the-superficial-inferior-epigastric-artery-axial-flap-to-study

The Superficial Inferior Epigastric Artery Axial Flap to Study Ischemic Preconditioning Effects in a Rat Model

Fasciocutaneous flaps (FCF) have become the gold standard for complex defect reconstruction in plastic and reconstructive surgery. This muscle-sparing ...

Massachusetts General Hospital

Harvard Medical School

&#x4EE5;&#x524D;&#x88AB;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8BE5; p21 &#x4E0D;&#x4EC5;&#x4F5C;&#x4E3A; CDK &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x4E5F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8F6C;&#x5F55; co-repressor &#x529F;&#x80FD;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x3002;&#x8C03;&#x67E5; p21 &#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7814;&#x7A76;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8BF1;&#x5BFC; p21 &#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x4E3B;&#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4ECB;&#x5BFC; p21 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4EBA;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB; (K562)&#xFF0C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x9635;&#x5217;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;p21 &#x8FC5;&#x901F;&#x548C;&#x5F3A;&#x70C8;&#x538B;&#x6291;&#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x4E0E;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x6B21;&#x6570;&#x7684; mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5F3A;&#x70C8;&#x4E0B;&#x8C03;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x662F; CCNE2 (&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; E2 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF09;&#x3002;K562 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; p21 &#x7684; N-&#x672B;&#x7AEF;&#x533A;&#x57DF;&#x662F;&#x9547;&#x538B;&#x7684; CCNE2 &#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9700;&#x8981;&#x3002;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6C89;&#x6DC0;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5; p21 &#x88AB;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x4EBA;&#x7C7B; CCNE2 &#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x538B;&#x6291; p21 &#x57FA;&#x56E0;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8D77;&#x59CB;&#x70B9;&#x9644;&#x8FD1;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;p21 &#x538B;&#x6291; K562 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; CCNE2 &#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6784;&#x9020;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x4FE1;&#x606F;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A; CDE &#x6BCD;&#x9898;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x5927;&#x591A;&#x6570; p21 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5; p21 &#x65BD;&#x52A0;&#x538B;&#x5236;&#x6027;&#x5F71;&#x54CD;&#x6709;&#x5173;&#x6570;&#x76EE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7; S &#x671F;&#x548C;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5C06;&#x4ECB;&#x5BFC; p21 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x7531; CDKs &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

&#x4F5C;&#x4E3A; S &#x671F;&#x548C;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x8C03;&#x63A7;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55; co-repressor p21&#x3002;

It has been previously described that p21 functions not only as a CDK inhibitor but also as a transcriptional co-repressor in some systems. To investigate the roles of p21 in transcriptional control, we studied the gene expression changes in two human cell systems. Using a human leukemia cell line (K562) with inducible p21 expression and human primary keratinocytes with adenoviral-mediated p21 expression, we carried out microarray-based gene expression profiling. We found that p21 rapidly and strongly repressed the mRNA levels of a number of genes involved in cell cycle and mitosis. One of the most strongly down-regulated genes was CCNE2 (cyclin E2 gene). Mutational analysis in K562 cells showed that the N-terminal region of p21 is required for repression of gene expression of CCNE2 and other genes. Chromatin immunoprecipitation assays indicated that p21 was bound to human CCNE2 and other p21-repressed genes gene in the vicinity of the transcription start site. Moreover, p21 repressed human CCNE2 promoter-luciferase constructs in K562 cells. Bioinformatic analysis revealed that the CDE motif is present in most of the promoters of the p21-regulated genes. Altogether, the results suggest that p21 exerts a repressive effect on a relevant number of genes controlling S phase and mitosis. Thus, p21 activity as inhibitor of cell cycle progression would be mediated not only by the inhibition of CDKs but also by the transcriptional down-regulation of key genes.

p21 as a transcriptional co-repressor of S-phase and mitotic control genes.

Il a &eacute;t&eacute; pr&eacute;c&eacute;demment d&eacute;crit que p21 fonctionne non seulement comme un inhibiteur de la CDK mais aussi comme un co-r&eacute;presseur transcriptional dans certains syst&egrave;mes. Afin d&#39;&eacute;tudier les r&ocirc;les de p21 dans contr&ocirc;le transcriptionnel, nous avons &eacute;tudi&eacute; les changements d&#39;expression de g&egrave;ne dans les deux syst&egrave;mes de cellules humaines. &Agrave; l&#39;aide d&#39;une lign&eacute;e de cellules leuc&eacute;miques humaines (K562) avec expression inductible p21 et des k&eacute;ratinocytes humains primaires avec l&#39;expression de p21 ad&eacute;noviraux m&eacute;diation, nous avons effectu&eacute; profil d&#39;expression g&eacute;nique de puces. Nous avons trouv&eacute; que p21 rapidement et fortement r&eacute;prim&eacute; les taux d&#39;ARNm d&#39;un certain nombre de g&egrave;nes impliqu&eacute;s dans le cycle cellulaire et la mitose. Un des plupart des g&egrave;nes fortement diminu&eacute;es &eacute;tait CCNE2 (g&egrave;ne de cycline E2). Analyse mutationnelle dans les cellules K562 a montr&eacute; que la r&eacute;gion N-terminale de p21 est requise pour la r&eacute;pression de l&#39;expression de g&egrave;ne de CCNE2 et d&#39;autres g&egrave;nes. Essais d&#39;immunopr&eacute;cipitation de la chromatine a indiqu&eacute; que p21 &eacute;tait li&eacute; &agrave; la CCNE2 humaine et autre g&egrave;ne g&egrave;nes r&eacute;prim&eacute;s p21 &agrave; proximit&eacute; du site d&#39;initiation de la transcription. En outre, p21 r&eacute;prim&eacute; des constructions humaines de promoteur-lucif&eacute;rase CCNE2 dans les cellules K562. L&#39;analyse bioinformatique a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que le motif de la CDE est pr&eacute;sent dans la plupart des promoteurs des g&egrave;nes p21 r&eacute;glement&eacute;s. Au total, les r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que p21 exerce un effet r&eacute;pressif sur un nombre pertinent de g&egrave;nes qui contr&ocirc;lent la phase S et la mitose. Ainsi, l&#39;activit&eacute; de la p21 comme inhibiteur de la progression du cycle cellulaire serait &ecirc;tre un non seulement par l&#39;inhibition de cdk2, mais aussi par la down-r&eacute;gulation transcriptionnelle des g&egrave;nes principaux.

P21 comme un co-r&eacute;presseur transcriptionnel de la phase S et des g&egrave;nes de r&eacute;gulation mitotique.

Es wurde bereits beschrieben, dass p21 fungiert nicht nur als ein CDK-Inhibitor, sondern auch als ein transkriptionelle Co-repressor in einigen Systemen. Um die Rollen von p21 transkriptionelle Kontrolle zu untersuchen, studiert wir die Gen-Ausdruck-&Auml;nderungen in zwei menschlichen Zellsysteme. Verwenden eine menschliche Leuk&auml;mie-Zelllinie (K562) mit Induktion p21 Ausdruck und menschliche prim&auml;ren Keratinozyten mit adenoviral-vermittelte p21 Ausdruck, durchgef&uuml;hrt wir Microarray-basierte gen Expression profiling. Wir fanden, dass das p21 rasch und stark unterdr&uuml;ckt die mRNA-Niveaus einer Anzahl von Genen, die im Zellzyklus und Mitose. Die meisten stark unten-geregelt-Gene geh&ouml;rte CCNE2 (cyclin E2-Gen). Teilhabende Analyse in K562-Zellen zeigte, dass die N-terminalen Region p21 f&uuml;r Unterdr&uuml;ckung der Genexpression von CCNE2 und anderen Genen erforderlich ist. Chromatin Immunopr&auml;zipitation Proben gaben an, dass p21 an menschlichen CCNE2 und andere Gene p21-unterdr&uuml;ckt-gen in der N&auml;he der Transkription Start Site gebunden war. Dar&uuml;ber hinaus unterdr&uuml;ckt p21 menschlichen CCNE2 Projekttr&auml;ger-Luciferase-Konstrukte in K562-Zellen. Bioinformatische Analyse ergab, dass das CDE-Motiv in den meisten der F&ouml;rderer der p21-regulierten Gene vorhanden ist. Insgesamt empfehlen die Ergebnisse, dass p21 eine repressive Wirkung auf einer entsprechenden Anzahl von Genen, die Kontrolle der Interphase und Mitose &uuml;bt. P21-Aktivit&auml;t als Inhibitor der Zellzyklusprogression w&uuml;rde daher nicht nur durch die Hemmung der CDKs, sondern auch durch die transkriptionelle Herunterregulation Schl&uuml;sselgenen vermittelt werden.

