odorant-induced-responses-recorded-from-olfactory-receptor-neurons

Odorant-induced Responses Recorded from Olfactory Receptor Neurons using the Suction Pipette Technique

Animals sample the odorous environment around them through the chemosensory systems located in the nasal cavity. Chemosensory signals affect complex ...

Monell Chemical Senses Center

&#x9F20;&#x6807;&#x8FDE;&#x63A5;&#x5230;&#x55C5;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#x6587;&#x5316;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E0E;&#x6EDA;&#x5B50;&#x7BA1;&#x6280;&#x672F;&#x4ECE;&#x4EA7;&#x540E;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4ECB;&#x4E4E; 13 &#x548C; 66 &#x5929;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC; electroolfactograms (EOGs) &#x5728;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E0D;&#x540C;&#x5929;&#x4F53;&#x5916; (DIV) &#x8FBE; 7 DIV&#xFF0C;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4ED6;&#x4EEC; EOGs &#x4ECE;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6025;&#x6027;&#x7B79;&#x5907;&#x5DE5;&#x4F5C; (0 DIV&#xFF09;&#x3002;EOG &#x56DE;&#x5E94; 2 &#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E0B; 1 mM &#x6216; 100 microM &#x4E0B;&#x8DCC; 2 &#x548C; 5 &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6C14;&#x5473;&#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x632F;&#x5E45; DIV &#x76F8;&#x6BD4; 0 &#x4E13;&#x533A;&#x54CD;&#x5E94;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x4E3A; 57%&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x7528;&#x9EC4;&#x560C;&#x5464;&#x78F7;&#x9178;&#x4E8C;&#x916F;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; 3-&#x5F02;&#x4E01;&#x57FA;-1-&#x7532;&#x57FA; &#xFF08;IBMX&#xFF09; &#x6765;&#x89E6;&#x53D1;&#x7ED5;&#x8FC7;&#x6C14;&#x5473;&#x53D7;&#x4F53;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x55C5;&#x89C9;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7EA7;&#x8054;&#x3002;500 MicroM IBMX EOG &#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x632F;&#x5E45;&#x660E;&#x663E;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;&#x5728;&#x591A;&#x8FBE; 6 DIV &#x6216; 0 DIV&#xFF0C;&#x6587;&#x5316;&#x5E76;&#x4E0D;&#x54CD;&#x5E94;&#x6587;&#x5316;&#x4E4B;&#x95F4; 2 &#x548C; 5 DIV &#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x767E;&#x5206;&#x6BD4;&#x4E3A; 72%&#x3002;IBMX 7 DIV &#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5230;&#x7684;&#x5242;&#x91CF;-&#x53CD;&#x5E94;&#x66F2;&#x7EBF;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5728; 0 &#x4E13;&#x533A;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;IBMX niflumic &#x9178;&#xFF0C;&#x9499;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6C2F;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x963B;&#x6EDE;&#x5242;&#x963B;&#x6B62; EOG &#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x767E;&#x5206;&#x6BD4;&#x4E0D;&#x662F;&#x517B;&#x6B96;&#x6216;&#x6025;&#x6027;&#x7684;&#x7B79;&#x5907;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x4E2D;&#x660E;&#x663E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x3002;

&#x4ECE;&#x5668;&#x5B98;&#x6587;&#x5316;&#x4ECE;&#x4EA7;&#x540E;&#x5C0F;&#x9F20;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7684; Electroolfactogram &#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

Organotypic cultures of the mouse olfactory epithelium connected to the olfactory bulb were obtained with the roller tube technique from postnatal mice aged between 13 and 66 days. To test the functionality of the cultures, we measured electroolfactograms (EOGs) at different days in vitro (DIV), up to 7 DIV, and we compared them with EOGs from identical acute preparations (0 DIV). Average amplitudes of EOG responses to 2 mixtures of various odorants at concentrations of 1 mM or 100 microM decreased in cultures between 2 and 5 DIV compared with 0 DIV. The percentage of responsive cultures was 57%. We also used the phosphodiesterase inhibitor 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX) to trigger the olfactory transduction cascade bypassing odorant receptor activation. Average amplitudes of EOG responses to 500 microM IBMX were not significantly different in cultures up to 6 DIV or 0 DIV, and the average percentage of responsive cultures between 2 and 5 DIV was 72%. The dose-response curve to IBMX measured in cultures up to 7 DIV was similar to that at 0 DIV. Moreover, the percentage of EOG response to IBMX blocked by niflumic acid, a blocker of Ca-activated Cl channels, was not significantly different in cultured or acute preparations.

Electroolfactogram responses from organotypic cultures of the olfactory epithelium from postnatal mice.

Cultures organotypiques de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium olfactif de la souris connect&#xE9;e au bulbe olfactif ont &#xE9;t&#xE9; obtenus avec la technique du tube rouleau de souris postnatales &#xE2;g&#xE9;s entre 13 et 66 jours. Pour tester la fonctionnalit&#xE9; des cultures, nous avons mesur&#xE9; electroolfactograms (EOGs) &#xE0; des jours diff&#xE9;rents in vitro (DIV), jusqu&#x26;#39;&#xE0; 7 DIV, et nous les avons compar&#xE9;s avec EOGs de pr&#xE9;parations identiques aigu&#xEB;s (0 DIV). Amplitudes moyennes de EOG r&#xE9;ponses &#xE0; 2 m&#xE9;langes de substances odorantes diff&#xE9;rents &#xE0; des concentrations de 1 mM ou 100 microM diminu&#xE9; dans des cultures entre 2 et 5 par rapport &#xE0; 0 DIV DIV. Le pourcentage de cultures sensibles &#xE9;tait de 57%. Nous avons &#xE9;galement utilis&#xE9; l&#x26;#39;inhibiteur de la phosphodiest&#xE9;rase 3-isobutyl-1-m&#xE9;thylxanthine (IBMX) pour d&#xE9;clencher la cascade de transduction olfactive contournant l&#x26;#39;activation du r&#xE9;cepteur odorant. Amplitudes moyennes de EOG r&#xE9;ponses &#xE0; 500 microM IBMX n&#x26;#39;&#xE9;taient pas significativement diff&#xE9;rents dans les cultures jusqu&#x26;#39;&#xE0; 6 ou 0 DIV DIV, et le pourcentage moyen des cultures sensibles entre 2 et 5 DIV a &#xE9;t&#xE9; de 72%. La courbe dose-r&#xE9;ponse &#xE0; IBMX mesur&#xE9;e dans des cultures jusqu&#x26;#39;&#xE0; 7 DIV &#xE9;tait semblable &#xE0; celle &#xE0; 0 DIV. En outre, le pourcentage de r&#xE9;ponse &#xE0; l&#x26;#39;EOG IBMX bloqu&#xE9; par l&#x26;#39;acide niflumique, un bloqueur des canaux Cl Ca-activ&#xE9;s, n&#x26;#39;&#xE9;tait pas significativement diff&#xE9;rente dans les pr&#xE9;parations de culture ou aigu&#xEB;.

R&#xE9;ponses Electroolfactogram de cultures organotypiques de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium olfactif de souris postnatale

Organotypische Kulturen von der Maus olfaktorischen Epithel mit den Riechkolben verbunden wurden mit der Walze-Rohr-Technik von postnatalen M&auml;usen im Alter zwischen 13 und 66 Tage erzielt. Um die Funktionalit&auml;t der Kulturen zu testen, haben wir Electroolfactograms (EOGs) an verschiedenen Tagen in-vitro (DIV), bis zu 7 DIV, gemessen und verglichen wir sie mit EOGs aus identischen akute Zubereitungen (0 DIV). Durchschnittliche Amplituden der EOG Antworten zu 2 Mischungen von verschiedenen Ger&uuml;chen in Konzentrationen von 1 mM oder 100 MicroM sank in Kulturen zwischen 2 und 5 DIV gegen&uuml;ber 0 DIV. Der Prozentsatz der reaktionsschnelle Kulturen war 57 %. Wir nutzten die Phosphodiesterase Inhibitor 3-Isobutyl-1-Methylxanthine (IBMX) ausl&ouml;sen die olfaktorischen Signaltransduktion-Kaskade Odorant-Aktivierung zu umgehen. Durchschnittliche Amplituden der EOG Antworten auf 500 MicroM IBMX waren nicht signifikant verschieden Kulturen bis zu 6 DIV oder 0 DIV, und der durchschnittliche Anteil der reaktionsschnelle Kulturen zwischen 2 und 5 DIV war 72 %. Die Dosis-Wirkungs-Kurve zu IBMX gemessen in Kulturen bis zu 7 DIV war &auml;hnlich wie bei 0 DIV. Dar&uuml;ber hinaus war der Prozentsatz der EOG Reaktion auf IBMX geblockt Niflumic S&auml;ure, ein Blocker aktiviert, Ca Cl-Kan&auml;le, nicht signifikant verschieden in kultivierten oder akute Zubereitungen.

Electroolfactogram Antworten von organotypische Kulturen das olfaktorische Epithel postnatale M&auml;use.

Colture organotypic dell&#39;epitelio olfattivo del mouse collegato al bulbo olfattivo sono stati ottenuti con la tecnica del tubo rullo da topi postnatali, di et&agrave; compresa tra 13 e 66 giorni. Per verificare la funzionalit&agrave; delle culture, abbiamo misurato electroolfactograms (EOGs) in giorni diversi in vitro (DIV), fino a 7 DIV, e li abbiamo confrontato con EOGs da preparazioni acute identici (0 DIV). Ampiezza media delle risposte EOG 2 miscele di vari odorizzazione a concentrazioni di 1 mM o 100 microM diminuito nelle culture tra 2 e 5 DIV rispetto con 0 DIV. La percentuale di reattive culture era 57%. Abbiamo anche usato la fosfodiesterasi inibitore della 3-isobutil-1-methylxanthine (IBMX) per innescare la cascata di trasduzione olfattiva bypassando odorant attivazione del recettore. Ampiezza media delle risposte EOG 500 microM IBMX non era significativamente differenti in culture fino a 6 DIV o 0 DIV, e la percentuale media di reattive culture tra 2 e 5 DIV era del 72%. La curva dose-risposta a IBMX misurata in culture fino a 7 DIV era simile a quella a 0 DIV. Inoltre, la percentuale di risposta EOG IBMX bloccato da acido di niflumic, un bloccante dei canali del Cl Ca-attivato, non era significativamente diversa nei preparativi colte o acute.

Electroolfactogram risposte da colture organotypic dell&#39;epitelio olfattivo da topi postnatali.

&#x55C5;&#x7403;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x5668;&#x5B98;&#x57F9;&#x990A;&#x306F;&#x3001;13&#x3068;66&#x65E5;&#x6B73;&#x751F;&#x5F8C;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E9;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x6CD5;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x5927;7 DIV&#x306B;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x65E5;&#xFF08;DIV&#xFF09;&#x3067;electroolfactograms&#xFF08;EOGs&#xFF09;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#xFF08;0 DIV&#xFF09;&#x304B;&#x3089;EOGs&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 1 mM&#x307E;&#x305F;&#x306F;100&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x5302;&#x3044;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;2&#x3078;&#x306E;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3092;EOG&#x306E;&#x632F;&#x5E45;&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x5024;&#x306F;&#x3001;0 DIV&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;2&#x301C;5 DIV&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306F;57&#xFF05;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x55C5;&#x899A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9;&#x3059;&#x308B;&#x55C5;&#x899A;&#x4F1D;&#x9054;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;3  - &#x30A4;&#x30BD;&#x30D6;&#x30C1;&#x30EB;-1  - &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;IBMX&#xFF09;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30B8;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 500&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;IBMX&#x3078;&#x306E;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3092;EOG&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x632F;&#x5E45;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x5927;6&#x3064;&#x306E;DIV&#x307E;&#x305F;&#x306F;0 DIV&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3067;&#x306F;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3001;2&#x3068;5 DIV&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x5272;&#x5408;&#x306F;72&#xFF05;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; 7 DIV&#x306B;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x307E;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;IBMX&#x306E;&#x7528;&#x91CF; - &#x53CD;&#x5FDC;&#x66F2;&#x7DDA;&#x306F;&#x3001;0 DIV&#x3067;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3068;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30CB;&#x30D5;&#x30EB;&#x30E0;&#x9178;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;Cl&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AB;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;IBMX&#x3001;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;EOG&#x306E;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306F;&#x57F9;&#x990A;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6025;&#x6027;&#x306E;&#x88FD;&#x5264;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x751F;&#x5F8C;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x5668;&#x5B98;&#x57F9;&#x990A;&#x304B;&#x3089;Electroolfactogram&#x5FDC;&#x7B54;

&#xD6C4; &#xAC01; &#xC804;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; Organotypic &#xBB38;&#xD654;&#xB294; 13 ~ 66 &#xC77C; &#xC138; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB864;&#xB7EC; &#xD29C;&#xBE0C; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xD68D;&#xB4DD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBB38;&#xD654; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC77C; &#xCCB4; &#xC678; (DIV), &#xCD5C;&#xB300; 7 DIV&#xC5D0; electroolfactograms (EOGs)&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xAE09;&#xC131; &#xC900;&#xBE44; (0 DIV)&#xC5D0;&#xC11C; Eogs&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50;. EOG &#xC751;&#xB2F5; 1mm &#xB610;&#xB294; 100 microM &#xBB38;&#xD654; 2&#xC640; 5 &#xC0AC;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; odorants&#xC758; 2 &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xC9C4;&#xD3ED; DIV&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 0 &#xD300; &#xC751;&#xB2F5; &#xBB38;&#xD654; &#xBE44;&#xC728; 57% &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD6C4; &#xAC01; &#xBCC0;&#xD658; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC; odorant &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC6B0;&#xD68C; &#xD558;&#xB294; &#xD3EC;&#xC2A4; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;. EOG &#xC751;&#xB2F5; 500 microM IBMX&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xC9C4;&#xD3ED; 6 DIV &#xB610;&#xB294; 0 DIV &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xC751;&#xB2F5; &#xBB38;&#xD654; &#xC0AC;&#xC774; 2, 5 DIV&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xBC31;&#xBD84;&#xC728;&#xC740; 72%. &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC751;&#xB2F5; &#xACE1;&#xC120; IBMX 7 DIV &#xCD5C;&#xB300; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; 0&#xC5D0;&#xC11C;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC0AC;&#xC5C5;&#xBD80; &#xB610;&#xD55C;, EOG &#xC751;&#xB2F5; IBMX niflumic &#xC0B0;, Cl Ca &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xCC28;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xBE44;&#xC728; &#xAD50;&#xC591; &#xB610;&#xB294; &#xAE09;&#xC131; &#xC900;&#xBE44;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC544;&#xB2C8;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xC0B0; &#xD6C4; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; organotypic &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; Electroolfactogram &#xC751;&#xB2F5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cultivos organot&#xED;picos del epitelio olfatorio del rat&#xF3;n conectado al bulbo olfatorio se obtuvieron con la t&#xE9;cnica del tubo del rodillo de los ratones postnatales de entre 13 y 66 d&#xED;as. Para probar la funcionalidad de las culturas, que mide electroolfactograms (EOGs) en diferentes d&#xED;as in vitro (DIV), hasta 7 DIV, y las hemos comparado con EOGs de id&#xE9;nticos preparados agudas (0 DIV). Amplitudes promedio de EOG respuestas a 2 mezclas de sustancias odor&#xED;feras diversas a concentraciones de 1 mM o 100 microM disminuci&#xF3;n en cultivos entre 2 y 5 DIV comparado con 0 DIV. El porcentaje de cultivos sensibles fue de 57%. Tambi&#xE9;n se utiliz&#xF3; el inhibidor de la fosfodiesterasa 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX) para activar la cascada de transducci&#xF3;n olfativa evitando la activaci&#xF3;n del receptor odorante. Amplitudes medias de las respuestas a EOG 500 microM IBMX no fueron significativamente diferentes en las culturas de hasta 6 o DIV DIV 0, y el porcentaje medio de respuesta de las culturas entre 2 y 5 DIV fue del 72%. La curva dosis-respuesta para IBMX medido en cultivos de hasta 7 DIV fue similar a la de 0 DIV. Adem&#xE1;s, el porcentaje de EOG respuesta a IBMX bloqueado por el &#xE1;cido nifl&#xFA;mico, un bloqueador del Ca canales activados Cl, no fue significativamente diferente en las preparaciones cultivadas o aguda.

Respuestas Electroolfactogram de cultivos organot&#xED;picos del epitelio olfatorio de los ratones postnatales

&#x8D85;&#x6781;&#x5316;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7535;&#x6D41; (Ih) &#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x4E2D;&#x592E;&#x548C;&#x5468;&#x56F4;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;Ih &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7281;&#x9F3B;&#x5668;&#x5B98; &#xFF08;VNO&#xFF09; &#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x4E0D;&#x597D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x7684; Ih &#x4ECE;&#x6025;&#x6027;&#x5207;&#x7247;&#x7684; VNO &#x9F20;&#x6807;&#x7684;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x7535;&#x538B;&#x94B3;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;Ih &#x67E5;&#x660E;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3001; &#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x548C;&#x5835;&#x585E;&#x7684; Cs + &#x6216; ZD-7288 &#x51C6;&#x8BC1;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x53D7;&#x4F53;&#x963B;&#x6EDE;&#x5242;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x3001; &#x6FC0;&#x6D3B;&#x5242;&#x7684;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5411;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x66F2;&#x7EBF;&#x4E3A; Ih &#x5C11;&#x8D1F;&#x7535;&#x4F4D;&#x3002;&#x4E0E;&#x90A3;&#x4E9B; Ih VNO &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x793A;&#x8D85;&#x6781;&#x5316;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x95E8;&#x63A7; (HCN) &#x901A;&#x9053;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; VNO RT-PCR &#x5B9E;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E; Ih &#x81F4; HCN2 &#x548C;/&#x6216; HCN4 &#x4E9A;&#x57FA;&#x3002;&#x5728;&#x7535;&#x6D41;&#x94B3;&#x5F55;&#x97F3;&#xFF0C;&#x963B;&#x6B62;&#x4E0E; ZD 7288 Ih &#x8BF1;&#x5BFC;&#x6781;&#x5316;&#x7684; 5.1 mV&#xFF0C;&#x8F93;&#x5165;&#x7535;&#x963B;&#x589E;&#x5927;&#xFF0C;&#x5F15;&#x8D77;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x5728;&#x5C0F;&#x7535;&#x6D41;&#x6CE8;&#x5C04;&#xFF0C;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x4E0B;&#x964D;&#x548C;&#x4E0D;&#x80FD;&#x4FEE;&#x6539;&#x5927;&#x7535;&#x6D41;&#x6CE8;&#x5165;&#x6240;&#x8BF1;&#x53D1;&#x7684;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x3002;&#x5B83;&#x6240;&#x793A; VNO &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x67D0;&#x4E9B;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x4F46;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x540E;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x963B;&#x6EDE;&#x5242;&#x7684;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x6781;&#x5316;&#x7684; 5.1 mV &#x4E2D; 11 14 &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x57FA;&#x5E95;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8C03;&#x8282;&#x4F11;&#x606F;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x9F20;&#x6807; VNO &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x8FBE; HCN2 &#x548C;/&#x6216; HCN4 &#x4E9A;&#x57FA;&#x548C; Ih &#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x4F11;&#x606F;&#x7684;&#x819C;&#x6F5C;&#x529B;&#x548C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x523A;&#x6FC0;&#x9608;&#x503C;&#x7684;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x3002;

&#x8D85;&#x6781;&#x5316;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x95E8;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x9F20;&#x6807;&#x7281;&#x9F3B;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;

Hyperpolarization-activated currents (Ih) are present in several neurons of the central and peripheral nervous system. However, Ih in neurons of the vomeronasal organ (VNO) is not well characterized. We studied the properties of Ih in sensory neurons from acute slices of mouse VNO. In voltage-clamp studies, Ih was identified by the characteristic kinetics of activation, voltage dependence, and blockage by Cs+ or ZD-7288, two blockers of the Ih. Forskolin, an activator of adenylyl cyclase, shifted the activation curve for Ih to less negative potentials. A comparison of Ih properties in VNO neurons with those of heterologously expressed hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated (HCN) channels, together with RT-PCR experiments in VNO, indicate that Ih is caused by HCN2 and/or HCN4 subunits. In current-clamp recordings, blocking Ih with ZD-7288 induced a hyperpolarization of 5.1 mV, an increase in input resistance, a decrease in the sensitivity to elicit action potentials in response to small current injections, and did not modify the frequency of action potentials elicited by a large current injection. It has been shown that in VNO neurons some pheromones induce a decrease in cAMP concentration, but the physiological role of cAMP is unknown. After application of blockers of adenylyl cyclase, we measured a hyperpolarization of 5.1 mV in 11 of 14 neurons, suggesting that basal levels of cAMP could modulate the resting potential. In conclusion, these results show that mouse VNO neurons express HCN2 and/or HCN4 subunits and that Ih contributes to setting the resting membrane potential and to increase excitability at stimulus threshold.

Hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channels in mouse vomeronasal sensory neurons.

Hyperpolarisation activ&#xE9; par courants (Ih) sont pr&#xE9;sents dans plusieurs neurones du syst&#xE8;me nerveux central et p&#xE9;riph&#xE9;rique. Toutefois, dans les neurones de Ih l&#x26;#39;organe vom&#xE9;ronasal (VNO) n&#x26;#39;est pas bien caract&#xE9;ris&#xE9;e. Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; les propri&#xE9;t&#xE9;s de Ih dans les neurones sensoriels de tranches aigu&#xEB;s de la souris VNO. En voltage-clamp &#xE9;tudes, Ih a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9; par les caract&#xE9;ristiques de la cin&#xE9;tique de l&#x26;#39;activation, la d&#xE9;pendance de tension, et le blocage par Cs + ou ZD-7288, deux bloqueurs de la Ih. La forskoline, un activateur de l&#x26;#39;ad&#xE9;nylate cyclase, a d&#xE9;plac&#xE9; la courbe d&#x26;#39;activation pour Ih &#xE0; des potentiels moins n&#xE9;gatifs. Une comparaison de propri&#xE9;t&#xE9;s Ih neurones VNO avec celles de mani&#xE8;re h&#xE9;t&#xE9;rologue exprim&#xE9; hyperpolarisation activ&#xE9;s nucl&#xE9;otides cycliques porte (HCN) canaux, ensemble avec la RT-PCR des exp&#xE9;riences en VNO, indiquent que Ih est provoqu&#xE9;e par HCN2 et / ou HCN4 sous-unit&#xE9;s. En courant clamp, le blocage Ih avec ZD-7288 a induit une hyperpolarisation de 5,1 mV, soit une augmentation de la r&#xE9;sistance d&#x26;#39;entr&#xE9;e, une diminution de la sensibilit&#xE9; pour obtenir des potentiels d&#x26;#39;action en r&#xE9;ponse &#xE0; de petites injections de courant, et ne modifie pas la fr&#xE9;quence des potentiels d&#x26;#39;action provoqu&#xE9;e par une forte injection de courant. Il a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; que dans les neurones VNO certains ph&#xE9;romones induire une diminution de la concentration de l&#x26;#39;AMPc, mais le r&#xF4;le physiologique de l&#x26;#39;AMPc est inconnue. Apr&#xE8;s l&#x26;#39;application des inhibiteurs de l&#x26;#39;ad&#xE9;nylcyclase, nous avons mesur&#xE9; une hyperpolarisation de 5,1 mV dans 11 des 14 neurones, ce qui sugg&#xE8;re que les niveaux de base de l&#x26;#39;AMPc pourrait moduler le potentiel de repos. En conclusion, ces r&#xE9;sultats montrent que la souris VNO neurones expresse HCN2 et / ou sous-unit&#xE9;s HCN4 et que Ih contribue &#xE0; fixer le potentiel de membrane au repos et &#xE0; augmenter l&#x26;#39;excitabilit&#xE9; au seuil de stimulation.

Hyperpolarisation activ&#xE9;s par les nucl&#xE9;otides cycliques-d&#xE9;pendants canaux dans Souris Vomeronasal neurones sensoriels

Hyperpolarisation aktiviert Str&ouml;mungen (Ih) sind in mehreren Neuronen des zentralen und peripheren Nervensystems. Ih in Neuronen das Vomeronasal Organ (VNO) ist allerdings nicht gut gekennzeichnet. Wir studierten die Eigenschaften des Ih in sensorischen Neuronen aus akuten Scheiben Maus VNO. In Spannung Klemm-Studien nannte die charakteristischen Kinetik der Aktivierung, Spannung Abh&auml;ngigkeit und Blockierung von Cs + oder ZD-7288, zwei Blocker der IH Ih. Forskolin, Aktivator Fehlfunktion Guanylatcyclase, verlagerte die Aktivierungs-Kurve f&uuml;r Ih auf weniger negative Potentiale. Ein Vergleich der Ih Immobilien in VNO Neuronen mit denen der heterologously ausgedr&uuml;ckt Hyperpolarisation aktiviert zyklische Nukleotid-Gating (HCN) Kan&auml;le, zusammen mit RT-PCR Experimente in VNO, anzugeben, dass Ih HCN2 und/oder HCN4 Untereinheiten zur&uuml;ckzuf&uuml;hren ist. Im aktuellen Klemm-Aufnahmen, Ih mit ZD-7288-Blockierung induziert eine Hyperpolarisation von 5.1 mV, eine Zunahme der Eingangswiderstand, eine Abnahme der Empfindlichkeit zu entlocken Aktionspotentiale in Reaktion auf kleine aktuelle Injektionen, und die Frequenz der Aktionspotentiale, hervorgerufen durch eine gro&szlig;e Stromeinspeisung Tat nicht modifizieren. Es hat sich gezeigt, dass in VNO Neuronen, einige Pheromone eine Abnahme der cAMP-Konzentration ausl&ouml;sen, sondern die physiologische Rolle des Lagers unbekannt ist. Nach der Anwendung von Blocker der Fehlfunktion Guanylatcyclase gemessen wir eine Hyperpolarisation von 5.1 mV 11 14 Neuronen, die darauf hindeutet, dass Basalebenen des Lagers das ruhelosigkeit Potenzial modulieren k&ouml;nnen. Abschlie&szlig;end zeigen diese Ergebnisse, dass Maus VNO Neuronen HCN2 und/oder HCN4 Untereinheiten Ausdr&uuml;cken und Ih tr&auml;gt zur Einstellung der ruhenden Membran potenzielle und Erregbarkeit bei Reizschwelle zu erh&ouml;hen.

Hyperpolarisation aktiviert zyklische Nukleotid-Gating Kan&auml;le in Maus Vomeronasal sensorischen Neuronen.

Correnti hyperpolarization-attivato (Ih) sono presenti in diversi neuroni del centrale e sistema nervoso periferico. Tuttavia, Ih nei neuroni dell&#39;organo vomeronasale (VNO) non &egrave; ben caratterizzato. Abbiamo studiato le propriet&agrave; di Ih in neuroni sensoriali da fette acute del mouse VNO. Negli studi di tensione-clamp, Ih fu identificato dalla caratteristica cinetica di attivazione, dipendenza di tensione e bloccaggio di Cs + o ZD-7288, due bloccanti della Ih. La forskolina, un attivatore della adenil ciclasi, ha spostato la curva di attivazione per Ih a potenziali meno negativi. Confronto delle propriet&agrave; Ih in neuroni VNO con quelli di heterologously espresso hyperpolarization-attivato ciclici nucleotide-gated (HCN) canali, insieme con gli esperimenti di RT-PCR in VNO, indicano che Ih &egrave; causato da subunit&agrave; HCN2 o HCN4. Nella corrente-morsetto registrazioni, bloccando Ih con ZD 7288 indotta a hyperpolarization di 5.1 mV, un aumento della resistenza d&#39;ingresso, una diminuzione della sensibilit&agrave; per sollecitare i potenziali d&#39;azione in risposta alle piccole iniezioni di corrente e non ha fatto modificare la frequenza dei potenziali di azione ha suscitato da una grande iniezione di corrente. &Egrave; stato dimostrato che nei neuroni VNO alcuni feromoni inducono una diminuzione della concentrazione di cAMP, ma il ruolo fisiologico dell&#39;accampamento &egrave; sconosciuto. Dopo l&#39;applicazione di bloccanti della adenil ciclasi, abbiamo misurato un hyperpolarization di 5.1 mV in 11 dei 14 neuroni, suggerendo che i livelli basali di cAMP potrebbero modulare il potenziale di riposo. In conclusione, questi risultati mostrano che i neuroni di topo VNO express subunit&agrave; HCN2 o HCN4 e che Ih contribuisce all&#39;impostazione di potenziale della membrana di riposa e di aumentare eccitabilit&agrave; alla soglia di stimolo.

Hyperpolarization-attivato cyclic nucleotide-gated canali nei neuroni sensoriali del mouse vomeronasal.

&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x96FB;&#x6D41;&#xFF08;IH&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x672B;&#x68A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x92E4;&#x9F3B;&#x5668;&#x5B98;&#xFF08;VNO&#xFF09;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;Ih&#x304C;&#x3088;&#x304F;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x92E4;&#x9F3B;&#x5668;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x611F;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;Ih&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x96FB;&#x5727;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;IH&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x96FB;&#x5727;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3001;&#x53CA;&#x3073;Cs +&#x307E;&#x305F;&#x306F;ZD-7288&#x3001;IH&#x306E;2&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AB;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9589;&#x585E;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EA;&#x30EB;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x8CA0;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306B;Ih&#x304C;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x66F2;&#x7DDA;&#x3092;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7570;&#x7A2E;&#x767A;&#x73FE;&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x74B0;&#x72B6;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#xFF08;HCN&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;VNO&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;Ih&#x304C;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;VNO&#x3067;RT-PCR&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;Ih&#x304C;&#x304C;HCN2&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;HCN4&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; ZD-7288&#x3068;IH&#x3092;&#x906E;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x96FB;&#x6D41;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x8A18;&#x9332;&#x3001;5.1 mV&#x306E;&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#x3001;&#x5165;&#x529B;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x304C;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x5927;&#x96FB;&#x6D41;&#x6CE8;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;VNO&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x306B;cAMP&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;cAMP&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EA;&#x30EB;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x906E;&#x65AD;&#x306E;&#x9069;&#x7528;&#x5F8C;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;cAMP&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x9759;&#x6B62;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;14&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;11&#x3067;5.1 mV&#x306E;&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;VNO&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x6025;&#x884C;HCN2&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;HCN4&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x305D;&#x306E;IH&#x304C;&#x9759;&#x6B62;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3092;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3057;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x95BE;&#x5024;&#x3067;&#x306E;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x92E4;&#x9F3B;&#x611F;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x74B0;&#x72B6;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;

Hyperpolarization &#xD65C;&#xC131; &#xC804;&#xB958; (Ih) &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC911;&#xC559;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC0F; &#xB9D0; &#xCD08; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, Ih vomeronasal &#xAE30;&#xAD00; (VNO)&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC798; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xB418;&#xC9C0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; VNO &#xAE09;&#xC131; &#xC870;&#xAC01;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; Ih&#xC758; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC804;&#xC555; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; Ih&#xB294; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;, &#xC804;&#xC555; &#xC758;&#xC874; &#xBC0F; Cs + &#xB610;&#xB294; ZD-7288, &#xB9C9;&#xD798;&#xC740; Ih&#xC758; &#xB450; &#xCC28;&#xB2E8;&#xC81C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Forskolin, adenylyl cyclase &#xD65C;&#xC131; Ih&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB35C; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xACE1;&#xC120;&#xC744; &#xC774;&#xB3D9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8; VNO &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C; Ih &#xC18D;&#xC131;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; heterologously hyperpolarization &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC21C;&#xD658;-&#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; (HCN) &#xCC44;&#xB110;, RT-PCR &#xC2E4;&#xD5D8; VNO &#xD568;&#xAED8; &#xD45C;&#xD604;, Ih HCN2 &#xBC0F; HCN4 &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD45C;&#xC2DC;. 5.1 Hyperpolarization &#xC720;&#xB3C4; ZD-7288&#xB85C; Ih &#xCC28;&#xB2E8; &#xC804;&#xB958; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xB179;&#xC74C;&#xC5D0; mV, &#xC785;&#xB825;&#xB41C; &#xC800;&#xD56D; &#xC99D;&#xAC00;, &#xC791;&#xC740; &#xD604;&#xC7AC; &#xC8FC;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xCE58; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xC774;&#xB04C;&#xC5B4;&#xB0B4;&#xB294; &#xAC10;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xD589;&#xB3D9; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xD070; &#xD604;&#xC7AC; &#xBD84;&#xC0AC;&#xB85C; elicited &#xBE48;&#xB3C4; &#xC218;&#xC815; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; VNO &#xB274;&#xB7F0; &#xC77C;&#xBD80; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xCEA0;&#xD504; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCEA0;&#xD504;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC73C;&#xBA74; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 5.1 Hyperpolarization &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; adenylyl cyclase &#xCC28;&#xB2E8;&#xAE30;&#xC758; &#xC801;&#xC6A9; &#xD6C4; 11 &#xCEA0;&#xD504; &#xAE30;&#xC800; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD734;&#xC2DD; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xBCC0;&#xC870; &#xC218; &#xC81C;&#xC548; 14 &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBBA4;&#xC9C1; &#xBE44;&#xB514;&#xC624;. &#xACB0;&#xB860;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; VNO &#xB274;&#xB7F0; HCN2 &#xB610;&#xB294; HCN4 subunits &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; Ih &#xC26C;&#xACE0; &#xB9C9; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC124;&#xC815; &#xBC0F; &#xC790;&#xADF9; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD765;&#xBD84;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xAE30;&#xC5EC;.

Hyperpolarization &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCC44;&#xB110; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; vomeronasal &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;.

Hiperpolarizaci&#xF3;n activado por corrientes (Ih) est&#xE1;n presentes en varias neuronas del sistema nervioso central y perif&#xE9;rico. Sin embargo, Ih en las neuronas del &#xF3;rgano vomeronasal (OVN) no est&#xE1; bien caracterizado. Se estudiaron las propiedades de Ih en las neuronas sensoriales de rebanadas agudas de rat&#xF3;n VNO. En estudios de clamp de voltaje, Ih fue identificado por la cin&#xE9;tica caracter&#xED;sticos de activaci&#xF3;n, la dependencia de voltaje, y el bloqueo por Cs + o ZD 7288, dos bloqueadores de la Ih. Forskolina, un activador de la adenilil ciclasa, desplaz&#xF3; la curva de activaci&#xF3;n para Ih a potenciales menos negativos. Una comparaci&#xF3;n de las propiedades de Ih en neuronas del OVN con los de heter&#xF3;loga expresadas activados hiperpolarizaci&#xF3;n-nucle&#xF3;tidos c&#xED;clicos-dependientes (HCN), junto con los canales de RT-PCR experimentos en OVN, indican que Ih es causada por HCN2 y / o HCN4 subunidades. En grabaciones de corriente abrazadera, bloqueando Ih con ZD-7288 indujo una hiperpolarizaci&#xF3;n de 5,1 mV, un aumento de la resistencia de entrada, una disminuci&#xF3;n de la sensibilidad para obtener los potenciales de acci&#xF3;n en respuesta a peque&#xF1;as inyecciones actuales, y no modificar la frecuencia de potenciales de acci&#xF3;n provocada por una inyecci&#xF3;n de corriente grande. Se ha demostrado que en las neuronas del OVN algunas feromonas inducir una disminuci&#xF3;n en la concentraci&#xF3;n de cAMP, pero el papel fisiol&#xF3;gico de cAMP es desconocida. Despu&#xE9;s de la aplicaci&#xF3;n de los bloqueadores de la adenilato ciclasa, que mide una hiperpolarizaci&#xF3;n de 5,1 mV en 11 de 14 neuronas, lo que sugiere que los niveles basales de AMPc podr&#xED;a modular el potencial de reposo. En conclusi&#xF3;n, estos resultados muestran que las neuronas de rat&#xF3;n VNO expresa HCN2 y / o subunidades HCN4 e IH que contribuye a establecer el potencial de membrana en reposo y para aumentar la excitabilidad en el umbral de est&#xED;mulo.

Activados por hiperpolarizaci&#xF3;n-Nucle&#xF3;tido c&#xED;clico-canales dependientes del rat&#xF3;n en neuronas sensoriales vomeronasales

Ca(2+) &#x6FC0;&#x6D3B; Cl(-) &#x901A;&#x9053;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x751F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x76EE;&#x524D;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x547D;&#x540D;&#x4E3A;&#x8DE8;&#x819C; 16 (TMEM16) &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x6765;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) Cl(-) &#x6E20;&#x9053;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x529F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x7684;&#x9F20;&#x6807; TMEM16B (mTMEM16B) &#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x80BE; (&#x6797;&#x514B;) 293T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x3001; &#x6D4B;&#x91CF;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x90FD;&#x548C;&#x5185;&#x90E8;&#x51FA;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC; mTMEM16B &#x5F53;&#x524D;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x80DE;&#x5185;&#x7ECF;&#x4F20;&#x64AD;&#x4ECE;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5438;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x901A;&#x8FC7; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x5546;&#x5E97;&#x91CA;&#x653E;&#x6216;&#x4ECE; photoreleased &#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5185;&#x7B3C;&#x7ECF;&#x3002;&#x5728;&#x5185;&#x5916;&#x819C;&#x7684;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x7535;&#x6D41;&#x8FC5;&#x901F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6D74;&#x4E2D;&#x63A7;&#x5236;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x8BE5; mTMEM16B &#x76F4;&#x63A5;&#x7531;&#x7ECF;&#x95E8;&#x63A7;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5185;&#x5916;&#x914D;&#x7F6E;&#xFF0C;Ca(2+) &#x8BF1;&#x5BFC;&#x5F53;&#x524D;&#x662F;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x3001; &#x963B;&#x6B62; Cl(-) &#x901A;&#x9053;&#x963B;&#x6EDE;&#x5242; niflumic &#x9178;&#xFF0C;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Ca(2+) &#x7684;&#x77EB;&#x6B63;&#x3002;&#x5728;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5185;&#x5916;&#xFF0C;&#x7ECF;&#x534A;-&#x6781;&#x5927;&#x5F53;&#x524D;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x964D;&#x4ECE; 4.9 microM &#x5728;-50 &#x81F3; 3.3 microM &#x5728; + 50 mV mV&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5C71;&#x7CFB;&#x6570;&#x662F; &gt; 2&#x3002;&#x5728;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5185;&#x5916;&#xFF0C;&#x7535;&#x6D41;&#x4E0B;&#x964D;&#x53EF;&#x9006;&#x5F53;&#x524D;&#x5728;-50 mV &#x5B58;&#x5728;&#x6052;&#x5B9A;&#x7684;&#x9AD8;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x8F6C;&#x7684;&#x65AD;&#x5F00;&#xFF0C;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F55;&#x97F3;&#x4E2D;&#x672A;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x4E00;&#x4E9B;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x8C03;&#x5236;&#x5668;&#x5728;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5220;&#x6539;&#x540E;&#x4E22;&#x5931;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;mTMEM16B &#x51FD;&#x6570;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) Cl(-) &#x901A;&#x9053;&#x65F6;&#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B; 293T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

TMEM16B &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7531;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9499;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6C2F;&#x901A;&#x9053;&#x7535;&#x6D41;&#x3002;

Ca(2+)-activated Cl(-) channels play important physiological roles in various cell types, but their molecular identity is still unclear. Recently, members of the protein family named transmembrane 16 (TMEM16) have been suggested to function as Ca(2+)-activated Cl(-) channels. Here, we report the functional properties of mouse TMEM16B (mTMEM16B) expressed in human embryonic kidney (HEK) 293T cells, measured both in the whole-cell configuration and in inside-out excised patches. In whole cell, a current induced by mTMEM16B was activated by intracellular Ca(2+) diffusing from the patch pipette, released from intracellular stores through activation of a G-protein-coupled receptor, or photoreleased from caged Ca(2+) inside the cell. In inside-out membrane patches, a current was rapidly activated by bath application of controlled Ca(2+) concentrations, indicating that mTMEM16B is directly gated by Ca(2+). Both in the whole-cell and in the inside-out configurations, the Ca(2+)-induced current was anion selective, blocked by the Cl(-) channel blocker niflumic acid, and displayed a Ca(2+)-dependent rectification. In inside-out patches, Ca(2+) concentration for half-maximal current activation decreased from 4.9 microM at -50 mV to 3.3 microM at +50 mV, while the Hill coefficient was >2. In inside-out patches, currents showed a reversible current decrease at -50 mV in the presence of a constant high Ca(2+) concentration and, moreover, an irreversible rundown, not observed in whole-cell recordings, indicating that some unknown modulator was lost upon patch excision. Our results demonstrate that mTMEM16B functions as a Ca(2+)-activated Cl(-) channel when expressed in HEK 293T cells.

TMEM16B induces chloride currents activated by calcium in mammalian cells.

Ca (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) canaux jouent des r&#xF4;les physiologiques dans divers types cellulaires, mais leur identit&#xE9; mol&#xE9;culaire n&#x26;#39;est pas encore clair. R&#xE9;cemment, des membres de la famille des prot&#xE9;ines transmembranaires nomm&#xE9; 16 (TMEM16) ont &#xE9;t&#xE9; propos&#xE9;es pour la fonction en tant que Ca (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) canaux. Ici, nous pr&#xE9;sentons les propri&#xE9;t&#xE9;s fonctionnelles de la souris TMEM16B (mTMEM16B) exprim&#xE9;es dans le rein embryonnaire humain (HEK) des cellules 293T, mesur&#xE9;es &#xE0; la fois dans la configuration cellule enti&#xE8;re et dans l&#x26;#39;int&#xE9;rieur-des patchs excis&#xE9;s. Dans la cellule enti&#xE8;re, un courant induit par mTMEM16B a &#xE9;t&#xE9; activ&#xE9; par le Ca (2 +) diffusant de la pipette de patch, lib&#xE9;r&#xE9; de magasins intracellulaires par l&#x26;#39;activation d&#x26;#39;un r&#xE9;cepteur de G-coupl&#xE9; &#xE0; la prot&#xE9;ine, ou photoreleased de cage Ca (2 +) &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur du cellulaire. Dans les parcelles membrane inside-out, un courant a &#xE9;t&#xE9; rapidement activ&#xE9; par l&#x26;#39;application contr&#xF4;l&#xE9;e de bain de Ca (2 +) des concentrations, ce qui indique que mTMEM16B est directement d&#xE9;clench&#xE9; par Ca (2 +). Tant dans la cellule enti&#xE8;re et dans les configurations inside-out, le Ca (2 +)-courant induit &#xE9;tait anionos&#xE9;lective, bloqu&#xE9; par le Cl (-) l&#x26;#39;acide niflumique bloqueur des canaux, et fait preuve d&#x26;#39;un Ca (2 +) d&#xE9;pendant de la rectification . Dans l&#x26;#39;int&#xE9;rieur des des patchs, Ca (2 +) de concentration pour les demi-activation maximale actuelle diminu&#xE9; de 4,9 microM &#xE0; -50 mV &#xE0; 3,3 microM &#xE0; +50 mV, alors que le coefficient de Hill &#xE9;tait&#x26;gt; 2. Dans l&#x26;#39;int&#xE9;rieur des des correctifs, les courants ont montr&#xE9; une diminution de courant r&#xE9;versible &#xE0; -50 mV en pr&#xE9;sence d&#x26;#39;une constante Ca haute (2 +) et la concentration, en outre, un r&#xE9;capitulatif irr&#xE9;versible, pas &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9; dans des cellules enti&#xE8;res d&#x26;#39;enregistrements, ce qui indique que certains modulateur inconnue a &#xE9;t&#xE9; perdu lors de l&#x26;#39;excision patch. Nos r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que les fonctions mTMEM16B comme Ca (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) de canal lorsqu&#x26;#39;il est exprim&#xE9; dans des cellules 293T HEK.

TMEM16B induit des courants de chlorure activ&#xE9;e par le calcium dans les cellules de mammif&#xE8;res

Ca(2+) aktivierte Cl(-) Kan&auml;le in verschiedenen Zelltypen eine wichtige physiologische Rolle spielen, aber ihre molekulare Identit&auml;t ist noch unklar. Vor kurzem wurden der Protein-Familie namens Transmembran-16 (TMEM16) vorgeschlagen, die Funktion als Ca(2+) aktivierte Cl(-) Kan&auml;le. Hier teilen wir Ihnen die funktionellen Eigenschaften der Maus TMEM16B (mTMEM16B) ausgedr&uuml;ckt in menschlichen embryonalen (HEK) 293T Nierenzellen, sowohl in der ganz-Zell Konfiguration gemessen und in Inside-Out-herausgeschnitten Flecken. Ganze Zelle ein Strom von mTMEM16B induziert durch intrazellul&auml;re Ca(2+) verbreiten aus den Patch-Pipette, freigegeben von den intrazellul&auml;ren speichern durch Aktivierung von ein G-Protein-gekoppelter Rezeptor, aktiviert wurde oder Photoreleased vom K&auml;fig Ca(2+) innerhalb der Zelle. Inside-Out-Membrane Patches wurde eine aktuelle schnell durch Bad Anwendung der kontrollierten Ca(2+)-Konzentrationen, die angibt, dass die mTMEM16B direkt von Ca(2+) Gating ist aktiviert. Die ganze Zellen sowohl in der Inside-Out-Konfigurationen der Ca(2+)-induzierte Strom war Anion selektive, blockiert durch die Cl(-) Kanal Blocker Niflumic S&auml;ure; angezeigt eine Berichtigung der Ca(2+)-abh&auml;ngige Inside-Out-Patches, verringerte sich die Ca(2+)-Konzentration f&uuml;r die H&auml;lfte-maximale aktuelle Aktivierung von 4,9 MicroM bei-50 mV bis 3.3 MicroM bei + 50 mV, w&auml;hrend der Hill-Koeffizient war &gt; 2. Inside-Out-Patches, Str&ouml;mungen zeigte eine reversible aktuelle Abnahme bei-50 mV in der Gegenwart eine konstant hohe Konzentration der Ca(2+) und dar&uuml;ber hinaus eine irreversible Rundown, nicht auf ganze Zellen-Aufnahmen, beobachtet, dass einige unbekannte Modulator auf Patch Exzision verloren ging. Unsere Ergebnisse zeigen, dass mTMEM16B als Ca(2+) aktivierte Cl(-) Kanal in HEK 293T Zellen ausgedr&uuml;ckt funktioniert.

TMEM16B induziert Chlorid-Str&ouml;me von Kalzium in den S&auml;ugetier-Zellen aktiviert.

Attivato CA(2+) Cl(-) canali giocano un ruolo fisiologico importante in vari tipi di cellule, ma la loro identit&agrave; molecolare non &egrave; ancora chiaro. Recentemente, membri della famiglia di proteine transmembrana 16 (TMEM16) il nome sono stati suggeriti per funzionare come canali attivati dal Ca(2+) Cl(-). Riportiamo le propriet&agrave; funzionali del mouse TMEM16B (mTMEM16B) espressa in cellule 293T Rene embrionale umano (HEK), misurata sia nella configurazione di cellule intere e in inside out escisse patch. Nella cella intera, una corrente indotta da mTMEM16B &egrave; stata attivata da intracellulare Ca(2+) diffusione dalla pipetta patch, rilasciata dai depositi intracellulari attraverso l&#39;attivazione di una G-protein-coupled receptor, o photoreleased dalla gabbia Ca(2+) all&#39;interno della cellula. Nella patch di membrana inside-out, una corrente rapidamente &egrave; stata attivata dall&#39;applicazione bagno controllato concentrazioni di Ca(2+), che indica che mTMEM16B &egrave; gestita direttamente da Ca(2+). Le cellule intere sia in configurazioni di dentro-fuori, la corrente indotta da Ca(2+) era anione selettivi, bloccati con l&#39;acido di niflumic Cl(-) channel blocker e visualizzate una rettifica Ca(2+)-dipendente. Nella patch di dentro-fuori, Ca(2+) concentrazione per met&agrave;-massima corrente attivazione diminuito da 4,9 microM a -50 mV a 3,3 microM al + 50 mV, mentre il coefficiente di Hill era &amp;gt; 2. Nella patch di dentro-fuori, correnti ha mostrato una diminuzione di corrente reversibile a -50 mV in presenza di un&#39;alta concentrazione di Ca(2+) costante e, inoltre, un rundown irreversibile, non osservato nelle cellule intere registrazioni, che indica che qualche sconosciuto modulatore &egrave; stata persa dopo l&#39;escissione patch. I nostri risultati dimostrano che mTMEM16B funziona come un canale attivato Ca(2+) Cl(-) quando espressa nelle cellule HEK 293T.

TMEM16B induce correnti cloruro attivate dal calcio in cellule di mammifero.

&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5869;&#x7D20;&#xFF08; - &#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30FC;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x6700;&#x8FD1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8CAB;&#x901A;16&#xFF08;TMEM16&#xFF09;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5869;&#x7D20;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x69CB;&#x6210;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x5074;&#x3001;&#x5207;&#x308A;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30D2;&#x30C8;&#x80CE;&#x5150;&#x814E;&#x81D3;&#xFF08;HEK&#xFF09;293T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;TMEM16B&#xFF08;mTMEM16B&#xFF09;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x5168;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x3001;mTMEM16B&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x96FB;&#x6D41;&#x306F;G-&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x8CAF;&#x8535;&#x304B;&#x3089;&#x653E;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x62E1;&#x6563;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3084;&#x3001;&#x5185;&#x90E8;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x304B;&#x3089;photoreleased&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x30BB;&#x30EB;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x819C;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6D41;&#x304C;&#x6025;&#x6FC0;&#x306B;mTMEM16B&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x76F4;&#x63A5;&#x30B2;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x6D74;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x5168;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x69CB;&#x6210;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x73FE;&#x5728;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30CB;&#x30AA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;Cl&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#xFF08; - &#xFF09;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AB;&#x30FC;&#x30CB;&#x30D5;&#x30EB;&#x30E0;&#x9178;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Ca&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6574;&#x6D41;&#x3002;&#x30D2;&#x30EB;&#x4FC2;&#x6570;&#x306F;&#x26;gt; 2&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;+50 mV&#x3067;3.3&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x3092;-50 mV&#x3067;4.9&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x534A;&#x6700;&#x5927;&#x96FB;&#x6D41;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x3067;&#x3001;&#x96FB;&#x6D41;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x5668;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x5B9A;&#x6570;&#x9AD8;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x8A18;&#x9332;&#x306B;&#x306F;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306A;&#x8981;&#x7D04;&#x3001;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;-50 mV&#x3067;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306A;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x5207;&#x9664;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;HEK 293T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;Cl&#x306A;&#x3069;mTMEM16B&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

TMEM16B&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5869;&#x5316;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;

Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Cl(-) &#xCC44;&#xB110; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC740; &#xC544;&#xC9C1; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85;. &#xCD5C;&#xADFC;, &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; 16 (TMEM16) &#xB77C;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xC5ED;&#xD560; Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Cl(-) &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; tmem16b&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD2B9;&#xC131; (mTMEM16B) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xC2E0;&#xC7A5; (HEK) 293T &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB450; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC544;&#xC6C3; &#xD328;&#xCE58; excised. &#xC804;&#xCCB4; &#xC140;&#xC5D0; Mtmem16b&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC804;&#xB958;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xB9E4;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xD328;&#xCE58; &#xD53C; &#xD3AB;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xB294; photoreleased&#xC5D0;&#xC11C; Ca(2+) &#xC140; &#xC548;&#xC5D0; &#xAC07;&#xD78C;. &#xC548;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C9; &#xD328;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC;&#xB294; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xADF8; Mtmem16b&#xB294; ca(2+)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBB38;&#xC774; &#xC9C1;&#xC811; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC81C;&#xC5B4; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xBAA9;&#xC695; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB450; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xB0B4;&#xBD80; &#xAD6C;&#xC131;, Ca(2+) &#xC720;&#xB3C4; &#xC804;&#xB958;&#xB294; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;, Cl(-) &#xCC44;&#xB110; &#xCC28;&#xB2E8;&#xC81C; niflumic &#xC0B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB41C; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xBC0F;&#xC5D0; Ca(2+) &#xC885;&#xC18D; &#xC815;&#xB958;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xB0B4;&#xBD80;-&#xC544;&#xC6C3; &#xD328;&#xCE58; &#xBC18; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xD604;&#xC7AC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4;-50&#xC5D0;&#xC11C; 4.9 Microm&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C; mV + 50&#xC5D0;&#xC11C; 3.3 microM ~ mV, &#xD790; &#xACC4;&#xC218;&#xB294; &amp;gt; 2. &#xB0B4;&#xBD80;-&#xC544;&#xC6C3; &#xD328;&#xCE58; &#xC804;&#xB958;-50&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC5ED; &#xC804;&#xB958; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; mV &#xC0C1;&#xC218; &#xB192;&#xC740; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xC874;&#xC7AC; &#xB610;&#xD55C;, &#xB3CC;&#xC774;&#xD0AC; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xB9C8;&#xCE60; &#xC218;, &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xB179;&#xC74C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC77C;&#xBD80; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30;&#xB294; &#xD328;&#xCE58; &#xC808;&#xB2E8; &#xC2DC; &#xC190;&#xC2E4; &#xD558;&#xB294; &#xACE0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; mTMEM16B Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Cl(-) &#xCC44;&#xB110; HEK 293T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

TMEM16B &#xC5FC;&#xD654; &#xC804;&#xB958; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE7C;&#xC298;&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Ca (2 +) activada por Cl (-) canales desempe&#xF1;an importantes funciones fisiol&#xF3;gicas en diversos tipos de c&#xE9;lulas, pero su identidad molecular a&#xFA;n no est&#xE1; claro. Recientemente, los miembros de la familia de prote&#xED;nas denominada transmembrana 16 (TMEM16) se han sugerido para funcionar como Ca (2 +) activada por Cl (-) canales. En este caso, se reportan las propiedades funcionales de rat&#xF3;n TMEM16B (mTMEM16B) expresadas en el ri&#xF1;&#xF3;n embrionario humano (HEK) 293T, medido tanto en la configuraci&#xF3;n de c&#xE9;lula completa y en el interior-fuera extirpados parches. En la celda toda una corriente inducida por la mTMEM16B fue activado por calcio intracelular (2 +) la difusi&#xF3;n de la pipeta parche, liberado de los dep&#xF3;sitos intracelulares mediante la activaci&#xF3;n de un receptor de la prote&#xED;na G-acoplada, o photoreleased de la jaula de Ca (2 +) en el interior del celular. En los parches de membrana de dentro a fuera, una corriente se activ&#xF3; r&#xE1;pidamente mediante la aplicaci&#xF3;n controlada de ba&#xF1;o de Ca (2 +) las concentraciones, lo que indica que es directamente mTMEM16B cerrada por Ca (2 +). Tanto en toda la celda, y en las configuraciones de dentro a fuera, el Ca (2 +)-corriente inducida era ani&#xF3;n selectivo, bloqueada por el Cl (-) &#xE1;cido nifl&#xFA;mico bloqueador de los canales, y se muestra un Ca (2 +)-dependiente rectificaci&#xF3;n . En el interior de los parches, Ca (2 +) de la concentraci&#xF3;n media m&#xE1;xima de activaci&#xF3;n actual se redujo de 4,9 microM a -50 mV a 3,3 microM a +50 mV, mientras que el coeficiente de Hill fue&#x26;gt; 2. En el interior de los parches, las corrientes mostraron una disminuci&#xF3;n reversible de corriente a -50 mV en la presencia de una constante de Ca elevado (2 +) la concentraci&#xF3;n y, adem&#xE1;s, un resumen irreversible, no se observ&#xF3; en c&#xE9;lulas enteras grabaciones, indicando que algunos modulador desconocido se perdi&#xF3; en la escisi&#xF3;n del parche. Nuestros resultados demuestran que las funciones mTMEM16B como Ca (2 +) activada por Cl (-) del canal cuando se expresa en las c&#xE9;lulas HEK 293T.

TMEM16B induce corrientes de cloruro activada por el calcio en c&#xE9;lulas de mam&#xED;fero

&#x8FD1;&#x5E74;&#x6765;&#xFF0C;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x5BF9;&#x751F;&#x6B96;&#x751F;&#x7406;&#x548C;&#x884C;&#x4E3A;&#x6DF1;&#x523B;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x4E2D;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x88AB;&#x5217;&#x4E3A;&#x5206;&#x5B50;&#x91CA;&#x653E;&#x7531;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x548C;&#x8D1F;&#x8D23;&#x5728;&#x540C;&#x4E00;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x884C;&#x4E3A;&#x8868;&#x73B0;&#x7684;&#x542F;&#x53D1;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5E38;&#x5E38;&#x5316;&#x5B66;&#x76F8;&#x5173;&#x6216;&#x4E0D;&#x76F8;&#x5173;&#xFF0C;&#x8F7D;&#x4E8E;&#x50CF;&#x5C3F;&#x6DB2;&#x3001; &#x6C57;&#x6C34;&#x3001; &#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x5916;&#x5206;&#x6CCC;&#x817A;&#x7C98;&#x6DB2;&#x5206;&#x6CCC;&#x7269;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x7684;&#x4F53;&#x6DB2;&#x3002;&#x6807;&#x51C6;&#x89C6;&#x56FE;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x9065;&#x611F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5931;&#x6563;&#x55C5;&#x89C9;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5177;&#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x89D2;&#x8272;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF1A; &#x4E3B;&#x8981;&#x55C5;&#x89C9;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230;&#x4F20;&#x7EDF;&#x7684;&#x6C14;&#x5473;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x7281;&#x9F3B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E13;&#x7528;&#x4E8E;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x91CD;&#x65B0;&#x5BA1;&#x89C6;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4F20;&#x7EDF;&#x89E3;&#x91CA;&#x663E;&#x793A;&#x51FA;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x55C5;&#x89C9;&#x548C;&#x7281;&#x9F3B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x79EF;&#x6781;&#x53C2;&#x4E0E; pheromonal &#x901A;&#x4FE1;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5BA1;&#x67E5;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E86;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3001; &#x751F;&#x7406;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x5F53;&#x524D;&#x77E5;&#x8BC6;&#x3002;

&#x4ECE;&#x884C;&#x4E3A;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x3002;

In recent years, considerable progress has been achieved in the comprehension of the profound effects of pheromones on reproductive physiology and behavior. Pheromones have been classified as molecules released by individuals and responsible for the elicitation of specific behavioral expressions in members of the same species. These signaling molecules, often chemically unrelated, are contained in body fluids like urine, sweat, specialized exocrine glands, and mucous secretions of genitals. The standard view of pheromone sensing was based on the assumption that most mammals have two separated olfactory systems with different functional roles: the main olfactory system for recognizing conventional odorant molecules and the vomeronasal system specifically dedicated to the detection of pheromones. However, recent studies have reexamined this traditional interpretation showing that both the main olfactory and the vomeronasal systems are actively involved in pheromonal communication. The current knowledge on the behavioral, physiological, and molecular aspects of pheromone detection in mammals is discussed in this review.

From pheromones to behavior.

Ces derni&#xE8;res ann&#xE9;es, des progr&#xE8;s consid&#xE9;rables ont &#xE9;t&#xE9; accomplis dans la compr&#xE9;hension des effets profonds de ph&#xE9;romones sur la physiologie de reproduction et le comportement. Les ph&#xE9;romones ont &#xE9;t&#xE9; class&#xE9;s en tant que mol&#xE9;cules lib&#xE9;r&#xE9;es par les individus et les responsables de l&#x26;#39;activation d&#x26;#39;expressions sp&#xE9;cifiques de comportement chez les membres de la m&#xEA;me esp&#xE8;ce. Ces mol&#xE9;cules de signalisation, souvent sans parent&#xE9; chimique, sont contenus dans les fluides corporels comme l&#x26;#39;urine, la sueur, sp&#xE9;cialis&#xE9;s glandes exocrines, et les s&#xE9;cr&#xE9;tions des muqueuses des organes g&#xE9;nitaux. La vue standard de la ph&#xE9;romone de d&#xE9;tection a &#xE9;t&#xE9; fond&#xE9;e sur l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que la plupart des mammif&#xE8;res ont deux syst&#xE8;mes s&#xE9;par&#xE9;s olfactifs avec diff&#xE9;rents r&#xF4;les fonctionnels: le syst&#xE8;me olfactif principal pour reconna&#xEE;tre les mol&#xE9;cules odorantes classiques et le syst&#xE8;me vom&#xE9;ronasal sp&#xE9;cifiquement d&#xE9;di&#xE9;e &#xE0; la d&#xE9;tection des ph&#xE9;romones. Cependant, des &#xE9;tudes r&#xE9;centes ont r&#xE9;examin&#xE9; cette interpr&#xE9;tation traditionnelle montrant que les deux olfactive principale et les syst&#xE8;mes Vomeronasal sont activement impliqu&#xE9;s dans la communication ph&#xE9;romonale. Les connaissances actuelles sur les aspects comportementaux, physiologiques et mol&#xE9;culaires de d&#xE9;tection des ph&#xE9;romones chez les mammif&#xE8;res est discut&#xE9;e dans cette revue.

De ph&#xE9;romones pour comportement

In den letzten Jahren wurden erhebliche Fortschritte im Verst&auml;ndnis der tiefgreifenden Auswirkungen der Pheromone auf reproduktive Physiologie und Verhalten erzielt. Pheromone haben als Molek&uuml;le freigegeben durch Einzelpersonen und verantwortlich f&uuml;r die Erhebung der spezifischen Verhaltens Ausdr&uuml;cke in Mitglieder derselben Art eingestuft worden. Diese signalisieren der Molek&uuml;le, oft chemisch nichts zu tun haben, sind in K&ouml;rperfl&uuml;ssigkeiten wie Urin, Schwei&szlig;, spezialisierte exokrine Dr&uuml;sen und Schleimh&auml;ute Sekrete der Geschlechtsorgane enthalten. Die standard-Ansicht von Pheromon Sensorik beruhte auf der Annahme, dass die meisten S&auml;ugetiere zwei getrennte olfaktorische Systeme mit unterschiedlichen funktionalen Rollen haben: wichtigsten olfaktorischen Systems zur Erkennung von konventionellen Odoriermittel Molek&uuml;le und das Vomeronasal System speziell f&uuml;r die Detektion von Pheromone gewidmet. Jedoch haben neuere Studien &uuml;berpr&uuml;ft diese traditionellen Interpretation, die die wichtigsten olfaktorischen und der Vomeronasal Systeme aktiv beteiligt sind in pheromonal Kommunikation zeigen. Das aktuelle Wissen &uuml;ber die Verhaltens-, physiologische und Molekulare Aspekte der Pheromon-Erkennung bei S&auml;ugetieren wird in diesem Bericht beschrieben.

Von Pheromone zu Verhalten.

Negli ultimi anni, sono stato raggiunto notevoli progressi nella comprensione degli effetti profondi di feromoni sul comportamento e fisiologia riproduttiva. I feromoni sono stati classificati come molecole rilasciate da parte di individui e responsabile per l&#39;elicitazione delle espressioni comportamentali specifiche in membri della stessa specie. Queste molecole, spesso chimicamente estranei, di segnalazione sono contenute nei liquidi corporei come urina, sudore, ghiandole esocrine specializzati e secrezioni mucose dei genitali. La vista standard del feromone di rilevamento &egrave; stata basata sul presupposto che la maggior parte dei mammiferi hanno due separati sistemi olfattivi con diversi ruoli funzionali: il sistema olfattivo principale per riconoscere molecole odorant convenzionale e il sistema vomeronasale specificamente dedicato al rilevamento di feromoni. Tuttavia, recenti studi hanno riesaminato questa interpretazione tradizionale che dimostrano che sia la principale olfattive e vomeronasal sistemi sono attivamente coinvolti nella comunicazione pheromonal. Le attuali conoscenze sugli aspetti comportamentali, fisiologiche e molecolari di rilevazione feromone nei mammiferi sono discusso in questa recensione.

Da feromoni di comportamento.

&#x8FD1;&#x5E74;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x9032;&#x5C55;&#x304C;&#x751F;&#x6B96;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x884C;&#x52D5;&#x4E0A;&#x306E;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x6DF1;&#x9060;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x500B;&#x4EBA;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x7A2E;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x884C;&#x52D5;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3057;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x653E;&#x51FA;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x7121;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3001;&#x5C3F;&#x3001;&#x6C57;&#x3001;&#x5C02;&#x9580;&#x5916;&#x5206;&#x6CCC;&#x817A;&#x3068;&#x3001;&#x6027;&#x5668;&#x306E;&#x7C98;&#x819C;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x7269;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x4F53;&#x6DB2;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x5302;&#x3044;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306B;&#x5C02;&#x7528;&#x306E;&#x92E4;&#x9F3B;&#x7CFB;&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E3B;&#x55C5;&#x899A;&#x7CFB;&#xFF1A;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x306E;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3064;2&#x3064;&#x306E;&#x533A;&#x5207;&#x308A;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x524D;&#x63D0;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x4E3B;&#x55C5;&#x899A;&#x3068;&#x9F3B;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x304C;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x89E3;&#x91C8;&#x3092;&#x898B;&#x76F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x884C;&#x52D5;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5074;&#x9762;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x8AAC;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xB3D9;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC;.

En los &#xFA;ltimos a&#xF1;os, los progresos se han alcanzado considerables en la comprensi&#xF3;n de los profundos efectos de las feromonas sobre la fisiolog&#xED;a reproductiva y el comportamiento. Las feromonas se han clasificado como las mol&#xE9;culas liberadas por las personas y las responsables de la obtenci&#xF3;n de determinadas expresiones de comportamiento en los miembros de la misma especie. Estas mol&#xE9;culas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, a menudo qu&#xED;micamente no relacionados, se encuentran en los fluidos corporales como la orina, el sudor, las gl&#xE1;ndulas exocrinas especializados, y las secreciones mucosas de los genitales. La visi&#xF3;n est&#xE1;ndar de detecci&#xF3;n de feromonas se bas&#xF3; en el supuesto de que la mayor&#xED;a de los mam&#xED;feros tienen dos sistemas separados olfativas con diferentes roles funcionales: el sistema olfativo principal para el reconocimiento de las mol&#xE9;culas odorantes convencionales y el sistema vomeronasal dedicado espec&#xED;ficamente a la detecci&#xF3;n de feromonas. Sin embargo, estudios recientes han reexaminado esta interpretaci&#xF3;n tradicional que muestra que tanto el olfativo principal y los sistemas de vomeronasal est&#xE1;n activamente involucrados en la comunicaci&#xF3;n feromonal. El conocimiento actual sobre los aspectos conductuales, fisiol&#xF3;gicos y moleculares de detecci&#xF3;n de feromonas en mam&#xED;feros se discute en esta revisi&#xF3;n.

Desde feromonas al comportamiento

&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6C2F;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x653E;&#x5927;&#x673A;&#x5236;&#x6765;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6C14;&#x5473;&#x3002;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x6C14;&#x5473;&#x4E2D;&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6D89;&#x53CA;&#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x95E8;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x5F00;&#x653E;&#x548C;&#x7ECF;&#x8FDB;&#x5165;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x7684;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x68AF;&#x7EA7;&#x3002;&#x7ECF;&#x6FC0;&#x6D3B; Cl(-) &#x5F53;&#x524D;&#x751F;&#x4EA7;&#x5916;&#x6392;&#x7684; Cl(-) &#x79BB;&#x5B50;&#x548C;&#x653E;&#x5927;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x3002;Ca(2+) &#x6FC0;&#x6D3B; Cl(-) &#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x662F;&#x4ECD;&#x9065;&#x9065;&#x65E0;&#x671F;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4E00;&#x4E9B; bestrophins &#x5DF2;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) Cl(-) &#x9891;&#x9053;&#x65F6;&#x8868;&#x793A;&#x5F02;&#x6E90;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x55C5;&#x89C9;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;bestrophin-2 (Best2) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x540D;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x8868;&#x793A;&#x6B63;&#x5728;&#x55C5;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) Cl(-) &#x901A;&#x9053;&#x5206;&#x5B50;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x7F3A;&#x4E4F; Best2 &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E3A; Best2 &#x76F8;&#x6BD4;&#x55C5;&#x6C14;&#x5473;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x53CD;&#x5E94;&#x4EE5;&#x53CA;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) Cl(-) &#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; (WT) &#x53CA; (KO) &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x786E;&#x8BA4; Best2 &#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7EA4;&#x6BDB;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6C14;&#x5473;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C; Ca(2+) &#x6FC0;&#x6D3B; Cl(-) &#x7535;&#x6D41;&#x4E0D;&#x662F; WT &#x548C; KO &#x5C0F;&#x9F20;&#x4E4B;&#x95F4;&#x663E;&#x8457;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;Best2 &#x4F3C;&#x4E4E;&#x5E76;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x55C5;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x5206;&#x5B50;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x9700;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684; Best2 &#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x4E2D;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;

&#x4ECE;&#x7F3A;&#x4E4F; bestrophin 2 &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x9499;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6C2F;&#x901A;&#x9053;&#x7535;&#x6D41;&#x3002;

Olfactory sensory neurons use a chloride-based signal amplification mechanism to detect odorants. The binding of odorants to receptors in the cilia of olfactory sensory neurons activates a transduction cascade that involves the opening of cyclic nucleotide-gated channels and the entry of Ca(2+) into the cilia. Ca(2+) activates a Cl(-) current that produces an efflux of Cl(-) ions and amplifies the depolarization. The molecular identity of Ca(2+)-activated Cl(-) channels is still elusive, although some bestrophins have been shown to function as Ca(2+)-activated Cl(-) channels when expressed in heterologous systems. In the olfactory epithelium, bestrophin-2 (Best2) has been indicated as a candidate for being a molecular component of the olfactory Ca(2+)-activated Cl(-) channel. In this study, we have analysed mice lacking Best2. We compared the electrophysiological responses of the olfactory epithelium to odorant stimulation, as well as the properties of Ca(2+)-activated Cl(-) currents in wild-type (WT) and knockout (KO) mice for Best2. Our results confirm that Best2 is expressed in the cilia of olfactory sensory neurons, while odorant responses and Ca(2+)-activated Cl(-) currents were not significantly different between WT and KO mice. Thus, Best2 does not appear to be the main molecular component of the olfactory channel. Further studies are required to determine the function of Best2 in the cilia of olfactory sensory neurons.

Calcium-activated chloride currents in olfactory sensory neurons from mice lacking bestrophin-2.

Olfactifs neurones sensoriels utiliser un m&#xE9;canisme de base de chlorure de signal d&#x26;#39;amplification pour d&#xE9;tecter substances odorantes. La liaison des substances odorantes &#xE0; des r&#xE9;cepteurs dans les franges de neurones sensoriels olfactifs active une cascade de transduction qui implique l&#x26;#39;ouverture de nucl&#xE9;otides cycliques-d&#xE9;pendants canaux et l&#x26;#39;entr&#xE9;e de Ca (2 +) dans les cils. Ca (2 +) active un Cl (-) de courant qui produit un efflux de Cl (-) des ions et amplifie la d&#xE9;polarisation. L&#x26;#39;identit&#xE9; mol&#xE9;culaire de Ca (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) canaux est encore loin d&#x26;#39;, bien que certains bestrophins a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9; que la fonction en tant que Ca (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) les canaux lorsqu&#x26;#39;il est exprim&#xE9; dans des syst&#xE8;mes h&#xE9;t&#xE9;rologues. Dans l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium olfactif, bestrophin-2 (Best2) a &#xE9;t&#xE9; indiqu&#xE9; comme &#xE9;tant un candidat pour un composant mol&#xE9;culaire du olfactive Ca (2 +)-actif Cl (-) de canal. Dans cette &#xE9;tude, nous avons analys&#xE9; les souris d&#xE9;pourvues de Best2. Nous avons compar&#xE9; les r&#xE9;ponses &#xE9;lectrophysiologiques de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium olfactif &#xE0; la stimulation odorante, ainsi que les propri&#xE9;t&#xE9;s de Ca (2 +) des Cl activ&#xE9; (-) les courants chez les souris de type sauvage (WT) et knock-out (KO) pour Best2. Nos r&#xE9;sultats confirment que Best2 est exprim&#xE9; dans les franges de neurones sensoriels olfactifs, tandis que les r&#xE9;ponses odorantes et Ca (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) les courants n&#x26;#39;&#xE9;taient pas significativement diff&#xE9;rents entre WT et souris KO. Ainsi, Best2 ne semble pas &#xEA;tre la composante principale de la cha&#xEE;ne mol&#xE9;culaire olfactive. D&#x26;#39;autres &#xE9;tudes sont n&#xE9;cessaires pour d&#xE9;terminer la fonction de Best2 dans les franges de neurones sensoriels olfactifs.

Courants chlorure de calcium-activ&#xE9;s dans olfactifs neurones sensoriels de souris d&#xE9;ficientes en Bestrophin-2

Olfaktorische sensorische Neuronen verwenden ein Verst&auml;rkungsmechanismus Chlorid basierenden Signal um Geruchsstoffe zu erkennen. Das Binden von Ger&uuml;chen an Rezeptoren in die Flimmerh&auml;rchen der olfaktorischen sensorischen Neuronen aktiviert eine Transduktion-Kaskade, bei der die &Ouml;ffnung der zyklische Nukleotid-Gating-Kan&auml;le und das Inkrafttreten des Ca(2+) die Flimmerh&auml;rchen. Ca(2+) wird eine aktuelle Cl(-), die ein Efflux Cl(-) Ionen produziert und verst&auml;rkt die Depolarisierung aktiviert. Die molekulare Identit&auml;t Cl(-) Ca(2+) aktivierte Kan&auml;le ist noch nicht abzusehen, obwohl einige Bestrophins gezeigt worden sind, die Funktion als Ca(2+) aktivierte Cl(-) Kan&auml;le in heterologen Systemen ausgedr&uuml;ckt. F&uuml;r Molekulare Komponente des olfaktorischen Ca(2+) aktivierte Cl(-) Kanals hat in der olfaktorischen Epithel Bestrophin-2 (Best2) als Kandidat aufgezeigt worden. In dieser Studie haben wir mit M&auml;usen fehlt Best2 analysiert. Wir verglichen die elektrophysiologischen Reaktionen von den olfaktorischen Epithel Odoriermittel Stimulation sowie die Eigenschaften des Ca(2+) aktivierte Cl(-) Str&ouml;mungen in Wildtyp (WT) und Knockout (KO)-M&auml;use f&uuml;r Best2. Unsere Ergebnisse best&auml;tigen, dass die Best2 in die Flimmerh&auml;rchen olfaktorischen sensorischen Neuronen, ausgedr&uuml;ckt wird, w&auml;hrend Odoriermittel Antworten und Ca(2+) aktivierte Cl(-) Str&ouml;mungen nicht signifikant verschieden zwischen WT und KO-M&auml;usen waren. So scheint Best2 nicht die molekulare Hauptkomponente des olfaktorischen Kanals werden. Weitere Studien sind erforderlich, um die Funktion des Best2 in die Flimmerh&auml;rchen der olfaktorischen sensorischen Neuronen zu bestimmen.

Kalzium aktivierte Chlorid Str&ouml;mungen im olfaktorischen sensorischen Neuronen von M&auml;usen fehlt Bestrophin-2.

I neuroni sensoriali olfattivi utilizzano un meccanismo di amplificazione del segnale basata su cloruro di rilevare odorifere. L&#39;associazione di odorizzazione i recettori le ciglia dei neuroni sensoriali olfattivi attiva una cascata di trasduzione che prevede l&#39;apertura di canali di nucleotide-gated cicliche e l&#39;entrata di Ca(2+) le ciglia. CA(2+) attiva una corrente di Cl(-) che produce un efflusso di ioni Cl(-) e amplifica la depolarizzazione. L&#39;identit&agrave; molecolare dei canali attivati dal Ca(2+) Cl(-) &egrave; ancora sfuggente, anche se alcuni bestrophins hanno dimostrato di funzionare come canali Cl(-)-Ca(2+)-attivato quando espressi in sistemi eterologo. Nell&#39;epitelio olfattivo, bestrophin-2 (Best2) &egrave; stato indicato come candidato per essere una componente molecolare del canale attivato Ca(2+) Cl(-) olfattivo. In questo studio, abbiamo analizzato i topi mancanti Best2. Abbiamo confrontato le risposte elettrofisiologiche dell&#39;epitelio olfattivo alla stimolazione odorant, cos&igrave; come le propriet&agrave; delle correnti Cl(-) Ca(2+)-attivato nel wild-type (WT) e topi knockout (KO) per Best2. I nostri risultati confermano che Best2 &egrave; espresso nelle ciglia dei neuroni sensoriali olfattivi, mentre odorant risposte e attivato Ca(2+) Cl(-) correnti non erano significativamente differenti tra topi WT e KO. Cos&igrave;, Best2 non sembra essere il principale componente molecolare del canale olfattivo. Sono necessari ulteriori studi per determinare la funzione di Best2 nelle ciglia dei neuroni sensoriali olfattivi.

Correnti di cloruro di calcio-attivato nei neuroni sensoriali olfattivi da topi privi di bestrophin-2.

&#x55C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5302;&#x3044;&#x7269;&#x8CEA;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5869;&#x5316;&#x7269;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5897;&#x5E45;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x55C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x4ED8;&#x81ED;&#x5264;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x74B0;&#x72B6;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306B;CA&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x958B;&#x53E3;&#x90E8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4F1D;&#x9054;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;Cl&#x306E;&#x6D41;&#x51FA;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#xFF08; - &#xFF09;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x3092;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x3092;&#x5897;&#x5E45;&#x3059;&#x308B;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306F;&#x3001;Cl&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7570;&#x7A2E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#xFF08; - &#xFF09;&#xFF08; - &#xFF09;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;Cl&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;bestrophins&#x304C;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5869;&#x7D20;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x4F9D;&#x7136;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3068;&#x3089;&#x3048;&#x3069;&#x3053;&#x308D;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;bestrophin-2&#xFF08;Best2&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x55C5;&#x899A;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;Cl&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6210;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Best2&#x3092;&#x6B20;&#x640D;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x89E3;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;Best2&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#xFF08;KO&#xFF09;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#xFF08;WT&#xFF09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x96FB;&#x6D41;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5302;&#x3044;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x55C5;&#x899A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;CA&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;Cl&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;Best2&#x306F;&#x3001;&#x55C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3089;&#x304F;&#x5302;&#x3044;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5869;&#x7D20;&#xFF08; - &#xFF09;&#x96FB;&#x6D41;&#x306F;WT&#x3068;KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x9593;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;Best2&#x306F;&#x3001;&#x55C5;&#x899A;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x6210;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x55C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306E;Best2&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Bestrophin-2&#x3092;&#x6B20;&#x640D;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x55C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5869;&#x5316;&#x96FB;&#x6D41;

&#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xB274;&#xB7F0; &#xC5FC;&#xD654; &#xAE30;&#xBC18; &#xC2E0;&#xD638; &#xC99D;&#xD3ED; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; odorants&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0;. Odorants &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCC44;&#xB110; &#xC5F4;&#xACE0; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xC5D0; ca(2+)&#xC758; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBCC0;&#xD658; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ca(2+)&#xB294; Cl(-) &#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xACBD;&#xACFC; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; &#xC99D;&#xD3ED; &#xD558;&#xB294; depolarization Cl(-) &#xD604;&#xC7AC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Cl(-) &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; id&#xB294; &#xC77C;&#xBD80; bestrophins Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Cl(-) &#xCC44;&#xB110; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xC560;&#xB9E4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6C4; &#xAC01; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC5D0;&#xC11C; bestrophin-2 (Best2) &#xD6C4; &#xAC01; Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Cl(-) &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC950; Best2 &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xBD84;&#xC11D;. &#xC6B0;&#xB9AC; Best2 odorant &#xC790;&#xADF9;, &#xD6C4; &#xAC01; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; electrophysiological &#xC751;&#xB2F5; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; Cl(-) Ca(2+) &#xD65C;&#xC131; &#xC804;&#xB958; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; (WT) &#xBC0F; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; (KO) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC18D;&#xC131; &#xBE44;&#xAD50;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD655;&#xC778; Best2 odorant &#xC751;&#xB2F5; &#xBC0F; Cl(-) Ca(2+) &#xD65C;&#xC131; &#xC804;&#xB958; &#xD588;&#xB2E4; WT &#xBC0F; &#xCF54; &#xC950; &#xC0AC;&#xC774; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, Best2 &#xD6C4; &#xAC01; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xBD84;&#xC790; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC218;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xAC00; &#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xC5D0; Best2 &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Bestrophin-2 &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC5FC;&#xD654; &#xCE7C;&#xC298; &#xD65C;&#xC131; &#xC804;&#xB958;.

Neuronas sensoriales olfativas utilizar un mecanismo de se&#xF1;ales a base de cloruro de amplificaci&#xF3;n para detectar sustancias odor&#xED;feras. La uni&#xF3;n de los odorantes a los receptores en los cilios de las neuronas sensoriales olfativas se activa una cascada de transducci&#xF3;n que implica la apertura de los nucle&#xF3;tidos c&#xED;clicos-canales con compuertas y la entrada de Ca (2 +) en los cilios. Ca (2 +) activa un Cl (-) la corriente que produce un flujo de salida de Cl (-) iones y amplifica la despolarizaci&#xF3;n. La identidad molecular de Ca (2 +) activada por Cl (-) canales es todav&#xED;a dif&#xED;cil de alcanzar, aunque algunos bestrophins han demostrado que funcionan como Ca (2 +) activada por Cl (-) canales cuando se expresan en sistemas heter&#xF3;logos. En el epitelio olfatorio, bestrofina-2 (Best2) ha sido indicado como un candidato para ser un componente molecular del olfato Ca (2 +) activada por Cl (-) del canal. En este estudio, hemos analizado los ratones que carecen Best2. Se compararon las respuestas electrofisiol&#xF3;gicas del epitelio olfativo a la estimulaci&#xF3;n olor, as&#xED; como las propiedades de Ca (2 +) activada por Cl (-) las corrientes en los ratones de tipo salvaje (WT) y knockout (KO) para Best2. Nuestros resultados confirman que Best2 se expresa en los cilios de las neuronas sensoriales olfativas, mientras que las respuestas de olor y Ca (2 +) activada por Cl (-) las corrientes no fueron significativamente diferentes entre el TE y ratones KO. As&#xED;, Best2 no parece ser el principal componente molecular del canal olfatorio. Se requieren estudios adicionales para determinar la funci&#xF3;n de Best2 de los cilios de las neuronas sensoriales olfativas.

Activados por calcio-Corrientes de cloruro en las neuronas sensoriales olfativas de ratones que carecen bestrofina-2

&#xC77C;&#xBD80; &#xD718;&#xBC1C;&#xC131; &#xC720;&#xAE30; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; antipersonnel &#xC9C0;&#xB8B0; &#xC99D;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; TNT&#xC640; RDX &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC751;&#xB2F5; &#xB3FC;&#xC9C0;&#xC640; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xB8B0;&#xC758; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD2F1; &#xBD80;&#xD488;&#xC758; GC/MS &#xBD84;&#xC11D; &#xAD11;&#xC0B0;&#xC758; &quot;&#xD5A5;&#xC218;&quot;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2E4;&#xD589; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC950; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC810; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC804;&#xAE30;-olfactogram&#xC640; odorants, &#xD3ED;&#xBC1C;&#xBB3C;&#xC758; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0; monophosphate (&#xCEA0;&#xD504;) &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4; &#xC870;&#xAC74;&#xC73C;&#xB85C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xC758; &#xC900;&#xBE44;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; TNT&#xC640; RDX&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAE30;&#xBC95;, &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xCE7C;&#xC298; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xD3ED;&#xBC1C;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xD3ED;&#xBC1C; &#xC7A5;&#xCE58; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD654;&#xD559; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3ED;&#xBC1C;&#xBB3C;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La respuesta de neuronas sensoriales olfativas a TNT y RDX, as&iacute; como algunos compuestos org&aacute;nicos vol&aacute;tiles presentes en los vapores de las minas terrestres antipersonales ha sido estudiada en el cerdo y en la rata. Se realizaron an&aacute;lisis de GC/MS de diferentes componentes pl&aacute;sticos de seis tipos diferentes de las minas terrestres con el fin de identificar los componentes del &quot;perfume&quot; de minas. Se realizaron estudios sobre mucosa olfatoria rata con electro-olfactogram y calcio im&aacute;genes t&eacute;cnicas, mientras que los cambios en los niveles de monofosfato de adenosina c&iacute;clico (cAMP) despu&eacute;s de la exposici&oacute;n a olores y explosivos fueron utilizados como un criterio para evaluar la interacci&oacute;n de TNT y RDX con receptores olfativos en una preparaci&oacute;n de cilios olfativos cerdo aislados. Estos estudios indican que los compuestos qu&iacute;micos asociados con explosivos y dispositivos explosivos pueden activar receptores olfativos mam&iacute;feros.

Detecci&oacute;n de explosivos por las neuronas sensoriales olfativas.

&#x732A;&#x548C;&#x9F20;&#x5BF9; TNT &#x548C; RDX &#x4EE5;&#x53CA;&#x4E00;&#x4E9B;&#x6325;&#x53D1;&#x6027;&#x7684;&#x6709;&#x673A;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x6740;&#x4F24;&#x4EBA;&#x5458;&#x5730;&#x96F7;&#x7684;&#x84B8;&#x6C14;&#x5C31;&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x786E;&#x5B9A;&#x5730;&#x96F7;&#x7684;&quot;&#x9999;&#x6C34;&quot;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x6C14;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;/&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x5206;&#x6790;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5851;&#x6599;&#x90E8;&#x4EF6;&#x7684;&#x516D;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x79CD;&#x7C7B;&#x7684;&#x5730;&#x96F7;&#x3002;&#x4E0E;&#x7535; olfactogram &#x548C;&#x9499;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6C14;&#x5473;&#x548C;&#x7206;&#x70B8;&#x7269;&#x66B4;&#x9732;&#x540E;&#x7684;&#x73AF;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7; &#xFF08;cAMP&#xFF09; &#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6807;&#x51C6;&#x8FDB;&#x884C;&#x8BC4;&#x4F30;&#x65F6;&#x91C7;&#x7528;&#x4E0E;&#x55C5;&#x89C9;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x5236;&#x5907;&#x79BB;&#x4F53;&#x7684;&#x732A;&#x55C5;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x7684; TNT &#x548C; RDX &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x5927;&#x9F20;&#x55C5;&#x7C98;&#x819C;&#x4E0A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x7206;&#x70B8;&#x7269;&#x548C;&#x7206;&#x70B8;&#x88C5;&#x7F6E;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x55C5;&#x89C9;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;

&#x7531;&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7206;&#x70B8;&#x7269;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;

The response of olfactory sensory neurons to TNT and RDX as well as to some volatile organic compounds present in the vapors of antipersonnel landmines has been studied both in the pig and in the rat. GC/MS analyses of different plastic components of six different kinds of landmines were performed in order to identify the components of the "perfume" of mines. Studies on rat olfactory mucosa were carried out with electro-olfactogram and calcium imaging techniques, while changes in the cyclic adenosine monophosphate (cAMP) levels following exposure to odorants and explosives were used as a criterion to evaluate the interaction of TNT and RDX with olfactory receptors in a preparation of isolated pig olfactory cilia. These studies indicate that chemical compounds associated with explosives and explosive devices can activate mammalian olfactory receptors.

Detection of explosives by olfactory sensory neurons.

La r&eacute;ponse des neurones sensoriels olfactifs de TNT et de RDX, ainsi quant &agrave; certains compos&eacute;s organiques volatils pr&eacute;sents dans les vapeurs de mines antipersonnel a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e chez le porc, tant chez le rat. Analyses de GC/MS de diff&eacute;rentes composantes en plastique de six types diff&eacute;rents de mines terrestres ont &eacute;t&eacute; effectu&eacute;es afin d&#39;identifier les composants du &quot;parfum&quot; des mines. &Eacute;tudes sur la muqueuse olfactive de rat ont &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;es avec l&#39;&eacute;lectro-olfactogramme et le calcium imaging techniques, tandis que les changements dans les concentrations d&#39;ad&eacute;nosine monophosphate cyclique (AMPc) apr&egrave;s exposition &agrave; des substances odorantes et des explosifs ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s comme crit&egrave;re pour &eacute;valuer l&#39;interaction de TNT et de RDX avec les r&eacute;cepteurs olfactifs dans une pr&eacute;paration de cils olfactifs de porc isol&eacute;. Ces &eacute;tudes indiquent que les compos&eacute;s chimiques explosifs et engins explosifs peuvent activer les r&eacute;cepteurs olfactifs chez les mammif&egrave;res.

D&eacute;tection d&#39;explosifs par les neurones sensoriels olfactifs.

Die Reaktion der olfaktorischen sensorischen Neuronen auf TNT und RDX sowie &uuml;ber einige fl&uuml;chtigen organischen Verbindungen in die D&auml;mpfe von Antipersonenminen vorhanden ist in das Schwein und der Ratte studiert worden. GC/MS-Analysen der verschiedenen Bauteile der sechs verschiedene Arten von Landminen wurden durchgef&uuml;hrt, um die Komponenten von der &quot;Duft&quot; von Minen zu identifizieren. Studien zur Ratte olfaktorischen Schleimhaut erfolgten mit Elektro-Olfactogram und Calcium, die bildgebenden Verfahren, w&auml;hrend &Auml;nderungen im Niveau zyklischen Adenosinmonophosphat (cAMP) nach Exposition gegen&uuml;ber Ger&uuml;chen und Sprengstoff als Kriterium verwendet wurden, um das Zusammenspiel von TNT und RDX mit olfaktorischen Rezeptoren in einer Zubereitung der isolierten Schwein olfaktorischen Zilien auszuwerten. Diese Studien zeigen, dass chemische Verbindungen zugeordnet Sprengstoffe und Sprengk&ouml;rper S&auml;ugetier-olfaktorische Rezeptoren aktivieren k&ouml;nnen.

Erkennung von Sprengstoff von olfaktorischen sensorischen Neuronen.

La risposta dei neuroni sensoriali olfattivi a TNT e RDX pure per quanto riguarda alcuni composti organici volatili presenti nei vapori delle mine antiuomo &egrave; stata studiata nel maiale e nel ratto. GC/MS analisi di diversi componenti in plastica di sei diversi tipi di mine antiuomo sono state effettuate al fine di identificare i componenti del &quot;profumo&quot; delle miniere. Studi sulla mucosa olfattiva di ratto sono stati effettuati con elettro-olfactogram e calcio immagini tecniche, mentre le modifiche nei livelli di adenosina monofosfato ciclico (cAMP) dopo esposizione di odorizzazione ed esplosivi sono state utilizzate come criterio per valutare l&#39;interazione di TNT e RDX con recettori olfattivi in una preparazione delle ciglia olfattive isolato maiale. Questi studi indicano che i composti chimici associati con esplosivi e dispositivi esplosivi possono attivare recettori olfattivi nei mammiferi.

Rilevazione degli esplosivi dai neuroni sensoriali olfattivi.

&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x63EE;&#x767A;&#x6027;&#x6709;&#x6A5F;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x5BFE;&#x4EBA;&#x5730;&#x96F7;&#x306E;&#x84B8;&#x6C17;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x306E; TNT &#x3068; RDX &#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x55C5;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x30D6;&#x30BF;&#x3068;&#x30CD;&#x30BA;&#x30DF;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;GC/MS &#x5206;&#x6790;&#x5730;&#x96F7;&#x306E; 6 &#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x90E8;&#x54C1;&#x306E;&#x9271;&#x5C71;&#x306E;&#x300C;&#x9999;&#x6C34;&#x300D;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x55C5;&#x7C98;&#x819C;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17; olfactogram &#x3068;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x6280;&#x8853;&#x3001;&#x5302;&#x3044;&#x3084;&#x706B;&#x85AC;&#x985E;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x74B0;&#x72B6;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E00;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; (&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;) &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x62BD;&#x51FA;&#x6761;&#x4EF6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8C5A;&#x55C5;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x306E; TNT &#x3068; RDX &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9593;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7206;&#x767A;&#x7269;&#x3084;&#x7206;&#x767A;&#x6027;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x55C5;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7206;&#x85AC;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3002;

Ca(2+) &#x6FC0;&#x6D3B; Cl(-) &#x901A;&#x9053;&#x4E2D;&#x51E0;&#x79CD;&#x751F;&#x7406;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x55C5;&#x89C9;&#x8F6C;&#x5BFC;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x76EE;&#x524D;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x6210;&#x5458;&#x8DE8;&#x819C; 16 &#xFF08;TMEM16&#xFF0C;&#x4E5F;&#x547D;&#x540D;&#x4E3A; anoctamin&#xFF09; &#x7684;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) Cl(-) &#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x55C5;&#x89C9;&#x8F6C;&#x5BFC;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x63D0;&#x8BAE; TMEM16b/anoctamin2&#xFF0C;Ca(2+) &#x6FC0;&#x6D3B; Cl(-) &#x9891;&#x9053;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x5206;&#x5B50;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x5C1A;&#x672A;&#x6267;&#x884C;&#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x672C;&#x673A;&#x548C;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7528;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7535;&#x538B;&#x94B3;&#x6280;&#x672F;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x672C;&#x673A;&#x901A;&#x9053;&#x9694;&#x79BB;&#x5C0F;&#x9F20;&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x548C;&#x4E0E;&#x9F20;&#x6807; TMEM16b/anoctamin2 &#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B; 293T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5B83;&#x4EEC;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76F4;&#x63A5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6E20;&#x9053;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x53EF;&#x91CD;&#x73B0;&#x7ECF;&#x80DE;&#x5185;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8DF3;&#x7B3C;&#x7ECF; photorelease &#x7D22;&#x53D6;&#x548C;&#x786E;&#x5B9A;&#x80DE;&#x5916;&#x963B;&#x585E;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x548C;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;Cl(-) &#x901A;&#x9053;&#x963B;&#x6EDE;&#x5242; niflumic &#x9178;&#x3001; 5-&#x785D;&#x57FA;-2-(3 phenylpropylamino) &#x82EF;&#x7532;&#x9178; (NPPB) &#x548C;&#x5206;&#x5E03;&#x5F0F;&#x5165;&#x4FB5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5728;&#x819C;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x4FA7;&#x5E94;&#x7528;&#x9020;&#x6210;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x8861;&#x91CF;&#x5916;&#x90E8;&#x79BB;&#x5B50;&#x4EA4;&#x6362;&#xFF0C;&#x5E76;&#x900F;&#x9732;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7535;&#x6D41;&#xFF0C;&#x67D0;&#x4E9B;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x6F5C;&#x5728;&#x9006;&#x8F6C;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E86;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;&#x4E0E;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176; III &#x5728;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x6B63; TMEM16b/anoctamin2&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x6D4B;&#x5F97;&#x7684;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x662F;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x662F;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684;&#x548C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8868;&#x660E; TMEM16b/anoctamin2 &#x5F88;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x672C;&#x673A;&#x55C5; Ca(2+) &#x6FC0;&#x6D3B; Cl(-) &#x5F53;&#x524D;&#x4E3B;&#x8981;&#x4E9A;&#x3002;

&#x9499;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8DF3;&#x8F6C;&#x663E;&#x793A;&#x9F20;&#x6807;&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C; TMEM16b &#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE; 293T &#x7EC6;&#x80DE;&#x9499;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6C2F;&#x79BB;&#x5B50;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x79BB;&#x5B50;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x3002;

Ca(2+)-activated Cl(-) channels play relevant roles in several physiological processes, including olfactory transduction, but their molecular identity is still unclear. Recent evidence suggests that members of the transmembrane 16 (TMEM16, also named anoctamin) family form Ca(2+)-activated Cl(-) channels in several cell types. In vertebrate olfactory transduction, TMEM16b/anoctamin2 has been proposed as the major molecular component of Ca(2+)-activated Cl(-) channels. However, a comparison of the functional properties in the whole-cell configuration between the native and the candidate channel has not yet been performed. In this study, we have used the whole-cell voltage-clamp technique to measure functional properties of the native channel in mouse isolated olfactory sensory neurons and compare them with those of mouse TMEM16b/anoctamin2 expressed in HEK 293T cells. We directly activated channels by rapid and reproducible intracellular Ca(2+) concentration jumps obtained from photorelease of caged Ca(2+) and determined extracellular blocking properties and anion selectivity of the channels. We found that the Cl(-) channel blockers niflumic acid, 5-nitro-2-(3-phenylpropylamino)benzoic acid (NPPB) and DIDS applied at the extracellular side of the membrane caused a similar inhibition of the two currents. Anion selectivity measured exchanging external ions and revealed that, in both types of currents, the reversal potential for some anions was time dependent. Furthermore, we confirmed by immunohistochemistry that TMEM16b/anoctamin2 largely co-localized with adenylyl cyclase III at the surface of the olfactory epithelium. Therefore, we conclude that the measured electrophysiological properties in the whole-cell configuration are largely similar, and further indicate that TMEM16b/anoctamin2 is likely to be a major subunit of the native olfactory Ca(2+)-activated Cl(-) current.

Calcium concentration jumps reveal dynamic ion selectivity of calcium-activated chloride currents in mouse olfactory sensory neurons and TMEM16b-transfected HEK 293T cells.

Ca (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) canaux jouent un r&#xF4;le pertinentes dans plusieurs processus physiologiques, y compris la transduction olfactive, mais leur identit&#xE9; mol&#xE9;culaire n&#x26;#39;est pas encore clair. Des donn&#xE9;es r&#xE9;centes sugg&#xE8;rent que les membres du transmembranaire 16 (TMEM16, &#xE9;galement nomm&#xE9; anoctamin) forme la famille Ca (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) des canaux dans plusieurs types cellulaires. Dans la transduction olfactive des vert&#xE9;br&#xE9;s, TMEM16b/anoctamin2 a &#xE9;t&#xE9; propos&#xE9; comme la principale composante mol&#xE9;culaire de Ca (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) canaux. Cependant, une comparaison des propri&#xE9;t&#xE9;s fonctionnelles de la configuration &#xE0; cellules enti&#xE8;res entre l&#x26;#39;origine et le canal candidat n&#x26;#39;a pas encore &#xE9;t&#xE9; effectu&#xE9;e. Dans cette &#xE9;tude, nous avons utilis&#xE9; l&#x26;#39;ensemble des cellules du voltage-clamp technique pour mesurer les propri&#xE9;t&#xE9;s fonctionnelles du canal natif chez la souris isol&#xE9; olfactifs neurones sensoriels et les comparer avec ceux de la souris TMEM16b/anoctamin2 exprim&#xE9; dans des cellules HEK 293T. Nous activ&#xE9; directement par les canaux rapide et reproductible intracellulaire de Ca (2 +) sauts de concentration obtenus &#xE0; partir de photos&#xE9;paration cage Ca (2 +) et d&#xE9;termin&#xE9;es extracellulaires des propri&#xE9;t&#xE9;s de blocage et la s&#xE9;lectivit&#xE9; des canaux d&#x26;#39;anions. On a constat&#xE9; que l&#x26;#39;Cl (-) de blocage des canaux acide niflumique, 5-nitro-2-(3-ph&#xE9;nylpropylamino) acide benzo&#xEF;que (NPPB) et DIDS appliqu&#xE9;s sur le c&#xF4;t&#xE9; de la membrane extracellulaire provoque une inhibition similaire des deux courants. S&#xE9;lectivit&#xE9; anionique mesur&#xE9;e &#xE9;change d&#x26;#39;ions externes et a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que, dans les deux types de courants, le potentiel d&#x26;#39;inversion pour certains anions &#xE9;tait d&#xE9;pendant du temps. En outre, nous avons confirm&#xE9; par immunohistochimie que TMEM16b/anoctamin2 en grande partie co-localis&#xE9;s avec ad&#xE9;nylcyclase III &#xE0; la surface de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium olfactif. Par cons&#xE9;quent, nous concluons que les propri&#xE9;t&#xE9;s mesur&#xE9;es &#xE9;lectrophysiologiques dans la configuration cellule enti&#xE8;re sont largement similaires, et indiquent en outre que TMEM16b/anoctamin2 est susceptible d&#x26;#39;&#xEA;tre une sous-unit&#xE9; majeure de l&#x26;#39;indig&#xE8;ne Ca olfactive (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) en cours.

Sauts de concentration de calcium Reveal s&#xE9;lectivit&#xE9; ionique dynamique des courants de chlorure de calcium-activ&#xE9;s dans olfactif de la souris les neurones sensoriels et TMEM16b transfect&#xE9;es cellules HEK 293T

Ca(2+) aktivierte Cl(-) Kan&auml;le relevante Rollen in verschiedene physiologische Prozesse, einschlie&szlig;lich olfaktorischen Signaltransduktion, spielen, aber ihre molekulare Identit&auml;t ist noch unklar. J&uuml;ngste Hinweise, dass Mitglieder der Transmembran 16 (TMEM16, auch ANO1 genannt) Familie Form Cl(-) Ca(2+) aktivierte Kan&auml;le in mehreren-Typen Handy. In vertebrate olfaktorischen Signaltransduktion wurde TMEM16b/anoctamin2 als molekulare Hauptkomponente der Cl(-) Ca(2+) aktivierte Kan&auml;le vorgeschlagen. Jedoch hat ein Vergleich der funktionellen Eigenschaften in der ganz-Zell Konfiguration zwischen systemeigenen und dem Kandidaten-Kanal noch nicht durchgef&uuml;hrt wurde. In dieser Studie haben wir die ganze Zelle Spannung Klemm-Technik verwendet, um funktionelle Eigenschaften des nativen Kanals in Maus isoliert olfaktorischen sensorischen Neuronen zu messen und vergleichen Sie sie mit der Maus TMEM16b/anoctamin2 in HEK 293T Zellen ausgedr&uuml;ckt. Wir aktiviert direkt Kan&auml;le durch schnelle und reproduzierbare intrazellul&auml;re Ca(2+) Konzentration Spr&uuml;nge aus Photorelease der K&auml;fig Ca(2+) und extrazellul&auml;re blockierende Eigenschaften und Anion Selektivit&auml;t der Kan&auml;le bestimmt. Wir fanden, dass die Cl(-) Kanal Blocker Niflumic S&auml;ure, 5-Nitro - 2-(3-Phenylpropylamino) Benzoes&auml;ure (NPPB) und did angewendet an der extrazellul&auml;ren Seite der Membran verursacht eine &auml;hnliche Hemmung der zwei Str&ouml;me. Anion Selektivit&auml;t Austausch von externe Ionen gemessen und ergab, dass beide Arten von Str&ouml;mungen, die Umkehrung Potenzial f&uuml;r einige Anionen zeitabh&auml;ngig war. Dar&uuml;ber hinaus best&auml;tigt wir durch Immunhistochemie, dass TMEM16b/anoctamin2 mit Fehlfunktion Guanylatcyclase III an der Oberfl&auml;che des olfaktorischen Epithel weitgehend co-localized. Daher schlie&szlig;en wir, dass die gemessenen elektrophysiologischen Eigenschaften in der ganz-Zell Konfiguration weitgehend &auml;hnlich sind, und weiter darauf hinweisen, dass TMEM16b/anoctamin2 eine gro&szlig;e Untereinheit des die native olfaktorischen Ca(2+) aktivierte Cl(-) aktuelle sein d&uuml;rfte.

Kalzium-Konzentration-Spr&uuml;nge zeigen dynamische Ion Selektivit&auml;t aktivierte Kalzium-Chlorid Str&ouml;mungen in Maus olfaktorischen sensorischen Neuronen und TMEM16b transfected HEK 293T Zellen.

Attivato CA(2+) Cl(-) canali giocano un ruolo rilevante in diversi processi fisiologici, tra cui trasduzione olfattiva, ma la loro identit&agrave; molecolare non &egrave; ancora chiaro. Recenti evidenze suggeriscono che membri dei canali attivati Ca(2+) Cl(-) forma familiare (TMEM16, anche denominato anoctamin) 16 transmembrana in diversi tipi di cella. In vertebrati trasduzione olfattiva, TMEM16b/anoctamin2 &egrave; stato proposto come l&#39;importante componente molecolare dei canali attivati da Ca(2+) Cl(-). Tuttavia, un confronto tra le propriet&agrave; funzionali nella configurazione di cellule intere tra i nativi e il canale del candidato non &egrave; stato ancora eseguito. In questo studio, abbiamo utilizzato la tecnica di cellule intere tensione-pinza per misurare le propriet&agrave; funzionali del canale nativo nei neuroni sensoriali olfattivi del mouse isolato e confrontarle con quelle del mouse TMEM16b/anoctamin2 espresso nelle HEK 293T cellule. Abbiamo attivato direttamente canali di rapido e riproducibile Ca(2+) intracellulare concentrazione salti ottenuti da photorelease di Ca(2+) in gabbia e determinato extracellulare blocco propriet&agrave; e anione selettivit&agrave; dei canali. Abbiamo scoperto che l&#39;acido di niflumic di bloccanti del canale Cl(-), 5-nitro - 2-(3-phenylpropylamino) benzoico acido (NPPB) e DIDS applicato al lato extracellulare della membrana ha causato un&#39;inibizione simile delle due correnti. Selettivit&agrave; anionico misurato lo scambio di ioni esterni e ha rivelato che, in entrambi i tipi di correnti, l&#39;inversione del potenziale per alcuni anioni era tempo dipendente. Inoltre, abbiamo confermato dall&#39;immunoistochimica co-ha che TMEM16b/anoctamin2 in gran parte localizzato con adenil ciclasi III alla superficie dell&#39;epitelio olfattivo. Pertanto, concludere che le propriet&agrave; elettrofisiologiche misurate nella configurazione di cellule intere sono in gran parte simili e ulteriormente indicano che TMEM16b/anoctamin2 &egrave; probabile che sia una subunit&agrave; maggiore del nativo olfattive attivato Ca(2+) Cl(-) corrente.

Calcio concentrazione salti rivelano selettivit&agrave; dinamica dello ione di correnti di cloruro di calcio-attivato in neuroni sensoriali olfattivi del mouse e TMEM16b-transfected HEK 293T cellule.

&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5869;&#x7D20;&#xFF08; - &#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x55C5;&#x899A;&#x60C5;&#x5831;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30FC;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;&#x8CAB;&#x901A;16&#xFF08;TMEM16&#x3001;&#x307E;&#x305F;anoctamin&#x540D;&#x524D;&#xFF09;&#x5BB6;&#x65CF;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;Cl&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#xFF08; - &#xFF09;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x306E;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x3001;TMEM16b/anoctamin2&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;Cl&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x6210;&#x5206;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3001;&#x5019;&#x88DC;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x9593;&#x306E;&#x5168;&#x7D30;&#x80DE;&#x69CB;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x55C5;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;HEK 293T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;TMEM16b/anoctamin2&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5168;&#x30BB;&#x30EB;&#x96FB;&#x5727;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x76F4;&#x63A5;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3068;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x906E;&#x65AD;&#x7279;&#x6027;&#x306E;photorelease&#x3068;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30B8;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AB;&#x30FC;&#x30CB;&#x30D5;&#x30EB;&#x30E0;&#x9178;&#x3001;5  - &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;-2  - &#xFF08;3  -  phenylpropylamino&#xFF09;&#x5B89;&#x606F;&#x9999;&#x9178;&#xFF08;NPPB&#xFF09;&#x3068;&#x3001;&#x819C;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x3067;&#x9069;&#x7528;DIDS&#x3064;&#x306E;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;Cl&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x9670;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x90E8;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x4EA4;&#x63DB;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3068;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30A2;&#x30CB;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x9006;&#x8EE2;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306F;&#x6642;&#x9593;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;TMEM16b/anoctamin2&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EA;&#x30EB;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;III&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#xFF08; - &#xFF09;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x69CB;&#x6210;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x200B;&#x200B;&#x305F;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;TMEM16b/anoctamin2&#x306F;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;Cl&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x30B8;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x55C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;TMEM16b&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;HEK 293T&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5869;&#x5316;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;

Cl(-) &#xCC44;&#xB110; Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD6C4; &#xAC01; &#xBCC0;&#xD658; &#xB4F1; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC740; &#xC544;&#xC9C1; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; 16 (TMEM16, anoctamin&#xC774; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; &#xD568;) &#xAC00;&#xC871; &#xD615;&#xD0DC; Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Cl(-) &#xCC44;&#xB110; &#xBA64;&#xBC84; &#xD615;&#xC2DD; &#xC140; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;. &#xCC99;&#xCD94; &#xD6C4; &#xAC01; &#xBCC0;&#xD658;, TMEM16b/anoctamin2 Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Cl(-) &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xBD84;&#xC790; &#xAD6C;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xC640; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xCC44;&#xB110; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xAD6C;&#xC131; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD2B9;&#xC131;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;&#xB294; &#xC544;&#xC9C1; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC808;&#xC5F0; &#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; TMEM16b/anoctamin2 HEK 293T &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xBE44;&#xAD50; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xC804;&#xC555; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC7AC;&#xD604;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xC810;&#xD504; &#xAC07;&#xD78C;&#xB41C; ca(2+)&#xC758; photorelease&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xACE0; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xCC28;&#xB2E8; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xACB0;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC; Cl(-) &#xCC44;&#xB110; &#xCC28;&#xB2E8;&#xC81C; niflumic &#xC0B0;, 5-&#xB2C8;&#xD2B8;&#xB85C;-2-(3-phenylpropylamino) &#xBCA4;&#xC870;&#xC0B0; (NPPB) DIDS &#xB9C9;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xB450; &#xC804;&#xB958; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xC678;&#xBD80; &#xC774;&#xC628; &#xAD50;&#xD658; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0;, &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xC804;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xBD80; &#xC74C;&#xC774;&#xC628;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBC18;&#xC804;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB984;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; TMEM16b/anoctamin2&#xB294; &#xC8FC;&#xB85C; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; adenylyl cyclase III&#xC640; co-localized &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xACB0;&#xB860; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; electrophysiological &#xC18D;&#xC131; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACE0; &#xCD94;&#xAC00; TMEM16b/anoctamin2&#xB294; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xD6C4; &#xAC01; Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Cl(-) &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xB420; &#xAC83; &#xC784;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCE7C;&#xC298; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC810;&#xD504; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; TMEM16b &#xD398; HEK 293T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC5FC;&#xD654; &#xCE7C;&#xC298; &#xD65C;&#xC131; &#xC804;&#xB958; &#xB3D9;&#xC801; &#xC774;&#xC628; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xACF5;&#xAC1C;.

Ca (2 +) activada por Cl (-) los canales juegan un papel relevante en varios procesos fisiol&#xF3;gicos, incluyendo la transducci&#xF3;n olfativa, pero su identidad molecular a&#xFA;n no est&#xE1; claro. La evidencia reciente sugiere que los miembros de la transmembrana de 16 (TMEM16, tambi&#xE9;n llamado anoctamin) de la familia la forma de Ca (2 +) activada por Cl (-) canales en varios tipos de c&#xE9;lulas. En la transducci&#xF3;n olfativa vertebrado, TMEM16b/anoctamin2 ha sido propuesto como el principal componente molecular de Ca (2 +)-activado Cl (-) canales. Sin embargo, una comparaci&#xF3;n de las propiedades funcionales en la configuraci&#xF3;n de c&#xE9;lula completa entre el nativo y el canal de candidato a&#xFA;n no se ha realizado. En este estudio, hemos utilizado el conjunto de c&#xE9;lulas voltaje-clamp t&#xE9;cnica para medir las propiedades funcionales del canal nativo en el rat&#xF3;n aislado neuronas sensoriales olfativas, y compararlas con las de rat&#xF3;n TMEM16b/anoctamin2 expresado en c&#xE9;lulas HEK 293T. Hemos activado directamente por los canales de calcio intracelular r&#xE1;pido y reproducible (2 +) saltos de concentraci&#xF3;n obtenidos a partir de photorelease de la jaula de Ca (2 +) y de determinadas propiedades extracelulares de bloqueo y la selectividad de los canales de aniones. Hemos encontrado que el Cl (-) bloqueadores de los canales de &#xE1;cido nifl&#xFA;mico, 5-nitro-2-(3-fenilpropilamino) de &#xE1;cido benzoico (NPPB) y DIDS aplicadas en el lado extracelular de la membrana causado una inhibici&#xF3;n similar de las dos corrientes. La selectividad de aniones mide el intercambio de iones externos y revel&#xF3; que, en ambos tipos de corrientes, la inversi&#xF3;n potencial de algunos aniones fue dependiente del tiempo. Por otra parte, se confirm&#xF3; mediante t&#xE9;cnicas de inmunohistoqu&#xED;mica que TMEM16b/anoctamin2 en gran medida co-localizada con la adenilil ciclasa III, en la superficie del epitelio olfatorio. Por lo tanto, se concluye que las propiedades medidas electrofisiol&#xF3;gicas en la configuraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas enteras son muy similares, e indican que TMEM16b/anoctamin2 es probable que sea una subunidad principal de la nativa Ca olfatorio (2 +) activada por Cl (-) actual.

Saltos concentraci&#xF3;n de calcio i&#xF3;nico Reveal Selectividad din&#xE1;mica de las corrientes de cloruro de calcio activados en las neuronas sensoriales olfativas de rat&#xF3;n y TMEM16b transfecci&#xF3;n de c&#xE9;lulas HEK 293T

&#x6784;&#x8C61;&#x8F6C;&#x6362;&#x7684;&#x670A;&#x86CB;&#x767D; (PrP(C)) &#x73B0;&#x5728;&#x516C;&#x8BA4;&#x7684;&#x56E0;&#x679C;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x81F4;&#x547D;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x670A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x957F;&#x671F;&#x6301;&#x4E45;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#xFF0C;PrP(C) &#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x4ECD;&#x7136;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x636E;&#x62A5; PrP(C) &#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x5404;&#x4E2A;&#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x55C5;&#x89C9;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; &#xFF08;OSNs&#xFF09; &#x5728;&#x5176;&#x7CBE;&#x786E;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4ECD;&#x8FDB;&#x884C;&#x8FA9;&#x8BBA;&#x3002;&#x5E94;&#x8BE5;&#x91CD;&#x65B0;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C; PrP(C) &#x8868;&#x8FBE;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; PrP(C) &#x6570;&#x989D;&#xFF0C;&#x5C31;&#x662F;&#xFF0C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3001; PrP &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x3001; &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; PrP C &#x8D85;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x6210;&#x4EBA;&#x540C;&#x7C7B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; PrP(C) &#x8868;&#x793A;&#x5728; OSNs&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4E5F;&#x5206;&#x914D;&#x4E0D;&#x5747;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x3001; &#x6811;&#x7A81;&#x548C;&#x6839;&#x5C16;&#x7684;&#x56FE;&#x5C42;&#xFF0C;&#x5728;&#x548C;&#x8F74;&#x7A81;&#x8D8A;&#x53D1;&#x88AB;&#x63A2;&#x6D4B;&#x51FA;&#x6765;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x901A;&#x8FC7;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7535;-olfactograms 3 &#x9F20;&#x6807;&#x7EBF;&#x906D;&#x53D7;&#x4E0D;&#x540C;&#x523A;&#x6FC0;&#x534F;&#x8BAE;&#x7684;&#x7814;&#x7A76; PrP(C) &#x53C2;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x6C14;&#x5473;&#xFF0C;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; 3 PrP &#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#xFF0C;&#x652F;&#x6301;&#x6392;&#x9664;&#x5728;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; PrP(C) &#x76F4;&#x63A5;&#x884C;&#x52A8;&#x7684;&#x524D;&#x51E0;&#x4EFD;&#x62A5;&#x544A;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5DEE;&#x522B;&#x3002;

&#x670A;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x6210;&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x55C5;&#x89C9;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;

A conformational conversion of the cellular prion protein (PrP(C)) is now recognized as the causal event of fatal neurodegenerative disorders, known as prion diseases. In spite of long-lasting efforts, however, the physiological role of PrP(C) remains unclear. It has been reported that PrP(C) is expressed in various areas of the olfactory system, including the olfactory epithelium, but its precise localization in olfactory sensory neurons (OSNs) is still debated. Here, using immunohistochemistry tools, we have reinvestigated the expression and localization of PrP(C) in the olfactory epithelium of adult congenic mice expressing different PrP(C) amounts, that is, wild-type, PrP-knockout, and transgenic PrP(C)-overexpressing animals. We found that PrP(C) was expressed in OSNs, in which, however, it was unevenly distributed, being detectable at low levels in cell bodies, dendrites and apical layer, and more abundantly in axons. We also studied the involvement of PrP(C) in the response of the olfactory epithelium to odorants, by comparing the electro-olfactograms of the 3 mouse lines subjected to different stimulation protocols. We found no significant difference between the 3 PrP genotypes, supporting previous reports that exclude a direct action of PrP(C) in the early signal transduction activity of the olfactory epithelium.

The cellular prion protein is expressed in olfactory sensory neurons of adult mice but does not affect the early events of the olfactory transduction pathway.

Une conversion conformationnelle de la prot&#xE9;ine prion cellulaire (PrP (C)) est maintenant reconnu comme l&#x26;#39;&#xE9;v&#xE9;nement causal de maladies neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ratives fatales, appel&#xE9;es maladies &#xE0; prions. En d&#xE9;pit de longue dur&#xE9;e efforts, cependant, le r&#xF4;le physiologique de la PrP (C) reste incertaine. Il a &#xE9;t&#xE9; rapport&#xE9; que la PrP (C) est exprim&#xE9;e dans divers domaines du syst&#xE8;me olfactif, y compris l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium olfactif, mais sa localisation pr&#xE9;cise dans les neurones sensoriels olfactifs (ARS) est encore d&#xE9;battue. Ici, en utilisant des outils d&#x26;#39;immunohistochimie, nous avons une nouvelle enqu&#xEA;te de l&#x26;#39;expression et la localisation de la PrP (C) dans l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium olfactif de souris adultes exprimant la PrP cong&#xE9;niques diff&#xE9;rentes (C) Les montants, qui est de type sauvage, la PrP-KO, et transg&#xE9;niques PrP (C ) surexprimant animaux. Nous avons trouv&#xE9; que la PrP (C) a &#xE9;t&#xE9; exprim&#xE9;e en ARS, dans laquelle, cependant, il a &#xE9;t&#xE9; in&#xE9;galement r&#xE9;partie, &#xE9;tant d&#xE9;tectable &#xE0; de faibles niveaux dans les corps cellulaires, des dendrites et la couche apicale, et plus abondamment dans les axones. Nous avons &#xE9;galement &#xE9;tudi&#xE9; l&#x26;#39;implication de la PrP (C) dans la r&#xE9;ponse de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium olfactif &#xE0; odorants, en comparant les olfactograms &#xE9;lectro-des 3 lign&#xE9;es de souris soumises &#xE0; diff&#xE9;rents protocoles de stimulation. Nous n&#x26;#39;avons trouv&#xE9; aucune diff&#xE9;rence significative entre les g&#xE9;notypes PrP 3, en soutenant les rapports pr&#xE9;c&#xE9;dents qui excluent une action directe de la PrP (C) dans l&#x26;#39;activit&#xE9; de transduction du signal au d&#xE9;but de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium olfactif.

La prot&#xE9;ine prion cellulaire est exprim&#xE9;e en neurones sensoriels olfactifs de souris adultes, mais n&#x26;#39;affecte pas les &#xE9;v&#xE9;nements pr&#xE9;coces de la voie de transduction olfactive

Eine Konformations&auml;nderungen Umwandlung von zellul&auml;ren Prionproteins (PrP(C)) wird jetzt als das urs&auml;chliche Ereignis t&ouml;dliche Neurodegenerative Erkrankungen, bekannt als Prionenkrankheiten erkannt. Trotz lang andauernder Bem&uuml;hungen bleibt jedoch die physiologische Rolle des PrP(C) unklar. Es wurde berichtet, dass PrP(C) sich in verschiedenen Bereichen des olfaktorischen Systems dr&uuml;ckt, einschlie&szlig;lich das olfaktorische Epithel, aber deren genaue Lokalisierung im olfaktorischen sensorischen Neuronen (OSNs) wird noch diskutiert. Hier haben mit Immunohistochemistry-Tools wir den Ausdruck und die Lokalisierung von PrP(C) in das olfaktorische Epithel der Erwachsenen Congenic M&auml;use zum Ausdruck bringen unterschiedlicher PrP(C) Mengen, d. h. Wildtyp PrP-k.o. und transgenen PrP C-&uuml;berexprimierenden Tiere einbezogen. Wir fanden, dass PrP(C) in OSNs, in denen jedoch dieser ungleichm&auml;&szlig;ig verteilt wurde, wird auf einem niedrigen Niveau in Zelle K&ouml;rper, Dendriten und apikale Schicht und reichlicher in Axonen nachweisbar ausgedr&uuml;ckt wurde. Wir studierten auch die Einbeziehung der PrP(C) in der Antwort des olfaktorischen Epithel, Geruchsstoffe, durch den Vergleich der Elektro-Olfactograms der verschiedenen Stimulierung Protokolle unterworfen 3 Maus Linien. Wir fanden keinen signifikanten Unterschied zwischen den 3 PrP-Genotypen, Unterst&uuml;tzung von fr&uuml;here Berichten, die eine direkte Aktion der PrP(C) in der fr&uuml;hen Signaltransduktion T&auml;tigkeit des olfaktorischen Epithel ausschlie&szlig;en.

Zellul&auml;ren Prionproteins im olfaktorischen sensorischen Neuronen des Erwachsenen M&auml;usen angegeben jedoch hat keinen Einfluss auf die fr&uuml;hen Veranstaltungen des olfaktorischen Signaltransduktion Signalweges.

Una conversione conformazionale della proteina prionica cellulare (PrP(C)) &egrave; ora riconosciuto come l&#39;evento causale di patologie neurodegenerative fatali, noto come malattie da prioni. Nonostante gli sforzi di lunga durata, tuttavia, il ruolo fisiologico di PrP(C) rimane poco chiaro. &Egrave; stato riportato che PrP(C) &egrave; espresso in varie zone del sistema olfattivo, tra cui l&#39;epitelio olfattivo, ma la sua precisa localizzazione nei neuroni sensoriali olfattivi (OSNs) &egrave; ancora dibattuta. Nuovamente qui, utilizzando strumenti di immunoistochimica, noi abbiamo controllata l&#39;espressione e la localizzazione di PrP(C) nell&#39;epitelio olfattivo di topi congenici adulti esprimendo diverse quantit&agrave; di PrP(C), che &egrave;, wild-type, PrP-knockout e transgenici con sovraesprimono relativa PrP C animali. Abbiamo trovato che PrP(C) &egrave; stato espresso in OSNs, in cui, tuttavia, esso &egrave; stato distribuito in maniera disomogenea, essendo rilevabili a livelli bassi nei corpi cellulari, dendriti e strato apicale e pi&ugrave; abbondantemente in assoni. Abbiamo studiato anche il coinvolgimento dei PrP(C) nella risposta dell&#39;epitelio olfattivo di odorizzazione, confrontando l&#39;electro-olfactograms delle linee del 3 mouse sottoposte a protocolli di stimolazione differenti. Abbiamo non trovato alcuna differenza significativa tra i 3 genotipi PrP, sostenendo relazioni precedenti che escludono un&#39;azione diretta di PrP(C) nell&#39;attivit&agrave; di trasduzione di segnale precoce dell&#39;epitelio olfattivo.

La proteina prionica cellulare &egrave; espresso nei neuroni sensoriali olfattivi di topi adulti ma non pregiudica i primi eventi del pathway di trasduzione olfattiva.

