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Assessing Somatic Hypermutation in Ramos B Cells after Overexpression or Knockdown of Specific Genes

B cells start their life with low affinity antibodies generated by V(D)J recombination.  However, upon detecting a pathogen, the variable (V) region of an ...

Duke University 

Exocyclic &#x4E8C;&#x70F7;&#x6C28;&#x57FA;&#x560C;&#x5464;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x5305;&#x62EC; N 2-ethyldeoxyguanosine&#x3001; N 2-isopropyldeoxyguanosine &#x548C; N 6 isopropyldeoxyadenosine&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E; DNA &#x4E0E;&#x4E59;&#x9187;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA7;&#x7269;&#x4E59;&#x919B;&#x3001; diisopropylnitrosamine&#x3001; diisopropyltriazene &#x7B49;&#x6BD2;&#x7D20;&#x53CD;&#x5E94;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x6709;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6570;&#x636E;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x751F;&#x7269;&#x540E;&#x679C;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x65F6;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E; DNA&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x81EA;&#x6765;&#x6C34;&#xFF0C;&#x5316;&#x5B66;&#x5408;&#x6210; exocyclic &#x6C28;&#x57FA;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x65F6;&#x5B9A;&#x70B9;&#x653E;&#x7F6E;&#x5728;&#x7956;&#x666E;&#x592B;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x8BB0;&#x8005;&#x8D28;&#x7C92; pLSX &#x548C;&#x590D;&#x5236;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8FD9;&#x4E9B; exocyclic &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x6F5C;&#x529B;&#x52A0;&#x5408;&#x5230; O 6-ethyldeoxyguanosine &#x7684;&#x3002;&#x5173;&#x4E8E;&#x8865;&#x5145;&#x7684;&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF; deoxyuridines &#x5217;&#x5165;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x5728; 5&#39; &#x548C; 3&#39; &#x4FA7;&#x7FFC;&#x9635;&#x5730;&#x9020;&#x6210;&#x7A81;&#x53D8;&#x7EC4;&#x5206;&#x7684; N 2 ethyldeoxyguanosine &#x548C; N 2 isopropyldeoxyguanosine &#x542B;&#x8D28;&#x7C92; 1.4+/-0.5%5.7 + /-2.5%&#x7684;&#x5206;&#x522B;&#xFF0C;&#x4E24;&#x8005;&#x5747;&#x660E;&#x663E;&#x5927;&#x4E8E;&#x63A7;&#x5236;&#x8D28;&#x7C92; deoxyuridines &#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x52A0;&#x5408;&#x7269; (p = 0.04 &#x548C; 0.003&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;)&#x3002;&#x81EA;&#x6765;&#x6C34;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A; exocyclic &#x4E8C;&#x70F7;&#x6C28;&#x57FA;&#x560C;&#x5464;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x6BD4; O 6 ethyldeoxyguanosine &#x5E45;&#x5EA6;&#x5C0F;&#x4E86; (&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6570; = 21.2 + /-1.2%&#xFF0C;p = 180&#xFF09; &#x4E0E;&#x6B63;&#x5728;&#x81F3;&#x5C11;&#x8BF1;&#x53D8;&#x7684; N 6 isopropyldeoxyadenosine (&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6570; = 1.2 + /-0.5%&#xFF0C;p = 0.13)&#x3002;N 2-&#x4E59;&#x57FA;&#x548C;-isopropyldeoxyguanosine &#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x8C31;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x5305;&#x62EC;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9; G:C--&gt; T: transversions&#x3001; &#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x7F51;&#x7AD9;&#x5355;&#x4E2A;&#x57FA;&#x5220;&#x9664;&#x5355;&#x4E2A;&#x57FA;&#x5220;&#x9664;&#x4E09;&#x4E2A;&#x57FA;&#x5730;&#x4E0E;&#x4E0B;&#x6E38;&#x4ECE;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x7531; O 6 ethyldeoxyguanosine &#x75C5;&#x53D8;&#x7684; 95%&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x7F51;&#x7AD9;&#x9488;&#x5BF9;&#x8F6C;&#x6362;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x8C31;&#x4E0E;&#x9C9C;&#x660E;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; N 2-&#x4E59;&#x57FA;&#x548C;-isopropyldeoxyguanosine &#x662F;&#x81F4;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x8C31;&#x660E;&#x663E;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;O 6 ethyldeoxyguanosine &#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x3002;

&#x8BF1;&#x53D8; exocyclic &#x4E8C;&#x70F7;&#x6C28;&#x57FA;&#x560C;&#x5464;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x3002;

Exocyclic alkylamino purine adducts, including N(2)-ethyldeoxyguanosine, N(2)-isopropyldeoxyguanosine, and N(6)-isopropyldeoxyadenosine, occur as a consequence of reactions of DNA with toxins such as the ethanol metabolite acetaldehyde, diisopropylnitrosamine, and diisopropyltriazene. However, there are few data addressing the biological consequences of these adducts when present in DNA. Therefore, we assessed the mutagenicities of these single, chemically synthesized exocyclic amino adducts when placed site-specifically in the supF gene in the reporter plasmid pLSX and replicated in Escherichia coli, comparing the mutagenic potential of these exocyclic amino adducts to that of O(6)-ethyldeoxyguanosine. Inclusion of deoxyuridines on the strand complementary to the adducts at 5' and 3' flanking positions resulted in mutant fractions of N(2)-ethyldeoxyguanosine and N(2)-isopropyldeoxyguanosine-containing plasmid of 1.4+/-0.5% and 5.7+/-2.5%, respectively, both of which were significantly greater than control plasmid containing deoxyuridines but no adduct (p=0.04 and 0.003, respectively). The mutagenicities of the three exocyclic alkylamino purine adducts tested were of smaller magnitude than O(6)-ethyldeoxyguanosine (mutant fraction=21.2+/-1.2%, p=0.00001) with the N(6)-isopropyldeoxyadenosine being the least mutagenic (mutant fraction=1.2+/-0.5%, p=0.13). The mutation spectrum generated by the N(2)-ethyl and -isopropyldeoxyguanosine adducts included adduct site-targeted G:C-->T:A transversions, adduct site single base deletions, and single base deletions three bases downstream from the adduct, which contrasted sharply with the mutation spectrum generated by the O(6)-ethyldeoxyguanosine lesion of 95% adduct site-targeted transitions. We conclude that N(2)-ethyl and -isopropyldeoxyguanosine are mutagenic adducts in E. coli whose mutation spectra differ markedly from that of O(6)-ethyldeoxyguanosine.

Mutagenesis by exocyclic alkylamino purine adducts in Escherichia coli.

Alkylamino exocyclique purine adduits, N 2-ethyldeoxyguanosine, N 2-isopropyldeoxyguanosine et N 6-isopropyldeoxyadenosine, en raison des r&eacute;actions de l&#39;ADN avec des toxines comme l&#39;ac&eacute;tald&eacute;hyde de m&eacute;tabolite de l&#39;&eacute;thanol, diisopropylnitrosamine et diisopropyltriazene. Cependant, il existent peu de donn&eacute;es sur les cons&eacute;quences biologiques de ces adduits lorsqu&#39;il est pr&eacute;sent dans l&#39;ADN. Par cons&eacute;quent, nous avons &eacute;valu&eacute; la mutag&eacute;nicit&eacute; de ces simples, synth&eacute;tis&eacute;s chimiquement exocyclique adduits amin&eacute;s lorsque plac&eacute; relativement dans le g&egrave;ne supF dans le pLSX de plasmide de journaliste et r&eacute;pliqu&eacute;es dans Escherichia coli, en comparant le potentiel mutag&egrave;ne de ces exocyclique amino adduits &agrave; celle de O 6-ethyldeoxyguanosine. Inclusion des d&eacute;soxyuridines sur le brin compl&eacute;mentaire &agrave; l&#39;adduits &agrave; 5&#39; et 3&#39; postes d&#39;accompagnement fait mutantes fractions de N 2-ethyldeoxyguanosine et le plasmide de N contenant du 2-isopropyldeoxyguanosine de 1.4+/-0.5% et 5,7 &plusmn; 2,5 %, respectivement, qui &eacute;taient significativement plus &eacute;lev&eacute;s que le plasmide contr&ocirc;le contenant d&eacute;soxyuridines mais aucun adduit (p = 0,04 et 0,003, respectivement). La mutag&eacute;nicit&eacute; de la purine trois alkylamino exocyclique adduits test&eacute;s ont &eacute;t&eacute; d&#39;une amplitude plus faible que O 6-ethyldeoxyguanosine (fraction mutante = 21,2 &plusmn; 1.2 %, p = 0,00001) avec le N 6-isopropyldeoxyadenosine &eacute;tant la moins mutag&egrave;ne (fraction mutante = 1,2 &plusmn; 0,5 %, p = 0,13). Le spectre de mutation g&eacute;n&eacute;r&eacute; par la N 2-&eacute;thyle et isopropyldeoxyguanosine - adduits inclus adduit cibl&eacute;e par sites est--&gt; T: une transversions, destructions de base unique site adduit et destructions de base unique trois bases en aval de l&#39;adduit, qui contraste fortement avec le spectre de mutation g&eacute;n&eacute;r&eacute; par la l&eacute;sion de 6-ethyldeoxyguanosine O de 95 % adduit cibl&eacute;es par sites transitions. Nous concluons que N 2-&eacute;thyle et isopropyldeoxyguanosine - sont mutag&egrave;nes adduits chez e. coli, dont les spectres mutation diff&egrave;rent nettement de celle de O 6-ethyldeoxyguanosine.

Mutag&eacute;n&egrave;se par alkylamino exocyclique purine adduits chez Escherichia coli.

EXOCYCLISCHE Alkylamino Purin Addukte, einschlie&szlig;lich N 2-Ethyldeoxyguanosine, N-2-Isopropyldeoxyguanosine und N-6-Isopropyldeoxyadenosine, infolge der Reaktionen der DNA mit Giftstoffen wie &Auml;thanol Stoffwechselprodukt Acetaldehyd, Diisopropylnitrosamine und Diisopropyltriazene auftreten. Es gibt jedoch einige Daten, die Bew&auml;ltigung der biologischen Folgen dieser Addukte wenn in DNA vorhanden. Daher beurteilen wir die Mutagenicities diese Single, chemisch synthetisierte EXOCYCLISCHE amino Addukte wenn ortspezifisch in das SupF-gen in der Reporter Plasmid pLSX platziert und in Escherichia coli repliziert, Vergleich des mutagenen Potentials diese EXOCYCLISCHE amino Addukte der O 6-Ethyldeoxyguanosine. Aufnahme des Deoxyuridines auf dem Strang komplement&auml;r zu der Addukte am 5&#39; und 3&#39; flankierenden Positionen f&uuml;hrte mutant Bruchteilen von N 2-Ethyldeoxyguanosine und N 2-Isopropyldeoxyguanosine-haltigen Plasmid 1.4+/-0.5% und 5,7 +/-2,5 %, beziehungsweise, beide waren deutlich gr&ouml;&szlig;er als Steuerelement Plasmid mit Deoxyuridines aber keine Addukts (p = 0.04 bzw. 0,003,). Die Mutagenicities von den drei EXOCYCLISCHE Alkylamino Purin Addukte getestet wurden kleinere Gr&ouml;&szlig;enordnung als O 6-Ethyldeoxyguanosine (mutant Bruchteil 21,2 +/-1,2 %, p = = 0,00001) mit der N-6-Isopropyldeoxyadenosine werden die wenigsten mutagen (mutant Bruch = 1,2 +/-0.5 %, p = 0,13). Das Mutation-Spektrum von der N 2-Ethyl- und - Isopropyldeoxyguanosine generierten Addukte enthalten Addukts Website-bezogene G:C--&gt; T: eine Transversion, Addukts Website einzelne base L&ouml;schungen und einzelne base L&ouml;schungen drei Basen stromabw&auml;rts von der Addukts, die kontrastiert mit dem Mutation-Spektrum von der O-6-Ethyldeoxyguanosine-L&auml;sion des 95 % Addukts Website-bezogene &Uuml;berg&auml;nge erzeugt. Wir schlie&szlig;en, dass N 2-Ethyl- und - Isopropyldeoxyguanosine Mutagene sind Addukte in E. Coli deren Spektren Mutation unterscheiden sich deutlich von dem der O 6-Ethyldeoxyguanosine.

Mutagenese durch EXOCYCLISCHE Alkylamino Purin Addukte in Escherichia coli.

Purina alchilamminico exocyclic addotti, compresi N (2)-ethyldeoxyguanosine, N (2) - isopropyldeoxyguanosine e N (6) - isopropyldeoxyadenosine, si verificano in conseguenza di reazioni di DNA con tossine come l&#39;acetaldeide metabolita etanolo, diisopropylnitrosamine e diisopropyltriazene. Tuttavia, ci sono pochi dati per affrontare le conseguenze biologiche di questi addotti quando presenti nel DNA. Pertanto, abbiamo valutato il mutagenicities di questi single, chimicamente sintetizzato exocyclic addotti ammino immessi site-specifically nel gene supF nel reporter del plasmide pLSX e replicati in Escherichia coli, confrontando il potenziale mutageno di questi exocyclic ammino addotti a quella di O (6)-ethyldeoxyguanosine. L&#39;inclusione di deoxyuridines sul filamento complementare l&#39;addotti al 5&#39; e 3&#39; posizioni di accompagnamento ha provocato mutante frazioni di N (2)-ethyldeoxyguanosine e N (2) - isopropyldeoxyguanosine - contenenti il plasmide di 1.4+/-0.5% e 5.7 + /-2.5%, rispettivamente, entrambi dei quali erano significativamente maggiore controllo del plasmide contenente deoxyuridines ma nessun addotto (p = 0,04 e 0,003, rispettivamente). La mutagenicities della purina tre alchilamminico exocyclic addotti testati erano di grandezza pi&ugrave; piccolo rispetto a O (6)-ethyldeoxyguanosine (frazione mutante = 21,2 &plusmn; 1.2%, p = 0.00001) con N (6)-isopropyldeoxyadenosine essere almeno mutageni (frazione mutante = 1.2 + /-0,5%, p = 0.13). Lo spettro di mutazione generato da N (2)-etile e - isopropyldeoxyguanosine addotti g incluso addotto targeting per sito--&gt; T: un transversioni, addotto sito singola base eliminazioni e delezioni singole base tre basi a valle da addotto, che contrastava nettamente con lo spettro di mutazione generato da O (6)-lesione ethyldeoxyguanosine del 95% addotto targeting per sito transizioni. Possiamo concludere che N (2)-etile e - isopropyldeoxyguanosine sono mutageni addotti in e. coli cui spettri mutazione differiscono notevolmente da quella della O (6)-ethyldeoxyguanosine.

Mutagenesi dal exocyclic alchilamminico Purina addotti in Escherichia coli.

Exocyclic &#x9175;&#x7D20;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3; &#x30A2;&#x30C0;&#x30AF;&#x30C8;&#x3001;N (2) &#x3092;&#x542B;&#x3080;-ethyldeoxyguanosine&#x3001;N &#xFF08;2&#xFF09; - isopropyldeoxyguanosine &#x3068; N (6) - isopropyldeoxyadenosine&#x3001;&#x30A8;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7269;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C8;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x3001;diisopropylnitrosamine&#x3001;diisopropyltriazene &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3092; DNA &#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;&#x306E; DNA &#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5408;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F; exocyclic &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;&#x306E;&#x7C73;&#x6751;&#x89E3;&#x6790;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; &#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x914D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE; mutagenic &#x6F5C;&#x5728;&#x6027;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089; exocyclic &#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C8;&#x6642;&#x306F; O &#xFF08;6&#xFF09; &#x306B;&#x30A2;&#x30C0;&#x30AF;&#x30C8;-ethyldeoxyguanosine&#x3002;Deoxyuridines &#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x306E;&#x5305;&#x542B;&#x3001;&#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;&#x306E; 5&#39; &#x3068; 3&#39; &#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x4E26;&#x3076; N (2) &#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x6570;&#x3067;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x305F;-ethyldeoxyguanosine &#x3068; 1.4+/-0.5% &#x3068; 5.7 &plusmn; 2.5% &#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x3092;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3092;&#x542B;&#x3080; N &#xFF08;2&#xFF09; - isopropyldeoxyguanosine - &#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082;&#x3044;&#x305F;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x5236;&#x5FA1;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7269;&#x3001;deoxyuridines &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; (p = 0.04 &#x3068; 0.003&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;)&#x3002;&#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;&#x306E; 3 &#x3064;&#x306E; exocyclic &#x9175;&#x7D20;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8; O (6) &#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306E;&#x3060;&#x3063;&#x305F;-ethyldeoxyguanosine (&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x6570; 21.2 &plusmn; 1.2%&#x3001;p = 0.00001 =) n (6)-&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x5909;&#x7570;&#x3055;&#x308C;&#x3066; isopropyldeoxyadenosine (&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x6570; 1.2 &plusmn; 0.5%&#x3001;p = 0.13 =)&#x3002;N (2) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;-&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7269; G:C T--&gt; &#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;&#x306E;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB; - isopropyldeoxyguanosine&#xFF1A;&#x3001;transversions&#x3001;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7269;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x5358;&#x4E00;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x524A;&#x9664; 3 &#x306F;&#x4E0B;&#x6D41; O (6) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3068;&#x92ED;&#x304F;&#x5BFE;&#x6BD4;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x62E0;&#x70B9;-95% &#x4ED8;&#x52A0;&#x7269;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x9077;&#x79FB;&#x306E; ethyldeoxyguanosine &#x75C5;&#x5909;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x7D50;&#x8AD6; N (2)-&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;&#x3068; - isopropyldeoxyguanosine &#x306F;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x304C;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x306F; O &#xFF08;6&#xFF09; &#x304B;&#x3089;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;-ethyldeoxyguanosine&#x3002;

&#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E; exocyclic &#x9175;&#x7D20;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;

Exocyclic alkylamino purine &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C;, N (2)-ethyldeoxyguanosine, N (2)-isopropyldeoxyguanosine, &#xBC0F; N (6)-isopropyldeoxyadenosine&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC;, &#xB3C5; &#xC18C; &#xC5D0;&#xD0C4;&#xC62C; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C; &#xC544;&#xC138;&#xD2B8;&#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC;, diisopropylnitrosamine, diisopropyltriazene &#xB4F1;&#xC73C;&#xB85C; DNA&#xC758; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C; DNA&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xC77C;&#xC758; mutagenicities &#xD3C9;&#xAC00;, O (6)-ethyldeoxyguanosine&#xC758; exocyclic site-specifically &#xAE30;&#xC790; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; Plsx&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; supF &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xBC30;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;, &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC774; exocyclic&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C; &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C; &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xC131;. &#xAC00;&#xB2E5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC644;&#xC5D0; deoxyuridines&#xC758; &#xD3EC;&#xD568;&#xC740; 5&#39;&#xACFC; 3&#39; &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C; &#xAC01;&#xAC01; N (2)-ethyldeoxyguanosine&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD84;&#xC218; &#xBC0F; 1.4+/-0.5%&#xC640; 5.7 &plusmn; 2.5 %n (2)-isopropyldeoxyguanosine-&#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xACB0;&#xACFC; &#xC704;&#xCE58; &#xCE21;&#xBA74;, &#xB458; &#xC911; &#xC544;&#xBB34; adduct &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; deoxyuridines&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xD070; &#xD588;&#xB2E4; (p = 0.04 &#xACE0; 0.003, &#xAC01;&#xAC01;). Mutagenicities 3 exocyclic alkylamino purine&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C; O (6)-ethyldeoxyguanosine &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC791;&#xC740; &#xADDC;&#xBAA8;&#xC758; &#xD588;&#xB2E4; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; (&#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD84;&#xC218; 34.1 &plusmn; 1.2%, p = = 0.00001)&#xB294; N (6)-isopropyldeoxyadenosine &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xB418; &#xACE0;&#xC640; (&#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD84;&#xC218; 1.2 &plusmn; 0.5%, p = 0.13 =). N (2)-&#xC5D0;&#xD2F8;-isopropyldeoxyguanosine&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; T--&gt; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305; &#xD3EC;&#xD568;&#xB41C; adduct G:C &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C;: O (6)-ethyldeoxyguanosine &#xBCD1; &#xBCC0; 95 %adduct &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD0C0;&#xAC9F; &#xC804;&#xD658;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC640; &#xC608;&#xB9AC;&#xD558;&#xAC8C; &#xB300;&#xC870; adduct&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xB958; &#xAE30;&#xC9C0;&#xB294; transversions, adduct &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC0AD;&#xC81C;, &#xBC0F; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC0AD;&#xC81C; 3. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; N (2)-&#xC5D0;&#xD2F8; &#xBC0F;-isopropyldeoxyguanosine&#xB294; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xACB0;&#xB860; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC758; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; O (6)-ethyldeoxyguanosine&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C;.

Exocyclic alkylamino purine &#xC5EC; mutagenesis &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C;.

Alquilamino exocyclic Purina aductos, incluyendo N 2-ethyldeoxyguanosine, N 2-isopropyldeoxyguanosine y N 6-isopropyldeoxyadenosine, se producen como consecuencia de las reacciones de ADN con toxinas como el acetaldeh&iacute;do de metabolito del etanol, diisopropylnitrosamine y diisopropyltriazene. Sin embargo, hay pocos datos abordar las consecuencias biol&oacute;gicas de estos aductos cuando est&aacute;n presentes en el ADN. Por lo tanto, determinamos las mutagenicities de estas solo, aductos exocyclic amino aductos cuando a site-specifically en el gen supF en el pLSX de pl&aacute;smido de reportero y replicado en Escherichia coli, comparando el potencial mutag&eacute;nico de estos exocyclic amino sintetizados qu&iacute;micamente a la de O 6-ethyldeoxyguanosine. Inserci&oacute;n de deoxyuridines en la cadena complementaria a los aductores a 5&#39; y 3&#39; flanqueando posiciones result&oacute; en fracciones mutantes de N 2-ethyldeoxyguanosine y pl&aacute;smido de N que contienen 2-isopropyldeoxyguanosine de 1.4+/-0.5% y 5.7 +/-2,5%, respectivamente, los cuales fueron significativamente mayores que el pl&aacute;smido de control que contiene deoxyuridines pero no aducto (p = 0,04 y 0.003, respectivamente). Aductores de las mutagenicities de la purina tres alquilamino exocyclic probados fueron de menor magnitud que O 6-ethyldeoxyguanosine (fracci&oacute;n mutante = 34.1 +/-1.2%, p = 0.00001) con la N 6-isopropyldeoxyadenosine ser el menos mutag&eacute;nico (fracci&oacute;n mutante = 1.2 + /-0.5%, p = 0.13). El espectro de la mutaci&oacute;n generado por el N 2-etil - isopropyldeoxyguanosine aductos incluido aducto orientada por sitio G:C--&gt; T: un transversions, aducto sitio sola base bajas y eliminaciones de base solos tres bases aguas abajo de la aducci&oacute;n, que contrasta fuertemente con el espectro de la mutaci&oacute;n generado por la lesi&oacute;n de 6-ethyldeoxyguanosine O de 95% aducto orientada por sitio transiciones. Concluimos que la N 2-etil y isopropyldeoxyguanosine - son mutag&eacute;nicas aductos en e. coli cuyos espectros de mutaci&oacute;n difieren marcadamente de la de O 6-ethyldeoxyguanosine.

Mutag&eacute;nesis por alquilamino exocyclic Purina aductos en Escherichia coli.

N 2-Ethyldeoxyguanosine &#xFF08;N(2)-ethyldGuo) &#x662F;&#x4E00;&#x79CD; DNA &#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x4E0E;&#x4E59;&#x9187;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA7;&#x7269;&#x4E59;&#x919B; dGuo exocyclic &#x80FA;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x4E59;&#x9187;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x81F4;&#x764C;&#x7269;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x6A21;&#x677F; N 2 ethyldGuo &#x751F;&#x7269;&#x540E;&#x679C;&#x3001; &#x4E0E;&#x730E;&#x6237;&#x5EA7;&#x52A0;&#x5408;&#x7269; O 6-ethyldeoxyguanosine &#xFF08;O(6)-ethyldGuo)&#x3002;&#x5355;&#x4E00;&#x5316;&#x5B66;&#x5408;&#x6210; N 2-ethyldGuo &#x6216; O 6 ethyldGuo &#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x4E13;&#x95E8;&#x5728;&#x6291;&#x5236; tRNA &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x62A5;&#x544A;&#x7A7F;&#x68AD;&#x8D28;&#x7C92; pLSX &#x653E;&#x7F6E;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;2-EthyldGuo N &#x548C; O 6 ethyldGuo &#x90FD;&#x662F;&#x5FAE;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5728;&#x53CC;&#x7EDE; pLSX &#x590D;&#x5236;&#x5728; 293 &#x7EC6;&#x80DE; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B89;&#x7F6E;&#x4E0A;&#x4E92;&#x8865;&#x7684;&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#x5728; 5&#39; deoxyuridines-3&#39;-&#x9635;&#x5730;&#x4FA7;&#x7FFC;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684; N (2)-ethyldGuo-5 &#x548C; 22 &#x500D;&#x589E;&#x5F3A;&#x548C; O (6)-ethyldGuo-&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x5206;&#x6570;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x6298;&#x53E0; (2)-ethyldGuo-N &#x589E;&#x52A0;&#x81F4;&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6570;&#x4E2D;&#x542B;&#x6709; deoxyuridine &#x7684;&#x8D28;&#x7C92;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x540E;&#x590D;&#x5236; 293T &#x7EC6;&#x80DE;&#x9519;&#x914D;&#x4FEE;&#x590D;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x53D8;&#x4F53; 293 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x8BE5;&#x590D;&#x5236;&#x540E;&#x9519;&#x914D;&#x4FEE;&#x590D;&#x5177;&#x6709;&#x8C03;&#x8282; N (2)-ethyldGuo-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8BF1;&#x53D8;&#x4F5C;&#x7528;&#x5F88;&#x5C0F;&#x3002;&#x7531; N 2 ethyldGuo &#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x8C31;&#x4E3B;&#x8981;&#x5305;&#x62EC;&#x5355;&#x4E2A;&#x57FA;&#x5220;&#x9664;&#x548C;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x4E0E;&#x72EC;&#x5BB6;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9; transversions &#x7531; O 6 ethyldGuo &#x52A0;&#x5408;&#x9488;&#x5BF9;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7684;&#x8FC7;&#x6E21;&#x3002;&#x540E;&#x4EE3;&#x8D28;&#x7C92;&#x540E; 293 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x5728;&#x7236;&#x6BCD;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92;&#x6216;&#x4E0D;&#x5230; 39 &#x6216; 19%deoxyuridine N 2-ethyldGuo &#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x5206;&#x522B;&#x51CF;&#x5C11;&#x4EA7;&#x91CF;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5728; DNA &#x4E2D;&#x7684; N 2-ethyldGuo &#x901A;&#x8FC7;&#x963B;&#x6B62; translesion DNA &#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8981;&#x4E48;&#x5931;&#x8D25;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x6216;&#x7A81;&#x53D8;&#x7F3A;&#x5931;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x65BD;&#x52A0;&#x5176;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

&#x590D;&#x5236; N2 ethyldeoxyguanosine DNA &#x52A0;&#x5408;&#x7269; 293 &#x4EBA;&#x80DA;&#x80BE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x3002;

N(2)-Ethyldeoxyguanosine (N(2)-ethyldGuo) is a DNA adduct formed by reaction of the exocyclic amine of dGuo with the ethanol metabolite acetaldehyde. Because ethanol is a human carcinogen, we assessed the biological consequences of replication of template N(2)-ethyldGuo, in comparison to the well-studied adduct O(6)-ethyldeoxyguanosine (O(6)-ethyldGuo). Single chemically synthesized N(2)-ethyldGuo or O(6)-ethyldGuo adducts were placed site specifically in the suppressor tRNA gene of the mutation reporting shuttle plasmid pLSX. N(2)-EthyldGuo and O(6)-ethyldGuo were both minimally mutagenic in double-stranded pLSX replicated in human 293 cells; however, the placement of deoxyuridines on the complementary strand at 5'- and 3'-positions flanking the adduct resulted in 5- and 22-fold enhancements of the N(2)-ethyldGuo- and O(6)-ethyldGuo-induced mutant fractions, respectively. The fold increase in the N(2)-ethyldGuo-induced mutant fraction in deoxyuridine-containing plasmids was similar after replication in 293T cells, a mismatch repair deficient variant of 293 cells, indicating that postreplication mismatch repair has little role in modulating N(2)-ethyldGuo-mediated mutagenesis. The mutation spectrum generated by N(2)-ethyldGuo consisted primarily of single base deletions and adduct site-targeted transversions, in contrast to the exclusive production of adduct site-targeted transitions by O(6)-ethyldGuo. The yield of progeny plasmids after replication in 293 cells was reduced by the presence of N(2)-ethyldGuo in parental plasmids with or without deoxyuridine to 39 or 19%, respectively. Taken together, these data indicate that N(2)-ethyldGuo in DNA exerts its principal biological activity by blocking translesion DNA synthesis in human cells, resulting in either failure of replication or frameshift deletion mutations.

Replication of N2-ethyldeoxyguanosine DNA adducts in the human embryonic kidney cell line 293.

N 2-Ethyldeoxyguanosine (N(2)-ethyldGuo) est un ADN adduit form&eacute; par r&eacute;action de l&#39;amine exocyclique de dGuo avec l&#39;ac&eacute;tald&eacute;hyde de m&eacute;tabolite de l&#39;&eacute;thanol. Parce que l&#39;&eacute;thanol est un canc&eacute;rog&egrave;ne pour les humain, nous avons &eacute;valu&eacute; les cons&eacute;quences biologiques de la r&eacute;plication du mod&egrave;le N 2-ethyldGuo, en comparaison avec l&#39;&eacute;tudi&eacute;e adduit O 6-ethyldeoxyguanosine (O(6)-ethyldGuo). Single synth&eacute;tis&eacute; chimiquement N 2-ethyldGuo ou des adduits O 6-ethyldGuo ont &eacute;t&eacute; plac&eacute;s le site sp&eacute;cifiquement dans le g&egrave;ne suppresseur de tRNA de la mutation pLSX de plasmide navette de d&eacute;claration. N 2-EthyldGuo et O-6-ethyldGuo &eacute;taient tous les deux au minimum mutag&egrave;ne dans bicat&eacute;naire pLSX r&eacute;pliqu&eacute;e dans les cellules humaines 293 ; Cependant, le placement des d&eacute;soxyuridines sur le brin compl&eacute;mentaire &agrave; 5&#39;-3&#39;-postes flanquant l&#39;adduit a donn&eacute; lieu &agrave; des am&eacute;liorations de N (2) - ethyldGuo - 5 et 22 fois et O (6) - ethyldGuo - induite des fractions mutantes, respectivement. La fraction mutant augmentation de N (2) - ethyldGuo - induite de pli dans les plasmides contenant d&eacute;soxyuridine ressemblait apr&egrave;s la r&eacute;plication dans les cellules 293 t, une variante de d&eacute;ficient de r&eacute;paration non concordance des 293 cellules, indiquant que m&eacute;sappariements postr&eacute;plication a qu&#39;un r&ocirc;le dans la modulation de N (2) - ethyldGuo - m&eacute;di&eacute;e par mutagen&egrave;se. Le spectre de mutation g&eacute;n&eacute;r&eacute; par N 2-ethyldGuo consistaient principalement en des destructions de base unique et transversions cibl&eacute;es par sites, contrairement &agrave; la production exclusive de l&#39;adduit adduit cibl&eacute;es par sites transitions par O 6-ethyldGuo. Le rendement des plasmides de descendance apr&egrave;s que r&eacute;plication dans les 293 cellules a &eacute;t&eacute; r&eacute;duite par la pr&eacute;sence de la N 2-ethyldGuo dans les plasmides parentales avec ou sans d&eacute;soxyuridine &agrave; 39, soit 19 %, respectivement. Pris ensemble, ces donn&eacute;es indiquent que N 2-ethyldGuo dans l&#39;ADN exerce son activit&eacute; biologique principale en bloquant TRANS-l&eacute;sion synth&egrave;se de l&#39;ADN dans les cellules humaines, entra&icirc;nant soit un &eacute;chec de r&eacute;plication ou changement de phase des mutations de d&eacute;l&eacute;tion.

R&eacute;plication de l&#39;ADN de N2-ethyldeoxyguanosine des adduits dans la lign&eacute;e de cellules r&eacute;nales embryonnaires humaines 293.

N 2-Ethyldeoxyguanosine (N(2)-ethyldGuo) ist eine DNA-Addukt gebildet durch Reaktion von der EXOCYCLISCHE Amin des dGuo mit dem &Auml;thanol Stoffwechselprodukt Acetaldehyd. Da Ethanol ein menschliches karzinogen ist, beurteilen wir die biologischen Auswirkungen der Replikation der Vorlage N 2-EthyldGuo, im Vergleich zu den gut erforscht-Addukt O 6-Ethyldeoxyguanosine (O(6)-ethyldGuo). Einzelne chemisch synthetisierte N 2-EthyldGuo oder O 6-EthyldGuo-Addukte wurden speziell in der tRNA-Suppressor-Gens, der Mutation Berichterstattung Flughafentransfer Plasmid pLSX Website gestellt. N 2-EthyldGuo und O 6-EthyldGuo waren beide minimal mutagen in doppelstr&auml;ngige pLSX in menschliche 293 Zellen repliziert; jedoch die Platzierung des Deoxyuridines auf dem komplement&auml;ren Strang in 5&#39;-3&#39;-Positionen Flankenangriff des Addukts ergab 5 und 22 8-fach Verbesserungen des N (2) - EthyldGuo - und O (6) - EthyldGuo - induzierten Mutante Fraktionen, beziehungsweise. Der Falte Zunahme der N (2) - EthyldGuo - induzierte mutant Bruch in Deoxyuridine-haltigen Plasmide war nach der Replikation in 293T Zellen, eine Fehlanpassung Reparatur mangelhaft Variante von 293 Zellen, die angibt, dass dieser postreplication Fehlanpassung Reparatur kaum eine Rolle im modulierenden N (2) - EthyldGuo - vermittelte Mutagenese hat &auml;hnlich. Das Mutation-Spektrum von N 2-EthyldGuo generierten bestand haupts&auml;chlich aus einzelnen base L&ouml;schungen und Addukt Website-bezogene Transversion, im Gegensatz zu der exklusiven Herstellung von Website-bezogene &Uuml;berg&auml;nge von O 6-EthyldGuo-Addukt. Der Ertrag der Nachkommenschaft Plasmide nach Replikation in 293 Zellen bzw. durch das Vorhandensein von N 2-EthyldGuo im elterlichen Plasmide mit oder ohne Deoxyuridine 39 oder 19 % reduziert wurde. Zusammengenommen zeigen diese Daten, dass N 2-EthyldGuo in der DNA seiner biologischen Hauptt&auml;tigkeit &uuml;bt durch die Blockade Translesion DNA-Synthese in den menschlichen Zellen, wodurch entweder Fehler der Replikation oder Frameshift-L&ouml;schung-Mutationen.

Replikation von N2-Ethyldeoxyguanosine DNA Addukte in die menschliche embryonale Nieren-Zelllinie 293.

N (2)-Ethyldeoxyguanosine (N(2)-ethyldGuo) &egrave; un DNA addotto formato dalla reazione di ammina exocyclic di dGuo con l&#39;acetaldeide metabolita di etanolo. Perch&eacute; l&#39;etanolo &egrave; un cancerogeno per l&#39;uomo, abbiamo valutato le conseguenze biologiche di replica del modello N (2) - ethyldGuo, in confronto la ben studiata addotto O (6) - ethyldeoxyguanosine (O(6)-ethyldGuo). Singola chimicamente sintetizzato N (2) - ethyldGuo o O (6) - ethyldGuo addotti erano posti sito in particolare il gene del tRNA soppressore della mutazione reporting navetta plasmide pLSX. N (2) - EthyldGuo e O (6) - ethyldGuo erano entrambi minimamente mutagena in double-stranded pLSX replicati nelle cellule umane 293; Tuttavia, il posizionamento di deoxyuridines sul filamento complementare al 5&#39;-3&#39;-posizioni che fiancheggiano l&#39;addotto ha portato miglioramenti 5 - 22 volte di N (2) - ethyldGuo - e O (6) - ethyldGuo - induced mutante frazioni, rispettivamente. Frazione mutante fold aumento di N (2) - ethyldGuo - indotta in plasmidi contenenti deossiuridina era simile dopo la replica nelle cellule 293T, una variante carenti di riparazione mancata corrispondenza delle 293 cellule, indicando che riparazione del disadattamento postreplication ha poco ruolo nel modulare la mutagenesi N (2) - ethyldGuo - mediata. Lo spettro di mutazione generato da N (2)-ethyldGuo consisteva principalmente di delezioni singole base e addotto transversioni targeting per sito, in contrasto con la produzione esclusiva di addotto targeting per sito transizioni da O (6)-ethyldGuo. Il rendimento dei plasmidi progenie dopo replicazione nelle 293 cellule &egrave; stato ridotto dalla presenza di N (2)-ethyldGuo in plasmidi parentale con o senza deossiuridina a 39 o 19%, rispettivamente. Presi insieme, questi dati indicano che N (2)-ethyldGuo nel DNA esercita la sua principale attivit&agrave; biologica bloccando sintesi di translesion del DNA nelle cellule umane, con conseguente o insufficienza di replica o frameshift mutazioni di omissione.

Replicazione del DNA N2-ethyldeoxyguanosine addotti nella linea di cellule renali embrionali umane 293.

N (2)-Ethyldeoxyguanosine (N(2)-ethyldGuo) &#x306F;&#x3001;DNA &#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53; exocyclic &#x30A2;&#x30DF;&#x30F3; dGuo &#x30A8;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7269;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C8;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x3068;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A8;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x767A;&#x764C;&#x7269;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x7D50;&#x679C; (2) &#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; N &#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1; - ethyldGuo &#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3088;&#x304F;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7269; O (6) - ethyldeoxyguanosine (O(6)-ethyldGuo)&#x3002;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x5408;&#x6210; N &#xFF08;2&#xFF09; - ethyldGuo &#x307E;&#x305F;&#x306F; O (6) - ethyldGuo &#x30A2;&#x30C0;&#x30AF;&#x30C8; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30B7;&#x30E3;&#x30C8;&#x30EB; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; &#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3001;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC; tRNA &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x7F6E;&#x304B;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;N (2) - EthyldGuo &#x3068; O (6) - ethyldGuo &#x3083;&#x3063;&#x305F;&#x308A;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x5909;&#x7570;&#x3067;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E; 293 &#x7D30;&#x80DE;&#x3067;; &#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C8;&#x4E8C;&#x672C;&#x9396;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30EA;&#x30F3;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;5 &#xFF5E; 22 &#x500D;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35; &#xFF08;2&#xFF09; - ethyldGuo - N &#x3067; deoxyuridines &#x4ED8;&#x52A0;&#x7269;&#x306E;&#x4E26;&#x3076; 5&#39;-&#x3068; 3&#39;-&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3067;&#x306E;&#x88DC;&#x8DB3;&#x306E;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x4E0A;&#x306E;&#x914D;&#x7F6E;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;O (6) - ethyldGuo - &#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x6570;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x8A98;&#x767A;&#x3002;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9; &#xFF08;2&#xFF09; - ethyldGuo - N &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x5909;&#x7570;&#x5206;&#x6570;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x8907;&#x88FD; 293 t &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x6B20;&#x640D;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x305D;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30DF;&#x30B9;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x304C; N (2) - ethyldGuo - &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x3092;&#x5909;&#x8ABF;&#x3067;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;293 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F8C;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;N (2) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;-ethyldGuo &#x306E;&#x4E3B;&#x306B;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x524A;&#x9664;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E; transversions &#x306E;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x7523;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7269;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x9077;&#x79FB; O (6) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7269;-ethyldGuo&#x3002;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; 293 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; N &#xFF08;2&#xFF09; &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x5B50;&#x5B6B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E;&#x53CE;&#x7387;-ethyldGuo &#x89AA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; &#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3; 39 &#x307E;&#x305F;&#x306F; 19% &#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059; N &#xFF08;2&#xFF09;-ethyldGuo DNA &#x306E;&#x3072;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x4E57;&#x308A;&#x8D8A;&#x3048; DNA &#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x524A;&#x9664;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30D1;&#x30EB;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

N2 ethyldeoxyguanosine DNA &#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x840C;&#x82BD;&#x671F;&#x306E;&#x814E;&#x81D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; 293 &#x30A2;&#x30C0;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

N (2)-Ethyldeoxyguanosine (n(2)-ethyldguo)&#xB294; DNA adduct &#xC5D0;&#xD0C4;&#xC62C; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C; &#xC544;&#xC138;&#xD2B8;&#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xC640; Dguo&#xC758; exocyclic &#xC544;&#xBBFC;&#xC758; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xC131;. &#xC5D0;&#xD0C4;&#xC62C; &#xC778;&#xAC04; &#xBC1C;&#xC554; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; N (2)-Ethyldguo&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xACB0;&#xACFC; &#xD3C9;&#xAC00;, &#xBE44;&#xAD50;&#xB294; &#xC774;&#xC57C;&#xAE30;&#xB3C4; adduct O (6)-ethyldeoxyguanosine (O(6)-ethyldGuo). &#xB2E8;&#xC77C; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xD569;&#xC131; N (2)-ethyldGuo &#xB610;&#xB294; O (6)-ethyldGuo &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC154;&#xD2C0; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; pLSX &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC5B5;&#xC555; tRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xBC30;&#xCE58; &#xD588;&#xB2E4;. N (2)-EthyldGuo O (6)-ethyldGuo &#xD588;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xB450; &#xCD5C;&#xC18C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; 293 &#xC138;&#xD3EC;; &#xB354;&#xBE14;-&#xC88C;&#xCD08; Plsx&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, deoxyuridines&#xC5D0;&#xC11C; 5&#39; &#xBCF4;&#xC644; &#xAC00;&#xB2E5;&#xC5D0; &#xBC30;&#xCE58;-3&#39;-&#xC704;&#xCE58;&#xB294; adduct &#xCE21;&#xBA74; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; (2)-ethyldGuo-n 5&#xC640; 22 &#xBC30; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xBC0F; O (6)-ethyldGuo-&#xC720;&#xBC1C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD84;&#xC218;, &#xAC01;&#xAC01;. Deoxyuridine &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xBC30; &#xC99D;&#xAC00; (2)-ethyldGuo-N&#xC5D0; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD84;&#xC218; &#xBCF5;&#xC81C; 293T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xADF8; postreplication &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58; &#xC218;&#xB9AC; &#xC788;&#xB2E4; N (2)-ethyldGuo-&#xC911;&#xC7AC; mutagenesis &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC740; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; 293 &#xC140;&#xC758; &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xACB0;&#xD54D; &#xBCC0;&#xD615; &#xD6C4; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. N (2)-Ethyldguo&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC8FC;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4;&#xC758; &#xB3C5;&#xC810; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305; transversions adduct &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xD658; &#xD558; &#xC5EC; O (6)-ethyldGuo adduct. 293 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xAC01;&#xAC01; N (2)-ethyldGuo 39 &#xB610;&#xB294; 19%, deoxyuridine &#xC5C6;&#xC774; &#xBD80;&#xBAA8;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xD6C4; &#xC790;&#xC190; plasmids&#xC758; &#xC218;&#xC775;&#xB960;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; N (2)-ethyldGuo dna&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB610;&#xB294; frameshift &#xC0AD;&#xC81C; &#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC5B4;&#xB290; &#xC624;&#xB958;&#xAC00; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; translesion DNA &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558; &#xC5EC; &#xC790;&#xC0AC;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294;.

N2 ethyldeoxyguanosine DNA&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC140; &#xC904; 293 &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C;.

N 2-Ethyldeoxyguanosine (N(2)-ethyldGuo) es un ADN aducto formado por la reacci&oacute;n de la amina exocyclic de dGuo con el acetaldeh&iacute;do de metabolito del etanol. Porque el etanol es un carcin&oacute;geno humano, se evaluaron las consecuencias biol&oacute;gicas de la replicaci&oacute;n de plantilla N 2-ethyldGuo, en comparaci&oacute;n con los estudiados aducto O 6-ethyldeoxyguanosine (O(6)-ethyldGuo). Solo qu&iacute;micamente sintetizados N 2-ethyldGuo o O 6-ethyldGuo aductos colocaron sitio espec&iacute;ficamente en el gen supresor de tRNA de la mutaci&oacute;n informes shuttle pl&aacute;smido pLSX. N 2-EthyldGuo y O 6-ethyldGuo fueron m&iacute;nimamente mut&aacute;geno en pLSX double-stranded replicada en c&eacute;lulas humanas de 293; sin embargo, la colocaci&oacute;n de deoxyuridines en la cadena complementaria en 5&#39;-3&#39;-posiciones que flanqueaban el aducto resultaron en mejoras de 5 - y 22 doblez de la N (2) - ethyldGuo - y O (6) - ethyldGuo - inducida por fracciones mutantes, respectivamente. La fracci&oacute;n mutante del aumento de la N (2) - ethyldGuo - inducida doblez en pl&aacute;smidos que contienen desoxiuridina fue similar despu&eacute;s de la replicaci&oacute;n en c&eacute;lulas 293T, una variante deficiente reparaci&oacute;n de desajuste de 293 c&eacute;lulas, que indica que la reparaci&oacute;n desajuste postreplication tiene poco papel en la modulaci&oacute;n de mutag&eacute;nesis de N (2) - ethyldGuo - mediada. El espectro de la mutaci&oacute;n generado por N 2-ethyldGuo consisti&oacute; principalmente en eliminaciones de base &uacute;nica y aducci&oacute;n transversions orientada por sitio, en contraste con la producci&oacute;n exclusiva de aducci&oacute;n transiciones sitio dirigidos por O 6-ethyldGuo. La producci&oacute;n de pl&aacute;smidos de progenie despu&eacute;s de replicaci&oacute;n en 293 c&eacute;lulas se redujo por la presencia de N 2-ethyldGuo en pl&aacute;smidos parentales con o sin desoxiuridina 39 o 19%, respectivamente. Tomados en conjunto, estos datos indican que N 2-ethyldGuo en ADN ejerce su actividad biol&oacute;gica principal mediante el bloqueo de translesion la s&iacute;ntesis de ADN en las c&eacute;lulas humanas, dando por resultado o falta de replicaci&oacute;n o frameshift mutaciones de la canceladura.

Aductores de la replicaci&oacute;n del ADN de N2-ethyldeoxyguanosine en la l&iacute;nea celular de ri&ntilde;&oacute;n embrionario humano 293.

&#x4E3A;&#x4E86;&#x6253;&#x51FB;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x6211;&#x4EEC;&#x6240;&#x9762;&#x4E34;&#x7684;&#x4E0D;&#x65AD;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x6C60;&#xFF0C;B &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4F18;&#x5316;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x9996;&#x5148;&#x968F;&#x673A;&#x751F;&#x6210;&#x7684; V (D) J &#x91CD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#xFF0C;&#x9047;&#x5230;&#x6297;&#x539F;&#x540E;, &#x6297;&#x4F53;&#x5FAE;&#x8C03;&#x8D85;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D8;&#x5F02;&#x548C;&#x7C7B;&#x4EA4;&#x6362;&#x673A;&#x91CD;&#x7EC4;--&#x4E24;&#x8005;&#x90FD;&#x7531;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80DE;&#x82F7;&#x8131;&#x6C28;&#x9176; &#xFF08;&#x63F4;&#x52A9;&#xFF09;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x90FD;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x548C;&#x70B8;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5DF2;&#x88AB;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E3A;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6781;&#x597D;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4E86;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x8BF1;&#x53D8;&#x53CD;&#x5E94;&#x6D41;&#x5411;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FD9;&#x5E26;&#x6709;&#x76F8;&#x5E94;&#x98CE;&#x9669;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8BB8;&#x591A;&#x60AC;&#x800C;&#x672A;&#x51B3;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x5E94;&#x4ED8;&#x540C;&#x65F6;&#x53D1;&#x5C55;&#x63F4;&#x52A9;&#x884C;&#x52A8;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5B57;&#x6BB5;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x5C06;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x7531;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x53D1;&#x73B0;&#x63F4;&#x52A9;&#x53EF;&#x80FD;&#x8131;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x3002;

&#x63F4;&#x52A9;&#xFF1A; &#x8C1C;&#x5305;&#x88F9;&#x5728;&#x795E;&#x79D8;&#x4E4B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8C1C;&#x3002;

To combat the ever-changing pool of pathogens we face, B cells generate highly optimized antibodies in two distinct steps. A large variety of antibodies are first generated randomly by V(D)J recombination, and then, upon encountering an antigen, antibodies are fine-tuned by somatic hypermutation and class switch recombination--both of which are initiated by the same protein, activation-induced cytidine deaminase (AID). All three processes are highly mutagenic, and mistargeting of each of these has been shown to contribute to tumorigenesis. We study these processes because they provide an excellent model to understand how highly mutagenic reactions are channeled into productive use by cells and the consequent risk this carries. In this review, we will discuss many of the outstanding questions in the field that we grapple with while developing a consistent model for AID action. We will also discuss the complexity added to these models by the recent finding that AID might be part of a demethylase complex.

AID: a riddle wrapped in a mystery inside an enigma.

Pour lutter contre la piscine en constante &#xE9;volution des agents pathog&#xE8;nes nous sommes confront&#xE9;s, les cellules B de g&#xE9;n&#xE9;rer des anticorps hautement optimis&#xE9;s en deux &#xE9;tapes distinctes. Une grande vari&#xE9;t&#xE9; d&#x26;#39;anticorps sont d&#x26;#39;abord g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; de fa&#xE7;on al&#xE9;atoire par V (D) J, puis, lors de la rencontre d&#x26;#39;un antig&#xE8;ne, les anticorps sont affin&#xE9;s par hypermutation somatique et la recombinaison de commutation de classe - qui sont tous deux initi&#xE9; par la prot&#xE9;ine, l&#x26;#39;activation m&#xEA;me induite par la cytidine d&#xE9;saminase (AID). Tous les trois processus sont tr&#xE8;s mutag&#xE8;ne, et mauvais ciblage de chacun de ces derniers a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; &#xE0; contribuer &#xE0; la tumorigen&#xE8;se. Nous &#xE9;tudions ces processus, car ils constituent un excellent mod&#xE8;le pour comprendre &#xE0; quel point les r&#xE9;actions mutag&#xE8;nes sont orient&#xE9;s vers un usage productif par les cellules et par cons&#xE9;quent le risque de cette porte. Dans cette revue, nous allons discuter de nombreuses questions en suspens dans le domaine que nous sommes aux prises avec tout en d&#xE9;veloppant un mod&#xE8;le coh&#xE9;rent pour l&#x26;#39;action AID. Nous discuterons &#xE9;galement de la complexit&#xE9; ajout&#xE9;e &#xE0; ces mod&#xE8;les par la d&#xE9;couverte r&#xE9;cente que l&#x26;#39;AID pourrait faire partie d&#x26;#39;un complexe d&#xE9;m&#xE9;thylase.

L&#x26;#39;IAD: une &#xE9;nigme envelopp&#xE9;e dans un myst&#xE8;re int&#xE9;rieur d&#x26;#39;une &#xE9;nigme

Um den st&auml;ndig wechselnden Pool von Krankheitserregern zu bek&auml;mpfen, denen wir gegen&uuml;berstehen, generieren die B-Zellen hochoptimierte Antik&ouml;rper in zwei getrennten Schritten. Eine Vielzahl von Antik&ouml;rpern werden erst nach dem Zufallsprinzip generiert, durch V (D) J Rekombination, und klicken Sie dann auf die Begegnung mit einem Antigen, Antik&ouml;rper sind verfeinert durch somatische Hypermutation und Klasse Switch Rekombination--beide durch die gleiche Protein, induziert durch Aktivierung Cytidin-Deaminase (AID) initiiert werden. Alle drei Prozesse sind hochgradig Mutagene und mistargeting von jeder dieser nachweislich zur Tumorentstehung beitragen. Wir untersuchen diese Prozesse, da sie ein hervorragendes Modell bieten zu verstehen, wie hochgradig Mutagene Reaktionen sind b&uuml;ndelte in produktive Nutzung von Zellen und die Gefahr, die dies aus&uuml;bt. In diesem Bericht besprechen wir viele der noch offenen Fragen im Bereich, die wir bei der Entwicklung eines konsistenten Modells zum AID-Aktion mit zu k&auml;mpfen. Wir besprechen auch die Komplexit&auml;t, die durch die j&uuml;ngsten Feststellung, dass Beihilfen m&ouml;glicherweise Teil einer komplexen Demethylase ist zu diesen Modellen hinzugef&uuml;gt.

Hilfe: ein R&auml;tsel, verpackt in ein R&auml;tsel in einem R&auml;tsel.

Per combattere la piscina mai-cambianti di patogeni che abbiamo di fronte, le cellule B generano anticorpi altamente ottimizzati in due fasi distinte. Una grande variet&agrave; di anticorpi prima vengono generati in modo casuale tramite la ricombinazione di V (D) J, e poi, su incontrando un antigene, anticorpi sono perfezionati da ipermutazione somatica e ricombinazione switch di classe - entrambi i quali sono iniziati dalla proteina stessa, deaminasi attivazione indotta citidina (aiuto). I tre processi sono altamente mutageni e mistargeting di ciascuno di questi ha dimostrato di contribuire alla tumorigenesi. Lo studio di questi processi perch&eacute; forniscono un eccellente modello per capire come altamente mutageni reazioni sono incanalata in uso produttivo di celle e il conseguente rischio che questo comporta. In questa recensione, si discuter&agrave; di molte delle questioni in sospeso nel campo che siamo alle prese con mentre lo sviluppo di un modello coerente per l&#39;azione di aiuto. Si discuter&agrave; anche la complessit&agrave; aggiunta a questi modelli dal recente ritrovamento che aiuti potrebbero essere parte di un complesso demetilasi.

AIUTO: un indovinello avvolto nel mistero dentro un enigma.

&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x304C;&#x76F4;&#x9762;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x523B;&#x3005;&#x3068;&#x5909;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x591A;&#x7A2E;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306E;V&#xFF08;D&#xFF09;J&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306B;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x906D;&#x9047;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x8D85;&#x5909;&#x7570;&#x53CA;&#x3073;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5FAE;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; - &#x540C;&#x3058;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x30B7;&#x30C1;&#x30B8;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;AID&#xFF09;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;mistargeting&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x884C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x3067;&#x751F;&#x7523;&#x7684;&#x306A;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7DCF;&#x8AAC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;AID&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x305F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x3068;&#x683C;&#x95D8;&#x3057;&#x305F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3067;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x8CEA;&#x554F;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;AID&#x304C;&#x30C7;&#x30E1;&#x30C1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

AID&#xFF1A;&#x30A8;&#x30CB;&#x30B0;&#x30DE;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x8B0E;&#x306B;&#x5305;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x8B0E;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC9C1;&#xBA74; &#xD558;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC758; &#xC801; &#xBCC0;&#xD654; &#xD480; &#xC804;&#xD22C;, B &#xC138;&#xD3EC; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB294; &#xBA3C;&#xC800; V (D) J &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xC784;&#xC758;&#xB85C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB418;&#xBA70; &#xB2E4;&#xC74C;, &#xC2DC; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xD56D; &#xC6D0;, &#xD56D; &#xCCB4; &#xC2E0;&#xCCB4;&#xC801;&#xC778; hypermutation &#xBC0F; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;-&#xB458; &#xB2E4; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; cytidine deaminase (&#xC6D0;&#xC870;)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC;&#xC791; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBBF8;&#xC138;&#xB294;. &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB450; &#xB9E4;&#xC6B0; mutagenic &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; &#xC774;&#xB4E4; &#xAC01;&#xAC01;&#xC758; mistargeting tumorigenesis&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xB9E4;&#xC6B0; mutagenic &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; &#xC140; &#xBC0F; &#xC218;&#xD589; &#xACB0;&#xACFC; &#xC704;&#xD5D8; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC801;&#xC778; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE21;&#xC5D0; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC5F0;&#xAD6C;. &#xC774; &#xB9AC;&#xBDF0; &#xB9CE;&#xC740; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC6D0;&#xC870; &#xD589;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC528;&#xB984; &#xD544;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xB6F0;&#xC5B4;&#xB09C; &#xC9C8;&#xBB38; &#xD558;&#xACA0;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC744; &#xD55C; &#xC6D0;&#xC870; demethylase &#xBCF5;&#xD569;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xAC00; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558;&#xACA0;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBCF4;&#xC870;: &#xC218;&#xC218;&#xAED8;&#xB07C; &#xC218;&#xC218;&#xAED8;&#xB07C; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBBF8;&#xC2A4;&#xD130;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC2F8;&#xC5EC;.

Para combatir la piscina siempre cambiante de los agentes pat&#xF3;genos que nos enfrentamos, las c&#xE9;lulas B generan anticuerpos altamente optimizados en dos pasos distintos. Una gran variedad de anticuerpos son generados aleatoriamente primero por V (D) J recombinaci&#xF3;n y, a continuaci&#xF3;n, al encontrar un ant&#xED;geno, los anticuerpos son ajustadas por hipermutaci&#xF3;n som&#xE1;tica y la recombinaci&#xF3;n cambio de clase - ambos de los cuales son iniciados por la misma prote&#xED;na de activaci&#xF3;n, citidina deaminasa inducida (AID). Los tres procesos son altamente mutag&#xE9;nico, y mala focalizaci&#xF3;n de cada una de ellas ha sido demostrado para contribuir a la tumorig&#xE9;nesis. Estudiamos estos procesos, ya que proporcionan un excelente modelo para entender c&#xF3;mo las reacciones altamente mutag&#xE9;nicos son canalizados hacia el uso productivo de las c&#xE9;lulas y el consiguiente riesgo que ello implica. En esta revisi&#xF3;n, vamos a discutir muchas de las cuestiones pendientes en el campo que nos enfrentamos con el mismo tiempo el desarrollo de un modelo coherente de acci&#xF3;n de ayudas estatales. Tambi&#xE9;n vamos a discutir la complejidad a&#xF1;adida de estos modelos por el reciente descubrimiento de que la ayuda podr&#xED;a ser parte de un complejo desmetilasa.

Article	Year
Mutagenesis by exocyclic alkylamino purine adducts in Escherichia coli. Mutation research\| PubMed ID: 16488449	2006
Replication of N2-ethyldeoxyguanosine DNA adducts in the human embryonic kidney cell line 293. Chemical research in toxicology\| PubMed ID: 16841965	2006
AID: a riddle wrapped in a mystery inside an enigma. Immunologic research\| PubMed ID: 21128007	2011

Dana C. Upton

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