P21 als ein transkriptionelle Co-repressor der S-Phase und mitotische Kontrolle Gene.

&Egrave; stata descritta in precedenza che p21 funziona non solo come un inibitore CDK ma anche come un co-repressor transcriptional in alcuni sistemi. Per indagare i ruoli di p21 nel controllo trascrizionale, abbiamo studiato i cambiamenti di espressione genica in due sistemi di cellule umane. Utilizzando una linea cellulare di leucemia umana (K562) con espressione inducibile p21 e cheratinociti umani primari con espressione di p21 adenovirali-mediata, abbiamo effettuato basata su microarray gene expression profiling. Abbiamo trovato che p21 rapidamente e fortemente represso i livelli di mRNA di un certo numero di geni coinvolti nel ciclo cellulare e mitosi. Uno della maggior parte dei geni down-regolato fortemente era CCNE2 (gene cyclin E2). Analisi mutazionale nelle cellule K562 ha mostrato che la regione N-terminale di p21 &egrave; richiesta per la repressione dell&#39;espressione di gene di CCNE2 e di altri geni. Analisi di immunoprecipitazione della cromatina indicato che quello p21 &egrave; stato associato a CCNE2 umana e altri gene p21-represso geni in prossimit&agrave; del sito di inizio trascrizione. Inoltre, p21 represso costrutti di promotore-luciferase CCNE2 umani in cellule K562. L&#39;analisi bioinformatica ha rivelato che il motivo del CDE &egrave; presente nella maggior parte dei promotori dei geni p21-regolato. Complessivamente, i risultati suggeriscono che p21 esercita un effetto repressivo su un rilevante numero di geni che controllano la fase S e mitosi. Cos&igrave;, p21 attivit&agrave; come inibitore della progressione del ciclo cellulare potrebbe essere mediata non solo tramite l&#39;inibizione di CDKs, ma anche dalla down-regulation trascrizionale dei geni chiave.

P21 come un co-repressor trascrizionale dei geni di controllo mitotic e fase S.

&#x4EE5;&#x524D;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305D;&#x306E; p21 CDK &#x30A4;&#x30F3;&#x30D2;&#x30D3;&#x30BF;&#x30FC;&#x8EE2;&#x5199;&#x5185;&#x4F53;&#x30B3;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x307F;&#x306A;&#x3089;&#x305A;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x4E00;&#x90E8;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;P21 &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5909;&#x66F4; 2 &#x3064;&#x306E;&#x3072;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x3067;&#x52C9;&#x5F37;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A; (K562) &#x8A98;&#x5C0E; p21 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30D2;&#x30C8;&#x89D2;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5A92;&#x4ECB; p21 &#x5F0F;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x305D;&#x306E; p21 &#x6025;&#x901F;&#x3068;&#x5F37;&#x304F;&#x93AE;&#x5727;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; mRNA &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5F37;&#x304F;&#x8ABF;&#x6574;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3060;&#x3063;&#x305F; CCNE2 (&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; E2 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;)&#x3002;K562 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x89E3;&#x6790; p21 &#x306E; N &#x672B;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF;&#x304C; CCNE2 &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6291;&#x5727;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x306F; p21 &#x4EBA;&#x9593; CCNE2 &#x3068;&#x4ED6;&#x306E; p21 &#x6291;&#x5727;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8EE2;&#x5199;&#x958B;&#x59CB;&#x90E8;&#x4F4D;&#x4ED8;&#x8FD1;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;p21 K562 &#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; CCNE2 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x3092;&#x6291;&#x5727;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Bioinformatic &#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;CDE &#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E; p21 &#x5236;&#x5FA1;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x305D;&#x306E; p21 S &#x671F;&#x3068;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x6570;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3068;&#x3057;&#x3066; p21 &#x6D3B;&#x52D5; Cdk &#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30AD;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x3002;

p21 &#x306F;&#x8EE2;&#x5199;&#x5185;&#x4F53;&#x30B3;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC; S &#x671F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x5236;&#x5FA1;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3002;