&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;PrP&#xFF08;C&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x75C5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x52AA;&#x529B;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;PRP&#xFF08;C&#xFF09;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x4F9D;&#x7136;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;PrP&#xFF08;C&#xFF09;&#x306F;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x55C5;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;OSNs&#xFF09;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x55C5;&#x899A;&#x7CFB;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x5206;&#x91CE;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5225;&#x306E;PrP&#xFF08;C&#xFF09;&#x306E;&#x91CF;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3067;&#x306E;PrP&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x5C40;&#x5728;&#xFF08;C&#xFF09;&#x3092;&#x518D;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3001;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;PrP&#xFF08;C &#xFF09;&#x3092;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x52D5;&#x7269;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x3068;&#x6839;&#x5C16;&#x5C64;&#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;PRP&#xFF08;C&#xFF09;&#x306F;OSNs&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x504F;&#x5728;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306B;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C1;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x5225;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;3&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;olfactograms&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5302;&#x3044;&#x7269;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x306E;PrP&#xFF08;C&#xFF09;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x55C5;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;PrP&#xFF08;C&#xFF09;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x9664;&#x5916;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;3&#x306E;PrP&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x3092;&#x8A8D;&#x3081;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x55C5;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x55C5;&#x899A;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x306A;&#x3044;

(PrP(C)) &#xC774;&#xC81C; &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB85C; &#xC778;&#xC2DD; &#xB41C;&#xB2E4; &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD658;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xB178;&#xB825;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;, Prp(c)&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5ED;&#xD560; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. PrP(C) &#xD6C4; &#xAC01; &#xC0C1;&#xD53C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD; (OSNs)&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xADF8; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB17C;&#xC7C1; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xAE30;&#xC220; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; reinvestigated &#xC2DD; &#xBC0F; &#xC131;&#xC778; congenic &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; PrP(C) &#xAE08;&#xC561;, &#xC989;, &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;, PrP-&#xB179;&#xC544;&#xC6C3;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; PrP C overexpressing &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC5D0; Prp(c)&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, PrP(C) OSNs&#xC5D0;&#xB294;,, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xACE0;&#xB974;&#xAC8C; &#xBD84;&#xD3EC;, axons&#xC5D0;&#xC11C; &#xB354; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558; &#xACE0; &#xC140; &#xBAB8;&#xACFC; dendrites &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xCE35;&#xC5D0; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418; &#xACE0; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC790;&#xADF9; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC5D0; &#xB4E4;&#xC5B4;&#xC11C;&#xB294; 3 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC120;&#xC758; &#xC804;&#xAE30; olfactograms&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; odorants, &#xD6C4; &#xAC01; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; Prp(c)&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; Prp(c)&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xD589;&#xB3D9;&#xC744; &#xC81C;&#xC678; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xC804; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xB97C; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; 3 PrP genotypes &#xC0AC;&#xC774; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774; &#xBC1C;&#xACAC;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB9AC;&#xC628; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC131;&#xC778; &#xC950;&#xC758; &#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC804;&#xB2EC; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Una conversi&#xF3;n conformacional de la prote&#xED;na pri&#xF3;nica celular (PrP (C)), ahora se reconoce como el hecho causante de enfermedades neurodegenerativas fatales, conocidas como enfermedades pri&#xF3;nicas. A pesar de los esfuerzos de larga duraci&#xF3;n, sin embargo, el papel fisiol&#xF3;gico de PrP (C) no est&#xE1; claro. Se ha informado de que la PrP (C) se expresa en diversas &#xE1;reas del sistema olfativo, incluyendo el epitelio olfativo, pero su localizaci&#xF3;n precisa en las neuronas sensoriales olfativas (OSN) todav&#xED;a se discute. En este caso, el uso de herramientas de inmunohistoqu&#xED;mica, hemos volvi&#xF3; a investigar la expresi&#xF3;n y localizaci&#xF3;n de la PrP (C) en el epitelio olfatorio de los ratones adultos cong&#xE9;nicos expresar PrP diferente (c) los importes, es decir, de tipo salvaje, la PrP golpe de gracia-, y transg&#xE9;nicos PrP (C ) con sobreexpresi&#xF3;n de los animales. Hemos encontrado que la PrP (C) se expres&#xF3; en OSN, en la que, sin embargo, se distribuye de manera desigual, siendo detectable en bajos niveles en los cuerpos celulares, dendritas y la capa apical, y m&#xE1;s abundantemente en los axones. Tambi&#xE9;n se estudi&#xF3; la participaci&#xF3;n de la PrP (C) en la respuesta del epitelio olfativo a los olores, mediante la comparaci&#xF3;n de los electro-olfactograms de las 3 l&#xED;neas de ratones sometidos a protocolos de estimulaci&#xF3;n diferentes. No se encontraron diferencias significativas entre los 3 genotipos PrP, el apoyo a los informes anteriores que excluyen a una acci&#xF3;n directa de la PrP (C) en la actividad de transducci&#xF3;n de se&#xF1;ales a principios del epitelio olfatorio.

La prote&#xED;na pri&#xF3;n celular se expresa en las neuronas sensoriales olfativas de ratones adultos, pero no afecta los primeros eventos de la v&#xED;a de transducci&#xF3;n olfativa

&#x611F;&#x5B98;&#x77E5;&#x89C9;&#x8981;&#x6C42;&#x51C6;&#x786E;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x611F;&#x5B98;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; NCKX4&#xFF0C;&#x94BE;&#x4F9D;&#x8D56; Na(+)/Ca(2+)&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5FEB;&#x901F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7EC8;&#x6B62;&#x548C;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x55C5;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; &#xFF08;OSNs&#xFF09; &#x7684;&#x9002;&#x5F53;&#x9002;&#x5E94;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6362;&#x70ED;&#x5668;&#x3002;OSNs Nckx4(-/-) &#xFF08;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A; Slc24a4&#xFF09; &#x9F20;&#x6807;&#x663E;&#x793A;&#x5927;&#x5E45;&#x5EF6;&#x957F;&#x7684;&#x7B54;&#x590D;&#x548C;&#x66F4;&#x5F3A;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x3002;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570; Na (+)-OSNs &#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x611F;&#x5B98;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7ECF;&#x5916;&#x6C47;&#x662F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684; NCKX4 &#x548C; OSNs&#xFF0C;Nckx4(-/-) &#x9F20;&#x6807;&#x6709;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4E4B;&#x5904;&#xFF0C;&#x5728;&#x7F16;&#x7801;&#x4E0A;&#x53CD;&#x590D;&#x523A;&#x6FC0;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x3002;&#x55C5;&#x7279;&#x5B9A; Nckx4(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x5DF2;&#x964D;&#x4F4E;&#x4F53;&#x91CD;&#x548C;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x6076;&#x81ED;&#x6E90;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x5851;&#x9020;&#x7684;&#x55C5;&#x89C9;&#x53CD;&#x5E94;&#x5EFA;&#x7ACB; NCKX4 &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x5FEB;&#x901F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7EC8;&#x6B62;&#x548C;&#x5468;&#x56F4;&#x795E;&#x7ECF;&#x611F;&#x89C9;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6B63;&#x786E;&#x9002;&#x5E94;&#x8C03;&#x6574;&#x4F18;&#x5316;&#x611F;&#x77E5;&#x7684;&#x611F;&#x5B98;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;

NCKX4 Na(+)/Ca(2+) &#x6362;&#x70ED;&#x5668;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC8;&#x6B62;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x55C5;&#x89C9;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x3002;

Sensory perception requires accurate encoding of stimulus information by sensory receptor cells. We identified NCKX4, a potassium-dependent Na(+)/Ca(2+) exchanger, as being necessary for rapid response termination and proper adaptation of vertebrate olfactory sensory neurons (OSNs). Nckx4(-/-) (also known as Slc24a4) mouse OSNs displayed substantially prolonged responses and stronger adaptation. Single-cell electrophysiological analyses revealed that the majority of Na(+)-dependent Ca(2+) exchange in OSNs relevant to sensory transduction is a result of NCKX4 and that Nckx4(-/-) mouse OSNs are deficient in encoding action potentials on repeated stimulation. Olfactory-specific Nckx4(-/-) mice had lower body weights and a reduced ability to locate an odorous source. These results establish the role of NCKX4 in shaping olfactory responses and suggest that rapid response termination and proper adaptation of peripheral sensory receptor cells tune the sensory system for optimal perception.

The Na(+)/Ca(2+) exchanger NCKX4 governs termination and adaptation of the mammalian olfactory response.

La perception sensorielle n&#xE9;cessite un encodage pr&#xE9;cis d&#x26;#39;information de relance par les cellules r&#xE9;ceptrices sensorielles. Nous avons identifi&#xE9; NCKX4, un Na de potassium-d&#xE9;pendante (+) / Ca (2 +) &#xE9;changeur, comme &#xE9;tant n&#xE9;cessaire pour la terminaison de r&#xE9;ponse rapide et une bonne adaptation des vert&#xE9;br&#xE9;s olfactifs neurones sensoriels (ARS). Nckx4 (- / -) de la souris (&#xE9;galement connu sous le nom Slc24a4) ARS affich&#xE9;es r&#xE9;ponses sensiblement prolong&#xE9;es et forte d&#x26;#39;adaptation. Monocellulaires analyses &#xE9;lectrophysiologiques ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que la majorit&#xE9; des Na (+)-d&#xE9;pendante Ca (2 +) change en ARS pertinentes &#xE0; la transduction sensorielle est le r&#xE9;sultat de NCKX4 et que Nckx4 (- / -) ARS souris sont d&#xE9;ficientes en codant des potentiels d&#x26;#39;action sur les une stimulation r&#xE9;p&#xE9;t&#xE9;e. Olfactive sp&#xE9;cifique Nckx4 (- / -) des souris avaient un poids corporel inf&#xE9;rieur et une capacit&#xE9; r&#xE9;duite pour localiser une source odorante. Ces r&#xE9;sultats &#xE9;tablissent le r&#xF4;le de NCKX4 dans l&#x26;#39;&#xE9;laboration de r&#xE9;ponses olfactives et sugg&#xE8;rent que la r&#xE9;siliation de r&#xE9;ponse rapide et une bonne adaptation des p&#xE9;riph&#xE9;riques cellules r&#xE9;ceptrices sensorielles r&#xE9;gler le syst&#xE8;me sensoriel de la perception optimale.

Le Na (+) / Ca (2 +) &#xC9;changeur NCKX4 R&#xE9;git r&#xE9;siliation et l&#x26;#39;adaptation de la r&#xE9;ponse des mammif&#xE8;res olfactive

Sinneswahrnehmung erfordert genaue Codierung der Reiz-Informationen von sensorischen Rezeptor Zellen. Wir haben NCKX4, ein Kalium-abh&auml;ngige Na(+)/Ca(2+) Exchanger, n&auml;mlich als notwendig, f&uuml;r schnelle Reaktion K&uuml;ndigung und korrekte Anpassung der Wirbeltiere olfaktorischen sensorischen Neuronen (OSNs) identifiziert. Nckx4(-/-) (auch bekannt als Slc24a4) Maus OSNs wesentlich l&auml;ngere Antworten und st&auml;rkere Anpassung angezeigt. Einzellige elektrophysiologische Analysen ergaben, dass die Mehrheit der Na (+)-abh&auml;ngige Ca(2+) OSNs f&uuml;r sensorische Transduktion relevant ist im ein Ergebnis von NCKX4 und diese Nckx4(-/-) Maus OSNs sind mangelhaft in Codierung Aktionspotentiale &uuml;ber wiederholte Stimulation. Bulbus-spezifische Nckx4(-/-) M&auml;use hatten niedrigere K&ouml;rper Gewichte und eine reduzierte F&auml;higkeit, eine duftende Quelle zu suchen. Diese Ergebnisse die Rolle des NCKX4 bei der Gestaltung der olfaktorischen Antworten und fest und schlagen Sie diese schnelle Reaktion-K&uuml;ndigung angemessene Anpassung der peripheren sensorischen Rezeptor Zellen optimieren das sensorische System f&uuml;r optimale Wahrnehmung.

Der Na(+)/Ca(2+)-Austauscher NCKX4 regelt die K&uuml;ndigung und Anpassung der S&auml;ugetier-olfaktorischen Antwort.

Percezione sensoriale richiede codifica accurata di informazioni stimolo dalle cellule dei recettori sensoriali. Abbiamo identificato NCKX4, uno scambiatore di Na(+)/Ca(2+) di potassio-dipendenti, come necessarie per una risposta rapida cessazione e adattamento corretto dei neuroni sensoriali olfattivi vertebrati (OSNs). Nckx4(-/-) (noto anche come Slc24a4) mouse OSNs visualizzato risposte sostanzialmente prolungate e l&#39;adattamento pi&ugrave; forte. Cella singola elettrofisiologici analisi ha rivelato che la maggior parte del Na (+)-dipendente Ca(2+) cambio in OSNs rilevanti per la trasduzione sensoriale &egrave; un risultato di NCKX4 e quello Nckx4(-/-) mouse OSNs sono carenti nella codifica dei potenziali di azione sulla stimolazione ripetuta. Topi Nckx4(-/-) olfattivo specifico avevano pesi corpo inferiori e una ridotta capacit&agrave; di individuare una fonte odorosa. Questi risultati stabilire il ruolo di NCKX4 nel plasmare le risposte olfattive e suggeriscono tale cessazione di risposta rapida e adattamento corretto delle cellule dei recettori sensoriali periferici sintonizzare il sistema sensoriale per una percezione ottimale.

Lo scambiatore di Na(+)/Ca(2+) NCKX4 governa cessazione e adattamento della risposta olfattiva dei mammiferi.

&#x77E5;&#x899A;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x899A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x523A;&#x6FC0;&#x60C5;&#x5831;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7D42;&#x7AEF;&#x3068;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;OSNs&#xFF09;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30AB;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;Na&#xFF08;+&#xFF09;/ Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3092;NCKX4&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Nckx4&#xFF08; -  /  - &#xFF08;&#xFF09;&#x3082;Slc24a4&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x9577;&#x671F;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x9069;&#x5FDC;&#x3092;OSNs&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;OSNs&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3067;&#x6B20;&#x640D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5358;&#x4E00;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x899A;&#x306E;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;OSNs&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Na&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#xFF08;+&#xFF09;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306F;NCKX4&#x3068;&#x305D;&#x306E;Nckx4&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x523A;&#x6FC0;&#x3092;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x55C5;&#x899A;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;Nckx4&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x4F4E;&#x4F53;&#x91CD;&#x3068;&#x81ED;&#x6C17;&#x6E90;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x55C5;&#x899A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;NCKX4&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7D42;&#x4E86;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x672B;&#x68A2;&#x611F;&#x899A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x5668;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x9069;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x77E5;&#x899A;&#x611F;&#x899A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;Na&#xFF08;+&#xFF09;/ Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;NCKX4&#x652F;&#x914D;&#x306E;&#x7D42;&#x4E86;&#x3068;&#x9069;&#x5FDC;

&#xAC10;&#xAC01; &#xC9C0; &#xAC01;&#xC758; &#xAC10;&#xAC01; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC790;&#xADF9; &#xC815;&#xBCF4; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xC744; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. NCKX4, &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC885;&#xB8CC; &#xD558; &#xACE0; &#xCC99;&#xCD94; &#xD6C4; &#xAC01; &#xAC10;&#xAC01; &#xB274;&#xB7F0; (OSNs)&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC801;&#xC751;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE7C;&#xB968; &#xC885;&#xC18D; Na(+)/Ca(2+) &#xAD50;&#xD658;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Nckx4(-/-) (Slc24a4 &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; &#xD568;) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; OSNs &#xD45C;&#xC2DC; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC7A5;&#xAE30;&#xAC04;&#xB41C; &#xC751;&#xB2F5; &#xBC0F; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC801;&#xC751;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; electrophysiological &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB294; Na (+)&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;-&#xC885;&#xC18D; Ca(2+) exchange&#xB97C; &#xAC10;&#xAC01; &#xC804;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; OSNs nckx4&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xBA70; &#xADF8; Nckx4(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Osns&#xB294; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC5C5; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xBC18;&#xBCF5;&#xB41C; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C;. &#xD6C4; &#xAC01; &#xAD00;&#xB828; Nckx4(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB0AE;&#xC740; &#xBAB8; &#xBB34;&#xAC8C;&#xC640; &#xD5A5;&#xAE30;&#xAC00; &#xC788;&#xB294; &#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xCC3E;&#xB294; &#xAC10;&#xC18C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xD615;&#xC131; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; nckx4&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC885;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xAC10;&#xAC01; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC801;&#xC751; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC778;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC870;&#xC815;.

Na(+)/Ca(2+) &#xAD50;&#xD658;&#xAE30; NCKX4 &#xD130;&#xBBF8;&#xB124;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xC801;&#xC751; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La percepci&#xF3;n sensorial requiere codificaci&#xF3;n precisa de la informaci&#xF3;n del est&#xED;mulo por las c&#xE9;lulas receptoras sensoriales. Se identificaron NCKX4, una de potasio dependiente de Na (+) / Ca (2 +) intercambiador de calor, como necesaria para la terminaci&#xF3;n de una respuesta r&#xE1;pida y correcta adaptaci&#xF3;n de los vertebrados las neuronas sensoriales olfativas (OSN). Nckx4 (- / -) del rat&#xF3;n (tambi&#xE9;n conocido como Slc24a4) OSN que se muestran las respuestas sustancialmente prolongados y una mayor adaptaci&#xF3;n. Unicelulares an&#xE1;lisis electrofisiol&#xF3;gicos revel&#xF3; que la mayor&#xED;a de Na (+)-dependiente de Ca (2 +) de cambio en OSN pertinentes a la transducci&#xF3;n sensorial es un resultado de NCKX4 y que Nckx4 (- / -) OSN rat&#xF3;n son deficientes en la codificaci&#xF3;n de los potenciales de acci&#xF3;n sobre estimulaci&#xF3;n repetida. Olfativo espec&#xED;fico Nckx4 (- / -) ratones ten&#xED;an un menor peso y una disminuci&#xF3;n de la capacidad para localizar una fuente de mal olor. Estos resultados establecen el papel de NCKX4 en la formaci&#xF3;n de respuestas olfativas y sugieren que la terminaci&#xF3;n de una respuesta r&#xE1;pida y la adaptaci&#xF3;n adecuada de las c&#xE9;lulas receptoras sensoriales perif&#xE9;ricos ajustar el sistema sensorial para la percepci&#xF3;n &#xF3;ptima.

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Electroolfactogram responses from organotypic cultures of the olfactory epithelium from postnatal mice. Chemical senses\| PubMed ID: 18303030	2008
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Calcium concentration jumps reveal dynamic ion selectivity of calcium-activated chloride currents in mouse olfactory sensory neurons and TMEM16b-transfected HEK 293T cells. The Journal of physiology\| PubMed ID: 20837642	2010
The cellular prion protein is expressed in olfactory sensory neurons of adult mice but does not affect the early events of the olfactory transduction pathway. Chemical senses\| PubMed ID: 21680753	2011
The Na(+)/Ca(2+) exchanger NCKX4 governs termination and adaptation of the mammalian olfactory response. Nature neuroscience\| PubMed ID: 22057188	2012

Michele Dibattista

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