affinity-precipitation-active-rho-gefs-using-gst-tagged-mutant-rho

Affinity Precipitation of Active Rho-GEFs Using a GST-tagged Mutant Rho Protein (GST-RhoA(G17A)) from Epithelial Cell Lysates

Proteins of the Rho family of small GTPases are central regulators of the cytoskeleton, and control a large variety of cellular processes, including cell ...

St. Michael's Hospital 

University of Toronto

&#x4E0D;&#x4F1A;&#x957F;&#x8868;&#x793A;&#x819C;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; (mM-CSF) &#x76AE;&#x4E0B;&#x63A5;&#x79CD;&#x5927;&#x9F20;&#x514B;&#x9686;&#x7684; T9 &#x8111;&#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE; (T9 C2) &#x548C;&#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x6CBB;&#x7597;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E; T9 C2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0E;&#x5916;&#x56F4;&#x63A5;&#x79CD;&#x75AB;&#x82D7;&#x53EF;&#x80FD;&#x6210;&#x529F;&#x94F2;&#x9664; T9 &#x9885;&#x5185;&#x80BF;&#x7624;&#x672C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x81F3;&#x56DB;&#x5929;&#x3002;&#x4ECE;&#x514D;&#x75AB;&#x5927;&#x9F20;&#xFF0C;&#x5F53; restimulated T9-4 &#x4EA7;&#x751F;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x813E; CD4 + &#x548C; CD8 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6027;&#x514D;&#x75AB; T9 &#x9885;&#x5185;&#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53EA; adoptively &#x8F6C;&#x5929;&#x771F;&#x5927;&#x9F20;&#x7684;&#x7D22;&#x53D6; T9 C2 &#x514D;&#x75AB;&#x5927;&#x9F20;&#x7684;&#x813E;&#x7EC6;&#x80DE; CD4 +&#x3002;&#x5927;&#x9F20;&#x4E5F;&#x7531; T9 C2 &#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514D;&#x75AB;&#x62B5;&#x5236;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x81EA;&#x4F53;&#x80F6;&#x8D28; &#xFF08;RT2 &#x548C; F98&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5141;&#x8BB8;&#x81EA;&#x4F53; NUTU 19 &#x5375;&#x5DE2;&#x764C;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x65E0;&#x5173;&#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4EA4;&#x53C9;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x8868;&#x660E;&#x6BEB;&#x7C73;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x8F6C;&#x67D3;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514D;&#x75AB;&#x6CBB;&#x7597;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x540C;&#x79CD;&#x5F02;&#x4F53;&#x80BF;&#x7624;&#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;

&#x8868;&#x793A;&#x819C;-&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684; T9 &#x8111;&#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x4FDD;&#x62A4; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5173;&#x8054;&#x6027;&#x514D;&#x75AB; T9 &#x9885;&#x5185;&#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x548C;&#x673A;&#x4F53;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x81EA;&#x4F53;&#x8111;&#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x3002;

Cloned T9 glioma cells (T9-C2) expressing the membrane form of macrophage colony stimulating factor (mM-CSF) inoculated subcutaneously into rats do not grow and glioma-specific immunity is stimulated. Immunotherapy experiments showed that intracranial T9 tumors present for one to four days could be successfully eradicated by peripheral vaccination with T9-C2 cells. CD4+ and CD8+ T splenocytes from immunized rats, when restimulated in vitro with T9 cells, produced interleukin-2 and -4. Protective immunity against intracranial T9 gliomas could only be adoptively transferred into naive rats by the CD4+ splenocytes obtained from T9-C2 immunized rats. Rats immunized by the T9-C2 tumor cells also resisted two different syngeneic gliomas (RT2 and F98) but allowed a syngeneic NUTU-19 ovarian cancer to grow. Such cross-protective immunity against unrelated gliomas suggests that mM-CSF transfected tumor cells have immunotherapeutic potential for use as an allogeneic tumor vaccine.

T9 glioma cells expressing membrane-macrophage colony stimulating factor produce CD4+ T cell-associated protective immunity against T9 intracranial gliomas and systemic immunity against different syngeneic gliomas.

Cellules de gliome clon&eacute;es T9 (T9-C2) exprimant la forme membranaire du facteur (CSF-mM) inocul&eacute; par voie sous-cutan&eacute;e &agrave; des rats de stimulation de colonie de macrophages ne poussent pas et l&#39;immunit&eacute; sp&eacute;cifique gliome est stimul&eacute;e. Immunoth&eacute;rapie exp&eacute;riences ont montr&eacute; que les tumeurs intracr&acirc;niennes de T9 pr&eacute;sents pendant un &agrave; quatre jours pourraient &ecirc;tre &eacute;radiqu&eacute;es avec succ&egrave;s par vaccination p&eacute;riph&eacute;rique avec cellules T9-C2. CD4 + et CD8 + T spl&eacute;nocytes de rats immunis&eacute;s, lorsque restimul&eacute;s in vitro avec des cellules de T9, produit interleukine-2 et -4. L&#39;immunit&eacute; protectrice contre les gliomes intracr&acirc;niens T9 pourrait &ecirc;tre Moutschen transf&eacute;r&eacute;e &agrave; des rats na&iuml;fs par les spl&eacute;nocytes de CD4 + de rats immunis&eacute;s T9-C2. Rats immunis&eacute;s par les cellules tumorales T9-C2 &eacute;galement r&eacute;sist&eacute; &agrave; deux diff&eacute;rents gliomes syng&eacute;niques (RT2 et F98) mais a permis &agrave; un cancer des ovaires syng&eacute;nique NUTU-19 pour se d&eacute;velopper. Cette immunit&eacute; protectrice crois&eacute;e contre les gliomes ind&eacute;pendants sugg&egrave;re que les cellules tumorales transfect&eacute; mM-CSF ont immunoth&eacute;rapeutique pourraient servir comme un vaccin tumeur allog&eacute;niques.

Cellules de gliome T9 exprimant le facteur de stimulation de colonie de membrane-macrophages produisent CD4 + associ&eacute;es aux cellules T immunit&eacute; protectrice contre les gliomes intracr&acirc;niens T9 et l&#39;immunit&eacute; syst&eacute;mique contre les gliomes syng&eacute;niques diff&eacute;rents.

T9 Gliomzellen exprimieren Membran-Makrophagen-Kolonie-stimulierenden Faktor produzieren CD4 + T-Zell-assoziierten sch&#xFC;tzende Immunit&#xE4;t gegen T9 intrakraniellen Gliome und systemische Immunit&#xE4;t gegen verschiedene syngenen Gliomen.

Clonato T9 Glioma delle cellule (T9-C2) che esprime la forma di membrana della colonia dei macrofagi fattore (mM-CSF) inoculato per via sottocutanea in ratti stimolante non crescono e l&#39;immunit&agrave; specifica glioma &egrave; stimolata. Immunoterapia esperimenti hanno mostrato che intracranici T9 tumori presenti per uno a quattro giorni potrebbero essere eradicati con successo da periferica vaccinazione con cellule T9-C2. CD4 + e CD8 + T splenocytes da topi immunizzati, quando restimulated in vitro con cellule T9, produzione di interleuchina-2 e -4. Immunit&agrave; protettiva contro gliomi T9 intracraniche potrebbe solo essere adoptively trasferiti in ratti naive di CD4 + splenocytes ottenuti da topi immunizzati T9-C2. Topi immunizzati da parte delle cellule tumorali T9-C2 anche resistevano a due differenti Carlo gliomi (RT2 con e F98) ma ha permesso a Carlo NUTU-19 cancro ovarico a crescere. Tale immunit&agrave; cross-protezione contro gliomi indipendenti suggeriscono che le cellule tumorali mM-CSF transfected immunotherapeutic potenziale per l&#39;uso come un vaccino tumore allogenici.

Cellule di glioma T9 esprimendo la colonia di membrana-macrofagi fattore stimolante producono CD4 + T cell-associated immunit&agrave; protettiva contro gliomi intracranici T9 e immunit&agrave; sistemica contro diversi Carlo gliomi.

&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; (mM CSF) &#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x76AE;&#x4E0B;&#x63A5;&#x7A2E;&#x306E;&#x819C;&#x5F62;&#x767A;&#x73FE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3; T9 &#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30DE;&#x7D30;&#x80DE; (T9 C2) &#x306F;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x81A0;&#x816B;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;T9 &#x816B;&#x760D;&#x4F8B; 1 &#xFF5E; 4 &#x65E5;&#x9593;&#x5B58;&#x5728;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B; T9 C2 &#x30BB;&#x30EB;&#x672B;&#x68A2;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x63A5;&#x7A2E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3067;&#x6839;&#x7D76;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;T9 &#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3; 2 &#x3068;-4 &#x4F53;&#x5916;&#x3088;&#x307F;&#x304C;&#x3048;&#x3063;&#x3066;&#x3068;&#x304D;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x306E; cd 4 + &#x304A;&#x3088;&#x3073; cd 8 + T &#x813E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x982D;&#x84CB; T9 &#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30DE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9632;&#x5FA1;&#x514D;&#x75AB;&#x306E;&#x307F;&#x9069;&#x5FDC;&#x7684;&#x306B;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6; &#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; T9 C2 &#x514D;&#x75AB;&#x3057;&#x305F;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F; cd4 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EE2;&#x9001;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x307E;&#x305F; T9 C2 &#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x514D;&#x75AB;&#x3057;&#x305F;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x540C;&#x7CFB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30DE; (RT2 &#x304A;&#x3088;&#x3073; F98) &#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x304C;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x540C;&#x7CFB;&#x30CC;&#x30C8;&#x30A6; 19 &#x5375;&#x5DE3;&#x764C;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7121;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306A;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30DE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x4FDD;&#x8B77;&#x514D;&#x75AB; mM CSF &#x5C0E;&#x5165;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x514D;&#x75AB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x540C;&#x7A2E;&#x816B;&#x760D;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x819C;&#x30FB; &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE; T9 &#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30DE;&#x7D30;&#x80DE; cd 4 + T &#x7D30;&#x80DE;&#x95A2;&#x9023;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9632;&#x5FA1;&#x514D;&#x75AB; T9 &#x982D;&#x84CB;&#x795E;&#x7D4C;&#x81A0;&#x816B;&#x3068;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x540C;&#x7CFB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30DE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5168;&#x8EAB;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C; T9, &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; (t 9-C2) &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC778;&#xC790; (mM CSF) &#xC950;&#xC5D0; subcutaneously &#xC8FC;&#xC0AC;&#xC758; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; glioma &#xD2B9;&#xC815; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC790;&#xADF9;. Immunotherapy &#xC2E4;&#xD5D8; intracranial T9 &#xC885;&#xC591; 1 ~ 4 &#xC77C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD604;&#xC7AC; T9 C2 &#xC140; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC15;&#xBA78; &#xC218; &#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBA74;&#xC5ED;&#xB41C; &#xC950; &#xC77C; &#xB54C; restimulated t 9 &#xC140;, &#xC0DD;&#xC0B0;&#xB41C; interleukin-2&#xC640;-4&#xC640; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; CD4 + &#xBC0F; CD8 + T splenocytes. Intracranial T9 gliomas&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638; &#xBA74;&#xC5ED;&#xB9CC; &#xC804;&#xC1A1; &#xB420; &#xC218; adoptively &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; &#xC950;&#xB85C; T9 C2 &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; CD4 + splenocytes&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;. &#xC950;&#xB3C4; T9 C2 &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;&#xC744; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; syngeneic gliomas (RT2 &#xBC0F; F98)&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; syngeneic NUTU 19 &#xB09C;&#xC18C; &#xC554; &#xC131;&#xC7A5;. &#xAD00;&#xB828; &#xC5C6;&#xB294; gliomas&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD50;&#xCC28; &#xBCF4;&#xD638; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAC19;&#xC740; mM CSF &#xD398; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; allogeneic &#xC885;&#xC591; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; immunotherapeutic &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;.

T 9&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;-&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xAD00;&#xB828; &#xBCF4;&#xD638; &#xC5ED;&#xB825; T9 intracranial gliomas &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; syngeneic gliomas&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xCCB4;&#xACC4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0;.

C&eacute;lulas de glioma T9 clonadas (T9-C2) expresando la forma de la membrana de factor (m-CSF) inoculado por v&iacute;a subcut&aacute;nea en ratas estimulante de colonias de macr&oacute;fagos no crecen y se estimula la inmunidad espec&iacute;fica glioma. Inmunoterapia experimentos demostraron que los tumores intracraneales T9 presentes de uno a cuatro d&iacute;as podr&iacute;an erradicarse con &eacute;xito mediante vacunaci&oacute;n perif&eacute;rica con c&eacute;lulas de T9-C2. CD4 + y CD8 + T esplenocitos de ratas inmunizadas, cuando restimulated in vitro con c&eacute;lulas de T9, produce interleucina-2 y -4. Inmunidad protectora contra los gliomas intracraneales de T9 s&oacute;lo se pod&iacute;a transferir eventualmente en ratas ingenuas por los esplenocitos de CD4 + procedentes de ratas inmunizadas T9-C2. Las ratas inmunizadas por las c&eacute;lulas del tumor T9-C2 tambi&eacute;n resistieron dos gliomas syngeneic diferentes (RT2 y F98) pero permitieron un c&aacute;ncer de ovario NUTU-19 syngeneic crecer. Dicha inmunidad de protecci&oacute;n cruzada contra los gliomas sin relaci&oacute;n sugiere que las c&eacute;lulas tumorales de m-CSF transfectada tienen potencial inmunoterap&eacute;utico para su uso como una vacuna contra el tumor alog&eacute;nicos.

Las c&eacute;lulas de glioma T9 expresando el factor estimulante de colonias de macr&oacute;fagos-membrana producen CD4 + T cell-asociados inmunidad protectora contra los gliomas intracraneales T9 y la inmunidad sist&eacute;mica contra diferentes gliomas syngeneic.

&#x800C;&#x63A7;&#x5236; T9 &#x7EC6;&#x80DE;&#x514B;&#x9686;&#x7684; T9 C2 &#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x67D3;&#x819C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; (mM-CSF) &#x4ECE;&#x6765;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F62;&#x6210;&#x76AE;&#x4E0B;&#x80BF;&#x7624;&#x65F6;&#x690D;&#x5165;&#x83F2;&#x820D;&#x5C14;&#x5927;&#x9F20;&#x3002;T9 C2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; paraptosis &#x5728; 1 &#x5929;&#x5185;&#x88AB;&#x5F7B;&#x5E95;&#x6253;&#x6B7B;&#x3002;&#x65E0;&#x673A;&#x76D0;&#x7684; T9 C2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x548C;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x5185;&#x690D;&#x5165;&#x672F;&#x540E; 4 &#x5C0F;&#x65F6;&#x5F00;&#x59CB;&#x3002;24 &#x5C0F;&#x65F6;&#x6B7B;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x90FD;&#x80BF;&#x548C;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x8131;&#x6C27;&#x6838;&#x82F7;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x63BA;&#x5165;&#x5C3C;&#x514B;&#x672B;&#x7AEF;&#x6807;&#x8BB0; (TUNEL)-&#x79EF;&#x6781;&#x3002;&#x5411;&#x7A97;&#x4F53;&#x4E2D;&#x5927;&#x9F20;&#x80BF;&#x7624;&#x5931;&#x8D25; Bcl2 &#x8F6C;&#x5BFC; T9 C2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;T9 &#x548C; T9 C2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#xFF0C;&#x5E94;&#x8058;&#x8FDB;&#x5165;&#x80BF;&#x7624;&#x6CE8;&#x5C04;&#x90E8;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x5728;&#x5B83;&#x4EEC;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x65B0;&#x9C9C;&#x5B64;&#x7ACB;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7531;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x4F5C;&#x7528;&#x673A;&#x5236;&#x6740;&#x4F53;&#x5916;&#x7684; T9 C2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;Antiasialo GM1 &#x6297;&#x4F53;&#x6CBB;&#x7597;&#x88F8;&#x9F20;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5927;&#x9F20;&#x5F62;&#x6210;&#x80BF;&#x7624; T9 C2&#xFF0C;&#x800C;&#x5927;&#x9F20;&#x6CBB;&#x7597;&#x81EA;&#x7136;&#x6740;&#x4F24;&#x7EC6;&#x80DE; (NK)-&#x5411;&#x7A97;&#x4F53;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x5931;&#x8D25;&#x3002;&#x5F53; antipolymorphonuclear &#x767D;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x6297;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x548C; antimacrophage &#x6297;&#x4F53;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;80%&#x7684;&#x88F8;&#x5927;&#x9F20;&#x5F62;&#x6210;&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x800C;&#x53EA;&#x6709; 40%&#x7684;&#x5927;&#x9F20;&#x5F00;&#x53D1;&#x80BF;&#x7624;&#x65F6;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E86;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x4E2D;&#x6027;&#x548C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53C2;&#x4E0E;&#x6740;&#x5BB3;&#x7684; T9 C2 &#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x62D2;&#x7EDD;&#x7684;&#x751F;&#x6D3B; T9 C2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x5927;&#x9F20;&#x662F;&#x5BF9;&#x9885;&#x5185; rechallenge T9 &#x7EC6;&#x80DE;&#x514D;&#x75AB;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x7ED9;&#x5F71;&#x54CD;&#x53D1;&#x751F;&#x5982;&#x679C; T9 C2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x88AB;&#x51BB;&#x7ED3;&#x89E3;&#x51BB;&#x3001; x-irradiated&#xFF0C;&#x6216;&#x4E1D;&#x88C2;&#x9709;&#x7D20; C &#x524D;&#x6CE8;&#x5C04;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6BEB;&#x7C73;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x8F6C;&#x5BFC; T9 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6700;&#x4F18;&#x80BF;&#x7624;&#x514D;&#x75AB;&#x9700;&#x8981;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6700;&#x4F18;&#x80BF;&#x7624;&#x514D;&#x75AB;&#x53D1;&#x751F;&#x65F6;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7684;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5E94;&#x5F88;&#x5F3A;&#x70C8;&#x88AB;&#x5F15;&#x8D77;&#x3002;

&#x751F;&#x6D3B; T9 &#x8111;&#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x819C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x4EA7;&#x751F;&#x7ACB;&#x5373;&#x80BF;&#x7624;&#x7834;&#x574F;&#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&quot;paraptosis&quot;-&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4FC3;&#x8FDB; T9 &#x9885;&#x5185;&#x80F6;&#x8D28;&#x7624;&#x5BF9;&#x673A;&#x4F53;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

Cloned T9-C2 glioma cells transfected with membrane macrophage colony-stimulating factor (mM-CSF) never formed subcutaneous tumors when implanted into Fischer rats, whereas control T9 cells did. The T9-C2 cells were completely killed within 1 day through a mechanism that resembled paraptosis. Vacuolization of the T9-C2 cell's mitochondria and endoplasmic reticulum started within 4 hours after implantation. By 24 hours, the dead tumor cells were swollen and terminal deoxynucleotide transferase-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL)-positive. Bcl2-transduced T9-C2 cells failed to form tumors in rats. Both T9 and T9-C2 cells produced cytokine-induced neutrophil chemoattractant that recruited the granulocytes into the tumor injection sites, where they interacted with the tumor cells. Freshly isolated macrophages killed the T9-C2 cells in vitro by a mechanism independent of phagocytosis. Nude athymic rats treated with antiasialo GM1 antibody formed T9-C2 tumors, whereas rats treated with a natural killer cell (NK)-specific antibody failed to form tumors. When treated with antipolymorphonuclear leukocyte (anti-PMN) and antimacrophage antibodies, 80% of nude rats formed tumors, whereas only 40% of the rats developed a tumor when a single antibody was used. This suggests that both PMNs and macrophages are involved in the killing of T9-C2 tumor cells. Immunocompetent rats that rejected the living T9-C2 cells were immune to the intracranial rechallenge with T9 cells. No vaccinating effect occurred if the T9-C2 cells were freeze-thawed, x-irradiated, or treated with mitomycin-C prior to injection. Optimal tumor immunization using mM-CSF-transduced T9 cells requires viable tumor cells. In this study optimal tumor immunization occurred when a strong inflammatory response at the injection of the tumor cells was induced.

Living T9 glioma cells expressing membrane macrophage colony-stimulating factor produce immediate tumor destruction by polymorphonuclear leukocytes and macrophages via a "paraptosis"-induced pathway that promotes systemic immunity against intracranial T9 gliomas.

Des cellules de gliome T9-C2 clon&eacute;es transfect&eacute;es avec membrane macrophage colony-stimulating factor (mM-CSF) jamais form&eacute; sous-cutan&eacute;e tumeurs lorsqu&#39;implant&eacute;es chez des rats Fischer, contrairement aux cellules t&eacute;moins T9. Les cellules de T9-C2 ont &eacute;t&eacute; compl&egrave;tement tu&eacute;s dans 1 jour gr&acirc;ce &agrave; un m&eacute;canisme qui ressemblait &agrave; paraptosis. Une vacuolisation des mitochondries et le r&eacute;ticulum endoplasmique de la cellule C2 T9 a commenc&eacute; dans les 4 heures apr&egrave;s l&#39;implantation. De 24 heures, les cellules tumorales morts &eacute;taient gonfl&eacute;es et terminal d&eacute;soxyribonucl&eacute;osides m&eacute;diation transferase dUTP nick-fin &eacute;tiquetage (TUNEL)-positif. BCL2-transduites T9-C2 cellules impossible de former des tumeurs chez les rats. T9 et T9-C2 cellules produisent chemoattractant neutrophile induite par les cytokines qui recrute les granulocytes dans les sites d&#39;injection de tumeur, o&ugrave; ils interagissent avec les cellules tumorales. Macrophages fra&icirc;chement isol&eacute;es tu&eacute; les cellules C2 T9 in vitro par un m&eacute;canisme ind&eacute;pendant de la phagocytose. Nude athymique chez les rats trait&eacute;s avec antiasialo GM1 anticorps forment tumeurs T9-C2, tandis que les rats trait&eacute;s avec une cellule de tueuses naturelles (NK)-anticorps sp&eacute;cifique n&#39;a pas pu former des tumeurs. Lorsqu&#39;ils sont trait&eacute;s avec des anticorps antimacrophage et leucocytes antipolymorphonuclear (anti-PMN), 80 % des rats nus forment des tumeurs, alors que seulement 40 % des rats a d&eacute;velopp&eacute; une tumeur lorsqu&#39;un seul anticorps a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;. Ceci sugg&egrave;re que les PN et les macrophages sont impliqu&eacute;s dans la mort des cellules tumorales T9-C2. Les rats immunocomp&eacute;tents ayant rejet&eacute; les cellules vivantes T9-C2 ont &eacute;t&eacute; immunis&eacute;s contre la reprise du traitement intracr&acirc;nien avec T9 cellules. Aucun effet de vaccination a eu lieu si les cellules de T9-C2 ont &eacute;t&eacute; d&eacute;congel&eacute;s de gel, irradi&eacute;s ou trait&eacute;e avec la mitomycine C avant l&#39;injection. Vaccination tumorale optimale &agrave; l&#39;aide de cellules de T9 mM-CSF-transduites n&eacute;cessite des cellules tumorales viables. Dans cette &eacute;tude vaccination tumorale optimale s&#39;est produite quand une forte r&eacute;action inflammatoire &agrave; l&#39;injection des cellules tumorales a &eacute;t&eacute; induite.

Produisent des cellules de gliome T9 vivantes exprimant la membrane macrophage colony-stimulating factor destruction tumorale imm&eacute;diate par les polynucl&eacute;aires et les macrophages via un &laquo; paraptosis &raquo;-induite par la voie d&#39;acc&egrave;s qui favorise l&#39;immunit&eacute; syst&eacute;mique contre les gliomes intracr&acirc;niens de T9.

Lebens T9 Gliomzellen exprimieren Membran-Makrophagen-Kolonie-stimulierender Faktor zu sofortigen Tumorzerst&#xF6;rung durch polymorphkernige Leukozyten und Makrophagen &#xFC;ber einen &#x26;quot;paraptosis&#x26;quot;-induzierten Signalweg, systemische Immunit&#xE4;t gegen intrakranialen T9 Gliome f&#xF6;rdert.

Clonato cellule di glioma T9-C2 transfected con membrana dei macrofagi colony-stimulating factor (mM-CSF) mai formata sottocutaneo tumori quando impiantato in ratti Fischer, considerando che le cellule di controllo T9 ha fatto. Le cellule T9-C2 sono stati uccisi completamente entro 1 giorno attraverso un meccanismo che somigliava a paraptosis. Vacuolizzazione dei mitocondri e del reticolo endoplasmatico della cellula T9-C2 iniziato entro 4 ore dopo l&#39;impianto. Da 24 ore, le cellule tumorali morti erano gonfie e terminale deoxynucleotide transferasi-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL)-positivo. BCL2 transduced cellule T9-C2 non &egrave; riuscito a tumori forma nei ratti. Cellule sia T9 T9-C2 prodotto chemioattrattanti neutrofili indotta da citochine che ha reclutato i granulociti nei luoghi dell&#39;iniezione di tumore, dove hanno interagiti con le cellule tumorali. Macrofagi isolati appena ucciso il T9-C2 cellule in vitro da un meccanismo indipendente di fagocitosi. Nudo atimico ratti trattati con l&#39;anticorpo antiasialo GM1 formarono i tumori T9-C2, considerando che i ratti trattati con una cella di natural killer (NK)-anticorpo specifico non &egrave; riuscito a tumori di forma. Quando trattati con anticorpi antimacrophage e antipolymorphonuclear del leucocita (anti-PMN), l&#39;80% dei topi nude formano tumori, considerando che solo il 40% dei ratti si &egrave; sviluppato un tumore quando &egrave; stato utilizzato un singolo anticorpo. Questo suggerisce che sia PMN e macrofagi sono coinvolti nell&#39;uccisione delle cellule tumorali T9-C2. Immunitarie ratti che ha respinto le cellule viventi T9-C2 erano il rechallenge intracranica con T9 cellule immuni. Si &egrave; verificato alcun effetto vaccinazione se le cellule T9-C2 sono stati scongelati freeze, x-irradiated o trattati con mitomicina-C prima dell&#39;iniezione. Immunizzazione ottimale tumore utilizzando cellule di mM-CSF-transduced T9 richiede cellule tumorali vitali. In questo studio l&#39;immunizzazione ottimale tumore si &egrave; verificato quando una forte risposta infiammatoria presso l&#39;iniezione delle cellule del tumore &egrave; stata indotta.

Cellule di glioma T9 viventi che esprimono colony-stimulating factor di membrana dei macrofagi producono distruzione immediata tumore dai leucociti polimorfonucleati e macrofagi tramite un &quot;paraptosis&quot;-indotta pathway che promuove l&#39;immunit&agrave; sistemica contro intracraniche T9 gliomi.

&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; T9 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30FC; &#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x819C;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x6C7A;&#x3057;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x8981;&#x56E0; (mM CSF) &#x76AE;&#x4E0B;&#x816B;&#x760D; T9 C2 &#x795E;&#x7D4C;&#x81A0;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;T9 C2 &#x30BB;&#x30EB;&#x306F; paraptosis &#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; 1 &#x65E5;&#x4EE5;&#x5185;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6BBA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;T9 C2 &#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x3068;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x306E;&#x7A7A;&#x80DE;&#x5909;&#x6027;&#x6CE8;&#x5165;&#x5F8C; 4 &#x6642;&#x9593;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;24 &#x6642;&#x9593;&#x3067;&#x6B7B;&#x3093;&#x3067;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;&#x308C;&#x3068;&#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB; deoxynucleotide &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F; dUTP &#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30FB; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9; (TUNEL) &#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;-&#x6B63;&#x3002;Bcl2 &#x5C0E;&#x5165; T9 C2 &#x30BB;&#x30EB;&#x5F62;&#x816B;&#x760D;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;T9 &#x3068; T9 C2 &#x7D30;&#x80DE;&#x9846;&#x7C92;&#x7403;&#x3069;&#x3053;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x816B;&#x760D;&#x6CE8;&#x5C04;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x63A1;&#x7528;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x904A;&#x8D70;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x65B0;&#x9BAE;&#x5358;&#x96E2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; T9 C2 &#x7D30;&#x80DE; in vitro &#x8CAA;&#x98DF;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6BBA;&#x5BB3;&#x3002;Antiasialo GM1 &#x6297;&#x4F53;&#x51E6;&#x7406;&#x30CC;&#x30FC;&#x30C9;&#x7121;&#x80F8;&#x817A;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x30CA;&#x30C1;&#x30E5;&#x30E9;&#x30EB; &#x30AD;&#x30E9;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;NK&#xFF09; &#x6295;&#x4E0E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; T9 C2 &#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;-&#x7279;&#x7570;&#x6297;&#x4F53;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x308F;&#x305A;&#x304B; 40 &#xFF05; &#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; antipolymorphonuclear &#x767D;&#x8840;&#x7403; (&#x53CD; PMN) &#x3068; antimacrophage &#x6297;&#x4F53;&#x3068;&#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x88F8;&#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E; 80 &#xFF05; &#x306F;&#x816B;&#x760D;&#x3001;&#x5F62;&#x4F5C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F; Pmn &#x3068;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; T9 C2 &#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6BBA;&#x5BB3;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B; T9 C2 &#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x62D2;&#x5426;&#x3059;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; T9 &#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x982D;&#x84CB;&#x5185;&#x306B;&#x9650;&#x3063;&#x3066;&#x306B;&#x514D;&#x75AB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;T9 C2 &#x7D30;&#x80DE;&#x51CD;&#x7D50;&#x878D;&#x89E3;&#x306E; x &#x7DDA;&#x7167;&#x5C04;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; C &#x6CE8;&#x5165;&#x524D;&#x3067;&#x6CBB;&#x7642;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;MM CSF &#x5C0E;&#x5165; T9 &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x6700;&#x9069;&#x816B;&#x760D;&#x514D;&#x75AB;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x816B;&#x760D;&#x514D;&#x75AB;&#x5F37;&#x3044;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6642;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x306F;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

T9 &#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30DE;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x5927;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x751F;&#x6210;&#x591A;&#x5F62;&#x6838;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x3068;&quot;paraptosis&quot;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5373;&#x6642;&#x816B;&#x760D;&#x7834;&#x58CA;-&#x982D;&#x84CB; T9 &#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30DE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5168;&#x8EAB;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3002;

&#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; t 9 &#xC140; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xBC18;&#xBA74; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C; T9 C2 &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC778;&#xC790; (mM CSF) &#xACB0;&#xCF54; &#xD615;&#xC131; &#xD53C;&#xD558; &#xC885;&#xC591; &#xD53C;&#xC154; &#xC950;&#xC5D0; &#xC774;&#xC2DD; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC640; &#xD398;. T9-c 2 &#xC140; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xB2EE;&#xC740; paraptosis &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; 1 &#xC77C; &#xC774;&#xB0B4; &#xC0AC;&#xB9DD; &#xD588;&#xB2E4;. T9-c 2 &#xC140;&#xC758; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C;&#xC758; Vacuolization &#xC774;&#xC2DD; &#xD6C4; 4 &#xC2DC;&#xAC04; &#xC774;&#xB0B4;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xC791;. 24 &#xC2DC;&#xAC04;, &#xC8FD;&#xC740; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD80; &#xC5B4; &#xBC0F; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; deoxynucleotide&#xACFC; &#xC911;&#xC7AC; dUTP &#xB2C9; &#xC5D4;&#xB4DC; &#xB77C;&#xBCA8; (TUNEL) &#xD588;&#xB2E4;-&#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778;. Bcl2 &#xBD88;&#xB9AC;&#xACE0; T9 C2 &#xC140; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC885;&#xC591; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. T 9 &#xBC0F; t 9&#xC740; C2 &#xC140; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC885;&#xC591; &#xC0AC;&#xCD9C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;, &#xC5B4;&#xB514; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; granulocytes&#xC744; &#xCC44;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; cytokine &#xC720;&#xB3C4; &#xD638; chemoattractant. &#xAC13; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCCB4; &#xC678; T9 C2 &#xC140; &#xC0AC;&#xB9DD;. Antiasialo GM1 &#xD56D; &#xCCB4;&#xB85C; &#xCDE8;&#xAE09; &#xD558;&#xB294; &#xB204;&#xB4DC; athymic &#xC950; &#xC950;&#xAC00; &#xC790;&#xC5F0; &#xD0AC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC; (NK)&#xC73C;&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; T9 C2 &#xC885;&#xC591; &#xD615;&#xC131;-&#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Antipolymorphonuclear &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; (PMN &#xC548;&#xD2F0;)&#xC640; antimacrophage &#xD56D; &#xCCB4;&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xBA74; &#xC950;&#xC758; 40%&#xB9CC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xB204;&#xB4DC; &#xC950;&#xC758; 80%&#xB294; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; PMNs &#xBC0F; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; T9 C2 &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0B4;&#xD574;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xD65C; T9 C2 &#xC140; &#xAC70;&#xBD80; immunocompetent &#xC950; t 9 &#xC140;&#xACFC; intracranial rechallenge&#xC5D0; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB2C8; vaccinating &#xD6A8;&#xACFC; T9 C2 &#xC140; &#xB3D9;&#xACB0; &#xD574; &#xB3D9;, x-irradiated, &#xB610;&#xB294; &#xC8FC;&#xC785; &#xC804;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xD1A0;&#xB9C8;&#xC774;&#xC2E0;-c &#xCE58;&#xB8CC; &#xACBD;&#xC6B0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. MM CSF &#xBD88;&#xB9AC;&#xACE0; t 9 &#xC140;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xC811;&#xC885; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885; &#xB54C; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xB9C9; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC778;&#xC790; &#xD45C;&#xD604; &#xC0DD;&#xD65C; T9 &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC0B0; polymorphonuclear &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C;&#xC640; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &quot;paraptosis&quot;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC989;&#xC2DC; &#xC885;&#xC591; &#xD30C;&#xAD34;-intracranial T9 gliomas&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xCCB4;&#xACC4;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC720;&#xB3C4;.

C&eacute;lulas clonadas de glioma T9-C2 transfectadas con membrana macr&oacute;fago colony-stimulating factor (m-CSF) nunca formado tumores subcut&aacute;neos cuando est&aacute;n implantados en ratas Fischer, mientras que las c&eacute;lulas del control T9. Las c&eacute;lulas de T9-C2 murieron totalmente dentro de 1 d&iacute;a a trav&eacute;s de un mecanismo que se asemejaba a miembros. Vacuolizaci&oacute;n de mitocondrias y ret&iacute;culo endopl&aacute;smico de la c&eacute;lula T9-C2 iniciado dentro de 4 horas despu&eacute;s de la implantaci&oacute;n. Por 24 horas, las c&eacute;lulas tumorales muertas estaban hinchados y terminal Deoxinucle&oacute;tidos transferasa-mediated dUTP nick-final etiquetado (TUNEL)-positivo. BCL2-transduced T9-C2 c&eacute;lulas no tumores forma en ratas. Las c&eacute;lulas tanto T9 y T9-C2 producen quimioatrayentes neutr&oacute;filo cytokine-inducida que reclutaron a los granulocitos en los sitios de la inyecci&oacute;n del tumor, donde interactuaron con las c&eacute;lulas del tumor. Reci&eacute;n aislados macr&oacute;fagos hab&iacute;an asesinado las T9-C2 las c&eacute;lulas in vitro por un mecanismo independiente de la fagocitosis. Desnudo athymic ratas tratadas con antiasialo GM1 anticuerpos forman tumores T9-C2, mientras que las ratas tratadas con una c&eacute;lula de asesino natural (NK)-anticuerpo espec&iacute;fico no tumores de forma. Cuando se tratan con anticuerpos antimacrophage y antipolymorphonuclear del leucocito (anti-PMN), 80% de las ratas desnudas formaron tumores, mientras que s&oacute;lo el 40% de las ratas desarrollaron un tumor cuando se utiliz&oacute; un solo anticuerpo. Esto sugiere que tanto PMN y macr&oacute;fagos est&aacute;n involucrados en la muerte de las c&eacute;lulas del tumor T9-C2. Las ratas inmunocompetentes que rechazaron las c&eacute;lulas vivas T9-C2 eran inmunes a la rechallenge intracraneal con c&eacute;lulas de T9. Se ha producido ning&uacute;n efecto de la vacunaci&oacute;n si las c&eacute;lulas T9-C2 fueron descongelados congelaci&oacute;n, x-irradiated o tratadas con mitomicina-C antes de la inyecci&oacute;n. Inmunizaci&oacute;n de tumor &oacute;ptima utilizando c&eacute;lulas de T9 m-CSF-transduced requiere c&eacute;lulas tumorales viables. En este estudio inmunizaci&oacute;n &oacute;ptima tumor ocurri&oacute; cuando una fuerte respuesta inflamatoria en la inyecci&oacute;n de las c&eacute;lulas del tumor fue inducida.

C&eacute;lulas de glioma vivas T9 expresando el factor estimulante de colonias de membrana macr&oacute;fagos producen destrucci&oacute;n inmediata del tumor por leucocitos polimorfonucleares y macr&oacute;fagos mediante un &quot;miembros&quot;-inducida por la v&iacute;a que promueve la inmunidad sist&eacute;mica contra gliomas intracraneales de T9.

&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x591A;&#x5143;&#x9187;&#x901A;&#x8DEF;&#x548C;&#x589E;&#x5F3A;&#x975E;&#x9176;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x80BE;&#x75C5;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B63;&#x5E38;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7403;&#x7CFB;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE; (MCs) &#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8DEF;&#x5F84;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; &#xFF08;TG&#xFF09; MCs &#x9AD8;&#x67B6;&#x919B;&#x7CD6;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176; &#xFF08;AR&#xFF09; &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

&#x591A;&#x5143;&#x9187;&#x901A;&#x8DEF;&#x548C;&#x975E;&#x9176;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x5BF9;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7403;&#x7CFB;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Both activation of the polyol pathway and enhanced non-enzymatic glycation have been implicated in the pathogenesis of diabetic glomerulopathy. We investigated the interaction between these two pathways using normal mesangial cells (MCs) and transgenic (TG) MCs with elevated aldose reductase (AR) activity.

Interaction between the polyol pathway and non-enzymatic glycation on mesangial cell gene expression.

Les deux activation de la voie polyol et la glycation non-enzymatique am&eacute;lior&eacute;e ont &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;s dans la pathogen&egrave;se de la glom&eacute;rulopathie diab&eacute;tique. Nous avons &eacute;tudi&eacute; l&#39;interaction entre ces deux voies &agrave; l&#39;aide de cellules m&eacute;sangiales normal (MCs) et transg&eacute;niques (TG) MCs avec &eacute;lev&eacute; activit&eacute; l&#39;aldose r&eacute;ductase (AR).

Interaction entre la voie de polyols et glycation non-enzymatique sur l&#39;expression de g&egrave;nes de cellules m&eacute;sangiales.

Die Interaktion zwischen dem Polyol-Weg und nicht-enzymatische Glykosylierung auf Mesangialzellen Genexpression.

Entrambi attivazione del pathway di poliolo e rafforzata la glicazione non enzimatica sono stati implicati nella patogenesi della immunotattoide diabetica. Abbiamo studiato l&#39;interazione tra questi due percorsi utilizzando cellule mesangiali normale (MCs) e transgenica (TG) MCs con elevata attivit&agrave; di aldoso reduttasi (AR).

Interazione tra il pathway di poliolo e glicazione non enzimatica sull&#39;espressione del gene delle cellule mesangiali.

&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x975E;&#x9175;&#x7D20;&#x7684;&#x7CD6;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x6027;&#x7CF8;&#x7403;&#x4F53;&#x814E;&#x75C7;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x30E1;&#x30B5;&#x30F3;&#x30AE;&#x30A6;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE; (MCs) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; (TG) MCs &#x306B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C9;&#x30FC;&#x30B9;&#x9084;&#x5143;&#x9175;&#x7D20; (AR) &#x6D3B;&#x6027;&#x304C;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x975E;&#x9175;&#x7D20;&#x7684;&#x7CD6;&#x5316;&#x30E1;&#x30B5;&#x30F3;&#x30AE;&#x30A6;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#xD3F4;&#xB9AC;&#xC62C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xBE44; &#xD6A8;&#xC18C; glycation&#xC758; &#xB450; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; glomerulopathy &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; mesangial &#xC140; (MCs)&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; &#xACBD;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; (TG) Mcs&#xC640; &#xB192;&#xC740; aldose reductase (&#xC544;&#xCE78;&#xC18C; &#xC8FC;) &#xD65C;&#xB3D9;.

&#xD3F4;&#xB9AC;&#xC62C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xBC0F; mesangial &#xC140; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0; &#xBE44; &#xD6A8;&#xC18C; glycation &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;.

Ambos activaci&oacute;n de la v&iacute;a de polialcohol y glicaci&oacute;n no enzim&aacute;tica mayor han sido implicados en la patogenia de la Glomerulopat&iacute;a diab&eacute;tica. Investigamos la interacci&oacute;n entre estas dos v&iacute;as utilizando c&eacute;lulas mesangiales normal (MCs) y transg&eacute;nicos (TG) MCs con elevan actividad de aldosa reductasa (AR).

Interacci&oacute;n entre la v&iacute;a de polialcohol y la glicaci&oacute;n no enzim&aacute;tica en la expresi&oacute;n de genes de la c&eacute;lula mesangial.

Die Interaktion zwischen dem Polyol-Weg und nicht-enzymatische Glykosylierung auf glatten Muskelzellen der Aorta Zellmigration und Monozytenadh&#xE4;sion.

&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x591A;&#x5143;&#x9187;&#x901A;&#x8DEF;&#x548C;&#x589E;&#x5F3A;&#x975E;&#x9176;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x90FD;&#x7275;&#x8FDE;&#x5230;&#x53D1;&#x75C5;&#x7684;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x52A8;&#x8109;&#x7CA5;&#x6837;&#x786C;&#x5316;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; (SMC) &#x529F;&#x80FD;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x9F20;&#x6807;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x548C;&#x6821;&#x8463;&#x4F1A;&#x4ECE; tn &#x91CE;&#x6BD2; (WT) &#x5C0F;&#x9F20;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x919B;&#x7CD6;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176; (AR) &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; (TG) &#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6587;&#x5316;&#x5173;&#x4E8E; AR &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C; SMC &#x57FA;&#x56E0;&#x6D3B;&#x5316;&#x3001; &#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5728;&#x5BF9;&#x665A;&#x671F;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x53CD;&#x5E94;&#x6700;&#x7EC8;&#x4EA7;&#x54C1;&#x4FEE;&#x6539;&#x725B;&#x8840;&#x6E05;&#x767D;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x5E74;&#x9F84; BSA&#xFF09;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x5E74;&#x9F84;-&#x725B;&#x8840;&#x6E05;&#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#x589E;&#x52A0; AR &#x6D3B;&#x6027;&#x7684; WT &#x548C; TG &#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x8F83;&#x5927;&#x7684;&#x6B65;&#x957F; (p &lt; 0.05) TG &#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x7684;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x57FA;&#x7840;&#xFF0C;&#x5347;&#x9AD8;&#xFF0C;AR &#x6D3B;&#x6027; (WT &#x7684; 2.8 &#x500D;)&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x589E;&#x91CF;&#x662F;&#x51CF;&#x6BD2;&#x7684; zopolrestat&#xFF0C;AR &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;AR &#x6D3B;&#x6027;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5E74;&#x9F84;&#x4E3A;&#x589E;&#x91CF;&#x5347;&#x5E45;&#x7684;&#x4ECE; WT &#x548C; TG &#x5C0F;&#x9F20;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x6821;&#x8463;&#x4F1A;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6587;&#x5316; (60%&#x548C; 100%&#xFF0C;&#x5206;&#x522B; P &lt; 0.01&#xFF09;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x589E;&#x91CF;&#x4F34;&#x968F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 (&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1&#xFF09; &#x548C;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;-1 (MCP 1) mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x589E;&#x52A0; (&#x4E24;&#x4E2A; P &lt; 0.05)&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x76F8;&#x5173; PKC beta1 (P &lt; 0.05) &#x4EE5;&#x53CA;&#x589E;&#x52A0;&#x7684; SMC &#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x5B89;&#x5FB7;&#x91CC;-&#x970D;&#x65AF;&#x798F;&#x5C14;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;THP&#xFF09;-1 &#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5230;&#x6821;&#x8463;&#x4F1A; &#xFF08;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; p &lt; 0.01)&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6240;&#x6709;&#x66F4;&#x6539;&#x88AB; TG &#x6821;&#x8463;&#x4F1A;&#x4E2D;&#x5927;&#x5F97;&#x591A; (P &lt; 0.05) &#x753B;&#x9762;&#x7531; zopolrestat &#x6216; AR &#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x8F6C;&#x67D3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5BF9; SMC &#x6D3B;&#x5316;&#x3001; &#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x5E74;&#x9F84;&#x5F71;&#x54CD;&#x8C03;&#x89E3;&#x90E8;&#x5206;&#x901A;&#x8FC7;&#x591A;&#x5143;&#x9187;&#x901A;&#x8DEF;&#x4EE5;&#x53CA;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684; PKC &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;TG &#x6821;&#x8463;&#x4F1A;&#x66F4;&#x5927;&#x5E74;&#x9F84;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x652F;&#x6301;&#x6B64;&#x7C7B;&#x66F4;&#x6539;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x9879;&#x7684;&#x591A;&#x5143;&#x9187;&#x901A;&#x8DEF;&#x591A;&#x52A8;&#x3002;

&#x591A;&#x5143;&#x9187;&#x901A;&#x8DEF;&#x548C;&#x975E;&#x9176;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x5BF9;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

We investigated for the interaction between the polyol pathway and enhanced non-enzymatic glycation, both implicated in the pathogenesis of diabetic atherosclerosis, in the activation of aortic smooth muscle cell (SMC) function. Mouse aortas and primary cultures of SMCs from wildtype (WT) mice and transgenic (TG) mice expressing human aldose reductase (AR) were studied regarding changes in AR activity, and SMC gene activation, migration and monocyte adhesion, in response to advanced glycation end-product modified BSA (AGE-BSA). Results showed that AGE-BSA increased AR activity in both WT and TG aortas, with greater increments (p < 0.05) in TG aortas which, basally, had elevated AR activity (2.8 fold of WT). These increments were attenuated by zopolrestat, an AR inhibitor. Similar AGE-induced increments in AR activity were observed in primary cultures of aortic SMCs from WT and TG mice (60% and 100%, respectively, P < 0.01). Such increments were accompanied by increases in intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) mRNA levels (both P < 0.05), activation of membrane-associated PKC-beta1 (P < 0.05) as well as increased SMC migration and Tamm-Horsfall protein (THP)-1 monocyte adhesion to SMCs (both p < 0.01), with all changes being significantly greater in TG SMCs (P < 0.05) and suppressible by either zopolrestat or transfection with an AR antisense oligonucleotide. Our findings suggest that the effects of AGEs on SMC activation, migration and monocyte adhesion are mediated partly through the polyol pathway and, possibly, PKC activation. The greater AGE-induced changes in the TG SMCs have provided further support for the dependency of such changes on polyol pathway hyperactivity.

Interaction between the polyol pathway and non-enzymatic glycation on aortic smooth muscle cell migration and monocyte adhesion.

Nous avons &eacute;tudi&eacute; l&#39;interaction entre la voie des polyols et am&eacute;lior&eacute;e la glycation non enzymatique, tous deux impliqu&eacute;s dans la pathogen&egrave;se de l&#39;ath&eacute;roscl&eacute;rose diab&eacute;tique, dans l&#39;activation des fibres musculaires lisses aortiques de lymphocytes (SMC). Les aortes de souris et de cultures primaires des CML de souris de type sauvage (WT) et des souris transg&eacute;niques (TG) exprimant les humains aldose r&eacute;ductase (AR) ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;s au sujet des changements dans la migration de l&#39;activit&eacute; et activation de g&egrave;nes SMC, AR et adh&eacute;rence des monocytes, en r&eacute;ponse &agrave; la glycation avanc&eacute;e produit final modifi&eacute; BSA (&acirc;ge-BSA). Les r&eacute;sultats ont montr&eacute; qu&#39;&acirc;ge-BSA a augment&eacute; l&#39;activit&eacute; AR dans les aortes WT et TG, avec des incr&eacute;ments de plus (p &lt; 0,05) dans les aortes de TG qui, &agrave; la base, ont &eacute;lev&eacute; l&#39;activit&eacute; AR (2,8 fois de WT). Ces augmentations ont &eacute;t&eacute; att&eacute;nu&eacute;es par les zopolrestat, un inhibiteur de l&#39;AR. Incr&eacute;ments d&#39;induite par &acirc;ge semblables activit&eacute; AR ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s dans des cultures primaires de SMCs aortiques de souris WT et TG (60 % et 100 %, respectivement, P &lt; 0,01). Ces augmentations &eacute;taient accompagn&eacute;es d&#39;augmentations dans la mol&eacute;cule d&#39;adh&eacute;sion intercellulaire-1 (ICAM-1) et de monocyte chemoattractant prot&eacute;ine-1 (MCP-1) ARNm (P 0,05 &lt;), activation de la PKC-beta1 membranaires (P 0,05 &lt;) ainsi qu&#39;une augmentation des migrations SMC et Tamm-Horsfall prot&eacute;ine (THP) monocytes-1 adh&eacute;rence aux CML (p &lt; 0,01), compte tenu des changements &eacute;tant significativement plus &eacute;lev&eacute;e chez les TG CML (P 0,05 &lt;) et suppressible par transfection avec un oligonucl&eacute;otide antisens AR ou zopolrestat. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que les effets de l&#39;&acirc;ge sur l&#39;adh&eacute;rence de l&#39;activation, les migrations et les monocytes SMC sont en partie par la voie des polyols et, &eacute;ventuellement, l&#39;activation de la PKC. Les plus grands changements induite par l&#39;&acirc;ge dans les CML TG ont fourni un soutien suppl&eacute;mentaire &agrave; la d&eacute;pendance de ces changements sur l&#39;hyperactivit&eacute; de voie polyol.

Interaction entre la voie des polyols et la glycation non enzymatique sur l&#39;adh&eacute;sion de migration et de monocytes des cellules musculaires lisses aortiques.

Abbiamo studiato l&#39;interazione tra il pathway di poliolo e rafforzata la glicazione non enzimatica, sia implicato nella patogenesi dell&#39;aterosclerosi diabetica, all&#39;attivazione della funzione di muscolo liscio aortiche cella (SMC). Aortas mouse e colture primarie di SMCs da wildtype (WT) topi e topi transgenici (TG) esprimendo la riduttasi dell&#39;aldoso della umana (AR) sono stati studiati per quanto riguarda i cambiamenti in AR attivit&agrave; e attivazione del gene SMC, migrazione e l&#39;adesione dei monociti, in risposta a glicazione avanzata prodotto finale modificato BSA (et&agrave;-BSA). I risultati hanno mostrato che et&agrave;-BSA aumentata attivit&agrave; AR in aortas sia WT e TG, con incrementi maggiori (p &lt; 0.05) in aortas TG che le, aveva elevata attivit&agrave; AR (2,8 piega di WT). Questi incrementi sono stati abbassati di zopolrestat, un inibitore di AR. Simili incrementi et&agrave;-indotta nell&#39;attivit&agrave; di AR sono stati osservati in colture primarie di SMCs aortico da topi WT e TG (60% e il 100%, rispettivamente, P &lt; 0,01). Tali incrementi sono stati accompagnati da aumento della molecola di adesione intercellulare-1 (ICAM-1) e livelli di mRNA (MCP-1) monocyte chemoattractant protein-1 (entrambi P &lt; 0.05), attivazione della PKC-beta1 associata di membrana (P 0.05 &lt;) cos&igrave; come aumento della migrazione SMC e Tamm-Horsfall proteina (THP) monociti-1 adesione a SMCs (entrambi p &lt; 0,01), con tutte le modifiche essendo significativamente maggiore nel TG SMCs (P 0.05 &lt;) e sopprimibile da zopolrestat o trasfezione con un oligonucleotide antisenso AR. I nostri risultati suggeriscono che gli effetti dell&#39;et&agrave; sulla adesione di attivazione, migrazione e monociti SMC sono mediati parzialmente attraverso il pathway di poliolo e, possibilmente, attivazione PKC. Le alterazioni indotte dalla et&agrave; maggiore il SMC TG hanno fornito un ulteriore supporto per la dipendenza di tali cambiamenti sull&#39;iperattivit&agrave; pathway poliolo.

Interazione tra il pathway di poliolo e glicazione non enzimatica sul muscolo liscio aortiche migrazione e monociti adesione delle cellule.

&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x30A2;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0;&#x6027;&#x52D5;&#x8108;&#x786C;&#x5316;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE; (SMC) &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x975E;&#x9175;&#x7D20;&#x7684;&#x7CD6;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x3068;&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; &#xFF08;WT&#xFF09; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x4EBA;&#x9593;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C9;&#x30FC;&#x30B9;&#x9084;&#x5143;&#x9175;&#x7D20; &#xFF08;AR&#xFF09; &#x3092;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; (TG) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089; AR &#x6D3B;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073; SMC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x3068;&#x5358;&#x7403;&#x63A5;&#x7740;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;, &#x306B;&#x5FDC;&#x3048;&#x3066;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7CD6;&#x5316;&#x6700;&#x7D42;&#x88FD;&#x54C1; BSA &#xFF08;&#x5E74;&#x9F62; BSA&#xFF09; &#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x5E74;&#x9F62; BSA &#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x523B;&#x307F; (p &lt; 0.05) &#x3067; WT &#x3068; TG &#x306E;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; AR &#x6D3B;&#x52D5;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x57FA;&#x80A5;&#x3001;AR &#x6D3B;&#x52D5; (WT &#x306E; 2.8 &#x500D;) &#x3092;&#x4E0A;&#x3052;&#x305F; TG &#x306E;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x3067;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5897;&#x5206; AR &#x963B;&#x5BB3;&#x5264; zopolrestat &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6E1B;&#x8870;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x5E74;&#x9F62;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5897;&#x5206; AR &#x6D3B;&#x52D5;&#x3067; WT &#x3068; TG &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F; (60 &#xFF05;&#x3001;100 &#xFF05;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;P &lt; 0.01)&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5358;&#x4F4D;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;-1 (ICAM-1) &#x3068;&#x5358;&#x7403;&#x5316;&#x5B66;&#x8A98;&#x56E0;&#x7269;&#x8CEA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 1 &#xFF08;MCP-1) &#x306E; mRNA &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F; &#xFF08;&#x4E21;&#x65B9; P &lt; 0.05)&#x3001;&#x819C;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x305F; PKC beta1 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; (P &lt; 0.05) &#x5897;&#x52A0; SMC &#x79FB;&#x884C;&#x3068; Tamm-horsfall &#x86CB;&#x767D; (THP)-1 &#x5358;&#x7403;&#x63A5;&#x7740; SMCs (&#x4E21;&#x65B9;&#x306E; p &lt; 0.01) &#x306B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3068;&#x304C; TG SMCs &#x3067;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x3044; (P &lt; 0.05) &#x304A;&#x3088;&#x3073; zopolrestat &#x307E;&#x305F;&#x306F; AR &#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9; &#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E38;&#x307F;&#x3092;&#x96A0;&#x3059;&#x3002;SMC &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5358;&#x7403;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5E74;&#x9F62;&#x306F;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068; PKC &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x3001;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;TG SMCs &#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x5E74;&#x9F62;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5909;&#x5316;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8; &#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x6B20;&#x9665;&#x591A;&#x52D5;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x975E;&#x9175;&#x7D20;&#x7684;&#x7CD6;&#x5316;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3068;&#x5358;&#x7403;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC62C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xBE44; &#xD6A8;&#xC18C; glycation &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC0AC;, &#xBAA8;&#xB450; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC; (SMC) &#xAE30;&#xB2A5; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xACBD;&#xD654; &#xC99D;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; aortas&#xC640; wildtype (WT) &#xC0DD;&#xC950;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; aldose reductase (AR)&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; (TG) &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; Smcs&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBB38;&#xD654; &#xC544;&#xCE78;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; SMC &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;, &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; monocyte &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;, &#xC751;&#xB2F5; &#xACE0;&#xAE09; glycation &#xC5D4;&#xB4DC; &#xC81C;&#xD488; BSA (&#xB098;&#xC774; BSA) &#xC218;&#xC815;. &#xACB0;&#xACFC; basally, AR &#xD65C;&#xB3D9; (WT&#xC758; 2.8 &#xBC30;) &#xC0C1;&#xC2B9; &#xD588;&#xB2E4; TG aortas&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xC774; BSA &#xD070; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; (p &lt; 0.05) WT &#xBC0F; TG aortas&#xC5D0; AR &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; zopolrestat, &#xC544;&#xCE78;&#xC18C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC1E0; &#xD588;&#xB2E4;. AR &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xB098;&#xC774; &#xC720;&#xB3C4; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; SMCs WT &#xBC0F; TG &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; (60%&#xC640; 100 %p &#xAC01;&#xAC01; &lt; 0.01). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790;-1 (ICAM-1)&#xACFC; monocyte chemoattractant &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-1 (MCP-1) mRNA &#xC218;&#xC900; &#xC99D;&#xAC00; &#xB3D9;&#xD589; &#xD588;&#xB2E4; (&#xB450; P &lt; 0.05), &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xAD00;&#xB828; PKC beta1&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; (P &lt; 0.05) &#xC99D;&#xAC00; SMC &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xD0D0; Horsfall &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (THP)-1 monocyte &#xC811;&#xCC29; SMCs (&#xB450; p &lt; 0.01)&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418; TG Smcs&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xD070; (P &lt; 0.05) zopolrestat &#xB610;&#xB294; &#xC544;&#xCE78;&#xC18C; &#xC13C;&#xC2A4; oligonucleotide&#xACFC; transfection suppressible &#xD558; &#xACE0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; SMC &#xD65C;&#xC131;&#xD654;, &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; monocyte &#xC811;&#xCC29;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB839;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC62C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xBC0F; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C;, PKC &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. TG Smcs&#xC758; &#xD070; &#xB098;&#xC774; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB294; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC62C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xACFC;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC758; &#xC885;&#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD94;&#xAC00; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD3F4;&#xB9AC;&#xC62C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xACFC; monocyte &#xC811;&#xCC29;&#xC5D0; &#xBE44; &#xD6A8;&#xC18C; glycation &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;.

Investigamos para la interacci&oacute;n entre la v&iacute;a de polialcohol y glicaci&oacute;n mejorada no enzim&aacute;tica, ambos implicados en la patogenia de la aterosclerosis diab&eacute;tica, en la activaci&oacute;n de la funci&oacute;n del m&uacute;sculo liso a&oacute;rtico de la c&eacute;lula (SMC). Aortas de rat&oacute;n y cultivos primarios de comit&eacute;s de ratones de tipo salvaje (WT) y ratones transg&eacute;nicos (TG) expresi&oacute;n humana de la aldosa reductasa (AR) estudiaron sobre los cambios en la actividad y activaci&oacute;n del gene SMC, migraci&oacute;n de AR y adhesi&oacute;n de monocitos, en respuesta a la glicaci&oacute;n avanzada producto final hab&iacute;a modificado BSA (edad-BSA). Los resultados mostraron que edad-BSA mayor actividad de la AR en las aortas WT tanto TG, con mayores incrementos (p &lt; 0.05) en las aortas de TG que, basalmente, hab&iacute;an elevado la actividad de la AR (2,8 veces de WT). Estos incrementos fueron atenuados por el zopolrestat, un inhibidor de la AR. Se observaron incrementos similares de inducida por edad en actividad de la AR en cultivos primarios de SMCs a&oacute;rticas de ratones WT y TG (60% y 100%, respectivamente, P &lt; 0.01). Estos incrementos fueron acompa&ntilde;ados por aumentos en la mol&eacute;cula 1 de adhesi&oacute;n intercelular (ICAM-1) y los niveles de monocito chemoattractant protein-1 mRNA (MCP-1) (ambos P &lt; 0.05), activaci&oacute;n de PKC-beta1 asociada a membrana (P 0.05 &lt;) as&iacute; como la creciente migraci&oacute;n de SMC y adherencia de monocito-1 de prote&iacute;na (THP) Tamm-Horsfall a comit&eacute;s (ambos p &lt; 0.01), con todos los cambios siendo significativamente mayor en los comit&eacute;s de TG (P &lt; 0.05) y suprimible por transfecci&oacute;n con un oligonucle&oacute;tido antisentido de AR o zopolrestat. Nuestros resultados sugieren que los efectos de las edades en la adhesi&oacute;n de monocitos, la migraci&oacute;n y la activaci&oacute;n de SMC est&aacute;n mediados en parte por la v&iacute;a de polialcohol y, posiblemente, la activaci&oacute;n de PKC. Los cambios inducidos por la edad mayor en el TG SMCs han proporcionado ayuda adicional para la dependencia de dichos cambios sobre hiperactividad de v&iacute;a del poliol.

Interacci&oacute;n entre la v&iacute;a de polialcohol y la glicaci&oacute;n no enzim&aacute;tica sobre adhesi&oacute;n de migraci&oacute;n y monocitos de celular del m&uacute;sculo liso a&oacute;rtico.

Retrovirally &#x8F6C;&#x67D3;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; (M-CSF) &#x4F7F;&#x7528; LXSN &#x57FA;&#x4E8E;&#x77E2;&#x91CF;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x8868;&#x660E;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x53D8;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;M-CSF &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x72B6;&#x6001;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x4EA7;&#x751F;&#x96C6;&#x843D;&#xFF0C;&#x800C;&#x975E;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5408;&#x6210;&#x5C0F;&#x96C6;&#x843D;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;5&#39;-UTR &#x7684;&#x96C6;&#x843D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x8282;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; M CSF &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x7ED3;&#x624E;&#x672F;&#x8FD9; 5&#39;-UTR &#x5230;&#x589E;&#x5F3A;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0; (EGFP) &#x9020;&#x6210;&#x663E;&#x793A;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x4E8C;&#x5206;&#x6CD5;&#x6B63;&#x5982;&#x5148;&#x524D;&#x6240;&#x89C1; M-CSF &#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;5&#39;-UTR &#x4ECE; LXSN &#x5411;&#x91CF;&#x4E2D;&#x79FB;&#x9664;&#x65F6;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x96C6;&#x843D;&#x6709;&#x4EBA;&#x5728;&#x975E;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x3002;&#x5B9E;&#x65F6;&#x5B9A;&#x91CF;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5206;&#x6790;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x5C0F;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x96C6;&#x843D; mRNA &#x53D1;&#x751F;&#x5185;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6BD4;&#x975E;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;5&#39;-UTR &#x4ECE;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x4E2D;&#x79FB;&#x9664;&#x65F6;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5DEE;&#x5F02;&#x88AB;&#x6DD8;&#x6C70;&#x4E86;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x660E;&#x6B64; 5&#39;-UTR &#x7684;&#x96C6;&#x843D;&#x57FA;&#x56E0;&#x53EF;&#x80FD;&#x5185;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x80FD;&#x5728;&#x975E;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x83B7;&#x5F97;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;

Retrovirally &#x8F6C;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x5BF9;&#x76EE;&#x6807;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x9075;&#x5B88;&#x72B6;&#x6001;&#x548C;&#x5176; 5&#39; &#x4FA7;&#x7FFC;&#x8C03;&#x63A7;&#x672A;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;

Numerous cell types retrovirally transduced with macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) using LXSN-based vectors showed a variable expression of the transgene. Expression of M-CSF correlated with the cells' adherent status. Transduced adherent cells produced the M-CSF, whereas the non-adherent cells synthesized little M-CSF. Studies showed that the 5'-UTR of the M-CSF gene regulated transgenic M-CSF gene expression. Ligation of this 5'-UTR to the enhanced green fluorescent protein gene (EGFP) caused the expression of EGFP to show the same dichotomy as previously seen with the M-CSF. Transgenic M-CSF was expressed within non-adherent cells when the 5'-UTR was removed from the LXSN vector. Quantitative real-time polymerase chain reaction analysis confirmed that lesser production of M-CSF mRNA occurred within the non-adherent cells than in the adherent cells. This difference was eliminated when the 5'-UTR was removed from the retroviral vector. Our work suggests that this 5'-UTR of the M-CSF gene could be an important way to get transgenic expression within adherent cells, but not in non-adherent cells.

Macrophage colony-stimulating factor expression in retrovirally transduced cells is dependent upon both the adherence status of the target cells and its 5' flanking untranslated region.

Nombreux types de cellules transduites retrovirally &agrave; macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) &agrave; l&#39;aide de vecteurs de base LXSN a montr&eacute; une expression variable du transg&egrave;ne. Expression de M-CSF en corr&eacute;lation avec le statut d&#39;adh&eacute;rent LiPo. Les cellules adh&eacute;rentes transduits produisent le M-CSF, tandis que les cellules non adh&eacute;rentes synth&eacute;tisent peu M-CSF. Des &eacute;tudes ont montr&eacute; que la 5&#39;-UTR du g&egrave;ne M-CSF r&eacute;glement&eacute; l&#39;expression des g&egrave;nes transg&eacute;nique M-CSF. Ligature de cette 5&#39;-UTR au g&egrave;ne de la prot&eacute;ine fluorescente verte am&eacute;lior&eacute;e (EGFP) due &agrave; l&#39;expression de EGFP pour montrer la m&ecirc;me dichotomie comme d&eacute;j&agrave; vue avec le M-CSF. M-CSF transg&eacute;nique a &eacute;t&eacute; exprim&eacute; dans les cellules non adh&eacute;rentes lors de la 5&#39;-UTR a &eacute;t&eacute; supprim&eacute;e du vecteur LXSN. L&#39;analyse quantitative Real-Time polymerase chain reaction a confirm&eacute; qu&#39;une production moindre de l&#39;ARNm de M-CSF s&#39;est produite dans les cellules non adh&eacute;rentes que dans les cellules adh&eacute;rentes. Cette diff&eacute;rence a &eacute;t&eacute; &eacute;limin&eacute;e lors de la 5&#39;-UTR a &eacute;t&eacute; supprim&eacute;e du vecteur r&eacute;troviral. Notre travail sugg&egrave;re que ce 5&#39;-UTR du g&egrave;ne M-CSF pourrait &ecirc;tre un moyen important d&#39;obtenir l&#39;expression transg&eacute;nique au sein des cellules adh&eacute;rentes, mais pas dans les cellules non adh&eacute;rentes.

Macrophage colony-stimulating factor expression dans les cellules retrovirally transduits d&eacute;pend de deux le statut de l&#39;adh&eacute;rence des cellules cibles et son accompagnement r&eacute;gion non traduite en 5&#39;.

Makrophagen-Kolonie-stimulierender Faktor Expression in retroviral transduzierten Zellen h&#xE4;ngt sowohl die Einhaltung Status der Zielzellen und der 5&#x26;#39;-untranslatierten Region flankieren.

Numerosi tipi di cellule retrovirally transduced con macrofagi colony-stimulating factor (M-CSF) utilizzando i vettori basati su LXSN ha mostrato una variabile espressione del transgene. Espressione di M-CSF correlato con lo stato aderente delle cellule. Cellule trasdotte aderente prodotto M-CSF, considerando che le cellule non-aderenti sintetizzato poco M-CSF. Studi hanno mostrato che la 5&#39;-UTR del gene M-CSF regolato transgenico espressione genica di M-CSF. Legatura di questo 5&#39;-UTR per il gene della proteina fluorescente verde migliorato (EGFP) ha causato l&#39;espressione di EGFP per mostrare la stessa dicotomia come precedentemente vista con la M-CSF. Transgenici M-CSF &egrave; stata espressa all&#39;interno non aderente cellule quando la 5&#39;-UTR &egrave; stato rimosso dal vettore LXSN. Analisi di reazione a catena della polimerasi in tempo reale quantitativa ha confermato che minore produzione di M-CSF mRNA si &egrave; verificato all&#39;interno delle cellule non-aderenti rispetto nelle cellule aderenti. Questa differenza &egrave; stata eliminata quando la 5&#39;-UTR &egrave; stato rimosso dal vettore retrovirale. Il nostro lavoro suggerisce che questo 5&#39;-UTR del gene M-CSF potrebbe essere un modo importante per ottenere l&#39;espressione transgenica all&#39;interno delle cellule aderenti, ma non nelle cellule non-aderenti.

Macrofago colony-stimulating factor expression in cellule trasdotte retrovirally &egrave; dipendente sia lo status di adesione delle cellule bersaglio e le sue 5&#39; che fiancheggiano la regione non tradotta.

LXSN &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9; &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068; (M-CSF) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x3001;transgene &#x306E;&#x5909;&#x6570;&#x5F0F;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;M CSF &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x72B6;&#x614B;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3002;&#x975E;&#x4ED8;&#x7740;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5C11;&#x3057; M-CSF &#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x5F62;&#x8CEA;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4ED8;&#x7740;&#x6027;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB; M CSF &#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; 5&#39;-UTR M-CSF &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; M-CSF &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3002;&#x7D50;&#x7D2E;&#x306E;&#x3053;&#x306E; 5&#39;-UTR &#x5F37;&#x5316;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; (EGFP) &#x306B;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x524D;&#x8FF0; M-CSF &#x3068;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x540C;&#x3058;&#x4E8C;&#x5206;&#x6CD5;&#x3092;&#x793A;&#x3059; EGFP &#x767A;&#x73FE;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; M-CSF &#x975E;&#x4ED8;&#x7740;&#x5185;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x7D30;&#x80DE; 5&#39;-UTR LXSN &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC;&#x89E3;&#x6790; M-CSF mRNA &#x306E;&#x4F4E;&#x3044;&#x751F;&#x7523;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x975E;&#x4ED8;&#x7740;&#x7D30;&#x80DE;&#x4ED8;&#x7740;&#x6027;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x5185;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x304C;&#x6392;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D; 5&#39;-UTR retroviral &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306F;&#x793A;&#x5506;&#x3053;&#x306E; 5&#39;-UTR M-CSF &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x975E;&#x4ED8;&#x7740;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x4ED8;&#x7740;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5F62;&#x8CEA;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x9806;&#x5B88;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30BF;&#x30B9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E; 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x4E26;&#x3076;&#x3002;

Retrovirally &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC778;&#xC790; (M-CSF) LXSN &#xAE30;&#xBC18; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD568;&#xAED8; &#xBD88;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xC140; &#xC885;&#xB958;&#xB294; transgene&#xC758; &#xAC00;&#xBCC0; &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. M-CSF&#xC758; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xBE44; &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD569;&#xC131; &#xC791;&#xC740; M-CSF &#xBC18;&#xBA74; transduced &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC140; M CSF &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xC5F0;&#xAD6C; M-CSF &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; 5&#39;-UTR &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; M-CSF &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0; &#xCC30;&#xC774; 5&#39;-UTR&#xC5D0; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; (EGFP)&#xC758; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; M-CSF&#xC640; &#xBCF8; &#xAC19;&#xC740; &#xC774;&#xBD84;&#xBC95;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; EGFP&#xC758; &#xD45C;&#xD604;. 5&#39;-UTR LXSN &#xBCA1;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xAC70; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C; &#xBE44; &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; M CSF &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC815;&#xB7C9; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751; &#xBD84;&#xC11D; &#xD655;&#xC778; M CSF Mrna&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBE44; &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCC28;&#xC774; 5&#39;-UTR retroviral vector&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xAC70; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C; &#xD0C8;&#xB77D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC77C;&#xC774; 5&#39;-UTR M-CSF &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC140; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBE44; &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC548;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xC744; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;&#xACE0; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Macrophage &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC778;&#xC790; &#xC2DD; retrovirally transduced &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xC0C1; &#xC140;&#xC758; &#xB450; &#xC900;&#xC218; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; 5&#39; &#xB9DE;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xCE21;&#xBA74;.

Numerosos tipos de c&eacute;lulas retrovirally transduced con macr&oacute;fagos colony-stimulating factor (M-CSF) usando vectores basados en LXSN demostraron una expresi&oacute;n variable del transg&eacute;n. Expresi&oacute;n de M-CSF correlaciona con Estado adherente de las c&eacute;lulas. C&eacute;lulas adherentes transduced produjeron el M-CSF, mientras que las c&eacute;lulas no adherente sintetizan poco M-CSF. Los estudios demostraron que el 5&#39;-UTR del gen M-CSF regula genes transg&eacute;nicos de M-CSF. Ligadura de este 5&#39;-UTR al gen de la prote&iacute;na fluorescente verde mejorada (EGFP) caus&oacute; la expresi&oacute;n de EGFP para mostrar la misma dicotom&iacute;a vista anteriormente con el M-CSF. M-CSF transg&eacute;nico fue expresado dentro de las c&eacute;lulas no adherente cuando el 5&#39;-UTR se desconect&oacute; el vector LXSN. An&aacute;lisis de la reacci&oacute;n en cadena de la polimerasa en tiempo real cuantitativa confirm&oacute; que la menor producci&oacute;n de mRNA de M-CSF ocurri&oacute; dentro de las c&eacute;lulas no adherente que en las c&eacute;lulas adherentes. Esta diferencia fue eliminada cuando el 5&#39;-UTR se desconect&oacute; el vector retroviral. Nuestro trabajo sugiere que esta 5&#39;-UTR del gen M-CSF podr&iacute;a ser una manera importante para conseguir la expresi&oacute;n transg&eacute;nica dentro de las c&eacute;lulas adherentes, pero no en c&eacute;lulas no adherente.

Expresi&oacute;n de factor estimulante de colonias de macr&oacute;fagos en c&eacute;lulas retrovirally transduced depende de que tanto el estado de la adherencia de las c&eacute;lulas diana y sus 5&#39; que flanquean la regi&oacute;n sin traducir.

&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x536B;&#x751F;&#x5385;) &#x4FDD;&#x6301;&#x8C03;&#x5236;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E0D;&#x65AD;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x523A;&#x6FC0;&#x5176;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6B64;&#x8868;&#x578B;&#x8C03;&#x5236;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x8840;&#x7BA1;&#x75BE;&#x75C5;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x884D;&#x751F;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x523A;&#x6FC0;&#x5BFC;&#x81F4;&#x663E;&#x8457;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; c &#x541B;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x51CF;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; Cdelta &#x548C;&#x9499;&#x9499;&#x8C03;&#x7D20;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x8003;&#x8651;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x88AB;&#x6240;&#x793A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x7EBE;&#x7F13;&#x7C7B;&#x4E8C;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x5316;&#x9176; &#xFF08;HDACs&#xFF09; &#x7684;&#x538B;&#x5236;&#x6027;&#x5F71;&#x54CD;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x5F3A;&#x56E0;&#x5B50; (MEF) 2 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC; ectopically HDAC4 &#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230; c jun &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;Congruently&#xFF0C;HDAC4 RNA &#x5E72;&#x6270;&#x6280;&#x672F;&#x6291;&#x5236;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x5F3A; c-jun &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6309;&#x7167;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;c &#x541B;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A; MEF2 &#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5728;&#x9759;&#x6001;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; MEF2 &#x72EC;&#x8054;&#x4F53;-&#x5143;&#x7D20;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x5728;&#x6B64;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#x901A;&#x8FC7;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5F62;&#x6210;&#x7684; MEF2 &#x6291;&#x5236; c Jun &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;HDAC4 &#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x76D0;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; 1 &#x590D;&#x6742;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6587;&#x4EF6; c &#x541B;&#x4E0E;&#x7279;&#x5F02;&#xFF0C;&#x7269;&#x7406;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684; c &#x541B;&#x7684;&#x5F3A;&#x8FEB;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x538B;&#x6291;&#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x80FD;&#x529B;&#x6765;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;MEF2 &#x548C; HDAC4 &#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#xFF0C;&#x538B;&#x5236;&#x5728;&#x9759;&#x6B62;&#x536B;&#x751F;&#x5385; c Jun &#x8868;&#x8FBE;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x8FD9;&#x79CD;&#x538B;&#x5236;&#xFF0C;&#x548C;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x884D;&#x751F;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; derepresses &#x901A;&#x8FC7;&#x9499;&#x9499;&#x8C03;&#x7D20;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; c Jun &#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x65B0;&#x578B;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; c &#x541B;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5BF9;&#x6B64;&#x5206;&#x5B50;&quot;&#x5F00;&#x5173;&quot;&#x591A;&#x79CD;&#x8C03;&#x63A7;&#x53EF;&#x80FD;&#x56E0;&#x6B64;&#x8BC1;&#x660E;&#x5207;&#x6362;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x9759;&#x6B62;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#x89C4;&#x5B9A;&#x5927;&#x4F1A;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A; MEF2 {&#x4E2D;&#x95F4;&#x70B9;} HDAC4 &#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x590D;&#x6742;&#x63A7;&#x5236; c &#x541B;&#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Vascular smooth muscle cells (VSMCs) maintain the ability to modulate their phenotype in response to changing environmental stimuli. This phenotype modulation plays a critical role in the development of most vascular disease states. In these studies, stimulation of cultured vascular smooth muscle cells with platelet-derived growth factor resulted in marked induction of c-jun expression, which was attenuated by protein kinase Cdelta and calcium/calmodulin-dependent protein kinase inhibition. Given that these signaling pathways have been shown to relieve the repressive effects of class II histone deacetylases (HDACs) on myocyte enhancer factor (MEF) 2 proteins, we ectopically expressed HDAC4 and observed repression of c-jun expression. Congruently, suppression of HDAC4 by RNA interference resulted in enhanced c-jun expression. Consistent with these findings, mutation of the MEF2 cis-element in the c-jun promoter resulted in promoter activation during quiescent conditions, suggesting that the MEF2 cis-element functions as a repressor in this context. Furthermore, we demonstrate that protein kinase A attenuates c-Jun expression by promoting the formation of a MEF2.HDAC4 repressor complex by inhibiting salt-inducible kinase 1. Finally, we document a physical interaction between c-Jun and myocardin, and we document that forced expression of c-Jun represses the ability of myocardin to activate smooth muscle gene expression. Thus, MEF2 and HDAC4 act to repress c-Jun expression in quiescent VSMCs, protein kinase A enhances this repression, and platelet-derived growth factor derepresses c-Jun expression through calcium/calmodulin-dependent protein kinases and novel protein kinase Cs. Regulation of this molecular "switch" on the c-jun promoter may thus prove critical for toggling between the activated and quiescent VSMC phenotypes.

Protein kinase A-regulated assembly of a MEF2{middle dot}HDAC4 repressor complex controls c-Jun expression in vascular smooth muscle cells.

Les cellules de muscle lisse vasculaire (CMLV) maintiennent la capacit&eacute; de moduler leur ph&eacute;notype en r&eacute;ponse &agrave; l&#39;&eacute;volution des stimuli environnementaux. Cette modulation de ph&eacute;notype joue un r&ocirc;le essentiel dans le d&eacute;veloppement de la plupart des &Eacute;tats de maladie vasculaire. Dans ces &eacute;tudes, la stimulation des cellules musculaires lisses vasculaires cultiv&eacute;es avec facteur de croissance d&eacute;riv&eacute; des plaquettes a provoqu&eacute; marqu&eacute;e induction de l&#39;expression de c-jun, qui a &eacute;t&eacute; att&eacute;nu&eacute;e par la prot&eacute;ine kinase Cdelta et inhibition de calcium/calmoduline-d&eacute;pendante de prot&eacute;ine kinase. Donn&eacute; que ces voies auraient d&ucirc; &ecirc;tre divulgu&eacute;s pour soulager les effets r&eacute;pressifs de classe II histones d&eacute;sac&eacute;tylases (HDAC) de signalisation sur le facteur de renforceur de myocyte (MEF) 2 prot&eacute;ines, nous fa&ccedil;on ectopique exprim&eacute; HDAC4 et observ&eacute; la r&eacute;pression de l&#39;expression de c-jun. Suppression de HDAC4 par interf&eacute;rence ARN entra&icirc;n&eacute; congruente, expression accrue de c-jun. Conform&eacute;ment &agrave; ces conclusions, mutation de la cis-&eacute;l&eacute;ment MEF2 dans le promoteur c-jun a abouti &agrave; l&#39;activation du promoteur lors de conditions de repos, ce qui sugg&egrave;re que l&#39;&eacute;l&eacute;ment cis MEF2 fonctionne comme un r&eacute;presseur dans ce contexte. En outre, nous d&eacute;montrons que cette prot&eacute;ine kinase A att&eacute;nue l&#39;expression de c-Jun en favorisant la formation d&#39;un MEF2.HDAC4 r&eacute;presseur complexe en inhibant la kinase inductible sel 1. Enfin, on trouvera une interaction physique entre c-Jun et MYOCARDINE, et nous documentons qu&#39;expression forc&eacute;e de c-Jun r&eacute;prime la capacit&eacute; de MYOCARDINE pour activer l&#39;expression des g&egrave;nes musculaires lisses. Ainsi, MEF2 et HDAC4 agir pour r&eacute;primer l&#39;expression de c-Jun dans les CMLV quiescentes, prot&eacute;ine kinase A am&eacute;liore cette r&eacute;pression et facteur de croissance d&eacute;riv&eacute; des plaquettes derepresses expression de c-Jun par calcium/calmoduline-d&eacute;pendante de prot&eacute;ine kinases et nouvelle prot&eacute;ine kinase cs. R&egrave;glement de cet &laquo; interrupteur mol&eacute;culaire &raquo; sur le promoteur de c-jun peut ainsi s&#39;av&eacute;rer critique permettant d&#39;alterner entre les ph&eacute;notypes de CMLV activ&eacute;s et repos.

Prot&eacute;ine kinase A r&eacute;glement&eacute; l&#39;Assembl&eacute;e d&#39;un complexe de r&eacute;presseur MEF2 {point m&eacute;dian} HDAC4 contr&ocirc;le l&#39;expression de c-Jun dans les cellules musculaires lisses vasculaires.

Vaskul&auml;ren glatten Muskelzellen (VSMCs) erhalten die M&ouml;glichkeit, ihren Ph&auml;notyp in sich ver&auml;ndernden Umwelt Reize zu modulieren. Dieser Ph&auml;notyp-Modulation spielt eine wichtige Rolle bei der Entwicklung der meisten Gef&auml;&szlig;erkrankungen Zust&auml;nde. In diesen Studien ergab Stimulation der kultivierten vaskul&auml;ren glatten Muskelzellen mit Platelet-derived Growth Factor markierte Induktion von c-jun-Ausdruck, der durch Proteinkinase Cdelta und Calcium/Calmodulin-abh&auml;ngige Protein Kinase Hemmung abgeschw&auml;cht wurde. Da diese Signalisierung Wege sind gezeigt worden, um die repressive Wirkung von Klasse II Histon Deacetylases (HDACs) zu entlasten auf Muskelfaser-Vergr&ouml;&szlig;erer-Faktor (MEF) 2 Proteine, wir ectopically ausgedr&uuml;ckt HDAC4 und Unterdr&uuml;ckung der c-jun Ausdruck zu beobachten. Unterdr&uuml;ckung der HDAC4 von RNA-Interferenz f&uuml;hrte deckungsgleich, verbesserte c-jun Ausdruck. Im Einklang mit diesen Erkenntnissen, Mutation des MEF2 Cis-Elements in der c-jun Projekttr&auml;ger f&uuml;hrte Projekttr&auml;ger Aktivierung w&auml;hrend ruhige Bedingungen, was darauf hindeutet, dass, das MEF2 Cis-Element als ein Verdr&auml;nger in diesem Zusammenhang Funktionen. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir, dass Proteinkinase A c-Jun Ausdruck d&auml;mpft durch die F&ouml;rderung der Bildung von einem MEF2.HDAC4 Verdr&auml;nger Komplex durch die Hemmung der Salz-inducible Kinase 1. Schlie&szlig;lich dokumentieren wir eine k&ouml;rperliche Interaktion zwischen c-Jun und Myocardin, und wir dokumentieren, dass erzwungene Ausdruck von c-Jun die F&auml;higkeit der Myocardin unterdr&uuml;ckt, um glatte Muskulatur Genexpression zu aktivieren. So, MEF2 und HDAC4 handeln, um c-Jun Ausdruck im Ruhezustand VSMCs zu unterdr&uuml;cken, Proteinkinase A verbessert diese Repression und Platelet-derived Growth Factor derepresses c-Jun Ausdruck durch Calcium/Calmodulin-abh&auml;ngigen Proteinkinasen und neuartige Proteinkinase Mutation Verordnung dieser molekularen &quot;Schalter&quot; auf der c-jun Projekttr&auml;ger erweisen sich damit kritisch f&uuml;r das Umschalten zwischen den aktivierten und Ruhezustand VSMC Ph&auml;notypen.

Proteinkinase A geregelten Montage von einem MEF2 {Mittepunkt} HDAC4 Verdr&auml;nger Komplex steuert c-Jun Ausdruck im vaskul&auml;ren glatten Muskelzellen.

Cellule muscolari lisce vascolari (VSMCs) mantengono la capacit&agrave; di modulare il loro fenotipo in risposta a stimoli ambientali la modifica. Questa modulazione del fenotipo gioca un ruolo fondamentale nello sviluppo della maggior parte degli Stati di malattia vascolare. In questi studi, stimolazione delle cellule della muscolatura liscia vascolare colta con fattore di crescita derivato dalle piastrine provocato contrassegnato induzione dell&#39;espressione di c-jun, che &egrave; stato attenuato dalla proteina chinasi Cdelta e inibizione della chinasi di proteina calcio/calmodulina-dipendente. Dato che queste vie hanno dimostrati di alleviare gli effetti repressivi della classe II deacetylases dell&#39;istone (HDACs) di segnalazione sul fattore di rinforzatore del myocyte (MEF) 2 proteine, noi ectopically espresso HDAC4 e osservate la repressione dell&#39;espressione di c-jun. Congruente, soppressione del HDAC4 di interferenza del RNA ha portato una maggiore espressione di c-jun. Coerentemente con questi risultati, mutazione del MEF2 cis-elemento nel promotore c-jun ha portato nell&#39;attivazione del promotore durante condizioni di riposo, suggerendo che il cis-elemento MEF2 funzioni come un repressore in questo contesto. Inoltre, dimostriamo che chinasi di proteina A attenua espressione di c-Jun, promuovendo la formazione di un MEF2.HDAC4 repressor complesso inibendo la chinasi inducibile sale 1. Infine, abbiamo documento un&#39;interazione fisica tra c-Jun e myocardin, e documentiamo che forzata espressione di c-Jun reprime la capacit&agrave; di myocardin per attivare l&#39;espressione genica di muscolo liscio. Cos&igrave;, MEF2 e HDAC4 agire per reprimere l&#39;espressione di c-Jun in VSMCs quiescente, migliora la chinasi di proteina A questa repressione e fattore di crescita derivato dalle piastrine derepresses espressione di c-Jun attraverso chinasi calcio/calmodulina-dipendente e chinasi di proteina romanzo cs regolamento di questo &quot;interruttore&quot; molecolare sul promotore di c-jun cos&igrave; possono rivelarsi critica per la commutazione tra i fenotipi VSMC attivati e quiescenti.

Proteina chinasi regolata A assemblaggio di un complesso di repressore MEF2 {mediano} HDAC4 controlla l&#39;espressione di c-Jun in cellule muscolari lisce vascolari.

&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE; (VSMCs) &#x74B0;&#x5883;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x81EA;&#x5206;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x5909;&#x8ABF;&#x8840;&#x7BA1;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x5DDE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x57F9;&#x990A;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x7531;&#x6765;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x523A;&#x6FC0;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x8A98;&#x5C0E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; Cdelta &#x3068;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;/&#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C7;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x8870;&#x3055;&#x308C;&#x305F; c jun &#x5F0F;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; II &#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x8131;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x9175;&#x7D20; &#xFF08;HDACs&#xFF09; &#x306E;&#x6291;&#x5727;&#x7684;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x548C;&#x3089;&#x3052;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x56E0;&#x5B50; (MEF) 2 &#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x57F9;&#x990A; HDAC4 &#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;c-jun &#x5F0F;&#x306E;&#x5F3E;&#x5727;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3002;&#x632F;&#x308A;&#x8FD4;&#x308B;&#x3001;HDAC4 &#x306E;&#x6291;&#x5236; RNA &#x5E72;&#x6E09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F; c jun &#x5F0F;&#x3067;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; MEF2 cis &#x8981;&#x7D20;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4F11;&#x6B62;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x7570; MEF2 cis &#x8981;&#x7D20; c jun &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; MEF2 &#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A c Jun &#x5F0F;&#x6E1B;&#x8870;&#x3092;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HDAC4 &#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x5869;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 1 &#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8907;&#x96D1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061; c Jun &#x304A;&#x3088;&#x3073; myocardin&#x3001;&#x9593;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x6587;&#x66F8;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x5F37;&#x5236;&#x5F0F; c 6 &#x6708;&#x306E; myocardin &#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x6587;&#x66F8;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;MEF2 HDAC4 c Jun &#x5F0F;&#x9759;&#x6B62; VSMCs &#x3067;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x884C;&#x52D5;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A &#x3053;&#x306E;&#x6291;&#x5727;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3068;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x7531;&#x6765;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;/&#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C7;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; c Jun &#x5F0F; derepresses&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; c jun &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x300C;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x300D;&#x306E; Cs. &#x898F;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x9759;&#x6B62;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x9593;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8A3C;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A &#x898F;&#x5236;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA; MEF2 {&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;} HDAC4 &#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; C-jun &#x5F0F;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD608;&#xAD00; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC; (VSMCs) &#xBCC0;&#xD654; &#xD658;&#xACBD; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0;. &#xC774; &#xD615; &#xBCC0;&#xC870; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xD608;&#xAD00; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xC720;&#xB798; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC640; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xD608;&#xAD00; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC790;&#xADF9;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; Cdelta &#xACE0; &#xCE7C;&#xC298;/calmodulin &#xC885;&#xC18D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinase &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC1E0;&#xB294; c-6 &#xC6D4; &#xC2DD;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC720;&#xB3C4; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. Myocyte &#xC99D;&#xAC15; &#xC778;&#xC790; (MEF) 2&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; deacetylases (HDACs)&#xC758; &#xC5B5;&#xC555; &#xC801;&#xC778; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC644;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xC6B0;&#xB9AC; ectopically HDAC4 &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; c &#xC900; &#xC2DD;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. Congruently, hdac4&#xC758; RNA &#xAC04;&#xC12D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5B5;&#xC81C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; c-6 &#xC6D4; &#xC2DD;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;, c 6 &#xC6D4; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; MEF2 cis-&#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; MEF2 cis-&#xC694;&#xC18C;&#xC758;&#xC774; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xC555;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC81C;&#xC548; &#xBB34;&#xBD80;&#xD558; &#xC870;&#xAC74; &#xC911; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xACB0;&#xACFC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A c-6 &#xC6D4; &#xC2DD;&#xC740; mef2&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC57D;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.HDAC4 &#xC9C4;&#xC555; &#xC18C;&#xAE08; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; 1&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC; myocardin, c-6 &#xC6D4; &#xC0AC;&#xC774; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBB38;&#xC11C;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC; c-6 &#xC6D4;&#xC758; &#xAC15;&#xC81C; &#xC2DD; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; myocardin&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xB204;&#xB974;&#xB294; &#xBB38;&#xC11C;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, MEF2 &#xBC0F; HDAC4 &#xBB34;&#xBD80;&#xD558; Vsmcs&#xC758; c-6 &#xC6D4; &#xC2DD; &#xC8FC;&#xCCB4; &#xD560; &#xD589;&#xB3D9;,&#xC774; &#xC5B5;&#xC555;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A &#xBC0F; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xC720;&#xB798; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; derepresses &#xCE7C;&#xC298;/calmodulin &#xC885;&#xC18D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinases &#xD1B5;&#xD574; c 6 &#xC6D4; &#xC2DD; &#xBC0F; &#xC18C;&#xC124; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; c-6 &#xC6D4; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0;&#xC774; &#xBD84;&#xC790; &quot;&#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;&quot;&#xC758; Cs. &#xADDC;&#xC81C; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xBB34;&#xBD80;&#xD558; VSMC &#xACE0;&#xAE30; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC804;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC99D;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A &#xADDC;&#xC81C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; MEF2 {&#xC911;&#xAC04; &#xC810;} HDAC4 &#xC9C4;&#xC555; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD608;&#xAD00; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; c &#xC900; &#xC2DD;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C&eacute;lulas musculares lisas vasculares (VSMCs) mantienen la capacidad para modular su fenotipo en respuesta a los cambiantes est&iacute;mulos ambientales. Esta modulaci&oacute;n del fenotipo desempe&ntilde;a un papel cr&iacute;tico en el desarrollo de la enfermedad vascular mayor&iacute;a. En estos estudios, estimulaci&oacute;n de las c&eacute;lulas del m&uacute;sculo liso vascular cultivadas con factor de crecimiento derivado de plaquetas produjo marcada inducci&oacute;n de la expresi&oacute;n de c-jun, que fue atenuada por la prote&iacute;na quinasa Cdelta y la inhibici&oacute;n de la cinasa de prote&iacute;na dependiente de Calcio/calmodulina. Dado que &eacute;stos se&ntilde;alizaci&oacute;n v&iacute;as han demostrado aliviar los efectos represivos de clase II Histona Desacetilasas (HDAC) factor de potenciador del miocito (MEF) 2 prote&iacute;nas, nos ect&oacute;picamente expres&oacute; HDAC4 y observ&oacute; la represi&oacute;n de la expresi&oacute;n de c-jun. Congruentemente, supresi&oacute;n de HDAC4 por interferencia de ARN dio lugar a la expresi&oacute;n de c-jun realzada. De acuerdo con estos resultados, mutaci&oacute;n del MEF2 cis-elemento en el promotor de c-jun dio lugar a la activaci&oacute;n del promotor durante condiciones de reposo, sugiriendo que los elementos cis MEF2 funciona como un represor en este contexto. Adem&aacute;s, demostramos que Kinase de prote&iacute;na A aten&uacute;a la expresi&oacute;n de c-Jun al promover la formaci&oacute;n de un MEF2.HDAC4 represor complejo mediante la inhibici&oacute;n de la sal-inducible quinasa 1. Finalmente, documentamos una interacci&oacute;n f&iacute;sica entre c-Jun y myocardin, y documentamos que forzada expresi&oacute;n de c-Jun reprime la capacidad de myocardin para activar la expresi&oacute;n del gen del m&uacute;sculo liso. As&iacute;, MEF2 y HDAC4 act&uacute;an para reprimir la expresi&oacute;n de c-Jun en VSMCs quietos, mejora el kinase de prote&iacute;na A esta represi&oacute;n y factor de crecimiento derivado de plaquetas derepresses expresi&oacute;n de c-Jun a trav&eacute;s de prote&iacute;nas dependiente de Calcio/calmodulina quinasas y novedosa prote&iacute;na quinasa CS. regulaci&oacute;n de este &quot;interruptor&quot; molecular en el promotor de c-jun as&iacute; puede resultar fundamental para alternar entre los fenotipos de Coevoluci&oacute;n activados y quietos.

Prote&iacute;na quinasa regulada A la Asamblea de un complejo de represor MEF2 {medio punto} HDAC4 controla la expresi&oacute;n de c-Jun en c&eacute;lulas de m&uacute;sculo liso vascular.

&#x9F20;&#x6807; Hepa1-6 &#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x764C; (HCC) &#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; (mM-CSF) &#x819C;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3002;&#x5F53; mM &#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x8F6C;&#x5BFC; Hepa1-6 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x88AB;&#x76AE;&#x4E0B;&#x6CE8;&#x5165;&#x5C0F;&#x9F20;&#x65F6;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F62;&#x6210;&#x80BF;&#x7624;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x514D;&#x75AB;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x813E;&#x810F;&#x6240;&#x8F7D;&#x6740;&#x5BB3;&#x672A;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684; Hepa1-6 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; CD8 + T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE; (CTL)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; (&#x535A;&#x89C8;-CSF) &#x66FF;&#x4EE3;&#x5F62;&#x5F0F;&#x8BF1;&#x5BFC; CTL &#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x5BF9; Hepa1-6 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x535A;&#x89C8;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E; H-2D(b) &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;Ctl &#x6740; RMA S &#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x6E90;&#x535A;&#x89C8;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x80BD;&#x8D1F;&#x8F7D;&#x3002;&#x75AB;&#x82D7;&#x63A5;&#x79CD;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x8109;&#x51B2;&#x4E0E;&#x535A;&#x89C8;-CSF &#x80BD;&#x4E0E;&#x6BEB;&#x7C73;-CSF Hepa1-6 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x809D;&#x810F;&#x548C;&#x80BE;&#x810F;&#x708E;&#x75C7;&#x523A;&#x6FC0;&#x6297;-Hepa1-6 Ctl&#x3002; &#x8D85;-&#x514D;&#x75AB;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x535A;&#x89C8;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x809D;&#x548C;&#x80BE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4F46;&#x5B83;&#x7684;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x4E8E; Hepa1-6 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x535A;&#x89C8;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x4EBA;&#x7C7B; HepG2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x535A;&#x89C8; CSF &#x53EF;&#x80FD;&#x4E3A;&#x809D;&#x764C;&#x80BF;&#x7624;&#x6297;&#x539F;&#x3002;

Hepa1-6 &#x975E;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#x3001; &#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x809D;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x514D;&#x75AB;&#x88AB;&#x9488;&#x5BF9;&#x65B0;&#x578B;&#x66FF;&#x4EE3;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;

Mouse Hepa1-6 hepatocellular carcinoma (HCC) cells were transduced with the membrane form of macrophage colony stimulating factor (mM-CSF). When mM-CSF transduced Hepa1-6 cells were injected subcutaneously into mice, these cells did not form tumors. The spleens of these immunized mice contained cytotoxic CD8+ T lymphocytes (CTL) that killed the unmodified Hepa1-6 cells. We show that the alternative form of macrophage colony stimulating factor (altM-CSF) induced CTL-mediated immunity against Hepa1-6 cells. AltM-CSF is restricted to the H-2D(b) allele. CTLs killed RMA-S cells loaded with exogenous altM-CSF peptide. Vaccination of mice with dendritic cells pulsed with the altM-CSF peptide stimulated anti-Hepa1-6 CTLs. Hyper-immunization of mice with mM-CSF Hepa1-6 cells showed inflammation of the liver and kidneys. Although altM-CSF was expressed within liver and kidney cells, its intensity was lower than Hepa1-6 cells. AltM-CSF was detected within the human HepG2 cell line. These studies suggest that altM-CSF may be a tumor antigen for HCC.

Cytotoxic T cell immunity against the non-immunogenic, murine, hepatocellular carcinoma Hepa1-6 is directed towards the novel alternative form of macrophage colony stimulating factor.

Souris Hepa1-6 h&eacute;patocellulaire (HCC) cellules &eacute;taient transduites avec la forme de la membrane de macrophages stimulant les colonies facteur (mM-CSF). Lorsque les cellules Hepa1-6 mM-CSF transduite ont &eacute;t&eacute; inject&eacute;es par voie sous-cutan&eacute;e &agrave; des souris, ces cellules ne forment pas de tumeurs. La rate de ces souris immunis&eacute;es contenue des lymphocytes T CD8 + cytotoxiques (CTL) qui a tu&eacute; les cellules Hepa1-6 non modifi&eacute;s. Nous montrons que la forme alternative du facteur (CLA-CSF) stimulant des colonies de macrophages induite par CTL l&#39;immunit&eacute; contre les cellules Hepa1-6. CLA-CSF est restreinte &agrave; l&#39;all&egrave;le H-2D(b). CTL a tu&eacute; les cellules de RMA-S charg&eacute;s peptide exog&egrave;ne CLA-CSF. Vaccination des souris avec des cellules dendritiques puls&eacute; avec le CLA-CSF peptide stimul&eacute; anti-Hepa1-6 CTL. Hyper-immunisation de souris avec des cellules mM-CSF Hepa1-6 a montr&eacute; une inflammation du foie et des reins. Bien que CLA-CSF a &eacute;t&eacute; exprim&eacute; dans le foie et les cellules r&eacute;nales, son intensit&eacute; &eacute;tait plus faible que les cellules Hepa1-6. CLA-CSF a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;e dans la lign&eacute;e humaine HepG2. Ces &eacute;tudes sugg&egrave;rent que CLA-CSF peut &ecirc;tre un antig&egrave;ne pour HCC.

Immunit&eacute; des lymphocytes T cytotoxiques contre le carcinome h&eacute;patocellulaire non immunog&egrave;nes, murin, Hepa1-6 est orient&eacute;e vers la nouvelle forme alternative du facteur stimulant des colonies de macrophages.

Maus-Hepa1-6 Hepatozellul&auml;res Karzinom (HCC) Zellen wurden mit der Membran-Form des Makrophagen-Kolonie-anregende Faktor (mM-CSF) ausgestrahlt. Wenn mM-CSF septischen Hepa1-6 Zellen in M&auml;usen subkutan injiziert wurden, bildeten diese Zellen keine Tumoren. Die Milz von diesen immunisierten M&auml;usen enthaltenen zytotoxische CD8 + T-Lymphozyten (CTL), die die unver&auml;nderten Hepa1-6-Zellen get&ouml;tet. Wir zeigen, dass die alternative Form der Makrophagen-Kolonie-anregende Faktor (AltM-CSF) CTL-vermittelte Immunit&auml;t gegen Hepa1-6-Zellen induziert. AltM-CSF beschr&auml;nkt sich auf die H-2D(b)-Allel. Zertifikatsvertrauenslisten get&ouml;tet RMA-S-Zellen mit exogenen AltM-CSF Peptid geladen. Impfung der M&auml;use mit dendritischen Zellen gepulst mit AltM-CSF Peptid stimuliert Anti-Hepa1-6 CTLs. Hyper-Immunisierung von M&auml;usen mit mM-CSF-Hepa1-6-Zellen, die Entz&uuml;ndung der Leber und Nieren zeigten. Obwohl AltM-CSF im Leber- und Nierenzellen ge&auml;u&szlig;ert wurde, war seine Intensit&auml;t niedriger als Hepa1-6-Zellen. AltM-CSF wurde innerhalb der menschlichen HepG2-Zelllinie erkannt. Diese Studien deuten darauf hin, dass die AltM-CSF m&ouml;glicherweise einen Tumor Antigen f&uuml;r HCC.

Zytotoxische T-Zell Immunit&auml;t gegen die nicht immunogen, murine, Hepatozellul&auml;res Karzinom Hepa1-6 richtet sich auf die neue alternative Form der Makrophagen-Kolonie-anregende Faktor.

Mouse Hepa1-6 cellule di hepatocellular carcinoma (HCC) erano transduced con la forma di membrana della colonia di macrofagi fattore (mM-CSF). Quando le cellule di Hepa1-6 mM-CSF transduced erano iniettate per via sottocutanea in topi, queste cellule non ha fatto formare i tumori. La milza di questi topi immunizzati conteneva i linfociti T CD8 + citotossici (CTL) che ha ucciso le cellule non modificate di Hepa1-6. Mostriamo che la forma alternativa della colonia dei macrofagi (altM-CSF) fattore stimolante induce immunit&agrave; mediata da CTL contro le cellule Hepa1-6. AltM-CSF &egrave; limitato per l&#39;allele H-2D(b). CTL ucciso le cellule RMA-S caricate con peptide esogeno altM-CSF. La vaccinazione dei topi con cellule dendritiche pulsato con l&#39;altM-CSF peptide stimolato anti-Hepa1-6 CTL. Hyper-immunizzazione dei topi con cellule di mM-CSF Hepa1-6 ha mostrate l&#39;infiammazione del fegato e dei reni. Anche se altM-CSF &egrave; stata espressa all&#39;interno di cellule di rene e fegato, la sua intensit&agrave; &egrave; stato inferiore a Hepa1-6 celle. AltM-CSF &egrave; stato rilevato all&#39;interno della linea di cellule HepG2 umana. Questi studi suggeriscono che altM-CSF pu&ograve; essere un antigene tumorale per HCC.

Linfociti T cell immunit&agrave; contro il carcinoma epatocellulare non immunogenico, murino, Hepa1-6 &egrave; diretto verso il romanzo forma alternativa della colonia dei macrofagi fattore stimolante.

Hepa1 6 &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x764C; (HCC) &#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; (mM CSF) &#x306E;&#x819C;&#x5F62;&#x3067;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;MM CSF &#x5C0E;&#x5165; Hepa1 6 &#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x76AE;&#x4E0B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x514D;&#x75AB;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x813E;&#x81D3;&#x306B;&#x306F;&#x672A;&#x5909;&#x66F4;&#x306E; Hepa1 6 &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6BBA;&#x3057;&#x305F;&#x3059;&#x308B; cd8 &#x967D;&#x6027; T &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403; (CTL) &#x3092;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; &#xFF08;altM CSF) &#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092; Hepa1 6 &#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066; CTL &#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;AltM CSF H-2D(b) &#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ctl &#x306F;&#x5916;&#x56E0;&#x6027; altM CSF &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9; RMA S &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6BBA;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x63A5;&#x7A2E;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9; altM CSF &#x3068;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x523A;&#x6FC0;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;-Hepa1-6 &#x306E; Ctl&#x3002; &#x30CF;&#x30A4;&#x30D1;&#x30FC;&#x63A5;&#x7A2E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x809D;&#x81D3;&#x3084;&#x814E;&#x81D3;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; mM CSF Hepa1 6 &#x30BB;&#x30EB;&#x3068;&#x3002;AltM CSF &#x809D;&#x81D3;&#x3068;&#x814E;&#x81D3;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306F; Hepa1 6 &#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x4F4E;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;AltM CSF &#x4EBA;&#x9593; HepG2 &#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E; altM CSF &#x306F;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x764C;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x6297;&#x539F;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Hepa1 6 &#x306E;&#x975E;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;, &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;, &#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x764C;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027; T &#x7D30;&#x80DE;&#x514D;&#x75AB;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x5F62;&#x5F0F;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x76E3;&#x7763;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Hepa1 6 &#xAC04;&#xC138;&#xD3EC; &#xC554; (HCC) &#xC138;&#xD3EC; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC778;&#xC790; (mM CSF) &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xBD88;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB54C; mM CSF &#xBD88;&#xB9AC;&#xACE0; Hepa1 6 &#xC140; subcutaneously &#xC950;&#xB85C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD588;&#xB2E4;,&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED;&#xB41C; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; spleens &#xD3EC;&#xD568; cytotoxic CD8 + T &#xC138;&#xD3EC; (CTL) &#xC218;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; Hepa1 6 &#xC140;&#xC744; &#xC8FD; &#xC600; &#xC5B4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC778;&#xC790; (altM-CSF)&#xC758; &#xB300;&#xC548; &#xD615;&#xD0DC; Hepa1 6 &#xC140;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; CTL-&#xC911;&#xC7AC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC720;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC5EC;. AltM CSF H-2D(b) &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB85C; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ctl &#xC0B4;&#xD574; RMA S &#xC140; exogenous altM CSF &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB85C;&#xB4DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885; altM CSF&#xC640; &#xD384;&#xC2A4; &#xAC04; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xC7A5;&#xC758; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC; mM CSF Hepa1 6 &#xC140; &#xC548;&#xD2F0;-Hepa1-6 Ctl. &#xD558;&#xC774;&#xD37C;-&#xBA74;&#xC5ED; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;. AltM CSF&#xB294; &#xAC04;, &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8; &#xAC15;&#xB3C4; Hepa1 6 &#xC140; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740;. AltM CSF &#xC778;&#xAC04;&#xC758; HepG2 &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; altM CSF HCC&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC885;&#xC591; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hepa1-6-immunogenic, murine, &#xAC04;&#xC138;&#xD3EC; &#xC554; &#xC885;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131; T &#xC138;&#xD3EC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC778;&#xC790; &#xB2E4;&#xB978; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rat&oacute;n Hepa1-6 hepatocelular (HCC) c&eacute;lulas fueron transduced con la forma de la membrana de factor (m-CSF) estimulante de colonias de macr&oacute;fagos. Cuando las c&eacute;lulas de Hepa1-6 m m-CSF transduced se inyectaron por v&iacute;a subcut&aacute;nea en ratones, estas c&eacute;lulas no formaron tumores. El bazo de los ratones inmunizados contiene linfocitos T CD8 + citot&oacute;xicos (CTL) que mat&oacute; a las c&eacute;lulas de Hepa1-6 no modificadas. Demostramos que la forma alternativa de factor (altM-CSF) estimulante de colonias de macr&oacute;fagos induce inmunidad mediada por CTL contra las c&eacute;lulas de Hepa1-6. AltM-CSF est&aacute; restringido para el alelo H-2D(b). Listas CTL mat&oacute; a c&eacute;lulas de RMA-S cargadas de p&eacute;ptido ex&oacute;geno altM-CSF. Vacunaci&oacute;n de ratones con c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas pulsada con el altM-CSF p&eacute;ptido estimulado anti-Hepa1-6 CTLs. Hyper-inmunizaci&oacute;n de ratones con c&eacute;lulas de m-CSF Hepa1-6 demostradas la inflamaci&oacute;n del h&iacute;gado y ri&ntilde;ones. Aunque altM-CSF se expres&oacute; en el h&iacute;gado y las c&eacute;lulas del ri&ntilde;&oacute;n, su intensidad fue menor que las c&eacute;lulas de Hepa1-6. AltM-CSF fue detectada dentro de la l&iacute;nea de c&eacute;lulas HepG2 humana. Estos estudios sugieren que AltM-CSF puede ser un ant&iacute;geno del tumor de HCC.

T citot&oacute;xicos inmunidad contra el carcinoma hepatocelular no inmunog&eacute;nico, murino, Hepa1-6 se dirige hacia la nueva forma alternativa de factor estimulante de colonias de macr&oacute;fagos.

&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x6FC0;&#x6D3B; Rho/Rho &#x6FC0;&#x9176; (&#x97E9;&#x56FD;) &#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4ECE;&#x800C;&#x589E;&#x5F3A;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7B;&#x94FE; (MLC) &#x78F7;&#x9178;&#xFF0C;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x6E17;&#x900F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7684;&#x592B;&#x5987; depolarization Rho &#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x6E17;&#x900F;&#x6027;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x663E;&#x793A;&#x4E09;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x53BB;&#x6781;&#x5316; &#xFF08;&#x80DE;&#x5916; K(+) &#x9AD8;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3001; &#x4EB2;&#x8102;&#x6027;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50; tetraphenylphosphonium &#x6216; l-&#x4E19;&#x6C28;&#x9178;&#xFF0C;&#x91C7;&#x53D6;&#x7535; Na(+) cotransport&#xFF09; &#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x6240;&#x6709;&#x6311;&#x8D77;&#x9C81;&#x68D2;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; ERK LLC PK1 &#x548C;&#x6885;&#x4E01;&#x8FBE;&#x6BD4;&#x72AC;&#x80BE; (&#x80BE;) &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236; ERK &#x963B;&#x6B62;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684; Rho&#x3002;&#x641C;&#x7D22;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A; GTP GDP &#x4EA4;&#x6362;&#x56E0;&#x5B50;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x4E3A;&#x8D1F;&#x8D23;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; Rho &#x6FC0;&#x6D3B; ERK &#x76D1;&#x7BA1;&#x5173;&#x952E;&#x4EA4;&#x6362;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C; 1&#xFF09; &#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; p115RhoGEF&#x3001; 2&#xFF09; &#x77ED;&#x5E72;&#x6270; RNA &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x6C89;&#x9ED8;&#x6DD8;&#x6C70;&#x7684; Rho &#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C; 3&#xFF09; erk &#x9014;&#x5F84;&#x963B;&#x6B62;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Na(+)-K(+) &#x6CF5;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x54C7;&#x4E5F;&#x9020;&#x6210; ERK&#x3001; &#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x548C; Rho &#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x9664;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x5173;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x65B0;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x540E;&#x679C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x589E;&#x52A0; LLC PK1 &#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4F7F;&#x7528; blebbistatin &#x6216;&#x663E;&#x6027;&#x51CF;&#x8F7B;&#x8D1F; (&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x65E0;&#x80FD;) &#x521A;&#x679C;&#x89E3;&#x653E;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;&#x7EFC;&#x4E0A;&#x6240;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; ERK/&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1/Rho/&#x97E9;&#x56FD;/pMLC &#x9014;&#x5F84;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x592E;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5373;&#x7535;&#x523A;&#x6FC0;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x8FD0;&#x8F93;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x63A7;&#x5236;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x548C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5728;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;

&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8C03;&#x8282;&#x6FC0;&#x9176;&#x548C;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x8C03;&#x89E3;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x8BF1;&#x5BFC; Rho &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;

Plasma membrane depolarization activates the Rho/Rho kinase (ROK) pathway and thereby enhances myosin light chain (MLC) phosphorylation, which in turn is thought to be a key regulator of paracellular permeability. However, the upstream mechanisms that couple depolarization to Rho activation and permeability changes are unknown. Here we show that three different depolarizing stimuli (high extracellular K(+) concentration, the lipophilic cation tetraphenylphosphonium, or l-alanine, which is taken up by electrogenic Na(+) cotransport) all provoke robust phosphorylation of ERK in LLC-PK1 and Madin-Darby canine kidney (MDCK) cells. Importantly, inhibition of ERK prevented the depolarization-induced activation of Rho. Searching for the underlying mechanism, we have identified the GTP/GDP exchange factor GEF-H1 as the ERK-regulated critical exchange factor responsible for the depolarization-induced Rho activation. This conclusion is based on our findings that 1) depolarization activated GEF-H1 but not p115RhoGEF, 2) short interfering RNA-mediated GEF-H1 silencing eliminated the activation of the Rho pathway, and 3) ERK inhibition prevented the activation of GEF-H1. Moreover, we found that the Na(+)-K(+) pump inhibitor ouabain also caused ERK, GEF-H1, and Rho activation, partially due to its depolarizing effect. Regarding the functional consequences of this newly identified pathway, we found that depolarization increased paracellular permeability in LLC-PK1 and MDCK cells and that this effect was mitigated by inhibiting myosin using blebbistatin or a dominant negative (phosphorylation incompetent) MLC. Taken together, we propose that the ERK/GEF-H1/Rho/ROK/pMLC pathway could be a central mechanism whereby electrogenic transmembrane transport processes control myosin phosphorylation and regulate paracellular transport in the tubular epithelium.

Extracellular signal-regulated kinase and GEF-H1 mediate depolarization-induced Rho activation and paracellular permeability increase.

D&#xE9;polarisation de la membrane plasmatique active la Rho / Rho kinase (ROK) et am&#xE9;liore ainsi la voie l&#xE9;g&#xE8;re de la myosine cha&#xEE;ne (MLC) de phosphorylation, qui &#xE0; son tour est pens&#xE9; pour &#xEA;tre un r&#xE9;gulateur cl&#xE9; de la perm&#xE9;abilit&#xE9; paracellulaire. Cependant, les m&#xE9;canismes en amont que la d&#xE9;polarisation couple &#xE0; Rho changements d&#x26;#39;activation et de la perm&#xE9;abilit&#xE9; sont inconnus. Ici, nous montrons que les trois diff&#xE9;rents stimuli d&#xE9;polarisants (forte teneur en K extracellulaire (+) la concentration, l&#x26;#39;t&#xE9;traph&#xE9;nylphosphonium cation lipophile, ou L-alanine, qui est repris par &#xE9;lectrog&#xE8;ne Na (+) cotransport) tous les provoquent la phosphorylation de ERK dans les robustes LLC-PK1 et Madin-Darby canine r&#xE9;naux (MDCK). Il est important, l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;activation de ERK emp&#xEA;ch&#xE9; induit par la d&#xE9;polarisation de Rho. Recherche pour le m&#xE9;canisme sous-jacent, nous avons identifi&#xE9; le facteur de GTP / GDP &#xE9;change FEM-H1 comme le facteur ERK-r&#xE9;glement&#xE9; &#xE9;change critique responsable de l&#x26;#39;activation induit par la d&#xE9;polarisation Rho. Cette conclusion est bas&#xE9;e sur nos constatations selon lesquelles 1) la d&#xE9;polarisation activ&#xE9; FEM-H1 mais pas p115RhoGEF, 2) petit ARN interf&#xE9;rent m&#xE9;di&#xE9;e par le FEM-H1 silence &#xE9;limin&#xE9; l&#x26;#39;activation de la voie Rho, et 3) l&#x26;#39;inhibition de ERK emp&#xEA;ch&#xE9; l&#x26;#39;activation de FEM-H1 . En outre, nous avons constat&#xE9; que le Na (+)-K (+) inhibiteur de la pompe ouaba&#xEF;ne a &#xE9;galement caus&#xE9; ERK, le FEM-H1, et l&#x26;#39;activation de Rho, partiellement en raison de son effet d&#xE9;polarisant. En ce qui concerne les cons&#xE9;quences fonctionnelles de cette voie nouvellement identifi&#xE9;s, nous avons constat&#xE9; que la d&#xE9;polarisation augmentation de la perm&#xE9;abilit&#xE9; paracellulaire dans LLC-PK1 et cellules MDCK et que cet effet a &#xE9;t&#xE9; att&#xE9;nu&#xE9; par la myosine inhibant l&#x26;#39;aide blebbistatin ou une dominante n&#xE9;gative MLC (phosphorylation incomp&#xE9;tent). Pris dans leur ensemble, nous proposons que la voie ERK/GEF-H1/Rho/ROK/pMLC pourrait &#xEA;tre un m&#xE9;canisme central par lequel les processus de transport transmembranaires &#xE9;lectrog&#xE8;nes contr&#xF4;ler et de r&#xE9;glementer phosphorylation de la myosine transport paracellulaire dans l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium tubulaire.

Extracellular signal-regulated kinase et le FEM-H1 Mediate d&#xE9;polarisation induite par l&#x26;#39;activation de Rho et augmentation de la perm&#xE9;abilit&#xE9; paracellulaire

Depolarisation der Plasmamembran der Rho/Rho-Kinase (ROK)-Signalweg aktiviert und damit Myosin-Leichtketten (MLC)-Phosphorylierung, die wiederum angenommen wird, ein wichtiger Regulator der parazellul&auml;ren Durchl&auml;ssigkeit verbessert. Die vorgelagerten Mechanismen, die paar Rho-Aktivierung und Durchl&auml;ssigkeit &Auml;nderungen depolarization sind jedoch unbekannt. Hier zeigen wir, dass drei verschiedene depolarisierende Reize (extrazellul&auml;re K(+) Hochkonzentration, lipophile kation Tetraphenylphosphonium oder l-Alanin, welche von elektrizit&auml;tserzeugende Na(+) Cotransport eingenommen wird) alle provozieren robuste Phosphorylierung von ERK in LLC-PK1 und Madin Darby canine Kidney (MDCK) Zellen. Hemmung der ERK verhindert vor allem die Depolarisierung-induzierte Aktivierung des Rho. Suche nach den zugrunde liegenden Mechanismus, haben wir den GTP/BIP-Austausch-Faktor GEF-H1 als die kritischen Austausch ERK-regulierten Faktor f&uuml;r die Depolarisierung induziert Rho-Aktivierung identifiziert. Diese Schlussfolgerung ist aufgrund unserer Erkenntnisse, dass 1) Depolarisierung GEF-H1 aber nicht p115RhoGEF aktiviert, 2) kurze interferierender RNA-vermittelte GEF-H1 Unterdr&uuml;ckender die Aktivierung des Rho-Signalweges eliminiert und 3) ERK Hemmung die Aktivierung der GEF-H1 verhindert. Dar&uuml;ber hinaus fanden wir, dass die Na(+)-K(+) Pumpe Inhibitor Strophanthin auch ERK, GEF-H1 und Rho-Aktivierung, teilweise bedingt durch die depolarisierende Wirkung verursacht. Zu den funktionellen folgen diesem neu identifizierte Weg, wir fanden, dass Depolarisation parazellul&auml;ren Durchl&auml;ssigkeit im LLC-PK1 erh&ouml;ht und MDCK Zellen und, dass dieser Effekt durch die Hemmung der Myosin mit Blebbistatin oder eine dominante entsch&auml;rft war negativ (Phosphorylierung inkompetent) MLC. Zusammengenommen, schlagen wir vor, dass der Stoffwechselweg ERK/GEF-H1/Rho/ROK/pMLC einen zentralen Mechanismus sein k&ouml;nnte, wobei elektrizit&auml;tserzeugende Transmembran Transportprozesse Myosin Phosphorylierung kontrollieren und regulieren parazellul&auml;ren Transport in das tubul&auml;re Epithel.

Extrazellul&auml;re Signal-regulierte Kinase und GEF-H1 vermitteln induziert durch Depolarisation Rho Aktivierung und parazellulare Durchl&auml;ssigkeit erh&ouml;hen.

Depolarizzazione della membrana plasmatica attiva il pathway della chinasi (ROK) Rho/Rho e quindi aumenta la fosforilazione della catena leggera (MLC) di miosina, che a sua volta &egrave; pensato per essere un regolatore chiave della permeabilit&agrave; paracellular. Tuttavia, i meccanismi a monte che coppia depolarizzazione per attivazione di Rho e cambiamenti di permeabilit&agrave; sono sconosciuti. Qui vi mostriamo che tre differenti depolarizzante stimoli (alta concentrazione extracellulare di K(+), il catione lipofilico tetraphenylphosphonium o l-alanina, che &egrave; preso dalla elettrogeniche Na(+) cotrasporto) tutti provocano robusta fosforilazione di ERK in cellule di rene canino (MDCK) LLC-PK1 e Madin-Darby. Soprattutto, l&#39;inibizione di ERK ha impedito l&#39;attivazione indotta depolarizzazione di Rho. Cercando il meccanismo sottostante, abbiamo identificato il fattore di scambio GTP/GDP GEF-H1 come il fattore di scambio critico ERK-regolato responsabile per l&#39;attivazione di Rho depolarizzazione indotta. Questa conclusione &egrave; basata sulle nostre scoperte che 1) depolarizzazione attivato GEF-H1 ma non p115RhoGEF, 2) breve interfering RNA-mediata GEF-H1 silenziamento eliminato l&#39;attivazione del percorso Rho e inibizione 3) ERK ha impedito l&#39;attivazione del GEF-H1. Inoltre, abbiamo trovato che l&#39;ouabaina inibitore di pompa Na(+)-K(+) causato anche ERK, GEF-H1 e attivazione di Rho, parzialmente a causa del suo effetto depolarizing. Per quanto riguarda le conseguenze funzionali di questo percorso recentemente identificata, abbiamo scoperto che la depolarizzazione aumentata permeabilit&agrave; paracellular in LLC-PK1 e cellule MDCK e che questo effetto &egrave; stato mitigato inibendo la miosina utilizzando blebbistatin o una dominante negativo (fosforilazione incompetente) MLC. Presi insieme, proponiamo che il pathway ERK/GEF-H1/Rho/ROK/pMLC potrebbe essere un meccanismo centrale per cui i processi di trasporto transmembrana elettrogeniche controllare la fosforilazione della miosina e regolare trasporto paracellular nell&#39;epitelio tubulare.

Chinasi segnale-regolata extracellulare e GEF-H1 mediano depolarizzazione indotta Rho attivazione e paracellular permeabilit&agrave; aumento.

&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x306F;&#x3001;Rho / Rho&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;ROK&#xFF09;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9806;&#x756A;&#x306B;&#x508D;&#x7D30;&#x80DE;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x8EFD;&#x9396;&#xFF08;MLC&#xFF09;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Rho&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x900F;&#x6C34;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EB;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x305D;&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x793A;&#x3059;3&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF08;&#x9AD8;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;K&#xFF08;+&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3001;&#x8102;&#x6EB6;&#x6027;&#x967D;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30CB;&#x30A6;&#x30E0;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;L-&#x30A2;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x3001;&#x8D77;&#x96FB;&#x6027;&#x306E;Na&#xFF08;+&#xFF09;&#x5171;&#x8F38;&#x9001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#xFF09;LLC-PK1&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ERK&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6311;&#x767A;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3068;Madin-Darby&#x30A4;&#x30CC;&#x814E;&#x81D3;&#xFF08;MDCK&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;ERK&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;Rho&#x306E;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x9632;&#x3044;&#x3060;&#x3002;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63A2;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;Rho&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;ERK-&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x4EA4;&#x63DB;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;GTP / GDP&#x4EA4;&#x63DB;&#x56E0;&#x5B50;GEF-H1&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D50;&#x8AD6;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;1&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#xFF09;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;GEF-H1&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;p115RhoGEF&#x3001;2&#xFF09;&#x77ED;&#x9396;&#x5E72;&#x6E09;RNA&#x5A92;&#x4ECB;GEF-H1&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;Rho&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x3001;3&#xFF09;ERK&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;GEF-H1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;Na&#xFF08;+&#xFF09;-K&#xFF08;+&#xFF09;&#x30DD;&#x30F3;&#x30D7;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x30A6;&#x30A2;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x307E;&#x305F;ERK&#x3001;GEF-H1&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x6975;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;Rho&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5E30;&#x7D50;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x306F;&#x3001;LLC-PK1&#x304A;&#x3088;&#x3073;MDCK&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x508D;&#x7D30;&#x80DE;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;blebbistatin&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#xFF08;&#x30EA;&#x30F3;&#x7121;&#x80FD;&#xFF09;MLC&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;ERK/GEF-H1/Rho/ROK/pMLC&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x8D77;&#x96FB;&#x6027;&#x819C;&#x8F38;&#x9001;&#x904E;&#x7A0B;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x3001;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x508D;&#x7D30;&#x80DE;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x5236;&#x5FA1;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;GEF-H1&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x306E;Rho&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x508D;&#x7D30;&#x80DE;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;

&#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; depolarization Rho/&#xB178; &#xB2C8; (&#xD55C;&#xAD6D;) &#xD1B5;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; myosin &#xBE5B; &#xCCB4;&#xC778; (MLC) &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; paracellular &#xCE68;&#xD22C;&#xC131;&#xC758; &#xD0A4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB41C;&#xB2E4;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBD80;&#xBD80;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xD22C;&#xACFC;&#xC728; &#xBCC0;&#xD654; depolarization &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; 3 &#xB2E4;&#xB978; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E4;&#xBA74;&#xC11C; &#xC790;&#xADF9; (&#xB192;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; K(+) &#xB18D;&#xB3C4;, &#xBE14;&#xB808;&#xBBF8;&#xC26C; &#xC591;&#xC774;&#xC628; tetraphenylphosphonium, &#xB610;&#xB294; l-&#xC54C;&#xB77C;&#xB2CC;, electrogenic Na(+) cotransport&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294;) &#xBAA8;&#xB4E0; LLC PK1 &#xBC0F; Madin-&#xB2E4; &#xBE44; &#xC1A1;&#xACF3; &#xB2C8; &#xC2E0;&#xC7A5; (MDCK) &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; ERK&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC790;&#xADF9;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, ERK&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xB85C; depolarization &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xC0C9;, &#xC6B0;&#xB9AC; depolarization &#xC720;&#xB3C4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; exchange ERK &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; GDP&#xB294; GTP/&#xAD50;&#xD658; &#xBE44;&#xC728; GEF H1 &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xB860; 1) depolarization &#xD65C;&#xC131;&#xD654; GEF H1 &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; p115RhoGEF, 2) &#xC9E7;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA &#xC911;&#xC7AC; GEF H1 &#xC785;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70;&#xB85C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; 3) ERK &#xC800;&#xD574; GEF-h 1&#xC758; &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Na(+)-K(+) &#xD38C;&#xD504; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; ouabain ERK, GEF H1 &#xBC0F; depolarizing&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; Rho &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xD55C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; depolarization &#xC99D;&#xAC00; paracellular &#xCE68;&#xD22C;&#xC131;&#xC5D0; LLC PK1 &#xBC0F; MDCK &#xC140;&#xACFC; myosin blebbistatin &#xB610;&#xB294; &#xC9C0;&#xBC30;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC644;&#xD654;&#xB294; &#xC74C;&#xC218; (&#xBB34;&#xB2A5; &#xD55C; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;)&#xC774; &#xC0C8;&#xB85C; &#xD655;&#xC778;&#xB41C; &#xB41C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300;&#xD558;&#xC5EC; MLC. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, ERK/GEF-H1/&#xB178;/&#xD55C;&#xAD6D;/pMLC &#xD1B5;&#xB85C; &#xC911;&#xC559; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; electrogenic &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC804;&#xC1A1; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC81C;&#xC5B4; myosin &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558;&#xBA70; &#xAD00; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; paracellular &#xAD50;&#xD1B5; &#xADDC;&#xC81C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;&#xACE0; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;.

GEF H1 &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC2E0;&#xD638; &#xADDC;&#xC81C; &#xD0A4;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; paracellular &#xCE68;&#xD22C;&#xC131; &#xC99D;&#xAC00; depolarization &#xC720;&#xB3C4; &#xC911;&#xC7AC;.

Despolarizaci&#xF3;n de la membrana plasm&#xE1;tica se activa la Rho / Rho-kinasa (Rep&#xFA;blica de Corea) y la v&#xED;a por lo tanto mejora la cadena ligera de miosina (MLC), la fosforilaci&#xF3;n, que a su vez se cree que es un regulador clave de la permeabilidad intestinal. Sin embargo, los mecanismos de aguas arriba que la despolarizaci&#xF3;n de pareja a los cambios de activaci&#xF3;n de Rho y la permeabilidad son desconocidos. Aqu&#xED; nos muestran que tres diferentes est&#xED;mulos despolarizantes (K extracelular de alto (+) la concentraci&#xF3;n, el tetrafenilfosfonio cati&#xF3;n lipof&#xED;lico, o L-alanina, que es absorbido por electrog&#xE9;nico Na (+) cotransporte) toda la fosforilaci&#xF3;n provocan robusta de ERK en LLC-PK1 y Madin-Darby de ri&#xF1;&#xF3;n canino (MDCK). Es importante destacar que la inhibici&#xF3;n de ERK impidieron la activaci&#xF3;n inducida por despolarizaci&#xF3;n de Rho. La b&#xFA;squeda de los mecanismos subyacentes, se ha identificado el factor de GTP / PIB de cambio del FMAM-H1 como el factor de intercambio de ERK-regulado cr&#xED;tica responsable de la activaci&#xF3;n inducida por la despolarizaci&#xF3;n-Rho. Esta conclusi&#xF3;n se basa en nuestras conclusiones de que 1) la despolarizaci&#xF3;n activado FMAM-H1, pero no p115RhoGEF, 2) ARN corto de interferencia mediada por el FMAM-H1 silenciamiento eliminado la activaci&#xF3;n de la v&#xED;a Rho, y 3) la inhibici&#xF3;n de ERK impidieron la activaci&#xF3;n del FMAM-H1 . Adem&#xE1;s, se encontr&#xF3; que el Na (+)-K (+) inhibidores de la bomba ouaba&#xED;na tambi&#xE9;n caus&#xF3; ERK, FMAM-H1, y la activaci&#xF3;n de Rho, parcialmente debido a su efecto despolarizante. En cuanto a las consecuencias funcionales de esta v&#xED;a recientemente identificada, se encontr&#xF3; que la despolarizaci&#xF3;n de aumento de la permeabilidad paracelular en la LLC-PK1 y las c&#xE9;lulas MDCK y que este efecto se vio mitigado por la inhibici&#xF3;n de la miosina con blebbistatin o de una posici&#xF3;n dominante en el MLC negativo (fosforilaci&#xF3;n incompetente). Tomados en conjunto, se propone que la v&#xED;a ERK/GEF-H1/Rho/ROK/pMLC podr&#xED;a ser un mecanismo mediante el cual el centro de los procesos de transporte transmembrana electr&#xF3;genos controlar la fosforilaci&#xF3;n de la miosina y regular el transporte paracelular en el epitelio tubular.

Regulada por se&#xF1;al extracelular quinasa y el FMAM-H1 Mediate despolarizaci&#xF3;n inducida por la activaci&#xF3;n de Rho y de aumento de la permeabilidad paracelular

&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50; (TNF)-&alpha; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x91CD;&#x6784;&#x5728;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x672A;&#x5B8C;&#x5168;&#x63A2;&#x7D22;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5148;&#x524D;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E; RhoA GDP/GTP &#x4EA4;&#x6D41;&#x56E0;&#x7D20;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1/&#x6D88;&#x5931;&#x6A21;&#x94F8;&#x9020; ERK &#x4ECB;&#x5BFC;&#x523A;&#x6FC0;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x8BF1;&#x5BFC; RhoA &#x523A;&#x6FC0;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7684; ERK/&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x8BF1;&#x5BFC; ERK &#x548C; RhoA &#x523A;&#x6FC0;&#x9632;&#x6B62;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; (EGFR) &#x6291;&#x5236;&#x6216;&#x6C89;&#x9ED8;&#x4E86;&#x3002;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x4E5F;&#x589E;&#x5F3A;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7597;&#x6A21;&#x4EFF;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x5F15;&#x8D77;&#x70C8;&#x6027;&#x3001; ERK &#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x548C; RhoA &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC; RhoA &#x6FC0;&#x6D3B;&#x65E0;&#x6CD5;&#x7531;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x6C89;&#x9ED8;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E3B;&#x8981;&#x4E0B;&#x6E38;&#x6548;&#x5E94;&#x3002;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; ERK &#x548C; RhoA &#x523A;&#x6FC0;&#x4E86;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x91CA;&#x653E;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; convertase &#x9176; (TACE)&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#xFF0C;EGFR &#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FD8;&#x9700;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176; Src&#xFF0C;Src &#x6291;&#x5236;&#x963B;&#x6B62;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;/ERK/&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1/RhoA &#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6EB4;&#x8131;&#x6C27;&#x5C3F;&#x7519; &#xFF08;BrdU&#xFF09; &#x7EB3;&#x5165;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x7535;&#x6C14;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x886C;&#x5E95;&#x963B;&#x6297;&#x9065;&#x611F; &#xFF08;ECIS&#xFF09; &#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x523A;&#x6FC0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x8BF1;&#x5BFC; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x53C8;&#x4E0D;&#x56E0;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x6216; Src &#x6291;&#x5236;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x4EA7;&#x751F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x4E24;&#x79CD;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7EC6;&#x80DE; ERK/&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1/RhoA &#x9014;&#x5F84;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x901A;&#x8FC7; Src &#x548C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x809D;&#x52A8;&#x8109;&#x5316;&#x7597;&#x6813;&#x585E;&#x7684; EGFR &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x4EE5;&#x60C5;&#x4FA3;&#x708E;&#x75C7;&#x548C;&#x589E;&#x751F;&#x6027;&#x523A;&#x6FC0;&#x548C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x53EF;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x4F24;&#x53E3;&#x6108;&#x5408;&#x548C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&alpha; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x6FC0;&#x6D3B; ERK/&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1/RhoA &#x8DEF;&#x5F84;&#x5728;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Tumor necrosis factor (TNF)-Î± induces cytoskeleton and intercellular junction remodeling in tubular epithelial cells; the underlying mechanisms, however, are incompletely explored. We have previously shown that ERK-mediated stimulation of the RhoA GDP/GTP exchange factor GEF-H1/Lfc is critical for TNF-Î±-induced RhoA stimulation. Here we investigated the upstream mechanisms of ERK/GEF-H1 activation. Surprisingly, TNF-Î±-induced ERK and RhoA stimulation in tubular cells were prevented by epidermal growth factor receptor (EGFR) inhibition or silencing. TNF-Î± also enhanced phosphorylation of the EGFR. EGF treatment mimicked the effects of TNF-Î±, as it elicited potent, ERK-dependent GEF-H1 and RhoA activation. Moreover, EGF-induced RhoA activation was prevented by GEF-H1 silencing, indicating that GEF-H1 is a key downstream effector of the EGFR. The TNF-Î±-elicited EGFR, ERK, and RhoA stimulation were mediated by the TNF-Î± convertase enzyme (TACE) that can release EGFR ligands. Further, EGFR transactivation also required the tyrosine kinase Src, as Src inhibition prevented TNF-Î±-induced activation of the EGFR/ERK/GEF-H1/RhoA pathway. Importantly, a bromodeoxyuridine (BrdU) incorporation assay and electric cell substrate impedance-sensing (ECIS) measurements revealed that TNF-Î± stimulated cell growth in an EGFR-dependent manner. In contrast, TNF-Î±-induced NFÎºB activation was not prevented by EGFR or Src inhibition, suggesting that TNF-Î± exerts both EGFR-dependent and -independent effects. In summary, in the present study we show that the TNF-Î±-induced activation of the ERK/GEF-H1/RhoA pathway in tubular cells is mediated through Src- and TACE-dependent EGFR activation. Such a mechanism could couple inflammatory and proliferative stimuli and, thus, may play a key role in the regulation of wound healing and fibrogenesis.

The epidermal growth factor receptor mediates tumor necrosis factor-alpha-induced activation of the ERK/GEF-H1/RhoA pathway in tubular epithelium.

Facteur de n&#xE9;crose tumorale (TNF)-&#x3B1; induit cytosquelette et le remodelage de jonction intercellulaire dans les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales tubulaires, les m&#xE9;canismes sous-jacents, cependant, ne sont pas compl&#xE8;tement explor&#xE9;. Nous avons pr&#xE9;c&#xE9;demment montr&#xE9; que ERK induite par la stimulation de la RhoA GDP / GTP GEF-H1/Lfc facteur d&#x26;#39;&#xE9;change est essentiel pour le TNF-&#x3B1; induite par la stimulation RhoA. Ici, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; les m&#xE9;canismes en amont de ERK/GEF-H1 activation. &#xC9;tonnamment, le TNF-&#x3B1; induite par ERK et la stimulation RhoA dans les cellules tubulaires ont &#xE9;t&#xE9; emp&#xEA;ch&#xE9;s par des r&#xE9;cepteurs du facteur de croissance &#xE9;pidermique (EGFR) l&#x26;#39;inhibition ou le silence. TNF-&#x3B1; a &#xE9;galement am&#xE9;lior&#xE9; la phosphorylation de l&#x26;#39;EGFR. FEM traitement imitait les effets du TNF-&#x3B1;, comme il a suscit&#xE9; puissant, ERK-d&#xE9;pendante du FEM-H1 et activation de RhoA. En outre, l&#x26;#39;EGF-activation induite par RhoA a &#xE9;t&#xE9; emp&#xEA;ch&#xE9; par le FEM-H1 silence, indiquant que le FEM-H1 est un peu en aval cl&#xE9;s effectrices de l&#x26;#39;EGFR. Le TNF-&#x3B1;-EGFR a suscit&#xE9;, ERK, et la stimulation RhoA ont &#xE9;t&#xE9; m&#xE9;di&#xE9;e par le TNF-&#x3B1; enzyme convertase (TACE) qui peut &#xE9;mettre des ligands d&#x26;#39;EGFR. En outre, la transactivation EGFR &#xE9;galement requis l&#x26;#39;tyrosine kinase Src, comme l&#x26;#39;inhibition du TNF-Src emp&#xEA;ch&#xE9; &#x3B1; induite par activation de la voie EGFR/ERK/GEF-H1/RhoA. Il est important, un dosage bromod&#xE9;soxyuridine constitution (BrdU) et &#xE9;lectrique des cellules du substrat imp&#xE9;dance de d&#xE9;tection (ECIS) mesures ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que le TNF-&#x3B1; stimul&#xE9; la croissance des cellules d&#x26;#39;une mani&#xE8;re d&#xE9;pendante de l&#x26;#39;EGFR. En revanche, le TNF-&#x3B1; induite par l&#x26;#39;activation NFKB n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; emp&#xEA;ch&#xE9;e par l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;EGFR ou Src, sugg&#xE9;rant que le TNF-&#x3B1; exerce &#xE0; la fois l&#x26;#39;EGFR-d&#xE9;pendants et ind&#xE9;pendants des effets. En r&#xE9;sum&#xE9;, dans la pr&#xE9;sente &#xE9;tude, nous montrons que l&#x26;#39;activation du TNF-&#x3B1; induite par de la voie ERK/GEF-H1/RhoA dans les cellules tubulaires est m&#xE9;di&#xE9;e par Src et l&#x26;#39;activation du R-EGF TACE-d&#xE9;pendante. Un tel m&#xE9;canisme pourrait couple de stimuli inflammatoires et prolif&#xE9;ratifs et, par cons&#xE9;quent, peuvent jouer un r&#xF4;le cl&#xE9; dans la r&#xE9;gulation de la cicatrisation et la fibrogen&#xE8;se.

Les m&#xE9;diatise facteur de croissance &#xE9;pidermique r&#xE9;cepteurs tumoraux Factor-alpha induite par n&#xE9;crose activation de la voie ERK/GEF-H1/RhoA dans l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium tubulaire

Tumor-Nekrose-Faktor (TNF)-&alpha; induziert, Zytoskelett und interzellul&auml;re Junction Umbau tubul&auml;re Epithelzellen; die zugrunde liegenden Mechanismen sind jedoch nicht vollst&auml;ndig erforscht. Wir haben bereits gezeigt, dass ERK-vermittelte Stimulation des Faktors Austausch RhoA BIP/GTP GEF-H1/Lfc kritisch f&uuml;r TNF-&alpha; induziert RhoA Stimulation ist. Hier untersuchten wir die vorgelagerten Mechanismen der ERK/GEF-H1-Aktivierung. &Uuml;berraschenderweise wurden die TNF-&alpha; induziert ERK und RhoA Stimulation in tubul&auml;ren Zellen durch Hemmung der epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR) oder zum Schweigen verhindert. TNF-&alpha; erh&ouml;hte auch die Phosphorylierung des EGFR. EGF-Behandlung imitiert die Wirkung von TNF-&alpha;, wie es potente, ERK-abh&auml;ngige GEF-H1 und RhoA Aktivierung entlockt. Dar&uuml;ber hinaus wurde RhoA EGF-induzierte Aktivierung von GEF-H1 zum Schweigen, verhindert, dass GEF-H1 eine wichtige nachgeschaltete Effektor des EGFR ist. Die TNF-&alpha;-entlockt EGFR, ERK und RhoA Stimulation wurden vermittelt, durch die TNF-&alpha;-Konvertase-Enzym (TACE), das EGFR-Liganden freisetzen kann. Dar&uuml;ber hinaus ben&ouml;tigt EGFR Transactivation auch die Tyrosinkinase Src, wie Src Hemmung TNF-&alpha;-induzierte Aktivierung des EGFR/ERK/GEF-H1/RhoA Signalweges verhindert. Wichtig ist, eine Bromdesoxyuridin (BrdU)-Aufnahme-Test und elektrische Zelle Substrate Impedance sensing, dass (ECIS) Messungen ergeben, dass TNF-&alpha; Zellwachstum EGFR-abh&auml;ngigen Weise angeregt. TNF-&alpha;-induzierte NF&kappa;B-Aktivierung wurde hingegen nicht durch EGFR oder Src Hemmung, was darauf hindeutet, dass TNF-&alpha; EGFR-abh&auml;ngige sowohl -unabh&auml;ngige Effekte &uuml;bt verhindert. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen zeigen wir in der vorliegenden Studie, dass die TNF-&alpha;-induzierte Aktivierung des ERK/GEF-H1/RhoA Signalweges in tubul&auml;ren Zellen durch Src - und TACE-abh&auml;ngigen EGFR-Aktivierung vermittelt wird. Ein solcher Mechanismus k&ouml;nnte paar entz&uuml;ndliche und proliferative Reize und somit kann eine wichtige Rolle bei der Regulierung der Wundheilung und Fibrogenesis.

Der epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor vermittelt die Tumor-Nekrose-Faktor-Alpha-induzierte Aktivierung des ERK/GEF-H1/RhoA Signalweges in tubul&auml;re Epithel.

Fattore di necrosi tumorale (TNF)-&alpha; induce citoscheletro e giunzione intercellulare rimodellamento nelle cellule epiteliali tubulari; Tuttavia, i meccanismi sottostanti, in modo incompleto sono esplorati. Abbiamo precedentemente dimostrato che ERK-mediata stimolazione del fattore di scambio GDP/GTP RhoA GEF-H1/Lfc &egrave; critica per la stimolazione indotta da TNF-&alpha; RhoA. Qui abbiamo studiato i meccanismi a monte dell&#39;attivazione di ERK/GEF-H1. Sorprendentemente, indotta da TNF-&alpha; ERK e RhoA stimolazione nelle cellule tubulari sono stati evitati dal epidermal growth factor receptor (EGFR) inibizione o tacere. TNF-&alpha; rafforzata anche la fosforilazione dell&#39;EGFR. Trattamento di EGF imitato gli effetti del TNF-&alpha;, come esso ha suscitato attivazione GEF-H1 e RhoA potente, ERK-dipendente. Inoltre, attivazione indotta da EGF RhoA fu impedito da GEF-H1 silenziamento, indicando che GEF-H1 &egrave; una chiave effettore a valle dell&#39;EGFR. La stimolazione di EGFR, ERK e RhoA TNF-&alpha;-suscitato erano mediati dall&#39;enzima convertasi TNF-&alpha; (TACE) che pu&ograve; rilasciare ligandi EGFR. Ulteriormente, transactivation EGFR necessaria anche la tirosina chinasi Src, come inibizione Src ha impedito il pathway EGFR/ERK/GEF-H1/RhoA attivazione indotta da TNF-&alpha;. Importante, un dosaggio di incorporazione di bromodeoxyuridine (BrdU) ed elettrici delle cellule substrato impedance sensing misurazioni (ECI) ha rivelato che TNF-&alpha; ha stimolato la crescita cellulare in maniera EGFR-dipendente. Al contrario, attivazione NF&kappa;B indotta da TNF-&alpha; non &egrave; stato impedito di inibizione di EGFR o Src, suggerendo che il TNF-&alpha; esercita sia EGFR-dipendente e - effetti indipendenti. In sintesi, nel presente studio ci mostrano che l&#39;attivazione indotta da TNF-&alpha; del percorso ERK/GEF-H1/RhoA in cellule tubulari &egrave; mediata attraverso l&#39;attivazione di EGFR Src - e TACE-dipendente. Tale meccanismo potrebbe accoppiare stimoli infiammatori e proliferative e, cos&igrave;, pu&ograve; giocare un ruolo chiave nella regolazione della guarigione delle ferite e fibrogenesis.

Il recettore del fattore di crescita epidermico media attivazione fattore di necrosi tumorale-alfa-indotta della via ERK/GEF-H1/RhoA nell&#39;epitelio tubulare.

&#x816B;&#x760D;&#x58CA;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;TNF&#xFF09;-&#x3B1;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x63A5;&#x5408;&#x306E;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;RhoA&#x306E;GDP / GTP&#x4EA4;&#x63DB;&#x56E0;&#x5B50;GEF-H1/Lfc&#x306E;ERK&#x4ECB;&#x5728;&#x523A;&#x6FC0;&#x306F;TNF-&#x3B1;&#x8A98;&#x5C0E;RhoA&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;ERK/GEF-H1&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;TNF-&#x3B1;&#x8A98;&#x5C0E;ERK&#x304A;&#x3088;&#x3073;RhoA&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;EGFR&#xFF09;&#x963B;&#x5BB3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9632;&#x6B62;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; TNF-&#x3B1;&#x306B;&#x3082;EGFR&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x3001;ERK-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;GEF-H1&#x3068;RhoA&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;EGF&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x3001;TNF-&#x3B1;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;EGF&#x8A98;&#x767A;&#x6027;RhoA&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;GEF-H1&#x306F;&#x3001;EGFR&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x9375;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;GEF-H1&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; TNF-&#x3B1;&#x8A98;&#x767A;EGFR&#x3001;ERK&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;RhoA&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306F;&#x3001;EGFR&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x89E3;&#x653E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;TNF-&#x3B1;&#x8EE2;&#x63DB;&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;TACE&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; Src&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;EGFR/ERK/GEF-H1/RhoA&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;TNF-&#x3B1;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;EGFR&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;Src&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30D6;&#x30ED;&#x30E2;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#xFF08;BrdU&#xFF09;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x96FB;&#x6C60;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;ECIS&#xFF09;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;TNF-&#x3B1;&#x306F;&#x3001;EGFR&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;TNF-&#x3B1;&#x8A98;&#x5C0E;NF&#x3BA;B&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;TNF-&#x3B1;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;EGFR&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;EGFR&#x307E;&#x305F;&#x306F;Src&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x963B;&#x6B62;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ERK/GEF-H1/RhoA&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;TNF-&#x3B1;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304C;Src&#x3068;TACE&#x4F9D;&#x5B58;EGFR&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5897;&#x6B96;&#x6027;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x3068;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5275;&#x50B7;&#x6CBB;&#x7652;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ERK/GEF-H1/RhoA&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x58CA;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;-&#x3B1;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6D3B;&#x6027;

&#xC885;&#xC591; &#xAD34; &#xC0AC; &#xC778;&#xC790; (TNF)-&alpha; &#xC720;&#xB3C4; cytoskeleton &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xD569; &#xAD00; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xC7A5; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xD558; &#xAC8C; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; RhoA GDP/GTP exchange &#xC694;&#xC18C;&#xC758; GEF-H1/Lfc ERK &#xC911;&#xC7AC; &#xC790;&#xADF9;&#xC740; TNF-&alpha; &#xC720;&#xB3C4; RhoA &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; ERK/GEF-H1 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xAD00; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; TNF-&alpha; &#xC720;&#xB3C4; ERK &#xBC0F; RhoA &#xC790;&#xADF9;&#xC744; &#xD45C; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (EGFR) &#xC800;&#xD574; &#xB610;&#xB294; &#xC785;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4;. TNF-&alpha;&#xC5D0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xB41C; EGFR&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C;. EGF &#xCE58;&#xB8CC; &#xC720;&#xC0AC; TNF-&alpha;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C;, ERK &#xC885;&#xC18D; GEF H1 &#xBC0F; RhoA &#xD65C;&#xC131;&#xD654; elicited. &#xB610;&#xD55C;, EGF &#xC720;&#xB3C4; RhoA &#xD65C;&#xC131;&#xD654; GEF h1&#xB294; EGFR&#xC758; &#xD0A4; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; GEF H1 &#xC785;&#xC744; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD588;&#xB2E4;. TNF-&alpha; elicited EGFR, ERK, &#xBC0F; RhoA &#xC790;&#xADF9; EGFR ligands &#xD574;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; TNF-&alpha; convertase &#xD6A8;&#xC18C; (TACE) &#xC911;&#xC7AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, EGFR transactivation Src &#xC800;&#xD574; &#xBC29;&#xC9C0; EGFR/ERK/GEF-H1/RhoA &#xACBD;&#xB85C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; TNF-&alpha; &#xC720;&#xB3C4; tyrosine kinase Src&#xC744; &#xB610;&#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, bromodeoxyuridine (BrdU) &#xD569;&#xB3D9; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC0F; &#xC804;&#xAE30; &#xAE30;&#xD310; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC9C0; (ECIS) &#xCE21;&#xC815; &#xBC1D;&#xD600; EGFR&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; TNF-&alpha; &#xC138;&#xD3EC;. &#xBC18;&#xBA74;, TNF-&alpha; &#xC720;&#xB3C4; NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; EGFR &#xB610;&#xB294; Src &#xC800;&#xD574;, TNF-&alpha; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; EGFR &#xC885;&#xC18D;&#xC640;-&#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC81C;&#xC548; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E4;&#xD589;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xAD00; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; ERK/GEF-H1/RhoA &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; TNF-&alpha; &#xC720;&#xB3C4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Src &#xBC0F; TACE &#xC885;&#xC18D; EGFR &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC218; &#xBD80;&#xBD80;&#xB294; &#xC99D;&#xC2DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC790;&#xADF9; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC0C1;&#xCC98; &#xCE58;&#xC720; &#xBC0F; fibrogenesis&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB2F4;&#xB2F9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD45C; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAD00; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC5D0;&#xC11C; ERK/GEF-H1/RhoA &#xACBD;&#xB85C;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xAD34; &#xC0AC; &#xC694;&#xC778; &#xC54C;&#xD30C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El factor de necrosis tumoral (TNF)-&#x3B1; induce la remodelaci&#xF3;n del citoesqueleto y uniones intercelulares en las c&#xE9;lulas epiteliales tubulares, los mecanismos subyacentes, sin embargo, no est&#xE1;n totalmente exploradas. Hemos demostrado anteriormente que ERK mediada por la estimulaci&#xF3;n de la RhoA GDP / GTP GEF-H1/Lfc de cambio es decisivo para el TNF-&#x3B1; inducida por la estimulaci&#xF3;n RhoA. Aqu&#xED; hemos investigado los mecanismos de aguas arriba de ERK/GEF-H1 activaci&#xF3;n. Sorprendentemente, el TNF-&#x3B1; inducida por la estimulaci&#xF3;n de ERK y la Rho A en las c&#xE9;lulas tubulares fueron impedidos por el factor de crecimiento epid&#xE9;rmico receptor (EGFR) la inhibici&#xF3;n o el silenciamiento. TNF-&#x3B1; tambi&#xE9;n se ha mejorado la fosforilaci&#xF3;n del EGFR. EGF tratamiento imitaba los efectos de TNF-&#x3B1;, ya que provoc&#xF3; potente, ERK-dependiente FMAM-H1 y activaci&#xF3;n de RhoA. Por otra parte, EGF inducida por la activaci&#xF3;n de RhoA fue impedido por el FMAM-H1 silenciamiento, lo que indica que el FMAM-H1 es un efector corriente abajo clave del EGFR. El TNF-&#x3B1;-suscit&#xF3; EGFR, ERK, y la estimulaci&#xF3;n de RhoA se mediada por la enzima de TNF-&#x3B1; convertasa (TACE), que puede liberar ligandos del EGFR. Adem&#xE1;s, la transactivaci&#xF3;n del EGFR tambi&#xE9;n se requiere de la tirosina quinasa Src, como la inhibici&#xF3;n de TNF-Src impedido &#x3B1; inducida por la activaci&#xF3;n de la v&#xED;a EGFR/ERK/GEF-H1/RhoA. Es importante destacar que una bromodesoxiuridina (BrdU) ensayo de incorporaci&#xF3;n y el&#xE9;ctrico de c&#xE9;lulas sustrato detecci&#xF3;n de impedancia (ECIS) mediciones revelaron que el TNF-&#x3B1; estimul&#xF3; el crecimiento de c&#xE9;lulas en una forma dependiente de EGFR. Por el contrario, el TNF-&#x3B1; inducida por la activaci&#xF3;n de NFkB no fue impedida por la inhibici&#xF3;n de EGFR o Src, lo que sugiere que el TNF-&#x3B1; ejerce tanto EGFR-dependientes e independientes de efectos. En resumen, en el presente estudio muestran que la activaci&#xF3;n de TNF-&#x3B1; inducida por la v&#xED;a en las c&#xE9;lulas tubulares ERK/GEF-H1/RhoA est&#xE1; mediada por Src y la activaci&#xF3;n del EGFR TACE-dependiente. Este mecanismo podr&#xED;a pareja inflamatoria y est&#xED;mulos proliferativos y, por tanto, puede desempe&#xF1;ar un papel clave en la regulaci&#xF3;n de la cicatrizaci&#xF3;n de heridas y la fibrog&#xE9;nesis.

El crecimiento epid&#xE9;rmico media la del receptor del factor tumoral-alfa de necrosis inducida por la activaci&#xF3;n de la v&#xED;a ERK/GEF-H1/RhoA en el epitelio tubular

&#x76D1;&#x7BA1;&#x548C;&#x7EF4;&#x62A4;&#x5728;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x80BE;&#x529F;&#x80FD;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x7EC4;&#x5408;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x6291;&#x5236;&#x836F;&#x7269;&#x73AF;&#x5B62;&#x7D20; (CsA) &#x548C;&#x96F7;&#x5E15;&#x9709;&#x7D20; (SRL) &#x65BD;&#x52A0;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x6291;&#x5236;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x80BE;&#x6BD2;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5148;&#x524D;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E; CsA &#x548C; SRL &#x5728;&#x4E00;&#x5B9A;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x901A;&#x8FC7; MEK/ERK1/2 &#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x63D0;&#x5347; &mdash; &#x8DE8;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7535;&#x963B; (&#x4E4B;&#x4E09;)&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86; RhoA &#x9014;&#x5F84;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E5F;&#x8C03;&#x89E3; CsA &#x548C; SRL &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; CsA &#x4E0E; CsA/SRL &#x7EC4;&#x5408;&#x6FC0;&#x6D3B; RhoA&#x3001; &#x8BF1;&#x5BFC; cofilin &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x548C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5E94;&#x529B;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x4EE3;&#x3002;Rho &#x6FC0;&#x9176; (&#x97E9;&#x56FD;) &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;Y27632&#xFF0C;&#x963B;&#x6B62; CsA &#x53CA; CsA SRL &#x8BF1;&#x5BFC; cofilin &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x5851;&#x3001; &#x51CF;&#x5C11;&#x4E4B;&#x4E09;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x9632;&#x6B62;&#x836F;&#x7269;&#x6240;&#x81F4;&#x7684;&#x514B;&#x52B3;&#x4E01; 7 &#x6C34;&#x5E73;&#x4E0A;&#x5347;&#x3002;CsA &#x4E0E; CsA/SRL &#x6CBB;&#x7597;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1/&#x6D88;&#x5931;&#x6A21;&#x94F8;&#x9020;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x88AB;&#x63D0;&#x5347;&#x7684;&#x4EA4;&#x6362;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x6C89;&#x9ED8; &asymp;50%&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x6D3B;&#x5316; RhoA &#x548C;&#x5148;&#x5929;&#x51CF;&#x5C11;&#x8BF1;&#x53D1; CsA &#x53CA; CsA/SRL cofilin &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x548C;&#x5E94;&#x529B;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x4E0B;&#x8C03;&#x5E76;&#x672A;&#x963B;&#x6B62;&#x4E4B;&#x4E09;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64; Rho/Rho &#x6FC0;&#x9176;&#x901A;&#x8DEF;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8C03;&#x89E3; CsA &#x53CA; CsA SRL &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x91CD;&#x6392;&#x548C;&#x4E4B;&#x4E09;&#x901A;&#x8FC7;&#x514B;&#x52B3;&#x4E01;-7 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x4F46;&#x662F;&#x6307;&#x5411;&#x5FAE;&#x5206;&#x8C03;&#x8282;&#x7684; Rho &#x6FC0;&#x6D3B;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4E2D;&#x592E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x91CD;&#x6784;&#xFF0C;&#x5373;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1 &#x7684;&#x5168;&#x7403;&#x73AF;&#x5883;&#x57FA;&#x91D1;-H1-&#x4F9D;&#x8D56;&#x548C;&#x7F1D;&#x9699;&#x6E17;&#x900F;&#x3002;

RhoA &#x548C; Rho &#x6FC0;&#x9176;&#x8C03;&#x89E3;&#x73AF;&#x5B62;&#x7D20; A &#x548C;&#x6536;&#x7D27;&#x5728;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x897F;&#x7F57;&#x83AB;&#x53F8;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x5C4F;&#x969C;&#x3002;

The regulation and maintenance of the paracellular transport in renal tubular epithelia is vital for kidney functions. Combination of the immunosuppressant drugs cyclosporine A (CsA) and sirolimus (SRL) exerts powerful immunosuppression, but also causes nephrotoxicity. We have previously shown that CsA and SRL elevate transepithelial resistance (TER) in kidney tubular cells partly through MEK/ERK1/2. In this work we examined the hypothesis that the RhoA pathway may also be mediating effects of CsA and SRL. We show that CsA and the CsA/SRL combination activated RhoA, induced cofilin phosphorylation and promoted stress fiber generation. The Rho kinase (ROK) inhibitor, Y27632, prevented CsA and CsA/SRL-induced cofilin phosphorylation and actin remodelling, reduced the TER increase and prevented the rise in claudin-7 levels caused by the drugs. Expression of the exchange factor GEF-H1/lfc was elevated in cells treated with CsA and CsA/SRL. GEF-H1 silencing inhibited RhoA activation by â‰ˆ50%, and potently reduced cofilin phosphorylation and stress fiber formation induced by CsA and CsA/SRL. However, GEF-H1 downregulation did not prevent the TER change. Thus the Rho/Rho kinase pathway was involved in mediating CsA and CsA/SRL-induced cytoskeleton rearrangement and TER changes via claudin-7 expression. Our data however point to differential regulation of Rho activation involved in central cytoskeleton remodelling, that is GEF-H1-dependent and junctional permeability that does not require GEF-H1.

Article	Year
T9 glioma cells expressing membrane-macrophage colony stimulating factor produce CD4+ T cell-associated protective immunity against T9 intracranial gliomas and systemic immunity against diff... Cellular immunology\| PubMed ID: 12142031	2002
Living T9 glioma cells expressing membrane macrophage colony-stimulating factor produce immediate tumor destruction by polymorphonuclear leukocytes and macrophages via a "paraptosis"-induced... Blood\| PubMed ID: 12149220	2002
Interaction between the polyol pathway and non-enzymatic glycation on mesangial cell gene expression. Nephron. Experimental nephrology\| PubMed ID: 15528949	2004
Interaction between the polyol pathway and non-enzymatic glycation on aortic smooth muscle cell migration and monocyte adhesion. Life sciences\| PubMed ID: 15530506	2004
Macrophage colony-stimulating factor expression in retrovirally transduced cells is dependent upon both the adherence status of the target cells and its 5' flanking untranslated region. Biochemical and biophysical research communications\| PubMed ID: 15823581	2005
Protein kinase A-regulated assembly of a MEF2{middle dot}HDAC4 repressor complex controls c-Jun expression in vascular smooth muscle cells. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 19389706	2009
Cytotoxic T cell immunity against the non-immunogenic, murine, hepatocellular carcinoma Hepa1-6 is directed towards the novel alternative form of macrophage colony stimulating factor. Cellular immunology\| PubMed ID: 19615673	2009
Extracellular signal-regulated kinase and GEF-H1 mediate depolarization-induced Rho activation and paracellular permeability increase. American journal of physiology. Cell physiology\| PubMed ID: 20237148	2010
The epidermal growth factor receptor mediates tumor necrosis factor-alpha-induced activation of the ERK/GEF-H1/RhoA pathway in tubular epithelium. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 21212278	2011
RhoA and Rho kinase mediate cyclosporine A and sirolimus-induced barrier tightening in renal proximal tubular cells. The international journal of biochemistry & cell biology\| PubMed ID: 22062948	2012

Qinghong Dan

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