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Automated Quantification of Synaptic Fluorescence in <em>C. elegans</em>

Synapse strength refers to the amplitude of postsynaptic responses to presynaptic neurotransmitter release events, and has a major impact on overall ...

University of Toledo 

(1) UNC-49B and UNC-49C are gamma-aminobutyric acid (GABA) receptor subunits encoded by the Caenorhabditis elegans unc-49 gene. UNC-49B forms a homomeric GABA receptor, or can co-assemble with UNC-49C to form a heteromeric receptor. The pharmacological properties of UNC-49B homomers and UNC-49B/C heteromers were investigated in Xenopus oocytes. (2) The UNC-49 subunits are most closely related to the bicuculline- and benzodiazepine-insensitive RDL GABA receptors of insects. Consistent with this classification, bicuculline (10 micro M) did not inhibit, nor did diazepam (10 micro M) enhance UNC-49B homomeric or UNC-49B/C heteromeric receptors. (3) The UNC-49C subunit strongly affects the pharmacology of UNC-49B/C heteromeric receptors. UNC-49B homomers were much more picrotoxin sensitive than UNC-49B/C heteromers (IC(50)=0.9+/-0.2 micro M and 166+/-42 micro M, respectively). Pentobarbitone enhancement was greater for UNC-49B homomers compared to UNC-49B/C heteromers. Propofol (50 micro M) slightly enhanced UNC-49B homomers but slightly inhibited UNC-49B/C heteromers. Penicillin G (10 mM) inhibited UNC-49B homomers less strongly than UNC-49B/C heteromers (30% compared to 53% inhibition, respectively). (4) Several aspects of UNC-49 pharmacology were unusual. Picrotoxin sensitivity strongly correlates with dieldrin sensitivity, yet UNC-49B homomers were highly dieldrin resistant. The enhancing neurosteroid pregnanolone (5beta-pregnan-3alpha-ol-20-one; 10 micro M) strongly inhibited both UNC-49 receptors. Alphaxalone (10 micro M), another enhancing neurosteroid, did not affect UNC-49B homomers, but slightly inhibited UNC-49B/C heteromers. (5) UNC-49 subunits and mammalian GABA(A) receptor alpha, beta, and gamma subunit classes all share roughly the same degree of sequence similarity. Thus, although they are most similar to other invertebrate GABA receptors, the UNC-49 receptors share significant structural and pharmacological overlap with mammalian GABA(A) receptors.

Pharmacological characterization of the homomeric and heteromeric UNC-49 GABA receptors in C. elegans.

(&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B; unc 49 &#x57FA;&#x56E0;&#x6240;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; &gamma;-&#x6C28;&#x57FA;&#x4E01;&#x9178; (GABA) &#x53D7;&#x4F53;&#x4E9A;&#x57FA; 1) UNC 49B &#x548C; UNC-49 C&#x3002;UNC 49B &#x5F62;&#x6210; homomeric &#x7684; GABA &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6216;&#x53EF;&#x4EE5; co-assemble &#x4E0E; UNC-49 C &#x5F62;&#x6210;&#x7F1D;&#x9699;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;UNC 49B homomers &#x548C; UNC-49B/C heteromers &#x7684;&#x836F;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;(2) UNC 49 &#x4E9A;&#x57FA;&#x6700;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x8377;&#x5305;&#x7261;&#x4E39;&#x78B1;&#x548C;&#x82EF;&#x4E8C;&#x6C2E;&#x5353;&#x7C7B;-&#x533A;&#x5206; RDL GABA &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x6606;&#x866B;&#x3002;&#x6309;&#x7167;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5206;&#x7C7B;&#xFF0C;&#x8377;&#x5305;&#x7261;&#x4E39;&#x78B1; (10 &#x5FAE; M) &#x6CA1;&#x6709;&#x4E0D;&#x6291;&#x5236;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x6CA1;&#x6709;&#x5730;&#x897F;&#x6CEE; (10 &#x5FAE; M) &#x589E;&#x5F3A; UNC 49B homomeric &#x6216; UNC-49B/C &#x7F1D;&#x9699;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;(3) UNC-49 C &#x4E9A;&#x57FA;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5F71;&#x54CD; UNC-49B/C &#x7F1D;&#x9699;&#x53D7;&#x4F53;&#x836F;&#x7406;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;UNC 49B homomers &#x88AB;&#x66F4;&#x591A;&#x5316;&#x5B66;&#x654F;&#x611F;&#x6BD4; UNC-49B/C heteromers (IC (50) = 0.9 + /-0.2 &#x5FAE; M &#x548C; 166 + /-42 &#x5FAE; M&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;)&#x3002;Pentobarbitone &#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x5927;&#x7684; UNC 49B homomers &#x76F8;&#x6BD4; UNC-49B/C heteromers&#x3002;&#x4E19;&#x6CCA;&#x915A; (50 &#x5FAE; M) &#x7565;&#x6709;&#x589E;&#x5F3A; UNC 49B &#x4F46;&#x7A0D;&#x6709;&#x6291;&#x5236; UNC-49B/C heteromers homomers&#x3002;&#x9752;&#x9709;&#x7D20; G &#xFF08;10 &#x6BEB;&#x7C73;&#xFF09; &#x6291;&#x5236; UNC 49B homomers UNC-49B/C heteromers (&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; 53%&#x6291;&#x5236;&#x76F8;&#x6BD4; 30%) &#x6BD4;&#x4E0D;&#x90A3;&#x4E48;&#x5F3A;&#x70C8;&#x3002;(UNC 49 &#x836F;&#x7406;&#x5B66; 4) &#x51E0;&#x4E2A;&#x65B9;&#x9762;&#x662F;&#x4E0D;&#x5BFB;&#x5E38;&#x7684;&#x3002;&#x5316;&#x5B66;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x5F3A;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x72C4;&#x6C0F;&#x5242;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#xFF0C;&#x7136;&#x800C; UNC 49B homomers &#x8010;&#x72C4;&#x6C0F;&#x5242;&#x3002;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x70F7;&#x9187; &#xFF08;5beta-pregnan-3alpha-ol-20-one &#xFF1B; 10 &#x5FAE; M&#xFF09; &#x5F3A;&#x70C8;&#x6291;&#x5236;&#x4E24;&#x4E2A; UNC 49 &#x53D7;&#x4F53;&#x3002;Alphaxalone &#xFF08;10 &#x5FAE; M&#xFF09;&#xFF0C;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x63D0;&#x9AD8;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD; UNC 49B homomers&#xFF0C;&#x4F46;&#x7A0D;&#x6709;&#x6291;&#x5236;&#x7684; UNC-49B/C heteromers&#x3002;(5) UNC 49 &#x4E9A;&#x57FA;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53; &alpha;-&#x3001; &beta; &#x548C; &gamma; &#x4E9A;&#x57FA;&#x7C7B;&#x5927;&#x81F4;&#x5171;&#x4EAB;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x662F;&#x6700;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684; GABA &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;UNC 49 &#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x53D7;&#x4F53; GABA(A) &#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x5171;&#x4EAB;&#x91CD;&#x5927;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x91CD;&#x53E0;&#x3002;

&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x7684; homomeric &#x548C;&#x7F1D;&#x9699; UNC 49 GABA &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x836F;&#x7406;&#x5B66;&#x7279;&#x6027;&#x3002;

(1) UNC-49 b et C de l&#39;UNC-49 sont des sous-unit&eacute;s du r&eacute;cepteur de l&#39;acide gamma - aminobutyrique (GABA) cod&eacute;es par le g&egrave;ne unc-49 de Caenorhabditis elegans. UNC-49 b constitue un r&eacute;cepteur de homom&egrave;res GABA, ou peut co-assembl&eacute;es avec UNC-49 C pour former un r&eacute;cepteur h&eacute;t&eacute;rom&eacute;rique. Les propri&eacute;t&eacute;s pharmacologiques de l&#39;UNC-49 b homomers et heteromers d&#39;UNC-49 b/C ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;es dans des ovocytes de Xenopus. (2) Les sous-unit&eacute;s de l&#39;UNC-49 sont plus &eacute;troitement li&eacute;es &agrave; la bicuculline et benzodiaz&eacute;pine-insensible r&eacute;cepteurs GABA RDL d&#39;insectes. Conform&eacute;ment &agrave; cette classification, bicuculline (10 micro M) n&#39;a pas inhib&eacute;, ni fait le diaz&eacute;pam (micro 10 M) favoriserait UNC-49 b homom&egrave;res ou r&eacute;cepteurs h&eacute;t&eacute;rom&eacute;rique UNC-49 b/C. (3) De la sous-unit&eacute; C UNC-49 influe fortement sur la pharmacologie des r&eacute;cepteurs h&eacute;t&eacute;rom&eacute;rique UNC-49 b/C. UNC-49 b homomers &eacute;taient beaucoup plus sensible &agrave; la picrotoxine que heteromers UNC-49 b/C (IC (50) = 0,9 +/-0,2 micro M et 166 +/-42 micro M, respectivement). Am&eacute;lioration de pentobarbital &eacute;tait sup&eacute;rieure chez homomers UNC-49 b par rapport &agrave; heteromers d&#39;UNC-49 b/C. Propofol (micro 50 M) l&eacute;g&egrave;rement augment&eacute;e homomers UNC-49 b mais l&eacute;g&egrave;rement inhib&eacute; UNC-49 b/C heteromers. La p&eacute;nicilline G (10 mM) inhibe la UNC-49 b homomers moins fortement que heteromers UNC-49 b/C (30 % par rapport &agrave; l&#39;inhibition de 53 %, respectivement). (4) Plusieurs aspects de la pharmacologie de l&#39;UNC-49 &eacute;taient inhabituels. Sensibilit&eacute; de la picrotoxine est fortement en corr&eacute;lation avec sensibilit&eacute; de la dieldrine, pourtant homomers UNC-49 b &eacute;taient tr&egrave;s r&eacute;sistants &agrave; la dieldrine. L&#39;am&eacute;lioration pr&eacute;gnanolone neurost&eacute;ro&iuml;des (5beta-pregnan-3alpha-ol-20-one ; micro 10 M) inhibe fortement les deux r&eacute;cepteurs UNC-49. L&#39;alphaxalone (micro 10 M), neurost&eacute;ro&iuml;de favorisant une autre, n&#39;a pas affect&eacute; homomers UNC-49 b, mais un peu inhib&eacute;e UNC-49 b/C heteromers. (5) Sous-unit&eacute;s de l&#39;UNC-49 et les mammif&egrave;res GABA r&eacute;cepteurs alpha, b&ecirc;ta et gamma sous-unit&eacute; classes partagent &agrave; peu pr&egrave;s le m&ecirc;me degr&eacute; de similarit&eacute; de s&eacute;quence. Ainsi, bien qu&#39;ils ressemblent le plus aux autres r&eacute;cepteurs GABA d&#39;invert&eacute;br&eacute;s, les r&eacute;cepteurs de l&#39;UNC-49 partagent structurels et pharmacologique chevauchement avec les r&eacute;cepteurs GABA chez les mammif&egrave;res.

Caract&eacute;risation pharmacologique des r&eacute;cepteurs GABA UNC-49 homom&egrave;res et h&eacute;t&eacute;rom&eacute;rique chez c. elegans.

(1) UNC-49B und UNC - 49 C sind Gamma - Aminobutters&auml;ure (GABA)-Rezeptor-Untereinheiten der Caenorhabditis Elegans Unc-49 Gen codiert. UNC-49B bildet einen Homomeric GABA-Rezeptor oder kann co-assemble mit UNC - 49 C einen heteromeren-Rezeptor zu bilden. Die pharmakologischen Eigenschaften von UNC-49B Homomers und UNC-49B/C Heteromers wurde bei Xenopus Oocytes untersucht. (2) Die UNC-49-Untereinheiten sind am ehesten zu den Bicuculline - und Benzodiazepin-unempfindliche RDL GABA-Rezeptoren von Insekten verwandt. In &Uuml;bereinstimmung mit dieser Klassifizierung, Bicuculline (10 Mikro M) nicht hemmen, noch Tat Diazepam (10 Mikro M) erh&ouml;hen, UNC-49B Homomeric oder UNC-49B/C heteromeren Rezeptoren. (3) Die UNC - 49 C-Untereinheit beeinflusst stark die Pharmakologie von UNC-49B/C heteromeren Rezeptoren. UNC-49B Homomers waren viel mehr sensible Picrotoxin als UNC-49B/C Heteromers (IC (50) = 0.9 +/-0,2 Mikro M bzw. +/-42 Mikro M, 166). Pentobarbitone-Verbesserung war gr&ouml;&szlig;er f&uuml;r UNC-49B Homomers im Vergleich zu UNC-49B/C Heteromers. Propofol (50 Mikro M) leicht verbesserte UNC-49B Homomers aber etwas gehemmter UNC-49B/C Heteromers. Penicillin G (10 mM) hemmte UNC-49B Homomers weniger stark als UNC-49B/C Heteromers (30 % im Vergleich zu 53 % Hemmung, beziehungsweise). (4) Mehrere Aspekte der UNC-49 Pharmakologie waren ungew&ouml;hnlich. Picrotoxin Empfindlichkeit stark korreliert mit Dieldrin Empfindlichkeit, doch UNC-49B Homomers waren Dieldrin hochresistent. Die Verbesserung Neurosteroid-Pregnanolone (5beta-pregnan-3alpha-ol-20-one; 10 Mikro M) hemmte stark beide UNC-49-Rezeptoren. Alphaxalone (10 Mikro M), eine weitere Verbesserung Neurosteroid, hatte keine Auswirkungen auf UNC-49B Homomers, aber etwas gehemmt UNC-49B/C Heteromers. (5) UNC-49-Untereinheiten und S&auml;ugetier-GABA(A) Rezeptor Alpha, Beta und Gamma Untereinheit Klassen alle teilen ungef&auml;hr den gleichen Grad an &Auml;hnlichkeit der Sequenz. Obwohl sie anderen Wirbellosen GABA-Rezeptoren am &auml;hnlichsten sind, teilen die UNC-49-Rezeptoren so bedeutende strukturelle und pharmakologische &Uuml;berlappung mit S&auml;ugetier-GABA(A) Rezeptoren.

Pharmakologische Charakterisierung von Homomeric und heteromeren UNC-49 GABA-Rezeptoren in C. Elegans.

(1) UNC-49B e UNC-49 C sono le subunit&agrave; del recettore acido gamma - aminobutirrico (GABA) codificate dal gene unc-49 Caenorhabditis elegans. UNC-49B forma un recettore homomeric GABA, o pu&ograve; co-assemble con UNC-49 C per formare un recettore eteromerici. Le propriet&agrave; farmacologiche di UNC-49B homomers e heteromers UNC-49B/C sono state investigate in ovociti di Xenopus. (2) La subunit&agrave; UNC-49 sono pi&ugrave; strettamente correlati alla bicuculline - e benzodiazepine-insensibile recettori GABA RDL di insetti. Coerente con questa classificazione, bicuculline (10 micro M) non ha fatto inibire, n&eacute; fatto diazepam (10 micro M) migliorare UNC-49B homomeric o recettori eteromerici UNC-49B/C. (3) La subunit&agrave; UNC-49 C influenza fortemente la farmacologia dei recettori eteromerici UNC-49B/C. UNC-49B homomers erano picrotoxin molto pi&ugrave; sensibile rispetto a UNC-49B/C heteromers (IC (50) = 0,9 + /-0,2 micro M e 166 + micro 42 M, rispettivamente). Valorizzazione pentobarbitone era maggiore per UNC-49B homomers rispetto ai heteromers UNC-49B/C. Propofol (50 micro M) leggermente migliorato homomers UNC-49B ma leggermente inibito UNC-49B/C heteromers. Penicillina G (10 mM) inibito UNC-49B homomers meno fortemente di UNC-49B/C heteromers (30% rispetto alla inibizione del 53%, rispettivamente). (4) Diversi aspetti di farmacologia UNC-49 erano insoliti. Sensibilit&agrave; picrotoxin correla fortemente con la sensibilit&agrave; di dieldrin, eppure homomers UNC-49B erano altamente resistenti dieldrin. Il miglioramento pregnanolone neurosteroide (5beta-pregnan-3alpha-ol-20-one; 10 micro M) fortemente inibito entrambi i recettori UNC-49. Alphaxalone (micro 10 M), un altro miglioramento neurosteroide, non influisce sulla homomers UNC-49B, ma leggermente inibito UNC-49B/C heteromers. (5) UNC-49 subunit&agrave; e mammiferi GABA(A) recettore alfa, beta e gamma subunit&agrave; classi tutti condividono all&#39;incirca lo stesso grado di somiglianza di sequenza. Cos&igrave;, anche se sono pi&ugrave; simili ad altri invertebrati recettori GABA, i recettori UNC-49 condividono sovrapposizione significativa strutturale e farmacologica con recettori GABA(A) dei mammiferi.

Caratterizzazione farmacologica dei recettori GABA UNC-49 homomeric ed eteromerici in c. elegans.

(1) UNC 49B &#x3068; UNC 49 C &#x578B;&#x7DDA;&#x866B;&#x7DDA;&#x866B; unc 49 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x308B; &gamma;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x916A;&#x9178; (GABA) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;UNC 49B homomeric GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x304B; heteromeric &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;UNC 49 C &#x306B; co-assemble &#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067; UNC 49B homomers &#x3068; UNC-49B/C heteromers &#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;(2)&#x3001;UNC 49 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x6700;&#x3082;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x3001;&#x30D3;&#x30AF;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;- &#x3068;&#x30D9;&#x30F3;&#x30BE;&#x30B8;&#x30A2;&#x30BC;&#x30D4;&#x30F3;&#x7121;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306B;&#x6606;&#x866B;&#x306E; RDL GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x5206;&#x985E;&#x306F;&#x3001;&#x30D3;&#x30AF;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; (10 &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF09; &#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30B8;&#x30A2;&#x30BC;&#x30D1;&#x30E0; &#xFF08;10 &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;) UNC 49B homomeric &#x307E;&#x305F;&#x306F; UNC-49B/C heteromeric &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;(3) UNC 49 C &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x5F37;&#x304F; UNC-49B/C heteromeric &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;UNC 49B homomers &#x3055;&#x308C;&#x305F; UNC-49B/C heteromers &#x3088;&#x308A;&#x654F;&#x611F;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x30D4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; (IC (50) = 0.2 &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; M &plusmn; 0.9 &#x3068; 166 &plusmn; 42 &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;)&#x3002;&#x30DC;&#x30FC;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x306F;&#x3001;UNC-49B/C heteromers &#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066; UNC 49B homomers &#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30DD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB; &#xFF08;50 &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF09; &#x82E5;&#x5E72; UNC 49B homomers &#x304C;&#x82E5;&#x5E72;&#x6291;&#x5236;&#x306E; UNC-49B/C heteromers &#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DA;&#x30CB;&#x30B7;&#x30EA;&#x30F3; G (10 mM) &#x3067; UNC 49B homomers &#x3092; UNC-49B/C heteromers &#xFF08;53% &#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066; 30 &#xFF05;&#xFF09; &#x3088;&#x308A;&#x3088;&#x308A;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x5F37;&#x304F;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#xFF08;UNC 49 &#x85AC;&#x7406;&#x5B66; 4&#xFF09; &#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x306F;&#x666E;&#x901A;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x306F;&#x5F37;&#x304F;&#x30C7;&#x30A3;&#x30EB;&#x30C9;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x307E;&#x3060; UNC 49B homomers &#x9AD8;&#x30C7;&#x30A3;&#x30EB;&#x30C9;&#x30EA;&#x30F3;&#x62B5;&#x6297;&#x529B;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5F37;&#x5316;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; pregnanolone &#xFF08;5beta-pregnan-3alpha-ol-20-one &#xFF1B; 10 &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF09; &#x306F;&#x5F37;&#x304F;&#x4E21;&#x65B9; UNC 49 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Alphaxalone &#xFF08;10 &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF09; &#x5225;&#x5F37;&#x5316;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; UNC 49B homomers &#x304C;&#x82E5;&#x5E72;&#x6291;&#x5236;&#x306E; UNC-49B/C heteromers &#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;(5) UNC 49 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E; GABA(A) &#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; &gamma; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x307B;&#x307C;&#x540C;&#x3058;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x985E;&#x4F3C;&#x5EA6;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;UNC 49 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x85AC;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x304C;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x306F;&#x5F7C;&#x3089;&#x4ED6;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E; GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3002;

&#x7DDA;&#x866B;&#x306E; homomeric &#x3068; heteromeric UNC 49 GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3002;

(1) UNC 49b&#xC640; UNC-49 C&#xB294; &#xAC10;&#xB9C8;-aminobutyric &#xC0B0; (GABA) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; subunits Caenorhabditis elegans unc-49 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C;. UNC 49B homomeric GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xAC70;&#xB098;&#xC640; UNC-49 C heteromeric &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; co-assemble &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. UNC 49B homomers&#xC640; UNC-49B/C heteromers&#xC758; &#xC57D;&#xB9AC; &#xC18D;&#xC131; Xenopus oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. (2) UNC 49 subunits &#xAC00;&#xC7A5; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; bicuculline-&#xC640; benzodiazepine &#xBE44;&#xAD6C;&#xBD84; &#xACE4;&#xCDA9;&#xC758; RDL GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAD00;&#xB828;. &#xC774; &#xBD84;&#xB958;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;, bicuculline (10 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; M) &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;&#xB3C4; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xB2E4;&#xC774;&#xC544; &#xC81C; &#xD31C; (10 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xBBF8;&#xD130;) &#xD5A5;&#xC0C1; UNC 49B homomeric &#xB610;&#xB294; UNC-49B/C heteromeric &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;. (3) UNC-49 C &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; UNC-49B/C heteromeric &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC57D;&#xB9AC;&#xD559;&#xC744; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. UNC 49B homomers &#xD588;&#xB2E4; UNC-49B/C heteromers &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; picrotoxin &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; (IC (50) = 0.2 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; M &plusmn; 0.9&#xC640; 42 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; M, + 166 &#xAC01;&#xAC01;). Pentobarbitone &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; UNC-49B homomers UNC-49B/C heteromers&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD070; &#xD588;&#xB2E4;. Propofol (50 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; M) &#xC57D;&#xAC04; &#xC57D;&#xAC04; &#xC800;&#xD574; UNC-49B/C heteromers &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; UNC 49B homomers &#xAC15;&#xD654;. &#xD398;&#xB2C8;&#xC2E4;&#xB9B0; G (10mm) UNC-49B/C heteromers (&#xAC01;&#xAC01; 53% &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 30%) &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xB35C; &#xAC15;&#xD558;&#xAC8C; UNC 49B homomers &#xC800;&#xD574;. (4) &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCE21;&#xBA74; UNC 49 &#xC57D;&#xB9AC;&#xD559;&#xC758; &#xD3C9;&#xC18C; &#xC544;&#xB2C8;&#xC5C8;&#xB2E4;. Picrotoxin &#xAC10;&#xB3C4; &#xAC15;&#xD558;&#xAC8C; dieldrin &#xAC10;&#xB3C4;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xC544;&#xC9C1; 49B UNC homomers dieldrin &#xB0B4;&#xC131;. &#xAC15;&#xD654; neurosteroid pregnanolone (5beta-pregnan-3alpha-ol-20-one; 10 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; M)&#xC740; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xB450; UNC 49 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC800;&#xD574;. Alphaxalone (10 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xBBF8;&#xD130;), &#xB2E4;&#xB978; &#xAC15;&#xD654; neurosteroid&#xC740; UNC 49B homomers &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC57D;&#xAC04; &#xC800;&#xD574; UNC-49B/C heteromers&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. (5) UNC 49 subunits &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC54C;&#xD30C;, &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC0F; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xACF5;&#xC720; &#xB300;&#xB7B5; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131; &#xC815;&#xB3C4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C;, UNC 49 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870; &#xBC0F; &#xC57D;&#xB9AC; &#xACB9;&#xCE68; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; &#xACF5;&#xC720;.

C. elegans&#xC5D0;&#xC11C; homomeric &#xBC0F; heteromeric UNC-49 GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC57D;&#xB9AC;&#xD559; &#xC801;&#xC778; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;.

(1) UNC-49B y UNC - 49 C son subunidades del receptor de &aacute;cido gamma - aminobut&iacute;rico (GABA) codificadas por el gen de unc-49 Caenorhabditis elegans. UNC-49B forma un receptor de GABA homomeric o puede co-assemble con UNC - 49 C para formar un receptor heterom&eacute;ricos. Se investigaron las propiedades farmacol&oacute;gicas de la UNC-49B homomers y UNC-49B/C dels en ovocitos de Xenopus. (2) Las subunidades de la UNC-49 est&aacute;n m&aacute;s estrechamente relacionadas a la bicuculina y benzodiacepina-min&uacute;sculas receptores GABA RDL de insectos. De acuerdo con esta clasificaci&oacute;n, bicuculina (micro 10 M) no inhibir, ni hizo diazepam (10 micro M) mejorar UNC-49B homomeric o UNC-49B/C heterom&eacute;ricos receptores. (3) La subunidad de la UNC - 49 C afecta fuertemente a la farmacolog&iacute;a de los receptores heterom&eacute;ricos UNC-49B/C. UNC-49B homomers fueron picrotoxin mucho m&aacute;s sensible que la UNC-49B/C dels (IC (50) = 0,9 +/-0,2 micro M y 166 + /-42 micro M, respectivamente). Mejora del compuesto fue mayor para homomers de la UNC-49B comparado con UNC-49B/C dels. Propofol (50 micro M) ligeramente mejorado UNC-49B homomers pero un poco inhibido dels UNC-49B/C. Penicilina G (10 mM) inhibi&oacute; UNC-49B homomers menos fuertemente que dels UNC-49B/C (30% en comparaci&oacute;n con inhibici&oacute;n de 53%, respectivamente). (4) Varios aspectos de la farmacolog&iacute;a de la UNC-49 eran inusuales. Sensibilidad de Picrotoxin se correlaciona fuertemente con sensibilidad de dieldr&iacute;n, sin embargo, UNC-49B homomers eran altamente resistentes de dieldr&iacute;n. El aumento pregnanolone de neuroesteroides (5beta-pregnan-3alpha-ol-20-one; 10 micro M) fuertemente inhibe los receptores de la UNC-49. Alphaxalone (micro 10 M), no afect&oacute; a otro aumento neuroesteroides, UNC-49B homomers, pero un poco inhibido dels UNC-49B/C. (5) UNC-49 subunidades y mam&iacute;feras GABA(A) receptor alfa, beta y gamma subunidad clases todos comparten m&aacute;s o menos el mismo grado de semejanza de la secuencia. As&iacute;, aunque son m&aacute;s similares a otros invertebrados receptores de GABA, los receptores de la UNC-49 compartan una superposici&oacute;n significativa estructural y farmacol&oacute;gica con mam&iacute;feros GABA(A) receptores.

Caracterizaci&oacute;n farmacol&oacute;gica de los receptores de GABA UNC-49 homomeric y heterom&eacute;ricos en C. elegans.

1.Unc 49 &#x7684;&#x7EBF;&#x866B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x4E09;&#x6C28;&#x57FA;&#x4E01;&#x9178; A &#x578B; (GABA(A)) &#x53D7;&#x4F53;&#x4E9A;&#x57FA;&#x3002;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E24;&#x4E2A;&#xFF0C;UNC 49B &#x548C; UNC-49 C&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x9AD8;&#x4E30;&#x5EA6;&#x548C; co-localize &#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x4EA4;&#x754C;&#x5904;&#x3002;2.UNC 49B &#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x79CD; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x51FD;&#x6570; unc 49 &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x90FD;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x529F;&#x80FD;&#x6027; UNC 49B&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E13;&#x95E8;&#x505C;&#x7528; UNC-49 C&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;UNC-49 C &#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x53EF;&#x6709;&#x53EF;&#x65E0;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;UNC-49 C &#x5DF2;&#x88AB;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x7EBF;&#x866B;&#x79CD;&#x7C7B;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x6709;&#x5FC5;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;3.&#x4E3A;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426; UNC-49 C &#x662F;&#x4F53;&#x5185;&#x7684; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x7EBF;&#x866B;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6267;&#x884C;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x68C0;&#x67E5;&#x3002;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6; GABA&#xFF0C;&#x548C;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x70EF;&#x786B;&#x9178;&#xFF0C;&#x5339;&#x914D; UNC-49B/C heteromer&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F; UNC 49B homomer&#xFF0C;&#x4E3A;&#x5916;&#x6E90;&#x6027;&#x548C; synaptically &#x91CA;&#x653E; GABA&#x3002;4.&#x7A81;&#x89E6;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684; UNC-49 C &#x9700;&#x8981; UNC 49B&#xFF0C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x57FA;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x534F;&#x4F1A;&#x7684;&#x6307;&#x793A;&#x6027;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x662F; UNC-49B/C heteromer&#x3002;5.UNC-49 C &#x8D77;&#x8D1F;&#x8C03;&#x8282;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x5FEB;&#x901F;&#x914D;&#x4F53;&#x4EA4;&#x6362;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A; UNC-49 C &#x539F;&#x56E0;&#x52A0;&#x901F;&#x53D7;&#x4F53;&#x8131;&#x654F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;UNC-49 C &#x8868;&#x660E;&#x662F;&#x51CF;&#x5C11;&#x5728; UNC-49B/C heteromers &#x5355;&#x901A;&#x9053;&#x7535;&#x5BFC;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;UNC 49B &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x662F;&#x63D0;&#x4F9B; GABA &#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x80FD;&#x529B;&#x548C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x518D;&#x5230;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#xFF0C;&#x800C; UNC-49 C &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x662F;&#x5BF9;&#x6D88;&#x6781;&#x8C03;&#x8282;&#x53D7;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x7CBE;&#x786E;&#x5F62;&#x72B6;&#x6291;&#x5236;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7535;&#x6D41;&#x3002;

&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x63A5;&#x5934;&#x5904;&#x7684; GABA &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;

1. The unc-49 gene of the nematode Caenorhabditis elegans encodes three gamma-aminobutyric acid type A (GABA(A)) receptor subunits. Two of these, UNC-49B and UNC-49C, are expressed at high abundance and co-localize at the neuromuscular junction. 2. The UNC-49B subunit is sufficient to form a GABA(A) receptor in vitro and in vivo. Furthermore, all loss-of-function unc-49 alleles lack functional UNC-49B. No mutations specifically inactivate UNC-49C. Thus, UNC-49C appears to be dispensable for receptor function; however, UNC-49C has been conserved among different nematode species, suggesting it plays a necessary role. 3. To ascertain whether UNC-49C is part of the GABA(A) receptor in vivo, we performed patch-clamp electrophysiology on C. elegans muscle cells. Sensitivity to GABA, and to the antagonists picrotoxin and pregnenolone sulfate, matched the UNC-49B/C heteromer rather than the UNC-49B homomer, for both exogenous and synaptically-released GABA. 4. The synaptic localization of UNC-49C requires the presence of UNC-49B, indicative of a physical association between the two subunits in vivo. Thus, the in vivo receptor is an UNC-49B/C heteromer. 5. UNC-49C plays a negative modulatory role. Using the rapid ligand-exchange technique in vitro, we determined that UNC-49C causes accelerated receptor desensitization. Previously, UNC-49C was shown to reduce single-channel conductance in UNC-49B/C heteromers. Thus, the function of UNC-49B is to provide GABA responsiveness and localization to synapses, while the function of UNC-49C is to negatively modulate receptor function and precisely shape inhibitory postsynaptic currents.

The composition of the GABA receptor at the Caenorhabditis elegans neuromuscular junction.

1. Le unc-49 g&#xE8;ne de n&#xE9;matode Caenorhabditis elegans code trois types d&#x26;#39;acide gamma-aminobutyrique sous-unit&#xE9;s A (r&#xE9;cepteurs GABA (A)). Deux d&#x26;#39;entre eux, UNC-49B et 49C UNC-, sont exprim&#xE9;s &#xE0; forte abondance et la co-localisation &#xE0; la jonction neuromusculaire. 2. La sous-unit&#xE9; UNC-49B est suffisante pour former une GABA (A) du r&#xE9;cepteur in vitro et in vivo. En outre, toutes les pertes de fonction unc-49 all&#xE8;les n&#x26;#39;ont pas fonctionnelle UNC-49B. Pas de mutations sp&#xE9;cifiquement inactiver UNC-49C. Ainsi, UNC-49C semble &#xEA;tre indispensable pour la fonction du r&#xE9;cepteur; toutefois, UNC-49C a &#xE9;t&#xE9; conserv&#xE9; parmi les diff&#xE9;rentes esp&#xE8;ces de n&#xE9;matodes, ce qui sugg&#xE8;re qu&#x26;#39;elle joue un r&#xF4;le n&#xE9;cessaire. 3. Pour v&#xE9;rifier si UNC-49C s&#x26;#39;inscrit dans le cadre du GABA (A) du r&#xE9;cepteur in vivo, nous avons r&#xE9;alis&#xE9; de patch-clamp &#xE9;lectrophysiologie sur des cellules musculaires C. elegans. Sensibilit&#xE9; &#xE0; GABA, et &#xE0; l&#x26;#39;picrotoxine antagonistes et le sulfate de pregn&#xE9;nolone, la correspondance UNC-49B / C plut&#xF4;t que l&#x26;#39;h&#xE9;t&#xE9;rom&#xE8;re homom&#xE8;re UNC-49B, &#xE0; la fois pour exog&#xE8;ne et synaptique-GABA lib&#xE9;r&#xE9;e. 4. La localisation synaptique de l&#x26;#39;UNC-49C n&#xE9;cessite la pr&#xE9;sence de l&#x26;#39;UNC-49B, ce qui indique une association physique entre les deux sous-unit&#xE9;s in vivo. Ainsi, le r&#xE9;cepteur en vivo est un h&#xE9;t&#xE9;rom&#xE8;re UNC-49B / C. 5. UNC-49C joue un r&#xF4;le modulateur n&#xE9;gatif. Utilisation de la rapide d&#x26;#39;&#xE9;change de ligands technique in vitro, nous avons d&#xE9;termin&#xE9; que UNC-49C provoque la d&#xE9;sensibilisation des r&#xE9;cepteurs acc&#xE9;l&#xE9;r&#xE9;e. Auparavant, UNC-49C a permis de r&#xE9;duire &#xE0; canal unique conductance dans UNC-49B / C h&#xE9;t&#xE9;rom&#xE8;res. Ainsi, la fonction de l&#x26;#39;UNC-49B est de fournir la r&#xE9;activit&#xE9; et la localisation du GABA au niveau des synapses, tandis que la fonction de l&#x26;#39;UNC-49C est de moduler n&#xE9;gativement la fonction des r&#xE9;cepteurs et pr&#xE9;cis&#xE9;ment fa&#xE7;onner courants postsynaptiques inhibiteurs.

La composition du r&#xE9;cepteur GABA &#xE0; la jonction neuromusculaire Caenorhabditis elegans

Die Zusammensetzung des GABA-Rezeptor an der neuromuskul&#xE4;ren Synapse Caenorhabditis elegans.

1. Il gene unc-49 del nematode elegans di Caenorhabditis codifica tre acido gamma - aminobutirrico tipo A (GABA(A)) subunit&agrave; del recettore. Due di questi, UNC-49B e UNC-49 C, sono espressi in abbondanza e co-localize presso la giunzione neuromuscolare. 2. La subunit&agrave; UNC-49B &egrave; sufficiente per formare un recettore GABA(A) in vitro e in vivo. Inoltre, tutti gli alleli di unc-49 perdita di funzione mancano funzionale UNC-49B. Nessuna mutazione inattivano specificamente UNC-49 C. Cos&igrave;, UNC-49 C sembra essere superfluo per la funzione del recettore; Tuttavia, UNC-49 C conservato tra le diverse specie di nematodi, suggerendo che essa svolge un ruolo necessario. 3. Per accertare se UNC-49 C &egrave; parte del recettore GABA(A) in vivo, abbiamo eseguito elettrofisiologia patch-clamp su cellule muscolari c. elegans. Sensibilit&agrave; al GABA e per gli antagonisti picrotoxin e pregnenolone solfato, appaiati con l&#39;UNC-49B/C heteromer piuttosto che homomer l&#39;UNC-49B, esogeno e rilasciato sinapticamente GABA. 4. La localizzazione sinaptica di UNC-49 C richiede la presenza di UNC-49B, indicativo di un&#39;associazione fisica tra le due subunit&agrave; in vivo. Cos&igrave;, il recettore in vivo &egrave; un heteromer UNC-49B/C. 5. UNC-49 C svolge un ruolo di modulatore negativo. Utilizzando la tecnica del ligando-scambio rapido in vitro, abbiamo determinato che UNC-49 C causa la desensibilizzazione del recettore accelerata. In precedenza, UNC-49 C ha dimostrato di ridurre la conduttanza del singolo canale in UNC-49B/C heteromers. Cos&igrave;, la funzione di UNC-49B &egrave; fornire GABA reattivit&agrave; e localizzazione di sinapsi, mentre la funzione di UNC-49 C &egrave; negativamente modulare funzione del recettore e precisamente forma inibitorio postsinaptico correnti.

La composizione del recettore GABA a giunzione neuromuscolare Caenorhabditis elegans.

1&#x3002;&#x7DDA;&#x866B;Caenorhabditis elegans&#x306E;UNC-49&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;3&#x3B3;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x916A;&#x9178;&#x578B;&#xFF08;GABA&#xFF08;A&#xFF09;&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4E8C;&#x3064;&#x3001;UNC-49B&#x3068;UNC-49C&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x3067;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 2&#x3002; UNC-49B&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x3067;&#x306E;GABA&#xFF08;A&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x55AA;&#x5931;UNC-49&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;UNC-49B&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3044;&#x3044;&#x3048;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x7279;&#x306B;UNC-49C&#x3092;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;UNC-49C&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x8981;&#x3068;&#x601D;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x304C;&#x3001;UNC-49C&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x7DDA;&#x866B;&#x7A2E;&#x9593;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 3&#x3002; UNC-49C&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;GABA&#xFF08;&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;C. elegans&#x306E;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002; GABA&#x306B;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30D4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B0;&#x30CD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x5869;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;GABA&#x306F;&#x3001;UNC-49B / C&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x30DE;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;UNC-49B&#x306E;homomer&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 4&#x3002; UNC-49C&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C40;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x9593;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x95A2;&#x9023;&#x3092;&#x793A;&#x3059;UNC-49B&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;UNC-49B / C&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x30DE;&#x30FC;&#x3067;&#x3059;&#x3002; 5&#x3002; UNC-49C&#x306F;&#x3001;&#x8CA0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x4EA4;&#x63DB;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;UNC-49C&#x304C;&#x52A0;&#x901F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x3001;UNC-49C&#x306F;&#x3001;UNC-49B / C heteromers&#x3067;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; UNC-49C&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x8CA0;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3001;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;UNC-49B&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;GABA&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x7DDA;&#x866B;Caenorhabditis elegans&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;GABA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;

1. &#xC120; &#xCDA9; &#xB958; Caenorhabditis elegans&#xC758; unc 49 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; 3 &#xAC10;&#xB9C8;-aminobutyric &#xC0B0; &#xD615; A (GABA(A)) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; UNC 49b&#xC640; UNC-49 C, 2 &#xB192;&#xC740; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xD559; &#xAD50;&#xCC28;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; co-localize. 2. UNC 49B &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84;. &#xB610;&#xD55C;, &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC190;&#xC2E4; unc-49 &#xB300;&#xB9BD; &#xAE30;&#xB2A5; UNC 49B &#xBD80;&#xC871;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB2C8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD2B9;&#xD788; UNC-49 C &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, UNC-49 C &#xBD88;&#xAC00;&#xACB0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5;;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC83; &#xC778; &#xB4EF;&#xD558;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; UNC-49 C &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xC120; &#xCDA9; &#xB958; &#xC885; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xBCF4;&#xC874; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. 3. UNC-49 C vivo&#xC5D0;&#xC11C; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80; &#xC778;&#xC9C0; &#xD655;&#xC778; &#xD558; C. elegans &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xC804;&#xAE30; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xB3C4; GABA&#xC640; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; picrotoxin &#xBC0F; pregnenolone &#xD669;&#xC0B0; exogenous&#xC640; synaptically &#xCD9C;&#xC2DC; GABA&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; UNC 49B homomer &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; UNC-49B/C heteromer&#xC744; &#xC77C;&#xCE58;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 4. &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; UNC-49 C UNC-49B, vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704; &#xAC04;&#xC758; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD574;&#xC57C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; UNC-49B/C heteromer&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. 5. UNC-49 C &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; modulatory &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xCCB4; &#xC678; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;-&#xAD50;&#xD658; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; UNC-49 C &#xC6D0;&#xC778; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB454;&#xAC10; &#xAC00;&#xC18D; &#xACB0;&#xC815;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0;, UNC-49 C UNC-49B/C heteromers&#xC5D0; &#xB2E8;&#xC77C; &#xCC44;&#xB110; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, UNC 49B &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3D9;&#xC548; UNC-49 C&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xBAA8;&#xC591; &#xAE08;&#xC9C0; postsynaptic &#xC804;&#xB958; &#xBCC0;&#xC870; GABA &#xC751;&#xB2F5;&#xC131; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB0C5;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;.

Caenorhabditis elegans &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xD559; &#xAD50;&#xCC28;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;.

1. La UNC-49 de genes de nematodo Caenorhabditis elegans codifica tres gamma-aminobut&#xED;rico tipo de &#xE1;cido (A subunidades del receptor GABA (A)). Dos de ellos, la UNC-49B y 49C-UNC, se expresan en gran abundancia y la co-localizaci&#xF3;n en la uni&#xF3;n neuromuscular. 2. La subunidad de UNC-49B es suficiente para formar una GABA (A) del receptor in vitro e in vivo. Adem&#xE1;s, todas las p&#xE9;rdidas de la funci&#xF3;n de UNC-49 alelos funcionales carecen de la UNC-49B. No se encontraron mutaciones en concreto inactivar la UNC-49C. Por lo tanto, la UNC-49C parece ser prescindible para la funci&#xF3;n del receptor, sin embargo, la UNC-49C se ha conservado entre diferentes especies de nematodos, lo que sugiere que juega un papel necesario. 3. Para determinar si la UNC-49C es parte de la GABA (A) del receptor in vivo, se realiz&#xF3; un patch-clamp de electrofisiolog&#xED;a en las c&#xE9;lulas musculares C. elegans. Sensibilidad al GABA, y al picrotoxina antagonistas y sulfato de pregnenolona, &#x200B;&#x200B;coincid&#xED;a con la UNC-49B / C heter&#xF3;mero en lugar de la hom&#xF3;mero UNC-49B, por tanto ex&#xF3;gena y sin&#xE1;pticamente liberado-GABA. 4. La localizaci&#xF3;n sin&#xE1;ptica de UNC-49C requiere la presencia de la UNC-49B, indicativo de una asociaci&#xF3;n f&#xED;sica entre las dos subunidades in vivo. Por lo tanto, la de los receptores in vivo es un heter&#xF3;mero UNC-49B / C. 5. UNC-49C juega un papel modulador negativo. Usando el r&#xE1;pido intercambio de ligando t&#xE9;cnica in vitro, se determin&#xF3; que la UNC-49C causa la desensibilizaci&#xF3;n del receptor acelerado. Anteriormente, la UNC-49C ha demostrado reducir de un solo canal de la conductancia en la UNC-49B / C heter&#xF3;meros. As&#xED;, la funci&#xF3;n de la UNC-49B es proporcionar la capacidad de respuesta de GABA y la localizaci&#xF3;n de las sinapsis, mientras que la funci&#xF3;n de la UNC-49C es negativa modular la funci&#xF3;n del receptor y precisamente dar forma a las corrientes inhibitorios postsin&#xE1;pticos.

La composici&#xF3;n del receptor de GABA en el cruce de Caenorhabditis elegans neuromuscular

GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC790;&#xADF9; &#xD558; &#xACE0; &#xB1CC;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC758; &#xADE0;&#xD615; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;, &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB0C5; &#xAC15;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0;, &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;. GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; synaptogenesis, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB9C1;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C; &#xD558; presynaptic &#xB2E8;&#xB9D0;&#xAE30;&#xB294; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xD615;&#xC131;&#xACFC; &#xC720;&#xC9C0;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; presynaptic &#xB274;&#xB7F0; &#xC9C1;&#xC811; GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xC6B0;&#xB9AC; GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; Caenorhabditis elegans&#xC5D0; presynaptic &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98;&#xB97C; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD558;&#xB294; postsynaptic &#xC140;&#xC5D0; &#xC870;&#xC0AC;. C. elegans postsynaptic &#xADFC;&#xC721; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0;&#xACFC; GABA &#xBAA8;&#xD130; innervation &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xACE0; GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xBC18;&#xB300; GABA &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;. GABA &#xC785;&#xB825;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xB610;&#xB294; GABA presynaptic &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB9C1; &#xC720;&#xB3C4; &#xD655;&#xC778; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBE0C;&#xB7EC;&#xC2DC;&#xAC00; &#xBC30;&#xD3EC; GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; innervation&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC190;&#xC2E4;&#xC774; &#xD588;&#xB2E4; GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; GABA&#xC640; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC785;&#xB825; &#xD568;&#xAED8; GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; autophagosomes&#xC5D0; &#xD2B8;&#xB798;&#xD53D;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Autophagosomes&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC131;&#xB2A5; &#xC800;&#xD558; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880;&#xC744; &#xB300;&#xB7C9; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC140;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; endocytic &#xC81C;&#xAC70; autophagosomes &#xD2B8;&#xB798;&#xD53D;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD6C4; autophagosomes GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD2B8;&#xB798;&#xD53D;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, autophagy &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC800;&#xD558; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB798;&#xC11C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; presynaptic &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC5EC; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB9C1;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; autophagy GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; degradative &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Presynaptic &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC744; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC548; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB9C1; &#xBC0F; autophagy Caenorhabditis elegans&#xC5D0; GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC870;&#xC808;.

GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x7A81;&#x89E6;&#x805A;&#x7C7B;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#xFF0C;&#x5F71;&#x54CD;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x548C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5174;&#x594B;&#x4E0E;&#x6291;&#x5236;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E73;&#x8861;&#x3002;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7801;&#x5934;&#x8BF1;&#x4F7F; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x805A;&#x7C7B;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x77E5;&#x9053;&#x96C6;&#x7FA4;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x7EF4;&#x62A4;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x8981;&#x7814;&#x7A76;&#x5982;&#x4F55;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x96C6;&#x7FA4;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x672A;&#x80FD;&#x83B7;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x8054;&#x7CFB;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x3002;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x808C;&#x8089;&#x63A5;&#x6536;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x548C; GABA &#x7535;&#x673A;&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#xFF0C;&#x548C; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x7FA4;&#x96C6;&#x5BF9;&#x9762; GABA &#x7801;&#x5934;&#x3002;GABA &#x6295;&#x5165;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x635F;&#x5931; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x6F2B;&#x5206;&#x53D1;&#x6216;&#x9644;&#x8FD1;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#xFF0C;&#x786E;&#x8BA4; GABA &#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7801;&#x5934;&#x8BF1;&#x4F7F; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x805A;&#x7C7B;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4E22;&#x5931;&#x4E86;&#x5BF9; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x7684; GABA &#x548C;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x6295;&#x5165;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x9020;&#x6210; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x80DE;&#x5185; autophagosomes &#x7684;&#x901A;&#x8BAF;&#x91CF;&#x3002;Autophagosomes &#x901A;&#x5E38;&#x8FD0;&#x8F93;&#x6563;&#x88C5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5230;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; autophagosomes &#x7684; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x901A;&#x8BAF;&#x540E;&#x541E;&#x53BB;&#x9664;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0D;&#x505A;&#x4EA4;&#x901A;&#x5230; autophagosomes&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x81EA;&#x566C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x964D;&#x4F4E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x80FD;&#x5982;&#x6B64;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x505A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7801;&#x5934;&#x8BF1;&#x4F7F; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x805A;&#x7C7B;&#x901A;&#x8FC7;&#x72EC;&#x7ACB;&#x63A7;&#x5236;&#x7A81;&#x89E6;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C;&#x8868;&#x9762; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4E5F;&#x8868;&#x660E;&#x81EA;&#x566C;&#x5728; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x8D29;&#x5356;&#x65B0;&#x578B;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7801;&#x5934;&#x72EC;&#x7ACB;&#x8C03;&#x8282;&#x7A81;&#x89E6;&#x805A;&#x7C7B;&#x548C;&#x81EA;&#x566C;&#x7684;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x3002;

Synaptic clustering of GABAA receptors is important for the function of inhibitory synapses, influencing synapse strength and, consequently, the balance of excitation and inhibition in the brain. Presynaptic terminals are known to induce GABAA receptor clustering during synaptogenesis, but the mechanisms of cluster formation and maintenance are not known. To study how presynaptic neurons direct the formation of GABAA receptor clusters, we have investigated GABAA receptor localization in postsynaptic cells that fail to receive presynaptic contacts in Caenorhabditis elegans. Postsynaptic muscles in C. elegans receive acetylcholine and GABA motor innervation, and GABAA receptors cluster opposite GABA terminals. Selective loss of GABA inputs caused GABAA receptors to be diffusely distributed at or near the muscle cell surface, confirming that GABA presynaptic terminals induce GABAA receptor clustering. In contrast, selective loss of acetylcholine innervation had no effect on GABAA receptor localization. However, loss of both GABA and acetylcholine inputs together caused GABAA receptors to traffic to intracellular autophagosomes. Autophagosomes normally transport bulk cytoplasm to the lysosome for degradation. However, we show that GABAA receptors traffic to autophagosomes after endocytic removal from the cell surface and that acetylcholine receptors in the same cells do not traffic to autophagosomes. Thus, autophagy can degrade cell-surface receptors and can do so selectively. Our results show that presynaptic terminals induce GABAA receptor clustering by independently controlling synaptic localization and surface stability of GABAA receptors. They also demonstrate a novel function for autophagy in GABAA receptor degradative trafficking.

Presynaptic terminals independently regulate synaptic clustering and autophagy of GABAA receptors in Caenorhabditis elegans.

Regroupement synaptique de r&#xE9;cepteurs GABA A est importante pour la fonction des synapses inhibitrices, influen&#xE7;ant la force des synapses et, par cons&#xE9;quent, le solde de l&#x26;#39;excitation et d&#x26;#39;inhibition dans le cerveau. Terminaisons pr&#xE9;synaptiques sont connues pour induire le regroupement du r&#xE9;cepteur GABAA pendant la synaptogen&#xE8;se, mais les m&#xE9;canismes de formation de grappes et d&#x26;#39;entretien ne sont pas connus. Pour &#xE9;tudier comment les neurones pr&#xE9;synaptiques diriger la formation de grappes de r&#xE9;cepteurs GABA A, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; la localisation du r&#xE9;cepteur GABAA dans les cellules post-synaptiques qui ne re&#xE7;oivent pas les contacts pr&#xE9;synaptiques dans Caenorhabditis elegans. Muscles postsynaptiques chez C. elegans recevoir l&#x26;#39;ac&#xE9;tylcholine et l&#x26;#39;innervation motrice du GABA, et GABAA r&#xE9;cepteurs de cluster en face terminaux GABA. La perte s&#xE9;lective des entr&#xE9;es GABA caus&#xE9; des r&#xE9;cepteurs GABA A &#xE0; diffuse distribu&#xE9;s &#xE0; ou pr&#xE8;s de la surface de la cellule musculaire, confirmant que le GABA terminaisons pr&#xE9;synaptiques induire le regroupement du r&#xE9;cepteur GABAA. En revanche, la perte s&#xE9;lective de l&#x26;#39;innervation ac&#xE9;tylcholine n&#x26;#39;a eu aucun effet sur la localisation du r&#xE9;cepteur GABAA. Toutefois, la perte des deux entr&#xE9;es du GABA et l&#x26;#39;ac&#xE9;tylcholine ainsi caus&#xE9; des r&#xE9;cepteurs GABA A &#xE0; la circulation &#xE0; autophagosomes intracellulaires. Autophagosomes normalement transporter en vrac cytoplasme vers le lysosome de la d&#xE9;gradation. Cependant, nous montrons que GABAA r&#xE9;cepteurs trafic vers autophagosomes apr&#xE8;s l&#x26;#39;enl&#xE8;vement d&#x26;#39;endocytose de la surface de la cellule et que les r&#xE9;cepteurs de l&#x26;#39;ac&#xE9;tylcholine dans les m&#xEA;mes cellules ne sont pas le trafic vers autophagosomes. Ainsi, l&#x26;#39;autophagie peut d&#xE9;grader r&#xE9;cepteurs de surface cellulaire et peut le faire de mani&#xE8;re s&#xE9;lective. Nos r&#xE9;sultats montrent que les terminaux pr&#xE9;synaptiques induire le regroupement du r&#xE9;cepteur GABAA par contr&#xF4;ler ind&#xE9;pendamment la localisation synaptique et la stabilit&#xE9; de surface des r&#xE9;cepteurs GABA A. Ils d&#xE9;montrent &#xE9;galement une nouvelle fonction de l&#x26;#39;autophagie dans le trafic de r&#xE9;cepteur GABA d&#xE9;gradation.

Terminaisons pr&#xE9;synaptiques r&#xE9;gler ind&#xE9;pendamment le clustering Synaptic et autophagie des r&#xE9;cepteurs GABA A chez Caenorhabditis elegans

Synaptische clustering von GABAA-Rezeptoren ist wichtig f&uuml;r die Funktion der hemmenden Synapsen beeinflussen Synapse St&auml;rke und, folglich, das Gleichgewicht der Erregung und Hemmung im Gehirn. Pr&auml;synaptische Klemmen sind bekannterma&szlig;en Clusterbildung w&auml;hrend Synaptogenese GABAA-Rezeptor ausl&ouml;sen, aber die Mechanismen der Clusterbildung und Wartung sind nicht bekannt. Um direkte wie pr&auml;synaptischen Neuronen die Bildung des GABAA-Rezeptors Clustern zu studieren, haben wir GABAA-Rezeptor-Lokalisierung in postsynaptisches Zellen untersucht, die nicht in Caenorhabditis Elegans pr&auml;synaptischen Kontakte erhalten. Postsynaptisches Muskeln in C. Elegans erhalten, Acetylcholin und GABA motorische Innervation und GABAA-Rezeptoren cluster entgegengesetzte GABA-Klemmen. Selektive verursacht GABA Eing&auml;nge GABAA-Rezeptoren an oder nahe der Muskel-Zelloberfl&auml;che, best&auml;tigt, dass GABA pr&auml;synaptische Klemmen GABAA Rezeptor Clusterbildung induzieren diffus verteilt werden. Im Gegensatz dazu hatte selektiven Verlust von Acetylcholin Innervation keine Auswirkung auf GABAA-Rezeptor-Lokalisierung. Allerdings verursachte Verlust von GABA und Acetylcholin Eing&auml;nge zusammen GABAA-Rezeptoren-Datenverkehr an intrazellul&auml;re Autophagosomes. Autophagosomes transport normalerweise Massen Zytoplasma in das Lysosom Leistungsabfall. Allerdings zeigen wir diesen GABAA-Rezeptoren-Datenverkehr auf Autophagosomes nach endocytic Entfernung aus der Zelloberfl&auml;che und die Acetylcholin-Rezeptoren in denselben Zellen nicht zu Autophagosomes Verkehr. So Autophagy Zelloberfl&auml;che Rezeptoren beeintr&auml;chtigen kann und kann so gezielt tun. Unsere Ergebnisse zeigen, dass pr&auml;synaptische Klemmen GABAA-Rezeptor clustering von synaptischen Lokalisierung und Oberfl&auml;chen Stabilit&auml;t von GABAA-Rezeptoren unabh&auml;ngig voneinander Steuern bewegen. Sie zeigen auch eine neuartige Funktion f&uuml;r Autophagy GABAA-Rezeptor-Degradations-Handel.

Pr&auml;synaptische Klemmen Regeln unabh&auml;ngig synaptische clustering und Autophagy von GABAA-Rezeptoren im Fadenwurm Caenorhabditis Elegans.

Clustering sinaptica dei recettori GABAA &egrave; importante per la funzione della sinapsi inibitorie, influenzando forza sinapsi e, di conseguenza, l&#39;equilibrio di eccitazione e inibizione nel cervello. Presinaptiche terminali sono noti per indurre il recettore GABAA clustering durante pervasivi, ma non sono noti i meccanismi di formazione di cluster e di manutenzione. Per studiare come presinaptico neuroni direttamente la formazione del recettore GABAA dei cluster, abbiamo studiato localizzazione del recettore GABAA nelle cellule postsinaptiche che non riescono a ricevere contatti presinaptiche in Caenorhabditis elegans. Muscoli postsinaptici in c. elegans ricevano acetilcolina e innervazione motore GABA, e recettori GABAA cluster opposti GABA terminali. Perdita selettiva di ingressi GABA ha causato i recettori GABAA a essere diffusamente distribuiti presso o vicino la superficie della cellula muscolare, confermando che i terminali presinaptiche GABA inducono clustering di recettore GABAA. Al contrario, perdita selettiva di innervazione acetilcolina ha avuto alcun effetto sulla localizzazione del recettore GABAA. Tuttavia, perdita di ingressi sia GABA e acetilcolina insieme causato recettori GABAA verso il traffico intracellulare autophagosomes. Autophagosomes normalmente trasporto massa citoplasma al lisosoma per degradazione. Tuttavia, mostriamo quel traffico di recettori GABAA a autophagosomes dopo endocitico rimozione dalla superficie delle cellule e che i recettori dell&#39;acetilcolina nelle stesse cellule non il traffico autophagosomes. Cos&igrave;, autophagy pu&ograve; degradare recettori della superficie cellulare e pu&ograve; fare cos&igrave; in modo selettivo. I nostri risultati mostrano che terminali presinaptiche inducono il recettore GABAA clustering controllando in modo indipendente localizzazione sinaptica e la stabilit&agrave; superficiale dei recettori GABAA. Essi dimostrano anche una funzione di romanzo per autophagy in GABAA ricevitore traffico di degradazione.

Terminali presinaptiche regolano indipendentemente clustering sinaptica e autophagy dei recettori GABAA in Caenorhabditis elegans.

GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x5F37;&#x3055;&#x3068;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x8133;&#x5185;&#x306E;&#x8208;&#x596E;&#x3068;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x3001;&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x7AEF;&#x672B;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x6642;&#x306E;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x7DAD;&#x6301;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5C0E;&#x304F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x5B66;&#x3076;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7DDA;&#x866B;&#xFF08;Caenorhabditis elegans&#xFF09;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x9023;&#x7D61;&#x5148;&#x306E;&#x53D7;&#x4FE1;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002; C. elegans&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x7B4B;&#x8089;&#x306F;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;GABA&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x652F;&#x914D;&#x3057;&#x3001;GABA&#x306E;&#x7AEF;&#x5B50;&#x53CD;&#x5BFE;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x53D7;&#x4FE1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; GABA&#x5165;&#x529B;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;GABA&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x7AEF;&#x672B;&#x304C;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304C;&#x3073;&#x307E;&#x3093;&#x6027;&#x306B;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x914D;&#x5E03;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;GABA&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x5165;&#x529B;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x304C;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3078;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x30D0;&#x30EB;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x8F38;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x540C;&#x4E00;&#x30BB;&#x30EB;&#x5185;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3078;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x304C;&#x305D;&#x3046;&#x3067;&#x306A;&#x3044;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x305D;&#x306E;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x52A3;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x884C;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x7AEF;&#x672B;&#x304C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C40;&#x5728;&#x3068;&#x8868;&#x9762;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x7AEF;&#x672B;&#x304C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x7DDA;&#x866B;Caenorhabditis elegans&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

Agrupaci&#xF3;n sin&#xE1;ptica de los receptores GABA es importante para la funci&#xF3;n de las sinapsis inhibitorias, influyendo fuerza sinapsis y, en consecuencia, el saldo de la excitaci&#xF3;n y la inhibici&#xF3;n en el cerebro. Terminales presin&#xE1;pticos se sabe que inducen la agrupaci&#xF3;n GABAA receptor durante la sinaptog&#xE9;nesis, pero los mecanismos de formaci&#xF3;n de los cluster y el mantenimiento no se conocen. Para estudiar c&#xF3;mo las neuronas presin&#xE1;pticas dirigir la formaci&#xF3;n de grupos de receptores de GABA, hemos investigado la localizaci&#xF3;n GABAA receptor en las c&#xE9;lulas postsin&#xE1;pticas que no logran recibir contactos presin&#xE1;pticos en Caenorhabditis elegans. M&#xFA;sculos postsin&#xE1;pticos en C. elegans recibir la acetilcolina y la inervaci&#xF3;n motora de GABA y los receptores GABA grupo frente a la terminales de GABA. P&#xE9;rdida selectiva de GABA entradas causado los receptores GABA que se distribuye de manera difusa en la superficie o cerca de c&#xE9;lulas musculares, lo que confirma que GABA terminales presin&#xE1;pticos inducir agrupaci&#xF3;n receptores GABAA. En contraste, la p&#xE9;rdida selectiva de inervaci&#xF3;n acetilcolina no tuvo efecto sobre la localizaci&#xF3;n del receptor de GABA. Sin embargo, la p&#xE9;rdida de tanto GABA y acetilcolina entradas juntas causado los receptores GABA al tr&#xE1;fico de autofagosomas intracelulares. Autofagosomas normalmente transportan a granel citoplasma a los lisosomas para la degradaci&#xF3;n. Sin embargo, nos muestran que el tr&#xE1;fico de los receptores GABA de autofagosomas despu&#xE9;s de la eliminaci&#xF3;n endoc&#xED;tica de la superficie celular y que los receptores de acetilcolina en las mismas c&#xE9;lulas no el tr&#xE1;fico de autofagosomas. Por lo tanto, la autofagia puede degradar receptores de superficie celular y puede hacerlo de forma selectiva. Nuestros resultados muestran que las terminales presin&#xE1;pticas inducir a los receptores GABAA por la agrupaci&#xF3;n independiente para controlar la localizaci&#xF3;n sin&#xE1;ptica y la estabilidad de la superficie de los receptores GABA. Tambi&#xE9;n ponen de manifiesto una nueva funci&#xF3;n para la autofagia en el tr&#xE1;fico de receptor GABA degradaci&#xF3;n.

Terminales presin&#xE1;pticos Independientemente Regular agrupaci&#xF3;n Synaptic y la autofagia de los receptores GABA en Caenorhabditis elegans

GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x662F;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x548C;&#x5408;&#x6210;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x5173;&#x4E8E;&#x5BF9; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x884C;&#x52A8;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x77E5;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B; UNC 49 GABA &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x5BC6;&#x5207;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x70EF;&#x786B;&#x9178; (PS) &#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;UNC 49 &#x8F68;&#x8FF9;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x4E24;&#x79CD; GABA &#x53D7;&#x4F53;&#x4E9A;&#xFF0C;UNC 49B &#x548C; UNC-49 C&#x3002;UNC-49 C &#x662F;&#x5BF9; PS &#x654F;&#x611F;&#x4F46; UNC 49B &#x4E0D;&#x654F;&#x611F;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x6790;&#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#x548C;&#x53D7;&#x4F53;&#x542B;&#x5B9A;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E24;&#x4E2A;&#x533A;&#x57DF;&#x6240;&#x9700;&#x7684; PS &#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8DE8;&#x819C;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x6B8B;&#x7559;&#x91CF;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5BF9; PS&#x3001; &#x654F;&#x611F;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x672B;&#x5C3E;&#x7684; M2 &#x87BA;&#x65CB;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5E26;&#x7535;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x4E5F;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x989D;&#x5916;&#x7684; M1 &#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x76F8;&#x53CD; PS &#x4ECE;&#x6291;&#x5236;&#x5230;&#x53D7;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x589E;&#x5F3A;&#x3002;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684; M1 &#x57DF;&#x4E00;&#x822C;&#x5DF2;&#x5BF9;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5316;&#x5B66;&#x3001; &#x6697;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x53EF;&#x80FD;&#x5177;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x8C03;&#x89E3;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x884C;&#x52A8;&#x548C;&#x4E0D;&#x53D8;&#x6784;&#x8C03;&#x8282;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8DE8;&#x819C;&#x57DF;&#x4E2D;&#x6B8B;&#x7559;&#x8D4B;&#x4E88;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x70EF;&#x786B;&#x9178;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;

The GABA(A) receptor is a target of endogenous and synthetic neurosteroids. Little is known about the residues required for neurosteroid action on GABA(A) receptors. We have investigated pregnenolone sulfate (PS) inhibition of the Caenorhabditis elegans UNC-49 GABA receptor, a close homolog of the mammalian GABA(A) receptor. The UNC-49 locus encodes two GABA receptor subunits, UNC-49B and UNC-49C. UNC-49C is sensitive to PS but UNC-49B is not sensitive. By analyzing chimeric receptors and receptors containing site-directed mutations, we identified two regions required for PS inhibition. Four residues in the first transmembrane domain are required for the majority of the sensitivity to PS, but a charged extracellular residue at the end of the M2 helix also plays a role. Strikingly, mutation of one additional M1 residue reverses the effect of PS from an inhibitor to an enhancer of receptor function. Mutating the M1 domain had little effect on sensitivity to the inhibitor picrotoxin, suggesting that these residues may mediate neurosteroid action specifically, and not allosteric regulation in general.

Residues in the first transmembrane domain of the Caenorhabditis elegans GABA(A) receptor confer sensitivity to the neurosteroid pregnenolone sulfate.

Le r&eacute;cepteur GABA est une cible de neurosteroids endog&egrave;ne et synth&eacute;tique. On en sait peu sur les r&eacute;sidus requis pour neurost&eacute;ro&iuml;des action sur les r&eacute;cepteurs GABA. Nous avons &eacute;tudi&eacute; l&#39;inhibition de la pregnenolone sulfate (PS) du Caenorhabditis elegans r&eacute;cepteurs GABA UNC-49, un homologue proche du r&eacute;cepteur GABA chez les mammif&egrave;res. Le locus UNC-49 code de deux sous-unit&eacute;s de r&eacute;cepteurs de GABA, UNC-49 b et UNC - 49 C. UNC - 49 C est sensible au PS mais UNC-49 b n&#39;est pas sensible. En analysant les r&eacute;cepteurs chim&eacute;riques et r&eacute;cepteurs contenant des mutations dirig&eacute;e, nous avons identifi&eacute; deux r&eacute;gions requises pour l&#39;inhibition du PS. Quatre r&eacute;sidus dans le premier domaine transmembranaire sont requis pour la majorit&eacute; de la sensibilit&eacute; au PS, mais un r&eacute;sidu extracellulaire charg&eacute; &agrave; la fin de la spirale M2 joue &eacute;galement un r&ocirc;le. Remarquablement, mutation d&#39;un r&eacute;sidu suppl&eacute;mentaire de M1 inverse l&#39;effet du PS d&#39;un inhibiteur d&#39;un activateur de la fonction des r&eacute;cepteurs. La mutation du domaine de M1 avait peu d&#39;effet sur la sensibilit&eacute; &agrave; la picrotoxine inhibiteur, sugg&eacute;rant que ces r&eacute;sidus peuvent m&eacute;dier neurost&eacute;ro&iuml;des action sp&eacute;cifiquement et r&eacute;gulation allost&eacute;rique pas en g&eacute;n&eacute;ral.

R&eacute;sidus dans le premier domaine transmembranaire du r&eacute;cepteur GABA Caenorhabditis elegans conf&egrave;rent sensibilit&eacute; pour le sulfate de pr&eacute;gn&egrave;nolone neurost&eacute;ro&iuml;des.

Der GABA(A)-Rezeptor ist ein Ziel von endogenen und synthetischen Neurosteroids. Wenig bekannt &uuml;ber die R&uuml;ckst&auml;nde f&uuml;r die Neurosteroid Aktion am GABA(A) Rezeptoren erforderlich. Wir haben untersucht, Pregnenolone Sulfat (PS)-Hemmung der Fadenwurm Caenorhabditis elegans UNC-49 GABA-Rezeptor, eine enge Homolog des S&auml;ugetier-GABA(A) Rezeptors. Der UNC-49-Locus codiert zwei GABA-Rezeptor-Untereinheiten, UNC-49B und UNC - 49 C. UNC - 49 C reagiert empfindlich auf PS aber UNC-49B ist nicht empfindlich. Durch Analyse von Chim&auml;ren-Rezeptoren und Rezeptoren, die Site-verwiesene Mutationen enth&auml;lt, haben wir festgestellt, zwei Regionen, die f&uuml;r PS-Hemmung erforderlich. Vier R&uuml;ckst&auml;nde in die ersten Transmembranegebiet sind erforderlich f&uuml;r die Mehrheit der Empfindlichkeit zu PS, aber ein aufgeladener extrazellul&auml;rer R&uuml;ckstand am Ende der Helix M2 spielt auch eine Rolle. Auff&auml;llig ist, kehrt Mutation von einem zus&auml;tzlichen M1-R&uuml;ckstand die Auswirkungen der PS aus einen Inhibitor um ein Vergr&ouml;&szlig;erer Rezeptor-Funktion. Mutiert die M1-Dom&auml;ne hatte kaum Auswirkungen auf die Empfindlichkeit und die Hemmer Picrotoxin, darauf hindeutet, dass diese R&uuml;ckst&auml;nde Neurosteroid Aktion speziell vermitteln k&ouml;nnen und nicht allosterischer Verordnung im Allgemeinen.

R&uuml;ckst&auml;nde in die ersten Transmembranegebiet Caenorhabditis Elegans GABA(A) Rezeptors verleihen Sensibilit&auml;t f&uuml;r die Neurosteroid Pregnenolone Sulfat.

Il recettore GABA(A) &egrave; una destinazione di neurosteroids endogeni e sintetici. Poco si sa circa i residui necessari per neurosteroide azione sui recettori GABA(A). Abbiamo studiato inibizione di pregnenolone solfato (PS) di Caenorhabditis elegans del recettore GABA UNC-49, uno stretto omologo del recettore GABA(A) dei mammiferi. Il locus UNC-49 codifica due subunit&agrave; del recettore GABA, UNC-49B e UNC-49 C. UNC-49 C &egrave; sensibile al PS ma UNC-49B non &egrave; sensibile. Analizzando i recettori chimerici e recettori contenenti mutazioni sito-diretto, abbiamo identificato due regioni necessarie per inibizione di PS. Quattro residui del primo dominio transmembrana sono richiesti per la maggior parte della sensibilit&agrave; di PS, ma un residuo extracellulare caricato alla fine dell&#39;elica M2 svolge anche un ruolo. Sorprendentemente, mutazione di un residuo M1 aggiuntiva inverte l&#39;effetto del PS da un inibitore di un potenziatore della funzione del recettore. Mutando il dominio M1, ha avuto poco effetto sulla sensibilit&agrave; al picrotoxin inibitore, suggerendo che tali residui possono mediare neurosteroide azione specificamente e non allosterica in generale.

Residui nel primo dominio transmembrana del recettore Caenorhabditis elegans GABA(A) conferiscono sensibilit&agrave; per il neurosteroide pregnenolone solfato.

GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5408;&#x6210;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5C11;&#x3057;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DDA;&#x866B; UNC 49 GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x9589;&#x3058;&#x308B;&#x76F8;&#x540C;&#x306E;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B0;&#x30CD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x786B;&#x9178; (PS) &#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;UNC 49 &#x8ECC;&#x8DE1;&#x306F;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E; GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;UNC 49B &#x3068; UNC 49 C &#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;UNC 49 C &#x306F; PS &#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;UNC 49B &#x306F;&#x533A;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x6307;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;PS &#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A; 2 &#x3064;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; 4 &#x6B8B;&#x57FA;&#x304C; ps &#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3001;&#x5145;&#x96FB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x6B8B;&#x6E23; M2 &#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x7D42;&#x308F;&#x308A;&#x3082;&#x3001;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x3001;1 &#x8FFD;&#x52A0; M1 &#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;PS &#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x304B;&#x3089;&#x963B;&#x5BB3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3092;&#x53CD;&#x8EE2;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;M1 &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5909;&#x7570;&#x611F;&#x5EA6;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x30D4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3001;&#x30A2;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x52B9;&#x679C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x306B; &#x3002;

&#x7DDA;&#x866B;&#x7DDA;&#x866B; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6B8B;&#x7559;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30D7;&#x30EC;&#x30B0;&#x30CD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x3078;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x5354;&#x8B70;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB0B4; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; neurosteroids&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC791;&#xC740; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; neurosteroid &#xC791;&#xC5C5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; Caenorhabditis elegans UNC-49 GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC758; pregnenolone &#xD669;&#xC0B0; (PS) &#xC800;&#xD574;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. UNC 49 &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; &#xB450; GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; subunits&#xB97C; UNC 49b&#xC640; UNC-49 C &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. UNC-49 C PS&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; UNC 49B &#xAD6C;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Chimeric &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBC0F; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC10;&#xB3C5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC; PS &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; 4 &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; ps, &#xAC10;&#xB3C4;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; M2 &#xB098;&#xC120; &#xB05D;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xC804;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xCC0C; &#xAEBC; &#xAE30;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xAE30; &#xB9C9;&#xD788;&#xAC8C;, &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; M1 &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC99D;&#xAC15;&#xC5D0; PS&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB418;&#xB3CC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. M 1 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; picrotoxin, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; neurosteroid &#xC870;&#xCE58;&#xB97C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC911;&#xC7AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xBC0F; &#xD558;&#xC9C0; allosteric &#xADDC;&#xCE59;&#xC5D0; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xAC70;&#xC758; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC794;&#xB958;&#xBB3C; Caenorhabditis elegans GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBD80;&#xC5EC; neurosteroid pregnenolone &#xD669;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xAC10;&#xB3C4;.

El receptor GABA(A) es un objetivo de neuroesteroides end&oacute;genos y sint&eacute;ticos. Poco se sabe sobre los residuos para neuroesteroides acci&oacute;n sobre los receptores GABA(A). Hemos investigado inhibici&oacute;n de pregnenolona sulfato (PS) de los elegans de Caenorhabditis receptor de GABA UNC-49, un hom&oacute;logo cerca del receptor GABA(A) mam&iacute;fero. El lugar geom&eacute;trico de la UNC-49 codifica dos subunidades del receptor de GABA, UNC-49B y UNC - 49C. UNC - 49 C es sensible a PS pero UNC-49B no es sensible. Mediante el an&aacute;lisis de receptores quim&eacute;ricos y receptores que contienen mutaciones dirigida, se identificaron dos regiones necesarias para la inhibici&oacute;n de PS. Cuatro residuos en el primer dominio transmembrana son necesarios para la mayor&iacute;a de la sensibilidad al PS, sino un residuo extracelular cargado al final de la h&eacute;lice M2 tambi&eacute;n desempe&ntilde;a un papel. Sorprendentemente, la mutaci&oacute;n de un residuo adicional de M1 invierte el efecto de PS de inhibidor a un potenciador de la funci&oacute;n del receptor. Adquiera el dominio M1 tuvo poco efecto en la sensibilidad a la picrotoxin inhibidor, sugiriendo que estos residuos pueden mediar acci&oacute;n neuroesteroides espec&iacute;ficamente y Regulaci&oacute;n alost&eacute;rica no en general.

Residuos en el primer dominio transmembrana del receptor GABA(A) Caenorhabditis elegans confieren sensibilidad para el sulfato de pregnenolona neuroesteroides.

&#xC138;&#xD3EC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xBE44; &#xB300;&#xB7C9; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC775;&#xC219;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; autophagy &#xD2B9;&#xC815; &#xBCC0;&#xACBD; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Autophagy &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAE30;&#xD310; &#xC120;&#xD0DD; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC791; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC785;&#xC99D; &#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;. &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC120; &#xCDA9; &#xB958; Caenorhabditis elegans&#xC758; &#xC9C0;&#xAE08; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAE30;&#xD310; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; autophagy&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB0C5; presynaptic &#xC140; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; postsynaptic &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC5F0;&#xB77D; &#xC591;&#xC2DD;. &#xC774; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98;&#xB294; synaptically &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xC9C0; postsynaptic &#xC140;&#xC5D0; &#xBE44; &#xACC4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Presynaptic &#xC811;&#xCD09; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB41C; postsynaptic &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; autophagy &#xC720;&#xB3C4; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xD310; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xBD84;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;: &#xAC10;&#xB9C8;-aminobutyric &#xC0B0; &#xC720;&#xD615; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;), &#xC801;&#xBD84; &#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; autophagosomes&#xB97C; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xADF8; autophagy &#xC544;&#xC774;&#xB514;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC778; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD2B9;&#xC815; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC140; &#xAD6C;&#xC870; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xC791;&#xC758; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB0B4;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xAC00;&#xC838;&#xC62C; &#xC218; &#xC788;&#xB294;, &#xD2B9;&#xD788; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5;, &#xBD84;&#xD654; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACBD;&#xC6B0;&#xAC00; &#xB9CE;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Autophagy &#xD558; &#xC5EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xD615;&#xD0DC;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD615;&#xC131;.

&#x719F;&#x6089;&#x8702;&#x7A9D;&#x6750;&#x6599;&#x975E;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6279;&#x91CF;&#x964D;&#x89E3;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x81EA;&#x566C;&#x4E5F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E26;&#x6765;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x81EA;&#x566C;&#x5DF2;&#x63D0;&#x51FA;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x886C;&#x5E95;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x884C;&#x8FD9;&#x9879;&#x804C;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8BC1;&#x660E;&#x4E00;&#x76F4;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x4E00;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EBF;&#x866B;&#x73B0;&#x5728;&#x63D0;&#x4F9B;&#x57FA;&#x677F;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x81EA;&#x566C;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x5F53;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x4F34;&#x4FA3;&#x8054;&#x7CFB;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x8868;&#x5355;&#x3002;&#x6B64;&#x8054;&#x7CFB;&#x4EBA;&#x8BF1;&#x5BFC; synaptically &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5305;&#x542B;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3002;&#x5F53;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x63A5;&#x89E6;&#x88AB;&#x963B;&#x6B62;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x566C;&#x88AB;&#x5F15;&#x8D77;&#x3002;&#x57FA;&#x677F;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x663E;&#x7136;&#x5728;&#x6B64;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF1A; &gamma;-&#x6C28;&#x57FA;&#x4E01;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53; (GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#xFF09;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x578B;&#x79EF;&#x5206;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x88AB;&#x8D29;&#x8FD0;&#x5230; autophagosomes &#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x6784;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x60F3;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x81EA;&#x566C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7531;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x964D;&#x89E3;&#x5E26;&#x6765;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x884C;&#x4E3A;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5F80;&#x5F80;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x3001; &#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x5851;&#x9020;&#x7684;&#x81EA;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

In addition to its familiar role in non-selective bulk degradation of cellular material, autophagy can also bring about specific changes in the structure and function of cells. Autophagy has been proposed to operate in a substrate-selective mode to carry out this function, although evidence to demonstrate selectivity has been lacking. A recent study of synapse formation in the nervous system of the nematode Caenorhabditis elegans now provides experimental evidence for substrate-selective autophagy. Synapses form when presynaptic cells contact their postsynaptic partners during development. This contact induces the assembly of synaptically-localized protein complexes in the postsynaptic cell that contain scaffolding proteins and neurotransmitter receptors. When presynaptic contact was blocked, autophagy in the postsynaptic cell was induced. Substrate selectivity was evident in this system: the gamma-aminobutyric acid type A receptor (GABA(A) receptor), an integral-membrane neurotransmitter receptor, trafficked from the cell surface to autophagosomes. By contrast, the acetylcholine receptor, a structurally-similar neurotransmitter receptor, remained on the cell surface. This result provides experimental support for the idea that autophagy can bring about changes in cell structure and behavior by degrading specific cellular proteins, particularly cell surface receptors that are often important for regulating cell growth, differentiation and function.

Shaping cellular form and function by autophagy.

Outre son r&ocirc;le familier dans la d&eacute;gradation du mat&eacute;riel cellulaire en vrac non s&eacute;lectifs, autophagie peut aussi entra&icirc;ner des changements dans la structure et la fonction des cellules sp&eacute;cifiques. Autophagie a &eacute;t&eacute; propos&eacute; d&#39;&eacute;mettre un substrat s&eacute;lectif &agrave; exercer cette fonction, bien que les &eacute;l&eacute;ments de preuve pour d&eacute;montrer la s&eacute;lectivit&eacute; a fait d&eacute;faut. Une &eacute;tude r&eacute;cente de la formation des synapses dans le syst&egrave;me nerveux de la n&eacute;matode Caenorhabditis elegans maintenant fournit la preuve exp&eacute;rimentale de l&#39;autophagie substrat s&eacute;lectif. Les synapses se forment lorsque des cellules pr&eacute;synaptiques contacter leurs partenaires postsynaptiques au cours du d&eacute;veloppement. Ce contact provoque l&#39;assemblage des complexes de prot&eacute;ine synapses localis&eacute;e dans la cellule postsynaptique qui contiennent des prot&eacute;ines de l&#39;&eacute;chafaudage et les r&eacute;cepteurs de neurotransmetteurs. Lorsque le contact pr&eacute;synaptique a &eacute;t&eacute; bloqu&eacute;, autophagie dans la cellule postsynaptique est induite. S&eacute;lectivit&eacute; de substrat &eacute;tait &eacute;vidente dans ce syst&egrave;me : le type d&#39;acide gamma - aminobutyrique un r&eacute;cepteur (r&eacute;cepteur GABA), un r&eacute;cepteur neurotransmetteur integral membrane, traite &agrave; partir de la surface de la cellule &agrave; autophagosomes. En revanche, le r&eacute;cepteur de l&#39;ac&eacute;tylcholine, un r&eacute;cepteur neurotransmetteur structurellement similaires, est rest&eacute; &agrave; la surface cellulaire. Ce r&eacute;sultat fournit une prise en charge exp&eacute;rimentale pour l&#39;id&eacute;e que l&#39;autophagie peut apporter des changements dans la structure cellulaire et le comportement en d&eacute;gradant les prot&eacute;ines cellulaires sp&eacute;cifiques, notamment des r&eacute;cepteurs de surface qui sont souvent importants pour la r&eacute;gulation de la croissance cellulaire, la diff&eacute;renciation et la fonction de cellules.

Fa&ccedil;onner la forme cellulaire et la fonction par autophagie.

Zus&auml;tzlich zu den bekannten selektiven Massen Verschlechterung der zellularen Material bringen Autophagy auch &uuml;ber spezifische &Auml;nderungen in der Struktur und Funktion der Zellen. Autophagy wurde vorgeschlagen, in einem Substrat-selektiven Modus durchzuf&uuml;hren, diese Funktion zu betreiben, obwohl Beweise zeigen Selektivit&auml;t gefehlt hat. Eine aktuelle Studie der Synapse Bildung im Nervensystem der Fadenwurm Caenorhabditis Elegans jetzt bietet experimentelle Beweise f&uuml;r die Substrat-selektive Autophagy in Verbindung. Synapsen bilden sich, wenn pr&auml;synaptische Zellen w&auml;hrend der Entwicklung ihrer postsynaptisches Partner wenden. Dieser Kontakt induziert die Montage von synaptisch lokalisierte Proteinkomplexe in der postsynaptisches Zelle, die Neurotransmitter-Rezeptoren und Ger&uuml;stbau Proteine enthalten. Als pr&auml;synaptischen Kontakt blockiert wurde, war Autophagy in der postsynaptisches Zelle induziert. Substrat-Selektivit&auml;t, zeigte sich in diesem System: der Gamma - Aminobutters&auml;ure-Typ ein Rezeptor (GABA(A) Rezeptor), ein Integral-Membran Neurotransmitter-Rezeptor, Autophagosomes von der Zelloberfl&auml;che gehandelt. Im Gegensatz dazu blieb der Acetylcholinrezeptor, ein strukturell &auml;hnlichen Neurotransmitter-Rezeptor auf der Zelloberfl&auml;che. Dieses Ergebnis stellt experimentelle Unterst&uuml;tzung f&uuml;r die Idee, dass Autophagy kann &uuml;ber Ver&auml;nderungen in der Zellstruktur und Verhalten von erniedrigender spezifische zellul&auml;re Proteine, besonders Handy-Oberfl&auml;che Rezeptoren, die oft f&uuml;r die Regulierung der Zelle Wachstum, Differenzierung und Funktion wichtig sind.

Gestaltung von zellul&auml;ren Form und Funktion von Autophagy in Verbindung.

Oltre al suo ruolo familiare nella degradazione di massa non selettiva di materiale cellulare, autophagy possono anche portare cambiamenti specifici nella struttura e nella funzione delle cellule. Autophagy &egrave; stato proposto di operare in modalit&agrave; substrata selettiva per svolgere questa funzione, anche se prova a dimostrare la mancanza di selettivit&agrave;. Un recente studio di synapse formazione nel sistema nervoso del nematode elegans di Caenorhabditis ora fornisce un&#39;evidenza sperimentale per substrato selettivo autophagy. Sinapsi si formano quando le cellule presinaptiche loro interlocutori postsinaptica durante lo sviluppo. Questo contatto induce l&#39;assemblaggio dei complessi della proteina sinapticamente localizzata nella cellula postsinaptica che contengono proteine di ponteggi e recettori del neurotrasmettitore. Quando contatto presinaptica &egrave; stato bloccato, &egrave; stato indotto autophagy nella cellula postsinaptica. Selettivit&agrave; del substrato &egrave; stato evidente in questo sistema: l&#39;acido gamma - aminobutirrico tipo un recettore (GABA(A) receptor), un recettore di membrana integrale di neurotrasmettitore, trafficate dalla superficie delle cellule di autophagosomes. Al contrario, i recettori dell&#39;acetilcolina, un recettore del neurotrasmettitore strutturalmente simili, &egrave; rimasto sulla superficie della cellula. Questo risultato fornisce supporto sperimentale per l&#39;idea che autophagy pu&ograve; portare cambiamenti nella struttura delle cellule e comportamento degradando le proteine cellulari specifiche, particolarmente cellule recettori di superfici che spesso sono importanti per la regolazione della crescita cellulare, la differenziazione e la funzione.

Shaping forma cellulare e funzione di autophagy.

&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30FC;&#x6750;&#x6599;&#x306E;&#x975E;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x30D0;&#x30EB;&#x30AF;&#x52A3;&#x5316;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x304A;&#x306A;&#x3058;&#x307F;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3082;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x57FA;&#x677F;&#x9078;&#x629E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x304C;&#x4F5C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x793A;&#x3059;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x4ECA;&#x57FA;&#x677F;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;&#x9023;&#x7D61;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x9023;&#x7D61;&#x5148;&#x306F;&#x8DB3;&#x5834;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C40;&#x5728;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x63A5;&#x89E6;&#x304C;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x304C;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x57FA;&#x8CEA;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#xFF1A; &gamma;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x916A;&#x9178;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; &#xFF08;GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF09;&#x3001;&#x7A4D;&#x5206;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x6B8B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A2;&#x306F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x306A;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x7279;&#x5B9A;&#x7D30;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x884C;&#x52D5;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x30FB;&#x5206;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x591A;&#x3044;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x5668;&#x3092;&#x643A;&#x5E2F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B7;&#x30A7;&#x30FC;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;

Adem&aacute;s de su funci&oacute;n familiar en degradaci&oacute;n a granel no selectivo de material celular, autofagia tambi&eacute;n puede generar cambios espec&iacute;ficos en la estructura y funci&oacute;n de las c&eacute;lulas. Autofagia ha comenzado a funcionar en un modo selectivo de sustrato para llevar a cabo esta funci&oacute;n, aunque pruebas que demuestren la selectividad ha faltado. Un estudio reciente de sinapsis formaci&oacute;n en el sistema nervioso del nematodo Caenorhabditis elegans ahora proporciona la evidencia experimental para substrato selectiva autofagia. Las sinapsis se forman cuando las c&eacute;lulas presin&aacute;pticas p&oacute;ngase en contacto con sus socios postsin&aacute;pticas durante el desarrollo. Este contacto induce a la Asamblea de complejos de la prote&iacute;na CCIS localizados en la c&eacute;lula postsin&aacute;ptica que contienen prote&iacute;nas de andamiaje y receptores neurotransmisores. Cuando fue bloqueado contacto presin&aacute;ptico, se indujo autofagia en la c&eacute;lula postsin&aacute;ptica. Selectividad de substrato fue evidente en este sistema: el tipo de &aacute;cido gamma - aminobut&iacute;rico un receptor (receptor GABA(A)), un receptor de membrana integral neurotransmisor, traficada desde la superficie celular a autophagosomes. Por el contrario, el receptor de la acetilcolina, un receptor del neurotransmisor estructuralmente similares, permanec&iacute;a en la superficie celular. Este resultado proporciona soporte experimental para la idea que autofagia puede provocar cambios en la estructura celular y el comportamiento degradando prote&iacute;nas celulares espec&iacute;ficas, especialmente receptores de superficie que a menudo son importantes para regular el crecimiento celular, diferenciaci&oacute;n y funci&oacute;n de la c&eacute;lula.

Conformaci&oacute;n celular forma y funci&oacute;n de autofagia.

&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x662F;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x8C03;&#x8D28;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C; allosterically &#x89C4;&#x7BA1; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8DE8;&#x819C;&#x57DF; &#xFF08;M1&#xFF09; &#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x800C;&#x8A00;&#x975E;&#x5E38;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x8C03;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6B63;&#x5728;&#x7814;&#x7A76;&#x7531;&#x786B;&#x9178;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x7684; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#xFF0C;&#x70EF;&#x786B;&#x9178; (PS) &#x4E4B;&#x4E00;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x516D;&#x4E2A;&#x5DF2;&#x67E5;&#x660E;&#x7684; M1 &#x6B8B;&#x7559;&#x6291;&#x5236; UNC 49 GABA &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x662F;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x540C;&#x6E90;&#x7684;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x4ECE; homomeric GABA &#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x786B;&#x9178;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8131;&#x6C22;&#x8868;&#x96C4;&#x916E;&#x786B;&#x9178;&#x76D0; (DHEAS) UNC 49 GABA &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;DHEAS &#x7B49;&#x540C;&#x4E8E; PS &#x4E0D;&#x540C;&#x4E4B;&#x5904;&#x5728;&#x4E8E;&#x5B83;&#x542B;&#x6709;&#x7FB0;&#x57FA;&#x6C27;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728; C17 &#x4E0A;&#x6FC0;&#x7D20; D &#x73AF;&#x4E59;&#x9170;&#x57FA;&#x7EC4;&#x3002;UNC 49 &#x7A81;&#x53D8;&#x5F71;&#x54CD; PS &#x6291;&#x5236;&#x4E86;&#x5927;&#x81F4;&#x5E73;&#x884C;&#x5F71;&#x54CD; DHEAS&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x67D0;&#x4E9B; M1 &#x7A81;&#x53D8;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E0D;&#x540C;&#x5F71;&#x54CD; DHEAS &#x6BD4;&#x8FC8;&#x8003;&#x8651;&#xFF0C;&#x9996;&#x5148;&#xFF0C;D &#x73AF;&#x5305;&#x542B; PS &#x548C; DHEAS&#xFF0C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x7ED3;&#x6784;&#x6027;&#x5DEE;&#x5F02;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#xFF0C;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x6700;&#x5F3A;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4F4D;&#x963B;&#x6548;&#x5E94;&#x53EF;&#x80FD;&#x611F;&#x53D7;&#x5230;&#x5F53;&#x5730;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7ED3;&#x679C;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x6FC0;&#x7D20; D &#x73AF;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E; M1 &#x8054;&#x7CFB;&#x9644;&#x8FD1;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x5F88;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5F53;&#x524D;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x4EA4;&#x4E92; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E; pregnane &#x7684;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x6FC0;&#x7D20;&#x73AF;&#x7ED1;&#x5B9A; M1&#xFF0C;&#x800C; D &#x73AF;&#x7ED1;&#x5B9A; M4&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x7C7B;&#x4E0E; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;

&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x8131;&#x6C22;&#x8868;&#x96C4;&#x916E;&#x786B;&#x9178;&#x76D0;&#x548C;&#x70EF;&#x786B;&#x9178;&#x6291;&#x5236; UNC 49 GABA &#x53D7;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x5957;&#x5171;&#x540C;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x3002;

Neurosteroids are endogenous neuromodulators that bind and allosterically regulate GABA(A) receptors. Residues were recently identified in the first transmembrane domain (M1) of GABA(A) receptor subunits that are important for neurosteroid modulation. We are studying the inhibition of GABA(A) receptors by sulfated neurosteroids. One of these neurosteroid, pregnenolone sulfate (PS), depends on six identified M1 residues to inhibit the UNC-49 GABA receptor, a homomeric GABA receptor from Caenorhabditis elegans that is homologous to the mammalian GABA(A) receptor. Here, we investigate the inhibition of the UNC-49 GABA receptor by another sulfated neurosteroid, dehydroepiandrosterone sulfate (DHEAS). DHEAS is identical to PS except that it contains a carbonyl oxygen instead of an acetyl group at C17 on the steroid D ring. UNC-49 mutations that affect PS inhibition had broadly parallel effects on DHEAS, suggesting the two neurosteroids act through similar mechanisms. However, certain M1 mutations affected DHEAS differently than PS. Considering that first, the D ring contains the only structural difference between PS and DHEAS, and second, the strongest chemical and steric effects of a mutation are likely to be felt in the local environment of the altered residues, this result implies that the steroid D ring may contact M1 near the mutated residues. This possibility is interesting because current models of neurosteroid interactions with GABA(A) receptors, based on pregnane steroids, suggest that the steroid A ring binds M1, whereas the D ring binds M4. Our findings suggest that there may be considerable diversity in the way different classes of neurosteroids interact with GABA(A) receptors.

The neurosteroids dehydroepiandrosterone sulfate and pregnenolone sulfate inhibit the UNC-49 GABA receptor through a common set of residues.

Neurosteroids sont des neuromodulateurs endog&egrave;nes qui se lient et r&eacute;glementent fa&ccedil;on allost&eacute;rique des r&eacute;cepteurs GABA. Les r&eacute;sidus ont &eacute;t&eacute; r&eacute;cemment identifi&eacute;s dans le premier domaine transmembranaire (M1) des sous-unit&eacute;s de r&eacute;cepteurs GABA qui sont importantes pour la modulation des neurost&eacute;ro&iuml;des. Nous &eacute;tudions l&#39;inhibition des r&eacute;cepteurs GABA par neurosteroids sulfat&eacute;. Un des ces neurost&eacute;ro&iuml;des, sulfate de pr&eacute;gn&egrave;nolone (PS), d&eacute;pend de six identifi&eacute;s M1 r&eacute;sidus d&#39;inhiber les r&eacute;cepteurs GABA UNC-49, un r&eacute;cepteur homom&egrave;res GABA de Caenorhabditis elegans qui est homologues au r&eacute;cepteur GABA chez les mammif&egrave;res. Ici, nous &eacute;tudions l&#39;inhibition du r&eacute;cepteur GABA UNC-49 par un autre neurost&eacute;ro&iuml;des sulfat&eacute;e, le sulfate de d&eacute;hydro&eacute;piandrost&eacute;rone (DHEAS). DHEAS est identique &agrave; PS, sauf qu&#39;il contient un oxyg&egrave;ne carbonyle au lieu d&#39;un groupe ac&eacute;tyle &agrave; C17 sur le st&eacute;ro&iuml;de anneau en D. UNC-49 des mutations qui affectent l&#39;inhibition PS eu des effets globalement parall&egrave;les sur SDHEA, sugg&eacute;rant que les deux neurosteroids agissent par des m&eacute;canismes similaires. Toutefois, certaines mutations M1 touch&eacute;es DHEAS diff&eacute;remment que PS. consid&eacute;rant que le premier, l&#39;anneau D contient la diff&eacute;rence seulement structurelle entre PS et DHEAS et Deuxi&egrave;mement, les effets chimiques et st&eacute;riques plus forts d&#39;une mutation sont susceptibles de se manifester dans l&#39;environnement local des r&eacute;sidus modifi&eacute;s, ce r&eacute;sultat implique que l&#39;anneau de st&eacute;ro&iuml;de D peut contacter M1 pr&egrave;s les r&eacute;sidus mut&eacute;s. Cette possibilit&eacute; est int&eacute;ressante parce que les mod&egrave;les actuels des neurost&eacute;ro&iuml;des interactions avec des r&eacute;cepteurs GABA, bas&eacute;s sur les st&eacute;ro&iuml;des pr&eacute;gnane, sugg&egrave;rent que le st&eacute;ro&iuml;de un anneau lie M1, tandis que l&#39;anneau en D lie M4. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent qu&#39;il peut y avoir une diversit&eacute; consid&eacute;rable dans la fa&ccedil;on dont les diff&eacute;rentes classes de neurosteroids interagissent avec les r&eacute;cepteurs GABA.

Le sulfate de d&eacute;hydro&eacute;piandrost&eacute;rone neurosteroids et sulfate de pr&eacute;gn&egrave;nolone inhibent les r&eacute;cepteurs GABA UNC-49 gr&acirc;ce &agrave; un ensemble commun de r&eacute;sidus.

Neurosteroids sind endogene Neuromodulators, die binden und phosphorylierter GABA(A) Rezeptoren zu regulieren. R&uuml;ckst&auml;nde wurden vor kurzem in der ersten Transmembran-Dom&auml;ne (M1) GABA(A) Rezeptor-Untereinheiten identifiziert, die f&uuml;r Neurosteroid Modulation wichtig sind. Wir studieren die Hemmung der GABA(A)-Rezeptoren durch sulfatierte Neurosteroids. Einer der diese Neurosteroid, Pregnenolone Sulfat (PS), h&auml;ngt davon ab, sechs identifizierten M1-R&uuml;ckst&auml;nde den UNC-49 GABA-Rezeptor, ein Homomeric GABA-Rezeptor von Caenorhabditis Elegans zu hemmen, die an den S&auml;ugetier-GABA(A) Rezeptor Homolog ist. Hier untersuchen wir die Hemmung des UNC-49 GABA-Rezeptors durch ein anderes sulfatierte Neurosteroid, Dehydroepiandrosteron-Sulfat (DHEAS). DHEAS ist identisch mit PS, au&szlig;er dass es eine Carbonyl-Sauerstoff anstelle einer Acetylgruppe an C17 auf der Steroid-D-Ring enth&auml;lt. UNC-49-Mutationen, die PS-Hemmung beeinflussen hatte weitgehend parallele Auswirkungen auf DHEAS, was darauf hindeutet, dass die zwei Neurosteroids durch &auml;hnliche Mechanismen handeln. Jedoch bestimmte M1-Mutationen betroffen DHEAS anders als PS. in der Erw&auml;gung, dass zuerst der D-Ring enth&auml;lt den nur strukturellen Unterschied zwischen PS und DHEAS und zweitens d&uuml;rften die st&auml;rksten chemischen und sterische Effekte der Mutation zu sp&uuml;ren in der lokalen Umgebung der ver&auml;nderten R&uuml;ckst&auml;nde, dieses Ergebnis bedeutet, dass der Steroid D-Ring in der N&auml;he von mutierten R&uuml;ckst&auml;nde M1 wenden kann. Diese M&ouml;glichkeit ist interessant, weil die derzeitige Modelle Neurosteroid Interaktionen mit GABA(A)-Rezeptoren, die auf der Grundlage von Pregnane Steroide, zeigen, dass der Steroid Ring M1, bindet w&auml;hrend der D-Ring M4 bindet. Unsere Forschungsergebnisse legen nahe, dass es auch betr&auml;chtliche Unterschiede in der Art, wie verschiedene Klassen von Neurosteroids mit GABA(A) Rezeptoren interagieren.

Die Neurosteroids Dehydroepiandrosteron-Sulfat und Pregnenolone Sulfat hemmen den UNC-49 GABA-Rezeptor durch einen gemeinsamen Satz von R&uuml;ckst&auml;nden.

Neurosteroids sono neurotrasmettitori endogeni che legano e allosterically regolano i recettori GABA(A). Residui sono stati identificati recentemente nel primo dominio transmembrana (M1) della subunit&agrave; del recettore GABA(A) che sono importanti per la modulazione neurosteroide. Stiamo studiando l&#39;inibizione dei recettori GABA(A) da solfato neurosteroids. Uno di questi neurosteroide, pregnenolone solfato (PS), dipende da sei identificati M1 residui di inibire il recettore GABA UNC-49, un recettore GABA homomeric da Caenorhabditis elegans che &egrave; omologo al recettore GABA(A) dei mammiferi. Qui, indaghiamo l&#39;inibizione del recettore GABA UNC-49 da un altro neurosteroide solfato, Deidroepiandrosterone solfato (DHEAS). DHEAS &egrave; identico al PS tranne per il fatto che contiene un ossigeno carbonilico invece un gruppo acetile a C17 su steroide anello D. UNC-49 mutazioni che colpiscono l&#39;inibizione PS avevano effetti sostanzialmente paralleli su DHEAS, suggerendo che i due neurosteroids agiscono attraverso meccanismi simili. Tuttavia, alcune mutazioni M1 colpiti DHEAS diversamente rispetto PS. considerando che in primo luogo, l&#39;anello D contiene la differenza solo strutturale tra PS e DHEAS e in secondo luogo, gli effetti chimici e sterico pi&ugrave; forti di una mutazione sono suscettibili di essere sentito nell&#39;ambiente locale dei residui alterati, questo risultato implica che l&#39;anello steroide D pu&ograve; contattare M1 vicino i residui mutati. Questa possibilit&agrave; &egrave; interessante perch&eacute; i modelli attuali di neurosteroide interazioni con i recettori GABA(A), basati sugli steroidi pregnane, suggeriscono che un anello steroide associa M1, mentre l&#39;anello D lega M4. I nostri risultati suggeriscono che ci possono essere diversit&agrave; considerevole nel modo in diverse classi di neurosteroids interagiscono con i recettori GABA(A).

Il neurosteroids Deidroepiandrosterone solfato e pregnenolone solfato inibiscono il recettore GABA UNC-49 attraverso un set comune di residui.

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3001;&#x30A2;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30D6; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306F;&#x6700;&#x8FD1;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; (M1) &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x5909;&#x8ABF;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x52C9;&#x5F37;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF0C; &#x786B;&#x9178;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B0;&#x30CD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3; (PS) &#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E; UNC 49 GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x76F8;&#x540C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x7DDA;&#x866B;&#x304B;&#x3089; homomeric GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x516D;&#x3064;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306A; M1 &#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x786B;&#x9178;&#x5316;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A8;&#x30D4;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x30B5;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30C8; (DHEAS) UNC 49 GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C17 &#x306B;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x57FA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; D &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x7D20;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x9664;&#x3044;&#x3066; DHEAS PS &#x306B;&#x540C;&#x4E00;&#x3067;&#x3059;&#x3002;PS &#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B; UNC 49 &#x5909;&#x7570; DHEAS 2 &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x52D5;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5E83;&#x304F;&#x4E26;&#x5217;&#x52B9;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A; M1 &#x5909;&#x7570; DHEAS &#x7570;&#x306A;&#x308B; PS. &#x6700;&#x521D;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3057;&#x3066;&#x3082;&#x5F71;&#x97FF;&#x3001;D &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B; PS &#x3068; DHEAS&#x3001;&#x306E;&#x307F;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306B;&#x3001;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x6700;&#x5F37;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7ACB;&#x4F53;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; D &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; M1 &#x5909;&#x7570;&#x6B8B;&#x57FA;&#x8FD1;&#x508D;&#x9023;&#x7D61;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3059;&#x308B;&#x5909;&#x66F4;&#x5F8C;&#x306E;&#x6B8B;&#x6E23;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x3092;&#x611F;&#x3058;&#x305F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;D &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F; M4 &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E; &beta; &#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x5264;&#x3068;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; M1 &#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306F;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x591A;&#x69D8;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A8;&#x30D4;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x786B;&#x9178;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B0;&#x30CD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; UNC 49 GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Neurosteroids&#xB294; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; allosterically GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xB0B4; &#xC0DD; neuromodulators. &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; neurosteroid &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; subunits&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (M1)&#xC5D0; &#xCD5C;&#xADFC; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Sulfated neurosteroids, GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;. &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; neurosteroid pregnenolone &#xD669;&#xC0B0; (PS), UNC 49 GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xB3D9;&#xC885; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; Caenorhabditis elegans&#xC5D0;&#xC11C; homomeric GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; M1 &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB2E4;&#xB978; sulfated neurosteroid, dehydroepiandrosterone &#xD669;&#xC0B0; (DHEAS)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; UNC 49 GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; D &#xB9C1;&#xC5D0; c17&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xADF8;&#xB8F9; &#xB300;&#xC2E0; &#xB2D0; &#xC0B0;&#xC18C; &#xD3EC;&#xD568; DHEAS PS &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. PS &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xB294; UNC 49 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; DHEAS, &#xB450; neurosteroids &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD589;&#xB3D9; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCD1;&#xB82C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD2B9;&#xC815; M1 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB2E4;&#xB974;&#xAC8C; ps. &#xADF8; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xACE0;&#xB824; &#xBCF4;&#xB2E4; DHEAS&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; D &#xB9C1; &#xD3EC;&#xD568;&#xB9CC; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xCC28;&#xC774; PS&#xC640; DHEAS, &#xB458;&#xC9F8;, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD654;&#xD559; &#xBC0F; &#xC785;&#xCCB4; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; D &#xB9C1; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xADFC;&#xCC98; m 1&#xC744; &#xBB38;&#xC758;&#xD558;&#xC2E4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC758;&#xBBF8; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xB85C;&#xCEEC; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB290;&#xB084; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774;. Neurosteroid pregnane &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xBAA8;&#xB378; &#xC81C;&#xC548; D &#xB9C1; &#xACB0;&#xC18D; M4 &#xBC18;&#xBA74; &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xBC18;&#xC9C0; M1, &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC774; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; neurosteroids&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC758; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neurosteroids dehydroepiandrosterone &#xD669;&#xC0B0; &#xBC0F; pregnenolone &#xD669;&#xC0B0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xACF5;&#xD1B5; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; UNC 49 GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C;.

Neuroesteroides son neuromoduladores end&oacute;genos que se unen y allosterically regulan GABA(A) receptores. Residuos fueron identificados recientemente en el primer dominio transmembrana (M1) de subunidades del receptor GABA(A) que son importantes para la modulaci&oacute;n de neuroesteroides. Estamos estudiando la inhibici&oacute;n de los receptores GABA(A) por neuroesteroides sulfatada. Uno de estos neuroesteroides, pregnenolona sulfato (PS), depende de seis residuos identificados de M1 para inhibir el receptor GABA UNC-49, un receptor homomeric GABA de Caenorhabditis elegans que es hom&oacute;loga al receptor GABA(A) de mam&iacute;fero. Aqu&iacute;, investigamos la inhibici&oacute;n de los receptores de GABA UNC-49 por otro neuroesteroides sulfatada, sulfato de dehidroepiandrosterona (DHEAS). DHEA es id&eacute;ntico al PS salvo que contiene un ox&iacute;geno carbonilo en lugar de un grupo acetilo en C17 en el anillo en D del esteroide. UNC-49 mutaciones que afectan a la inhibici&oacute;n de la PS repercutido ampliamente paralelo de DHEAS, sugiriendo que los dos neuroesteroides act&uacute;an a trav&eacute;s de mecanismos similares. Sin embargo, ciertas mutaciones M1 afectaron DHEAS diferentemente que PS. teniendo en cuenta que primero, el anillo D contiene la diferencia s&oacute;lo estructural entre PS y DHEAS, y en segundo lugar, los efectos qu&iacute;micos y est&eacute;rico m&aacute;s fuertes de una mutaci&oacute;n est&aacute;n probable que se siente en el ambiente local de los residuos alterados, este resultado implica que el anillo esteroide D puede comunicarse con M1 cerca los residuos mutados. Esta posibilidad es interesante porque los modelos actuales de neuroesteroides interacciones con receptores GABA(A), partiendo de pregnano esteroides, sugieren que el esteroide un anillo une a M1, mientras que el anillo D une M4. Nuestros resultados sugieren que puede haber una considerable diversidad en la forma de diferentes clases de neuroesteroides interact&uacute;an con receptores GABA(A).

Los neuroesteroides dehidroepiandrosterona sulfato y sulfato de pregnenolona inhiben el receptor GABA UNC-49 a trav&eacute;s de un conjunto com&uacute;n de residuos.

&#x81EA;&#x566C;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7EE7;&#x7EED;&#x5411; accelerate,(1) &#x548C;&#x8BB8;&#x591A;&#x65B0;&#x79D1;&#x5B66;&#x5BB6;&#x56E0;&#x6B64;&#x8FDB;&#x5165;&#x8BE5;&#x9886;&#x57DF;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x8981;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E00;&#x7EC4;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x76D1;&#x6D4B;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684; macroautophagy &#x6807;&#x51C6;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5BA1;&#x67E5;&#x6240;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5DF2;&#x7528;&#x4E8E;&#x6B64;&#x76EE;&#x7684;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x3002;&#xFF08;2&#x3001; 3&#xFF09; &#x6709;&#x8BB8;&#x591A;&#x6709;&#x7528;&#x548C;&#x65B9;&#x4FBF;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x76D1;&#x89C6; macroautophagy &#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5176;&#x4ED6;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x5F88;&#x5C11;&#xFF0C;&#x6709;&#x5F88;&#x591A;&#x5173;&#x4E8E;&#x53EF;&#x63A5;&#x53D7;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x8861;&#x91CF; macroautophagy &#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3002;&#x9700;&#x8981;&#x5F3A;&#x8C03;&#x6307;&#x51FA;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x70B9;&#x662F; autophagosomes &#x7684;&#x76D1;&#x89C6;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4EBA;&#x6570;&#x8BE5;&#x63AA;&#x65BD;&#x901A;&#x8FC7;&#x81EA;&#x566C;&#x9014;&#x5F84; &#xFF1B; &#x901A;&#x91CF;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728; autophagosome &#x79EF;&#x7D2F;&#x7684; macroautophagy &#x4E2D;&#x7684;&#x5757;&#x9700;&#x8981;&#x533A;&#x522B;&#x4E8E;&#x5305;&#x542B;&#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#xFF0C;&#x5168;&#x529F;&#x80FD;&#x81EA;&#x566C;&#x548C;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53; &#xFF08;&#x5728;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;) &#x6216; (&#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x548C;&#x771F;&#x83CC;) &#x6CE1;&#x5185;&#x7684;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E00;&#x5957;&#x4F9B;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x51C6;&#x5219;&#x548C;&#x89E3;&#x91CA;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7531;&#x8C03;&#x67E5;&#x4EBA;&#x5458;&#x6B63;&#x5728;&#x8BD5;&#x56FE;&#x68C0;&#x67E5; macroautophagy &#x548C;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5BA1;&#x9605;&#x8005;&#x9700;&#x8981;&#x63D0;&#x4F9B;&#x73B0;&#x5B9E;&#x548C;&#x5408;&#x7406;&#x7684;&#x6279;&#x8BC4;&#xFF0C;&#x8C03;&#x67E5;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x6587;&#x4EF6;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x624D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x5957;&#x51C6;&#x5219;&#x4E0D;&#x662F;&#x8981;&#x5957;&#x516C;&#x5F0F;&#x5316;&#x7684;&#x89C4;&#x5219;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x90E8;&#x5206;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x7684;&#x8D28;&#x8BE2;&#x548C;&#x6B63;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F3A;&#x8C03;&#x4FDD;&#x8BC1;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E2A;&#x522B;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x90FD;&#x662F;&#x5728;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6700;&#x5408;&#x9002;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4F7F;&#x7528;&#x591A;&#x4E2A;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x81EA;&#x566C;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x76D1;&#x6D4B;&#x4E2D;&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x81EA;&#x566C;&#x7684;&#x89E3;&#x91CA;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x6307;&#x5357;&#x3002;

Research in autophagy continues to accelerate,(1) and as a result many new scientists are entering the field. Accordingly, it is important to establish a standard set of criteria for monitoring macroautophagy in different organisms. Recent reviews have described the range of assays that have been used for this purpose.(2,3) There are many useful and convenient methods that can be used to monitor macroautophagy in yeast, but relatively few in other model systems, and there is much confusion regarding acceptable methods to measure macroautophagy in higher eukaryotes. A key point that needs to be emphasized is that there is a difference between measurements that monitor the numbers of autophagosomes versus those that measure flux through the autophagy pathway; thus, a block in macroautophagy that results in autophagosome accumulation needs to be differentiated from fully functional autophagy that includes delivery to, and degradation within, lysosomes (in most higher eukaryotes) or the vacuole (in plants and fungi). Here, we present a set of guidelines for the selection and interpretation of the methods that can be used by investigators who are attempting to examine macroautophagy and related processes, as well as by reviewers who need to provide realistic and reasonable critiques of papers that investigate these processes. This set of guidelines is not meant to be a formulaic set of rules, because the appropriate assays depend in part on the question being asked and the system being used. In addition, we emphasize that no individual assay is guaranteed to be the most appropriate one in every situation, and we strongly recommend the use of multiple assays to verify an autophagic response.

Guidelines for the use and interpretation of assays for monitoring autophagy in higher eukaryotes.

La recherche dans l&#x26;#39;autophagie ne cesse de s&#x26;#39;acc&#xE9;l&#xE9;rer, (1) et comme un r&#xE9;sultat de nombreux scientifiques nouvelles entrent sur le terrain. En cons&#xE9;quence, il est important d&#x26;#39;&#xE9;tablir un ensemble standard de crit&#xE8;res pour la surveillance macro-autophagie dans diff&#xE9;rents organismes. Des examens r&#xE9;cents ont d&#xE9;crit la gamme d&#x26;#39;essais qui ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s &#xE0; cette fin. (2,3) Il existe de nombreuses m&#xE9;thodes utiles et pratiques qui peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s pour surveiller les macro-autophagie dans la levure, mais relativement peu dans des syst&#xE8;mes mod&#xE8;les d&#x26;#39;autres, et il ya beaucoup confusion au sujet des m&#xE9;thodes acceptables pour mesurer macro-autophagie chez les eucaryotes sup&#xE9;rieurs. Un point essentiel qui doit &#xEA;tre soulign&#xE9;, c&#x26;#39;est qu&#x26;#39;il ya une diff&#xE9;rence entre les mesures qui surveillent le nombre de autophagosomes par rapport &#xE0; ceux que le flux mesure par la voie de l&#x26;#39;autophagie, donc, un bloc de macro-autophagie qui r&#xE9;sulte en une accumulation autophagosome doit &#xEA;tre diff&#xE9;renci&#xE9;e de tirer pleinement fonctionnelle autophagie qui comprend la livraison &#xE0;, et la d&#xE9;gradation de l&#x26;#39;int&#xE9;rieur, les lysosomes (dans la plupart des eucaryotes sup&#xE9;rieurs) ou la vacuole (dans les plantes et les champignons). Ici, nous pr&#xE9;sentons un ensemble de lignes directrices pour la s&#xE9;lection et l&#x26;#39;interpr&#xE9;tation des m&#xE9;thodes qui peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s par les enqu&#xEA;teurs qui tentent d&#x26;#39;examiner les processus macro-autophagie et connexes, ainsi que par les examinateurs qui ont besoin de fournir des critiques r&#xE9;alistes et raisonnables de papiers qui enqu&#xEA;tent sur ces processus. Cet ensemble de directives n&#x26;#39;est pas cens&#xE9; &#xEA;tre un ensemble de formules de r&#xE8;gles, parce que les dosages appropri&#xE9;s d&#xE9;pendra en partie de la question pos&#xE9;e et le syst&#xE8;me utilis&#xE9;. En outre, nous soulignons qu&#x26;#39;aucun test individuel est assur&#xE9; d&#x26;#39;&#xEA;tre le plus appropri&#xE9; dans chaque situation, et nous recommandons fortement l&#x26;#39;utilisation de tests multiples de v&#xE9;rifier une r&#xE9;ponse autophagique.

Lignes directrices pour l&#x26;#39;utilisation et l&#x26;#39;interpr&#xE9;tation des dosages pour autophagie surveillance chez les eucaryotes sup&#xE9;rieurs

Forschung in Autophagy weiterhin accelerate,(1) und dadurch viele neue Wissenschaftler betreten das Feld. Dementsprechend ist es wichtig, eine Reihe von Kriterien f&uuml;r die &Uuml;berwachung von Macroautophagy in verschiedenen Organismen zu erreichen. Aktuelle Bewertungen haben die Proben beschrieben, die f&uuml;r diesen Zweck verwendet wurden.(2,3) Gibt es viele n&uuml;tzliche und praktische Methoden, die verwendet werden k&ouml;nnen, um Macroautophagy in der Hefe zu &uuml;berwachen, aber relativ wenige in anderen Modellsystemen, und es gibt viel Verwirrung in Bezug auf akzeptable Methoden zur Messung von Macroautophagy in den h&ouml;heren Eukaryotes. Ein wesentlicher Punkt, der betont werden muss ist, dass es ein Unterschied zwischen den Messungen, die den Nummern der Autophagosomes im Vergleich zu denen dieser Ma&szlig;nahme-Fluss durch den Autophagy Pathway &uuml;berwachen; Daher muss ein Block in Macroautophagy, die Ergebnisse in Autophagosomen Anh&auml;ufung von voll funktionsf&auml;higen Autophagy, die zum Lieferumfang und Verschlechterung in Lysosomen (in den meisten h&ouml;heren Eukaryotes) oder die Vakuole (in Pflanzen und Pilzen) unterschieden werden. Hier pr&auml;sentieren wir eine Reihe von Leitlinien f&uuml;r die Auswahl und Interpretation der Methoden, die verwendet werden k&ouml;nnen, durch Forscher, die versuchen, Macroautophagy und verwandte Prozesse zu untersuchen sowie durch Pr&uuml;fer, die m&uuml;ssen realistische und vern&uuml;nftige Kritiken von Papier bereitstellen, die diese Prozesse zu untersuchen. Dieser Satz von Leitlinien soll kein formelhaften Satz von Regeln, weil die entsprechenden Assays teilweise auf die Frage und das System verwendet wird. Dar&uuml;ber hinaus betonen wir, dass keine einzelne Assay ist garantiert das passende Produkt in jeder Situation, und wir empfehlen die Verwendung von mehreren Proben eine autophagic Antwort &uuml;berpr&uuml;fen.

Leitlinien f&uuml;r die Anwendung und Auslegung des Assays f&uuml;r die &Uuml;berwachung in den h&ouml;heren Eukaryotes Autophagy in Verbindung.

Ricerca in autophagy continua a accelerate,(1) e di conseguenza molti nuovi scienziati stanno entrando in campo. Di conseguenza, &egrave; importante stabilire un insieme di criteri per il monitoraggio macroautophagy in organismi differenti standard. Recensioni recenti hanno descritto la gamma di dosaggi che sono stati utilizzati per questo scopo.(2,3) Ci sono molti metodi utili e convenienti che possono essere utilizzati per monitorare macroautophagy in lievito, ma relativamente pochi in altri sistemi di modello, e c&#39;&egrave; molta confusione per quanto riguarda i metodi accettabili per misurare macroautophagy negli eucarioti superiori. Un punto chiave che deve essere sottolineato &egrave; che c&#39;&egrave; una differenza tra le misure che controllano i numeri di autophagosomes rispetto a quelle che misura flusso attraverso il pathway autophagy; cos&igrave;, un blocco in macroautophagy che si traduce in accumulo di autophagosome deve essere differenziato da autophagy completamente funzionale che comprende consegna e degradazione nei lisosomi (nella maggior parte dei eucarioti superiori) o il vacuolo (in piante e funghi). Qui di seguito, presentiamo una serie di linee guida per la selezione e l&#39;interpretazione dei metodi che possono essere utilizzati dagli investigatori che stanno cercando di esaminare macroautophagy e dei processi correlati, cos&igrave; come dai recensori che hanno bisogno di fornire critiche realistiche e ragionevole delle carte che studiare questi processi. Questa serie di linee guida non vuole essere una serie stereotipata di regole, perch&eacute; i dosaggi appropriati dipendono in parte la domanda e il sistema in uso. Inoltre, sottolineiamo che nessun dosaggio individuale &egrave; garantito per essere quello pi&ugrave; appropriato in ogni situazione, e si consiglia vivamente l&#39;uso di dosaggi multipli per verificare una risposta autophagic.

Linee guida per l&#39;uso e l&#39;interpretazione delle analisi per il monitoraggio autophagy negli eucarioti superiori.

&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x52A0;&#x901F;&#x3057;&#x7D9A;&#x3051;&#x3066;&#xFF08;1&#xFF09;&#x3001;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x79D1;&#x5B66;&#x8005;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x6E96;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3092;&#x8A18;&#x8F09;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#xFF08;2,3&#xFF09;&#x306F;&#x9175;&#x6BCD;&#x3067;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x304B;&#x3064;&#x4FBF;&#x5229;&#x306A;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x7CFB;&#x3067;&#x306F;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x305F;&#x304F;&#x3055;&#x3093;&#x3042;&#x308B;&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A31;&#x5BB9;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3002;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x70B9;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5BFE;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5024;&#x9593;&#x306E;&#x5DEE;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x306F;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#xFF09;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6DB2;&#x80DE;&#xFF08;&#x690D;&#x7269;&#x3084;&#x83CC;&#x985E;&#xFF09;&#x3067;&#x3001;&#x5185;&#x3078;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x52A3;&#x5316;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x4E26;&#x3073;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x305F;&#x8AD6;&#x6587;&#x306E;&#x73FE;&#x5B9F;&#x7684;&#x304B;&#x3064;&#x5408;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x6279;&#x8A55;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x3084;&#x89E3;&#x91C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E00;&#x9023;&#x306E;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3002;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304C;&#x6C42;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x304C;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x554F;&#x984C;&#x306B;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4E00;&#x9023;&#x306E;&#x6307;&#x91DD;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30EB;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5B9A;&#x578B;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x3042;&#x3089;&#x3086;&#x308B;&#x72B6;&#x6CC1;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4FDD;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x305A;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5F37;&#x304F;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x63A8;&#x5968;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3068;&#x89E3;&#x91C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;

Accelerate,(1) autophagy&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACC4;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xB9CE;&#xC740; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xACFC;&#xD559;&#xC790; &#xD544;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC785;&#xB825; &#xD558;&#xB294; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; macroautophagy&#xB97C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xC900;&#xC758; &#xD45C;&#xC900; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC911;&#xC694;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xB9AC;&#xBDF0;&#xB294;&#xC774; &#xBAA9;&#xC801;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB41C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;.(2, 3) &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; &#xD6A8; &#xBAA8;, macroautophagy &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xC720;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xD3B8;&#xB9AC;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC774;&#xBA70; &#xB192;&#xC740; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; macroautophagy&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300;&#xD558;&#xC5EC; &#xB9CE;&#xC740; &#xD63C;&#xB780;. &#xAC15;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xD575;&#xC2EC;&#xC740; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xB300; autophagosomes &#xC22B;&#xC790;; autophagy &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xADF8; &#xCE21;&#xC815; &#xC720;&#xB7C9; &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, macroautophagy autophagosome &#xB204;&#xC801; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xBE14;&#xB85D;, &#xBC30;&#xB2EC; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; autophagy&#xC640; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880; (&#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xB610;&#xB294; (&#xC2DD;&#xBB3C;&#xACFC; &#xACF0; &#xD321;&#xC774;)&#xC5D0; &#xACF5;&#xD3EC; &#xB0B4; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xD654; &#xB420; &#xD544;&#xC694;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD604;&#xC7AC; &#xC120;&#xD0DD; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xCE68;&#xC758; &#xC9D1;&#xD569; &#xBC0F; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xB17C;&#xBB38;&#xC758; &#xD604;&#xC2E4;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xD569;&#xB9AC;&#xC801;&#xC778; &#xBE44;&#xD310;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD574;&#xC57C; &#xD558;&#xB294; &#xAC80;&#xD1A0;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; macroautophagy &#xBC0F; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB824;&#xACE0; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xD574;&#xC11D;. &#xC774; &#xC77C;&#xB828;&#xC758; &#xC9C0;&#xCE68; formulaic &#xC77C;&#xB828;&#xC758; &#xADDC;&#xCE59;, &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAC8C; &#xC544;&#xB2D9;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC694;&#xCCAD;&#xC744; &#xBC1B;&#xACE0; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xC911;&#xC778; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAC15;&#xC870; &#xC544;&#xBB34; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;, &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC0C1;&#xD669;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC7A5; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; autophagic &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0AC;&#xC6A9;&#xACFC; &#xB192;&#xC740; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; autophagy &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xD574;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xCE68;.

La investigaci&#xF3;n en la autofagia se sigue acelerando, (1) y como resultado muchos nuevos cient&#xED;ficos est&#xE1;n entrando en el campo. En consecuencia, es importante establecer un conjunto est&#xE1;ndar de criterios para el seguimiento de macroautofagia en diferentes organismos. Revisiones recientes han descrito la gama de ensayos que se han utilizado para este prop&#xF3;sito. (2,3) Hay muchos m&#xE9;todos &#xFA;tiles y convenientes que pueden ser utilizados para controlar macroautofagia en la levadura, pero relativamente pocos en otros sistemas modelo, y hay mucho confusi&#xF3;n con respecto a los m&#xE9;todos aceptables para medir macroautofagia en eucariotas superiores. Un punto clave que debe hacerse hincapi&#xE9; es que hay una diferencia entre las mediciones que controlan los n&#xFA;meros de autofagosomas versus los que el flujo medida a trav&#xE9;s de la v&#xED;a de la autofagia, por lo que un bloque en macroautofagia que resulta en la acumulaci&#xF3;n autofagosomas necesita ser diferenciada de la plenamente funcional autofagia, que incluye la entrega a, y la degradaci&#xF3;n en el interior, los lisosomas (en la mayor&#xED;a de los eucariotas superiores) o la vacuola (en plantas y hongos). A continuaci&#xF3;n, presentamos un conjunto de directrices para la selecci&#xF3;n e interpretaci&#xF3;n de los m&#xE9;todos que pueden ser utilizados por los investigadores que est&#xE1;n tratando de examinar los procesos macroautofagia y afines, as&#xED; como por los cr&#xED;ticos que necesitan para proporcionar las cr&#xED;ticas realistas y razonables de los trabajos que investigan estos procesos. Este conjunto de directrices no est&#xE1; destinado a ser un conjunto de f&#xF3;rmulas de las normas, ya que los ensayos adecuados depender&#xE1; en parte de la pregunta que se hace y el sistema se est&#xE1; utilizando. Adem&#xE1;s, hacemos hincapi&#xE9; en que ning&#xFA;n ensayo individual se garantiza que sea el m&#xE1;s apropiado en cada situaci&#xF3;n, y le recomendamos el uso de m&#xFA;ltiples ensayos para comprobar una respuesta autofagia.

Directrices para el uso y la interpretaci&#xF3;n de la prueba de la autofagia de Vigilancia en eucariotas superiores

&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7; allosterically &#x8C03;&#x8282;&#x7A81;&#x89E6;&#x548C; extrasynaptic GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x65BD;&#x52A0;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x6548;&#x5E94;&#x3002;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x753E;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5982; 3alpha&#x3001; 21-dihydroxy-5beta-pregnan-20-one (5alpha&#xFF0C;3alpha-THDOC)&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0E;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x53E3;&#x888B;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E2D;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x548C;&#x7B2C;&#x56DB;&#x8DE8;&#x819C;&#x5B88;&#x6052;&#x6B8B;&#x7559; &#xFF08;TM&#xFF09; &#x4EA4;&#x4E92;&#x7684; alpha &#x4E9A;&#x57FA;&#x57DF;&#x60A3;&#x75C5; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5176;&#x4ED6;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x70EF;&#x786B;&#x9178; (PS)&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x901A;&#x8FC7; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;-&#x4E0D;&#x660E;&#x7684;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E; UNC 49 GABA &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;a GABA (A) PS &#x6291;&#x5236;&#x7814;&#x7A76;&#x7684; PS &#x6291;&#x5236;&#x673A;&#x5236;-&#x50CF;&#x4ECE;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x5728; UNC-49&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7A81;&#x53D8;&#x539F;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; 1 19 &#x6B8B;&#x7559;&#x90E8;&#x5206;&#x4EE5;&#x589E;&#x52A0;&#x6216;&#x51CF;&#x5C0F; PS &#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x5728; 20-fold &#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x3002;&#x51FA;&#x4EBA;&#x610F;&#x6599;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4EE3;&#x4EE5;&#x8FD9;&#x4E9B; UNC 49 &#x5E8F;&#x5217;&#x5230;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684; alpha(1)&#xFF0C;beta(2) &#x548C; gamma(2) &#x4E9A;&#x57FA;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EA7;&#x751F;&#x5BF9; PS &#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x4EA7;&#x751F;&#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#x7684;&#x76F8;&#x5E94;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4E0D;&#x5B88;&#x6052;&#x7684; PS &#x7ED1;&#x5B9A;&#x53E3;&#x888B;&#x5F62;&#x6210;&#x5728;&#x6B64;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;&#x5D4C;&#x5408; gamma2 &#x4E9A;&#x57FA;&#x9020;&#x6210; 5alpha&#xFF0C;3alpha-THDOC &#x957F;&#x65F6;&#x7A0B;&#x589E;&#x5F3A; &#xFF1B; &#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x7597;&#x6548;&#x4E8C;&#x3001; &#x81EA;&#x53D1;&#x6027;&#x6D47;&#x6CE8;&#x7684; alpha &#x6D4B;&#x8BD5;&#x7248; (6) (2) &#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x53D7;&#x4F53;&#x662F;&#x88AB; PS&#xFF0C;&#x963B;&#x6B62;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x5D4C;&#x5408; beta(2) &#x4E9A;&#x57FA; &#xFF1B;&#x7B2C;&#x4E09;&#xFF0C;&#x76F4;&#x63A5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x53D7; 5alpha alpha &#x6D4B;&#x8BD5;&#x7248; (6) (2) &#x4E09;&#x89D2;&#x4F53;&#xFF0C;3alpha THDOC &#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x5D4C;&#x5408; beta(2) &#x4E9A;&#x57FA;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x8C03;&#x5236;&#x548C;&#x76F4;&#x63A5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x975E; &alpha; &#x4E9A;&#x57FA;&#x4E3A;&#x65B0;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x5E76;&#x663E;&#x793A; &beta; &#x4E9A;&#x57FA;&#x539F;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; 1 &#x57DF;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53; GABA(A) extrasynaptic &#x7684;&#x81EA;&#x53D1;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x753E;&#x4F53;&#x8C03;&#x5236;&#x548C;&#x81EA;&#x53D1;&#x901A;&#x9053;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x8DE8;&#x819C;&#x57DF;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

Neurosteroids exert potent physiological effects by allosterically modulating synaptic and extrasynaptic GABA(A) receptors. Some endogenous neurosteroids, such as 3alpha, 21-dihydroxy-5beta-pregnan-20-one (5alpha, 3alpha-THDOC), potentiate GABA(A) receptor function by interacting with a binding pocket defined by conserved residues in the first and fourth transmembrane (TM) domains of alpha subunits. Others, such as pregnenolone sulfate (PS), inhibit GABA(A) receptor function through as-yet unidentified binding sites. Here we investigate the mechanisms of PS inhibition of mammalian GABA(A) receptors, based on studies of PS inhibition of the UNC-49 GABA receptor, a GABA(A)-like receptor from Caenorhabditis elegans. In UNC-49, a 19 residue segment of TM1 can be mutated to increase or decrease PS sensitivity over a 20-fold range. Surprisingly, substituting these UNC-49 sequences into mammalian alpha(1), beta(2), and gamma(2) subunits did not produce the corresponding effects on PS sensitivity of the resulting chimeric receptors. Therefore, it is unlikely that a conserved PS binding pocket is formed at this site. However we observed several interesting unexpected effects. First, chimeric gamma2 subunits caused increased efficacy of 5alpha, 3alpha-THDOC potentiation; second, spontaneous gating of alpha(6)beta(2)delta receptors was blocked by PS, and reduced by chimeric beta(2) subunits; and third, direct activation of alpha(6)beta(2)delta receptors by 5alpha, 3alpha-THDOC was reduced by chimeric beta(2) subunits. These results reveal novel roles for non-alpha subunits in neurosteroid modulation and direct activation, and show that the beta subunit TM1 domain is important for spontaneous activity of extrasynaptic GABA(A) receptors.

Multiple roles for the first transmembrane domain of GABAA receptor subunits in neurosteroid modulation and spontaneous channel activity.

Neurosteroids exercent des effets physiologiques puissants en modulant la fa&ccedil;on allost&eacute;rique des r&eacute;cepteurs GABA synaptiques et extrasynaptic. Certains neurosteroids endog&egrave;nes, tels que 3alpha, 21-dihydroxy-5beta-pregnan-20-one (5alpha, 3alpha-THDOC), potentialiser la fonction des r&eacute;cepteurs GABA en interagissant avec une poche de liaison d&eacute;finie par des r&eacute;sidus conserv&eacute;s dans le premier et le quatri&egrave;me transmembranaires (TM) domaines de sous-unit&eacute;s alpha. D&#39;autres, tels que le sulfate de pr&eacute;gn&egrave;nolone (PS), inhibent la fonction des r&eacute;cepteurs GABA par comme-sites de fixation non encore identifi&eacute;s. Ici, nous &eacute;tudions les m&eacute;canismes de l&#39;inhibition des r&eacute;cepteurs de GABA chez les mammif&egrave;res, bas&eacute;es sur des &eacute;tudes de l&#39;inhibition du r&eacute;cepteur GABA UNC-49, un GABA (A) PS PS-comme r&eacute;cepteur de Caenorhabditis elegans. Dans UNC-49, un segment de 19 r&eacute;sidus de TM1 peut &ecirc;tre mut&eacute; pour augmenter ou diminuer la sensibilit&eacute; du PS sur une plage de 20 fois. &Eacute;tonnamment, substituant ces s&eacute;quences de UNC-49 en alpha(1) chez les mammif&egrave;res, beta(2) et gamma(2) sous-unit&eacute;s ne produisent pas les effets correspondants sur la sensibilit&eacute; des r&eacute;cepteurs chim&eacute;riques qui en r&eacute;sulte du PS. Par cons&eacute;quent, il est peu probable qu&#39;une poche de liaison PS conserv&eacute;e est form&eacute;e &agrave; cet endroit. Cependant, nous avons observ&eacute; plusieurs effets inattendus int&eacute;ressants. Tout d&#39;abord, chim&eacute;rique gamma2 sous-unit&eacute;s caus&eacute; une efficacit&eacute; accrue du 5alpha, potentialisation 3alpha-THDOC ; Deuxi&egrave;mement, spontan&eacute;e, blocage de r&eacute;cepteurs alpha-delta (2) (6) b&ecirc;ta a &eacute;t&eacute; bloqu&eacute; par le PS et r&eacute;duit de sous-unit&eacute;s beta(2) chim&eacute;rique ; et Troisi&egrave;mement, activation de direct de r&eacute;cepteurs alpha-delta (6) b&ecirc;ta (2) par 5alpha, 3alpha-THDOC a &eacute;t&eacute; r&eacute;duit de sous-unit&eacute;s beta(2) chim&eacute;rique. Ces r&eacute;sultats r&eacute;v&egrave;lent de nouveaux r&ocirc;les pour les sous-unit&eacute;s non alphanum&eacute;riques dans la modulation des neurost&eacute;ro&iuml;des et activation directe et montrent que le domaine de TM1 sous-unit&eacute; b&ecirc;ta est important pour l&#39;activit&eacute; spontan&eacute;e des r&eacute;cepteurs de GABA extrasynaptic.

R&ocirc;les multiples pour le premier domaine transmembranaire des sous-unit&eacute;s du r&eacute;cepteur GABAA neurost&eacute;ro&iuml;des modulation et l&#39;activit&eacute; spontan&eacute;e.

Neurosteroids aus&uuml;ben potente physiologische Effekte von phosphorylierter moduliert synaptische und extrasynaptic GABA(A)-Rezeptoren. Einigen endogen Neurosteroids, z. B. 3alpha, 21-dihydroxy-5beta-pregnan-20-one (5alpha, 3alpha-THDOC), potenzieren GABA(A) Rezeptor-Funktion durch die Interaktion mit einer Bindung Tasche konservierten R&uuml;ckst&auml;nde in der ersten und vierten Transmembran definiert (TM) Dom&auml;nen alpha-Untereinheiten. Andere, wie Pregnenolone Sulfat (PS), hemmen GABA(A) Rezeptor-Funktion durch wie-bisher nicht identifizierten Bindungsstellen. Hier untersuchen wir die Mechanismen der PS-Hemmung der S&auml;ugetier-GABA(A)-Rezeptoren, die auf der Grundlage von Studien der PS-Hemmung des UNC-49 GABA-Rezeptors, GABA A-wie Rezeptor von Caenorhabditis Elegans. UNC-49 kann ein 19 R&uuml;ckstand-Segment der TM1 mutiert werden, erh&ouml;hen oder verringern PS-Empfindlichkeit &uuml;ber eine zwanzigfache Bereich. &Uuml;berraschenderweise ersetzen diese UNC-49-Sequenzen in S&auml;ugetieren alpha(1), beta(2) und gamma(2)-Untereinheiten produzieren nicht die entsprechenden Auswirkungen auf die PS-Empfindlichkeit der resultierenden Chim&auml;ren Rezeptoren. Daher ist es unwahrscheinlich, dass eine konservierte PS Bindung Tasche an diesem Aufstellungsort gebildet wird. Jedoch wir mehrere interessante unerwartete Effekte beobachtet. Erstens: Chim&auml;ren gamma2-Untereinheiten verursacht erh&ouml;hte Wirksamkeit von 5alpha, 3alpha-THDOC Potenzierung; zweite, spontane Anspritzung von alpha Beta (6) (2) Delta-Rezeptoren wurde blockiert von PS und um Chim&auml;ren beta(2) Untereinheiten reduziert; und drittens direkte Aktivierung von alpha (6) Beta (2)-Delta-Rezeptoren durch 5alpha, 3alpha-THDOC reduzierte sich um Chim&auml;ren beta(2) Untereinheiten. Diese Ergebnisse zeigen neuartige Rollen f&uuml;r nicht-Alpha-Untereinheiten in Neurosteroid Modulation und direkte Aktivierung und zeigen, dass die Beta-Untereinheit TM1-Dom&auml;ne f&uuml;r die spontane Aktivit&auml;t extrasynaptic GABA(A)-Rezeptoren wichtig.

Mehrere Rollen f&uuml;r die erste Transmembranegebiet GABAA-Rezeptor-Untereinheiten in Neurosteroid Modulation und spontane Channel-Aktivit&auml;ten.

Neurosteroids esercitano potenti effetti fisiologici allosterically modulando i recettori GABA(A) sinaptici ed extrasynaptic. Alcuni neurosteroids endogeni, quali 3alfa, 21-dihydroxy-5beta-pregnan-20-one (5alfa 3alfa-THDOC), potenziare la funzione del recettore GABA(A) interagendo con una tasca di associazione definita da residui conservati nel primo e quarto transmembrana (TM) domini di subunit&agrave; alfa. Altri, come il pregnenolone solfato (PS), inibiscono la GABA(A) funzione del recettore attraverso come-siti di legame ancora non identificato. Qui abbiamo indagare i meccanismi di inibizione dei recettori GABA(A) dei mammiferi, sulla base di studi di inibizione di PS del recettore GABA UNC-49, un GABA (A) PS-come recettore da Caenorhabditis elegans. UNC-49, un segmento 19 residuo di TM1 pu&ograve; essere mutato per aumentare o diminuire la sensibilit&agrave; PS sopra una gamma di fold. Sorprendentemente, sostituendo queste sequenze UNC-49 in mammiferi alpha(1), beta(2) e gamma(2) subunit&agrave; non hanno prodotto gli effetti corrispondenti sulla sensibilit&agrave; PS dei recettori chimerici risultanti. Pertanto, &egrave; improbabile che una tasca di associazione PS conservata &egrave; formata in questo sito. Tuttavia abbiamo osservato diversi interessanti effetti inattesi. In primo luogo, chimerico gamma2 subunit&agrave; causato maggiore efficacia della 5alfa, potenziamento 3alfa-THDOC; secondo, spontaneo gating di recettori di (2) delta alfa (6) beta &egrave; stato bloccato da PS e ridotto da subunit&agrave; beta(2) chimerico; e in terzo luogo, diretta attivazione di alfa (6) beta (2) delta recettori di 5alfa 3alfa-THDOC &egrave; stato ridotto da subunit&agrave; beta(2) chimerico. Questi risultati mostrano che il dominio di TM1 subunit&agrave; beta &egrave; importante per l&#39;attivit&agrave; spontanea dei recettori GABA(A) extrasynaptic e rivelano nuovi ruoli per le subunit&agrave; non-alfa in modulazione neurosteroide e attivazione diretta.

Pi&ugrave; ruoli per il primo dominio transmembrana delle subunit&agrave; del recettore GABAA neurosteroide modulazione e l&#39;attivit&agrave; spontanea del canale.

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30A2;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3001;3 &alpha;&#x3001;21-dihydroxy-5beta-pregnan-20-one &#x306A;&#x3069; &#xFF08;5 alpha&#x3001;3 &alpha; THDOC&#xFF09;, GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; &#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x3068; 4 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x4FDD;&#x5B58;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3001;&#x7D50;&#x5408;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8; &#xFF08;TM&#xFF09; &#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5897;&#x5F37;.&#x4ED6;&#x306E;&#x4EBA;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B0;&#x30CD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x786B;&#x9178; (PS) &#x306A;&#x3069;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;-&#x307E;&#x3060;&#x6B63;&#x4F53;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; PS &#x6291;&#x5236;&#x6027; GABA (A) UNC 49 GABA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E; PS &#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;-&#x7DDA;&#x866B;&#x304B;&#x3089;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x3002;UNC-49, TM1 &#x306E; 19 &#x6B8B;&#x6E23;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x7BC4;&#x56F2;&#x304C; 20 PS &#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x5897;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; UNC 49 &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E; alpha(1) &#x306B;&#x4EE3;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3001;beta(2)&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; gamma(2) &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x7D50;&#x679C;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E; PS &#x611F;&#x5EA6;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F; PS &#x7D50;&#x5408;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x4E88;&#x671F;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305A;&#x3001;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x306E; gamma2 &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; 5 alpha 3 &alpha;-THDOC &#x306E;&#x5897;&#x5F37;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306B;&#x3001;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1; (6) &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; (2) &#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B2;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x305F; PS &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x3001;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x306E; beta(2) &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;;&#x7B2C;&#x4E09;&#x306B;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; 5 alpha &#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; (6) (2) &#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 3 &alpha; THDOC &#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x306E; beta(2) &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; - &alpha; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x5909;&#x8ABF;&#x3068;&#x76F4;&#x63A5;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3001;&beta; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; TM1 &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E; GABA(A) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; GABAA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x5909;&#x8ABF;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x81EA;&#x767A;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x3002;

Neurosteroids allosterically &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC640; extrasynaptic GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC1C;&#xD718; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBD80; &#xC0DD; neurosteroids, 3alpha, 21-dihydroxy-5beta-pregnan-20-one &#xB4F1; (5alpha, 3alpha THDOC), &#xC54C;&#xD30C; subunits&#xC758; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBC0F; &#xB124; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC8FC;&#xBA38;&#xB2C8; (TM)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC57D;&#xD6A8;. &#xB2E4;&#xB978; &#xC0AC;&#xB78C;, pregnenolone &#xD669;&#xC0B0; (PS) &#xB4F1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5B5;&#xC81C;-&#xC544;&#xC9C1; &#xBBF8;&#xD655;&#xC778;&#xB41C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; PS PS &#xC5B5;&#xC81C; UNC 49 GABA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, GABA (A)&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC;-Caenorhabditis elegans&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC88B;&#xC544;&#xD55C;&#xB2E4;. UNC-49&#xC5D0;&#xC11C; 19 &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; TM1 20-fold &#xBC94;&#xC704; PS &#xAC10;&#xB3C4; &#xB298;&#xB9AC;&#xAC70;&#xB098; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; UNC 49 &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; alpha(1)&#xB85C; &#xB300;&#xCCB4;, beta(2), &#xBC0F; gamma(2) subunits &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC; chimeric &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C4; PS&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xB2F9; &#xD6A8;&#xACFC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; PS &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD3EC;&#xCF13;&#xC774;&#xC774; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xC740; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAD00;&#xCC30;. &#xCCAB;&#xC9F8;, chimeric gamma2 subunits &#xC778; 5alpha, 3alpha THDOC potentiation;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xD6A8;&#xB2A5; &#xCD94; &#xC2E0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; chimeric beta(2) subunits;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB458;&#xC9F8;, &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xAC8C;&#xC774;&#xD305; &#xC54C;&#xD30C; &#xBCA0;&#xD0C0; (6) (2) &#xB378;&#xD0C0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC14B;&#xC9F8;, &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811; 5alpha&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC54C;&#xD30C; &#xBCA0;&#xD0C0; (6) (2) &#xB378;&#xD0C0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; 3alpha THDOC chimeric beta(2) subunits &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBE44; &#xC54C;&#xD30C; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; neurosteroid &#xBCC0;&#xC870; &#xBC0F; &#xC9C1;&#xC811; &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; TM1 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC740; extrasynaptic GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC;.

GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; subunits neurosteroid &#xBCC0;&#xC870; &#xBC0F; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xCC44;&#xB110; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC5ED;&#xD560;.

Neuroesteroides ejercen potentes efectos fisiol&oacute;gicos modulando allosterically sin&aacute;ptica y extrasynaptic receptores de GABA(a). Algunos neuroesteroides end&oacute;genos, como 3alpha, 21-dihydroxy-5beta-pregnan-20-one (5, 3alpha-THDOC), potencian la funci&oacute;n del receptor GABA(A) interactuando con un bolsillo de Uni&oacute;n definido por residuos conservados en el primer y cuarto transmembrana (TM) dominios de subunidades alfa. Otros, tales como sulfato de pregnenolona (PS), inhiben la funci&oacute;n del receptor GABA(A) a trav&eacute;s de como-sitios de uni&oacute;n a&uacute;n no identificados. Aqu&iacute; investigamos los mecanismos de inhibici&oacute;n de PS de mam&iacute;feros receptores GABA(A), basado en estudios de la inhibici&oacute;n de los receptores de GABA UNC-49, GABA (A) PS-como receptor de Caenorhabditis elegans. En la UNC-49, un segmento de 19 residuos de TM1 puede ser transformado para aumentar o disminuir la sensibilidad del PS en una soluc&iacute;on gama. Sorprendentemente, sustituyendo estas secuencias de UNC-49 en mam&iacute;feros alfa, beta(2) y gamma(2) subunidades no produjo los efectos correspondientes en la sensibilidad de los receptores quim&eacute;ricos resultantes de PS. Por lo tanto, es poco probable que un bolsillo de uni&oacute;n conservado PS se forma en este sitio. Sin embargo, observamos varias interesantes efectos inesperados. En primer lugar, quim&eacute;rica gamma2 subunidades causaron mayor eficacia de 5, potenciaci&oacute;n 3alpha-THDOC; en segundo lugar, espont&aacute;nea que bloquean de alfa receptores de delta (2) (6) beta fue bloqueado por el PS y reduce la quim&eacute;rica beta(2) subunidades; y en tercer lugar, dirigir la activaci&oacute;n de los receptores alfa de la delta (6) beta (2) por 5, 3alpha-THDOC se redujo en subunidades beta(2) quim&eacute;rico. Estos resultados revelan nuevos roles para las subunidades no alfab&eacute;ticos en modulaci&oacute;n de neuroesteroides y activaci&oacute;n directa y demostraci&oacute;n que el dominio de TM1 de subunidad beta es importante para la actividad espont&aacute;nea de los receptores GABA(A) extrasynaptic.

M&uacute;ltiples funciones para el primer dominio transmembrana de subunidades de receptores GABAA en modulaci&oacute;n de neuroesteroides y actividad espont&aacute;nea del canal.

GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x8111;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x6B63;&#x7814;&#x7A76;&#x5728;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x4F7F;&#x7528;&#x9057;&#x4F20;&#x65B9;&#x6CD5; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3002;&#x6025;&#x6027;&#x66B4;&#x9732;&#x7684;&#x866B;&#x5B50;&#x5230; GABA(A) &#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x8548; hyperpolarizes &#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x762B;&#x75EA;&#x3002;&#x8815;&#x866B;&#x9002;&#x5E94;&#x540E;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x65F6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x663E;&#x793A;&#x4E0D;&#x534F;&#x8C03;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x4E0E;&#x51CF;&#x5C11; GABA &#x4FE1;&#x53F7;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x9002;&#x5E94;&#x671F;&#x95F4;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x5220;&#x9664;&#x4ECE;&#x7A81;&#x89E6; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x4E9A;&#x57FA; mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x7EF4;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD; (&#x676F;-5) &#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x8548;&#x66DD;&#x5149; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x6C34;&#x5E73;&#x5347;&#x9AD8;&#x3002;&#x5728;&#x9002;&#x5E94;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D7;&#x4F53;&#x88AB;&#x66F4;&#x6162;&#xFF0C;&#x9664;&#x53BB;&#xFF0C;&#x4F1A;&#x5806;&#x79EF;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x79EF;&#x6781;&#x4E3A;&#x665A; endosome &#x6807;&#x8BB0; GFP-RAB-7 &#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6162;&#x6027;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x66B4;&#x9732;&#x589E;&#x52A0;&#x5185;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x8D29;&#x8FD0; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7A81;&#x89E6; GABA(A) &#x53D7;&#x4F53;&#x6C34;&#x5E73;&#x964D;&#x4F4E;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7684; GABA &#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;

&#x89C4;&#x7BA1;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x8D29;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8C03;&#x8282; GABAA &#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x7684;&#x4E30;&#x5EA6;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

GABA(A) receptor plasticity is important for both normal brain function and disease progression. We are studying GABA(A) receptor plasticity in Caenorhabditis elegans using a genetic approach. Acute exposure of worms to the GABA(A) agonist muscimol hyperpolarizes postsynaptic cells, causing paralysis. Worms adapt after several hours, but show uncoordinated locomotion consistent with decreased GABA signaling. Using patch-clamp and immunofluorescence approaches, we show that GABA(A) receptors are selectively removed from synapses during adaptation. Subunit mRNA levels were unchanged, suggesting a post-transcriptional mechanism. Mutants with defective lysosome function (cup-5) show elevated GABA(A) receptor levels at synapses prior to muscimol exposure. During adaptation, these receptors are removed more slowly, and accumulate in intracellular organelles positive for the late endosome marker GFP-RAB-7. These findings suggest that chronic agonist exposure increases endocytosis and lysosomal trafficking of GABA(A) receptors, leading to reduced levels of synaptic GABA(A) receptors and reduced postsynaptic GABA sensitivity.

Regulated lysosomal trafficking as a mechanism for regulating GABAA receptor abundance at synapses in Caenorhabditis elegans.

Plasticit&#xE9; des r&#xE9;cepteurs GABA (A) est important &#xE0; la fois pour le fonctionnement du cerveau normal et progression de la maladie. Nous &#xE9;tudions GABA (A) la plasticit&#xE9; des r&#xE9;cepteurs dans Caenorhabditis elegans en utilisant une approche g&#xE9;n&#xE9;tique. L&#x26;#39;exposition aigu&#xEB; des vers &#xE0; l&#x26;#39;muscimol GABA agoniste (A) hyperpolarise cellules postsynaptiques, entra&#xEE;nant une paralysie. Worms adapter apr&#xE8;s plusieurs heures, mais montrent la locomotion coordination coh&#xE9;rente avec une diminution de signalisation GABA. Utilisation de patch-clamp et les approches d&#x26;#39;immunofluorescence, nous montrons que GABA (A) sont s&#xE9;lectivement les r&#xE9;cepteurs retir&#xE9; de synapses lors de l&#x26;#39;adaptation. Les niveaux d&#x26;#39;ARNm de sous-unit&#xE9;s &#xE9;taient inchang&#xE9;es, ce qui sugg&#xE8;re un m&#xE9;canisme post-transcriptionnel. Mutants avec fonction d&#xE9;fectueuse lysosome (tasse-5) montrent &#xE9;lev&#xE9;e GABA (A) des r&#xE9;cepteurs au niveau des synapses des niveaux avant l&#x26;#39;exposition muscimol. Au cours de l&#x26;#39;adaptation, ces r&#xE9;cepteurs sont &#xE9;limin&#xE9;s plus lentement et s&#x26;#39;accumulent dans les organites intracellulaires positives pour le marqueur fin endosome GFP-RAB-7. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;exposition chronique augmente le trafic agoniste endocytose et lysosomes de GABA (A) des r&#xE9;cepteurs, ce qui conduit &#xE0; des niveaux r&#xE9;duits de synaptiques GABA (A) des r&#xE9;cepteurs et la sensibilit&#xE9; postsynaptique GABA.

R&#xE9;glement&#xE9; le trafic lysosomal Comme un m&#xE9;canisme de r&#xE9;gulation Abondance r&#xE9;cepteur GABAA au niveau des synapses chez Caenorhabditis elegans

GABA(A) Rezeptor Plastizit&auml;t ist wichtig f&uuml;r beide normalen Gehirn Funktion und Krankheit Fortschreiten. Wir studieren GABA(A) Rezeptor Plastizit&auml;t in Caenorhabditis Elegans mit einem genetischen Ansatz. Akuter Exposition von W&uuml;rmern, die GABA(A) Agonisten Muscimol hyperpolarizes postsynaptisches Zellen, verursachen L&auml;hmung. W&uuml;rmer nach mehreren Stunden anzupassen, aber zeigen unkoordinierten Fortbewegung mit verminderte GABA-Signalisierung. Mit Patch-Clamp und Immunfluoreszenz-Ans&auml;tzen, zeigen wir, dass GABA(A) Rezeptoren bei Anpassung von Synapsen selektiv entfernt werden. Untereinheit mRNA-Stufen blieben unver&auml;ndert, einen Posttranskriptionale Mechanismus vorgeschlagen. Mutanten mit defekten Lysosom-Funktion (Pokal-5) zeigen erh&ouml;hten GABA(A) Rezeptor an Synapsen vor Muscimol. W&auml;hrend der Anpassung diese Rezeptoren werden langsamer entfernt, und sammeln sich in intrazellul&auml;ren Organellen positiv f&uuml;r den sp&auml;ten Endosom Marker GFP-RAB-7. Diese Forschungsergebnisse legen nahe, dass chronische Agonist Exposition Endozytose erh&ouml;ht und lysosomal Menschenhandel GABA(A) Rezeptoren, was zu reduzierten Ebenen der synaptischen GABA(A) Rezeptoren und postsynaptisches GABA-Empfindlichkeit reduziert.

Geregelt, lysosomale Menschenhandel als Mechanismus f&uuml;r die Regulierung der GABAA-Rezeptor-F&uuml;lle an Synapsen in Caenorhabditis Elegans.

Plasticit&agrave; del recettore GABA(A) &egrave; importante per entrambi progressione di malattia e funzione cerebrale normale. Stiamo studiando plasticit&agrave; del recettore GABA(A) in Caenorhabditis elegans utilizzando un approccio genetico. L&#39;esposizione acuta di vermi per il Muscimolo agonista GABA(A) hyperpolarizes cellule postsinaptiche, causando paralisi. Vermi adattano dopo diverse ore, ma Visualizza locomozione scoordinata coerente con segnalazione di GABA &egrave; diminuito. Utilizzando approcci di patch-clamp e immunofluorescenza, mostriamo che i recettori GABA(A) sono selettivamente rimosso dalla sinapsi durante l&#39;adattamento. Livelli di mRNA di subunit&agrave; erano invariati, suggerendo un meccanismo espresione. Mutanti con funzione difettosa lisosoma (Coppa-5) mostrano livelli elevati di recettori GABA(A) a sinapsi prima dell&#39;esposizione di Muscimolo. Durante l&#39;adattamento, questi recettori sono rimossi pi&ugrave; lentamente e si accumulano in organelli intracellulari positivi per il marcatore di fine endosoma GFP-RAB-7. Questi risultati suggeriscono che l&#39;esposizione cronica agonista aumenta endocitosi e traffico lisosomiale dei recettori GABA(A), portando a ridotti livelli di recettori GABA(A) sinaptici e ridotta sensibilit&agrave; GABA postsinaptici.

Regolato traffico lisosomiale come meccanismo per la regolazione della abbondanza del recettore GABAA a sinapsi in Caenorhabditis elegans.

GABA&#xFF08;A&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x8133;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x7DDA;&#x866B;Caenorhabditis elegans&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;GABA&#xFF08;&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; GABA&#xFF08;A&#xFF09;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E0;&#x30B7;&#x30E2;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x30EF;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x66B4;&#x9732;&#x306F;&#x3001;&#x9EBB;&#x75FA;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;hyperpolarizes&#x3002;&#x30EF;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x6570;&#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;GABA&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3068;&#x306E;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x307E;&#x3068;&#x307E;&#x308A;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;GABA&#xFF08;A&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x9664;&#x53BB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;mRNA&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x4E0D;&#x5909;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#xFF08;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;5&#xFF09;&#x524D;&#x30E0;&#x30B7;&#x30E2;&#x30FC;&#x30EB;&#x66DD;&#x9732;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;GABA&#x4E0A;&#x6607;&#xFF08;&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9069;&#x5FDC;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x3086;&#x3063;&#x304F;&#x308A;&#x3068;&#x9664;&#x53BB;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;GFP-RAB-7&#x967D;&#x6027;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x6162;&#x6027;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x66DD;&#x9732;&#x304C;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;GABA&#xFF08;A&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;GABA&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x6E1B;&#x5C11;&#x611F;&#x5EA6;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;GABA&#xFF08;A&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3092;&#x5897;&#x5927;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7DDA;&#x866B;Caenorhabditis elegans&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;GABAA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x91CF;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;

GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC18C;&#xC131; &#xBAA8;&#xB450; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xB1CC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC18C;&#xC131; Caenorhabditis elegans &#xC720;&#xC804; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. GABA(A) &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; muscimol&#xC5D0; &#xBC8C;&#xB808;&#xC758; &#xAE09;&#xC131; &#xB178;&#xCD9C; hyperpolarizes postsynaptic &#xC140;, &#xB9C8;&#xBE44;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294;. &#xBC8C;&#xB808; &#xBA87; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD6C4; &#xC801;&#xC751; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; uncoordinated &#xC6B4;&#xB3D9; &#xAC10;&#xC18C; GABA &#xC2E0;&#xD638; &#xC77C;&#xCE58; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xBC0F; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xC801;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xAC70; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; mRNA &#xC218;&#xC900; &#xBCC0;&#xACBD;, post-transcriptional &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880; &#xAE30;&#xB2A5; (5 &#xCEF5;)&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; muscimol &#xB178;&#xCD9C; &#xC804;&#xC5D0; &#xB0C5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB808;&#xBCA8; &#xBCF4;&#xAE30;. &#xC801;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB354; &#xB290;&#xB9AC;&#xAC8C; &#xC81C;&#xAC70; &#xB418; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; organelles &#xD6C4;&#xBC18; endosome &#xB9C8;&#xCEE4; GFP-&#xB7A9;-7&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778;&#xC5D0; &#xB204;&#xC801; &#xB420;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9CC;&#xC131; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xB178;&#xCD9C; &#xC99D;&#xAC00; endocytosis&#xC640; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; lysosomal &#xBC00;&#xB9E4; &#xB808;&#xBCA8; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; GABA(A) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; postsynaptic GABA &#xAC10;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

GABAA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; Caenorhabditis elegans&#xC5D0; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC73C;&#xB85C; lysosomal &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4; &#xADDC;&#xC81C;.

GABA (A) la plasticidad del receptor es importante para la funci&#xF3;n normal del cerebro y la progresi&#xF3;n de la enfermedad. Estamos estudiando el GABA (A) del receptor de la plasticidad en el Caenorhabditis elegans utilizando un enfoque gen&#xE9;tico. La exposici&#xF3;n aguda de los gusanos a la muscimol agonista GABA (A) hiperpolariza las c&#xE9;lulas postsin&#xE1;pticas, causando par&#xE1;lisis. Worms adaptarse despu&#xE9;s de varias horas, pero muestran la locomoci&#xF3;n coordinada coherente con una disminuci&#xF3;n de GABA se&#xF1;alizaci&#xF3;n. Uso de patch-clamp y los enfoques de inmunofluorescencia, nos muestran que GABA (A) son eliminados selectivamente los receptores de las sinapsis durante la adaptaci&#xF3;n. Los niveles de mRNA de subunidades se mantuvieron sin cambios, lo que sugiere un mecanismo post-transcripcional. Los mutantes con defectos de la funci&#xF3;n de los lisosomas (Copa-5) que muestran una elevada GABA (A) los niveles de los receptores en las sinapsis antes de la exposici&#xF3;n muscimol. Durante la adaptaci&#xF3;n, estos receptores son removidas m&#xE1;s lentamente, y se acumulan en los organelos intracelulares positivos para el marcador a finales endosoma GFP-RAB-7. Estos hallazgos sugieren que la exposici&#xF3;n cr&#xF3;nica aumenta el tr&#xE1;fico de agonista endocitosis y los lisosomas de GABA (A), los receptores, dando lugar a niveles reducidos de sinapsis GABA (A) los receptores de GABA y disminuci&#xF3;n de la sensibilidad postsin&#xE1;ptica.

Article	Year
Pharmacological characterization of the homomeric and heteromeric UNC-49 GABA receptors in C. elegans. British journal of pharmacology\| PubMed ID: 12642390	2003
The composition of the GABA receptor at the Caenorhabditis elegans neuromuscular junction. British journal of pharmacology\| PubMed ID: 15655525	2005
Presynaptic terminals independently regulate synaptic clustering and autophagy of GABAA receptors in Caenorhabditis elegans. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience\| PubMed ID: 16467519	2006
Residues in the first transmembrane domain of the Caenorhabditis elegans GABA(A) receptor confer sensitivity to the neurosteroid pregnenolone sulfate. British journal of pharmacology\| PubMed ID: 16547524	2006
Shaping cellular form and function by autophagy. Autophagy\| PubMed ID: 16874044	2006
The neurosteroids dehydroepiandrosterone sulfate and pregnenolone sulfate inhibit the UNC-49 GABA receptor through a common set of residues. Molecular pharmacology\| PubMed ID: 17715402	2007
Guidelines for the use and interpretation of assays for monitoring autophagy in higher eukaryotes. Autophagy\| PubMed ID: 18188003	2008
Multiple roles for the first transmembrane domain of GABAA receptor subunits in neurosteroid modulation and spontaneous channel activity. Neuroscience letters\| PubMed ID: 20193738	2010
Regulated lysosomal trafficking as a mechanism for regulating GABAA receptor abundance at synapses in Caenorhabditis elegans. Molecular and cellular neurosciences\| PubMed ID: 20403442	2010

Bruce A. Bamber

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