&#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC220; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xADF8; p21 transcriptional co-repressor&#xB85C; &#xB610;&#xD55C; CDK &#xC5B5;&#xC81C; &#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC77C;&#xBD80; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. P21 transcriptional &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB450; &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC120; (K562)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; p21 &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; keratinocytes adenoviral &#xC911;&#xC7AC; p21 &#xC2DD;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; microarray &#xAE30;&#xBC18; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xC2E4;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; p21 &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xC5B5;&#xC555; &#xB41C; mRNA &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xBC0F; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; CCNE2 (cyclin e 2 &#xC9C4;). K562 &#xC140; mutational &#xBD84;&#xC11D; p21&#xC758; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC9C0;&#xC5ED; ccne2&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. Chromatin immunoprecipitation &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xADF8; p21 &#xC778;&#xAC04; CCNE2 &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xC804;&#xC790; p21 &#xC5B5;&#xC555; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; &#xC2DC;&#xC791; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, p21 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; CCNE2 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xAD6C;&#xBB38; K562 &#xC140;&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC555;. Bioinformatic &#xBD84;&#xC11D; CDE &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; p21 &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC544;&#xC608;, &#xACB0;&#xACFC; p21 S &#xC704;&#xC0C1;&#xACFC; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD574;&#xB2F9; &#xBC88;&#xD638;&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC555; &#xC801;&#xC778; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD575;&#xC2EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; transcriptional &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC815; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; Cdks&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC9C4;&#xD589; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB85C; p21 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xAC83;.

p21 S &#xC704;&#xC0C1;&#xACFC; mitotic &#xC81C;&#xC5B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; transcriptional co-repressor&#xB85C;.

Se ha descrito previamente que p21 funciona no s&oacute;lo como un inhibidor de la CDK sino tambi&eacute;n como un co-repressor transcripcional en algunos sistemas. Para investigar el papel de p21 en control transcripcional, estudiamos los cambios de expresi&oacute;n g&eacute;nica en dos sistemas de c&eacute;lulas humanas. Usando una l&iacute;nea de c&eacute;lulas de leucemia humana (K562) con expresi&oacute;n de p21 inducible y keratinocytes humanos primarios con expresi&oacute;n de p21 adenoviral-mediada, llevamos a cabo el perfil de expresi&oacute;n g&eacute;nica con microarrays-basado. Encontramos que p21 r&aacute;pidamente y fuertemente reprimidos los niveles de mRNA de un n&uacute;mero de genes implicados en el ciclo celular y mitosis. Uno de la mayor&iacute;a de los genes fuertemente regula fue CCNE2 (cyclin E2 gene). El an&aacute;lisis mutacional en c&eacute;lulas K562 demostr&oacute; que la regi&oacute;n N-terminal de p21 es necesaria para la represi&oacute;n de la expresi&oacute;n g&eacute;nica de CCNE2 y otros genes. Ensayos de inmunoprecipitaci&oacute;n de cromatina indican que p21 deb&iacute;a CCNE2 humano y otro gen p21-reprime genes en las cercan&iacute;as del sitio de inicio de la transcripci&oacute;n. Por otra parte, p21 hab&iacute;a reprimido creaciones humanas de promotor-luciferasa CCNE2 en las c&eacute;lulas K562. An&aacute;lisis bioinform&aacute;tico revelaron que el motivo de la CDE est&aacute; presente en la mayor&iacute;a de los promotores de los genes regulados por p21. En conjunto, los resultados sugieren que p21 ejerce un efecto represivo sobre un n&uacute;mero relevante de genes que controlan la fase S y mitosis. Por lo tanto, ser mediado p21 actividad como inhibidor de la progresi&oacute;n del ciclo celular, no s&oacute;lo por la inhibici&oacute;n de las CDKs, sino tambi&eacute;n por la abajo-regulaci&oacute;n transcripcional de genes clave.

Jose Reyes

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications