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Alginate Microcapsule as a 3D Platform for Propagation and Differentiation of Human Embryonic Stem Cells (hESC) to Different Lineages

Human embryonic stem cells (hESC) are emerging as an attractive alternative source for cell replacement therapy since they can be expanded in culture ...

Mahidol University 

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (hESCs) &#x662F;&#x6F5C;&#x5728;&#x53EF;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x6CBB;&#x7597;&#x8BB8;&#x591A;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; 1 &#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E86;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x6A21;&#x578B;&#x5BF9;&#x6587;&#x5316;&#x548C;&#x533A;&#x5206; hESCs &#x4E2D;&#x9499;&#x6D77;&#x85FB;&#x9178;&#x5FAE;&#x80F6;&#x56CA;&#x5C01;&#x88C5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5236;&#x5EA6;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x7EF4;&#x62A4;&#x591A;&#x6F5C;&#x80FD;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A; 3D &#x6A21;&#x578B;&#x8FD8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x673A;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5206;&#x79BB;&#x51FA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7528;&#x4F5C;&#x9972;&#x517B;&#x5C42;&#x4ECE; hESCs&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x8840;&#x6E05; (SR) &#x66F4;&#x6362;&#x4ECB;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80CE;&#x513F;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x6DB2; &#xFF08;h f f-&#x5398;&#x7C73;&#xFF09;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709; Y-27632&#xFF0C;&#x5CA9;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x5C01;&#x88C5; hESCs &#x6269;&#x6563;&#x3002;&#x4E0E; Y 27632 hESCs &#x6CBB;&#x7597;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x3001; &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x96C6;&#x7FA4;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x6269;&#x6563;&#x7387; SR &#x4ECB;&#x8D28;&#x548C; h f f-CM&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5C01;&#x88C5; hESC &#x96C6;&#x7FA4;&#x662F;&#x8868;&#x793A; mesendoderm &#x7684;&#x7136;&#x540E;&#x76F4;&#x63A5;&#x5230;&#x6700;&#x7EC8;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;Brachyury 70-fold&#xFF09;&#xFF0C;&#x6700;&#x7EC8;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42; (SOX17 &gt; 300 &#x500D;&#xFF0C;FOXA2 &gt; 800-&#x6298;&#x53E0;&#x548C; CXCR4 &gt; 100-fold) &#x548C;&#x539F;&#x59CB;&#x80A0;&#x9053;&#x7BA1; (HNF1beta &gt; 120-fold) &#x800C;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x7684; hESCs&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5FAE;&#x80F6;&#x56CA;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E; 3d &#x6700;&#x7EC8;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x5206;&#x5316;&#x7684; hESCs &#x53EF;&#x80FD;&#x5177;&#x6709;&#x6F5C;&#x5728;&#x5E94;&#x7528;&#x514D;&#x75AB;&#x9694;&#x79BB;&#x548C;&#x9884;&#x9632;&#x7578;&#x80CE;&#x7624;&#x5F62;&#x6210;&#x7684; hESCs &#x79FB;&#x690D;&#x672F;&#x3002;

&#x6D77;&#x85FB;&#x9178;&#x5FAE;&#x80F6;&#x56CA;&#x7E41;&#x6B96;&#x53CA;&#x5B9A;&#x5411;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x7684; hESCs &#x5230;&#x6700;&#x7EC8;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x3002;

Human embryonic stem cells (hESCs) are potential renewable sources of cells in replacement therapies for many diseases including type 1 diabetes. We have established a three dimensional (3D) model to culture and differentiate hESCs that are encapsulated in calcium alginate microcapsules. This system promotes cellular interactions that are essential for both maintaining pluripotency and differentiation. This 3D model also provides opportunity to separate out hESCs from fibroblasts used as feeder layer during culture. In this study, we compared the viability and proliferation of the encapsulated hESCs cultured in serum replacement (SR) medium, human fetal fibroblast-conditioned medium (hFF-CM), in the presence and absence of Y-27632, a ROCK inhibitor. Treatment of hESCs with Y-27632 promoted cell survival, cell cluster formation and proliferation rate in both SR medium and hFF-CM. These encapsulated hESC clusters were then directly differentiated to definitive endoderm cells that expressed mesendoderm (Brachyury 70-fold), definitive endoderm (SOX17>300-fold, FOXA2>800-fold, and CXCR4>100-fold) and primitive gut tube (HNF1beta>120-fold) as compared to the undifferentiated hESCs. These data show that microcapsules can be used for differentiation of hESCs into definitive endoderm in 3D and could have potential application for immune-isolation and prevention of teratomas formation of hESCs during transplantation.

Alginate microcapsule for propagation and directed differentiation of hESCs to definitive endoderm.

Les cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) sont des sources potentielles de renouvelables de cellules dans les th&eacute;rapies de remplacement pour nombreuses maladies dont le diab&egrave;te de type 1. Nous avons &eacute;tabli trois dimensions (3D) mod&egrave;le &agrave; la culture et diff&eacute;rencier les CSEh sont encapsul&eacute;s dans des microcapsules d&#39;alginate de calcium. Ce syst&egrave;me favorise les interactions cellulaires qui sont essentielles pour maintenir la pluripotence et diff&eacute;renciation. Ce mod&egrave;le 3D fournit &eacute;galement la possibilit&eacute; de s&eacute;parer les CSEh de fibroblastes utilis&eacute;s comme couche de conducteur durant la culture. Dans cette &eacute;tude, nous avons compar&eacute; la viabilit&eacute; et la prolif&eacute;ration des CSEh encapsul&eacute; cultiv&eacute;es dans un milieu s&eacute;rum remplacement (SR), humain foetal conditionn&eacute; par des fibroblastes moyen (hFF-CM), en pr&eacute;sence et en absence de Y-27632, un inhibiteur de la roche. Traitement des CSEh avec Y-27632 favoris&eacute; la survie cellulaire, le taux de formation et la prolif&eacute;ration de cluster cellulaire en milieu SR et hFF-CM. Ces encapsul&eacute; CSEh grappes &eacute;taient alors cellules endoderme directement diff&eacute;renci&eacute;e &agrave; d&eacute;finitif qui exprime mesendoderm (Brachyury 70-fold), endoderme d&eacute;finitif (SOX17 &gt; 300-pli, FOXA2 &gt; 800-pli et CXCR4 &gt; 100 fois) et le tube de l&#39;intestin primitif (HNF1beta &gt; 120 renouvellements) par rapport &agrave; l&#39;indiff&eacute;renci&eacute; CSEh. Ces donn&eacute;es montrent que les microcapsules peuvent &ecirc;tre utilis&eacute;s pour diff&eacute;rencier des CSEh dans l&#39;endoderme d&eacute;finitif en 3D et pourraient avoir des applications potentielles pour immunitaire-isolement et de pr&eacute;vention de la formation de t&eacute;ratomes de CSEh lors de la transplantation.

Microcapsules d&#39;alginate pour la multiplication et diff&eacute;renciation dirig&eacute;e de CSEh d&#39;endoderme d&eacute;finitif.

Menschlicher embryonaler Stammzellen (Zellkulturen) sind potenzielle erneuerbaren Zellen in Ersatz-Therapien f&uuml;r viele Krankheiten, einschlie&szlig;lich Typ 1 Diabetes. Wir haben festgestellt, dass eine drei dimensionale (3D) model zur Kultur und Zellkulturen, die in Kalzium-Alginat-Mikrokapseln gekapselt sind zu unterscheiden. Dieses System f&ouml;rdert zellulare Wechselwirkungen, die f&uuml;r die Aufrechterhaltung Pluripotenz und Differenzierung von wesentlicher Bedeutung sind. Dieses 3D Modell bietet auch Gelegenheit, Zellkulturen aus Fibroblasten als Zubringer Schicht verwendet, w&auml;hrend Kultur zu trennen. In dieser Studie verglichen wir die Machbarkeit und die Verbreitung der gekapselten Zellkulturen in Serum Ersatz (SR) mittlerer menschlichen fetalen Fibroblast konditionierten Medium (hFF-CM), in der Anwesenheit und Abwesenheit von Y-27632, ein ROCK-Inhibitor kultiviert. Behandlung von Zellkulturen mit Y-27632 bef&ouml;rdert Zelle &uuml;berleben, Zelle Cluster Entstehung und Verbreitung Rate in SR Medium und hFF-CM. Diese gekapselt hESC-Cluster wurden dann direkt zur endg&uuml;ltigen differenzierte Entoderm-Zellen, die Mesendoderm ausgedr&uuml;ckt (Brachyury 70-fold), endg&uuml;ltige Endodermis (SOX17 &gt; 300 gefaltet, FOXA2 &gt; 800-Falte und CXCR4 &gt; verhundertfacht) und primitive Darm Rohr (HNF1beta &gt; 120-fold) im Vergleich zu den undifferenzierten Zellkulturen. Diese Daten zeigen, dass die Mikrokapseln f&uuml;r Differenzierung des Zellkulturen in endg&uuml;ltiger Endodermis in 3D genutzt werden und m&ouml;gliche Anwendung f&uuml;r immun-Isolierung und Verhinderung von Teratome Bildung von Zellkulturen bei Transplantation haben k&ouml;nnte.

Alginat mikroverkapselte f&uuml;r die Verbreitung und gezielte Differenzierung der Zellkulturen zur endg&uuml;ltigen Endodermis.

Cellule staminali embrionali umane (hESC) sono potenziali fonti rinnovabili delle cellule in terapie di sostituzione per molte malattie tra cui il diabete di tipo 1. Abbiamo stabilito un tre tridimensionale (3D) modello di cultura e differenziare hESCs incapsulati in microcapsule di alginato di calcio. Questo sistema promuove le interazioni cellulari che sono essenziali per mantenere pluripotenza e differenziazione. Questo modello 3D fornisce anche la possibilit&agrave; di separare le hESCs dai fibroblasti utilizzati come strato dell&#39;alimentatore durante la cultura. In questo studio abbiamo confrontato la vitalit&agrave; e la proliferazione delle hESCs incapsulato coltivate nel mezzo di siero sostituzione (SR), umana fetale del fibroblasto-condizionata medio (hFF-CM), in presenza e in assenza di Y-27632, un inibitore della roccia. Trattamento delle hESCs con Y-27632 promosso la sopravvivenza delle cellule, cellula cluster formazione e proliferazione tasso medio SR sia hFF-CM. Questi incapsulato hESC cluster erano poi cellule direttamente differenziato al definitivo endoderma che espresso mesendoderm (Brachyury 70-fold), endoderma definitivo (SOX17 &amp;gt; 300-piega, FOXA2 &amp;gt; 800-piega e CXCR4 &amp;gt; 100 volte) e intestino primitivo tubo (HNF1beta &amp;gt; Cambiautensili) rispetto le hESCs indifferenziato. Questi dati mostrano che le microcapsule possono essere utilizzati per la differenziazione delle hESCs in endoderma definitivo in 3D e potrebbero avere applicazioni potenziali per isolamento immunitario e prevenzione della formazione di teratomi di hESCs durante il trapianto.

Microcapsule di alginato per la propagazione e la differenziazione diretto delle hESCs a endoderma definitivo.

&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;hESCs&#xFF09; &#x30BB;&#x30EB;&#x7F6E;&#x63DB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; 1 &#x306E;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x518D;&#x751F;&#x53EF;&#x80FD;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x6E90;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; 3 &#x3064;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 3&#x6B21;&#x5143; (3 D) &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3068;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30F3;&#x9178;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x3067;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; hESCs &#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E; 3 D &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x307E;&#x305F; hESCs &#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x4E2D;&#x306E;&#x9001;&#x308A;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306E;&#x5C64;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x53CA;&#x3073;&#x8840;&#x6E05; (SR) &#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x5A92;&#x4F53;&#x3001;&#x3072;&#x3068;&#x80CE;&#x5150;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5A92;&#x4F53; &#xFF08;hFF &#x30BB;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF09; &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x4E0D;&#x5728;&#x3001;ROCK &#x963B;&#x5BB3;&#x5264; Y 27632 &#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB; hESCs &#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;HESCs Y 27632 &#x3067;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3001;SR &#x4E2D;&#x30FB; hFF CM &#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x3092;&#x63A8;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089; hESC &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC; mesendoderm &#x3092;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x7D30;&#x80DE;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316; (&#x77ED;&#x5C3E;&#x5947;&#x5F62; 70-fold&#xFF09;&#x3001;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x5185;&#x80DA;&#x8449; &#xFF08;SOX17 &#x76EE; FOXA2 300 &#x500D;&#x76EE; 800 &#x500D;&#x3068; CXCR4 &#x76EE; 100) &#x3068;&#x30D7;&#x30EA;&#x30DF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x8178;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6; (HNF1beta &#x76EE; 120-fold) &#x672A;&#x5206;&#x5316; hESCs &#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB; hESCs &#x306E; 3 D &#x3067;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x3078;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x9694;&#x96E2;&#x3068; hESCs &#x79FB;&#x690D;&#x6642;&#x5947;&#x5F62;&#x816B;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x4E88;&#x9632;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30F3;&#x9178;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x4F1D;&#x64AD;&#x3068; hESCs &#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x3078;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3002;

&#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hESCs)&#xB294; &#xC140; 1 &#xC720;&#xD615; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xB4F1; &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xCCB4; &#xC694;&#xBC95;&#xC5D0;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC18C;&#xC2A4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC124;&#xB9BD; 3 &#xCC28;&#xC6D0; (3D) &#xBB38;&#xD654; &#xBAA8;&#xB378; &#xBC0F; &#xCE7C;&#xC298; alginate microcapsules&#xC5D0; Hescs&#xB97C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC720;&#xC9C0; pluripotency&#xC640; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; 3D &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; hESCs &#xBB38;&#xD654; &#xC911;&#xC5D0; &#xD53C;&#xB354; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xBC0F; &#xD608; &#xCCAD; &#xAD50;&#xCCB4; (SR) &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4; &#xC778;&#xAC04; &#xD0DC;&#xC544; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC870;&#xC808; &#xB9E4;&#xCCB4; (hFF CM), &#xC874;&#xC7AC;&#xC640; Y-27632, &#xB85D; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD50;&#xC591; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xB41C; Hescs&#xC758; &#xD655;&#xC0B0; &#xBE44;&#xAD50;. &#xCE58;&#xB8CC;&#xC640; Y 27632 Hescs&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874;, SR &#xB9E4;&#xCCB4; &#xBC0F; hFF CM &#xC140; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xD615;&#xC131;&#xACFC; &#xD655;&#xC0B0; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC2B9;&#xC9C4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD45C;&#xD604; mesendoderm &#xB2E4;&#xC74C; &#xC9C1;&#xC811; &#xAC8C; &#xD655;&#xC2E4; &#xD55C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; endoderm &#xC140; &#xD588;&#xB2E4; hESC &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; (Brachyury 70-fold), &#xD655;&#xC2E4; &#xD55C; endoderm (SOX17 &amp;gt; FOXA2 300 &#xBC30; &amp;gt; 800 &#xBC30; &#xBC0F; CXCR4 &amp;gt; 100) &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; &#xCC3D; &#xC790; &#xD29C;&#xBE0C; (HNF1beta &amp;gt; 120-fold) undifferentiated hESCs &#xBE44;&#xAD50;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; microcapsules &#xCD5C;&#xC885; endoderm 3d&#xC5D0;&#xC11C;&#xB85C; Hescs&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACE0;&#xB9BD;&#xACFC; &#xC774;&#xC2DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; Hescs&#xC758; teratomas &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC608;&#xBC29;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xD560; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Alginate microcapsule &#xC804;&#xD30C;&#xC640; &#xD655;&#xC2E4; &#xD55C; endoderm Hescs&#xC758; &#xAC10;&#xB3C5;&#xB41C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;.

C&eacute;lulas madre embrionarias humanas (hESCs) son fuentes renovables potenciales de las c&eacute;lulas en las terapias de reemplazo para muchas enfermedades, incluyendo diabetes tipo 1. Hemos establecido tres dimensiones (3D) del modelo a la cultura y diferenciar hESCs encapsulados en microc&aacute;psulas de alginato de calcio. Este sistema promueve interacciones celulares que son esenciales para mantener pluripotencia y la diferenciaci&oacute;n. Este modelo 3D tambi&eacute;n ofrece oportunidad para separar hESCs de fibroblastos utilizados como capa de alimentador en cultura. En este estudio, comparamos la viabilidad y proliferaci&oacute;n de los encapsulados hESCs cultivadas en suero reemplazo (SR) medio, humano fetal del fibroblasto-condicionada (hFF-CM), en presencia y ausencia de Y-27632, un inhibidor de la roca. Tratamiento de hESCs con Y-27632 promueve la supervivencia celular, tasa de formaci&oacute;n y proliferaci&oacute;n de cl&uacute;ster celular en medio de SR tanto hFF-CM. Estos encapsulados hESCs racimos eran entonces c&eacute;lulas endodermo directamente diferenciados a definitivo que expresa mesendoderm (Brachyury 70-fold), endodermo definitivo (SOX17 &gt; 300 veces, FOXA2 &gt; 800 veces y CXCR4 &gt; centesimal) y tubo de intestino primitivo (HNF1beta &gt; 120-fold) en comparaci&oacute;n con las hESCs indiferenciado. Estos datos demuestran que las microc&aacute;psulas pueden utilizarse para la diferenciaci&oacute;n de hESCs en endodermo definitivo en 3D y podr&iacute;an tener aplicaci&oacute;n potencial inmunol&oacute;gico-aislamiento y prevenci&oacute;n de la formaci&oacute;n de teratomas de hESCs durante el trasplante.

Microc&aacute;psula de alginato para propagaci&oacute;n y diferenciaci&oacute;n dirigida de hESCs al endodermo definitivo.

L&#39;origine delle cellule progenitrici endoteliali (EPC) nel sangue del cordone ombelicale (UCB) &egrave; sconosciuta. In questo studio, abbiamo esplorato l&#39;origine delle EPCs UCB-derivato da coltura CD14 + o CD14-sottopopolazione separatamente e co-culturing questi due sottopopolazioni con o senza transwells. Abbiamo non trovato nessuna formazione di Colonia con CD14 + o CD14-sottopopolazione da solo, ma c&#39;erano colonie EPC osservati in diretta co-cultures di entrambe le sottopopolazioni. Sistema di coltura TransWell &egrave; stato usato per studiare ulteriormente l&#39;effetto delle citochine sulla formazione della colonia di EPC. Abbiamo osservato la presenza di colonie EPC derivata dalla sottopopolazione CD14 in presenza di CD14 + sottopopolazione nel vano superiore, considerando che non non c&#39;era nessuna Colonia generato da CD14 + sottopopolazione con CD14-sottopopolazione nel vano superiore. Pertanto, CD14-sottopopolazione &egrave; probabile che sia l&#39;origine di EPC e derivazione della Colonia EPC richiede citochine rilasciate da CD14 + sottopopolazione. Abbiamo caratterizzato ulteriormente la popolazione fondante del derivato da UCB EPCs suddividendo CD14-sottopopolazione in CD14-/ CD34 + e CD14-/ CD34-sottopopolazioni. Ci sono stati osservati solo in co-cultures di CD14 + con CD14 - colonie / CD34 + sottopopolazione ma non con CD14-/ CD34-sottopopolazione con o senza transwells. Abbiamo proiettato 42 citochine che coinvolgono in angiogenesis usando una matrice di ELISA nel surnatante raccolto da CD14 + rispetto al CD14-sottopopolazioni. Abbiamo trovato costantemente la presenza di angiogenin1 nel surnatante della sottopopolazione CD14 +, ma non in quello della sottopopolazione CD14. L&#39;aggiunta di angiogenin1 nella cultura di CD14-sottopopolazione ha reso colonie EPC. Concludiamo che derivata da UCB EPCs sono confinati a CD14 - CD34 + sottopopolazione e angiogenin1 rilasciato dalla sottopopolazione CD14 + pu&ograve; essere un fattore importante per promuovere la formazione della Colonia EPC.

CD14- / CD34 + &egrave; il fondatore della popolazione delle cellule progenitrici endoteliali derivati da sangue del cordone ombelicale e angiogenin1 &egrave; un fattore importante per promuovere la formazione di Colonia.

&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x529B;) &#x8110;&#x5E26;&#x8840; (UCB) &#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A2;&#x8BA8; UCB &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x5355;&#x72EC;&#x57F9;&#x517B; CD14 + &#x6216; CD14 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x548C;&#x5757;&#x5E26;&#x6216;&#x4E0D;&#x5E26; transwells &#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E0E; CD14 + &#x6216; CD14 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x7684;&#x96C6;&#x843D;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x83CC;&#x7FA4;&#x53D8;&#x5316;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684; EPC &#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x3002;Transwell &#x6587;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7528;&#x6765;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7814;&#x7A76;&#x5BF9; EPC &#x96C6;&#x843D;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6765;&#x81EA; CD14 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x5728;&#x573A; CD14 + &#x4E9A;&#x7FA4;&#x4E0A;&#x5C42;&#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x800C;&#x6CA1;&#x6709;&#x751F;&#x6210; CD14 + &#x4E9A;&#x7FA4;&#x4E0E; CD14 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x4E0A;&#x5C42;&#x8231;&#x5185;&#x4ECE;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x7684; EPC &#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;CD14 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x5F88;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x8D77;&#x6E90;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x548C; EPC &#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x63A8;&#x5BFC;&#x9700;&#x8981;&#x4ECE; CD14 + &#x4E9A;&#x7FA4;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7279;&#x70B9; UCB &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x521B;&#x59CB;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5C06; CD14 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x5206;&#x79BB;&#x5230; CD14-/ /cd34 + &#x548C; CD14-/ CD34 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x3002;&#x6709;&#x4EC5;&#x5728; CD14 + CD14-&#x83CC;&#x7FA4;&#x53D8;&#x5316;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730; / /cd34 + &#x4E9A;&#x7FA4;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0E; CD14-/ CD34 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x5E26;&#x6216;&#x4E0D;&#x5E26; transwells&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7504;&#x522B; 42 &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4F7F;&#x7528;&#x9176;&#x8054;&#x514D;&#x75AB;&#x5438;&#x9644;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x6570;&#x7EC4;&#x4ECE; CD14 + &#x76F8;&#x6BD4; CD14 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x6536;&#x96C6;&#x4E0A;&#x6E05;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x59CB;&#x7EC8;&#x5982;&#x4E00;&#x5730;&#x53D1;&#x73B0; angiogenin1 &#x7684;&#x5B58;&#x5728; CD14 + &#x4E9A;&#x7FA4;&#x4E0A;&#x6E05;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728; CD14 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x3002;Angiogenin1 CD14 &#x4E9A;&#x7FA4;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E86; EPC &#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; UCB &#x6D3E;&#x751F;&#x529B;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E; CD14-/cd34 + &#x4E9A;&#x7FA4;&#x548C; angiogenin1 &#x4ECE; CD14 + &#x4E9A;&#x7FA4;&#x91CA;&#x653E;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x63A8;&#x52A8; EPC &#x96C6;&#x843D;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

CD14-/ /cd34 + &#x662F;&#x8110;&#x5E26;&#x8840;&#x6E90;&#x6027;&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x521B;&#x59CB;&#x4EBA;&#x53E3;&#x548C; angiogenin1 &#x662F;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x96C6;&#x843D;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

The origin of endothelial progenitor cells (EPCs) in umbilical cord blood (UCB) is unknown. In this study, we explored the origin of UCB-derived EPCs by culturing CD14+ or CD14- subpopulation separately and co-culturing these two subpopulations either with or without transwells. We found no colony formation with CD14+ or CD14- subpopulation alone, but there were EPC colonies observed in direct co-cultures of both subpopulations. Transwell culture system was used to further study the effect of cytokines on EPC colony formation. We observed the presence of EPC colonies derived from CD14- subpopulation in the presence of CD14+ subpopulation in the upper compartment whereas there was no colony generated from CD14+ subpopulation with CD14- subpopulation in the upper compartment. Therefore, CD14- subpopulation is likely to be the origin of EPCs and EPC colony derivation requires cytokines released from CD14+ subpopulation. We further characterized the founding population of UCB-derived EPCs by separating CD14- subpopulation into CD14-/CD34+ and CD14-/CD34- subpopulations. There were colonies observed only in co-cultures of CD14+ with CD14-/CD34+ subpopulation but not with CD14-/CD34- subpopulation either with or without transwells. We screened 42 cytokines involving in angiogenesis using an ELISA array in the supernatant collected from CD14+ compared to CD14- subpopulations. We found consistently the presence of angiogenin1 in the supernatant of CD14+ subpopulation but not in that of CD14- subpopulation. The addition of angiogenin1 in culture of CD14- subpopulation yielded EPC colonies. We conclude that UCB-derived EPCs are confined to CD14-/CD34+ subpopulation and angiogenin1 released from CD14+ subpopulation may be an important factor promoting the EPC colony formation.

CD14-/CD34+ is the founding population of umbilical cord blood-derived endothelial progenitor cells and angiogenin1 is an important factor promoting the colony formation.

On ne conna&icirc;t pas l&#39;origine des prog&eacute;nitrices endoth&eacute;liales (EPCs) dans le sang de cordon ombilical (UCB). Dans cette &eacute;tude, nous avons explor&eacute; l&#39;origine du d&eacute;riv&eacute; de UCB EPCs par culture CD14 + ou sous-populations CD14 s&eacute;par&eacute;ment et co-culture ces deux sous-populations, avec ou sans transwells. Nous avons ne trouv&eacute; aucune formation de colonies avec CD14 + ou sous-populations CD14 seul, mais il y avait des colonies CBE observ&eacute;es dans des co-cultures directes des deux sous-populations. Syst&egrave;me de culture transwell servait &agrave; &eacute;tudier davantage l&#39;effet des cytokines sur la formation de colonies de CBE. Nous avons observ&eacute; la pr&eacute;sence de colonies de CBE d&eacute;riv&eacute; CD14-sous-population en pr&eacute;sence de la sous-population CD14 + dans le compartiment sup&eacute;rieur alors qu&#39;il n&#39;y n&#39;avait aucune colonie g&eacute;n&eacute;r&eacute; par sous-population CD14 + avec CD14 sous-populations dans le compartiment sup&eacute;rieur. Par cons&eacute;quent, CD14-sous-population est susceptible d&#39;&ecirc;tre &agrave; l&#39;origine du CPE et d&eacute;rivation colonie CBE exige des cytokines lib&eacute;r&eacute;es de CD14 + sous-population. Nous avons caract&eacute;ris&eacute; davantage la population fondatrice de EPCs d&eacute;riv&eacute; de UCB en s&eacute;parant CD14-sous-population dans CD14-/ CD34 + et CD14-/ CD34-sous-populations. Il y avait des colonies n&#39;observ&eacute;es que dans des co-cultures de CD14 + avec CD14-/ CD34 + sous-population, mais pas avec CD14-/ CD34 sous-populations avec ou sans transwells. Nous avons cribl&eacute; 42 impliquant des cytokines dans l&#39;angiogen&egrave;se en utilisant un tableau de ELISA dans le surnageant pr&eacute;lev&eacute; CD14 + par rapport au CD14-sous-populations. Nous avons trouv&eacute; constamment la pr&eacute;sence d&#39;angiogenin1 dans le surnageant de CD14 + sous-population, mais pas dans celui de CD14-sous-population. L&#39;ajout d&#39;angiogenin1 dans la culture des sous-populations CD14 c&eacute;d&eacute; colonies CBE. Nous concluons que les d&eacute;riv&eacute;s UCB EPCs sont limitent &agrave; CD14- / CD34 + sous-population et angiogenin1 lib&eacute;r&eacute; de sous-population CD14 + peuvent &ecirc;tre un facteur important favorisant la formation de colonies de CBE.

CD14- / CD34 + est la population fondatrice de cellules prog&eacute;nitrices endoth&eacute;liales d&eacute;riv&eacute;s du sang de cordon ombilical et angiogenin1 est un facteur important favorisant la formation de colonies.

Der Ursprung der endothelial Progenitor Cells (EPCs) im Nabelschnurblut (UCB) ist unbekannt. In dieser Studie untersucht wir den Ursprung von UCB abgeleitete EPCs durch Z&uuml;chtung Verwendung CD14 + oder Verwendung CD14-Teilgesamtheit separat und co-culturing diese zwei Subpopulationen mit oder ohne Transwells. Wir fanden keine Kolonie-Formation mit Verwendung CD14 + oder Verwendung CD14-Teilgesamtheit allein, aber es gab EPC-Kolonien in direkter Co-cultures von beiden Subpopulationen beobachtet. Transwell-Kultur-System wurde verwendet, um die Wirkung der Zytokine auf EPC Kolonie Bildung weiter zu studieren. Wir beobachteten das Vorhandensein von EPC-Kolonien von Verwendung CD14-Teilgesamtheit in Anwesenheit von Verwendung CD14 + Teilgesamtheit im oberen Fach abgeleitet wird, w&auml;hrend es keine Kolonie aus Verwendung CD14 + Teilgesamtheit mit Verwendung CD14-Teilgesamtheit im oberen Fach generiert war. Deshalb Verwendung CD14-Teilgesamtheit ist wahrscheinlich der Ursprung des EPCs und EPC Kolonie Ableitung erfordert Zytokine, die aus der Verwendung CD14 + Teilgesamtheit entlassen. Wir weiter charakterisiert die Gr&uuml;ndung Bev&ouml;lkerung von UCB abgeleitete EPCs aufteilen Verwendung CD14-Teilgesamtheit in Verwendung CD14-/ CD34 + und Verwendung CD14-/ CD34-Subpopulationen. Gab es Kolonien beobachtet nur in Co-cultures der Verwendung CD14 + mit Verwendung CD14-/ CD34 + Teilgesamtheit aber nicht mit Verwendung CD14-/ CD34-Teilgesamtheit entweder mit oder ohne Transwells. Wir geschirmt 42 Cytokines in Angiogenese mit einem ELISA-Array in der &Uuml;berstand entnommen Verwendung CD14 + im Vergleich zu Verwendung CD14-Subpopulationen einzubeziehen. Wir fanden stets das Vorhandensein von angiogenin1 in den &uuml;berstand der Verwendung CD14 + Teilgesamtheit aber nicht in der Verwendung CD14-Teilgesamtheit. Der Zusatz von angiogenin1 in der Kultur der Verwendung CD14-Teilgesamtheit ergab EPC-Kolonien. Wir schlie&szlig;en, dass UCB abgeleitete EPCs Verwendung CD14 beschr&auml;nkt- / CD34 + Teilgesamtheit und angiogenin1, die aus der Verwendung CD14 + Teilgesamtheit entlassen k&ouml;nnen ein wichtiger Faktor die EPC-Kolonie-Bildung zu f&ouml;rdern.

Verwendung CD14- / CD34 + ist die Gr&uuml;ndung Bev&ouml;lkerung der Nabelschnur Blut abgeleitete endothelialen Vorl&auml;uferzellen und angiogenin1 ist ein wichtiger Faktor, der die Kolonie-Bildung zu f&ouml;rdern.

&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE; (EPCs) &#x306E;&#x81CD;&#x5E2F;&#x8840; &#xFF08;UCB&#xFF09; &#x306E;&#x8D77;&#x6E90;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CD14 + &#x307E;&#x305F;&#x306F; CD14 subpopulation &#x3092;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x57F9;&#x990A;&#x3068;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; transwells &#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x3088;&#x308B; UCB &#x6D3E;&#x751F; EPCs &#x306E;&#x8D77;&#x6E90;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210; CD14 + &#x307E;&#x305F;&#x306F; CD14 &#x4E9C;&#x7A2E;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x3082;&#x3001;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x306B;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x7CFB;&#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F; EPC &#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;Transwell &#x6587;&#x5316;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C; EPC &#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Cd14 subpopulation CD14-subpopulation &#x4E0A;&#x90E8;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5BFE;&#x3057; CD14 &#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x304B;&#x3089; cd14 subpopulation &#x4E0A;&#x90E8;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x6D3E;&#x751F; EPC &#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;CD14 subpopulation EPCs &#x306E;&#x8D77;&#x6E90;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3001;EPC &#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x6D3E;&#x751F; cd14 subpopulation &#x304B;&#x3089;&#x653E;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3055;&#x3089;&#x306B; UCB &#x6D3E;&#x751F; EPCs &#x306E;&#x5275;&#x7ACB;&#x4EBA;&#x53E3; CD14 &#x4E9C;&#x7A2E;&#x3001;CD14 - &#x306B;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;/cd34 &#x3068; CD14-/CD34 &#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3002;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E; CD14 + &#x3068; CD14-&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x7CFB;&#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;/cd34 subpopulation &#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x3068; CD14-/CD34 &#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E; transwells &#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; 42 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E; ELISA &#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x304B;&#x3089; cd14 CD14 &#x4E9C;&#x7FA4;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x53CE;&#x96C6;&#x3057;&#x305F;&#x4E0A;&#x6E05;&#x4E2D;&#x306B;&#x4E0A;&#x6620;&#x3002;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;cd14 &#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x4E0A;&#x6F84;&#x307F;&#x304C; CD14 &#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044; angiogenin1 &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CD14 &#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; angiogenin1 &#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306F; EPC &#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; UCB &#x6D3E;&#x751F; EPCs &#x304C; CD14 - &#x306B;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;/cd34 &#x4E9C;&#x7A2E;&#x3068; CD14 + &#x304B;&#x3089; subpopulation &#x3092;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; angiogenin1 EPC &#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

CD14-/cd34 &#x3067;&#x3059;&#x81CD;&#x5E2F;&#x8840;&#x7531;&#x6765;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5275;&#x7ACB;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3068; angiogenin1 &#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD0EF; &#xC904; &#xD608;&#xC561; (UCB)&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xB0B4; &#xD53C; &#xBFCC;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC; (Epc)&#xC758; &#xCD9C;&#xCC98;&#xB97C; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; CD14 + &#xB610;&#xB294; CD14 subpopulation&#xB97C; &#xBCC4;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC7AC;&#xBC30; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xB450; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04; &#xB610;&#xB294; transwells &#xC5C6;&#xC774; co-culturing&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; UCB &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; Epc&#xC758; &#xAE30;&#xC6D0; &#xD0D0;&#xD5D8;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD63C;&#xC790;, CD14 + &#xB610;&#xB294; CD14 subpopulation &#xC804;&#xD600; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; EPC &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xB450; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; co-cultures&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. Transwell &#xBB38;&#xD654; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; EPC &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; cytokines&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB354; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C;. &#xC544;&#xB2C8; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; CD14 + subpopulation CD14-subpopulation &#xC0C1;&#xB2E8; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC640;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xBC18;&#xBA74; CD14 + subpopulation &#xC704;&#xCABD; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; CD14 subpopulation&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; EPC &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, CD14 subpopulation Epc&#xC758; &#xAE30;&#xC6D0; &#xB420; &#xAC83; &#xC774;&#xBA70; EPC &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; cytokines CD14 + subpopulation&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xD45C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354;&#xC6B1; CD14 subpopulation CD14-&#xB85C; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD558; &#xC5EC; UCB &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; Epc&#xC758; &#xCC3D;&#xB9BD; &#xC778;&#xAD6C; &#xD2B9;&#xC9D5; / CD34 + &#xBC0F; CD14-/ CD34-&#xBD80;&#xBD84;. &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC758; CD14 + CD14-co-cultures&#xC5D0;&#xB9CC; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4; / CD34 + subpopulation &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD568;&#xAED8; CD14-/ CD34-subpopulation &#xB610;&#xB294; transwells &#xC5C6;&#xC774;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 42 cytokines CD14 + CD14-&#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC218;&#xC9D1; &#xC0C1;&#xCF8C;&#xD55C; ELISA &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC0C1;&#xC601;. &#xC6B0;&#xB9AC; angiogenin1&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; CD14 + subpopulation &#xC0C1;&#xCF8C;&#xD55C; CD14 subpopulation&#xC758;&#xC5D0; &#xC77C;&#xAD00; &#xB418; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xACAC;. CD14-subpopulation &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; angiogenin1 &#xCD94;&#xAC00; EPC &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; UCB &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; Epc CD14-&#xAD6D;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACB0;&#xB860; / CD34 + subpopulation &#xBC0F; angiogenin1 CD14 + subpopulation&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xD45C; EPC &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

CD14-/ CD34 +&#xB294; &#xD0EF; &#xC904; &#xD608;&#xC561; &#xC720;&#xB798; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCC3D;&#xB9BD; &#xC778;&#xAD6C; &#xBC0F; angiogenin1 &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xC774;&#xB2E4;.

Se desconoce el origen de las c&eacute;lulas progenitoras endoteliales (EPCs) en la sangre del cord&oacute;n umbilical (UCB). En este estudio, se analiz&oacute; el origen de EPCs derivados de UCB por cultivo de CD14 + o CD14-subpoblaci&oacute;n separadamente y co-cultivo estas dos subpoblaciones con o sin transwells. No encontramos ninguna formaci&oacute;n de la Colonia con CD14 + o CD14-subpoblaci&oacute;n solo, pero hubo colonias EPC observadas en directos Co-cultivos de ambas subpoblaciones. Sistema de cultivo Transwell fue utilizado adem&aacute;s estudiar el efecto de citoquinas en la formaci&oacute;n de la Colonia EPC. Observamos la presencia de colonias EPC derivada CD14-subpoblaci&oacute;n en presencia de CD14 + subpoblaci&oacute;n en el compartimiento superior mientras que no hubo ninguna Colonia generado a partir de CD14 + subpoblaci&oacute;n con CD14-subpoblaci&oacute;n en el compartimiento superior. Por lo tanto, CD14-subpoblaci&oacute;n es probable que el origen del EPC y derivaci&oacute;n de Colonia EPC requiere liberada CD14 + subpoblaci&oacute;n de citoquinas. Nos caracteriza la poblaci&oacute;n fundadora de EPCs derivados de UCB separando CD14-subpoblaci&oacute;n en CD14-/ CD34 + y CD14-/ CD34-subpoblaciones. Hab&iacute;a colonias observadas solamente en co-cultivos de CD14 + con CD14-/ CD34 + subpoblaci&oacute;n pero no con CD14-/ CD34-subpoblaci&oacute;n con o sin transwells. Defendimos a 42 citoquinas que implica en la angiog&eacute;nesis usando un arsenal de ELISA en el sobrenadante de CD14 + comparado con CD14-subpoblaciones. Encontramos constantemente la presencia de angiogenin1 en el sobrenadante de CD14 + subpoblaci&oacute;n pero no en el de CD14-subpoblaci&oacute;n. La adici&oacute;n de angiogenin1 en la cultura de CD14-subpoblaci&oacute;n rindi&oacute; colonias EPC. Concluimos que EPCs derivados de UCB se limitan a CD14- / CD34 + subpoblaci&oacute;n y angiogenin1 de CD14 + subpoblaci&oacute;n pueden ser un factor importante, promoviendo la formaci&oacute;n de la Colonia EPC.

CD14- / CD34 + es la poblaci&oacute;n fundadora de c&eacute;lulas progenitoras endoteliales derivadas de sangre del cord&oacute;n umbilical y angiogenin1 es un factor importante, promoviendo la formaci&oacute;n de la Colonia.

Dans le diab&egrave;te de type 2, l&#39;alt&eacute;ration du processus de r&eacute;paration vasculaire et angiogen&egrave;se sont due &agrave; un dysfonctionnement (EPC) de cellules endoth&eacute;liales prog&eacute;nitrices. Dans cette &eacute;tude, nous avons mis en place une m&eacute;thodologie quantitative pour &eacute;valuer la fonction CBE en utilisant un test de la formation in vitro 5-6-carboxyfluoresc&eacute;ine diac&eacute;tate succinimidyl ester-&eacute;tiquetage navire. L&#39;EPCs ont &eacute;t&eacute; cultiv&eacute;s dans trois concentrations de glucose diff&eacute;rentes (100 et 189,5 295,5 mg/dl de D:-glucose) repr&eacute;sentant respectivement les contr&ocirc;les normaux et diab&egrave;te avec un contr&ocirc;le glyc&eacute;mique bon ou mauvais,. Nous avons constat&eacute; que la capacit&eacute; in vitro de navire formant &eacute;tait alt&eacute;r&eacute;e chez les EPCs cultiv&eacute;es dans des concentrations de glucose &eacute;lev&eacute; par rapport aux contr&ocirc;les normaux (43,4 &plusmn; 0,8 % et 34,7 &plusmn; 0,7 % vs 50,8 &plusmn; 2,1 %). Plus loin, nous avons &eacute;tudi&eacute; l&#39;expression des diff&eacute;rents g&egrave;nes impliqu&eacute;s dans la formation de vaisseaux. Il y avait un niveau inf&eacute;rieur de l&#39;expression g&eacute;nique angiopoietin 1 en EPCs cultiv&eacute;es dans des concentrations &eacute;lev&eacute;es de glucose. L&#39;addition de recombinant angiopoietin 1 augmente significativement la capacit&eacute; de navire formant des EPCs cultiv&eacute;es dans la concentration &eacute;lev&eacute;e de glucose (35,3 &plusmn; 2,0 % &agrave; 48,8 &plusmn; 2,7 %), tandis que l&#39;ajout d&#39;angiopoietin 2 (un inhibiteur comp&eacute;titif de l&#39;angiopoietin 1) compromis la capacit&eacute; de navire formant des EPCs cultiv&eacute;es dans la concentration en glucose normal (51,8 &plusmn; 1,3 % &agrave; 41,3 &plusmn; 0,6 %). Nous concluons que la capacit&eacute; in vitro de navire formant des EPCs cultiv&eacute;es dans la concentration &eacute;lev&eacute;e de glucose est alt&eacute;r&eacute;e en raison de faibles niveaux d&#39;angiopoietin 1.

Capacit&eacute; de navire formant in vitro des cellules prog&eacute;nitrices endoth&eacute;liales dans des conditions de forte concentration de glucose.

2 &#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x53D7;&#x635F;&#x8840;&#x7BA1;&#x4FEE;&#x590D;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; (EPC) &#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E86;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30; epc &#x603B;&#x627F;&#x5305;&#x529F;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E8C;&#x4E59;&#x9178;&#x916F; 5-6-carboxyfluorescein &#x4F53;&#x5916; succinimidyl &#x916F;&#x8D34;&#x6807;&#x8239;&#x53EA;&#x5F62;&#x6210;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x529B;&#x57F9;&#x517B;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6; &#xFF08;100&#x3001; 189.5 &#x548C; 295.5 &#x6BEB;&#x514B;/&#x5206;&#x5347;&#x7684; d:-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#xFF09; &#x5206;&#x522B;&#x5360;&#x6B63;&#x5E38;&#x63A7;&#x5236;&#x53CA;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x6216;&#x597D;&#x6216;&#x5DEE;&#x7684;&#x8840;&#x7CD6;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4F53;&#x5916;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x80FD;&#x529B;&#x6709;&#x635F;&#x4E8E;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6;&#x76F8;&#x6BD4;&#x6B63;&#x5E38;&#x63A7;&#x5236; (43.4 &plusmn; 0.8%&#x548C; 34.7 &plusmn; 0.7%&#x5BF9;&#x6BD4; 50.8 &plusmn; 2.1%)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7814;&#x7A76;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6709;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x529B;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F53;&#x5916;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7D20; 1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7D20; 1 &#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6; (35.3 &plusmn; 2.0%&#x81F3; 48.8 &plusmn; 2.7%&#xFF09;&#xFF0C;&#x800C;&#x589E;&#x52A0;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7D20; 2 (&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7D20; 1 &#x7684;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x5242;) &#x53D7;&#x635F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x8840;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6; (51.8 &plusmn; 1.3%&#x81F3; 41.3 &plusmn; 0.6%)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; &#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x8840;&#x7BA1;&#x6210;&#x5F62;&#x80FD;&#x529B;&#x53D7;&#x635F;&#x7531;&#x4E8E;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7D20; 1 &#x7684;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

&#x4F53;&#x5916;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x9AD8;&#x7CD6;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

In type 2 diabetes, the impairment of vascular repair processes and angiogenesis are due to endothelial progenitor cell (EPC) dysfunction. In this study, we established a quantitative methodology to assess EPC function by using an in vitro 5-(6)-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester-labeling vessel formation assay. The EPCs were cultured in three different glucose concentrations (100, 189.5, and 295.5Â mg/dl of D: -glucose) representing normal control and diabetes with either good or poor glycemic control, respectively. We found that the in vitro vessel-forming capacity was impaired in EPCs cultured in high glucose concentrations compared to normal control (43.4â€‰Â±â€‰0.8% and 34.7â€‰Â±â€‰0.7% vs. 50.8â€‰Â±â€‰2.1%). We further studied expression of various genes involved in vessel formation. There was a lower level of angiopoietin 1 gene expression in EPCs cultured in high glucose concentrations. The addition of recombinant angiopoietin 1 significantly increased the vessel-forming capacity of EPCs cultured in high glucose concentration (35.3â€‰Â±â€‰2.0% to 48.8â€‰Â±â€‰2.7%), whereas the addition of angiopoietin 2 (a competitive inhibitor of angiopoietin 1) impaired the vessel-forming capacity of EPCs cultured in normal glucose concentration (51.8â€‰Â±â€‰1.3% to 41.3â€‰Â±â€‰0.6%). We conclude that the in vitro vessel-forming capacity of EPCs cultured in high glucose concentration is impaired due to low levels of angiopoietin 1.

In vitro vessel-forming capacity of endothelial progenitor cells in high glucose conditions.

Bei Typ 2 Diabetes die Beeintr&auml;chtigung der Gef&auml;&szlig;reparation Prozesse und Angiogenese sind aufgrund der endothelialen Vorl&auml;uferzellen (EPC) Zelle Dysfunktion. In dieser Studie haben wir eine quantitative Methodik zur EPC Funktion bewerten, indem unter Verwendung einer in-vitro-5-6-Carboxyfluorescein Diacetat Succinimidyl Ester-Kennzeichnung Schiff Bildung Probe festgestellt. Die EPCs wurden kultiviert, in drei verschiedenen Glukose-Konzentrationen (100, 189,5 und 295.5 mg/dl von D:-Glukose), normalen Steuerung und Diabetes mit entweder gute oder schlechte Blutzuckereinstellung bzw. darstellt. Wir fanden, dass die in-vitro-Schiff-bildenden Kapazit&auml;t in EPCs kultiviert in hohe Glukose-Konzentrationen im Vergleich zur normalen Kontrolle (43,4 &plusmn; 0,8 % und 34.7 &plusmn; 0,7 % vs. 50,8 &plusmn; 2,1 %) beeintr&auml;chtigt wurde. Wir studierten weitere Expression verschiedener Gene Schiff Bildung beteiligt. Es gab ein geringeren ANGPTL1 1 Genexpression in EPCs kultiviert in hohe Glukose-Konzentrationen. Der Zusatz von rekombinanten ANGPTL1 1 deutlich erh&ouml;ht die Schiff-bildenden Kapazit&auml;t des EPCs kultiviert in hohe Glukosekonzentration (35,3 &plusmn; 2,0 % auf 48,8 &plusmn; 2,7 %), w&auml;hrend die Zugabe von ANGPTL1 2 (ein kompetitiver Inhibitor der ANGPTL1 1) beeintr&auml;chtigt die Schiff-bildenden Kapazit&auml;t des EPCs kultiviert in normalen Glukosekonzentration (51.8 &plusmn; 1,3 % auf 41,3 &plusmn; 0,6 %). Wir schlie&szlig;en, dass die in-vitro-Schiff-bildenden Kapazit&auml;t des EPCs kultiviert in hohe Glukosekonzentration aufgrund des niedrigen des ANGPTL1 1 beeintr&auml;chtigt wird.

In-vitro-Schiff-bildenden Kapazit&auml;t von endothelialen Progenitorzellen bei hohen Glukose-Bedingungen.

Nel diabete di tipo 2, la compromissione dei processi di riparazione vascolare e angiogenesi sono a causa di disfunzione (EPC) cellule progenitrici endoteliali. In questo studio, abbiamo stabilito una metodologia quantitativa per valutare la funzione EPC utilizzando un 6 in vitro-chetone di fluoromethyl Diacetato succinimidil estere-etichettatura nave formazione dosaggio. L&#39;EPC sono stati coltivati in tre concentrazioni diverse di glucosio (100, 189,5 e 295.5 mg/dl di d-glucosio) che rappresenta il controllo normale e diabete con controllo glicemico buona o cattiva, rispettivamente. Abbiamo trovato che la capacit&agrave; di nave-formare in vitro &egrave; stata alterata in EPCs coltivate in concentrazioni di glucosio elevati rispetto al normale controllo (43,4 &plusmn; 0,8% e 34,7 &plusmn; 0,7% vs 50,8 &plusmn; 2,1%). Abbiamo studiato ulteriormente espressione di diversi geni coinvolti nella formazione del vaso. C&#39;era un basso livello di espressione genica angiopoietin 1 in EPCs coltivate in concentrazioni elevate di glucosio. L&#39;aggiunta di angiopoietin ricombinante 1 significativamente aumentato la capacit&agrave; della nave-formando delle EPCs coltivate in concentrazione elevata di glucosio (35,3 &plusmn; 2.0% al 48,8 &plusmn; 2,7%), mentre l&#39;aggiunta di angiopoietin 2 (un inibitore competitivo di angiopoietin 1) ha alterato la capacit&agrave; recipiente formando delle EPCs coltivate in concentrazione normale glucosio (51,8 &plusmn; 1,3% a 41,3 &plusmn; 0,6%). Possiamo concludere che la capacit&agrave; vaso-formare in vitro delle EPCs coltivate in concentrazione elevata di glucosio &egrave; alterata a causa di bassi livelli di angiopoietin 1.

Capacit&agrave; vaso-formare in vitro di cellule progenitrici endoteliali in condizioni di glicemia alta.

2 &#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x6E1B;&#x640D;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE; (EPC) &#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; in vitro 6 &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; EPC &#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x624B;&#x6CD5;&#x78BA;&#x7ACB;-carboxyfluorescein &#x4E8C;&#x9162;&#x9178;&#x8A66;&#x9A13;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB; &#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3002;Epc &#x306F;&#x3001;3 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F; &#xFF08;100&#x3001;189.5&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 295.5 &#x30DF;&#x30EA;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;/dl &#x3068; d&#xFF1A; &#x306E;-&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;) &#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x826F;&#x3044;&#x304B;&#x60AA;&#x3044;&#x8840;&#x7CD6;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; (43.4 &plusmn; 0.8% &#x304A;&#x3088;&#x3073; 34.7 &plusmn; 0.7% &#x5BFE; 50.8 &plusmn; 2.1%) &#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x9AD8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x57F9;&#x990A; EPCs &#x306E; in vitro &#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x80FD;&#x304C;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Angiopoietin 1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE; EPCs &#x9AD8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; angiopoietin 1 &#x6DFB;&#x52A0;&#x306F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B; angiopoietin 2 (angiopoietin 1 &#x306E;&#x7AF6;&#x4E89;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;) &#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x901A;&#x5E38;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6; (51.8 &plusmn; 1.3 %41.3 &plusmn; 0.6%) &#x3067;&#x57F9;&#x990A; EPCs &#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x80FD;&#x529B;&#x969C;&#x5BB3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x9AD8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6; (48.8 &plusmn; 2.7 &#xFF05; 35.3 &plusmn; 2.0%), &#x57F9;&#x990A; EPCs &#x306E;&#x5BB9;&#x5668;&#x6210;&#x5F62;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x9AD8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F; Epc &#x306E; in vitro &#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x80FD;&#x529B;&#x304C; angiopoietin 1 &#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x969C;&#x5BB3;&#x8005;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AD8;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6761;&#x4EF6;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; in vitro &#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3002;

&#xC81C; 2 &#xD615; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608;&#xAD00; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC640; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC758; &#xC7A5;&#xC560; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (EPC) &#xC5ED; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC608;&#xC815; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCCB4; &#xC678; 5-(6)-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; EPC &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC591;&#xC801; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC744; &#xC124;&#xB9BD;. 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; Epc &#xACBD;&#xC791; &#xD588;&#xB2E4; (100, 189.5, &#xBC0F; d:&#xC758; 295.5 mg/dl-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;) &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xC911; &#xC88B;&#xC740; &#xB610;&#xB294; &#xAC00;&#xB09C;&#xD55C; glycemic &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC744; &#xAC01;&#xAC01; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Epc &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC81C;&#xC5B4; (43.4 &plusmn; 0.8%&#xC640; 50.8 &plusmn; 2.1% &#xB300; 34.7 &plusmn; 0.7%)&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACBD;&#xC791;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131; &#xB2A5;&#xB825; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD50;&#xC591; Epc&#xC5D0;&#xC11C; angiopoietin 1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC774; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; angiopoietin 1&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xD06C;&#xAC8C; Epc angiopoietin 2 (angiopoietin 1&#xC758; &#xACBD;&#xC7C1;&#xC801; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;)&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xC788;&#xB294; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC758; Epc &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4; (51.8 &plusmn; 1.3 %41.3 &plusmn; 0.6%)&#xC5D0;&#xC11C; &#xACBD;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4; (35.3 &plusmn; 2.0 %48.8 &plusmn; 2.7%), &#xAD50;&#xC591;&#xC758; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xAD50;&#xC591; Epc&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131; &#xC6A9;&#xB7C9; angiopoietin 1 &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC778;&#xD574; &#xC7A5;&#xC560;&#xC778;&#xC740; &#xACB0;&#xB860; &#xC9C0;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xB192;&#xC740; &#xD608;&#xB2F9; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131; &#xB2A5;&#xB825;.

En la diabetes de tipo 2, la alteraci&oacute;n de los procesos de reparaci&oacute;n vascular y angiog&eacute;nesis son debido a disfunci&oacute;n endoteliales progenitoras de las c&eacute;lulas (EPC). En este estudio, se estableci&oacute; una metodolog&iacute;a cuantitativa para evaluar la funci&oacute;n EPC por usando un recipiente formaci&oacute;n in vitro 5-6-carboxyfluorescein diacetato succinimidyl an&aacute;lisis &eacute;ster-etiquetado. El EPC fueron cultivada en tres concentraciones diferentes de glucosa (100 y 189.5 295.5 mg/dl de D:-glucosa) que representa el control normal y diabetes con cualquier control de la glucemia buena o mala, respectivamente. Encontramos que la capacidad de formaci&oacute;n de buque in vitro fue deteriorada en EPCs cultivadas en las concentraciones de glucosa alta en comparaci&oacute;n con el control normal (43,4 &plusmn; 0,8% y 34,7 &plusmn; 0.7% vs 50,8 &plusmn; 2,1%). M&aacute;s estudiamos la expresi&oacute;n de varios genes implicados en la formaci&oacute;n de vasos. Hubo un menor nivel de expresi&oacute;n g&eacute;nica de angiopoyetina 1 en EPCs cultivadas en las concentraciones de glucosa alta. La adici&oacute;n de angiopoyetina recombinante 1 aument&oacute; significativamente la capacidad de formaci&oacute;n de buque de EPCs cultivadas en la concentraci&oacute;n de glucosa alta (35,3 &plusmn; 2.0% a 48,8 &plusmn; 2.7%), mientras que la adici&oacute;n de angiopoyetina 2 (un inhibidor competitivo de la angiopoyetina 1) deteriorada la capacidad de formaci&oacute;n de buque de EPCs cultivadas en la concentraci&oacute;n de glucosa normal (51,8 &plusmn; 1.3% 41.3 &plusmn; 0,6%). Concluimos que la capacidad de formaci&oacute;n de buque in vitro de EPCs cultivadas en la concentraci&oacute;n de glucosa alta se deteriora debido a bajos niveles de angiopoyetina 1.

Article	Year
Alginate microcapsule for propagation and directed differentiation of hESCs to definitive endoderm. Biomaterials\| PubMed ID: 19833385	2010
CD14-/CD34+ is the founding population of umbilical cord blood-derived endothelial progenitor cells and angiogenin1 is an important factor promoting the colony formation. Annals of hematology\| PubMed ID: 21808991	2012
In vitro vessel-forming capacity of endothelial progenitor cells in high glucose conditions. Annals of hematology\| PubMed ID: 21822618	2012

Methichit Chayosumrit

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