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A Protocol for Detecting and Scavenging Gas-phase Free Radicals in Mainstream Cigarette Smoke

Cigarette smoking is associated with human cancers. It has been reported that most of the lung cancer deaths are caused by cigarette smoking 5,6,7,12.  ...

Cornell University

&#x6210;&#x819C;&#x900F;&#x6C27;&#x662F;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x4E0E;&#x751F;&#x7406;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x8FD8;&#x5BF9;&#x819C;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#x5B9A;&#x5411;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E2D;&#x7684;&#x6DF1;&#x5EA6;&#x51B3;&#x5B9A;&#x6709;&#x5173;&#x3002;&#x81EA;&#x65CB;-&#x6676;&#x683C; (T(1)) &#x677E;&#x5F1B;&#x589E;&#x5F3A;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7A7A;&#x6C14;&#x6216;&#x6C27;&#x6C14;&#x5206;&#x5B50;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x6570;&#x503C;&#x8C03;&#x8282;&#x94AE;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E3A; &#xFF08;n = 4-14&#xFF0C;16&#xFF09; sn 2 &#x94FE;&#x7684;&#x6DB2;&#x819C;&#x7684; dimyristoyl &#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x975E;&#x7EBF;&#x6027;&#x8FDE;&#x7EED;&#x6CE2;&#x7535;&#x5B50;&#x987A;&#x78C1;&#x5171;&#x632F; (EPR)&#x3002;&#x9010;&#x6B65;&#x9971;&#x548C;&#x548C;&#x51FA;&#x7684;&#x76F8;&#x4F4D;&#x8FDE;&#x7EED;&#x6CE2; EPR &#x6D4B;&#x91CF;&#x4EA7;&#x751F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x6C27;&#x6E17;&#x900F;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x4E0E;&#x7EAF;&#x6C27;&#x6C14;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x4ECE;&#x9F50;&#x6B21;&#x7EBF;&#x6027;&#x7684; EPR &#x8C31;&#x7684; linewidths T 2 &#x677E;&#x5F1B;&#x589E;&#x5F3A;&#x529F;&#x80FD;&#x662F;&#x7B49;&#x4E8E;&#x7531;&#x975E;&#x7EBF;&#x6027; EPR &#x7684; T 1 &#x5F1B;&#x8C6B;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;&#x8FD9;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5F1B;&#x8C6B;&#x589E;&#x5F3A;&#x529F;&#x80FD;&#x53D1;&#x751F;&#x6D77;&#x68EE;&#x5821;&#x4EA4;&#x6362;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9700;&#x8981;&#x6C27;&#x6C14;&#x548C;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x7B7E;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x63A5;&#x89E6;&#x3002;&#x6C27;&#x6C14;&#x6D53;&#x7F29;&#x5728;&#x758F;&#x6C34;&#x5BA4;&#x5185;&#x7684;&#x78F7;&#x8102;&#x53CC;&#x5C42;&#x819C;&#x4E0E; sigmoidal &#x6E17;&#x900F;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x7684;&#x53CD;&#x5411;&#x6781;&#x6027;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x8840;&#x8102;&#x65E9;&#x4E9B;&#x65F6;&#x5019;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x3002;&#x90E8;&#x5206;&#x7531;&#x6E17;&#x900F;&#x6C34;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8DE8;&#x819C;&#x6781;&#x6027;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x63A7;&#x5236;&#x5F62;&#x72B6;&#x7684;&#x6C27;&#x6E17;&#x900F;&#x6DB2;&#x8102;&#x8D28;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x5728; KcsA &#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x86CB;&#x767D;&#x754C;&#x9762;&#xFF0C;&#x6C27;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x662F;&#x6BD4;&#x6D41;&#x4F53;&#x8102;&#x53CC;&#x5C42;&#x66F4;&#x5F25;&#x6F2B;&#x3002;

&#x6C27;&#x6E17;&#x900F;&#x5728;&#x8102;&#x8D28;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#xFF1A; &#x6BD4;&#x8F83;&#x4E0E;&#x8DE8;&#x819C;&#x6781;&#x6027;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;

Permeation of oxygen into membranes is relevant not only to physiological function, but also to depth determinations in membranes by site-directed spin labeling. Spin-lattice (T(1)) relaxation enhancements by air or molecular oxygen were determined for phosphatidylcholines spin labeled at positions (n = 4-14, 16) of the sn-2 chain in fluid membranes of dimyristoyl phosphatidylcholine, by using nonlinear continuous-wave electron paramagnetic resonance (EPR). Both progressive saturation and out-of-phase continuous-wave EPR measurements yield similar oxygen permeation profiles. With pure oxygen, the T(2)-relaxation enhancements determined from homogeneous linewidths of the linear EPR spectra are equal to the T(1)-relaxation enhancements determined by nonlinear EPR. This confirms that both relaxation enhancements occur by Heisenberg exchange, which requires direct contact between oxygen and spin label. Oxygen concentrates in the hydrophobic interior of phospholipid bilayer membranes with a sigmoidal permeation profile that is the inverse of the polarity profile established earlier for these spin-labeled lipids. The shape of the oxygen permeation profile in fluid lipid membranes is controlled partly by the penetration of water, via the transmembrane polarity profile. At the protein interface of the KcsA ion channel, the oxygen profile is more diffuse than that in fluid lipid bilayers.

Oxygen permeation profile in lipid membranes: comparison with transmembrane polarity profile.

Perm&eacute;ation de l&#39;oxyg&egrave;ne dans les membranes est pertinente non seulement &agrave; une fonction physiologique, mais aussi aux d&eacute;terminations de la profondeur dans les membranes par marquage de spin dirig&eacute;e. Spin-r&eacute;seau (am&eacute;liorations de relaxation T(1)) par l&#39;air ou l&#39;oxyg&egrave;ne mol&eacute;culaire ont &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;es pour spin phosphatidylcholines marqu&eacute;e aux positions (n = 4-14, 16) de la cha&icirc;ne sn-2 dans les membranes liquides de dimyristoyl phosphatidylcholine, en utilisant la r&eacute;sonance paramagn&eacute;tique &eacute;lectronique onde continue non lin&eacute;aire (RPE). Saturation progressive tant mesures d&#39;EPR onde continues hors phase d&eacute;gagent de l&#39;oxyg&egrave;ne similaire des profils de perm&eacute;ation. Avec l&#39;oxyg&egrave;ne pur, les am&eacute;liorations de relaxation-2 T d&eacute;termin&eacute;es &agrave; partir des largeurs des raies des spectres rpe lin&eacute;aires homog&egrave;nes sont &eacute;gales aux am&eacute;liorations T 1-relaxation d&eacute;termin&eacute;es par EPR non lin&eacute;aire. Cela confirme que les deux am&eacute;liorations de relaxation se produisent par l&#39;&eacute;change de Heisenberg, qui n&eacute;cessite un contact direct entre l&#39;oxyg&egrave;ne et un essorage &eacute;tiquette. L&#39;oxyg&egrave;ne se concentre &agrave; l&#39;int&eacute;rieur hydrophobe des membranes bicouches phospholipidiques avec un profil de perm&eacute;ation sigmo&iuml;de qui est l&#39;inverse de la polarit&eacute; profil &eacute;tabli plus t&ocirc;t pour ces lipides marqu&eacute;. La forme du profil de perm&eacute;ation d&#39;oxyg&egrave;ne dans les membranes lipidiques fluide est contr&ocirc;l&eacute;e en partie par la p&eacute;n&eacute;tration de l&#39;eau, via le profil de polarit&eacute; transmembranaire. &Agrave; l&#39;interface de la prot&eacute;ine du canal ionique KcsA, le profil de l&#39;oxyg&egrave;ne est plus diffus que celui dans les bicouches lipidiques fluide.

Profil de perm&eacute;ation de l&#39;oxyg&egrave;ne dans les membranes lipidiques : comparaison avec le profil de polarit&eacute; transmembranaire.

Sauerstoffpermeation Profil in Lipidmembranen: Vergleich mit Transmembran Polarit&#xE4;t Profil.

Permeazione dell&#39;ossigeno nelle membrane &egrave; rilevante non solo per la funzione fisiologica, ma anche per le determinazioni di profondit&agrave; in membrane da luogo-diretta spin labeling. Spin-reticolo (miglioramenti relax T(1)) di aria o ossigeno molecolare sono stati determinati per spin fosfatidilcolina etichettati in posizioni (n = 4-14, 16) della catena sn-2 nei fluide delle membrane di dimiristoil fosfatidilcolina, mediante risonanza paramagnetica non lineare un elettrone (EPR). Out-of-fase una EPR misure e progressiva saturazione cedere ossigeno simile profili di permeazione. Con ossigeno puro, la T (2) - rilassamento miglioramenti determinati da linewidths omogenea degli spettri EPR lineari sono uguale a T (1) - miglioramenti di rilassamento determinati da EPR non lineare. Questo conferma che entrambi miglioramenti relax avvengono tramite lo scambio di Heisenberg, che richiede un contatto diretto tra ossigeno e spin label. Ossigeno si concentra all&#39;interno idrofobico delle membrane doppio strato fosfolipidico con un profilo di permeazione sigmoidal che &egrave; l&#39;inverso del profilo polarit&agrave; precedentemente stabilito per questi lipidi spin-etichettati. La forma del profilo di permeazione dell&#39;ossigeno in membrane lipidiche fluido &egrave; controllata parzialmente dalla penetrazione dell&#39;acqua, tramite il profilo di polarit&agrave; transmembrana. Nell&#39;interfaccia di proteine del canale ionico KcsA, il profilo di ossigeno &egrave; pi&ugrave; diffuso rispetto a quella nel fluido lipidici.

Profilo di permeazione dell&#39;ossigeno in membrane lipidiche: confronto con il profilo di polarit&agrave; transmembrana.

&#x819C;&#x3078;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x76E3;&#x7763;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x819C;&#x306E;&#x6DF1;&#x3055;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306B;&#x3082;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;-&#x683C;&#x5B50; (T(1)) &#x30EA;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5F37;&#x5316;&#x7A7A;&#x6C17;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9178;&#x7D20;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B; phosphatidylcholines &#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x306E;&#x30DD;&#x30B8;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F; &#xFF08;n = 4-14&#x3001;16&#xFF09; sn 2 &#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x975E;&#x7DDA;&#x5F62;&#x9023;&#x7D9A;&#x6CE2;&#x96FB;&#x5B50;&#x5E38;&#x78C1;&#x6027;&#x5171;&#x9CF4; (EPR) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;dimyristoyl &#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D41;&#x4F53;&#x819C;&#x306E;&#x3002;&#x9032;&#x6B69;&#x7684;&#x306A;&#x5F69;&#x5EA6;&#x3068;&#x4F4D;&#x76F8;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x767A;&#x632F; EPR &#x6E2C;&#x5B9A;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x9178;&#x7D20;&#x900F;&#x904E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x964D;&#x4F0F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D14;&#x7C8B;&#x306A;&#x9178;&#x7D20;&#x3001;T (2) - &#x7DDA;&#x5F62;&#x306E; EPR &#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x5747;&#x8CEA; c-4-10 &#x6C7A;&#x5B9A;&#x7DE9;&#x548C;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5F37;&#x5316;&#x304C; (1) T &#x306B;&#x7B49;&#x3057;&#x3044; - &#x30EA;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5F37;&#x5316;&#x975E;&#x7DDA;&#x5F62; EPR &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7DE9;&#x548C;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x9178;&#x7D20;&#x3068;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x30CF;&#x30A4;&#x30BC;&#x30F3;&#x30D9;&#x30EB;&#x30B0; exchange &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9178;&#x7D20;&#x5185;&#x90E8;&#x4EE5;&#x524D;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x8102;&#x8CEA;&#x3092;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x6975;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x9006;&#x3067;&#x3059;&#x30B7;&#x30B0;&#x30E2;&#x30A4;&#x30C9;&#x900F;&#x904E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30EA;&#x30F3;&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x819C;&#x306E;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x306B;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6D41;&#x4F53;&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x819C;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x900F;&#x904E;&#x5206;&#x5E03;&#x306E;&#x5F62;&#x72B6;&#x306F;&#x8CAB;&#x901A;&#x578B;&#x6975;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x6C34;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;KcsA &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x754C;&#x9762;&#x9178;&#x7D20;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3088;&#x308A;&#x3073;&#x307E;&#x3093;&#x6027;&#x6D41;&#x4F53;&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x819C;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x8102;&#x8CEA;&#x819C;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x900F;&#x904E;&#x5206;&#x5E03;: &#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x6975;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3002;

&#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC758; &#xCE68;&#xD22C;&#xB294; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC10;&#xB3C5; &#xC2A4;&#xD540; &#xB77C;&#xBCA8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xAE4A;&#xC774; &#xACB0;&#xC815;&#xC744; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2A4;&#xD540;-&#xACA9;&#xC790; (T(1)) &#xD734;&#xC2DD; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xACF5;&#xAE30; &#xB610;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; phosphatidylcholines &#xC2A4;&#xD540;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACB0;&#xC815; (n = 4-14, 16) &#xBE44;&#xC120;&#xD615; &#xC5F0;&#xC18D;&#xD30C; &#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xC874; &#xACF5;&#xBA85; (EPR)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; dimyristoyl phosphatidylcholine&#xC758; &#xC720;&#xCCB4; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; sn 2 &#xCCB4;&#xC778;&#xC758;. &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC801;&#xC778; &#xCC44;&#xB3C4; &#xC704;&#xC0C1; &#xC544;&#xC6C3; &#xC5F0;&#xC18D;&#xD30C; EPR &#xCE21;&#xC815; &#xD56D;&#xBCF5; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xD22C;&#xACFC; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;. &#xC21C;&#xC218; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC640; &#xB3D9;&#xC885; &#xC120; &#xC120;&#xD615; EPR &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; T (2)-&#xC774;&#xC644; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xBE44;&#xC120;&#xD615; EPR &#xC815;&#xD55C; T (1)-&#xD734;&#xC2DD; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC640; &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB85C;&#xC368; &#xB450; &#xD734;&#xC2DD; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC640; &#xC2A4;&#xD540; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xAC04;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC811;&#xCD09;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xD558;&#xC774;&#xC820;&#xBCA0;&#xB974;&#xD06C; &#xAD50;&#xD658;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0B0;&#xC18C;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2A4;&#xD540; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xC804; &#xC124;&#xB9BD; &#xADF9;&#xC131; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC758; &#xBC18;&#xC804;&#xC740; &#xC790;&#xD615; &#xD22C;&#xACFC; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xACFC; &#xC778;&#xC9C0;&#xC9C8; bilayer &#xB9C9;&#xC758; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xB0B4;&#xBD80;&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC720;&#xCCB4; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC758; &#xC0B0;&#xC18C; &#xD22C;&#xACFC; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC758; &#xBAA8;&#xC591;&#xC740; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xADF9;&#xC131; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBB3C; &#xCE68;&#xD22C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. KcsA &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC740; &#xC720;&#xCCB4; &#xC9C0;&#xC9C8; bilayers&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD655;&#xC0B0;.

&#xC9C0;&#xC9C8; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC0B0;&#xC18C; &#xD22C;&#xACFC; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;: &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xADF9;&#xC131; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50;.

Permeabilidad de ox&iacute;geno en las membranas es relevante no s&oacute;lo para la funci&oacute;n fisiol&oacute;gica, sino tambi&eacute;n a las determinaciones de la profundidad en las membranas por centrifugado dirigida etiquetado. Enrejado de la vuelta (mejoras de relajaci&oacute;n T(1)) por el aire o el ox&iacute;geno molecular determinaron fosfatidilcolinas vuelta marcada en las posiciones (n = 4-14, 16) de la cadena de sn-2 en l&iacute;quido membranas de fosfatidilcolina dimyristoyl, mediante el uso de resonancia paramagn&eacute;tica electr&oacute;nica no lineal de onda continua (EPR). Saturaci&oacute;n progresiva tanto medidas de EPR onda continua fuera de fase producen ox&iacute;geno similar perfiles de impregnaci&oacute;n. Con ox&iacute;geno puro, las mejoras de relajaci&oacute;n 2 T determinadas de linewidths homog&eacute;nea de los espectros lineales de EPR son iguales a las mejoras de T 1-relajaci&oacute;n determinadas por el EPR no lineal. Esto confirma que ambos mejoras de relajaci&oacute;n se producen por intercambio de Heisenberg, que requiere el contacto directo entre el ox&iacute;geno y giro de la etiqueta. Ox&iacute;geno se concentra en el interior hidrof&oacute;bico de las membranas bicapa de fosfol&iacute;pidos con un perfil de impregnaci&oacute;n sigmoidal que es el inverso del perfil polaridad establecido anteriormente para estos l&iacute;pidos marcado con giro. La forma del perfil de impregnaci&oacute;n del ox&iacute;geno en membranas lip&iacute;dicas fluido es controlada en parte por la penetraci&oacute;n del agua, mediante el perfil de polaridad transmembrana. En la interfaz de la prote&iacute;na del canal del ion de la emisora KcsA, el perfil de ox&iacute;geno es m&aacute;s difuso que en bicapas lip&iacute;dicas fluido.

Perfil de permeabilidad de ox&iacute;geno en membranas lip&iacute;dicas: comparaci&oacute;n con perfil de polaridad transmembrana.

&#x8FDE;&#x7EED;&#x6CE2;&#x7535;&#x5B50;&#x81EA;&#x65CB;&#x5171;&#x632F; (CW ESR) &#x548C;&#x53CC;&#x91CF;&#x5B50;&#x76F8;&#x5E72;&#x7535;&#x5B50;&#x81EA;&#x65CB;&#x5171;&#x632F; (&#x80CC;&#x538B; ESR&#xFF09;&#xFF0C;&#x5728;&#x51E0;&#x79CD;&#x8102;&#x8D28;&#x819C;&#x4E2D;&#x7814;&#x7A76;&#x4E00;&#x79CD;&#x6297;&#x83CC;&#x7D20; &#xFF08;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E86;&#x5B8F;&#x89C2;&#x7684;&#x6052;&#x57FA;&#x5BF9;&#x9F50;&#x7684;&#x6837;&#x672C; spin-dry &#x8D85;&#x901F;&#x79BB;&#x5FC3;&#x6CD5;&#xFF09; &#x53CA;&#x6C34;&#x6CE1;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8BB0;&#x8005;&#x7EC4;&#x4EA7;&#x751F;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x4EA7;&#x54C1; (GAsl) C &#x603B;&#x7AD9;&#x9644;&#x52A0;&#x662F;&#x6C2E;&#x6C27;&#x81EA;&#x7531;&#x65CB;&#x8F6C;-&#x6807;&#x7B7E;&#x3002;&#x5BF9;&#x9F50;&#x819C;&#x542B;&#x6709; GAsl &#x7684;&#x7535;&#x5B50;&#x81EA;&#x65CB;&#x5171;&#x632F;&#x5149;&#x8C31;&#x663E;&#x793A;&#x5F3A;&#x70C8;&#x53D6;&#x5411;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x3002;&#x89E3;&#x91CA;&#x5728;&#x5907;&#x707E;&#x548C; DSPC &#x819C;&#x5728;&#x5BA4;&#x6E29;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x5149;&#x8C31;&#x7684;&#x5F62;&#x72B6;&#x662F;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x6392;&#x5E8F;&#x987A;&#x5E8F;&#x4E00;&#x81F4;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x5408;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x6C2E;&#xFF0C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x9AD8;&#x6781;&#x6027;&#x4E3A;&#x662F;&#x6B63;&#x5728;&#x63A5;&#x8FD1;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x6C2E;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;GAsl DMPC &#x819C;&#x7684;&#x5149;&#x8C31;&#x8868;&#x660E;&#x6DF1;&#x5D4C;&#x5165;&#x548C;&#x503E;&#x659C;&#x7684;&#x65E0;&#x7EC4;&#x3002;GAsl &#x8C31;&#x5728;&#x5907;&#x707E;&#x819C;&#x5728; 35 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6; &#xFF08;Pbeta &#x9636;&#x6BB5;&#x8FC7;&#x6E21;&#x5230;&#x51DD;&#x80F6;) &#x5C55;&#x54C1;&#x6025;&#x5267;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8D85;&#x8FC7;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x6E29;&#x5EA6;&#x53D8;&#x5F97;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; DMPC&#x3002;&#x4ECE;&#x80CC;&#x538B; ESR &#x7684;&#x5076;&#x6781;&#x8C31;&#x6E05;&#x695A;&#x5730;&#x8868;&#x660E;&#x5BF9; DMPC &#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E0D;&#x662F;&#x5907;&#x707E;&#xFF0C;&#x8FC5;&#x901F;&#x51BB;&#x7ED3;&#x4ECE;&#x51DD;&#x80F6;&#x9636;&#x6BB5; &#xFF1B; &#x8FD9;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6709;&#x8FF9;&#x8C61;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x805A;&#x5408;&#x3002;Interspin &#x5BF9;&#x4E2D;&#x8DDD;&#x79BB; 30.9 A&#xFF0C;&#x5728;&#x597D;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x9762;&#x5BF9;&#x9762;&#x7684; GAsl &#x805A; (&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x6784;&#xFF09;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5339;&#x914D;&#x7684; DMPC &#x53CC;&#x5C42;&#x758F;&#x6C34;&#x7C97;&#x7EC6;&#x7684;&#x4F30;&#x8BA1;&#x6570;&#x3002;&#x5907;&#x707E;&#x548C; DSPC&#xFF0C;&#x663E;&#x7136;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x758F;&#x6C34;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x957F;&#x5EA6;&#x548C;&#x53CC;&#x5C42;&#x539A;&#x5EA6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x559C;&#x6B22;&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x51DD;&#x80F6;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x5728;&#x5907;&#x707E; &#xFF08;&#x9AD8;&#x4E8E; 35 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#xFF09; &#x7684; Pbeta &#x548C; Lalpha &#x7684;&#x9636;&#x6BB5;&#x901A;&#x9053;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x5F62;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x770B;&#x51FA;&#x80CC;&#x538B; ESR &#x5076;&#x6781;&#x8C31;&#x5FEB;&#x901F;&#x51B0;&#x51BB;&#x540E;&#x3002;&#x5B83;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x8102;&#x8D28;&#x5206;&#x5B50;&#x4FA7;&#x5411;&#x81A8;&#x80C0;&#x548C;&#x540C;&#x65F6;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x53CC;&#x5C42;&#x539A;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86;&#x758F;&#x6C34;&#x7684;&#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#x3002;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x7269;&#x7406;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E0E;&#x6BD4;&#x8F83;&#x6307;&#x793A;&#x662F;&#x5426;&#x5E94;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F4E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684; GA (&#x7EA6; 0.4-1 mol %) &#x4ECE;&#x4E8B;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x5C06;&#x751F;&#x6210;&#x975E;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x6E20;&#x9053;&#x7684;&#x7535;&#x5B50;&#x81EA;&#x65CB;&#x5171;&#x632F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BBF;&#x95EE;&#x3002;

&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x79CD;&#x6297;&#x83CC;&#x7D20;&#x7B54;&#xFF1A; &#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x5206;&#x89E3;&#x3002;

Gramicidin A was studied by continuous wave electron spin resonance (CW-ESR) and by double-quantum coherence electron spin resonance (DQC-ESR) in several lipid membranes (using samples that were macroscopically aligned by isopotential spin-dry ultracentrifugation) and vesicles. As a reporter group, the nitroxide spin-label was attached at the C-terminus yielding the spin-labeled product (GAsl). ESR spectra of aligned membranes containing GAsl show strong orientation dependence. In DPPC and DSPC membranes at room temperature the spectral shape is consistent with high ordering, which, in conjunction with the observed high polarity of the environment of the nitroxide, is interpreted in terms of the nitroxide moiety being close to the membrane surface. In contrast, spectra of GAsl in DMPC membranes indicate deeper embedding and tilt of the NO group. The GAsl spectrum in the DPPC membrane at 35 degrees C (the gel to Pbeta phase transition) exhibits sharp changes, and above this temperature becomes similar to that of DMPC. The dipolar spectrum from DQC-ESR clearly indicates the presence of pairs in DMPC membranes. This is not the case for DPPC, rapidly frozen from the gel phase; however, there are hints of aggregation. The interspin distance in the pairs is 30.9 A, in good agreement with estimates for the head-to-head GAsl dimer (the channel-forming conformation), which matches the hydrophobic thickness of the DMPC bilayer. Both DPPC and DSPC, apparently as a result of hydrophobic mismatch between the dimer length and bilayer thickness, do not favor the channel formation in the gel phase. In the Pbeta and Lalpha phases of DPPC (above 35 degrees C) the channel dimer forms, as evidenced by the DQC-ESR dipolar spectrum after rapid freezing. It is associated with a lateral expansion of lipid molecules and a concomitant decrease in bilayer thickness, which reduces the hydrophobic mismatch. A comparison with studies of dimer formation by other physical techniques indicates the desirability of using low concentrations of GA (approximately 0.4-1 mol %) accessible to the ESR methods employed in the study, since this yields non-interacting dimer channels.

Spin-labeled gramicidin a: channel formation and dissociation.

Gramicidine A a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;e par r&#xE9;sonance des ondes de spin &#xE9;lectronique continue (CW-ESR) et en double-quantique de r&#xE9;sonance de spin &#xE9;lectronique coh&#xE9;rence (DQC-ESR) dans les membranes lipidiques (en utilisant plusieurs &#xE9;chantillons qui ont &#xE9;t&#xE9; align&#xE9;es par macroscopiquement isopotentiel au s&#xE8;che-linge ultracentrifugation) et des v&#xE9;sicules. En tant que groupe rapporteur, le nitroxyde de spin-&#xE9;tiquette a &#xE9;t&#xE9; attach&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; C-terminale produisant le spin-marqu&#xE9; produit (GASL). Spectres de RPE de membranes align&#xE9;es contenant spectacle GASL orientation forte d&#xE9;pendance. Dans les membranes DPPC et DSPC &#xE0; la temp&#xE9;rature ambiante la forme spectrale est compatible avec commande &#xE9;lev&#xE9;e, qui, en conjonction avec la polarit&#xE9; observ&#xE9;e &#xE9;lev&#xE9; de l&#x26;#39;environnement du nitroxyde, est interpr&#xE9;t&#xE9;e en termes de la fraction nitroxyde &#xE9;tant proche de la surface de la membrane. En revanche, les spectres de GASL dans les membranes DMPC indiquent profonde int&#xE9;gration et l&#x26;#39;inclinaison du groupe NO. Le spectre GASL dans la membrane DPPC moins 35 degr&#xE9;s C (le gel &#xE0; transition de phase Pbeta) pr&#xE9;sente des changements brusques, et au-dessus de cette temp&#xE9;rature devient similaire &#xE0; celle de DMPC. Le spectre de dipolaire DQC-ESR indique clairement la pr&#xE9;sence de paires dans les membranes DMPC. Ce n&#x26;#39;est pas le cas pour la DPPC, congel&#xE9; rapidement de la phase de gel, mais il ya des indices d&#x26;#39;agr&#xE9;gation. La distance interspin dans les paires est de 30,9 A, en bon accord avec les estimations pour le dim&#xE8;re t&#xEA;te-&#xE0;-t&#xEA;te GASL (la conformation de formation de canal), ce qui correspond &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;paisseur hydrophobe de la bicouche de DMPC. Les deux DPPC et DSPC, apparemment en raison de l&#x26;#39;inad&#xE9;quation entre la longueur hydrophobe dim&#xE8;re et &#xE9;paisseur de la bicouche, ne favorisent pas la formation d&#x26;#39;un canal dans la phase gel. Dans les phases Pbeta et Lalpha de DPPC (sup&#xE9;rieure &#xE0; 35 degr&#xE9;s C) les formes dim&#xE8;res de canaux, comme en t&#xE9;moigne le spectre DQC-ESR dipolaire apr&#xE8;s cong&#xE9;lation rapide. Il est associ&#xE9; &#xE0; une expansion lat&#xE9;rale de mol&#xE9;cules lipidiques et une diminution concomitante de l&#x26;#39;&#xE9;paisseur bicouche, qui r&#xE9;duit le d&#xE9;calage hydrophobe. Une comparaison avec des &#xE9;tudes de la formation de dim&#xE8;res par d&#x26;#39;autres techniques physiques indique l&#x26;#39;opportunit&#xE9; d&#x26;#39;utiliser de faibles concentrations de GA (environ 0,4 &#xE0; 1% en mole) accessibles &#xE0; des m&#xE9;thodes ESR employ&#xE9;es dans l&#x26;#39;&#xE9;tude, car cela donne des canaux dim&#xE8;res non-interaction.

Spin-&#xE9;tiquet&#xE9;s gramicidine A: formation d&#x26;#39;un canal et de dissociation

Spin-markierten Gramicidin A: Kanal Bildung und Dissoziation.

Gramicidina A &egrave; stato studiato dalla risonanza di spin degli elettroni onda continua (CW-ESR) e dalla risonanza elettrone (DQC-ESR) di spin double-quantum coherence in diverse membrane lipidiche (utilizzando campioni che erano allineate macroscopicamente da isopotential centrifugare ultracentrifugazione) e vescicole. Come un gruppo di reporter, il nitrossido spin-etichetta era attaccata al C-terminale cedendo il prodotto etichettato spin (GAsl). Spettri ESR di membrane allineate contenenti GAsl Visualizza dipendenza forte orientamento. Nelle membrane DPPC e Lotusflower a temperatura ambiente che la forma spettrale &egrave; coerenza con l&#39;alto ordine, che, in concomitanza con la polarit&agrave; alta osservata dell&#39;ambiente del nitrossido, &egrave; interpretate in termini il nitrossido moiety essendo vicino alla superficie della membrana. Al contrario, gli spettri del GAsl nelle membrane DMPC indicano incorporamento pi&ugrave; profonda e l&#39;inclinazione del gruppo NO. Lo spettro di GAsl nella membrana DPPC a 35 gradi C (il gel a transizione di fase Pbeta) esibisce cambiamenti taglienti e di sopra di questa temperatura diventa simile a quello della DMPC. Lo spettro dipolare da DQC-ESR indica chiaramente la presenza di coppie in membrane DMPC. Questo non &egrave; il caso di DPPC, rapidamente congelato dalla fase gel; Tuttavia, ci sono accenni di aggregazione. La distanza interspin nelle coppie &egrave; 30,9 A, in buon accordo con le stime per il testa a testa GAsl dimero (conformazione che formano canali), cui corrisponde lo spessore idrofobo del doppio strato DMPC. Sia DPPC e DSPC, apparentemente come conseguenza idrofobo mancata corrispondenza tra il dimero lunghezza e doppio strato di spessore, non favoriscono la formazione del canale in fase di gel. Nelle fasi Pbeta e Lalpha di DPPC (superiore a 35 gradi C) forma il dimero di canale, come dimostra lo spettro dipolare DQC-ESR dopo congelamento rapido. &Egrave; associato con un&#39;espansione laterale delle molecole lipidiche e una concomitante diminuzione di spessore doppio strato, che riduce il disadattamento idrofobo. Un confronto con gli studi di formazione di dimero da altre tecniche fisici indica l&#39;opportunit&agrave; di utilizzare basse concentrazioni di GA (circa 0,4-1% mol) accessibile ai metodi ESR impiegati nello studio, dal momento che questo produce canali dimero non interagenti.

Gramicidina spin-etichettati r: canale formazione e dissociazione.

&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x9023;&#x7D9A;&#x6CE2;&#x96FB;&#x5B50;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x5171;&#x9CF4;&#xFF08;CW-ESR&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x819C;&#xFF08;&#x5DE8;&#x8996;&#x7684;&#x306B;&#x7B49;&#x96FB;&#x4F4D;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x4E7E;&#x71E5;&#x3057;&#x305F;&#x8D85;&#x9060;&#x5FC3;&#x5206;&#x96E2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6574;&#x5217;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#xFF09;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x91CF;&#x5B50;&#x30B3;&#x30D2;&#x30FC;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9;&#x3001;&#x96FB;&#x5B50;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x5171;&#x9CF4;&#xFF08;DQC-ESR&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x57FA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x88FD;&#x54C1;&#xFF08;GAsl&#xFF09;&#x3092;&#x5F97;&#x305F;C-&#x672B;&#x7AEF;&#x306B;&#x53D6;&#x308A;&#x4ED8;&#x3051;&#x305F;&#x3002; GAsl&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x5F37;&#x3044;&#x65B9;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x6574;&#x5217;&#x819C;&#x306E;ESR&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x5BA4;&#x6E29;&#x3067;DPPC&#x3068;DSPC&#x819C;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x5F62;&#x72B6;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9AD8;&#x6975;&#x6027;&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x8FD1;&#x304F;&#x3001;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x3044;&#x308B;&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x90E8;&#x5206;&#x306E;&#x70B9;&#x3067;&#x306F;&#x89E3;&#x91C8;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x9806;&#x5E8F;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;DMPC&#x819C;&#x306E;GAsl&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;NO&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x6DF1;&#x3044;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307F;&#x3068;&#x50BE;&#x304D;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 35&#xB0;C&#xFF08;Pbeta&#x76F8;&#x8EE2;&#x79FB;&#x306B;&#x30B2;&#x30EB;&#xFF09;&#x306E;DPPC&#x819C;&#x306E;GAsl&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x304C;&#x6025;&#x6FC0;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x308B;&#x3068;DMPC&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DQC-ESR&#x304B;&#x3089;&#x53CC;&#x6975;&#x6027;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;DMPC&#x819C;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x30B2;&#x30EB;&#x76F8;&#x304B;&#x3089;&#x51CD;&#x7D50;DPPC&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x96C6;&#x8A08;&#x306E;&#x30D2;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DA;&#x30A2;&#x3067;interspin&#x8DDD;&#x96E2;&#x306F;DMPC&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x306E;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x306E;&#x539A;&#x3055;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x982D;&#x306B;&#x982D;GAsl&#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#xFF08;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#xFF09;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x5024;&#x3068;&#x3088;&#x304F;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;30.9&#x3067;&#x3059;&#x3002; DPPC&#x3068;DSPC&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x3001;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x3068;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x306E;&#x539A;&#x3055;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x306E;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30B2;&#x30EB;&#x76F8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x652F;&#x6301;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3002; DPPC&#xFF08;35&#x5EA6;&#x4EE5;&#x4E0A;C&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;Pbeta&#x3068;Lalpha&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x6025;&#x901F;&#x51CD;&#x7D50;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;DQC-ESR&#x53CC;&#x6975;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30E9;&#x30E0;&#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306A;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x8102;&#x8CEA;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x30DF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x306E;&#x539A;&#x3055;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x6A2A;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5229;&#x56DE;&#x308A;&#x306E;&#x975E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x7528;&#x3044;ESR&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x304D;&#x308B;GA&#x306E;&#x4F4E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;&#x7D04;0.4&#x304B;&#x3089;1&#x30E2;&#x30EB;&#xFF05;&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x3055;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#xFF1A;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x89E3;&#x96E2;

Gramicidin A &#xC5F0;&#xC18D; &#xD30C;&#xB3C4; &#xC804;&#xC790; &#xC2A4;&#xD540; &#xACF5;&#xBA85; (ESR CW) &#xBC0F; &#xC774;&#xC911; &#xC591;&#xC790; &#xC77C;&#xAD00;&#xC131; &#xC804;&#xC790; &#xC2A4;&#xD540; &#xACF5;&#xBA85; (ESR DQC) &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACF5;&#xBD80; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; (&#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC70;&#xC2DC;&#xC801; isopotential&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC815;&#xB82C; &#xB41C; &#xC0D8;&#xD50C; spin-dry ultracentrifugation)&#xC640; &#xC18C;&#xD3EC;. &#xAE30;&#xC790; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC11C; nitroxide &#xC2A4;&#xD540; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xC2A4;&#xD540; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC81C;&#xD488; (GAsl) C-&#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. ESR &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; GAsl &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC815;&#xB82C; &#xB41C; &#xB9C9;&#xC758; &#xAC15;&#xD55C; &#xBC29;&#xD5A5; &#xC758;&#xC874;&#xC131;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xD615;&#xD0DC;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xC21C;&#xC11C;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xC2E4; &#xC628;&#xC5D0;&#xC11C; DPPC &#xBC0F; DSPC &#xB9C9;&#xC5D0;&#xB294;, nitroxide, &#xD658;&#xACBD; &#xAD00;&#xCE21;&#xB41C; &#xB192;&#xC740; &#xADF9;&#xC131;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xC11D; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; nitroxide moiety &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, DMPC &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; Gasl&#xC758; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xAE4A;&#xC740; &#xD3EC;&#xD568; &#xBC0F; &#xC5C6;&#xC74C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xAE30;&#xC6B8;&#xAE30;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 35&#xB3C4; C (Pbeta &#xC704;&#xC0C1; &#xC804;&#xD658; &#xC824;)&#xC5D0;&#xC11C; DPPC &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; GAsl &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xB0A0;&#xCE74;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xC628;&#xB3C4; DMPC&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. DQC ESR&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC704; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC740; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; DMPC &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC30D;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; DPPC, &#xC824; &#xB2E8;&#xACC4;;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE09;&#xC18D; &#xB0C9;&#xB3D9;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC9D1;&#xACC4;&#xC758; &#xD78C;&#xD2B8;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC30D;&#xC5D0;&#xC11C; interspin &#xAC70;&#xB9AC; DMPC bilayer &#xC18C;&#xC218; &#xB450;&#xAED8; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xBA38;&#xB9AC; GAsl &#xC774;&#xD569;&#xCCB4; (&#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131; &#xD615;&#xD0DC;)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACAC;&#xC801;&#xC640; &#xC88B;&#xC740; &#xACC4;&#xC57D;&#xC5D0; 30.9 A&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. DPPC &#xBC0F; DSPC, &#xBD84;&#xBA85;&#xD788; dimer &#xAE38;&#xC774; bilayer &#xB450;&#xAED8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xCC2C;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC824; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131;. (35 &deg; C) &#xC774;&#xC0C1; DPPC&#xC758; Pbeta &#xBC0F; Lalpha &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC44;&#xB110; dimer &#xD615;&#xC131;, &#xAE09;&#xC18D; &#xB3D9;&#xACB0; &#xD6C4; DQC ESR &#xBC30;&#xC704; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC785;&#xC99D;&#xC73C;&#xB85C;. &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC218;&#xD3C9;&#xC801; &#xD655;&#xC7A5;&#xACFC; &#xC18C;&#xC218; &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C; bilayer &#xB450;&#xAED8;&#xC5D0; &#xC218; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xAE30;&#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC774;&#xD569;&#xCCB4; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC870;&#xC9C0;&#xC544;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC14;&#xB78C;&#xC9C1; &#xD568; (&#xC57D; 0.4-1 mol %) &#xB54C;&#xBB38;&#xC774; &#xC544;&#xB2CC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; dimer &#xCC44;&#xB110; &#xC0DD;&#xC131; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xACE0;&#xC6A9; ESR &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Gramicidin &#xC2A4;&#xD540; &#xBD84;&#xB958; a: &#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xBD84;&#xB9AC;.

Gramicidina A fue estudiado por la resonancia de spin electr&#xF3;nico de onda continua (CW-VSG) y con un doble-cu&#xE1;ntica de resonancia de spin electr&#xF3;nico coherencia (DQC-ESR) en las membranas lip&#xED;dicas (utilizando varias muestras que fueron alineados macrosc&#xF3;picamente por isopotencial spin-seca ultracentrifugaci&#xF3;n) y ves&#xED;culas. Como un grupo informador, el nitr&#xF3;xido giro de la etiqueta se adjunta en el extremo C-terminal produciendo el giro marcado con producto (gasl). ESR espectros de las membranas que contienen la dependencia alineados gasl espect&#xE1;culo fuerte orientaci&#xF3;n. En las membranas de DPPC y DSPC a temperatura ambiente la forma espectral es consistente con orden alto, lo que, en conjunci&#xF3;n con la polaridad observada alta del medio ambiente del nitr&#xF3;xido, se interpreta en t&#xE9;rminos de la fracci&#xF3;n nitr&#xF3;xido estar cerca de la superficie de la membrana. En contraste, los espectros de gasl en las membranas DMPC indican m&#xE1;s profunda incrustaci&#xF3;n y la inclinaci&#xF3;n del grupo NO. El espectro gasl en la membrana de DPPC a 35 grados C (el gel a la transici&#xF3;n de fase Pbeta) exhibe cambios bruscos, y encima de esta temperatura se vuelve similar a la de DMPC. El espectro dipolar de DQC-ESR indica claramente la presencia de pares de membranas DMPC. Este no es el caso de DPPC, congela r&#xE1;pidamente de la fase de gel, sin embargo, hay indicios de agregaci&#xF3;n. La distancia interspin en los pares es 30,9 A, en buen acuerdo con las estimaciones para el d&#xED;mero de cabeza a cabeza gasl (la conformaci&#xF3;n del canal de formaci&#xF3;n), que coincide con el espesor hidrof&#xF3;bica de la bicapa de DMPC. Tanto DPPC y DSPC, aparentemente como resultado de la falta de coincidencia entre la longitud hidr&#xF3;fobo d&#xED;mero y el espesor de bicapa, no favorecen la formaci&#xF3;n de canales en la fase de gel. En los Pbeta y Lalpha fases de DPPC (por encima de 35 grados C) las formas d&#xED;mero de canal, como se evidencia por el espectro de ESR-dipolar DQC despu&#xE9;s de la congelaci&#xF3;n r&#xE1;pida. Se asocia con una expansi&#xF3;n lateral de mol&#xE9;culas de l&#xED;pidos y un descenso concomitante de espesor bicapa, lo que reduce el desajuste hidr&#xF3;fobo. Una comparaci&#xF3;n con los estudios de formaci&#xF3;n de d&#xED;mero por otras t&#xE9;cnicas f&#xED;sicas indica la conveniencia de utilizar bajas concentraciones de GA (aproximadamente 0.4-1% en moles) accesibles a los m&#xE9;todos ESR empleados en el estudio, ya que esto produce que no interact&#xFA;an canales d&#xED;mero.

Spin-etiquetados gramicidina A: Canal formaci&#xF3;n y disociaci&#xF3;n

Transmembrane profiles of molecular oxygen in lipid bilayers are not only significant for membrane physiology and pathology, but also are essential to the determination of membrane protein structure by site-directed spin labeling. Oxygen profiles obtained with spin-labeled lipid chains have a Boltzmann sigmoidal dependence on the depth into each lipid leaflet, which represents a two-compartment distribution between outer and inner regions of the membrane, with a transfer free energy that depends linearly on distance from the dividing planes. Transmembrane profiles for intramembrane polarity, and for water penetration into the membrane, have an identical form, but are of the reverse sign. Comparison with recently published oxygen profiles from a site-specifically spin-labeled alpha-helical transmembrane peptide validates the use of spin-labeled lipids for all these profiles and provides the necessary bridge to generate the full bilayer from a single lipid leaflet.

Oxygen profiles in membranes.

Profils transmembranaires de l&#39;oxyg&egrave;ne mol&eacute;culaire dans les bicouches lipidiques ne sont pas seulement importantes pour la pathologie et la physiologie de la membrane, mais sont &eacute;galement essentielles &agrave; la d&eacute;termination de la structure des prot&eacute;ines membranaires par marquage de spin dirig&eacute;e. Profils d&#39;oxyg&egrave;ne obtenus avec les cha&icirc;nes lipidiques marqu&eacute; ont une d&eacute;pendance sigmo&iuml;de de Boltzmann sur la profondeur dans chaque foliole de lipides, ce qui repr&eacute;sente une distribution &agrave; deux compartiments entre les r&eacute;gions internes et externes de la membrane, avec un transfert d&#39;&eacute;nergie libre qui d&eacute;pend lin&eacute;airement de la distance des Division avions. Profils transmembranaires intramembranaires polarit&eacute; et pour la p&eacute;n&eacute;tration de l&#39;eau dans la membrane, ont une forme identique, mais sont le signe inverse. Comparaison avec des profils d&#39;oxyg&egrave;ne publi&eacute; r&eacute;cemment d&#39;un peptide transmembranaire alpha-h&eacute;lico&iuml;dal relativement marqu&eacute; valide l&#39;utilisation des lipides marqu&eacute; pour tous ces profils et fournit le pont n&eacute;cessaire pour g&eacute;n&eacute;rer la bicouche complet sur une foliole unique de lipides.

Profils d&#39;oxyg&egrave;ne dans les membranes.

&#x5206;&#x5B50;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C27;&#x8102;&#x53CC;&#x5C42;&#x819C;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x91CD;&#x5927;&#x819C;&#x751F;&#x7406;&#x548C;&#x75C5;&#x7406;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x4E5F;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#x5B9A;&#x5411;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E0E;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x8102;&#x94FE;&#x7684;&#x6C27;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x6709;&#x73BB;&#x5C14;&#x5179;&#x66FC; sigmoidal &#x4F9D;&#x8D56;&#x6DF1;&#x5165;&#x5230;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x8102;&#x8D28;&#x7684;&#x5355;&#x5F20;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x819C;&#x4E0E;&#x7EBF;&#x6027;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x4ECE;&#x5212;&#x5206;&#x7684;&#x5E73;&#x9762;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB;&#x7684;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x514D;&#x8D39;&#x80FD;&#x6E90;&#x7684;&#x5916;&#x90E8;&#x548C;&#x5185;&#x90E8;&#x533A;&#x57DF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8F66;&#x53A2;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;&#x8DE8;&#x819C;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6; intramembrane &#x6781;&#x6027;&#x548C;&#x6C34;&#x6E17;&#x900F;&#x819C;&#xFF0C;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x7A97;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8BE5;&#x53CD;&#x5411;&#x7684;&#x6807;&#x5FD7;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x51FA;&#x7248;&#x7684;&#x6C27;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x4ECE;&#x5B9A;&#x70B9;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x87BA;&#x65CB;&#x819C;&#x80BD;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x8840;&#x8102;&#x7528;&#x4E8E;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x6865;&#x6881;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x5355;&#x5F20;&#x751F;&#x6210;&#x5B8C;&#x6574;&#x7684;&#x53CC;&#x5C42;&#x3002;

&#x6C27;&#x5728;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;

Transmembran-Portraits von molekularen Sauerstoff in Lipid-Doppelschichten sind nicht nur f&uuml;r Membran-Physiologie und Pathologie, sondern sind auch wichtig f&uuml;r die Bestimmung der Membrane Protein-Struktur von Site-verwiesene Drehbeschleunigung zu beschriften. Sauerstoff-profile die mit Drehbeschleunigung-beschrifteten Lipid-Ketten haben eine Boltzmann sigmoiden Abh&auml;ngigkeit von der Tiefe in jeder Lipid-Brosch&uuml;re, die eine zwei-Fach-Verteilung zwischen den &auml;u&szlig;eren und inneren Regionen der Membran mit einem Transfer freie Energie darstellt, die h&auml;ngt linear von der Entfernung der trennenden Flugzeuge. Transmembran-Profile f&uuml;r Intramembrane Polarit&auml;t und Wasser Eindringen in die Membran, identischen Form haben, aber das umgekehrten Vorzeichen sind. Vergleich mit k&uuml;rzlich ver&ouml;ffentlichten Sauerstoff-Profilen aus ein ortspezifisch Drehbeschleunigung-beschriftet Alpha-Kegelrad Transmembran-Peptid &uuml;berpr&uuml;ft die Verwendung der Drehbeschleunigung-beschrifteten Lipide f&uuml;r diese Profile und bietet die notwendige Br&uuml;cke um die volle Bilayer aus einer einzigen Lipid-Brosch&uuml;re zu generieren.

Sauerstoff-Profile in Membranen.

Profili transmembrana di ossigeno molecolare in lipidici non solo sono significativi per la membrana fisiologia e patologia, ma sono anche essenziali per la determinazione della struttura della proteina di membrana di luogo-diretta spin labeling. Profili di ossigeno ottenuti con catene lipidiche con etichetta spin hanno una dipendenza sigmoidal Boltzmann sulla profondit&agrave; in ogni foglietto lipidico, che rappresenta una distribuzione di due-vano tra regioni interne ed esterne della membrana, con un&#39;energia libera di trasferimento che dipende linearmente dalla distanza dai piani divisori. Profili transmembrana per intramembrane polarit&agrave; e penetrazione di acqua nella membrana, hanno una forma identica, ma sono di segno inverso. Confronto con i profili di ossigeno pubblicato di recente da un peptide alfa-elica transmembrana site-specifically spin-etichettati convalida l&#39;uso di lipidi spin-etichetta per tutti questi profili e fornisce il ponte necessario per generare il doppio strato completo da un foglietto lipidico unico.

Profili di ossigeno nelle membrane.

&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x819C;&#x4E2D;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x307F;&#x306E;&#x819C;&#x751F;&#x7406;&#x30FB;&#x75C5;&#x7406;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3082;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x76E3;&#x7763;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x9396;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x9178;&#x7D20;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306F;&#x6DF1;&#x3055;&#x306E;&#x30DC;&#x30EB;&#x30C4;&#x30DE;&#x30F3; &#x30B7;&#x30B0;&#x30E2;&#x30A4;&#x30C9;&#x4F9D;&#x5B58; 2 &#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5206;&#x5E03;&#x7DDA;&#x5F62;&#x5206;&#x5272;&#x5E73;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8DDD;&#x96E2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x8EE2;&#x9001;&#x81EA;&#x7531;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x6027;&#x819C;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x3068;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x9593;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x5404;&#x8102;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30D5;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x3001;&#x819C;&#x3078;&#x306E;&#x6C34;&#x6D78;&#x900F;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x6975;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x304C;&#x306E;&#x9006;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7C73;&#x6751;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58; &alpha; &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30EB;&#x8CAB;&#x901A;&#x578B;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x767A;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9178;&#x7D20;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x8102;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30E9;&#x30B7;&#x304B;&#x3089;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E8C;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30B8;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x819C;&#x4E2D;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;

&#xC9C0;&#xC9C8; bilayers &#xBD84;&#xC790; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC758; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9CC; &#xB9C9; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559; &#xBC0F; &#xBCD1;&#xB9AC;&#xD559;, &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC10;&#xB3C5; &#xC2A4;&#xD540; &#xB77C;&#xBCA8; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC870; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2A4;&#xD540; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xCCB4;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5BB;&#xC740; &#xC0B0;&#xC18C; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xC120;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xB204;&#xC5B4; &#xD3C9;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xAC70;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC804;&#xC1A1; &#xC790;&#xC720; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0;&#xB294; &#xB9C9;&#xC758; &#xC678;&#xBD80;&#xC640; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC601;&#xC5ED; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; 2 &#xAD6C;&#xD68D; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xAC01; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC804;&#xB2E8;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xAE4A;&#xC774;&#xC5D0; &#xBCFC;&#xCE20;&#xB9CC; &#xC790;&#xD615; &#xC758;&#xC874;&#xB3C4;. Intramembrane &#xADF9;&#xC131;, &#xACE0; &#xB9C9;,&#xC73C;&#xB85C; &#xBB3C; &#xCE68;&#xD22C; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC591;&#xC2DD;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC758;. Site-specifically &#xC2A4;&#xD540; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC54C;&#xD30C; &#xB098;&#xC120;&#xD615; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xCD9C;&#xD310; &#xB41C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; &#xBAA8;&#xB4E0;&#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD68C;&#xC804; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC804;&#xB2E8;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xCCB4; bilayer &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0B0;&#xC18C;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;.

Perfiles de transmembrana del ox&iacute;geno molecular en bicapas lip&iacute;dicas no s&oacute;lo son importantes para la membrana fisiolog&iacute;a y patolog&iacute;a, pero tambi&eacute;n son esenciales para la determinaci&oacute;n de la estructura de la prote&iacute;na de membrana por centrifugado dirigida etiquetado. Perfiles de ox&iacute;geno obtenidos con cadenas de l&iacute;pidos marcado giro tienen una dependencia sigmoidal de Boltzmann de la profundidad en cada folleto de l&iacute;pidos, que representa una distribuci&oacute;n de dos compartimentos entre regiones externas e internas de la membrana, con una energ&iacute;a de libre transferencia que depende linealmente de distancia de los planos de la divisorios. Perfiles transmembrana para intramembranosas polaridad y para la penetraci&oacute;n del agua en la membrana, tienen una forma id&eacute;ntica, pero son del signo inverso. Comparaci&oacute;n con perfiles de ox&iacute;geno recientemente publicado de un p&eacute;ptido transmembrana alfa helicoidal site-specifically marcado con giro valida la utilizaci&oacute;n de los l&iacute;pidos marcado giro para todos estos perfiles y proporciona el puente necesario para generar la bicapa completa de un folleto de l&iacute;pidos solo.

Perfiles de ox&iacute;geno en las membranas.

&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x65B0;&#x5355;&#x58F0;&#x9053;&#x548C;&#x53CC;-&#x81EA;&#x65CB;-&#x6807;&#x8BB0;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x8102;&#x73AF;&#x5883; ESR &#x7814;&#x7A76;&#x4E86;&#x901A;&#x9053;&#x548C; nonchannel &#x79CD;&#x6297;&#x83CC;&#x7D20; A (GA) &#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3002;&#x9057;&#x4F20;&#x7B97;&#x6CD5;&#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x5982;&#x4F55;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x7528;&#x8109;&#x51B2;&#x5076;&#x6781; ESR &#x786E;&#x5B9A;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x819C;&#x4E0E;&#x819C;&#x904D;&#x5386;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x53D6;&#x5411;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7814;&#x7A76;&#x8102;&#x8D28;&#x73AF;&#x5883;&#x5BF9;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x79CD;&#x6297;&#x83CC;&#x7D20;&#x901A;&#x9053;&#x4E2D;&#x7684; interspin &#x8DDD;&#x79BB;&#x7684;&#x5FAE;&#x5999;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x7814;&#x7A76; nonchannel &#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x79CD;&#x6297;&#x83CC;&#x7D20;&#xFF0C;&#x8109;&#x51B2;&#x5076;&#x6781; ESR &#x7528;&#x4E8E;&#x9996;&#x5148;&#x786E;&#x5B9A; interspin &#x5355;&#x4F53;&#x548C;&#x6709;&#x673A;&#x6EB6;&#x5242;&#x4E09;&#x6C1F;&#x4E59;&#x9187;&#x548C;&#x8F9B;&#x9187;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x9057;&#x4F20;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x53CC;&#x87BA;&#x65CB;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x6240;&#x5BF9;&#x5E94;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB;&#x3002;&#x7136;&#x540E;&#x5728;&#x819C;&#x51FA;&#x73B0;&#x4E86;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x5728;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684; nonchannel &#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5F88;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x538B;&#x5236;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x4E0E;&#x8FC7;&#x5269;&#x672A;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x4F50;&#x6CBB;&#x4E9A;&#x5DDE;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x53CC;&#x6807;&#x8BB0; GA interspin &#x5206;&#x5B50;&#x95F4;&#x8DDD;&#x79BB;&#x7684;&#x5076;&#x6781;&#x8C31;&#x5728;&#x758F;&#x6C34;&#x4E0D;&#x5339;&#x914D;&#x8840;&#x8102; (L(&beta;) &#x5907;&#x707E;&#x9636;&#x6BB5;)&#x3001; &#x79CD;&#x6297;&#x83CC;&#x7D20;&#x6E20;&#x9053;&#x79BB;&#x89E3;&#x6210;&#x81EA;&#x7531;&#x7684;&#x5355;&#x4F53;&#x3002;&#x5355;&#x4F53;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x9AA8;&#x5E72;&#x7ED3;&#x6784;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5355;&#x4F53;&#x5355;&#x5143;&#x7684;&#x901A;&#x9053;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x3002;&#x6E20;&#x9053;&#x548C;&#x5355;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5B58;&#x5728;&#x4E00;&#x4E9B;&#x819C;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x53CC;&#x87BA;&#x65CB;&#x6784;&#x8C61;&#x7684;&#x79CD;&#x6297;&#x83CC;&#x7D20;&#x3002;&#x5728;&#x9971;&#x548C;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x7684;&#x51DD;&#x80F6;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x53CC;&#x87BA;&#x65CB;&#x7684;&#x5206;&#x6570;&#x589E;&#x52A0;&#x6309;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x987A;&#x5E8F;&#xFF1A; DLPC &lt; DMPC &lt; DSPC &lt; &#x5907;&#x707E;&#x3002;&#x5728;&#x5907;&#x707E;&#x4E2D;&#x7684;&#x5747;&#x8861;&#x901F;/&#x5355;&#x4F53;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x5728;&#x819C;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#x4EC5;&#x5728;&#x805A;&#x5408;&#x4E2D;&#x7684;&#x53CC;&#x87BA;&#x65CB;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x9057;&#x4F20;&#x5206;&#x5B50;&#x4E2D; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x66FF;&#x4EE3;&#x5BF9;&#x901A;&#x9053;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6F14;&#x793A;&#x5982;&#x4F55;&#x8109;&#x51B2;&#x5076;&#x6781; ESR &#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x6765;&#x7814;&#x7A76;&#x590D;&#x6742;&#x5E73;&#x8861;&#x5728;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x3002;

&#x901A;&#x9053;&#x548C; nonchannel &#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x5728;&#x819C;&#x548C;&#x5176;&#x5E73;&#x8861;&#x79CD;&#x6297;&#x83CC;&#x7D20;&#x3002;

Channel and nonchannel forms of gramicidin A (GA) were studied by ESR in various lipid environments using new mono- and double-spin-labeled compounds. For GA channels, we demonstrate here how pulse dipolar ESR can be used to determine the orientation of the membrane-traversing molecule relative to the membrane normal and to study subtle effects of lipid environment on the interspin distance in the spin-labeled gramicidin channel. To study nonchannel forms of gramicidin, pulse dipolar ESR was used first to determine interspin distances corresponding to monomers and double-helical dimers of spin-labeled GA molecules in the organic solvents trifluoroethanol and octanol. The same distances were then observed in membranes. Since detection of nonchannel forms in the membrane is complicated by aggregation, we suppressed any dipolar spectra from intermolecular interspin distances arising from the aggregates by using double-labeled GA in a mixture with excess unlabeled GA. In hydrophobic mismatching lipids (L(Î²) phase of DPPC), gramicidin channels dissociate into free monomers. The backbone structure of the monomeric form is similar to a monomeric unit of the channel dimer. In addition to channels and monomers, the double-helical conformation of gramicidin is present in some membrane environments. In the gel phase of saturated phosphatidylcholines, the fraction of double helices increases in the following order: DLPC < DMPC < DSPC < DPPC. The equilibrium DHD/monomer ratio in DPPC was determined. In membranes, the double-helical form is present only in aggregates. In addition, we studied the effect of N-terminal substitution in the GA molecule upon channel formation. This work demonstrates how pulsed dipolar ESR may be utilized to study complex equilibria of peptides in membranes.

Channel and nonchannel forms of spin-labeled gramicidin in membranes and their equilibria.

Formes de la Manche et de la gramicidine A nonchannel (GA) ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;s par RPE dans des environnements diff&#xE9;rents lipides en utilisant de nouveaux mono-et double-spin des compos&#xE9;s &#xE9;tiquet&#xE9;s. Pour les canaux GA, nous d&#xE9;montrons ici comment impulsion ESR dipolaire peut &#xEA;tre utilis&#xE9; pour d&#xE9;terminer l&#x26;#39;orientation de la mol&#xE9;cule membranaire de d&#xE9;placement par rapport &#xE0; la normale de la membrane et d&#x26;#39;&#xE9;tudier les effets subtils de l&#x26;#39;environnement lipidique sur la distance interspin dans le spin-&#xE9;tiquet&#xE9;s canal gramicidine. Pour &#xE9;tudier les formes de nonchannel gramicidine, le pouls dipolaire ESR a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; en premier pour d&#xE9;terminer les distances interspin correspondant &#xE0; des monom&#xE8;res et des dim&#xE8;res double h&#xE9;lice de mol&#xE9;cules GA spin-marqu&#xE9;es dans le trifluoro&#xE9;thanol solvants organiques et l&#x26;#39;octanol. Les m&#xEA;mes distances ont ensuite &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;s dans les membranes. Depuis la d&#xE9;tection de formes nonchannel dans la membrane est compliqu&#xE9;e par agr&#xE9;gation, on supprime toute spectres dipolaire &#xE0; des distances interspin intermol&#xE9;culaires r&#xE9;sultant des agr&#xE9;gats &#xE0; l&#x26;#39;aide double marqu&#xE9; GA dans un m&#xE9;lange avec un exc&#xE8;s non marqu&#xE9; GA. Dans les lipides de d&#xE9;sadaptation hydrophobes (L (&#x3B2;) la phase de la DPPC), les canaux de gramicidine se dissocier en monom&#xE8;res libres. La structure de squelette de la forme monom&#xE9;rique est similaire &#xE0; une unit&#xE9; monom&#xE8;re du dim&#xE8;re de canal. En plus de canaux et de monom&#xE8;res, la conformation en double h&#xE9;lice de la gramicidine est pr&#xE9;sent dans certains environnements membranaires. Dans la phase de gel de phosphatidylcholines satur&#xE9;es, la fraction de doubles h&#xE9;lices augmente dans l&#x26;#39;ordre suivant: DLPC &#x26;lt;DMPC &#x26;lt;DSPC &#x26;lt;DPPC. L&#x26;#39;&#xE9;quilibre DHD / monom&#xE8;re dans DPPC a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;e. Dans les membranes, sous la forme d&#x26;#39;une double h&#xE9;lice est pr&#xE9;sente uniquement dans les agr&#xE9;gats. En outre, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; l&#x26;#39;effet de la N-terminal de substitution dans la mol&#xE9;cule GA lors de la formation du canal. Ce travail montre comment puls&#xE9; ESR dipolaire peut &#xEA;tre utilis&#xE9;e pour &#xE9;tudier les &#xE9;quilibres complexes de peptides dans les membranes.

Formulaires de la Manche et Nonchannel de Spin-&#xE9;tiquet&#xE9;s gramicidine dans les membranes et leurs &#xE9;quilibres

Kanal und Nonchannel Formen der Gramicidin A (GA) wurden von ESR in verschiedenen Lipid-Umgebungen mit neuen Mono - und Doppel-Spin-markierten Verbindungen untersucht. F&uuml;r GA-Kan&auml;le zeigen wir hier, wie Puls zweipoligen ESR verwendet werden kann, um zu bestimmen, die Orientierung des Molek&uuml;ls im Verh&auml;ltnis zu der normalen Membran Membran durchqueren und subtile Effekte der Lipid-Umgebung auf dem interspin Abstand im Drehfeld-beschrifteten Gramicidin Kanal zu studieren. Um Nonchannel Formen der Gramicidin zu studieren, wurde Puls zweipoligen ESR zuerst zur interspin Entfernungen entsprechend Monomere und Doppel-Kegelrad-Dimer Drehbeschleunigung-beschrifteten GA-Molek&uuml;le in der organischen L&ouml;sungsmitteln Trifluoroethanol und Oktanol zu bestimmen. Die gleichen Abst&auml;nde wurden dann in Membranen beobachtet. Da Aufdeckung Nonchannel Formen in der Membran durch Aggregation erschwert ist, unterdr&uuml;ckt wir jede zweipoligen Spektren aus Intermolekulare interspin Entfernungen, die infolge der Aggregate mithilfe von Doppel-beschrifteten GA in einer Mischung mit &uuml;bersch&uuml;ssigen unbeschriftete GA. In hydrophobe nicht &uuml;bereinstimmende Lipide (L(&beta;)-Phase des DPPC) distanzieren Gramicidin Kan&auml;le in freien Monomere. Die R&uuml;ckgrat-Struktur von der Monomeren &auml;hnelt eine Monomere Ma&szlig;einheit die Kanal-Dimer. Die Doppel-Kegelrad Konformation von Gramicidin ist neben der Kan&auml;le und Monomere in einigen Umgebungen Membran vorhanden. In der Gel-Phase der ges&auml;ttigten Phosphatidylcholines, erh&ouml;ht der Bruch des Double-Helices in der folgenden Reihenfolge: DLPC &lt; DMPC &lt; DSPC &lt; DPPC. Das Gleichgewicht DHD/Monomer-Verh&auml;ltnis in DPPC wurde ermittelt. In Membranen ist die doppelte-spiralf&ouml;rmige Form nur im Aggregate. Dar&uuml;ber hinaus studierte wir die Wirkung der N-terminalen Substitution in der GA-Molek&uuml;l auf Kanal-Bildung. Diese Arbeit zeigt, wie gepulste zweipoligen ESR kann verwendet werden, um komplexe Gleichgewichte Peptide in Membranen zu studieren.

Kanal und Nonchannel Formen der Drehbeschleunigung-beschrifteten Gramicidin in Membranen und ihre Gleichgewichte.

Canale e nonchannel forme di Gramicidina A (GA) sono state studiate da ESR in vari ambienti di lipidi utilizzando nuovi composti con mono - e doppia rotazione-etichetta. Per i canali di GA, mostriamo qui come impulso dipolare ESR pu&ograve; essere utilizzato per determinare l&#39;orientamento della molecola rispetto alla normale membrana membrana-attraversamento e a studiare gli effetti sottili di ambiente lipidico sulla distanza interspin nel canale Gramicidina spin-etichettati. Per studiare forme di nonchannel di Gramicidina, impulso dipolare ESR &egrave; stato utilizzato prima per determinare la distanza interspin corrispondenti ai monomeri e doppio elica dimeri di molecole di GA spin-etichettati in solventi organici trifluoroethanol e ottanolo. Le stesse distanze allora sono state osservate nelle membrane. Poich&eacute; la rilevazione delle forme di nonchannel nella membrana &egrave; complicata dall&#39;aggregazione, abbiamo soppresso qualsiasi dipolari spettri da distanze interspin intermolecolari derivanti da aggregazioni utilizzando GA double-etichettati in una miscela con eccesso GA senza etichetta Nei lipidi disadattamento idrofobici (L(&beta;) fase di DPPC), canali Gramicidina dissociano in monomeri liberi. La struttura della spina dorsale della forma monomerica &egrave; simile a un&#39;unit&agrave; monomerica di dimero di canale. Oltre ai canali e monomeri, la doppia elica conformazione della Gramicidina &egrave; presente in alcuni ambienti di membrana. Nella fase di gel di fosfatidilcolina saturo, la frazione di doppie eliche aumenta nel seguente ordine: DLPC &lt; DMPC &lt; Lotusflower &lt; DPPC. Il rapporto di equilibrio DHD/monomero in DPPC &egrave; stato determinato. Nelle membrane, la forma di doppia elica &egrave; presente solo in aggregati. Inoltre, abbiamo studiato l&#39;effetto di sostituzione del N-terminale nella molecola GA su formazione di canale. Questo lavoro dimostra come pulsata dipolare ESR possono essere utilizzate per studiare i complessi equilibri di peptidi nelle membrane.

Canale e nonchannel forme di Gramicidina spin-etichettati in membrane e loro equilibri.

&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;A&#xFF08;GA&#xFF09;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;&#x975E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E2;&#x30CE;&#x3068;&#x30C0;&#x30D6;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x8102;&#x8CEA;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ESR&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002; GA&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x53CC;&#x6975;ESR&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x819C;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x819C;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5411;&#x304D;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;interspin&#x8DDD;&#x96E2;&#x306B;&#x8102;&#x8CEA;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x5FAE;&#x5999;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x306E;&#x975E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x53CC;&#x6975;ESR&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x3068;&#x6709;&#x6A5F;&#x6EB6;&#x5A92;&#x306E;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30ED;&#x30A8;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x30AA;&#x30AF;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;GA&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;interspin&#x8DDD;&#x96E2;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x3058;&#x8DDD;&#x96E2;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x819C;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x819C;&#x306E;&#x975E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306F;&#x3001;&#x51DD;&#x96C6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8907;&#x96D1;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x904E;&#x5270;&#x306E;&#x975E;&#x6A19;&#x8B58;GA&#x3068;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x3067;&#x4E8C;&#x91CD;&#x6A19;&#x8B58;GA&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;interspin&#x8DDD;&#x96E2;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x53CC;&#x6975;&#x5B50;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x30DF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x8102;&#x8CEA;&#xFF08;DPPC&#x306E;L&#xFF08;&#x3B2;&#xFF09;&#x76F8;&#xFF09;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x6599;&#x306E;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x306B;&#x89E3;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x5358;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x5358;&#x4F4D;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x819C;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DLPC &#x26;lt;DMPC &#x26;lt;DSPC &#x26;lt;DPPC&#xFF1A;&#x98FD;&#x548C;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30B2;&#x30EB;&#x76F8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CD;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;&#x9806;&#x5E8F;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DPPC&#x306E;&#x5747;&#x8861;DHD /&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x6BD4;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x819C;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CD;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x5F62;&#x3060;&#x3051;&#x96C6;&#x7D04;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5F62;&#x6210;&#x6642;&#x306B;GA&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x5185;&#x306B;N&#x672B;&#x7AEF;&#x7F6E;&#x63DB;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x53CC;&#x6975;ESR&#x306F;&#x819C;&#x4E2D;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x5E73;&#x8861;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;&#x975E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5E73;&#x8861;

&#xCC44;&#xB110; &#xBC0F; nonchannel &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; gramicidin A (GA) ESR&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBAA8;&#xB178;-&#xBC0F; &#xB354;&#xBE14;-&#xC2A4;&#xD540;-&#xB77C;&#xB294; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. GA &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xD384;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC704; ESR &#xC815;&#xC0C1; &#xB9C9; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xB9C9; &#xD1B5;&#xACFC; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xD68C;&#xC804; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; gramicidin &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; interspin &#xAC70;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xD658;&#xACBD;&#xC758; &#xBBF8;&#xBB18;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xAE30; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Nonchannel &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; gramicidin &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xD384;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC704; ESR &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4; &#xBC0F; &#xC720;&#xAE30; &#xC6A9; &#xC81C; trifluoroethanol &#xBC0F; octanol&#xAC00; &#xBD84;&#xC790; &#xD68C;&#xC804; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC758; &#xB354;&#xBE14; &#xD5EC;&#xB9AC;&#xCEEC; &#xC774;&#xD569;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; interspin &#xAC70;&#xB9AC;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xBA3C;&#xC800; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAC19;&#xC740; &#xAC70;&#xB9AC;&#xB97C; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; nonchannel &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xD0D0;&#xC9C0; &#xC9D1;&#xACC4; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0;, &#xC774;&#xD6C4; &#xC6B0;&#xB9AC; intermolecular interspin &#xAC70;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xCD08;&#xACFC; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC5C6;&#xB294; &#xC870;&#xC9C0;&#xC544;&#xC640; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB450; &#xBC88; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC870;&#xC9C0;&#xC544;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xBC30;&#xC704; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC9C0;&#xC9C8; (DPPC&#xC758; L(&beta;) &#xB2E8;&#xACC4;), gramicidin &#xCC44;&#xB110; &#xBB34;&#xB8CC; &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4;&#xB85C; &#xBD84;&#xB9AC;. Monomeric &#xC591;&#xC2DD;&#xC758; &#xBC31;&#xBCF8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; monomeric &#xB2E8;&#xC704;&#xC758; &#xCC44;&#xB110; &#xC774;&#xD569;&#xCCB4;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC44;&#xB110; &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; gramicidin&#xC758; &#xB354;&#xBE14; &#xD5EC;&#xB9AC;&#xCEEC; &#xB098; &#xB780;&#xC740; &#xC77C;&#xBD80; &#xB9C9; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC824; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC758; &#xD3EC;&#xD654; phosphatidylcholines &#xB354;&#xBE14; &#xD3EC;&#xD568; &#xC77C;&#xBD80; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC21C;&#xC11C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00;: DLPC &lt; DMPC &lt; DSPC &lt; DPPC. DPPC &#xD3C9;&#xD615; DHD/&#xBAA8;&#xB178; &#xBA38; &#xBE44;&#xC728; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB354;&#xBE14; &#xD5EC;&#xB9AC;&#xCEEC; &#xD615;&#xC2DD;&#xC740; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC874;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCC44;&#xB110; &#xD615;&#xC131; &#xC2DC; &#xC870;&#xC9C0;&#xC544; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB300;&#xCCB4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xD384;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC704; ESR &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD654;&#xD559;&#xC2DD;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xD65C;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xACFC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD654;&#xD559;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xD540; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; gramicidin&#xC758; &#xCC44;&#xB110; &#xBC0F; nonchannel &#xD615;&#xD0DC;.

Formas de canal y nonchannel de gramicidina A (GA) fueron estudiados por ESR en ambientes diferentes de l&#xED;pidos usando el nuevo mono y doble spin-compuestos marcados. Para los canales GA, se demuestra aqu&#xED; c&#xF3;mo ESR pulso dipolar puede ser utilizado para determinar la orientaci&#xF3;n de la mol&#xE9;cula de membrana de desplazamiento con respecto a la normal de la membrana y para estudiar los efectos sutiles de medio ambiente l&#xED;pidos en la distancia interspin en el spin-etiquetados canal gramicidina. Para el estudio de las formas nonchannel de gramicidina, el pulso bipolar ESR fue utilizado por primera vez para determinar las distancias correspondientes a interspin mon&#xF3;meros y d&#xED;meros de doble h&#xE9;lice de mol&#xE9;culas marcadas spin-GA en el trifluoroetanol disolventes org&#xE1;nicos y octanol. Las mismas distancias se observaron a continuaci&#xF3;n, en las membranas. Puesto que la detecci&#xF3;n de formas nonchannel en la membrana se complica por la agregaci&#xF3;n, se suprime cualquier espectros dipolar de distancias interspin intermoleculares derivados de los agregados mediante doble marcado con GA en una mezcla con un exceso no marcado GA. En los l&#xED;pidos hidrof&#xF3;bicos no coincidentes (L (&#x3B2;) la fase de DPPC), de canales de gramicidina se disocian en mon&#xF3;meros libres. La estructura principal de la forma monom&#xE9;rica es similar a una unidad monom&#xE9;rica del d&#xED;mero canal. Adem&#xE1;s de los canales y mon&#xF3;meros, la conformaci&#xF3;n de doble h&#xE9;lice de gramicidina est&#xE1; presente en algunos entornos de membrana. En la fase de gel de fosfatidilcolinas saturadas, la fracci&#xF3;n de dobles h&#xE9;lices aumenta en el siguiente orden: DLPC &#x26;lt;DMPC &#x26;lt;DSPC &#x26;lt;DPPC. El equilibrio DDH / mon&#xF3;mero relaci&#xF3;n en DPPC se determin&#xF3;. En las membranas, la forma de doble h&#xE9;lice est&#xE1; presente s&#xF3;lo en los agregados. Adem&#xE1;s, se estudi&#xF3; el efecto de la N-terminal de sustituci&#xF3;n en la mol&#xE9;cula de GA en la formaci&#xF3;n de canales. Este trabajo demuestra c&#xF3;mo ESR dipolar pulsada puede ser utilizado para estudiar equilibrios complejo de p&#xE9;ptidos en las membranas.

Los canales y las formas de Nonchannel Spin-etiquetados gramicidina en las membranas y su equilibrio

PC &#x81EA;&#x65CB;&#x6807;&#x7B7E;&#x51BB;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x7535;&#x5B50;&#x81EA;&#x65CB;&#x5171;&#x632F;&#x53C2;&#x6570;&#x5E76;&#x4E0D;&#x53EA;&#x662F;&#x4EE3;&#x8868;&#x819C;&#x6781;&#x6027;&#x6216;&#x6C34;&#x6E17;&#x900F;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5206;&#x5E03;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6C22;&#x952E; (HB) &#x548C;&#x975E;&#x6C22;&#x4FDD;&#x7A0E; &#xFF08;&#x975E; HB) &#x56FD;&#x5BB6;&#x53D7;&#x5230;&#x82E5;&#x5E72;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x819C;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4ECE;&#x7ED3;&#x6676;&#x6EB6;&#x5242;&#x6EB6;&#x8D28;&#x7684;&#x6392;&#x65A5;&#xFF0C;&#x7EAF;&#x6563;&#x88C5;&#x51DD;&#x80F6;&#x9636;&#x6BB5;&#x6392;&#x9664;&#x6C2E;&#x6C27;&#x81EA;&#x7531;&#x57FA;&#xFF0C;&#x8FEB;&#x4F7F;&#x9170;&#x57FA;&#x94FE;&#x91C7;&#x53D6;&#x5F2F;&#x66F2;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6784;&#x8C61;&#x6C2E;&#x662F;&#x6C22;&#x952E;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x540E;&#x9010;&#x6E10;&#x51B7;&#x5374;&#x8FC7;&#x51B7;&#x7684;&#x51DD;&#x80F6;&#x4E2D;, PC &#x6807;&#x7B7E;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x7F13;&#x6162;&#x6A2A;&#x5411;&#x805A;&#x5408;&#x9020;&#x6210;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x80CC;&#x666F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5982;&#x679C;&#x7ACB;&#x5373;&#x51BB;&#x7ED3;&#x8BE5;&#x793A;&#x4F8B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x80CC;&#x666F;&#x662F;&#x7531; HB &#x7EC4;&#x4EF6;&#x66FF;&#x6362;&#x3002;&#x5728;&#x819C;&#x4E0E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684; HB &#x80C6;&#x56FA;&#x9187; / &#x975E; HB &#x6BD4;&#x7387;&#x6700;&#x597D;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7531;&#x6C2E;&#x6C27;&#x81EA;&#x7531;&#x57FA;&#x8102;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x5185;&#x7684;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x548C;&#x90A3;&#x4E9B;&#x63A5;&#x8FD1;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x7F3A;&#x9677;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x5206;&#x533A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x5E73;&#x8861;&#x3002;

&#x6784;&#x8C61;&#x5206;&#x5E03;&#x548C;&#x51DD;&#x80F6;&#x548C;&#x51BB;&#x7684;&#x8102;&#x53CC;&#x5C42;&#x7684;&#x6C22;&#x952E;&#x7ED3;&#x5408;&#xFF1A; &#x9AD8;&#x9891;&#x65CB;&#x8F6C;&#x6807;&#x7B7E; ESR &#x7814;&#x7A76;&#x3002;

The ESR parameters of PC spin labels in frozen membranes do not simply represent the membrane polarity or water penetration profile. Instead, they show a distribution between hydrogen-bonded (HB) and non-hydrogen bonded (non-HB) states, which is affected by a number of factors in the membrane composition. Similar to the exclusion of solutes from crystallizing solvents, the pure bulk gel phase excludes nitroxides, forcing acyl chains to take bent conformations. In these conformations the nitroxide is hydrogen-bonded. Furthermore, upon gradual cooling in the supercooled gel PC labels undergo slow lateral aggregation resulting in a broad background signal. However, if the sample is instantly frozen, this background is replaced by the HB component. In membranes with cholesterol the observed HB/ non-HB ratio can best be described by a partition-like equilibrium between nitroxides located in defects of lipid structure within the hydrophobic core and those close to the membrane surface.

Conformational Distributions and Hydrogen Bonding in Gel and Frozen Lipid Bilayers: A High Frequency Spin-Label ESR Study.

Les param&#xE8;tres ESR de marqueurs de spin PC dans les membranes congel&#xE9;s ne repr&#xE9;sente pas seulement la polarit&#xE9; membranaire ou un profil de p&#xE9;n&#xE9;tration de l&#x26;#39;eau. Au lieu de cela, ils montrent une r&#xE9;partition entre l&#x26;#39;hydrog&#xE8;ne li&#xE9; (HB) et non-hydrog&#xE8;ne li&#xE9; (non-HB) les Etats, qui est affect&#xE9;e par un certain nombre de facteurs dans la composition de la membrane. Semblable &#xE0; l&#x26;#39;exclusion des solut&#xE9;s de solvants de cristallisation, la phase de gel en vrac pur exclut nitroxydes, for&#xE7;ant cha&#xEE;nes acyles de prendre des conformations pli&#xE9;es. Dans ces conformations le nitroxyde est de l&#x26;#39;hydrog&#xE8;ne li&#xE9;. En outre, lors du refroidissement progressif des &#xE9;tiquettes en surfusion PC gel subir lente agr&#xE9;gation lat&#xE9;rale r&#xE9;sultant en un signal d&#x26;#39;arri&#xE8;re-plan large. Toutefois, si l&#x26;#39;&#xE9;chantillon est instantan&#xE9;ment gel&#xE9;, ce contexte est remplac&#xE9; par le composant HB. Dans les membranes avec le taux de cholest&#xE9;rol observ&#xE9;e le HB / non-HB ratio peut &#xEA;tre d&#xE9;crit par un &#xE9;quilibre de partage entre les nitroxydes-comme situ&#xE9;s dans les d&#xE9;fauts de structure lipidique dans le noyau hydrophobe et ceux &#xE0; proximit&#xE9; de la surface de la membrane.

Distributions de conformation et la liaison hydrog&#xE8;ne dans les bicouches lipidiques gel et congel&#xE9;: Une &#xE9;tude de haute fr&#xE9;quence ESR Spin-Label

Die ESR-Parameter PC Drehbeschleunigung Etiketten in gefrorenen Membranen repr&auml;sentieren nicht einfach das Profil zum Membran-Polarit&auml;t oder Wasser eindringen. Stattdessen zeigen sie, dass eine Verteilung von Wasserstoff-gebundenen (HB) und nicht-Wasserstoff (HB) Staaten, verklebt, der von einer Reihe von Faktoren in der Membran-Komposition beeinflusst. &Auml;hnlich wie bei den Ausschluss von Analyten aus kristallisieren L&ouml;sungsmittel schlie&szlig;t die pure Masse Gel Phase Nitroxides, zwingen Acil Ketten, verbogene Konformationen zu nehmen. In diesen Konformationen ist der Nitroxide Wasserstoff gebunden. Dar&uuml;ber hinaus werden PC-Etiketten auf allm&auml;hliche Abk&uuml;hlung im unterk&uuml;hlten Gel langsam laterale Aggregation, was zu einer breiten Hintergrund-Signal unterzogen. Wenn die Probe sofort fixiert ist, wird diesem Hintergrund jedoch von der HB-Komponente ersetzt. In Membranen mit Cholesterin der beobachteten HB / nicht-HB-Verh&auml;ltnis kann am besten durch eine Partition wie Gleichgewicht zwischen Nitroxides befindet sich in M&auml;ngel der Lipid-Struktur innerhalb der hydrophoben Kern und diejenigen in der N&auml;he der Membranoberfl&auml;che beschrieben werden.

Konformations&auml;nderungen Distributionen und Hydrogen Bonding Gel und gefrorenen Lipid-Doppelschichten: ein Hochfrequenz-Spin-Label-ESR-Studie.

I parametri di ESR di etichette spin PC nelle membrane congelate non rappresentano semplicemente il profilo di penetrazione membrana polarit&agrave; o acqua. Invece, essi mostrano che una distribuzione tra idrogeno-legato (HB) e non-idrogeno bonded stati (non-HB), che &egrave; influenzata da un certo numero di fattori della composizione della membrana. Simile all&#39;esclusione dei soluti dalla cristallizzazione di solventi, la fase di gel puro bulk esclude nitroxides, costringendo catene acil per assumere conformazioni piegati. In queste conformazioni il nitrossido &egrave; legato con idrogeno. Inoltre, sul raffreddamento graduale nel gel sovraraffreddate etichette PC subiscono lenta aggregazione laterale risultante in un segnale di ampio background. Tuttavia, se il campione &egrave; immediatamente congelato, questo sfondo &egrave; sostituito dal componente HB. Nelle membrane con colesterolo la HB osservata / non-HB ratio pu&ograve; essere meglio descritta da un partizione come equilibrio tra nitroxides situato in difetti della struttura dei lipidi all&#39;interno del nucleo idrofobo e quelli vicino alla superficie della membrana.

Distribuzioni conformazionali e legami idrogeno in Gel e lipidici congelata: uno studio di ESR Spin-etichetta ad alta frequenza.

&#x51CD;&#x7D50;&#x819C;&#x306E;PC&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;ESR&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x306B;&#x819C;&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x3084;&#x6C34;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#xFF08;HB&#xFF09;&#x3068;&#x819C;&#x7D44;&#x6210;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x975E;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#xFF08;&#x975E;HB&#xFF09;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x9593;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x6676;&#x5316;&#x6EB6;&#x5A92;&#x304B;&#x3089;&#x6EB6;&#x8CEA;&#x306E;&#x6392;&#x9664;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x7D14;&#x7C8B;&#x306A;&#x30D0;&#x30EB;&#x30AF;&#x30B2;&#x30EB;&#x76F8;&#x306F;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x9396;&#x304C;&#x66F2;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x53D6;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4F59;&#x5100;&#x306A;&#x304F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x3092;&#x9664;&#x5916;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x904E;&#x51B7;&#x5374;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;PC&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x5F90;&#x3005;&#x306B;&#x51B7;&#x5374;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5E45;&#x5E83;&#x3044;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B0;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x4F4E;&#x901F;&#x5074;&#x306E;&#x96C6;&#x8A08;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306F;&#x5373;&#x5EA7;&#x306B;&#x51CD;&#x7D50;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x80CC;&#x666F;&#x306F;HB&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x819C;&#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;HB /&#x975E;HB&#x6BD4;&#x306F;&#x6700;&#x9AD8;&#x306E;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x30B3;&#x30A2;&#x3068;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x8102;&#x8CEA;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5E73;&#x8861;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B8;&#x30A7;&#x30EB;&#x3068;&#x51B7;&#x51CD;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x306E;&#x7ACB;&#x4F53;&#x69CB;&#x9020;&#x5206;&#x5E03;&#x3068;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#xFF1A;&#x9AD8;&#x5468;&#x6CE2;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;ESR&#x7814;&#x7A76;

&#xB0C9;&#xB3D9;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; PC &#xC2A4;&#xD540; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC758; ESR &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB294; &#xB2E8;&#xC21C;&#xD788; &#xB9C9; &#xADF9;&#xC131; &#xB610;&#xB294; &#xBB3C; &#xCE68;&#xD22C; &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xC744; &#xB300;&#xD45C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC218;&#xC18C; &#xBCF4; &#xC138; (HB)&#xC640; &#xBE44; &#xC218;&#xC18C; &#xBD84;&#xD3EC; &#xBCF4; &#xC138; (&#xBE44; HB) &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB294; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Crystallizing &#xC6A9; &#xB9E4;&#xC5D0;&#xC11C; solutes &#xC81C;&#xC678; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC640; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC21C;&#xC218; &#xB300;&#xB7C9; &#xC824; &#xB2E8;&#xACC4; nitroxides, &#xAD6C;&#xBD80;&#xB7EC;&#xC9C4;&#xB41C; conformations &#xAC78;&#xB9B4; acyl &#xCCB4;&#xC778; &#xAC15;&#xC81C; &#xC81C;&#xC678; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; conformations&#xB294; nitroxide &#xC218;&#xC18C; &#xBCF4; &#xC138;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC810;&#xC9C4;&#xC801; &#xB0C9;&#xAC01; supercooled &#xC824;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; PC &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xB290;&#xB9B0; &#xCE21;&#xBA74; &#xC9D1;&#xACC4;&#xB97C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xBC30;&#xACBD; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xBC1B; &#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC0D8;&#xD50C;, &#xC989;&#xC2DC; &#xB0C9;&#xB3D9;&#xC774; &#xBC30;&#xACBD; HB &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xCCB4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; HB&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; / &#xBE44; HB &#xBE44;&#xC728; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; &#xC18C;&#xC218; &#xCF54;&#xC5B4;&#xC640; &#xADF8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xD45C;&#xBA74; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xD55C; nitroxides &#xC0AC;&#xC774; &#xD30C;&#xD2F0;&#xC158; &#xAC19;&#xC740; &#xADE0;&#xD615;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC124;&#xBA85; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBC30;&#xD3EC;&#xD310; &#xBC0F; &#xC824;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC815; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC9C8; Bilayers &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569;: &#xACE0;&#xC8FC;&#xD30C; &#xC2A4;&#xD540; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; ESR &#xC5F0;&#xAD6C;.

Los par&#xE1;metros ESR de marcadores de esp&#xED;n de PC en las membranas congelados no representan simplemente la polaridad de la membrana o el perfil de la penetraci&#xF3;n del agua. En cambio, muestran una distribuci&#xF3;n entre enlaces de hidr&#xF3;geno (HB) y no hidr&#xF3;geno unido (no HB) estados, que se ve afectada por un n&#xFA;mero de factores en la composici&#xF3;n de la membrana. Similar a la exclusi&#xF3;n de los solutos de disolventes de cristalizaci&#xF3;n, la fase en masa de gel puro excluye nitr&#xF3;xidos, forzando a las cadenas de acilo para tomar conformaciones dobladas. En estas conformaciones el nitr&#xF3;xido es enlaces de hidr&#xF3;geno. Adem&#xE1;s, el enfriamiento gradual en las etiquetas de PC subfundidas gel someterse agregaci&#xF3;n lenta lateral que resulta en una se&#xF1;al de fondo amplio. Sin embargo, si la muestra se congel&#xF3; instant&#xE1;neamente, este fondo se sustituye por el componente de HB. En las membranas de la observada con colesterol HB / no-HB relaci&#xF3;n puede ser mejor descrito por un equilibrio de reparto-como entre nitr&#xF3;xidos localizado en defectos de la estructura lip&#xED;dica dentro del n&#xFA;cleo hidr&#xF3;fobo y cerrar aquellos a la superficie de la membrana.

Las distribuciones conformacionales y enlace de hidr&#xF3;geno en la bicapa lip&#xED;dica de gel y congelados: una alta frecuencia de Spin-Label Study ESR

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Boris G. Dzikovski

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