in-vivo-electroporation-of-morpholinos-into-the-adult-zebrafish-retina

<em>In vivo</em> Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

University of Notre Dame 

Rx &#x7C7B;&#x4F3C;&#x914D;&#x5BF9;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x76D2;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x773C;&#x775B;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7269;&#x79CD;&#x5305;&#x62EC;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x3001; &#x9F20;&#x6807;&#x3001; &#x9E21;&#x3001; &#x6B21;&#x3001; &#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x548C;&#x4EBA;&#x6743;&#x5177;&#x6709;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x524D;&#x795E;&#x7ECF;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x540E;&#x6765;&#x5728;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x548C;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x8179;&#x4FA7;&#xFF0C;&#x6700;&#x521D;&#x8868;&#x793A; Rx&#x3002;&#x975E;&#x6B63;&#x5E38;&#x8C03;&#x8282;&#x6216; Rx &#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E25;&#x91CD;&#x5F02;&#x5E38;&#x773C;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;Rx &#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x3001; &#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; overproliferation&#x3002;Rx &#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x7684;&#x6D88;&#x9664;&#x5BFC;&#x81F4;&#x773C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x3002;Rx &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x9F20;&#x6807;&#x7A81;&#x53D8;&#x5148;&#x89C1;&#x4E4B;&#x660E; &#xFF08;ey1&#xFF09;&#x3001; &#x6B21;&#x6E29;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x7A81;&#x53D8;&#x5148;&#x89C1;&#x4E4B;&#x660E; (el) &#x548C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7A81;&#x53D8; chokh &#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x5BF9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6765;&#x8BF4;&#xFF0C;Rx &#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x773C;&#x7403;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; Rx &#x57FA;&#x56E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x773C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x80FD;&#x8F7B;&#x677E;&#x5730;&#x534F;&#x8C03;&#x4E0E;&#x5B57;&#x6BB5;&#x7684;&#x6700;&#x53D7;&#x6B22;&#x8FCE;&#x7684;&#x6559;&#x6761;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x773C;&#x775B;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x89E3;&#x91CA;&#x3002;

&#x7531; Rx &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x773C;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x89C4;&#x5F8B;&#x3002;

The paired-like homeobox-containing gene Rx has a critical role in the eye development of several vertebrate species including Xenopus, mouse, chicken, medaka, zebrafish and human. Rx is initially expressed in the anterior neural region of developing embryos, and later in the retina and ventral hypothalamus. Abnormal regulation or function of Rx results in severe abnormalities of eye formation. Overexpression of Rx in Xenopus and zebrafish embryos leads to overproliferation of retinal cells. A targeted elimination of Rx in mice results in a lack of eye formation. Mutations in Rx genes are the cause of the mouse mutation eyeless (ey1), the medaka temperature sensitive mutation eyeless (el) and the zebrafish mutation chokh. In humans, mutations in Rx lead to anophthalmia. All of these studies indicate that Rx genes are key factors in vertebrate eye formation. Because these results cannot be easily reconciled with the most popular dogmas of the field, we offer our interpretation of eye development and evolution.

Regulation of vertebrate eye development by Rx genes.

Le type jumel&eacute; bo&icirc;te hom&eacute;otique g&egrave;ne Rx a un r&ocirc;le essentiel dans le d&eacute;veloppement de l&#39;oeil de plusieurs esp&egrave;ces de vert&eacute;br&eacute;s dont Xenopus, souris, poulet, medaka, poisson z&egrave;bre et homme. RX est exprim&eacute;e au d&eacute;part dans la r&eacute;gion ant&eacute;rieure neurale des embryons en d&eacute;veloppement et plus tard dans la r&eacute;tine et l&#39;hypothalamus ventral. R&eacute;gulation anormale ou fonction de Rx entra&icirc;ne des anomalies graves des yeux. La surexpression de Rx chez les embryons de Xenopus et poisson-z&egrave;bre conduit &agrave; l&#39;overproliferation des cellules r&eacute;tiniennes. Une &eacute;limination cibl&eacute;e de Rx chez la souris se traduit par un manque de formation de l&#39;oeil. Des mutations dans les g&egrave;nes Rx sont la cause de la mutation de souris eyeless (ey1), le m&eacute;daka temp&eacute;rature sensible mutation eyeless (el) et le poisson-z&egrave;bre mutation chokh. Chez les humains, mutations dans Rx entra&icirc;nent anophtalmie. Toutes ces &eacute;tudes indiquent que les g&egrave;nes Rx sont des facteurs cl&eacute;s dans les yeux des vert&eacute;br&eacute;s. Parce que ces r&eacute;sultats ne peuvent pas &ecirc;tre facilement r&eacute;concili&eacute;s avec les dogmes plus populaires du champ, nous offrons notre interpr&eacute;tation du d&eacute;veloppement de le &oelig;il et l&#39;&eacute;volution.

R&eacute;gulation du d&eacute;veloppement des vert&eacute;br&eacute;s oeil de g&egrave;nes Rx.

Verordnung des Wirbeltierauge Entwicklung von Rx-Gene.

Accoppiato-come contenenti homeobox gene Rx ha un ruolo fondamentale nello sviluppo degli occhi di diverse specie di vertebrati tra cui Xenopus, mouse, pollo, medaka, zebrafish e umani. RX &egrave; espressa inizialmente nella regione neurale anteriore di sviluppo di embrioni e pi&ugrave; tardi nella retina e ventrale dell&#39;ipotalamo. Regolamento anormale o funzione di Rx provoca gravi anomalie di formazione degli occhi. Sovraespressione di Rx in embrioni di Xenopus e zebrafish conduce al overproliferation delle cellule della retina. Un&#39;eliminazione mirata di Rx in topi si traduce in una mancanza di formazione degli occhi. Mutazioni nei geni Rx sono la causa della mutazione del mouse eyeless (ey1), medaka temperatura sensibile mutazione eyeless (el) e il chokh di mutazione di zebrafish. Nell&#39;uomo, mutazioni di Rx causano anoftalmia. Tutti questi studi indicano che i geni Rx sono fattori chiave nella formazione degli occhi vertebrati. Perch&eacute; questi risultati non possono essere facilmente riconciliati con i dogmi pi&ugrave; popolari del campo, offriamo la nostra interpretazione dell&#39;occhio sviluppo ed evoluzione.

Regolamento di sviluppo vertebrato occhio da geni Rx.

&#x30DA;&#x30A2;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA; &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; Rx &#x91CD;&#x5927;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;&#x9D8F;&#x8089;&#x3001;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x6570;&#x7A2E;&#x306E;&#x773C;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x304C;&#x3002;Rx &#x306F;&#x5F53;&#x521D;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x306E;&#x524D;&#x65B9;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x5F8C;&#x3067;&#x7DB2;&#x819C;&#x3068;&#x8179;&#x5074;&#x8996;&#x5E8A;&#x4E0B;&#x90E8;&#x306B;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5236;&#x5FA1;&#x7570;&#x5E38;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x95A2;&#x6570; Rx &#x306E;&#x76EE;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Rx &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3068;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7DB2;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; overproliferation &#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Rx &#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7D5E;&#x3063;&#x305F;&#x9664;&#x53BB;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x76EE;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x306F;&#x3002;Rx &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x7DE8;&#x307F;&#x91DD; &#xFF08;ey1&#xFF09;&#x3001;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x5909;&#x7570;&#x7DE8;&#x307F;&#x91DD; &#xFF08;el&#xFF09;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5909;&#x7570; chokh &#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x7570; Rx &#x306E;&#x7121;&#x773C;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306F;&#x3001;Rx &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x4EBA;&#x6C17;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x6559;&#x7FA9;&#x3068;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x7167;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x76EE;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x3068;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x89E3;&#x91C8;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Rx &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x3002;

&#xC9DD; &#xAC19;&#xC740; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; homeobox &#xC720;&#xC804;&#xC790; Rx Xenopus, &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, &#xCE58;&#xD0A8;, &#xC2A4;, zebrafish &#xBC0F; &#xC778;&#xAC04;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC885;&#xC758; &#xB208; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. Rx&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xACFC; &#xBCF5; &#xBD80; &#xC2DC;&#xC0C1; &#xD558; &#xBD80;&#xC758; &#xB4B7;&#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xADDC;&#xC81C; &#xB098; Rx &#xAE30;&#xB2A5; &#xB208; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Xenopus &#xBC0F; zebrafish &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; Rx&#xC758; overexpression overproliferation &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB9AC;&#xB4DC;. &#xC950;&#xC5D0; Rx&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC81C;&#xAC70; &#xB208; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rx &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB208;&#xC774; (ey1), &#xACE0; &#xC2A4; &#xC628;&#xB3C4; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB208;&#xC774; (&#xC5D8;) zebrafish &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; chokh&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294;, Rx&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; anophthalmia &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; Rx &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xB208; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD544;&#xB4DC;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC778;&#xAE30; &#xC788;&#xB294; &#xAD50;&#xB9AC;&#xC640; &#xC27D;&#xAC8C; &#xD654;&#xD574; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB208; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xBC1C;&#xC804;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD574;&#xC11D; &#xC81C;&#xACF5;.

Rx &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC99;&#xCD94; &#xB208; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El emparejado-como que contienen homeobox gen Rx tiene un papel fundamental en el desarrollo del ojo de varias especies de vertebrados, incluyendo Xenopus, rat&oacute;n, pollo, medaka, pez cebra y humanos. RX se expresa inicialmente en la regi&oacute;n anterior de nerviosas de embriones en desarrollo y m&aacute;s tarde en la retina y el hipot&aacute;lamo ventral. Regulaci&oacute;n anormal o funci&oacute;n de Rx produce anormalidades severas de la formaci&oacute;n del ojo. Sobreexpresi&oacute;n de Rx en embriones de Xenopus y pez cebra conduce a la expresi&oacute;n de las c&eacute;lulas retinales. Una eliminaci&oacute;n dirigida de Rx en ratones se traduce en una falta de formaci&oacute;n del ojo. Mutaciones en genes de Rx son la causa de la mutaci&oacute;n de rat&oacute;n ciega (ey1), medaka temperatura sensible mutaci&oacute;n ciega (el) y el chokh de la mutaci&oacute;n de pez cebra. En los seres humanos, las mutaciones en Rx llevan a anophthalmia. Todos estos estudios indican que los genes de Rx son factores clave en la formaci&oacute;n del ojo de vertebrados. Debido a estos resultados no pueden ser f&aacute;ciles de conciliar con los dogmas m&aacute;s populares del campo, ofrecemos nuestra interpretaci&oacute;n del desarrollo del ojo y de la evoluci&oacute;n.

Regulaci&oacute;n del desarrollo de vertebrados ojo por genes de Rx.

RX ist ein Homeobox-haltigen gen, das f&uuml;r die vertebrate Augenentwicklung entscheidend ist. Seine Dom&auml;ne Ausdruck beschreibt einen Bereich von Zellen, aus denen der Netzhaut und der ventralen Hypothalamus zu entwickeln. Die 5&#39; upstream regulatorische Sequenzen der Reisk&auml;rpfling Fische Rx-gen sind funktional Verlauf der Evolution zu einem Grad konserviert, dass sie Genexpression in Rx-Ausdr&uuml;cken Bereich von Zellen in M&auml;usen zu lenken. Verwenden diese Sequenzen, machten wir eine Cre-Linie, die Inaktivierung der Genexpression in der entwickelnden Netzhaut verwendet werden kann.

RX-Cre, ein Werkzeug zur Inaktivierung der Genexpression in der Netzhaut entwickeln.

RX &egrave; un contenenti homeobox gene che &egrave; fondamentale per lo sviluppo degli occhi vertebrati. Il dominio di espressione delinea un campo di cellule da cui sviluppare la retina e l&#39;ipotalamo ventrale. I 5&#39; a Monte sequenze regolatrici dei pesci medaka gene Rx sono funzionalmente conservati durante l&#39;evoluzione ad un grado che sono diretta espressione genica nel campo Rx-esprimere delle cellule nei topi. Utilizzando queste sequenze, abbiamo realizzato una linea di Cre che pu&ograve; essere utilizzata per l&#39;inattivazione del gene expression in retina in via di sviluppo.

RX-Cre, uno strumento per l&#39;inattivazione del gene expression in retina in via di sviluppo.

Rx is a homeobox-containing gene that is critical for vertebrate eye development. Its expression domain delineates a field of cells from which the retina and the ventral hypothalamus develop. The 5' upstream regulatory sequences of the medaka fish Rx gene are functionally conserved during evolution to a degree that they direct gene expression into the Rx-expressing field of cells in mice. Using these sequences, we made a Cre line that can be used for inactivation of gene expression in the developing retina.

Rx-Cre, a tool for inactivation of gene expression in the developing retina.

RX est un g&egrave;ne hom&eacute;otique contenant qui est critique pour le d&eacute;veloppement de le &oelig;il de vert&eacute;br&eacute;s. Son domaine d&#39;expression d&eacute;limite un champ de cellules dont la r&eacute;tine et l&#39;hypothalamus ventral d&eacute;veloppent. Les 5&#39; s&eacute;quences r&eacute;gulatrices en amont du poisson m&eacute;daka g&egrave;ne Rx sont fonctionnellement conserv&eacute;s au cours de l&#39;&eacute;volution &agrave; un degr&eacute; que qu&#39;ils dirigent l&#39;expression des g&egrave;nes dans le champ Rx exprimant des cellules de souris. &Agrave; l&#39;aide de ces s&eacute;quences, nous avons fait une ligne de Cre qui peut &ecirc;tre utilis&eacute;e pour l&#39;inactivation de l&#39;expression g&eacute;nique dans la r&eacute;tine en voie de d&eacute;veloppement.

RX-Cre, un outil pour l&#39;inactivation de l&#39;expression g&eacute;nique dans la r&eacute;tine en voie de d&eacute;veloppement.

Rx &#x662F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x773C;&#x53D1;&#x5C55;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x76D2;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x5176;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x57DF;&#x5206;&#x754C;&#x7EBF;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x548C;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x8179;&#x4FA7;&#x4ECE;&#x4E2D;&#x53D1;&#x5C55;&#x9886;&#x57DF;&#x3002;5&#39; &#x4E0A;&#x6E38;&#x8C03;&#x63A7;&#x5E8F;&#x5217;&#x6B21;&#x9C7C; Rx &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x662F;&#x5728;&#x8FDB;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x5B88;&#x6052;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x76F4;&#x63A5;&#x5230; Rx &#x8868;&#x793A;&#x5B57;&#x6BB5;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x53D6;&#x5F97;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x6740;&#x706D;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; Cre &#x4E00;&#x884C;&#x3002;

Rx-Cre&#xFF0C;&#x706D;&#x6D3B;&#x5728;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

Rx &#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA; &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x7DB2;&#x819C;&#x304B;&#x3089;&#x8179;&#x5074;&#x8996;&#x5E8A;&#x4E0B;&#x90E8;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3092;&#x533A;&#x5207;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;5&#39; &#x4E0A;&#x6D41;&#x898F;&#x5236;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; &#x30E1;&#x30C0;&#x30AB; Rx &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5B66;&#x4F4D;&#x3078;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306B; Rx &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B; Cre &#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4F5C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

Rx-Cre&#x3001;&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3002;

Rx &#xCC99;&#xCD94; &#xB208; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; homeobox &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DD; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBC0F; &#xBCF5; &#xBD80; &#xC2DC;&#xC0C1; &#xD558; &#xBD80; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBD84;&#xC57C;&#xB97C; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 5&#39; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC2A4; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; Rx &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC950;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC140;&#xC758; Rx &#xD45C;&#xD604; &#xD544;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; &#xD558;&#xB294; &#xC815;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC9C4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBCF4;&#xC874; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; Cre &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E0; &#xB2E4;&#xC74C;&#xC774; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;.

Rx-Cre, &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;.

RX es un gen homeobox-que contiene que es fundamental para el desarrollo del ojo de vertebrados. Su dominio de la expresi&oacute;n delinea un campo de las c&eacute;lulas de los cuales convierten la retina y el hipot&aacute;lamo ventral. Las 5&#39; upstream secuencias reguladoras del pez medaka gen Rx funcionalmente son conservadas durante la evoluci&oacute;n a un grado que dirigen expresi&oacute;n g&eacute;nica en el campo de Rx-expresi&oacute;n de las c&eacute;lulas en ratones. Usando estas secuencias, hicimos una l&iacute;nea de Cre que puede ser utilizada para la inactivaci&oacute;n de la expresi&oacute;n g&eacute;nica en la retina en desarrollo.

RX-Cre, una herramienta para la inactivaci&oacute;n de la expresi&oacute;n g&eacute;nica en la retina en desarrollo.

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30F3; 3 (NEUROG3) &#x306F;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x81B5;&#x81D3;&#x3084;&#x8178;&#x306E;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;NEUROG3 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; (NEUROG3) &#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E00;&#x822C;&#x5316;&#x5438;&#x53CE;&#x4E0D;&#x826F;&#x3068; enteroendocrine &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x52A3;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30F3; 3&#x3002;

Neurogenin-3 (NEUROG3)&#xC740; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xCDCC; &#xC7A5;&#xACFC; &#xC18C;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD544;&#xC694;. NEUROG3 &#xC720;&#xC804;&#xC790; (NEUROG3) &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC77C;&#xBC18;&#xD654; &#xB41C; &#xD761;&#xC218; &#xC7A5;&#xC560; &#xBC0F; enteroendocrine &#xC140;&#xC758; &#xC18C;&#xC218;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC0C8;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC;&#xB41C; &#xB41C; &#xC0C1; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC5F4;&#xC131; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC120; &#xCC9C; &#xC131; malabsorptive &#xC124;&#xC0AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; neurogenin 3.

Neurogenin-3 (NEUROG3) se expresa en c&eacute;lulas progenitoras endocrinos y se requiere para el desarrollo de c&eacute;lulas endocrinas en el p&aacute;ncreas y el intestino. El gen NEUROG3 (NEUROG3) por lo tanto es un candidato para la causa de un reci&eacute;n descubierto trastorno autos&oacute;mico recesivo caracterizado por malabsorci&oacute;n generalizada y una falta de c&eacute;lulas enteroendocrinas.

Neurogenin-3 mutante en diarrea malabsorci&oacute;n cong&eacute;nita.

&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7D20; 3 &#xFF08;NEUROG3&#xFF09; &#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x662F;&#x5728;&#x80F0;&#x817A;&#x548C;&#x80A0;&#x9053;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;NEUROG3 &#x57FA;&#x56E0; (NEUROG3) &#x56E0;&#x6B64;&#x662F;&#x5019;&#x9009;&#x65B0;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x663E;&#x6027;&#x9057;&#x4F20;&#x9690;&#x6027;&#x969C;&#x788D;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x5E7F;&#x4E49;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x4E0D;&#x826F;&#x548C;&#x7BA1;&#x7684;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A00;&#x5C11;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;

&#x5148;&#x5929;&#x6027; malabsorptive &#x8179;&#x6CFB;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7D20; 3&#x3002;

Neurogenin-3 (NEUROG3) is expressed in endocrine progenitor cells and is required for endocrine-cell development in the pancreas and intestine. The NEUROG3 gene (NEUROG3) is therefore a candidate for the cause of a newly discovered autosomal recessive disorder characterized by generalized malabsorption and a paucity of enteroendocrine cells.

Mutant neurogenin-3 in congenital malabsorptive diarrhea.

Neurogenin-3 (NEUROG3) est exprim&eacute; dans les cellules prog&eacute;nitrices endocrines et est n&eacute;cessaire pour le d&eacute;veloppement des cellules endocrines dans le pancr&eacute;as et l&#39;intestin. Le g&egrave;ne NEUROG3 (NEUROG3) est donc un candidat pour la cause d&#39;un nouvellement d&eacute;couverte maladie autosomique r&eacute;cessive caract&eacute;ris&eacute;e par une malabsorption g&eacute;n&eacute;ralis&eacute;e et une p&eacute;nurie de cellules ent&eacute;roendocrines.

Neurogenin-3 mutant dans la diarrh&eacute;e de malabsorption cong&eacute;nitale.

Neurogenin-3 (NEUROG3) wird in endokrine Vorl&auml;uferzellen ausgedr&uuml;ckt und ist erforderlich f&uuml;r die Entwicklung von endokrinen Zellen in der Bauchspeicheldr&uuml;se und des Darms. Das NEUROG3-gen (NEUROG3) ist daher ein Kandidat f&uuml;r die Ursache f&uuml;r einen neu entdeckten autosomal-rezessiv generalisierte Malabsorption und ein Mangel an enteroendokrinen Zellen charakterisiert.

Mutant Neurogenin-3 in kongenitale malabsorptive Durchfall.

Neurogenina-3 (NEUROG3) &egrave; espresso in cellule progenitrici endocrino ed &egrave; necessaria per lo sviluppo delle cellule endocrine del pancreas e intestino. Il gene NEUROG3 (NEUROG3) &egrave; quindi un candidato per la causa di una recente scoperta malattia autosomica recessiva caratterizzata da malassorbimento generalizzato e una scarsit&agrave; intestinale delle cellule.

Mutante neurogenina-3 in diarrea Malassorbimento congenito.

&#x5149;&#x635F;&#x574F;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x548C;&#x5931;&#x8E2A;&#x7684;&#x6746;&#x548C;&#x9525;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x968F;&#x540E;&#x518D;&#x751F;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x518D;&#x751F;&#x542F;&#x52A8;&#x4E0E;&#x4EA7;&#x751F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x653E;&#x5927;&#xFF0C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230;&#x5916;&#x6838;&#x5C42; &#xFF08;&#x5728;&#x7EBF;&#xFF09;&#xFF0C;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x4E24;&#x7C7B;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3002;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86; Pax6 &#x86CB;&#x767D;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A; Pax6 &#x86CB;&#x767D;&#x3001; pax6a &#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x4E00;&#x4E2A;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684; pax6b &#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CE8;&#x5165;&#x73BB;&#x7483;&#x548C;&#x8F6C; morpholinos &#x76F8;&#x8F85;&#x76F8;&#x6210;&#x7684; pax6a &#x6216; pax6b mRNA &#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x76F8;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x3002;Pax6b &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x4F46;&#x963B;&#x6B62;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE5;&#x540E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;paralogous Pax6a &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x7A0D;&#x540E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x6700;&#x5927;&#x5316;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6570;&#x91CF;&#x3002;&#x800C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6269;&#x589E;&#x3001; &#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x9A7B;&#x5730;&#x83E9;&#x6746;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53EA;&#x53EF;&#x4EE5;&#x751F;&#x6210;&#x68D2;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x7981;&#x6BD2;&#x5C40;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x6210;&#x53CD;&#x6BD4;&#x3002;&#x8FD9;&#x8BC1;&#x5B9E; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x90FD;&#x9700;&#x91CD;&#x65B0;&#x751F;&#x6210;&#x9525;&#x548C;&#x72EC;&#x7279;&#x673A;&#x5236;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x91CD;&#x65B0;&#x751F;&#x6210;&#x6746;&#x548C;&#x9525;&#x4F53;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x4E5F;&#x4E3A; Pax6a &#x548C; Pax6b &#x5B9A;&#x4E49;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x5728;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5728;&#x6210;&#x5E74;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;

&#x9700;&#x8981;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x70B9;&#x5728; Pax6a &#x548C; Pax6b&#x3002;

The light-damaged zebrafish retina results in the death of photoreceptor cells and the subsequent regeneration of the missing rod and cone cells. Photoreceptor regeneration initiates with asymmetric MÃ¼ller glial cell division to produce neuronal progenitor cells, which amplify, migrate to the outer nuclear layer (ONL), and differentiate into both classes of photoreceptor cells. In this study, we examined the role of the Pax6 protein in regeneration. In zebrafish, there are two Pax6 proteins, one encoded by the pax6a gene and the other encoded by the pax6b gene. We intravitreally injected and electroporated morpholinos that were complementary to either the pax6a or pax6b mRNA to knockdown the translation of the corresponding protein. Loss of Pax6b expression did not affect MÃ¼ller glial cell division, but blocked the subsequent first cell division of the neuronal progenitors. In contrast, the paralogous Pax6a protein was required for later neuronal progenitor cell divisions, which maximized the number of neuronal progenitors. Without neuronal progenitor cell amplification, proliferation of resident ONL rod precursor cells, which can only regenerate rods, increased inversely proportional to the number of INL neuronal progenitor cells. This confirmed that MÃ¼ller glial-derived neuronal progenitor cells are necessary to regenerate cones and that distinct mechanisms selectively regenerate rod and cone photoreceptors. This work also defines distinct roles for Pax6a and Pax6b in regulating neuronal progenitor cell proliferation in the adult zebrafish retina and increases our understanding of the molecular pathways required for photoreceptor cell regeneration.

Pax6a and Pax6b are required at different points in neuronal progenitor cell proliferation during zebrafish photoreceptor regeneration.

Les r&#xE9;sultats &#xE0; la lumi&#xE8;re endommag&#xE9;s r&#xE9;tine de poisson z&#xE8;bre dans la mort des cellules photor&#xE9;ceptrices et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration ult&#xE9;rieure de la tige de disparus et des c&#xF4;nes. Photor&#xE9;cepteur r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration initie avec la division cellulaire asym&#xE9;trique M&#xFC;ller glial pour produire des cellules souches neuronales, qui d&#xE9;taillent, de migrer vers la couche nucl&#xE9;aire externe (ONL), et se diff&#xE9;rencient en deux cat&#xE9;gories de cellules photor&#xE9;ceptrices. Dans cette &#xE9;tude, nous avons examin&#xE9; le r&#xF4;le de la prot&#xE9;ine Pax6 dans la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. Dans le poisson-z&#xE8;bre, il ya deux Pax6 prot&#xE9;ines, l&#x26;#39;une cod&#xE9;e par le g&#xE8;ne pax6a et l&#x26;#39;autre cod&#xE9;e par le g&#xE8;ne pax6b. On injecte intravitr&#xE9;enne et &#xE9;lectroporation morpholinos qui &#xE9;taient compl&#xE9;mentaires l&#x26;#39;une de l&#x26;#39;ARNm ou pax6a pax6b &#xE0; effet de choc de la traduction de la prot&#xE9;ine correspondante. La perte d&#x26;#39;expression Pax6b n&#x26;#39;a pas affect&#xE9; la division cellule gliale de M&#xFC;ller, mais bloqu&#xE9; la division cellulaire ult&#xE9;rieure premier des prog&#xE9;niteurs neuronaux. En revanche, la prot&#xE9;ine paralogues Pax6a a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire pour plus tard neuronales divisions de cellules prog&#xE9;nitrices, qui maximise le nombre de prog&#xE9;niteurs neuronaux. Sans amplification de cellules souches neuronales, la prolif&#xE9;ration des cellules pr&#xE9;curseurs r&#xE9;sidents ONL tige, qui ne peut r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer tiges, augment&#xE9; inversement proportionnelle au nombre de cellules prog&#xE9;nitrices INL neuronales. Cela confirme que M&#xFC;ller d&#xE9;riv&#xE9;s des cellules gliales prog&#xE9;nitrices des cellules neuronales sont n&#xE9;cessaires pour r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer les c&#xF4;nes et que des m&#xE9;canismes distincts s&#xE9;lectivement r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer les photor&#xE9;cepteurs b&#xE2;tonnets et des c&#xF4;nes. Ce travail d&#xE9;finit &#xE9;galement les r&#xF4;les distincts pour Pax6a et dans la r&#xE9;gulation neuronale Pax6b la prolif&#xE9;ration des cellules prog&#xE9;nitrices dans la r&#xE9;tine du poisson z&#xE8;bre adulte et augmente notre compr&#xE9;hension des m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires n&#xE9;cessaires &#xE0; la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des cellules photor&#xE9;ceptrices.

Pax6a et Pax6b sont n&#xE9;cessaires &#xE0; diff&#xE9;rents points de la prolif&#xE9;ration des cellules prog&#xE9;nitrices neuronaux au cours du poisson z&#xE8;bre photor&#xE9;cepteur R&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration

Die Zebrab&auml;rbling Licht-Gesch&auml;digte Netzhaut f&uuml;hrt zu den Tod von Sehzellen und der nachfolgenden Regeneration der fehlenden Stab und Kegel Zellen. Photorezeptoren Regenerierung initiiert mit asymmetrischen M&uuml;ller Gliazellen Zellteilung zu neuronalen Vorl&auml;uferzellen zu produzieren, die verst&auml;rken, um die nukleare Au&szlig;enschicht (ONL) migrieren und differenzieren sich in beiden Klassen von Sehzellen. In dieser Studie wurden die Rolle der das Pax6-Protein Regeneration. Im Zebrafisch gibt es zwei Pax6-Proteine, eine der pax6a-Gen codiert und die andere die pax6b-Gen codiert. Wir Intravitreally injiziert und Electroporated Morpholinos, die komplement&auml;r zu der pax6a oder pax6b waren mRNA zu Niederschlag die &Uuml;bersetzung des entsprechenden Proteins. Verlust der Pax6b Ausdruck keinen Einfluss auf die Zellteilung der M&uuml;ller-Gliazellen, aber blockiert die nachfolgende erste Zellteilung der neuronalen Vorl&auml;uferzellen. Im Gegensatz dazu war das paralogen Pax6a Protein bei sp&auml;ter neuronalen Vorl&auml;uferzellen Zellteilungen, die die Anzahl der neuronalen Vorl&auml;uferzellen maximiert. Ohne neuronalen Vorl&auml;uferzellen Zelle Verst&auml;rkung erh&ouml;hte Proliferation von resident ONL Stab Vorl&auml;ufer-Zellen, die nur St&auml;be regenerieren k&ouml;nnen, umgekehrt proportional zur Anzahl der neuronalen Vorl&auml;uferzellen INL. Dies best&auml;tigt, dass M&uuml;ller Gliazellen abgeleitete neuronalen Vorl&auml;uferzellen Zapfen Regenerieren erforderlich sind und dass verschiedene Mechanismen selektiv Stab und Kegel Photorezeptoren regenerieren. Diese Arbeit auch definiert unterschiedliche Rollen f&uuml;r Pax6a und Pax6b bei der Regulierung der neuronalen Vorl&auml;uferzellen Zellproliferation in der Erwachsenen Zebrafisch-Netzhaut und erh&ouml;ht unser Verst&auml;ndnis der molekularen Bahnen f&uuml;r die Photorezeptoren Zellregeneration erforderlich.

Pax6a und Pax6b sind an verschiedenen Punkten in neuronalen Vorl&auml;uferzellen Zellproliferation w&auml;hrend der Zebrafisch Photorezeptor Regenerierung erforderlich.

La retina danneggiata luce zebrafish provoca la morte delle cellule fotorecettrici ed il conseguente rigenerazione delle cellule mancante rod e cono. Rigenerazione fotorecettore avvia con asimmetrica M&uuml;ller glial cell division per produrre cellule progenitrici neuronali, che amplificano, migrano verso lo strato nucleare esterno (ONL) e differenziano in entrambe le classi di cellule fotorecettrici. In questo studio, abbiamo esaminato il ruolo della proteina Pax6 nella rigenerazione. In zebrafish, ci sono due proteine Pax6, codificata dal gene pax6a uno e l&#39;altro codificata dal gene pax6b. Abbiamo iniettato intravitreally ed electroporated morpholinos che erano complementari al pax6a o pax6b mRNA per atterramento la traduzione della proteina corrispondente. Perdita di espressione Pax6b non influisce sulla divisione delle cellule gliali M&uuml;ller, ma bloccato la successiva divisione cellulare prima dei progenitori neuronali. Al contrario, la proteina Pax6a paralogous &egrave; stato richiesta per divisioni cellulari successivamente neuronali progenitrici, che massimizzato il numero di progenitori neuronali. Senza amplificazione delle cellule progenitrici neuronali, proliferazione di residente ONL rod precursore cellule, che pu&ograve; rigenerare solo canne, aumentato inversamente proporzionale al numero di cellule progenitrici neuronali INL. Ci&ograve; ha confermato che M&uuml;ller glial derivate neuronale le cellule progenitrici sono necessarie per rigenerare coni e che distinti meccanismi selettivamente rigenerano rod e cono fotorecettori. Questo lavoro inoltre definisce i ruoli distinti per Pax6a e Pax6b nella regolazione della proliferazione delle cellule progenitrici neuronali della retina di zebrafish adulto e aumenta la nostra comprensione delle vie molecolari necessari per la rigenerazione delle cellule fotorecettrici.

Pax6a e Pax6b sono richiesti in diversi punti nella proliferazione delle cellule progenitrici neuronali durante la rigenerazione del fotorecettore zebrafish.

&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6B7B;&#x3084;&#x884C;&#x65B9;&#x4E0D;&#x660E;&#x3001;&#x687F;&#x4F53;&#x3068;&#x9310;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x5149;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x518D;&#x751F;&#x306F;&#x3001;&#x5897;&#x5E45;&#x3059;&#x308B;&#x5916;&#x9846;&#x7C92;&#x5C64;&#xFF08;ONL&#xFF09;&#x306B;&#x79FB;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x306E;Pax6&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;Pax6&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;pax6a&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3068;pax6b&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4ED6;&#x306E;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x785D;&#x5B50;&#x4F53;&#x5185;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3057;&#x3001;pax6a&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x3078;pax6b&#x306E;mRNA&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306B;&#x76F8;&#x88DC;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;morpholinos&#x3092;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3002; Pax6b&#x5F0F;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3092;&#x963B;&#x6B62;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;Pax6a&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x6700;&#x5927;&#x5316;&#x5F8C;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x305B;&#x305A;&#x3001;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x68D2;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x5E38;&#x99D0;ONL&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x306F;&#x3001;INL&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x306B;&#x53CD;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3057;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x9310;&#x4F53;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x687F;&#x4F53;&#x3068;&#x9310;&#x4F53;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;Pax6a&#x3068;Pax6b&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5225;&#x500B;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x3001;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Pax6a&#x3068;Pax6b&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x611F;&#x5149;&#x4F53;&#x518D;&#x751F;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;

Zebrafish &#xBE5B; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C; &#xBC0F; &#xB204;&#xB77D; &#xB41C; &#xB9C9;&#xB300; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC99D;&#xD3ED; &#xD558; &#xACE0; &#xC678;&#xBD80; &#xD575; &#xCE35; (ONL) &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD560; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB450; &#xC885;&#xB958;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; &#xBB90;&#xB7EC; glial &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; Pax6 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xAC80;&#xC0AC;. Zebrafish, &#xB450; Pax6 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xD558;&#xB098; pax6a &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80;&#xD638;&#xD654; &#xBC0F; pax6b &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80;&#xD638;&#xD654; &#xB2E4;&#xB978; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; intravitreally &#xC8FC;&#xC0AC;&#xC640; electroporated morpholinos pax6a &#xB610;&#xB294; pax6b&#xB97C; &#xBCF4;&#xC644; &#xD588;&#xB2E4; mRNA &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xD574;&#xB2F9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC5D0;. Pax6b &#xC2DD;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xBB90;&#xB7EC; glial &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC2E0;&#xACBD; progenitors&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, paralogous Pax6a &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; progenitors &#xC218;&#xB97C; &#xCD5C;&#xB300;&#xD654; &#xB098;&#xC911; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xD3ED; &#xC5C6;&#xC774; &#xC8FC;&#xBBFC; ONL &#xB9C9;&#xB300; &#xC804;&#xC870; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD09; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC218;, &#xD655;&#xC0B0; &#xC99D;&#xAC00; INL &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218;&#xC5D0; &#xBC18;&#xBE44;&#xB840; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB90;&#xB7EC; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xAD50; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xACE0;&#xC720; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C9;&#xB300; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xB300;&#xB1CC; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488; &#xB610;&#xD55C; &#xC131;&#xC778; zebrafish &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; Pax6a &#xBC0F; pax6b&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD558; &#xACE0; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xACBD;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00;.

Pax6a&#xC640; pax6b&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC;&#xC810; zebrafish &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las da&#xF1;adas por la luz los resultados de la retina del pez cebra en la muerte de las c&#xE9;lulas fotorreceptoras y la posterior regeneraci&#xF3;n de la barra de desaparecidos y las c&#xE9;lulas del cono. Fotorreceptores de regeneraci&#xF3;n se inicia con la divisi&#xF3;n celular asim&#xE9;trica M&#xFC;ller glial para producir c&#xE9;lulas progenitoras neuronales que ampl&#xED;en, migran a la capa nuclear externa (ONL), y se diferencian en dos clases de c&#xE9;lulas fotorreceptoras. En este estudio, hemos examinado el papel de la prote&#xED;na Pax6 en la regeneraci&#xF3;n. En el pez cebra, hay dos Pax6 prote&#xED;nas, una codificada por el gen pax6a y la otra codificada por el gen pax6b. Se inyect&#xF3; por v&#xED;a intrav&#xED;trea y electroporaci&#xF3;n morfolinos que eran complementarias a cualquiera de la pax6a o ARNm pax6b a desmontables la traducci&#xF3;n de la prote&#xED;na correspondiente. P&#xE9;rdida de la expresi&#xF3;n Pax6b no afectar a la divisi&#xF3;n M&#xFC;ller c&#xE9;lulas gliales, pero bloque&#xF3; la posterior divisi&#xF3;n celular primero de los progenitores neuronales. En contraste, la prote&#xED;na paralogous pax6a se requiere para las divisiones celulares neuronales progenitoras m&#xE1;s tarde, que maximiza el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas progenitoras neuronales. Sin amplificaci&#xF3;n neuronal de c&#xE9;lulas progenitoras, la proliferaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas residentes ONL varilla precursoras, que s&#xF3;lo pueden regenerar varillas, aument&#xF3; inversamente proporcional al n&#xFA;mero de INL c&#xE9;lulas progenitoras neuronales. Esto confirm&#xF3; que M&#xFC;ller glial-derivado de las c&#xE9;lulas progenitoras neuronales son necesarios para regenerar los conos y que los mecanismos de regeneraci&#xF3;n de los fotorreceptores de forma selectiva diferentes conos y bastones. Este trabajo tambi&#xE9;n se definen los roles distintos para pax6a Pax6b y en la regulaci&#xF3;n de la proliferaci&#xF3;n neuronal de c&#xE9;lulas progenitoras de la retina del pez cebra adulto y aumenta nuestra comprensi&#xF3;n de los mecanismos moleculares necesarios para la regeneraci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas fotorreceptoras.

Pax6a y Pax6b se requieren en diferentes puntos de la proliferaci&#xF3;n neuronal de c&#xE9;lulas progenitoras Durante pez cebra fotorreceptor Regeneraci&#xF3;n

&#x635F;&#x574F;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x5C42;&#xFF0C;&#x90A3;&#x91CC;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E22;&#x5931;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x7528;&#x66FF;&#x6362;&#x4E22;&#x5931;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x901A;&#x8FC7;&#x518D;&#x751F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5DF2;&#x77E5; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x541E;&#x566C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E86;&#x5982;&#x679C; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x541E;&#x566C;&#x51CB;&#x4EA1;&#x6746;&#x7EC6;&#x80DE;&#x673A;&#x6784;&#x5149;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x3002;&#x540E;&#x7684;&#x5E38;&#x91CF;&#x5F3A;&#x5149;&#x7684; 24 h&#xFF0C;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x900F;&#x9732;&#x6838; TUNEL &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x548C; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28; TUNEL &#x4FE1;&#x53F7;&#x592A;&#x5F31;&#x90FD;&#x867D;&#x7136;&#x4E0D;&#x89C1;&#x5F97;&#x5149;&#x53D7;&#x635F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x6746;&#x7279;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8BB0;&#x8005;&#x7EBF;&#xFF0C;Tg(XlRho:EGFP)(fl1)&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E00;&#x4E9B; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x542B;&#x6709; TUNEL &#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x6B64;&#x5B50;&#x96C6; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x541E;&#x566C;&#x51CB;&#x4EA1;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x7684;&#x5149;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x541E;&#x566C;&#x81F4;&#x5149;&#x53D7;&#x635F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528; O-&#x78F7;&#x9178;-l-&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178; &#xFF08;L-SOP&#xFF09;&#xFF0C;&#x6A21;&#x4EFF;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x5934;&#x7EC4;&#x548C;&#x90E8;&#x5206;&#x963B;&#x6B62;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;L SOP &#x524D;&#x5915;&#x5F00;&#x59CB;&#x4E0D;&#x65AD;&#x6FC0;&#x70C8;&#x5149;&#x6CBB;&#x7597;&#x73BB;&#x7483;&#x4F53;&#x8154;&#x5185;&#x7684;&#x6CE8;&#x5C04;&#xFF1A; i&#xFF09; &#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x5927;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x5149;&#x81F4;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#xFF0C;ii) &#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x589E;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x6297;&#x539F;&#x9633;&#x6027; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x548C; iii) &#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x9525;&#x518D;&#x751F;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x63A7;&#x5236;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7684;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A; L SOP &#x4E5F;&#x662F;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC4;&#x4E09;&#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53; (&#x4F5C;&#x7528;) &#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E86;&#x5982;&#x679C;&#x66F4;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC4;&#x4E09;&#x4FC3;&#x6548;&#x5242;&#xFF0C;L-2-&#x6C28;&#x57FA;-4-phosphonobutyrate (L-AP4&#xFF09;&#xFF0C;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EC4;&#x4E09;&#x62EE;&#x6297;&#x5242; (RS)-&alpha;-Methylserine-O-&#x7EC4;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x78F7;&#x9178; &#xFF08;&#x529F;&#x80FD;&#xFF09; &#x6216;&#x7279;&#x5B9A;&#x3001; &#x9178; L-2-&#x6C28;&#x57FA;-3-phophonopropanoic (L AP3) &#x53D7;&#x5F71;&#x54CD; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6CA1;&#x6709;&#x66F4;&#x6539;&#x4E0E;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6BD4;&#x8F83;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x56E0;&#x7D20;&#x63ED;&#x793A;&#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0D;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;ascl1a &#x548C; stat3 &#x8868;&#x8FBE;&#x4E86; L SOP &#x6216;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x63A7;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A; L SOP &#x6270;&#x4E71; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x4E4B;&#x540E;&#x6216;&#x4E0E; ascl1a &#x548C; stat3 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x5E76;&#x884C;&#x529F;&#x80FD;&#x6CE8;&#x5165;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86;&#x7531; L-SOP&#xFF0C;&#x4E2D;&#x65AD;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5149;&#x53D7;&#x635F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;

&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;O-&#x78F7;&#x9178;-L-&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x5149;&#x635F;&#x574F;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x9525;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x518D;&#x751F;&#x3002;

The damaged zebrafish retina replaces lost neurons through a regenerative response that initiates with the asymmetric cell division of MÃ¼ller glia to produce neuronal progenitor cells that proliferate and migrate to the damaged retinal layer, where they differentiate into the lost neuronal cell types. Because MÃ¼ller glia are known to phagocytose apoptotic retinal cells during development, we tested if MÃ¼ller glia engulfed apoptotic rod cell bodies in light-damaged retinas. After 24h of constant intense light, damaged retinas revealed both a strong nuclear TUNEL signal in photoreceptors and a weak cytoplasmic TUNEL signal in MÃ¼ller glia, although MÃ¼ller glial apoptosis is not observed in the light-damaged retina. Light damage of a rod-specific transgenic reporter line, Tg(XlRho:EGFP)(fl1), resulted in some MÃ¼ller glia containing both TUNEL signal and EGFP, which indicated that this subset of MÃ¼ller glia engulfed apoptotic photoreceptor cell bodies. To determine if phagocytosis induced the MÃ¼ller glial proliferative response in the light-damaged retina, we utilized O-phospho-l-serine (L-SOP), a molecule that mimics the phosphatidylserine head group and partially blocks microglial phagocytosis of apoptotic cells. Intravitreal injection of L-SOP immediately prior to beginning constant intense light treatment: i) did not significantly reduce light-induced photoreceptor cell death, ii) significantly reduced the number of PCNA-positive MÃ¼ller glia, and iii) significantly reduced the number of cone photoreceptors in the regenerated retina relative to control retinas. Because L-SOP is also a specific group III metabotropic glutamate receptor (mGluR) agonist, we also tested if the more potent specific group III agonist, L-2-amino-4-phosphonobutyrate (L-AP4), the specific group III antagonist (RS)-Î±-Methylserine-O-phosphate (MSOP) or the specific group I antagonist, L-2-amino-3-phophonopropanoic acid (L-AP3) affected MÃ¼ller glial proliferation. We found no changes with any of these factors compared to control retinas, revealing that metabotropic glutamate receptors were not necessary in the MÃ¼ller glia proliferative response. Furthermore, ascl1a and stat3 expression were unaffected in either the L-SOP or MSOP-injected retinas relative to controls, suggesting L-SOP disrupts MÃ¼ller glia proliferation subsequent to or in parallel with ascl1a and stat3 activation. This implies that at least one signaling mechanism, in addition to the process disrupted by L-SOP, is required to activate MÃ¼ller glia proliferation in the light-damaged retina.

The inhibitor of phagocytosis, O-phospho-L-serine, suppresses MÃ¼ller glia proliferation and cone cell regeneration in the light-damaged zebrafish retina.

La r&#xE9;tine endommag&#xE9;e remplace le poisson-z&#xE8;bre neurones perdus par une r&#xE9;ponse r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rative qui initie &#xE0; la division cellulaire asym&#xE9;trique des cellules gliales de M&#xFC;ller pour produire des cellules souches neuronales qui prolif&#xE8;rent et migrent vers la couche endommag&#xE9;e de la r&#xE9;tine, o&#xF9; ils se diff&#xE9;rencient en les types de cellules neuronales perdues. Parce cellules gliales de M&#xFC;ller sont connus pour phagocyter apoptotiques des cellules r&#xE9;tiniennes au cours du d&#xE9;veloppement, nous avons test&#xE9; si gliales de M&#xFC;ller englouti corps cellulaires apoptotiques tige &#xE0; la lumi&#xE8;re endommag&#xE9;s par la r&#xE9;tine. Apr&#xE8;s 24h de lumi&#xE8;re intense constante, r&#xE9;tines endommag&#xE9;es r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; &#xE0; la fois un signal fort TUNEL nucl&#xE9;aire dans les photor&#xE9;cepteurs et un signal de faible TUNEL cytoplasmique dans gliales de M&#xFC;ller, bien que M&#xFC;ller glial apoptose n&#x26;#39;est pas observ&#xE9;e dans la r&#xE9;tine &#xE0; la lumi&#xE8;re endommag&#xE9;. Dommages l&#xE9;gers d&#x26;#39;une ligne de tige sp&#xE9;cifique journaliste transg&#xE9;nique, Tg (XlRho: EGFP) (FL1), a entra&#xEE;n&#xE9; dans certains cellules gliales de M&#xFC;ller contenant &#xE0; la fois du signal TUNEL et EGFP, qui a indiqu&#xE9; que ce sous-ensemble de cellules gliales de M&#xFC;ller englouti corps cellulaires apoptotiques photor&#xE9;cepteurs. Pour d&#xE9;terminer si la phagocytose induite de la M&#xFC;ller r&#xE9;ponse prolif&#xE9;rative gliales dans la r&#xE9;tine &#xE0; la lumi&#xE8;re endommag&#xE9;, nous avons utilis&#xE9; O-phospho-L-s&#xE9;rine (L-POS), une mol&#xE9;cule qui imite le groupe de t&#xEA;te phosphatidyls&#xE9;rine et partiellement phagocytose microgliale blocs de cellules apoptotiques. L&#x26;#39;injection intravitr&#xE9;enne de la L-POS imm&#xE9;diatement avant le d&#xE9;but du traitement intense de lumi&#xE8;re constante: i) n&#x26;#39;a pas r&#xE9;duit significativement induite par la lumi&#xE8;re mort des cellules photor&#xE9;ceptrices, ii) a r&#xE9;duit significativement le nombre de PCNA-positifs M&#xFC;ller glie, et iii) a r&#xE9;duit significativement le nombre de c&#xF4;ne photor&#xE9;cepteurs de la r&#xE9;tine r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; par rapport &#xE0; contr&#xF4;ler r&#xE9;tines. Parce que L-POS est aussi un groupe sp&#xE9;cifique du r&#xE9;cepteur m&#xE9;tabotropique du glutamate III (mGluR) agoniste, nous avons &#xE9;galement test&#xE9; si le plus puissant groupe sp&#xE9;cifique agoniste III, L-2-amino-4-phosphonobutyrate (L-AP4), le groupe antagoniste sp&#xE9;cifique III (RS)-&#x3B1;-m&#xE9;thyls&#xE9;rine-O-phosphate (DIP) ou l&#x26;#39;antagoniste de groupe sp&#xE9;cifique I, L-2-amino-3-acide phophonopropanoic (L-AP3) affect&#xE9;e M&#xFC;ller prolif&#xE9;ration gliale. Nous avons trouv&#xE9; aucun changement avec l&#x26;#39;un de ces facteurs par rapport &#xE0; contr&#xF4;ler la r&#xE9;tine, r&#xE9;v&#xE9;lant que les r&#xE9;cepteurs m&#xE9;tabotropiques du glutamate ne sont pas n&#xE9;cessaires dans la r&#xE9;ponse prolif&#xE9;rative M&#xFC;ller glie. En outre, ascl1a et d&#x26;#39;expression n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; affect&#xE9;s stat3 soit dans le L-POS ou MSOP-inject&#xE9;s r&#xE9;tines par rapport aux t&#xE9;moins, sugg&#xE9;rant L-SOP perturbe la prolif&#xE9;ration cellules gliales de M&#xFC;ller &#xE0; la suite ou en parall&#xE8;le avec ascl1a et activation de STAT3. Cela implique qu&#x26;#39;au moins un m&#xE9;canisme de signalisation, en plus du processus perturb&#xE9; par la L-POS, est n&#xE9;cessaire pour activer la prolif&#xE9;ration cellules gliales de M&#xFC;ller dans la r&#xE9;tine &#xE0; la lumi&#xE8;re endommag&#xE9;.

L&#x26;#39;inhibiteur de la phagocytose, O-phospho-L-s&#xE9;rine, inhibe la prolif&#xE9;ration cellules gliales de M&#xFC;ller et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration cellulaire c&#xF4;nes dans la r&#xE9;tine poisson z&#xE8;bre l&#xE9;ger endommag&#xE9;

Die besch&auml;digte Zebrafisch-Retina ersetzt verlorene Neuronen durch eine regenerative Antwort, die initiiert mit der asymmetrischen Zellteilung von M&uuml;ller Glia, neuronalen Vorl&auml;uferzellen, die sich vermehren und migrieren auf die besch&auml;digten Netzhaut-Schicht, zu produzieren, wo sie in die verlorene neuronale Zellentypen. Weil M&uuml;ller Glia sind bekannterma&szlig;en phagocytose Apoptotic retinalen Zellen w&auml;hrend der Entwicklung, haben wir getestet, wenn M&uuml;ller Glia Apoptotic Stab Zelle K&ouml;rper in Licht-Gesch&auml;digte Netzhaut verschlungen. Nach 24 h von Konstanten intensives Licht offenbart besch&auml;digten Netzhaut sowohl eine starke nukleare TUNEL-Signal in Photorezeptoren und ein schwaches zytoplasmatischen TUNEL-Signal in M&uuml;ller Glia, obwohl M&uuml;ller Gliazellen Apoptosis in der Licht-Gesch&auml;digte Netzhaut nicht beobachtet wird. Leichte Sch&auml;den einer Stab-spezifische transgene Reporter-Linie, Tg(XlRho:EGFP)(fl1), f&uuml;hrte zu einigen M&uuml;ller-Glia mit TUNEL-Signal und EGFP, denen hervorgeht, dass diese Teilmenge von M&uuml;ller Glia Apoptotic Photorezeptor Zelle K&ouml;rper versenkt. Um festzustellen, ob die Phagozytose die M&uuml;ller Gliazellen proliferative Antwort in der Licht-Gesch&auml;digte Netzhaut induziert, genutzt wir O-Phospho-l-Serin (L-SOP), ein Molek&uuml;l, das imitiert die Phosphatidylserin-Kopf-Gruppe und teilweise blockiert Microglial Phagozytose der Apoptotic Zellen. Intravitreal Injektion von L-SOP unmittelbar vor Beginn von st&auml;ndigen intensiven Licht Behandlung: i) nicht erheblich verringern Photorezeptor Licht induziert Zelltod, Ii) deutlich reduziert die Anzahl der PCNA-positivem M&uuml;ller Glia und Iii) deutlich reduziert die Anzahl der Kegel Lichtrezeptoren in der regenerierten Netzhaut relativ zum Steuerelement Netzhaut. Denn L-SOP ist auch eine bestimmte Gruppe III Metabotropic Glutamat-Rezeptor (mGluR)-Agonisten, wir auch getestet, ob die st&auml;rker spezifischen III-Agonist, L-2-amino-4-Phosphonobutyrate (L-AP4), der bestimmte Gruppe-III-Antagonist Gruppe (RS) - &alpha; - Methylserine-O-Phosphat (MSOP) oder der spezifischen Gruppe I Antagonist, L-2-amino-3-Phophonopropanoic-S&auml;ure (L-AP3) betroffenen M&uuml;ller Gliazellen Verbreitung. Wir fanden keine &Auml;nderungen mit jedem dieser Faktoren im Vergleich zur Kontrolle der Netzhaut, aufschlussreich, dass Metabotropic Glutamat-Rezeptoren nicht in die M&uuml;ller Glia proliferative Reaktion erforderlich waren. Dar&uuml;ber hinaus waren die ascl1a und stat3 Ausdruck unber&uuml;hrt in der L-SOP oder MSOP-injiziert Netzhaut relativ zu Steuerelementen, was darauf hindeutet, dass L-SOP M&uuml;ller Glia Verbreitung nach oder parallel zu ascl1a und stat3 Aktivierung st&ouml;rt. Dies bedeutet, dass mindestens ein Signalisierungsmechanismus, neben dem gest&ouml;rt durch L-SOP, M&uuml;ller Glia Verbreitung in der Licht-Gesch&auml;digte Netzhaut zu aktivieren.

Der Inhibitor der Phagozytose, O-Phospho-L-Serin, unterdr&uuml;ckt M&uuml;ller Glia Proliferation und Kegel Zellregeneration in der Licht-Gesch&auml;digte Zebrafisch-Netzhaut.

Retina danneggiata zebrafish sostituisce i neuroni persi attraverso una risposta rigenerativa che avvia con la divisione cellulare asimmetrica della glia di M&uuml;ller a produrre cellule progenitrici neuronali che proliferano e migrano al livello della retina danneggiato, dove si differenziano nei tipi di cellule neuronali perduto. Perch&eacute; glia di M&uuml;ller sono noti a fagocitare le cellule retiniche apoptotic durante lo sviluppo, abbiamo testato se glia di M&uuml;ller inghiottito asta degli enti apoptotic cell in retine danneggiate di luce. Dopo 24 h di luce costante e intensa, retine danneggiate rivelato sia un forte segnale nucleare di TUNEL in fotorecettori e un debole segnale TUNEL citoplasmatico nella glia di M&uuml;ller, sebbene M&uuml;ller glial apoptosi non sono osservata nella retina danneggiata di luce. Danni leggeri di una linea specifica asta transgenici reporter, Tg(XlRho:EGFP)(fl1), ha portato alcuni glia di M&uuml;ller che contiene segnale TUNEL ed EGFP, che ha indicato che questo sottoinsieme della glia di M&uuml;ller inghiottito degli enti apoptotic delle cellule fotorecettrici. Per determinare se la fagocitosi indotta la risposta proliferativa gliale M&uuml;ller nella retina danneggiata luce, abbiamo utilizzato O-fosfo-l-serina (L-SOP), una molecola che imita il gruppo di testa della fosfatidilserina e blocca parzialmente microgliali fagocitosi delle cellule apoptotic. Iniezione Intravitreal di L-SOP immediatamente prima di iniziare il trattamento costante di luce intensa: i) non significativamente riduce morte cellulare indotta da luce fotorecettore, ii) significativamente ridotto il numero della glia di M&uuml;ller PCNA-positivi e iii) significativamente ridotto il numero di fotorecettori cono nella retina rigenerata rispetto alla retina di controllo. Perch&eacute; L-SOP &egrave; anche un agonista specifico gruppo III metabotropic glutammato recettore (mGluR), abbiamo testato anche se le specifiche del pi&ugrave; potente gruppo agonista III, L-2-ammino-4-phosphonobutyrate (L-AP4), l&#39;antagonista III gruppo specifico (RS) - &alpha; - Methylserine-O-fosfato (MSOP) o le specifiche del gruppo antagonista, acido L-2-amino-3-phophonopropanoic (L-AP3) influenzato M&uuml;ller proliferazione gliale. Abbiamo non trovato alcuna modifica con uno qualsiasi di questi fattori rispetto per controllare la retina, rivelando che i recettori del glutammato metabotropico non erano necessari nella risposta proliferativa glia M&uuml;ller. Inoltre, ascl1a e stat3 espressione erano inalterati nel L-SOP o retine MSOP-iniettato rispetto a controlli, suggerendo L-SOP sconvolge la proliferazione glia di M&uuml;ller successivamente o in parallelo con l&#39;attivazione di ascl1a e stat3. Questo implica che almeno un meccanismo di segnalazione, oltre al processo interrotto da L-SOP, &egrave; necessario attivare la proliferazione glia M&uuml;ller nella retina danneggiata di luce.

L&#39;inibitore della fagocitosi, O-fosfo-L-Serina, sopprime M&uuml;ller glia proliferazione e cono di rigenerazione delle cellule della retina danneggiate luce zebrafish.

&#x7834;&#x640D;&#x3057;&#x305F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x304C;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x7834;&#x640D;&#x3057;&#x3066;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x5C64;&#x306B;&#x79FB;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7DB2;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x8CAA;&#x98DF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x640D;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3092;&#x5DFB;&#x304D;&#x8FBC;&#x3093;&#x3060;&#x306A;&#x3089;&#x3070;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x640D;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x7DB2;&#x819C;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x3001;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x5F37;&#x70C8;&#x306A;&#x5149;&#x306E;24&#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x3001;&#x640D;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x7DB2;&#x819C;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x6838;TUNEL&#x4FE1;&#x53F7;&#x3068;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x5F31;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;TUNEL&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x7279;&#x6709;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5149;&#x640D;&#x50B7;&#x306F;&#x3001;Tg&#x304C;&#xFF08;XlRho&#xFF1A;EGFP&#xFF09;&#xFF08;FL1&#xFF09;&#x3001;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3092;&#x5DFB;&#x304D;&#x8FBC;&#x3093;&#x3060;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;TUNEL&#x4FE1;&#x53F7;&#x3068;EGFP&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8CAA;&#x98DF;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x640D;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;O-&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;-L-&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;L-SOP&#xFF09;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x982D;&#x90E8;&#x57FA;&#x3068;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3057;&#x305F;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x76F4;&#x524D;&#x306E;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x5F37;&#x70C8;&#x306A;&#x5149;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x958B;&#x59CB;&#x306B;L-SOP&#x306E;&#x785D;&#x5B50;&#x4F53;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04;&#xFF1A;i&#xFF09;&#x306F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x3001;II&#x306E;&#x5149;&#x8A98;&#x8D77;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#xFF09;&#x304C;&#x6709;&#x610F;&#x306B;PCNA&#x967D;&#x6027;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3057;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;iii&#xFF09;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x30B3;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3057;&#x7DB2;&#x819C;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x56DE;&#x751F;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3002; L-SOP&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;III&#x4EE3;&#x8B1D;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;mGluR&#x306E;&#xFF09;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;III&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;L-2-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;-4  -  phosphonobutyrate&#xFF08;L-AP4&#xFF09;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;III&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#xFF08;RS&#xFF09;-&#x3B1;-&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;-O-&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;MSOP&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;I&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x3001;&#xFF08;L-AP3&#xFF09;&#x9178;L-2-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;-3  -  phophonopropanoic&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3068;&#x5909;&#x66F4;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;ascl1a&#x304A;&#x3088;&#x3073;STAT3&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;L-SOP&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;ascl1a&#x304A;&#x3088;&#x3073;STAT3&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x4E26;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;L-SOP&#x307E;&#x305F;&#x306F;MSOP-&#x6CE8;&#x5165;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;L-SOP&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7834;&#x58CA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x640D;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8CAA;&#x98DF;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x5264;&#x3001;O-&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;-L-&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x5149;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9310;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;

&#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; zebrafish &#xB9DD;&#xB9C9; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xBD84;&#xC2E4; &#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB294; &#xACA9; &#xC99D; &#xD558; &#xACE0; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xB97C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD560; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC804;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC;&#xC758; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC751;&#xB2F5; &#xC2DC;&#xC791;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC190;&#xC2E4;&#xB41C; &#xB274;&#xB7F0;&#xC744; &#xBC14;&#xAFC9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC; apoptotic &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; phagocytose &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC; apoptotic &#xB85C;&#xB4DC; &#xC140; &#xBC14;&#xB514; &#xBE5B; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; &#xC7A0;&#xACBC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xC0C1;&#xC218; &#xAC15;&#xB82C;&#xD55C; &#xBE5B;&#xC758; 24 &#xC2DC;&#xAC04; &#xD6C4; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBB90;&#xB7EC; &#xAD50; apoptosis &#xBE5B; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBAA8;&#xB450; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; &#xD575; &#xB4F1; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB4F1; &#xC2E0;&#xD638;&#xAC00; &#xC57D;&#xD55C; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xB85C;&#xB4DC; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xAE30;&#xC790; &#xC120;, Tg(XlRho:EGFP)(fl1), &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; &#xB4F1; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC;&#xC758;&#xC774; &#xBD80;&#xBD84; &#xC9D1;&#xD569; apoptotic &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC140; &#xC2DC;&#xCCB4;&#xB97C; &#xAC00;&#xB4DD; &#xCC44;&#xC6B0;&#xACE0; &#xD45C;&#xC2DC; EGFP &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC; &#xC77C;&#xBD80;&#xC758; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xC190;&#xC0C1;. &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; &#xBE5B; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; &#xBB90;&#xB7EC; &#xAD50; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC18;&#xC751; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; O-&#xC778;-l-&#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; (L-SOP) phosphatidylserine &#xBA38;&#xB9AC; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC744; &#xBAA8;&#xBC29; &#xD558; &#xACE0; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; microglial apoptotic &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C1;&#xC218; &#xAC15;&#xB82C;&#xD55C; &#xBE5B; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xAE30; &#xC9C1;&#xC804;&#xC758; L-SOP Intravitreal &#xC8FC;&#xC785;: &#xBE5B;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E4;&#xC9C0; i) &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; ii) &#xD06C;&#xAC8C; PCNA &#xC591;&#xC131; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC0F; iii) &#xD06C;&#xAC8C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; &#xC6D0;&#xCD94; &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C;. L-SOP&#xB3C4; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xADF8;&#xB8F9; III metabotropic &#xC0B0; &#xC5FC; (mGluR) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB354; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xADF8;&#xB8F9; III &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;, L-2-&#xC544;&#xBBF8;&#xB178;-4-phosphonobutyrate (L-AP4) &#xD2B9;&#xC815; &#xADF8;&#xB8F9; 3 &#xC138; &#xC801;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; (RS)-&alpha;-Methylserine-O-&#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; (MSOP) &#xB610;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xADF8;&#xB8F9; &#xB098; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;, L-2-&#xC544;&#xBBF8;&#xB178;-3-phophonopropanoic &#xC0B0; (L-AP3) &#xBB90;&#xB7EC; &#xAD50; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;. &#xC6B0;&#xB9AC; metabotropic glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4; &#xACF5;&#xAC1C; &#xB9DD;&#xB9C9;, &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB610;&#xD55C;, ascl1a &#xBC0F; stat3 &#xC2DD; L SOP &#xB610;&#xB294; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;, &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; L-SOP &#xBC29;&#xD574; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC; &#xD655;&#xC0B0; subsequent &#xB610;&#xB294; ascl1a &#xBC0F; stat3 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; MSOP &#xC8FC;&#xC785; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774; L-SOP&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xB2E8; &#xACFC;&#xC815; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBE5B; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC758;&#xBBF8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC18;&#xC751; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;, &#xC778; O L &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xCD94; &#xC138;&#xD3EC; &#xC7AC;&#xC0DD; zebrafish &#xBE5B; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La retina del pez cebra da&#xF1;ada reemplaza las neuronas perdidas a trav&#xE9;s de una respuesta regenerativa que se inicia con la divisi&#xF3;n celular asim&#xE9;trica de las c&#xE9;lulas de M&#xFC;ller para producir c&#xE9;lulas progenitoras neuronales que proliferan y migran a la capa de la retina da&#xF1;ada, donde se diferencian en los tipos de c&#xE9;lulas neuronales perdidas. Debido a que las c&#xE9;lulas de M&#xFC;ller son conocidos para fagocitar c&#xE9;lulas de la retina de apoptosis durante el desarrollo, hemos probado si las c&#xE9;lulas de M&#xFC;ller envuelto cuerpos de las c&#xE9;lulas apopt&#xF3;ticas en la barra de luz da&#xF1;ados por las retinas. Despu&#xE9;s de 24 horas de luz intensa constante, retinas da&#xF1;adas revel&#xF3; tanto una fuerte se&#xF1;al de TUNEL nuclear en los fotorreceptores y una se&#xF1;al d&#xE9;bil TUNEL frente al citoplasma de las c&#xE9;lulas de M&#xFC;ller, aunque M&#xFC;ller glial la apoptosis no se observa en la retina la luz da&#xF1;ada. Da&#xF1;o de la luz de una l&#xED;nea espec&#xED;fica del periodista de la barra transg&#xE9;nico, Tg (XlRho: EGFP) (FL1), dio lugar a algunos las c&#xE9;lulas de M&#xFC;ller que contiene la se&#xF1;al de TUNEL y EGFP, que indic&#xF3; que este subconjunto de las c&#xE9;lulas de M&#xFC;ller envuelto apoptosis cuerpos de las c&#xE9;lulas fotorreceptoras. Para determinar si la fagocitosis inducida por la respuesta proliferativa gliales M&#xFC;ller en la retina da&#xF1;ada por la luz, se utiliz&#xF3; S-fosfo-L-serina (L-SOP), una mol&#xE9;cula que imita el grupo de cabeza de fosfatidilserina y parcialmente la fagocitosis microglial bloques de c&#xE9;lulas apopt&#xF3;ticas. La inyecci&#xF3;n intrav&#xED;trea de L-SOP inmediatamente antes de comenzar el tratamiento constante de luz intensa: i) no redujo significativamente la luz inducida por la muerte de c&#xE9;lulas fotorreceptoras, ii) redujo significativamente el n&#xFA;mero de PCNA-positivas las c&#xE9;lulas de M&#xFC;ller, y iii) redujo significativamente el n&#xFA;mero de conos fotorreceptores de la retina regenerada relaci&#xF3;n con el control retinas. Debido a que la L-SOP es tambi&#xE9;n un grupo espec&#xED;fico de receptores de glutamato metabotr&#xF3;picos III (mGluR) agonista, tambi&#xE9;n a prueba si el m&#xE1;s potente agonista grupo espec&#xED;fico III, L-2-amino-4-phosphonobutyrate (L-AP4), el grupo antagonista espec&#xED;fico III (RS)-&#x3B1;-metilserina-O-fosfato (DIP) o el grupo espec&#xED;fico que antagonista, L-2-amino-3-phophonopropanoic &#xE1;cido (L-AP3) afectado proliferaci&#xF3;n glial M&#xFC;ller. No se encontraron cambios con alguno de estos factores en comparaci&#xF3;n con el control de la retina, dejando al descubierto que los receptores metabotr&#xF3;picos de glutamato no eran necesarias en la respuesta proliferativa las c&#xE9;lulas de M&#xFC;ller. Por otra parte, y la expresi&#xF3;n de STAT3 ascl1a no se vieron afectados, ya sea en la L-SOP o SOIC-inyecci&#xF3;n de la retina respecto a los controles, lo que sugiere la L-SOP interrumpe la proliferaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas de M&#xFC;ller despu&#xE9;s o en paralelo con ascl1a y la activaci&#xF3;n de STAT3. Esto implica que al menos un mecanismo de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, en adici&#xF3;n al proceso interrumpido por L-POE, es necesaria para activar la proliferaci&#xF3;n M&#xFC;ller gl&#xED;a en la retina da&#xF1;ada por la luz.

El inhibidor de la fagocitosis, O-fosfo-L-serina, suprime la proliferaci&#xF3;n M&#xFC;ller gl&#xED;a y la regeneraci&#xF3;n celular en el Cono retina de pez cebra da&#xF1;adas por la luz

Article	Year
Regulation of vertebrate eye development by Rx genes. The International journal of developmental biology\| PubMed ID: 15558469	2004
Rx-Cre, a tool for inactivation of gene expression in the developing retina. Genesis (New York, N.Y. : 2000)\| PubMed ID: 16850473	2006
Mutant neurogenin-3 in congenital malabsorptive diarrhea. The New England journal of medicine\| PubMed ID: 16855267	2006
Pax6a and Pax6b are required at different points in neuronal progenitor cell proliferation during zebrafish photoreceptor regeneration. Experimental eye research\| PubMed ID: 20152834	2010
The inhibitor of phagocytosis, O-phospho-L-serine, suppresses MÃ¼ller glia proliferation and cone cell regeneration in the light-damaged zebrafish retina. Experimental eye research\| PubMed ID: 20696157	2010

Travis J. Bailey

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications