in-vitro-mesothelial-clearance-assay-that-models-early-steps-ovarian

<em>In vitro</em> Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer related deaths in the United States1. Despite a positive initial response to therapies, 70 to 90 ...

Harvard Medical School

&#x5375;&#x5DE2;&#x80BF;&#x7624;&#x4F20;&#x64AD;&#x6D89;&#x53CA;&#x764C;&#x75C7;&#x7403;&#x6CE8;&#x5165;&#x95F4;&#x76AE;&#x5355;&#x5C42;&#x8179;&#x819C;&#x548C;&#x80F8;&#x819C;&#x8154;&#x5668;&#x5B98;&#x7684;&#x5899;&#x4E0A;&#x3002;&#x9644;&#x52A0;&#x5230;&#x8179;&#x8154;&#x5668;&#x5B98;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x6D3B;&#x68C0;&#x663E;&#x793A;&#x95F4;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x662F;&#x672C;&#x4E0B;&#x80BF;&#x7624;&#x80BF;&#x5757;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x5B9E;&#x65F6;&#x3001; &#x57FA;&#x4E8E;&#x56FE;&#x50CF;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x54EA;&#x4E9B;&#x80BF;&#x7624;&#x7403;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x548C;&#x95F4;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x76D1;&#x6D4B;&#x5B9E;&#x65F6;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65F6;&#x7A7A;&#x95F4;&#x76AE;&#x95F4;&#x9699;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5375;&#x5DE2;&#x764C;&#x7403;&#x5229;&#x7528;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x548C;&#x5854;&#x6797;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x7275;&#x5F15;&#x529B;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x95F4;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7403;&#x4F53;&#x4E0B;&#x65B9;&#x4ECE;&#x4F4D;&#x79FB;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5375;&#x5DE2;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C07;&#x8BBF;&#x95EE;&#x7531;&#x53D1;&#x529B;&#x886C;&#x9776;&#x5668;&#x5B98;&#xFF0C;&#x9A7E;&#x9A76;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x95F4;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x9699;&#x7684;&#x95F4;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B50;&#x95F4;&#x76AE;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x3002;

&#x5375;&#x5DE2;&#x764C;&#x7403;&#x4F7F;&#x7528;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4EA7;&#x751F;&#x529B;&#x6E05;&#x9664;&#x76AE;&#x3002;

Dissemination of ovarian tumors involves the implantation of cancer spheroids into the mesothelial monolayer on the walls of peritoneal and pleural cavity organs. Biopsies of tumors attached to peritoneal organs show that mesothelial cells are not present under tumor masses. We have developed a live, image-based in vitro model in which interactions between tumor spheroids and mesothelial cells can be monitored in real time to provide spatial and temporal understanding of mesothelial clearance. Here we provide evidence that ovarian cancer spheroids utilize integrin - and talin - dependent activation of myosin and traction force to promote mesothelial cells displacement from underneath a tumor cell spheroid. These results suggest that ovarian tumor cell clusters gain access to the sub-mesothelial environment by exerting force on the mesothelial cells lining target organs, driving migration and clearance of the mesothelial cells.

Ovarian cancer spheroids use myosin-generated force to clear the mesothelium.

Diffusion des tumeurs ovariennes comprend l&#x26;#39;implantation de sph&#xE9;ro&#xEF;des canc&#xE9;reuses dans la monocouche m&#xE9;soth&#xE9;liale sur les parois des organes cavit&#xE9; p&#xE9;riton&#xE9;ale et pleurale. Des biopsies de tumeurs li&#xE9;s &#xE0; des organes p&#xE9;riton&#xE9;aux montrent que les cellules m&#xE9;soth&#xE9;liales sont pas pr&#xE9;sents sous les masses tumorales. Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un live, l&#x26;#39;image-base dans le mod&#xE8;le in vitro dans lequel les interactions entre les sph&#xE9;ro&#xEF;des tumorales et les cellules m&#xE9;soth&#xE9;liales peuvent &#xEA;tre surveill&#xE9;s en temps r&#xE9;el pour fournir une compr&#xE9;hension spatiale et temporelle de la clairance de m&#xE9;soth&#xE9;liales. Ici, nous fournir la preuve que les sph&#xE9;ro&#xEF;des cancer de l&#x26;#39;ovaire utiliser int&#xE9;grine - et taline - activation d&#xE9;pend de la myosine et la force de traction afin de promouvoir le d&#xE9;placement des cellules m&#xE9;soth&#xE9;liales de dessous un sph&#xE9;ro&#xEF;de de cellules tumorales. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que les grappes cellulaires tumorales ovariennes d&#x26;#39;acc&#xE9;der &#xE0; l&#x26;#39;environnement sous-m&#xE9;soth&#xE9;liales en exer&#xE7;ant une force sur les cellules m&#xE9;soth&#xE9;liales qui tapissent les organes cibles, de conduire la migration et de la clairance des cellules m&#xE9;soth&#xE9;liales.

Sph&#xE9;ro&#xEF;des cancer de l&#x26;#39;ovaire Utilisez la myosine g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; la Force pour effacer le M&#xE9;soth&#xE9;lium

Verbreitung von Eierstockkrebs umfasst die Implantation von Krebs Sph&auml;roide in der mesothelial Monolage an den W&auml;nden der Peritonealdialyse und Pleura Hohlraum Organe. Biopsien von Tumoren verbunden, peritoneale Organe zeigen, dass mesothelial Zellen nicht unter Tumor Massen vorhanden sind. Wir haben ein live, Image-basierte in-vitro-Modell in welche Wechselwirkungen zwischen Tumor Sph&auml;roide entwickelt und mesothelial Zellen k&ouml;nnen in Echtzeit auf die r&auml;umliche und zeitliche Verst&auml;ndnis der mesothelial Clearance &uuml;berwacht werden. Hier stellen wir Hinweise, dass Eierstockkrebs Sph&auml;roide Integrin- und Talin - abh&auml;ngige Aktivierung von Myosin nutzen und Zugkraft zur F&ouml;rderung der mesothelial Verschiebung gegen&uuml;ber unter einem Tumor Zelle Sph&auml;roid Zellen. Diese Ergebnisse legen nahe, dass Eierstock Tumor Zelle Cluster auf die Sub-mesothelial Umwelt Zugriff durch bestm&ouml;gliche Kraft auf die mesothelialen Zellen Futter Zielorgane, Migration und Abfertigung der mesothelialen Zellen fahren.

Eierstockkrebs Sph&auml;roide verwenden Myosin generierte Kraft Mesothelium zu l&ouml;schen.

Diffusione dei tumori ovarici comporta l&#39;impianto di sferoidi cancro nel monostrato mesoteliali sulle pareti degli organi della cavit&agrave; peritoneale e pleurica. Biopsie di tumori associati agli organi peritoneali mostrano che le cellule mesoteliali non sono presenti nell&#39;ambito di masse tumorali. Abbiamo sviluppato un modello in vitro basata su immagine dal vivo, in cui le interazioni tra sferoidi tumore e cellule mesoteliali possono essere monitorate in tempo reale per fornire la comprensione spaziale e temporale di liquidazione mesoteliali. Qui forniamo prove che sferoidi cancro ovarico utilizzano integrina - e talin - attivazione dipendente della miosina e forza di trazione per promuovere mesoteliali cellule volumetriche da sotto uno sferoide di cellule tumorali. Questi risultati suggeriscono che ammassi di cellule di tumore ovarico accedere all&#39;ambiente sub-mesoteliali esercitando una forza sulle cellule mesoteliali fodera organi bersaglio, guida la migrazione e la clearance delle cellule mesoteliali.

Sferoidi cancro ovarico usare la forza generata della miosina per cancellare il mesotelio.

&#x5375;&#x5DE3;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x306F;&#x3001;&#x8179;&#x8154;&#x3068;&#x80F8;&#x8154;&#x81D3;&#x5668;&#x306E;&#x58C1;&#x306E;&#x4E2D;&#x76AE;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5358;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x3078;&#x306E;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8179;&#x819C;&#x81D3;&#x5668;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x751F;&#x691C;&#x306F;&#x4E2D;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x816B;&#x760D;&#x584A;&#x306E;&#x4E0B;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3068;&#x4E2D;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x76AE;&#x306E;&#x9699;&#x9593;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x3067;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;in vitro&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x753B;&#x50CF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3068;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3; -   - &#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x4E0B;&#x304B;&#x3089;&#x4E2D;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5909;&#x4F4D;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x727D;&#x5F15;&#x529B;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x5375;&#x5DE3;&#x764C;&#x306E;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904A;&#x8D70;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3057;&#x3001;&#x5375;&#x5DE3;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x304C;&#x6A19;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x5185;&#x5074;&#x3092;&#x8986;&#x3046;&#x4E2D;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x529B;&#x3092;&#x52A0;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30B5;&#x30D6;&#x76AE;&#x74B0;&#x5883;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x5375;&#x5DE3;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306F;&#x76AE;&#x3092;&#x6D88;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBCF4;&#xAE09; &#xB09C;&#xC18C; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xBCF5;&#xACFC; &#xD749; &#xAC15; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC758; &#xBCBD;&#xC5D0; mesothelial &#xB2E8;&#xCE35;&#xC73C;&#xB85C; &#xC554; spheroids&#xC758; &#xC8FC;&#xC785;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xBCF5; &#xAE30;&#xAD00;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC885;&#xC591;&#xC758; biopsies &#xBCF4;&#xC5EC; mesothelial &#xC138;&#xD3EC; &#xC885;&#xC591; &#xB300; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC885;&#xC591; spheroids &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;, &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xB378; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xACFC; mesothelial &#xC138;&#xD3EC; mesothelial &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC774;&#xD574; &#xC81C;&#xACF5;&#xC744; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB09C;&#xC18C; &#xC554; spheroids &#xD65C;&#xC6A9;&#xC758; myosin integrin-&#xBC0F; &#xC0AC;&#xAC8C;-&#xC885;&#xC18D; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xD64D;&#xBCF4; mesothelial &#xACAC;&#xC778; &#xD798; &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xC544;&#xB798;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xC704; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB09C;&#xC18C; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xB300;&#xC0C1; &#xAE30;&#xAD00;, &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; mesothelial &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6B4;&#xC804; &#xC548; &#xAC10; mesothelial &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD798;&#xC744; &#xBC1C;&#xD718; &#xD558; &#xC5EC; &#xD558;&#xC704; mesothelial &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC744; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB09C;&#xC18C; &#xC554; spheroids mesothelium &#xCDE8;&#xC18C; myosin &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xD798;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La difusi&#xF3;n de los tumores de ovario consiste en la implantaci&#xF3;n de esferoides de c&#xE1;ncer en la monocapa mesotelial en las paredes de &#xF3;rganos de la cavidad peritoneal y pleural. Las biopsias de los tumores vinculados a &#xF3;rganos peritoneales muestran que las c&#xE9;lulas mesoteliales no est&#xE1;n presentes en las masas tumorales. Hemos desarrollado un vivo, basado en im&#xE1;genes en el modelo in vitro en el que las interacciones entre los esferoides tumorales y las c&#xE9;lulas mesoteliales se puede controlar en tiempo real para proporcionar la comprensi&#xF3;n espacial y temporal de la autorizaci&#xF3;n mesotelial. Aqu&#xED; nos proporcionan pruebas de que el c&#xE1;ncer de ovario esferoides utilizan la integrina - y Talin - dependiente de la activaci&#xF3;n de la miosina y la fuerza de tracci&#xF3;n para promover el desplazamiento de las c&#xE9;lulas mesoteliales de debajo de un esferoide de las c&#xE9;lulas tumorales. Estos resultados sugieren que ov&#xE1;ricos grupos de c&#xE9;lulas tumorales tener acceso al entorno de sub-mesotelial ejerciendo fuerza sobre las c&#xE9;lulas mesoteliales que recubren los &#xF3;rganos diana, conduciendo la migraci&#xF3;n y el aclaramiento de las c&#xE9;lulas mesoteliales.

Rachel A. Davidowitz

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications