clinical-testing-spinal-cord-removal-mouse-model-for-amyotrophic

Clinical Testing and Spinal Cord Removal in a Mouse Model for Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS)

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disorder resulting in progressive degeneration of motoneurons. Peak of onset is around 60 ...

University Medicine Göttingen

Des r&eacute;actions allergiques &agrave; l&#39;arachide sont un grave probl&egrave;me de sant&eacute; en raison de leur pr&eacute;valence &eacute;lev&eacute;e, associ&eacute;e &agrave; la chronicit&eacute; et de gravit&eacute; potentiels. Un des trois principaux allerg&egrave;nes en arachide, Ara h 2, est un membre de la famille conglutin de prot&eacute;ines. Ara h 2 montre la forte homologie &agrave; des prot&eacute;ines de la famille de l&#39;albumine 2 s. Actuellement, seulement tr&egrave;s peu de donn&eacute;es structurales des prot&eacute;ines allerg&egrave;nes de cette famille diff&egrave;re. Pour une compr&eacute;hension approfondie des m&eacute;canismes mol&eacute;culaires des allergies induite par les aliments et pour le d&eacute;veloppement des connaissances des strat&eacute;gies th&eacute;rapeutiques de la haute r&eacute;solution en trois dimensions la structure des prot&eacute;ines allerg&egrave;nes est essentiel. Nous signaler une m&eacute;thode pour la pr&eacute;paration efficace &agrave; grande &eacute;chelle de correctement pli&eacute; Ara h 2 pour les &eacute;tudes structurales et d&eacute;clarer des donn&eacute;es spectroscopiques de CD. Contrairement &agrave; d&#39;autres allerg&egrave;nes 2 s albumines, Ara h 2 existe sous forme d&#39;une seule constante cha&icirc;ne polypeptidique dans les graines d&#39;arachide, et donc l&#39;expression h&eacute;t&eacute;rologue chez Escherichia coli a &eacute;t&eacute; possible. Ara h 2 a &eacute;t&eacute; exprim&eacute;e d&#39;une prot&eacute;ine de fusion Trx-His-tag dans e. coli Origami (DE3), une souche d&#39;Escherichia coli modifi&eacute; avec des oxydants cytoplasme qui permet la formation de ponts disulfures. Il pouvait &ecirc;tre montr&eacute; que recombinante Ara h 2, donc surexprim&eacute; et purifi&eacute; l&#39;allerg&egrave;ne isol&eacute; de cacahu&egrave;tes sont identiques, si l&#39;on en juge d&#39;immunoblotting, HPLC analytique et les spectres de dichro&iuml;sme circulaire.

Expression dans Escherichia coli, purification et caract&eacute;risation de correctement pli&eacute; principal allerg&egrave;ne d&#39;arachide Ara h 2 &agrave; rendement &eacute;lev&eacute;.

High-Yield-Expression in Escherichia coli, Reinigung und Charakterisierung von korrekt gefalteten gro&#xDF;en Erdnussallergen Ara h 2.

&#x5BF9;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x56E0;&#x5176;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x6027;&#x548C;&#x6162;&#x6027;&#x5173;&#x8054;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E25;&#x91CD;&#x7684;&#x5065;&#x5EB7;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x82B1;&#x751F;&#xFF0C;Ara h 2&#xFF0C;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x79CD;&#x5B50;&#x8D2E;&#x85CF;&#x86CB;&#x767D;&#x7684; conglutin &#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;Ara h 2 &#x663E;&#x793A;&#x5230; 2S &#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x9AD8;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x975E;&#x5E38;&#x53D8;&#x5E94;&#x539F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x5B58;&#x5728;&#x8FD9;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#x4ECE;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7ED3;&#x6784;&#x5316;&#x6570;&#x636E;&#x3002;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x4E86;&#x89E3;&#x7684;&#x98DF;&#x7269;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x7B56;&#x7565;&#x77E5;&#x8BC6;&#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x4E09;&#x7EF4;&#x53D1;&#x5C55;&#x53D8;&#x5E94;&#x539F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x6B63;&#x786E;&#x6298;&#x53E0; Ara h 2 &#x7ED3;&#x6784;&#x7814;&#x7A76;&#x9AD8;&#x6548;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x5236;&#x5907;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x62A5;&#x544A; CD &#x5149;&#x8C31;&#x6570;&#x636E;&#x3002;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x8FC7;&#x654F; 2S &#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x82B1;&#x751F;&#x79CD;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5355;&#x4E2A;&#x8FDE;&#x7EED;&#x591A;&#x80BD;&#x94FE; Ara h 2 &#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684;&#x5F02;&#x6E90;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x53EF;&#x80FD;&#x3002;Ara h 2 &#x88AB;&#x8868;&#x793A;&#x4E3A; Trx &#x4ED6;&#x6807;&#x8BB0;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x6298;&#x7EB8; &#xFF08;DE3&#xFF09; &#x4FEE;&#x6539;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E0E;&#x6C27;&#x5316;&#x5141;&#x8BB8;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x6865;&#x6881;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x3002;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5C06;&#x6240;&#x793A;&#xFF0C;&#x91CD;&#x7EC4; Ara h 2&#x3001; &#x56E0;&#x6B64;&#x5916;&#x57DF;&#x548C;&#x51C0;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5206;&#x79BB;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x662F;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5982;&#x4ECE;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x3001; &#x5206;&#x6790;&#x6027;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x548C;&#x5706;&#x4E8C;&#x8272;&#x5149;&#x8C31;&#x6765;&#x5224;&#x65AD;&#x3002;

&#x9AD8;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x3001; &#x7EAF;&#x5316;&#x53CA;&#x8868;&#x5F81;&#x7684;&#x6B63;&#x786E;&#x6298;&#x53E0;&#x4E3B;&#x8981;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F; Ara h 2 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Allergic reactions to peanuts are a serious health problem because of their high prevalence, associated with potential severity, and chronicity. One of the three major allergens in peanut, Ara h 2, is a member of the conglutin family of seed storage proteins. Ara h 2 shows high sequence homology to proteins of the 2S albumin family. Presently, only very few structural data from allergenic proteins of this family exist. For a detailed understanding of the molecular mechanisms of food-induced allergies and for the development of therapeutic strategies knowledge of the high-resolution three-dimensional structure of allergenic proteins is essential. We report a method for the efficient large-scale preparation of properly folded Ara h 2 for structural studies and report CD-spectroscopic data. In contrast to other allergenic 2S albumins, Ara h 2 exists as a single continuous polypeptide chain in peanut seeds, and thus heterologous expression in Escherichia coli was possible. Ara h 2 was expressed as Trx-His-tag fusion protein in E. coli Origami (DE3), a modified E. coli strain with oxidizing cytoplasm which allows the formation of disulfide bridges. It could be shown that recombinant Ara h 2, thus overexpressed and purified, and the allergen isolated from peanuts are identical as judged from immunoblotting, analytical HPLC, and circular dichroism spectra.

High-yield expression in Escherichia coli, purification, and characterization of properly folded major peanut allergen Ara h 2.

Reazioni allergiche alle arachidi sono un grave problema di salute a causa della loro elevata prevalenza, associata con la potenziale gravit&agrave; e cronicit&agrave;. Uno dei tre principali allergeni in arachidi, Ara h 2, &egrave; un membro della famiglia conglutin di proteine di deposito del seme. Ara h 2 Mostra omologia di sequenza alto alle proteine della famiglia albumina 2S. Attualmente, soltanto molto pochi dati strutturali da proteine allergeniche di questa famiglia esiste. Per una dettagliata comprensione dei meccanismi molecolari delle allergie alimentari-indotta e per lo sviluppo della conoscenza di strategie terapeutiche dell&#39;alta risoluzione tridimensionale struttura delle proteine allergeniche &egrave; essenziale. Noi segnala un metodo per la preparazione su larga scala efficiente correttamente piegato Ara h 2 per gli studi strutturali e segnalare i dati CD-spettroscopiche. A differenza di altre allergeni 2S albumine, Ara h 2 esiste come una catena di singolo polipeptide continuo nei semi di arachide, e cos&igrave; era possibile espressione eterologa in Escherichia coli. Ara h 2 &egrave; stato espresso come proteina di fusione Trx-His-tag in e. coli Origami (DE3), un ceppo di Escherichia coli modificato con ossidanti citoplasma che permette la formazione di ponti disolfuro. Potrebbe essere indicato quello ricombinante Ara h 2, cos&igrave; overexpressed e purificato, e l&#39;allergene isolato da arachidi sono identici come giudicato da immunoblotting, HPLC analitica e spettri di Dicroismo circolare.

Espressione di alto-rendimento in Escherichia coli, purificazione e caratterizzazione di correttamente piegato principali allergeni arachide Ara h 2.

&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x306B;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x5065;&#x5EB7;&#x554F;&#x984C;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x9AD8;&#x6709;&#x75C5;&#x7387;&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6DF1;&#x523B;&#x5EA6;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6162;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x3001;Ara h 2 &#x306E; 3 &#x3064;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x7A2E;&#x5B50;&#x8CAF;&#x8535;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E; conglutin &#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4E00;&#x54E1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Ara h 2 2 s &#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x3054;&#x304F;&#x5C11;&#x6570;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3053;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x3002;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x98DF;&#x7269;&#x8A98;&#x767A;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x7406;&#x89E3;&#x3068;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x6226;&#x7565;&#x77E5;&#x8B58;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6B63;&#x3057;&#x304F;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307E;&#x308C;&#x305F; Ara h 2 &#x69CB;&#x9020;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x8ABF;&#x88FD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;CD &#x5206;&#x5149;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ED6;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3; 2S &#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684; Ara h 2 &#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x7A2E;&#x5B50;&#x3067;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x3046;&#x3057;&#x3066;&#x7570;&#x7A2E;&#x767A;&#x73FE;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3067;&#x306F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;Ara h 2 Trx His &#x30BF;&#x30B0;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30A8;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EA;&#x30D2;&#x30A2;&#x5C5E;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x6298;&#x308A;&#x7D19; (DE3) &#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306F;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x9178;&#x5316;&#x5264;&#x5909;&#x66F4;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x83CC;&#x682A;&#x3067;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x305D;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; Ara h 2 &#x8868;&#x793A;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x306F;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x304C;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x6CD5;, hplc &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x5186;&#x4E8C;&#x8272;&#x6027;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x5224;&#x65AD;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x3058;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AD8;&#x53CE;&#x91CF;&#x767A;&#x73FE;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6B63;&#x3057;&#x304F;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x6297;&#x539F; Ara h 2&#x3002;

&#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4; &#xBC0F; chronicity&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xB960; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xAC74;&#xAC15; &#xBB38;&#xC81C;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB545;&#xCF69;, Ara h 2&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138; &#xAC1C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xC99D;&#xC0C1; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xAC00; &#xC885;&#xC790; &#xC800;&#xC7A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; conglutin &#xC81C;&#xD488;&#xAD70;. Ara h 2 2S &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; homology&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;, &#xB2E8;&#xC9C0; &#xB9E4;&#xC6B0; allergenic &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758;&#xC774; &#xAC00;&#xC871; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xB370;&#xC774;&#xD130;. &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xC2DD;&#xD488; &#xC720;&#xBC1C;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xC138;&#xD55C; &#xC774;&#xD574; &#xBC0F; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC804;&#xB7B5; &#xC9C0;&#xC2DD; &#xC788;&#xB294; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xAC1C;&#xBC1C; allergenic &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC811;&#xD78C;&#xB41C; Ara h 2 &#xAD6C;&#xC870; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC900;&#xBE44; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; CD &#xBD84; &#xAD11; &#xB370;&#xC774;&#xD130;. &#xB2E4;&#xB978; &#xADF9;&#xC131; 2S albumins &#xB2EC;&#xB9AC; Ara h 2 &#xB545;&#xCF69; &#xC528;&#xC557;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC5F0;&#xC18D; polypeptide &#xC0AC;&#xC2AC;&#xC73C;&#xB85C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC2DD;&#xC774; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD588;&#xB2E4;. Ara h 2&#xC740; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xC885;&#xC774; &#xC811;&#xAE30; (DE3), &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xB2E4;&#xB9AC;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC744; &#xC0B0;&#xD654;&#xC640; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; Trx&#xC758; &#xD0DC;&#xADF8; &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB420; &#xC218; &#xADF8; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; Ara h 2&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; overexpressed&#xC640; &#xC815;&#xD654;, &#xACE0; &#xC808;&#xC5F0; &#xB545;&#xCF69;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30;&#xB294; immunoblotting, &#xBD84;&#xC11D; HPLC &#xBC0F; &#xC6D0;&#xD615; &#x9EC4; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD310;&#xB2E8;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC77C;.

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;, &#xC815;&#xD654;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC811;&#xD78C;&#xB41C; &#xC8FC;&#xC694; &#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; Ara h 2&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC728; &#xC2DD;.

Reacciones al&eacute;rgicas a los cacahuetes son un serio problema de salud debido a su alta prevalencia, asociado con potencial gravedad y cronicidad. Uno de los tres principales al&eacute;rgenos en man&iacute;, Ara h 2, es un miembro de la familia de conglutin de las prote&iacute;nas de almacenamiento de semillas. Ara h 2 muestra homolog&iacute;a de secuencia alta a las prote&iacute;nas de la familia de alb&uacute;mina 2S. Actualmente, s&oacute;lo muy pocos datos estructurales de prote&iacute;nas alerg&eacute;nicas de esta familia existen. Para una comprensi&oacute;n detallada de los mecanismos moleculares de alergias inducidas por alimentos y para el desarrollo del conocimiento de estrategias terap&eacute;uticas de alta resoluci&oacute;n tridimensional estructura de prote&iacute;nas alerg&eacute;nicas es esencial. Divulgamos un m&eacute;todo para la preparaci&oacute;n a gran escala eficiente de correctamente doblada Ara h 2 para estudios estructurales y reportar los datos espectrosc&oacute;picos de CD. En contraste con otros alerg&eacute;nicos 2S alb&uacute;minas, Ara h 2 existe como una cadena polipept&iacute;dica &uacute;nica continua en semillas de man&iacute;, y as&iacute; fue posible la expresi&oacute;n heter&oacute;loga en Escherichia coli. Ara h 2 se expres&oacute; como la prote&iacute;na de fusi&oacute;n de Trx-su-etiqueta en e. coli Origami (DE3), una cepa de Escherichia coli modificada con oxidantes citoplasma que permite la formaci&oacute;n de puentes disulfuro. Podr&iacute;a ser demostrado que recombinante Ara h 2, as&iacute; sobreexpresa y purificado, y el alergeno aislado de man&iacute; son id&eacute;nticos como juzgado de immunoblotting, HPLC anal&iacute;tica y espectros de dicro&iacute;smo circular.

Expresi&oacute;n de alto rendimiento en Escherichia coli, purificaci&oacute;n y caracterizaci&oacute;n de al&eacute;rgeno man&iacute; principal correctamente doblada Ara h 2.

&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4F8B;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5206;&#x6790;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x80FD;&#x591F;&#x786E;&#x5B9A;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; E &#xFF08;IgE&#xFF09; &#x4F7F;&#x7528;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F; Ara h 2-&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x5728;&#x52A0;&#x5DE5;&#x7684;&#x98DF;&#x54C1;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x53D1;&#x8FBE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5408;&#x6210; Ara h 2 IgE &#x53CD;&#x5E94;&#x7EBF;&#x6027;&#x8868; 3 (&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x804C;&#x4F4D; 27-36) &#x591A;&#x6297;&#x539F;&#x80BD; &#xFF08;&#x56FE;&#xFF09;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86; monospecific &#x4EE5;&#x83B7;&#x53D6;&#x672A;&#x6765;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x79EF;&#x6781;&#x63A7;&#x5236;&#x6B64;&#x6297;&#x539F;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x89E3;&#x51B3;&#x8BCA;&#x65AD;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D; 3&#xFF0C;&#x53E6;&#x4E00;&#x5F20;&#x5730;&#x56FE;&#xFF0C;&#x6709; 7770 Da&#xFF0C;&#x5206;&#x5B50;&#x8D28;&#x91CF;&#xFF0C;&#x51C0;&#x5316;&#xFF0C;&#x548C;&#x7531;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;-&#x8D28;&#x8C31; (&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x79BB;&#x5B50;&#x5316;) &#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E86;&#x5176;&#x7ED3;&#x6784; &#xFF08;LC-MS(ESI))&#xFF0C;&#x57FA;&#x8D28;&#x8F85;&#x52A9;&#x6FC0;&#x5149;&#x89E3;&#x5438;&#x7535;&#x79BB;-&#x7684;/&#x65F6;&#x95F4;&#x98DE;&#x884C; (&#x9A6C;&#x5C14;&#x8FEA;-TOF) &#x548C; Edman &#x6D4B;&#x5E8F;&#x3002;&#x5730;&#x56FE;&#x7136;&#x540E;&#x7528;&#x6765;&#x63D0;&#x9AD8;&#x5154;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F50;&#x5242; Titermax &#x9AD8;&#x6EF4;&#x5EA6;&#x6297;&#x4F53;&#x548C;&#x7279;&#x70B9;&#x4ECE;&#x8FC7;&#x654F;&#x75C5;&#x4EBA;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230; Ara h 2 &#x7684; IgE &#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x3002;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x5B8C;&#x5168;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E2D;&#x6EF4;&#x5EA6; 10(7) &#x7C97;&#x82B1;&#x751F;&#x6C41;&#x7684; Ara h 2 &#x548C;&#x8868; 3 &#x6240;&#x793A;&#x7684;&#x5E93;&#x7684;&#x56FA;&#x4F53;&#x76F8;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5408;&#x6210; 15-mer &#x80BD;&#x6DB5;&#x76D6;&#x6574;&#x4E2A;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684; Ara h 2 &#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x7684;&#x4F4D;&#x4E0E;&#x5177;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x9AD8;&#x7684;&#x662F;&#x8FD9;&#x79CD; IgE &#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x610F;&#x4E49;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6784;&#x6210;&#x7279;&#x5B9A;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5728;&#x98DF;&#x54C1;&#x5DE5;&#x4E1A;&#x4E2D;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#x63A7;&#x5236;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x6216;&#x5728;&#x4F8B;&#x81F4;&#x547D;&#x53CD;&#x5E94;&#x672C;&#x6765;&#x5BF9;&#x6CD5;&#x533B;&#x7528;&#x9014;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x672A;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x82B1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;

&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7279;&#x5B9A;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F; Ara h 2 &#x4F7F;&#x7528;&#x9AD8;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x591A;&#x6297;&#x539F;&#x80BD;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

Using the major peanut allergen Ara h 2 as an example, an analytical tool enabling the determination of immunoglobulin E (IgE)-epitopes in processed food allergens was developed. We synthesized a multiple-antigenic peptide (MAP) of the IgE-reactive linear epitope 3 (amino acid positions 27-36) of Ara h 2 and raised a monospecific antiserum against this epitope to obtain a positive control for future epitope resolved diagnostics. First, a MAP of epitope 3, having a molecular mass of 7770 Da, was synthesized, purified, and its structure confirmed by liquid chromatography-mass spectrometry (electrospray ionization) (LC-MS(ESI)), matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight (MALDI-TOF), and Edman sequencing. The MAP was then used to raise high titer antibodies in rabbits using the adjuvant Titermax and to characterize the specificity of IgE from allergenic patients sensitized to Ara h 2. The antiserum exclusively detects Ara h 2 in crude peanut extract with a titer of 10(7) by Western blot and reacts specifically with epitope 3 shown by epitope mapping for a library of solid-phase-bound synthetic 15-mer peptides covering the entire sequence of Ara h 2. Such IgE-reactive epitopes are of high analytical relevance as they could constitute the basis for epitope-specific detection systems for use in quality control in the food industry or for forensic purposes in cases of fatal reactions to otherwise undetected peanut proteins.

Development of an epitope-specific analytical tool for the major peanut allergen Ara h 2 using a high-density multiple-antigenic peptide strategy.

En utilisant le principal allerg&egrave;ne d&#39;arachide Ara h 2 par exemple, un outil d&#39;analyse permettant la d&eacute;termination de l&#39;immunoglobuline E (IgE)-&eacute;pitopes allerg&egrave;nes alimentaires transform&eacute;s a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute;. Nous avons synth&eacute;tis&eacute; un peptide antig&eacute;nique multiple (carte) de l&#39;&eacute;pitope lin&eacute;aire IgE-r&eacute;actif 3 (acide amin&eacute; postes 27-36) de Ara h 2 et d&eacute;clench&eacute; une monosp&eacute;cifiques antis&eacute;rum contre cet &eacute;pitope pour obtenir un contr&ocirc;le positif pour les futur &eacute;pitope r&eacute;solu de diagnostic. Tout d&#39;abord, une carte de l&#39;&eacute;pitope 3, ayant une masse mol&eacute;culaire de 7770 Da, a &eacute;t&eacute; synth&eacute;tis&eacute;e, purifi&eacute;, et sa structure confirm&eacute;e par liquid chromatography-mass spectrometry (ionisation par &eacute;lectron&eacute;bulisation) (LC-MS(ESI)), matrice assisted laser desorption/ionisation-temps de vol (MALDI-TOF) et le s&eacute;quen&ccedil;age d&#39;Edman. La carte a &eacute;t&eacute; ensuite utilis&eacute;e pour soulever les anticorps titre &eacute;lev&eacute; chez les lapins &agrave; l&#39;aide de l&#39;adjuvant TiterMax de Freund et caract&eacute;riser la sp&eacute;cificit&eacute; d&#39;IgE allerg&egrave;ne patients sensibilis&eacute;s &agrave; l&#39;Ara h 2. L&#39;antis&eacute;rum exclusivement d&eacute;tecte l&#39;Ara h 2 dans un extrait d&#39;arachide brut avec un titre de 10 (7) par Western blot et r&eacute;agit sp&eacute;cifiquement avec l&#39;&eacute;pitope 3 indiqu&eacute;s par la cartographie des &eacute;pitopes pour une biblioth&egrave;que de peptides synth&eacute;tiques de phase solide-li&eacute; aux 15-mer couvrant la s&eacute;quence enti&egrave;re de l&#39;Ara h 2. Ces &eacute;pitopes IgE-r&eacute;actives sont de haute pertinence analytique qu&#39;ils pourraient constituer la base pour les syst&egrave;mes de d&eacute;tection de l&#39;&eacute;pitope sp&eacute;cifique pour une utilisation dans le contr&ocirc;le de la qualit&eacute; dans l&#39;industrie alimentaire ou &agrave; des fins m&eacute;dico-l&eacute;gales dans les cas de r&eacute;actions fatales pour autrement inaper&ccedil;us des prot&eacute;ines d&#39;arachide.

D&eacute;veloppement d&#39;un outil analytique de l&#39;&eacute;pitope sp&eacute;cifique pour le principal allerg&egrave;ne d&#39;arachide Ara h 2 &agrave; l&#39;aide d&#39;une strat&eacute;gie de haute densit&eacute; de peptide antig&eacute;nique multiple.

Entwicklung eines Epitop-spezifischen analytisches Werkzeug f&#xFC;r die gro&#xDF;e Erdnuss Allergen Ara h 2 unter Verwendung eines mit hoher Dichte mehrere antigene Peptid-Strategie.

Utilizzando i principali allergeni arachide Ara h 2 come esempio, uno strumento analitico che consente la determinazione delle immunoglobuline E (IgE)-epitopi in allergeni alimentari trasformati &egrave; stato sviluppato. Abbiamo sintetizzato un peptide antigenico multiplo (mappa) dell&#39;epitopo lineare IgE-reattiva 3 (amminoacido posizioni 27-36) di Ara h 2 e generato un monocolturali antisiero contro questo epitopo per ottenere un controllo positivo per futuro epitopo risolto diagnostica. In primo luogo, in una mappa di epitopo 3, avendo una massa molecolare di 7770 Da, &egrave; stata sintetizzata, purificato, e la sua struttura confermata dal liquida cromatografia spettrometria di massa (ionizzazione elettrospray) (LC-MS(ESI)), matrix assisted laser desorption/ionizzazione-tempo di volo (MALDI-TOF) e le sequenze di Edman. La mappa quindi &egrave; stata utilizzata per generare gli anticorpi alto titolo in conigli con l&#39;adiuvante Titermax e di caratterizzare la specificit&agrave; delle IgE allergeniche nei pazienti sensibilizzati ad Ara h 2. L&#39;antisiero esclusivamente rileva Ara h 2 in estratto grezzo di arachide con un titolo di 10 di Western blot e reagisce specificamente con l&#39;epitopo 3 mostrato da epitope mapping per una libreria di peptidi sintetici solidi-fase-bound 15-mer che coprono l&#39;intera sequenza di Ara h 2. Tali epitopi reattivi IgE sono di alta rilevanza analitica come essi potrebbe costituire la base per sistemi di rilevazione di epitopo specifico per l&#39;utilizzo nel controllo della qualit&agrave; nell&#39;industria alimentare o per scopi forensi nei casi di reazioni fatali al contrario inosservato arachidi proteine.

Sviluppo di uno strumento analitico epitopo specifico per l&#39;allergene maggiore arachide Ara h 2 usando una strategia del peptide antigenico multiplo ad alta densit&agrave;.

&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x6297;&#x539F; Ara h 2 &#x4F8B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; E (ige &#x6297;&#x4F53;) &#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;-&#x52A0;&#x5DE5;&#x98DF;&#x54C1;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E; Ara h 2 &#x306E; IgE &#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x7DDA;&#x5F62;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7; 3 &#xFF08;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x30DD;&#x30B8;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; 27 36&#xFF09; &#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x6297;&#x539F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; (&#x5730;&#x56F3;) &#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x7E41;&#x8302;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x80AF;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x8A3A;&#x65AD;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3002;&#x307E;&#x305A;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3001;7770 Da &#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7; 3&#x3001;&#x5730;&#x56F3;&#x304C;&#x5408;&#x6210;&#x3055;&#x308C;, &#x305D;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;-&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B; &#xFF08;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#xFF09; &#x3092;&#x78BA;&#x8A8D; (LC-MS(ESI)), &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x652F;&#x63F4;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8131;&#x96E2;/&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;-&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8; &#xFF08;MALDI-TOF&#xFF09; &#x3068; Edman &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3002;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x4FA1;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x88DC;&#x52A9; Titermax &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x4E0A;&#x3052;&#x308B;&#x3068;&#x3001;Ara h 2 &#x611F;&#x4F5C;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x306E; IgE &#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x306F;&#x3001;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684; Ara h 2 &#x539F;&#x6CB9;&#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4; &#x30A8;&#x30AD;&#x30B9; 10 (7) &#x306E;&#x4FA1;&#x3068;&#x30A6;&#x30A8;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7; Ara h 2 &#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x5168;&#x4F53;&#x3092;&#x30AB;&#x30D0;&#x30FC;&#x3059;&#x308B; mer 15 &#x5408;&#x6210; - &#x56FA;&#x76F8;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7; &#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066; 3 &#x3068;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; IgE &#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x9AD8;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x691C;&#x51FA;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x6CD5;&#x533B;&#x5B66;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x305D;&#x308C;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3084;&#x98DF;&#x54C1;&#x5DE5;&#x696D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x54C1;&#x8CEA;&#x7BA1;&#x7406;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3068;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x4E3B;&#x8981;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4; &#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3; Ara h 2 &#x9AD8;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x591A;&#x91CD;&#x6297;&#x539F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x89E3;&#x6790;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;

&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; E (IgE) &#xACB0;&#xC815;&#xC744; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC11D; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xC8FC;&#xC694; &#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; Ara h 2 &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;-&#xAC00;&#xACF5;&#xB41C; &#xC2DD;&#xD488; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30;&#xC5D0; epitopes &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Ara h 2&#xC758; ige&#xC758; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC120;&#xD615; epitope 3 (&#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC704;&#xCE58; 27-36)&#xC758; &#xB2E4;&#xC911; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; (&#xC9C0;&#xB3C4;)&#xB97C; &#xD569;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; monospecific &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xBBF8;&#xB798; epitope&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC744; &#xAC00;&#xC838;&#xC62C;&#xC774; &#xD53C;&#xD1A0; &#xD504;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD574;&#xACB0; &#xC9C4;&#xB2E8;. &#xCCAB;&#xC9F8;, 7770 Da&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD558;&#xB294; epitope 3, &#xC9C0;&#xB3C4; &#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xACE0;, &#xD569;&#xC131; &#xB41C;&#xC640; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;-&#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; (&#xBD84;&#xBB34; &#xC774;&#xC628;&#xD654;)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADF8; &#xAD6C;&#xC870; &#xD655;&#xC778; (LC-MS(ESI)), &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xC870; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xD0C8; &#xCC29;/&#xC774;&#xC628;&#xD654;-&#xC2DC;&#xAC04; &#xBE44;&#xD589; (TOF MALDI), &#xBC0F; Edman &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xB3C4; &#xB2E4;&#xC74C; &#xBCF4;&#xC870; &#xC81C; Titermax&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD1A0;&#xB07C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC740; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC778;&#xC0C1; &#xBC0F; sensitized Ara h 2&#xC5D0; &#xC54C; &#xB7EC; &#xC9C0; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; Ige&#xC758; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC11C;&#xCABD; &#xC624; &#xC810; &#xD558; &#xC5EC; 10(7)&#xAC00; &#xC6D0;&#xC720; &#xB545;&#xCF69; &#xCD94;&#xCD9C;&#xC5D0;&#xC11C; Ara h 2&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B9;&#xBCC4;&#xD788; epitope 3 &#xC194;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xC704;&#xC0C1; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD569;&#xC131; 15 &#xBA54; &#xB974; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; Ara h 2&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB2E4;&#xB8E8;&#xB294; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; epitope &#xB9E4;&#xD551;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC640; &#xBC18;&#xC751;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; ige&#xC758; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; epitopes&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xBD84;&#xC11D; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;&#xC740; &#xC2DD;&#xD488; &#xC0B0;&#xC5C5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD488;&#xC9C8; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB610;&#xB294; &#xADF8;&#xB807;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBA74; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC95;&#xC758;&#xD559; &#xBAA9;&#xC801; epitope &#xD2B9;&#xC815; &#xD0D0;&#xC9C0; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xAD6C;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xB4E4; &#xD0A4; &#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB545;&#xCF69; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;.

&#xC8FC;&#xC694; &#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; Ara h 2 &#xACE0;&#xBC00;&#xB3C4; &#xB2E4;&#xC911; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; epitope &#xD2B9;&#xC815; &#xBD84;&#xC11D; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xAC1C;&#xBC1C;.

Usando el alerg&eacute;nico principal de cacahuete Ara h 2 como ejemplo, una herramienta anal&iacute;tica que permite la determinaci&oacute;n de inmunoglobulina E (IgE)-epitopos en al&eacute;rgenos de alimentos procesados se desarrollaron. Hemos sintetizado un p&eacute;ptido m&uacute;ltiple antig&eacute;nico (mapa) del IgE reactiva epitopo lineal 3 (amino&aacute;cido posiciones 27-36) de Ara h 2 y levant&oacute; un monoespec&iacute;ficas antisuero contra este m&eacute;todo para obtener un control positivo para el futuro del ep&iacute;topo resolver diagn&oacute;sticos. En primer lugar, un mapa del epitopo 3, cuya masa molecular de 7770 Da, fue sintetizado, purificado, y su estructura confirmada por cromatograf&iacute;a l&iacute;quida espectrometr&iacute;a (ionizaci&oacute;n por electrospray) (LC-MS(ESI)), matriz asistida por l&aacute;ser desorci&oacute;n/ionizaci&oacute;n-tiempo de vuelo (MALDI-TOF) y secuenciaci&oacute;n de Edman. El mapa fue utilizado para levantar anticuerpos de alto t&iacute;tulo en conejos usando el adyuvante Titermax y caracterizar la especificidad de IgE de alerg&eacute;nicos pacientes sensibilizados a Ara h 2. El antisuero exclusivamente detecta Ara h 2 en extracto crudo de man&iacute; con un t&iacute;tulo de niveles por Western blot y reacciona espec&iacute;ficamente con el epitopo 3 de Mapeo epitopo para una biblioteca de p&eacute;ptidos sint&eacute;ticos de s&oacute;lido-fase-limite 15-mer que cubren toda la secuencia de Ara h 2. Estos epitopos IgE-reactivos son de alta relevancia anal&iacute;tica como que podr&iacute;an constituir la base para los sistemas de detecci&oacute;n espec&iacute;ficos del ep&iacute;topo para uso en control de calidad en la industria alimentaria o con fines forenses en casos de reacciones fatales a lo contrario no detectan prote&iacute;nas cacahuetes.

Desarrollo de una herramienta de an&aacute;lisis espec&iacute;ficos del ep&iacute;topo para el alergeno cacahuete importante Ara h 2 mediante una estrategia de alta densidad de p&eacute;ptidos antig&eacute;nicos m&uacute;ltiple.

Allergie &agrave; l&#39;arachide est un probl&egrave;me de sant&eacute; important en raison de son ampleur et la gravit&eacute; potentielle de la r&eacute;action allergique. La caract&eacute;risation des allerg&egrave;nes d&#39;arachide est cruciale pour la compr&eacute;hension du m&eacute;canisme de l&#39;allergie &agrave; l&#39;arachide. R&eacute;cemment, nous avons d&eacute;crit le clonage de l&#39;allerg&egrave;ne d&#39;arachide Ara h 6. Le but de cette &eacute;tude &eacute;tait d&#39;isolement et davantage de caract&eacute;risation de nAra h 6. Nous avons purifi&eacute; nAra h 6 &agrave; partir d&#39;arachide brut extrait &agrave; l&#39;aide de la filtration sur gel et la chromatographie &eacute;changeuse d&#39;anion. La pr&eacute;paration a &eacute;t&eacute; davantage caract&eacute;ris&eacute;e par &eacute;lectrophor&egrave;se sur gel de polyacrylamide bidimensionnelle (PAGE 2-D) avec l&#39;immunobuvardage ult&eacute;rieur. Stabilit&eacute; de nAra h 6 a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e par un essai de digestibilit&eacute; in vitro ainsi que par la r&eacute;sistance contre le traitement thermique. S&eacute;quen&ccedil;age de nAra h 6 a identifi&eacute; la s&eacute;quence d&#39;acides amin&eacute;s N-terminaux comme MRRERGRQGDSSS. Plus loin se traduit clairement d&eacute;montr&eacute;e stabilit&eacute; de nAra h 6 contre la digestion pepsique et chauffage. Immunoglobuline G (IgE) analyse et son activit&eacute; biologique par RBL contraignants, 25/30-test du naturel Ara h 6 prise en charge de l&#39;importance de cet allerg&egrave;ne d&#39;arachide. Enqu&ecirc;te de nAra h 6 a r&eacute;v&eacute;l&eacute; des preuves pour une cacahu&egrave;te autre allerg&egrave;ne putatif pertinence clinique bas&eacute; sur la r&eacute;sistance &agrave; la digestion pepsique et chaleur.

Isolation and characterization of natural Ara h 6: preuves d&#39;une arachide plue allerg&egrave;ne putatif pertinence clinique bas&eacute; sur la r&eacute;sistance &agrave; la digestion pepsique et chaleur.

Isolierung und Charakterisierung von nat&#xFC;rlichen Ara h 6: Beweise f&#xFC;r eine weitere Erdnussallergen mit vermeintlichen klinische Relevanz auf Widerstand der Basis, um die Verdauung und W&#xE4;rme Pepsin.

&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x75C7;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x60A3;&#x75C5;&#x7387;&#x548C;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x4E25;&#x91CD;&#x6027;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x5065;&#x5EB7;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x662F;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x75C7;&#x673A;&#x7406;&#x7684;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F; Ara h 6 &#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x9694;&#x79BB;&#x548C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x51C0;&#x5316;&#x7684;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x4ECE;&#x539F;&#x6CB9;&#x82B1;&#x751F;&#x63D0;&#x53D6;&#x4F7F;&#x7528;&#x51DD;&#x80F6;&#x8FC7;&#x6EE4;&#x548C;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x4EA4;&#x6362;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x3002;&#x7F16;&#x5199;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x4E0E;&#x540E;&#x7EED;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x7684;&#x4E8C;&#x7EF4;&#x805A;&#x4E19;&#x70EF;&#x9170;&#x80FA;&#x51DD;&#x80F6;&#x7535;&#x6CF3; &#xFF08;2 D &#x9875;&#xFF09;&#x3002;&#x7531;&#x4F53;&#x5916;&#x6D88;&#x5316;&#x7387;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x548C;&#x62B5;&#x6297;&#x70ED;&#x52A0;&#x5DE5;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x7684;&#x5148;&#x540E;&#x987A;&#x5E8F;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A; MRRERGRQGDSSS N-&#x7AEF;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7ED3;&#x679C;&#x660E;&#x786E;&#x8868;&#x660E;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x5BF9;&#x80C3;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D88;&#x5316;&#x548C;&#x52A0;&#x70ED;&#x3002;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x7531; RBL &#x53CA;&#x5176;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; G &#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;IgE&#xFF09; 25/30-&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x5929;&#x7136; Ara h 6 &#x652F;&#x6301;&#x6B64;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x8C03;&#x67E5;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BC1;&#x636E;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x7684;&#x5047;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6297;&#x80C3;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D88;&#x5316;&#x548C;&#x70ED;&#x3002;

&#x5929;&#x7136; Ara h 6 &#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x9274;&#x5B9A;&#xFF1A; &#x4E00;&#x9897;&#x82B1;&#x751F;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6297;&#x80C3;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D88;&#x5316;&#x548C;&#x70ED;&#x7684;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x7684;&#x5047;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x610F;&#x4E49;&#x3002;

Peanut allergy is a significant health problem because of its prevalence and the potential severity of the allergic reaction. The characterization of peanut allergens is crucial to the understanding of the mechanism of peanut allergy. Recently, we described cloning of the peanut allergen Ara h 6. The aim of this study was isolation and further characterization of nAra h 6. We purified nAra h 6 from crude peanut extract using gel filtration and anion exchange chromatography. The preparation was further characterized by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2-D PAGE) with subsequent immunoblotting. Stability of nAra h 6 was studied by an in vitro digestibility assay as well as by resistance against thermal processing. Sequencing of nAra h 6 identified the N-terminal amino acid sequence as MRRERGRQGDSSS. Further results clearly demonstrated stability of nAra h 6 against pepsin digestion and heating. Immunoglobulin G (IgE) binding analysis and its biological activity shown by RBL 25/30-test of natural Ara h 6 supported the importance of this peanut allergen. Investigation of nAra h 6 revealed evidence for a further peanut allergen with putative clinical relevance based on resistance to pepsin digestion and heat.

Isolation and characterization of natural Ara h 6: evidence for a further peanut allergen with putative clinical relevance based on resistance to pepsin digestion and heat.

Allergia alle arachide &egrave; un problema significativo per la salute a causa della sua prevalenza e la potenziale gravit&agrave; della reazione allergica. La caratterizzazione degli allergeni arachide &egrave; cruciale per la comprensione del meccanismo di allergia alle arachide. Recentemente, abbiamo descritto la clonazione dell&#39;allergene arachide Ara h 6. Lo scopo di questo studio era di isolamento e ulteriore caratterizzazione di nAra h 6. Abbiamo purificato nAra h 6 da arachide greggio estratto mediante gel filtrazione e cromatografia a scambio anionico. La preparazione &egrave; stata ulteriormente caratterizzata da elettroforesi bidimensionale del gel di poliacrilammide (pag. 2-D) con conseguente immunoblotting. Stabilit&agrave; di nAra h 6 &egrave; stato studiato da un dosaggio di digeribilit&agrave; in vitro nonch&eacute; di resistenza contro il trattamento termico. Sequenziamento di nAra h 6 identificato la sequenza dell&#39;amminoacido N-terminale come MRRERGRQGDSSS. Ulteriori risultati chiaramente dimostrata stabilit&agrave; di nAra h 6 contro la digestione di pepsina e riscaldamento. Immunoglobulina G (IgE) associazione di analisi e la sua attivit&agrave; biologica mostrato da RBL 25/30-prova di naturale Ara h 6 sostenuto l&#39;importanza di questo allergene arachidi. Indagine di nAra h 6 ha rivelato la prova per un ulteriore arachidi allergene con putativo significato clinico basato sulla resistenza alla digestione di pepsina e calore.

Isolamento e caratterizzazione di naturale Ara h 6: prova per un ulteriore arachidi allergene con putativo significato clinico basato sulla resistenza alla digestione di pepsina e calore.

&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4; &#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x91CD;&#x5927;&#x306A;&#x5065;&#x5EB7;&#x554F;&#x984C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6709;&#x75C5;&#x7387;&#x3068;&#x91CD;&#x5927;&#x6027;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4; &#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x6297;&#x539F; Ara h 6 &#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x66F4;&#x306B;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BC;&#x30A4;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x306E;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;H 6 &#x539F;&#x6CB9;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x30B2;&#x30EB;&#x6FFE;&#x904E;&#x3068;&#x9670;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x4EA4;&#x63DB;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5948;&#x826F;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6E96;&#x5099;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x4E8C;&#x6B21;&#x5143;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9;&#x30B2;&#x30EB;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5; (2 D &#x30DA;&#x30FC;&#x30B8;) &#x5F8C;&#x7D9A;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x71B1;&#x52A0;&#x5DE5;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x62B5;&#x6297;&#x3068;&#x540C;&#x69D8; in vitro &#x6D88;&#x5316;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3001;N &#x672B;&#x7AEF;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x914D;&#x5217; MRRERGRQGDSSS &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x30DA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x6D88;&#x5316;&#x529B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6696;&#x623F;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; RBL &#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; G (ige &#x6297;&#x4F53;) 25/30 &#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x81EA;&#x7136; Ara h 6 &#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5948;&#x826F; h 6 &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x63A8;&#x5B9A;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x610F;&#x7FA9;&#x3068;&#x30DA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x6D88;&#x5316;&#x529B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x71B1;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x81EA;&#x7136;&#x306E; Ara h 6 &#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x6027;&#x72B6;: &#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x30DA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x6D88;&#x5316;&#x529B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x71B1;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x63A8;&#x5B9A;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x610F;&#x7FA9;&#x3068;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x3002;

&#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xADF8; &#xC815;&#xB3C4;&#xC640; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC2EC;&#xAC01;&#xC131; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC74;&#xAC15; &#xBB38;&#xC81C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xC99D;&#xC0C1;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC740; &#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0;, &#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; Ara h 6&#xC758; &#xD074;&#xB85C;&#xB2DD;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xACE0;&#xB9BD;&#xACFC; &#xB098;&#xB77C; h 6&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;. H 6 &#xC6D0;&#xC720; &#xB545;&#xCF69;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC824; &#xC5EC;&#xACFC; &#xBC0F; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xAD50;&#xD658; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xB098;&#xB77C;&#xB97C; &#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xACE0;. &#xC900;&#xBE44;&#xB294; 2 &#xCC28;&#xC6D0; polyacrylamide &#xC824; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC95; (2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;) &#xD6C4;&#xC18D; immunoblotting&#xC640; &#xCD94;&#xAC00; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB098;&#xB77C; h 6&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC5F4; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCCB4; &#xC678; &#xC18C;&#xD654; &#xC728; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB098;&#xB77C; h 6&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; MRRERGRQGDSSS&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC80;&#xC99D; &#xB41C; &#xC548;&#xC815;&#xC131; pepsin &#xC18C;&#xD654; &#xBC0F; &#xB09C;&#xBC29; &#xC2DC;&#xC124;&#xC5D0; &#xB300;&#xD558;&#xC5EC; &#xB098;&#xB77C; h 6&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; G (ige&#xC758;) &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; RBL&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD65C;&#xB3D9; 25/30 &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC790;&#xC5F0; Ara h 6&#xC758; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xC774; &#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;. &#xB098;&#xB77C; h 6&#xC758; &#xC870;&#xC0AC; &#xCD94;&#xAC00; &#xB545;&#xCF69;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xBC1D;&#xD600; pepsin &#xC18C;&#xD654; &#xBC0F; &#xC5F4; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xC0C1; &#xC784;&#xC0C1; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30;.

&#xACA9;&#xB9AC;&#xC640; &#xC790;&#xC5F0; Ara h 6&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;: &#xB354; &#xB545;&#xCF69;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70; &#xC0C1; &#xC784;&#xC0C1; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; pepsin &#xC18C;&#xD654; &#xBC0F; &#xC5F4; &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;.

Alergia del cacahuete es un importante problema de salud debido a su prevalencia y la gravedad potencial de la reacci&oacute;n al&eacute;rgica. La caracterizaci&oacute;n de los alerg&eacute;nicos del cacahuete es crucial para la comprensi&oacute;n del mecanismo de la alergia del cacahuete. Recientemente, hemos descrito la clonaci&oacute;n del alergeno cacahuete Ara h 6. El objetivo de este estudio fue el aislamiento y la caracterizaci&oacute;n adicional de nAra h 6. Nos purifica nAra h 6 del cacahuete crudo extracto usando gel filtraci&oacute;n y cromatograf&iacute;a de intercambio ani&oacute;nico. La preparaci&oacute;n se caracteriz&oacute; m&aacute;s por electroforesis en geles de poliacrilamida bidimensional (2-D p&aacute;gina) con posterior immunoblotting. Estabilidad de nAra h 6 fue estudiada por un ensayo de digestibilidad in vitro, as&iacute; como por la resistencia contra el tratamiento t&eacute;rmico. Secuencia de nAra h 6 identific&oacute; la secuencia del amino&aacute;cido N-terminal MRRERGRQGDSSS. Adem&aacute;s resulta claramente demostrado estabilidad de nAra h 6 contra la digesti&oacute;n de la pepsina y calefacci&oacute;n. Inmunoglobulina G (IgE) obligatorio an&aacute;lisis y su actividad biol&oacute;gica que se muestra por RBL 25/30-prueba de natural Ara h 6 admite la importancia de este al&eacute;rgeno man&iacute;. Investigaci&oacute;n de nAra h 6 revel&oacute; evidencia de un cacahuete m&aacute;s al&eacute;rgenos con supuesta relevancia cl&iacute;nica basan en la resistencia a la digesti&oacute;n de la pepsina y el calor.

Aislamiento y caracterizaci&oacute;n de natural Ara h 6: evidencia de un cacahuete m&aacute;s al&eacute;rgenos con supuesta relevancia cl&iacute;nica basan en la resistencia a la digesti&oacute;n de la pepsina y el calor.

&#x8010;&#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x548C;&#x70ED;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x98DF;&#x7269;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5FC5;&#x5907;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x4ECE;&#x82B1;&#x751F; (&#x82B1;&#x751F;) &#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x662F;&#x81F4;&#x547D;&#x98DF;&#x7269;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x53D8;&#x5E94;&#x539F; 2S &#x767D;&#x86CB;&#x767D; Ara h 2 &#x548C;&#x540C;&#x6E90;&#x7684;&#x6B21;&#x8981;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F; Ara h 6 &#x5206;&#x5B50;&#x4E00;&#x7EA7;&#x7684;&#x672C;&#x673A;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6CBB;&#x7597;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x8FC7;&#x654F;&#x6548;&#x80FD;&#x5C31;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x6297;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684; Ara h 6 &#x6838;&#x5FC3;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x7ED3;&#x6784;&#x7531;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x5149;&#x8C31;&#x5B66;&#x548C;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x6A21;&#x578B;&#x7528;&#x4E8E;&#x751F;&#x6210; Ara h 2 &#x7ED3;&#x6784;&#x3002;Ara h 2 &#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x66F4;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x4E24;&#x4E2A;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x5206;&#x4EAB;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x4EA4;&#x53C9;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x542B;&#x6709;&#x5F88;&#x9AD8;&#x7684;&#x6297;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D88;&#x5316;&#x548C;&#x8FBE; 100 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x7684;&#x5185;&#x6838;&#x5373;&#x4F7F; IgE &#x6297;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x5BB9;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x5904;&#x7406;&#xFF0C;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E;&#x80A5;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x55DC;&#x78B1;&#xFF0C;&#x8C03;&#x89E3;&#x5458;&#x91CA;&#x653E;&#x4EBA;&#x6027;&#x5316;&#x7684; RBL &#xFF08;&#x5927;&#x9F20;&#x55DC;&#x78B1;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#xFF09; &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD; IgE &#x6297;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x5BB9;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x5E76;&#x4E0D;&#x4E00;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x5316;&#x4E3A;&#x51CF;&#x5C11;&#x8FC7;&#x654F;&#x6548;&#x80FD;&#x3002;&#x672C;&#x673A; Ara h 2 &#x548C; Ara h 6 &#x5DF2;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x53D8;&#x5E94;&#x539F;&#x6548;&#x4EF7;&#x6BD4;&#x6CBB;&#x7597;&#x6D88;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#x3002;&#x53D8;&#x5E94;&#x539F;&#x6838;&#x5FC3;&#x7684;&#x8936;&#x76B1;&#x90FD;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5E94;&#x533A;&#x57DF;&#x4E2D;&#x672A;&#x6D88;&#x5316;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x3002;&#x6781;&#x7AEF;&#x514D;&#x75AB;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684; Ara h 2 &#x548C; Ara h 6 &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6301;&#x7EED;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x53D8;&#x5E94;&#x539F;&#x6548;&#x529B;&#x5373;&#x4F7F;&#x5728;&#x98DF;&#x54C1;&#x5904;&#x7406;&#x540E;&#x89E3;&#x91CA;&#x3002;

&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0E;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684; 2S &#x6E05;&#x86CB;&#x767D;&#x578B;&#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x539F;&#xFF1A; &#x82B1;&#x751F;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E25;&#x91CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Resistance to proteolytic enzymes and heat is thought to be a prerequisite property of food allergens. Allergens from peanut (Arachis hypogaea) are the most frequent cause of fatal food allergic reactions. The allergenic 2S albumin Ara h 2 and the homologous minor allergen Ara h 6 were studied at the molecular level with regard to allergenic potency of native and protease-treated allergen. A high-resolution solution structure of the protease-resistant core of Ara h 6 was determined by NMR spectroscopy, and homology modelling was applied to generate an Ara h 2 structure. Ara h 2 appeared to be the more potent allergen, even though the two peanut allergens share substantial cross-reactivity. Both allergens contain cores that are highly resistant to proteolytic digestion and to temperatures of up to 100 degrees C. Even though IgE antibody-binding capacity was reduced by protease treatment, the mediator release from a functional equivalent of a mast cell or basophil, the humanized RBL (rat basophilic leukaemia) cell, demonstrated that this reduction in IgE antibody-binding capacity does not necessarily translate into reduced allergenic potency. Native Ara h 2 and Ara h 6 have virtually identical allergenic potency as compared with the allergens that were treated with digestive enzymes. The folds of the allergenic cores are virtually identical with each other and with the fold of the corresponding regions in the undigested proteins. The extreme immunological stability of the core structures of Ara h 2 and Ara h 6 provides an explanation for the persistence of the allergenic potency even after food processing.

Structure and stability of 2S albumin-type peanut allergens: implications for the severity of peanut allergic reactions.

R&eacute;sistance &agrave; la chaleur et des enzymes prot&eacute;olytiques est consid&eacute;r&eacute;e comme une propri&eacute;t&eacute; pr&eacute;requise des allerg&egrave;nes alimentaires. Allerg&egrave;nes de l&#39;arachide (Arachis hypogaea) sont la cause la plus fr&eacute;quente de r&eacute;actions allergiques alimentaires mortelles. L&#39;allerg&egrave;ne 2 s albumine Ara h 2 et l&#39;allerg&egrave;ne mineur homologue Ara h 6 ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;s au niveau mol&eacute;culaire en ce qui concerne la puissance allerg&eacute;nique des allerg&egrave;nes natifs et impr&eacute;gn&eacute;es de prot&eacute;ase. Une structure de solution &agrave; haute r&eacute;solution du noyau r&eacute;sistant &agrave; la prot&eacute;ase de Ara h 6 a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;e par spectroscopie RMN et mod&eacute;lisation d&#39;homologie a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour g&eacute;n&eacute;rer une structure de Ara h 2. Ara h 2 semblait &ecirc;tre le plus puissant allerg&egrave;ne, m&ecirc;me si les deux allerg&egrave;nes d&#39;arachide partagent importante r&eacute;activit&eacute; crois&eacute;e. Les deux allerg&egrave;nes contiennent des noyaux qui est tr&egrave;s r&eacute;sistantes &agrave; la digestion prot&eacute;olytique et &agrave; des temp&eacute;ratures jusqu&#39;&agrave; 100 &deg; C. M&ecirc;me si la capacit&eacute; de liaison anticorps IgE a &eacute;t&eacute; r&eacute;duite par le traitement de la prot&eacute;ase, la lib&eacute;ration de m&eacute;diateurs, d&#39;un &eacute;quivalent fonctionnel d&#39;une cellule de m&acirc;t ou basophiles, la cellule de (leuc&eacute;mie &agrave; basophiles rat) RBL humanis&eacute;e, a d&eacute;montr&eacute; que cette r&eacute;duction de capacit&eacute; de liaison anticorps IgE ne se traduit pas n&eacute;cessairement par r&eacute;duit potentiel allerg&eacute;nique. Native Ara h 2 et Ara h 6 ont une activit&eacute; allerg&eacute;nique pratiquement identique contre les allerg&egrave;nes qui ont &eacute;t&eacute; trait&eacute;s avec des enzymes digestives. Les plis des carottes allerg&egrave;nes sont pratiquement identiques entre eux et avec le pli des r&eacute;gions correspondants au niveau des prot&eacute;ines non dig&eacute;r&eacute;es. L&#39;extr&ecirc;me stabilit&eacute; immunologique des structures fondamentales de l&#39;Ara h 2 et Ara h 6 permet d&#39;expliquer la persistance du pouvoir allerg&eacute;nique m&ecirc;me apr&egrave;s la transformation des aliments.

Structure et stabilit&eacute; des allerg&egrave;nes d&#39;arachide d&#39;albumine-type 2 s: implications pour la gravit&eacute; des r&eacute;actions allergiques aux arachides.

Proteolytische Enzyme und Hitze wird gedacht, um eine erforderliche Eigenschaft von Lebensmittelallergien. Allergene aus der Erdnuss (Arachis Hypogaea) sind die h&auml;ufigste Ursache f&uuml;r t&ouml;dliche Nahrungsmittel allergische Reaktionen. Die Allergenen 2S Albumin Ara h 2 und das homologe kleinere Allergen Ara h 6 wurden auf molekularer Ebene in Bezug auf die Allergene Potenz der native und Protease-behandelten Allergen untersucht. Eine hochaufl&ouml;sende L&ouml;sungsstruktur des proteaseresistenten Kerns von Ara h 6 wurde durch NMR-Spektroskopie bestimmt und Homologie Modellierung angewendet wurde, um eine Ara-h 2-Struktur zu erzeugen. Ara h 2 schien das st&auml;rker Allergen, obwohl die beiden Erdnuss Allergene erhebliche Kreuzreaktivit&auml;t teilen. Beide Allergene enthalten Kerne, die sehr resistent gegen proteolytische Verdauung sowie gegen Temperaturen bis 100 Grad c Obwohl IgE-Antik&ouml;rper-Bindungskapazit&auml;t durch Protease-Behandlung, die Mittler-Freisetzung aus ein funktionales &Auml;quivalent einer Mastzelle oder basophiles, reduziert wurde reduziert die humanisierte RBL (Ratte basophile Leuk&auml;mie) Zelle, hat gezeigt, dass diese Reduzierung der Kapazit&auml;t der IgE-Antik&ouml;rper-Bindung nicht notwendigerweise zur Allergene Potenz. Native Ara h 2 und Ara h 6 haben nahezu identische Allergene Potenz im Vergleich zu den Allergenen, die Verdauungsenzyme behandelt wurden. Die Falten der allergenen Kerne sind praktisch identisch mit einander und mit der Faltung der entsprechenden Regionen in der unverdaute Proteine. Die immunologische extreme Stabilit&auml;t der Kern-Strukturen der Ara h 2 und Ara h 6 liefert eine Erkl&auml;rung f&uuml;r die Dauerhaftigkeit der allergenen Potenz auch nach der Lebensmittelverarbeitung.

Struktur und Stabilit&auml;t des 2S Albumin-Typ Erdnuss Allergene: Auswirkungen auf die Schwere der Erdnuss allergische Reaktionen.

Resistenza agli enzimi proteolitici e calore &egrave; pensato per essere una propriet&agrave; dei prerequisiti di allergeni alimentari. Allergeni da arachidi (Arachis hypogaea) sono la causa pi&ugrave; frequente di reazioni allergiche alimentari fatale. L&#39;allergenici 2S albumina Ara h 2 e l&#39;allergene minore omologo Ara h 6 sono state studiate a livello molecolare per quanto riguarda la potenza allergenica di allergeni nativi e proteasi-trattati. Una struttura di soluzione ad alta risoluzione del nucleo resistente alle proteasi di Ara h 6 &egrave; stata determinata mediante spettroscopia NMR e modellistica di omologia &egrave; stata applicata per generare una struttura di Ara h 2. Ara h 2 sembrava essere l&#39;allergene pi&ugrave; potente, anche se i due allergeni arachidi condividono notevole reattivit&agrave; crociata. Entrambi gli allergeni contengono nuclei che sono altamente resistenti alla digestione proteolitica e a temperature fino a 100 gradi c. Anche se la capacit&agrave; di legame dell&#39;anticorpo IgE &egrave; stata ridotta dal trattamento di proteasi, il rilascio del Mediatore da un equivalente funzionale di mastociti o dei basofili, cella (Leucemia basofila ratto) RBL umanizzata, ha dimostrata che questa riduzione della capacit&agrave; di legame dell&#39;anticorpo IgE non necessariamente tradurre in ridotto potere allergenico. Nativo Ara h 2 e Ara h 6 hanno potenza allergenica praticamente identica rispetto agli allergeni che sono stati trattati con enzimi digestivi. Le pieghe dei nuclei allergenici sono praticamente identiche tra loro e con la piega delle regioni corrispondenti delle proteine non digerite. L&#39;estrema stabilit&agrave; immunologica delle strutture fondamentali dell&#39;Ara h 2 e Ara h 6 fornisce una spiegazione per la persistenza della potenza allergenica anche dopo la trasformazione dei prodotti alimentari.

Struttura e stabilit&agrave; di allergeni arachide 2S albumina-tipo: implicazioni per la gravit&agrave; delle reazioni allergiche di arachidi.

&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x71B1;&#x98DF;&#x7269;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x5FC5;&#x9808;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x843D;&#x82B1;&#x751F; &#xFF08;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AB;&#x30BB;&#x30A4;&#xFF09; &#x304B;&#x3089;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x98DF;&#x7269;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x983B;&#x7E41;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3; 2S &#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3; Ara h 2 &#x76F8;&#x540C;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x6297;&#x539F; Ara h 6 &#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x5206;&#x5B50;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;.Ara h 6 &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x306E;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x69CB;&#x9020; nmr &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;Ara h 2 &#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x4EA4;&#x5DEE;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x5171;&#x6709; Ara h 2 &#x3088;&#x308A;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x3002;3L1115 &#x9175;&#x7D20;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x3066;&#x6700;&#x5927; 100 &#x5EA6; C &#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x30B3;&#x30A2;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;IgE &#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306F; mediator &#x306E;&#x767A;&#x58F2;&#x80A5;&#x6E80;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x597D;&#x5869;&#x57FA;&#x7403;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x540C;&#x7B49;&#x304B;&#x3089;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3053;&#x306E; IgE &#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x306B;&#x5FC5;&#x305A;&#x3057;&#x3082;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x5316;&#x306E; RBL (&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x597D;&#x5869;&#x57FA;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;) &#x30BB;&#x30EB; &#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3002;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E; Ara h 2 &#x3068; Ara h 6 &#x6D88;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x6027;&#x30B3;&#x30A2;&#x306E;&#x3072;&#x3060;&#x306F;&#x3001;&#x672A;&#x6D88;&#x5316;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x4E2D;&#x306E;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x76EE;&#x3092;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x540C;&#x4E00;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Ara h 2 &#x3068; Ara h 6 &#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x7A76;&#x6975;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x98DF;&#x54C1;&#x52A0;&#x5DE5;&#x5F8C;&#x3082;&#x6C38;&#x7D9A;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x69CB;&#x9020;&#x3068; 2 &#x79D2;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x578B;&#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4; &#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;: &#x30D4;&#x30FC;&#x30CA;&#x30C3;&#x30C4; &#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x3002;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; &#xC5F4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D; &#xC2DD;&#xD488; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30;&#xC758; &#xD544;&#xC218; &#xC18D;&#xC131; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB545;&#xCF69; (Arachis hypogaea)&#xC758; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xC99D;&#xC0C1;&#xC774; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xC2DD;&#xD488; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD754;&#xD55C; &#xC6D0;&#xC778;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Allergenic 2S &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; Ara h 2&#xC640; &#xB3D9;&#xC885; &#xC0AC;&#xC18C;&#xD55C; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; Ara h 6 &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xC54C; &#xB7EC; &#xC9C0; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. Ara h 6&#xC758; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C; &#xB0B4;&#xC131; &#xCF54;&#xC5B4;&#xC758; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; NMR &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xBC0F; Ara h 2 &#xAD6C;&#xC870; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xD638;&#xBAB0;&#xB85C;&#xC9C0; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;. Ara h 2 &#xB450; &#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xC99D;&#xC0C1; &#xACF5;&#xC720; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBD84;&#xB3C4; &#xB354; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xB420; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC778;&#xB2E4;. &#xB450; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xC99D;&#xC0C1;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC18C;&#xD654; &#xBC0F; &#xCD5C;&#xB300; 100&#xB3C4; C&#xC758; &#xC628;&#xB3C4; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xD55C; &#xCF54;&#xC5B4; IgE &#xD56D; &#xCCB4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC6A9;&#xB7C9; protease &#xCE58;&#xB8CC;, &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140;&#xC758; basophil, &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xB3D9;&#xAE09;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xB354;&#xB77C;&#xB3C4;&#xC774; IgE &#xD56D; &#xCCB4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xBC18;&#xB4DC;&#xC2DC; &#xBC88;&#xC5ED; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC99D;&#xBA85; humanized RBL (&#xC950; basophilic &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1;) &#xC140; allergenic &#xD798; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; Ara h 2&#xC640; Ara h 6 &#xC18C;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD588;&#xB2E4; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xC99D;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAC70;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C; allergenic &#xD798;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xB2F9; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xBC30;&#xC640; &#xC11C;&#xB85C; &#xD568;&#xAED8; allergenic &#xCF54;&#xC5B4;&#xC758; &#xC8FC;&#xB984; &#xAC70;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ara h 2&#xC640; Ara h 6&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xADF9;&#xB2E8;&#xC801;&#xC778; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xC2DD;&#xD488; &#xAC00;&#xACF5; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xC54C; &#xB7EC; &#xC9C0; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC758; &#xC9C0; &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC124;&#xBA85;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAD6C;&#xC870;&#xC640; 2S &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; &#xD615; &#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;: &#xB545;&#xCF69; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC758;&#xBBF8;.

Resistencia al calor y enzimas proteol&iacute;ticas se cree que una propiedad prerrequisito de los al&eacute;rgenos alimentarios. De man&iacute; (Arachis hypogaea) son la causa m&aacute;s frecuente de las reacciones al&eacute;rgicas de la comida fatal. Se estudiaron los alerg&eacute;nicos 2S alb&uacute;mina Ara h 2 y el alergeno menor hom&oacute;logo Ara h 6 a nivel molecular con respecto a la potencia alerg&eacute;nica del alergeno nativo y tratados con proteasa. Una estructura de alta resoluci&oacute;n de la soluci&oacute;n de la proteasa-resistente base de Ara h 6 se determin&oacute; mediante Espectroscopia NMR y modelado de homolog&iacute;a se aplic&oacute; para generar una estructura de h 2 de Ara. Ara h 2 parece ser el alergeno m&aacute;s potente, a pesar de que los dos los alerg&eacute;nicos del cacahuete compartan substancial reactividad cruzada. Ambos al&eacute;rgenos contienen n&uacute;cleos que son altamente resistentes a la digesti&oacute;n proteol&iacute;tica y a temperaturas de hasta 100 grados cent&iacute;grados. A pesar de que la capacidad de uni&oacute;n de anticuerpos IgE fue reducida por el tratamiento de la proteasa, la liberaci&oacute;n del mediador de un equivalente funcional de un mastocito o bas&oacute;filo, la c&eacute;lula de (leucemia basophilic de rata) RBL humanizada, demostrada que esta reducci&oacute;n en la capacidad de uni&oacute;n de anticuerpos IgE no necesariamente se traduce en reduce potencia alerg&eacute;nica. Nativa Ara h 2 y Ara h 6 tienen pr&aacute;cticamente id&eacute;ntica potencia alerg&eacute;nica en comparaci&oacute;n con los alergenos que fueron tratadas con enzimas digestivas. Los pliegues de los corazones alerg&eacute;nicos son pr&aacute;cticamente id&eacute;nticos entre s&iacute; y con el doble de las regiones correspondientes en las prote&iacute;nas no digeridas. La extrema estabilidad inmunol&oacute;gica de las estructuras de base de Ara 2 y Ara h 6 proporciona una explicaci&oacute;n para la persistencia de la potencia alerg&eacute;nica incluso despu&eacute;s de la transformaci&oacute;n de los alimentos.

Estructura y estabilidad de los alerg&eacute;nicos del cacahuete tipo alb&uacute;mina 2S: implicaciones para la severidad de las reacciones al&eacute;rgicas cacahuetes.

Article	Year
High-yield expression in Escherichia coli, purification, and characterization of properly folded major peanut allergen Ara h 2. Protein expression and purification\| PubMed ID: 14550644	2003
Development of an epitope-specific analytical tool for the major peanut allergen Ara h 2 using a high-density multiple-antigenic peptide strategy. Molecular nutrition & food research\| PubMed ID: 15508180	2004
Isolation and characterization of natural Ara h 6: evidence for a further peanut allergen with putative clinical relevance based on resistance to pepsin digestion and heat. Molecular nutrition & food research\| PubMed ID: 15672479	2004
Structure and stability of 2S albumin-type peanut allergens: implications for the severity of peanut allergic reactions. The Biochemical journal\| PubMed ID: 16372900	2006

Martin Suhr

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications