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A New Screening Method for the Directed Evolution of Thermostable Bacteriolytic Enzymes

Directed evolution is defined as a method to harness natural selection in order to engineer proteins to acquire particular properties that are not ...

University of Maryland 

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x67E5;&#x660E; 12 &#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x4ECE;&#x9700;&#x8981;&#x6839;&#x7BA1;&#x6CBB;&#x7597;&#x7259;&#x9F7F;&#x6839;&#x7BA1;&#x548C;&#x4E2D;&#x91CD;&#x5EA6;&#x7684;&#x8FB9;&#x9645;&#x7259;&#x5468;&#x708E;&#xFF0C;&#x7259;&#x5468;&#x888B;&#x7684;&#x82BD;&#x5B62;&#x6746;&#x83CC;&#x5206;&#x79BB;&#x5E76;&#x786E;&#x5B9A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x79BB;&#x5C55;&#x51FA;&#x80DE;&#x5916;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x53CA;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x6D4B;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x662F;&#x5426;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6B64;&#x7C7B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x964D;&#x4F4E;&#x886C;&#x5E95;&#xFF0C;&#x5C06; pathophysiologically &#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x7259;&#x9AD3;&#x548C;&#x7259;&#x5468;&#x75C5;&#x53D8;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x548C;&#x78B3;&#x6C34;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x53D1;&#x9175;&#x6A21;&#x5F0F;&#x88AB;&#x7528;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x83CC;&#x682A;&#xFF0C;&#x9274;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E86;&#x5E94;&#x53D8; BJ0055 the16S rRNA &#x57FA;&#x56E0;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x4E00;&#x822C;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x5E95;&#x7269;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7B5B;&#x67E5;&#x6240;&#x6709;&#x83CC;&#x682A;&#x80DE;&#x5916;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x5206;&#x79BB;&#x682A;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x4EE3;&#x8868;&#x77ED;&#x5C0F;&#x82BD;&#x5B62;&#x548C;&#x6240;&#x6709;&#x5C55;&#x51FA;&#x80DE;&#x5916;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x80DE;&#x5916;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x5E94;&#x53D8; BJ0055 &#x6307;&#x8BA4;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x751F;&#x7406;&#x610F;&#x4E49;&#x88AB;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x80F6;&#x539F;&#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x53D1;&#x8272;&#x591A;&#x80BD;&#x3002;&#x53EF;&#x80FD;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x886C;&#x5E95;&#x4E0A;&#x884C;&#x4E8B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7C7B;&#x4F7F;&#x7528;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7C7B;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x6D3B;&#x52A8;-ph &#x503C;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x662F;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C; pH &#x503C;&#x7684;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x4E2D;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4E86; caseinolytic&#x3001; elastinolytic&#x3001; &#x80F6;&#x539F;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x915E;&#x80BD;&#x94FE;&#x5185;&#x5207;&#x9176;&#x6837;&#x4E19;&#x6C28; tripeptidyl &#x80BD;&#x9176;&#x6837;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x6CA1;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;-&#x548C;&#x7CDC;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6837;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x88AB;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#xFF0C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5728;&#x4E2D;&#x6027;&#x548C;&#x78B1;&#x6027;&#x7535;&#x6C60;&#x3001; &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5448;&#x9178;&#x6027;&#xFF0C;ph &#x503C;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;B.&#x77ED;&#x5C0F;&#x682A;&#x4ECE;&#x7259;&#x9AD3;&#x548C;&#x7259;&#x5468;&#x75C5;&#x53D8;&#x5C55;&#x793A;&#x4F1A;&#x964D;&#x4F4E;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x80F6;&#x539F;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x635F;&#x4F24;&#x5728;&#x6839;&#x5C16;&#x5468;&#x708E;&#x548C;&#x8FB9;&#x9645;&#x91CD;&#x5EA6;&#x7259;&#x5468;&#x708E;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;

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The purpose of the present study was to identify 12 Bacillus isolates that had been obtained from root canals of teeth requiring endodontic therapy and from periodontal pockets in severe marginal periodontitis, and to determine whether these isolates exhibited extracellular proteolytic activity and, using in vitro assays, whether any such activity could degrade substrates that would be pathophysiologically relevant with regard to the production of endodontic and periodontal lesions. Biochemical and carbohydrate fermentation patterns were used in the identification of all strains, which was confirmed by determination of the16S rRNA gene sequence for strain BJ0055. Screening for production of extracellular proteolytic activity by all strains was done with a general proteinase substrate. All isolates were identified as representing Bacillus pumilus and all exhibited extracellular proteolytic activity. The putative pathophysiological relevance of extracellular proteinase production in strain BJ0055 was assessed using fluorophore-labelled elastin and collagen and several chromogenic peptides. Probable classes of proteinases acting on each substrate were investigated using class-specific inhibitors. Activity-pH profiles were determined in buffers at different pH values. Extracellular activities that were caseinolytic, elastinolytic, collagenolytic, glutamyl endopeptidase-like, and alanyl tripeptidyl peptidase-like were observed. No trypsin-like activities were detected. Serine- and chymotrypsin-like serine proteinase activities were detected, with activity observed at neutral and alkaline, but not acidic, pH. B. pumilus strains isolated from endodontic and periodontal lesions exhibited extracellular activities that degrade elastin, collagen and other substrates. These activities may be virulence factors that contribute to tissue damage in apical periodontitis and severe marginal periodontitis.

Extracellular proteolytic activities expressed by Bacillus pumilus isolated from endodontic and periodontal lesions.

La pr&eacute;sente &eacute;tude visait &agrave; identifier 12 isolats de Bacillus qui avaient &eacute;t&eacute; obtenues par radiculaires des dents n&eacute;cessitant un traitement endodontique et poches parodontales en parodontite marginale s&eacute;v&egrave;re et pour d&eacute;terminer si ces isolats pr&eacute;sentaient une activit&eacute; prot&eacute;olytique extracellulaire et, &agrave; l&#39;aide de tests in vitro, si une telle activit&eacute; pourrait d&eacute;grader les substrats qui seraient pathophysiologically pertinentes en ce qui concerne la production de l&eacute;sions endodontiques et parodontales. Les patrons de fermentation biochimique et hydrates de carbone ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s dans l&#39;identification de toutes les souches, qui a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e par la d&eacute;termination de la s&eacute;quence du g&egrave;ne ARNr the16S de souche BJ0055. D&eacute;pistage de la production de l&#39;activit&eacute; prot&eacute;olytique extracellulaire par toutes les souches a &eacute;t&eacute; fait avec un substrat de prot&eacute;inase g&eacute;n&eacute;rales. Tous les isolats ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s comme repr&eacute;sentant de Bacillus pumilus et tous pr&eacute;sentaient une activit&eacute; prot&eacute;olytique extracellulaire. La pertinence physiopathologique putative de la production de prot&eacute;inase extracellulaire chez la souche BJ0055 a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e en utilisant marqu&eacute;s au fluorophore &eacute;lastine et de collag&egrave;ne et de plusieurs peptides chromog&egrave;ne. Classes probables des prot&eacute;inases agissant sur chaque substrat ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;s en utilisant des inhibiteurs sp&eacute;cifiques &agrave; la classe. Profils d&#39;activit&eacute;-pH ont &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;s dans les tampons &agrave; diff&eacute;rents pH. Activit&eacute;s extracellulaires qui &eacute;taient cas&eacute;inolytique, &eacute;lastinolytique, collag&eacute;nolytique, glutamyl endopeptidase semblable et alanyl tripeptidyl peptidase semblables ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;es. Aucune activit&eacute; trypsine ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;es. Activit&eacute;s de s&eacute;rine - et de la chymotrypsine-like s&eacute;rine prot&eacute;inases ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;es, activit&eacute; observ&eacute;e &agrave; un pH neutre et alcalin, mais pas acide. B. pumilus souches isol&eacute;es de l&eacute;sions endodontiques et parodontales expose les activit&eacute;s extracellulaires qui d&eacute;gradent le collag&egrave;ne, &eacute;lastine et autres substrats. Ces activit&eacute;s peuvent &ecirc;tre des facteurs de virulence qui contribuent aux dommages de tissu dans la parodontite apicale et la parodontite s&eacute;v&egrave;re marginale.

Activit&eacute;s prot&eacute;olytiques extracellulaires exprim&eacute;es par Bacillus pumilus isol&eacute;e de l&eacute;sions endodontiques et parodontales.

Der Zweck der vorliegenden Studie war 12 Bacillus-Isolate zu identifizieren, die von Wurzelkan&auml;le Z&auml;hne endodontische Therapie und parodontale Taschen in schweren marginale Parodontitis erhalten hatte, und um festzustellen, ob diese Isolate extrazellul&auml;re proteolytische Aktivit&auml;t und mit in-vitro-Tests, ausgestellt, ob eine solche Aktivit&auml;t Substrate beeintr&auml;chtigen k&ouml;nnte, die w&auml;re im Hinblick auf die Produktion von endodontischen und parodontale L&auml;sionen Pathophysiologisch relevante. Biochemische und Kohlenhydrat-G&auml;rung-Muster dienten bei der Identifizierung von allen St&auml;mmen, die durch Bestimmung der the16S rRNA-Gen-Sequenz f&uuml;r Stamm BJ0055 best&auml;tigt wurde. Screening f&uuml;r Produktion von extrazellul&auml;ren proteolytische Aktivit&auml;t durch alle St&auml;mme erfolgte mit einem allgemeinen Proteinase-Substrat. Alle Isolate wurden als Vertreter der Bacillus Pumilus identifiziert und alle ausgestellt extrazellul&auml;re proteolytische Aktivit&auml;t. Die vermeintliche pathophysiologische Relevanz der extrazellul&auml;ren Proteinase-Produktion in Stamm BJ0055 wurde anhand Fluorophore beschriftet Elastin und Kollagen und mehrere chromogene Peptide gepr&uuml;ft. Wahrscheinliche Klassen von Proteinasen, die auf jedes Substrat wurden mit klassenspezifische Hemmnissen untersucht. Aktivit&auml;t-pH-Profile wurden in Puffern bei verschiedenen pH-Werten bestimmt. Extrazellul&auml;re Aktivit&auml;ten, die Caseinolytic, Elastinolytic, Collagenolytic und Glutamyl Endopeptidase-wie Alanyl Tripeptidyl Peptidase-wie waren wurden beobachtet. Keine Trypsin-&auml;hnlichen Aktivit&auml;ten gefunden. Serin - und Chymotrypsin-wie Serin-Proteinase-Aktivit&auml;ten wurden erkannt, mit Aktivit&auml;t beobachtet bei neutralen und alkalischen, aber nicht sauer, pH. B. Pumilus-St&auml;mme isoliert von endodontischen und parodontale L&auml;sionen ausgestellt extrazellul&auml;re Aktivit&auml;ten, die Elastin, Collagen und anderen Substraten zu beeintr&auml;chtigen. Diese Aktivit&auml;ten m&ouml;glicherweise Virulenzfaktoren, die zu Gewebesch&auml;den im apikalen Parodontitis und schwere marginale Parodontitis beitragen.

Extrazellul&auml;re proteolytische Aktivit&auml;ten durch Bacillus Pumilus von endodontischen und parodontale L&auml;sionen isoliert ausgedr&uuml;ckt.

Lo scopo del presente studio era di identificare 12 isolati di Bacillus che erano stati ottenuti da canali radicolari dei denti che necessitano di terapia endodontica e da tasche parodontali in grave parodontite marginale e per determinare se questi isolati esposti attivit&agrave; proteolitica extracellulare e, mediante saggi in vitro, se tali attivit&agrave; potrebbe degradare substrati che sarebbero patofisiologico rilevanti per quanto riguarda la produzione di lesioni endodontiche e parodontali. Modelli di fermentazione biochimica e carboidrati sono stati utilizzati nell&#39;identificazione di tutti i ceppi, che &egrave; stata confermata dalla determinazione della sequenza di geni rRNA the16S per ceppo BJ0055. Lo screening per la produzione di attivit&agrave; proteolitica extracellulare da tutti i ceppi &egrave; stato fatto con un substrato di proteinasi generale. Tutti gli isolati sono stati identificati come rappresentante di Bacillus pumilus e tutte esposte attivit&agrave; proteolitica extracellulare. La rilevanza fisiopatologica putativa della produzione di proteinasi extracellulare nel ceppo BJ0055 &egrave; stata valutata utilizzando il fluoroforo etichettati elastina e collagene e diversi peptidi cromogeni. Probabile classi di proteinases agendo su ogni substrato sono state studiate utilizzando gli inibitori specifici della classe. Profili di attivit&agrave;-pH sono stati determinati in buffer a pH diversi. Attivit&agrave; extracellulare che erano tripeptidyl caseinolytic, elastinolytic, collagenolytic, glutamil endopeptidasi-like e alanil-peptidasi-come sono state osservate. Nessuna attivit&agrave; tripsina-come sono stati rilevati. Attivit&agrave; proteinasi della serina di Serina e chimotripsina-come sono state rilevate, con attivit&agrave; osservata a pH neutro e alcaline, ma non acide. B. pumilus ceppi isolati da lesioni endodontiche e parodontali esposte attivit&agrave; extracellulare che degrada l&#39;elastina, collagene e altri substrati. Queste attivit&agrave; possono essere fattori di virulenza che contribuiscono al danno tissutale in parodontite apicale e grave parodontite marginale.

Extracellulare attivit&agrave; proteolitica espressa da Bacillus pumilus isolato da lesioni endodontiche e parodontali.

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BJ0055 the16S rRNA &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5869;&#x57FA;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x83CC;&#x682A;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x83CC;&#x682A;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A3;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x83CC;&#x682A;&#x304C;&#x7D30;&#x83CC;&#x691C;&#x8A0E;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3072;&#x305A;&#x307F; BJ0055 &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x306E;&#x75C5;&#x614B;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x3068;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x767A;&#x8272;&#x6027;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5404;&#x57FA;&#x677F;&#x4E0A;&#x3092;&#x6F14;&#x6280;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x3042;&#x308A;&#x305D;&#x3046;&#x306A;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3; pH &#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x5225; pH &#x5024;&#x306E;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x3067;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Caseinolytic elastinolytic&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30EB; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30A2;&#x30E9;&#x30CB;&#x30EB;&#x3055;&#x3089;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E2D;&#x6027;&#x3068;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x9178;&#x6027; pH &#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x304C;&#x3001;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30AD;&#x30E2;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x69D8;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A3;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6B6F;&#x5185;&#x30FB;&#x6B6F;&#x5468;&#x75C5;&#x5909;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2; B. &#x691C;&#x8A0E;&#x682A;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x57FA;&#x677F;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x6839;&#x5C16;&#x6027;&#x6B6F;&#x5468;&#x708E;&#x3068;&#x91CD;&#x5EA6;&#x6B6F;&#x5468;&#x708E;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D44;&#x7E54;&#x640D;&#x50B7;&#x8CA2;&#x732E;&#x75C5;&#x539F;&#x56E0;&#x5B50;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6B6F;&#x5185;&#x30FB;&#x6B6F;&#x5468;&#x75C5;&#x5909;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x691C;&#x8A0E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8868;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3002;

&#xD604;&#xC7AC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; endodontic &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xCE58;&#xC544;&#xC758; &#xB8E8;&#xD2B8; &#xC6B4;&#xD558;&#xC640; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xD55C;&#xACC4; &#xCE58; &#xC8FC; &#xC5FC;, &#xCE58; &#xC8FC; &#xC8FC;&#xBA38;&#xB2C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xC654;&#xB2E4; 12 &#xADE0; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9; pathophysiologically endodontic &#xBC0F; &#xCE58; &#xC8FC; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xAD00;&#xB828; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD00;&#xB828; &#xAE30;&#xD310; &#xC800;&#xD558; &#xC5EC;&#xBD80; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC804;&#xC2DC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294;. &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; &#xBC0F; &#xD0C4;&#xC218;&#xD654;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xD6A8; &#xD328;&#xD134; &#xBCC0;&#xD615; BJ0055 the16S rRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC21C;&#xC11C; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC885;&#xC790;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2EC;&#xC0AC;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xBD84; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBD84;&#xB9AC; &#xADE0; pumilus &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC2DC;. Bj0055&#xC774; &#xD53C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC131;&#xBD84; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC758; putative pathophysiological &#xAD00;&#xB828;&#xC131; fluorophore &#xC154; &#xC11C; &#xC5D8;&#xB77C; &#xC2A4; &#xD2F4;&#xACFC; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xACFC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB358; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAC01; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; proteinases&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xB3D9;-pH &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xB2E4;&#xB978; pH &#xAC12;&#xC5D0; &#xBC84;&#xD37C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD65C;&#xB3D9; glutamyl endopeptidase &#xAC19;&#xC740;, caseinolytic, elastinolytic, collagenolytic, alanyl tripeptidyl peptidase &#xAC19;&#xC740; &#xD588;&#xB2E4; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB2C8; trypsin &#xAC19;&#xC740; &#xD65C;&#xB3D9; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC131; &#xBC0F; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC0B0; &#xC131; Ph&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xB294; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC73C;&#xB85C; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xBC0F; &#xBC94;&#xC6A9;&#xC131; &#xAC19;&#xC740; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD65C;&#xB3D9; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. B. pumilus &#xBCC0;&#xC885; endodontic &#xBC0F; &#xCE58; &#xC8FC; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; &#xC5D8;&#xB77C; &#xC2A4; &#xD2F4;, &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xACFC; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xD310; &#xC800;&#xD558; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xCE58; &#xC8FC; &#xC5FC; &#xBC0F; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xD55C;&#xACC4; &#xCE58; &#xC8FC; &#xC5FC;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xB294; &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9; &#xADE0; pumilus endodontic &#xBC0F; &#xCE58; &#xC8FC; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xD45C;&#xD604;.

El prop&oacute;sito del presente estudio fue identificar 12 cepas de Bacillus que hab&iacute;an sido obtenidos de conductos radiculares de dientes que requieren terapia endod&oacute;ntica y de bolsas periodontales en periodontitis marginal severo y para determinar si estos aislantes exhibieron actividad proteol&iacute;tica extracelular y con estudios in vitro, si dicha actividad podr&iacute;a degradar sustratos que ser&iacute;an patofisiol&oacute;gico pertinentes con respecto a la producci&oacute;n de lesiones periodontales y endod&oacute;nticas. Patrones de fermentaci&oacute;n de bioqu&iacute;micos y carbohidratos fueron utilizados en la identificaci&oacute;n de las cepas, que fue confirmada por la determinaci&oacute;n de la secuencia del gene del rRNA the16S cepa BJ0055. Proyecci&oacute;n para la producci&oacute;n de la actividad proteol&iacute;tica extracelular por todas las cepas se realiz&oacute; con un sustrato de proteinasa general. Todos los aislamientos fueron identificados como Bacilo pumilus y todos mostraron actividad proteol&iacute;tica extracelular. La relevancia patofisiol&oacute;gica putativa de producci&oacute;n proteinasa extracelular en la cepa BJ0055 se evalu&oacute; mediante marcada con fluor&oacute;foro elastina y col&aacute;geno y varios p&eacute;ptidos cromog&eacute;nicos. Probables clases de proteinasas actuando en cada sustrato fueron investigadas usando inhibidores espec&iacute;ficos de la clase. Perfiles de actividad-pH se determinaron en tampones con valores de pH diferentes. Se observaron actividades extracelulares que fueron caseinolytic, elastinolytic, partir y glutamil endopeptidasa-como alanil tripeptidil peptidasa-como. Se detectaron ninguna actividad de la tripsina. Serina - y quimotripsina-como Serina Proteinasa actividades fueron detectadas, con actividad observada en pH neutro y alcalino, pero no &aacute;cida. B. pumilus cepas aisladas de las lesiones periodontales y endod&oacute;nticas exhibieron actividades extracelulares que degradan la elastina, col&aacute;geno y otros sustratos. Estas actividades pueden ser factores de virulencia que contribuyen al da&ntilde;o tisular en periodontitis apical y periodontitis marginal severo.

Actividades proteol&iacute;ticas extracelulares expresadas por Bacilo pumilus aislado de las lesiones periodontales y endod&oacute;nticas.

&#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x7814;&#x7A76;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x7F16;&#x7801;&#xFF0C;&#x79EF;&#x7D2F;&#x5728;&#x88C2;&#x89E3;&#x611F;&#x67D3;&#x5468;&#x671F;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x80BD;&#x805A;&#x7CD6; (&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;) &#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x7684;&#x3002;&#x665A;&#x671F;&#x95F4;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x7814;&#x7A76;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x9E3F;&#x9716;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x6613;&#x4F4D;&#x8DE8;&#x5185;&#x88AB;&#x819C;&#x6210;&#x80BD;&#x805A;&#x7CD6;&#x77E9;&#x9635;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E13;&#x9760;&#x5899;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1; covalent &#x503A;&#x5238;&#x5E76;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x88C2;&#x89E3;&#x53CA;&#x5B50;&#x4EE3;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x8FD9;&#x70C8;&#x6027;&#x7684;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D3B;&#x52A8;&#x73B0;&#x5DF2;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9057;&#x4F20;&#x7B5B;&#x9009;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x548C;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x6EB6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x6EB6; PlyG&#xFF0C;&#x4ECE;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x611F;&#x67D3;&#x70AD;&#x75BD;&#x82BD;&#x5B62;&#x6746;&#x83CC;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9633;&#x6027;&#x673A;&#x4F53; &#xFF1B; &#x65B9;&#x6CD5;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8C03;&#x6574;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x514B;&#x9686;&#x3001; &#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x4ECE;&#x4EFB;&#x4F55;&#x611F;&#x67D3;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x7814;&#x7A76;&#x751A;&#x81F3;&#x53EF;&#x80FD;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9634;&#x6027;&#x83CC;&#x3002;

&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x7814;&#x7A76;&#x9057;&#x4F20;&#x5C4F;&#x5E55;&#x3002;

Lysins are phage-encoded, peptidoglycan (cell wall) hydrolases that accumulate in the bacterial cytoplasm during a lytic infection cycle. Late during infection, the lysins undergo holin-mediated translocation across the inner membrane into the peptidoglycan matrix where they cleave cell wall covalent bonds required for wall stability and allow bacterial lysis and progeny phage release. This potent hydrolytic activity is now the foundation of a powerful genetic-based screening process for the identification and analysis of phage lysin proteins. Here, we describe a method for identifying a lysin, PlyG, from a bacteriophage that specifically infects the Gram-positive organism Bacillus anthracis; however, the techniques described can be adapted to clone, express, and analyze lysins from any phage infecting Gram-positive bacteria or possibly even Gram-negative bacteria.

A genetic screen to identify bacteriophage lysins.

Bact&eacute;riophages sont cod&eacute;es en phage, hydrolases de peptidoglycane (pari&eacute;tal) qui s&#39;accumulent dans le cytoplasme bact&eacute;rien pendant un cycle d&#39;infection lytique. Tard au cours de l&#39;infection, les bact&eacute;riophages subissent une m&eacute;diation holin translocation &agrave; travers la membrane interne dans la matrice de peptidoglycane, o&ugrave; ils clivent pari&eacute;taux covalentes n&eacute;cessaires &agrave; la stabilit&eacute; du mur et permettent &agrave; la prog&eacute;niture et lyse bact&eacute;rienne phage s&#39;&eacute;chapper. Cette puissante activit&eacute; hydrolytique est maintenant le fondement d&#39;un processus de criblage g&eacute;n&eacute;tique puissant pour l&#39;identification et l&#39;analyse des prot&eacute;ines lysine phage. Nous d&eacute;crivons ici une m&eacute;thode pour identifier une lysine, PlyG, d&#39;un bact&eacute;riophage qui infecte sp&eacute;cifiquement l&#39;organisme Gram positif Bacillus anthracis ; Cependant, les techniques d&eacute;crites peuvent &ecirc;tre adapt&eacute;s &agrave; cloner, exprimer et analyser les bact&eacute;riophages de n&#39;importe quel phages infectant des bact&eacute;ries Gram-positives ou peut-&ecirc;tre m&ecirc;me des bact&eacute;ries &agrave; Gram n&eacute;gatif.

Un d&eacute;pistage g&eacute;n&eacute;tique pour identifier les bact&eacute;riophages bact&eacute;riophage.

Lysine sind Phage-codierte, Peptidoglycan (Zellwand)-HYDROLASEN ansammeln, die im bakteriellen Zytoplasma w&auml;hrend eines lytische Infektion. Sp&auml;t w&auml;hrend der Infektion unterziehen die lysine holin-vermittelte Translokation durch die innere Membran in die Peptidoglycan-Matrix, wo sie Zellwand kovalente Bindungen f&uuml;r die Stabilit&auml;t der Mauer zu Zerspalten und bakterielle Zerst&ouml;rung und Nachkommenschaft Phage Freigabe erlauben. Diese potente hydrolytische Aktivit&auml;t ist jetzt die Grundlage f&uuml;r eine starke genetische Grundlage Screening-Verfahren zur Identifizierung und Analyse der Phage Lysin Proteine. Hier beschreiben wir eine Methode zur Identifizierung einer Lysin, PlyG, aus einer Bakteriophage, der speziell die grampositive Organismus Bacillus Anthracis infiziert; Allerdings k&ouml;nnen die beschriebenen Techniken Klonen, express, und analysieren lysine aus jeder Phage gram-positiver Bakterien zu infizieren oder m&ouml;glicherweise sogar Gramnegative Bakterien angepasst werden.

Ein genetischer Schirm Bakteriophage lysine zu identifizieren.

Lysins sono codificati dei fagi, idrolasi peptidoglicano (parete cellulare) che si accumulano nel citoplasma batterico durante il ciclo di infezione litico. Ritardo durante l&#39;infezione, il lysins subire holin-mediata traslocazione attraverso la membrana interna nella matrice peptidoglicano dove cleave covalenti parete cellulare necessarie per la stabilit&agrave; del muro e consentire la progenie e lisi batterica dei fagi rilascio. Questa potente attivit&agrave; idrolitica &egrave; ora la Fondazione di un processo di screening genetico basato potente per l&#39;identificazione e l&#39;analisi delle proteine di lisina dei fagi. Qui, descriviamo un metodo per l&#39;identificazione di una lisina, PlyG, da un batteriofago che infetta in modo specifico l&#39;organismo Gram-positivo Bacillus anthracis; Tuttavia, le tecniche descritte possono essere adattate a clonare, esprimere e analizzare lysins da qualsiasi dei fagi che infettano i batteri Gram-positivi o forse anche batteri Gram-negativi.

Uno schermo genetico per identificare lysins del batteriofago.

&#x30A2;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; &#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7B26;&#x53F7;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3; (&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#xFF09; &#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x6EB6;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x4E2D;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F8C;&#x671F;&#x611F;&#x67D3;&#x4E2D;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; &#x30CF;&#x30EB;&#x30DB;&#x30EA;&#x30F3;&#x5A92;&#x4ECB;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x5185;&#x819C;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x58C1;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x5207;&#x65AD;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x63DB;&#x6563;&#x3068;&#x5B50;&#x5B6B;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x884C;&#x5217;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x540C;&#x5B9A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x57FA;&#x76E4;&#x3068;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;PlyG&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x967D;&#x6027;&#x83CC;&#x70AD;&#x75BD;&#x83CC;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3001;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B9;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x3069;&#x306E;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3067;&#x3082;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x967D;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6790;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3082;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x83CC;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x907A;&#x4F1D;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30A2;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Lysins &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;, peptidoglycan (&#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD;) hydrolases&#xB294; &#xC6A9;&#xADE0;&#xC131; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xB3D9;&#xC548; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xCD95;&#xC801;. &#xB2A6;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC5FC;, &#xC2DC;&#xB294; lysins &#xB0B4;&#xBD80; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; holin &#xC911;&#xC7AC; &#xC804;&#xC744; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC774; &#xBCBD; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; &#xACF5;&#xC720; &#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xCABC;&#xAC1C; &#xACE0; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6A9; &#xD574;&#xC640; &#xC790;&#xC190; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD5C8;&#xC6A9; peptidoglycan &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xB85C; &#xBC1B; &#xB2E4;. &#xC774; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xC774;&#xC81C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xAE30;&#xBC18; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xAE30;&#xCD08; &#xBC0F; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; lysin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00;, PlyG, &#xD2B9;&#xD788; &#xADF8;&#xB78C; &#xC591;&#xC131; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xADE0; &#xB4E4;&#xC740;;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB294; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC624;&#xD30C;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; lysin&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xBCF5;&#xC81C;, &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4;, &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; &#xADF8;&#xB78C; &#xC591;&#xC131; &#xC138;&#xADE0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0;&#xC11C; lysins&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xB610;&#xB294; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131; &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xB3C4; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC624;&#xD30C;&#xC9C0; lysins &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD654;&#xBA74;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Lysins son codificados en Fago, hidrolasas de peptidoglicano (pared celular) que se acumulan en el citoplasma bacteriano durante un ciclo de infecci&oacute;n l&iacute;tica. Tarde durante la infecci&oacute;n, lysins someterse a desplazamiento holin-mediada a trav&eacute;s de la membrana interna en la matriz de peptidoglicano donde hienden covalentes de pared celular necesarias para la estabilidad de la pared y permitir progenie y lisis bacteriana fago. Este potente actividad hidrol&iacute;tica es ahora la base de un proceso de gran alcance proyecci&oacute;n basado en la gen&eacute;tica para la identificaci&oacute;n y an&aacute;lisis de Fago lysin prote&iacute;nas. Aqu&iacute; se describe un m&eacute;todo para identificar un lysin, PlyG, de un bacteri&oacute;fago que espec&iacute;ficamente infecta el organismo gram-positivas Bacillus anthracis; sin embargo, las t&eacute;cnicas descritas se pueden adaptar a clonar, expresar y analizar lysins de cualquier Fago que infecta a bacterias Gram-positivas o posiblemente incluso bacterias Gram-negativas.

Una pantalla gen&eacute;tica para identificar lysins bacteri&oacute;fago.

&#x9A6C;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x662F;&#x5316;&#x8113;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x9A6C; strangles &#x7684;&#x75C5;&#x6E90;&#x4F53;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x662F;&#x900F;&#x8FC7;&#x4E0E;&#x53D7;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6C61;&#x67D3;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x8131;&#x843D;&#x7684;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4ECE;&#x9F3B;&#x8154;&#x5206;&#x6CCC;&#x7269;&#x548C;&#x8113;&#x80BF;&#x5F15;&#x6D41;&#x6216;&#x63A5;&#x89E6;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x3002;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5242;&#x662F;&#x6709;&#x6548;&#x6253;&#x51FB; S.&#x76F8;&#x7B49;&#xFF0C;&#x4F46;&#x706D;&#x6D3B;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x635F;&#x574F;&#x8BBE;&#x5907;&#xFF0C;&#x548C;&#x6BD2;&#x6027;&#x6781;&#x5927;&#x5173;&#x6CE8;&#x3002;&#x5DF2;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x7814;&#x7A76; (&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x6C34;&#x89E3;) &#x8C03;&#x67E5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5176;&#x80FD;&#x529B;&#x81EA;&#x6EB6;&#x6613;&#x9769;&#x5170;&#x9633;&#x6027;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x5242;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6EB6;&#xFF0C;PlyC&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x53CD;&#x5BF9; S.&#x76F8;&#x7B49;&#x7684;&#x7A84;&#x8C31;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5242;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x662F;&#x79EF;&#x6781;&#x53CD;&#x5BF9; &gt; S.&#x8BBE;&#x5907;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; S.&#x8BBE;&#x5907;&#x4E9A;&#x79CD;&#x8BBE;&#x5907;&#x548C; S.&#x8BBE;&#x5907;&#x4E9A;&#x79CD;&#x517D;&#x75AB;&#x4E34;&#x5E8A; 20 &#x682A;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x9176;&#x7684;&#xFF0C;PlyC &#x662F;&#x9176;&#x7684; 1000 &#x500D;&#x66F4;&#x79EF;&#x6781;&#x6309;&#x6BCF;&#x91CD;&#x91CF;&#x6BD4; Virkon S&#xFF0C;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x6D88;&#x6BD2;&#x4EE3;&#x7406;&#xFF0C;1 microg &#x80FD;&#x591F;&#x8FDB;&#x884C;&#x6D88;&#x6BD2; 10(8) S.&#x8BBE;&#x5907;&#x5728; 30 &#x5206;&#x949F; PlyC CFU/ml &#x6587;&#x5316;&#x53D7;&#x5230;&#x4E86;&#x6D4B;&#x8BD5;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5242;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x7A00;&#x91CA;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6807;&#x51C6;&#x7535;&#x6C60;&#x548C;&#x6740;&#x83CC;&#x55B7;&#x96FE;&#x4EA7;&#x54C1;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x6D4B;&#x51FA; PlyC &#x53EF;&#x4EE5;&#x6D88;&#x9664;&#x6216;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x5404;&#x79CD;&#x6750;&#x6599;&#x7684; S.&#x8BBE;&#x5907;&#x8D1F;&#x8F7D;&#x4E0A;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x9A6C;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x8BBE;&#x5907;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;PlyC &#x662F;&#x663E;&#x793A;&#x4FDD;&#x7559;&#x5728;&#x6A21;&#x4EFF;&#x9A6C;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5373;&#x5B58;&#x5728;&#x975E;&#x79BB;&#x5B50;&#x578B;&#x6D17;&#x6DA4;&#x5242;&#x3001; &#x786C;&#x6C34;&#x6216;&#x6709;&#x673A;&#x6750;&#x6599;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x5145;&#x5206;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; PlyC &#x4F5C;&#x4E3A;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x7A84;&#x8C31;&#x6D88;&#x6BD2;&#x6DB2;&#x5BF9; S.&#x76F8;&#x7B49;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x589E;&#x52A0;&#x6216;&#x8865;&#x5145;&#x5728;&#x8C37;&#x4ED3;&#x548C;&#x9A6C;&#x53A9;&#x9A6C;&#x522B;&#x5730;&#x65B9;&#x7684;&#x5E7F;&#x8C31;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5242;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x5341;&#x5206;&#x666E;&#x904D;&#x3002;

&#x5229;&#x7528;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x6EB6;&#xFF0C;PlyC&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5BF9;&#x9A6C;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x9176;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5242;&#x3002;

Streptococcus equi is the causative agent of the purulent infection equine strangles. This disease is transmitted through shedding of live bacteria from nasal secretions and abscess drainage or by contact with surfaces contaminated by the bacteria. Disinfectants are effective against S. equi, but inactivation by environmental factors, damage to equipment, and toxicity are of great concern. Bacteriophage-encoded lysins (cell wall hydrolases) have been investigated as therapeutic agents due to their ability to lyse susceptible gram-positive organisms. Here, we investigate the use of one lysin, PlyC, as a narrow-spectrum disinfectant against S. equi. This enzyme was active against >20 clinical isolates of S. equi, including both S. equi subsp. equi and S. equi subsp. zooepidemicus. Significantly, PlyC was 1,000 times more active on a per weight basis than Virkon-S, a common disinfecting agent, with 1 microg of enzyme able to sterilize a 10(8) CFU/ml culture of S. equi in 30 min. PlyC was subjected to a standard battery of tests including the Use Dilution Method for Testing Disinfectants and the Germicidal Spray Products Test. Results indicate that aerosolized PlyC can eradicate or significantly reduce the S. equi load on a variety of materials found on common stable and horse-related equipment. Additionally, PlyC was shown to retain full activity under conditions that mimic a horse stable, i.e., in the presence of nonionic detergents, hard water, or organic materials. We propose PlyC as the first protein-based, narrow-spectrum disinfectant against S. equi, which may augment or supplement the use of broad-spectrum disinfectants in barns and stables where equine strangles is prevalent.

Use of a bacteriophage lysin, PlyC, as an enzyme disinfectant against Streptococcus equi.

Streptococcus equi est l&#39;agent causal de la gourme &eacute;quine infection purulente. Cette maladie est transmise par l&#39;excr&eacute;tion de bact&eacute;ries vivantes par les s&eacute;cr&eacute;tions nasales et drainage de l&#39;abc&egrave;s, soit par contact avec des surfaces contamin&eacute;es par la bact&eacute;rie. D&eacute;sinfectants sont efficaces contre S. equi, mais par des facteurs environnementaux, des dommages &agrave; l&#39;&eacute;quipement, l&#39;inactivation et la toxicit&eacute; sont tr&egrave;s pr&eacute;occupante. Bact&eacute;riophage-encod&eacute;es bact&eacute;riophages (hydrolases pari&eacute;tales) ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;s comme agents th&eacute;rapeutiques en raison de leur capacit&eacute; &agrave; la lyse des micro-organismes Gram positifs sensibles. Ici, nous &eacute;tudions l&#39;utilisation d&#39;une lysine, PlyC, comme un spectre &eacute;troit de d&eacute;sinfectant contre S. equi. Cette enzyme est actif contre &gt; 20 cliniques des isolats de S. equi, y compris S. equi subsp equi et S. equi sous-esp&egrave;ce zooepidemicus. Significativement, la PlyC &eacute;tait 1 000 fois plus active par le poids que Virkon-S, un agent d&eacute;sinfectant commun, avec 1 microg d&#39;enzyme capable pour st&eacute;riliser un 10 (8) la culture de S. equi dans 30 min. PlyC UFC/ml a &eacute;t&eacute; soumise &agrave; une batterie standard de tests, y compris l&#39;utilisation de la m&eacute;thode Dilution pour les tests de d&eacute;sinfectants et d&#39;indiquer les r&eacute;sultats de test de produits Spray germicide qui PlyC en a&eacute;rosol peut &eacute;liminer ou r&eacute;duire de fa&ccedil;on significative la charge d&#39;equi S. sur une vari&eacute;t&eacute; de mat&eacute;riaux trouv&eacute; sur la commune stable et &eacute;quipements li&eacute;s &agrave; cheval. En outre, PlyC s&#39;est av&eacute;r&eacute; garder pleine activit&eacute; dans des conditions qui simulent un cheval stable, c&#39;est-&agrave;-dire, en pr&eacute;sence de d&eacute;tergents non ioniques, l&#39;eau est dure ou de mati&egrave;res organiques. Nous proposons des PlyC que le premier d&eacute;sinfectant bas&eacute;es sur les prot&eacute;ines, le spectre &eacute;troit contre S. equi, qui peut am&eacute;liorer ou compl&eacute;ter l&#39;utilisation de d&eacute;sinfectants &agrave; large spectre dans les granges et les &eacute;tables o&ugrave; &eacute;quin &eacute;trangle est r&eacute;pandu.

Utilisation d&#39;une lysine de bact&eacute;riophage, PlyC, comme un d&eacute;sinfectant enzyme contre Streptococcus equi.

Streptococcus Equi ist der Erreger der eitrigen Infektion pferdeartige stranguliert. Diese Krankheit wird vererbt, durch Blutvergie&szlig;en Leben Bakterien aus nasalen Absonderungen und Abszess Drainage oder durch Kontakt mit Oberfl&auml;chen, die durch Bakterien kontaminiert. Desinfektionsmittel sind wirksam gegen S. Equi, aber Inaktivierung durch Umweltfaktoren, Sch&auml;den an Ger&auml;ten, und Toxizit&auml;t sind von gro&szlig;er Bedeutung. Bakteriophage-codierte lysine (Zellwand-HYDROLASEN) wurden als Therapeutika aufgrund ihrer F&auml;higkeit aufzul&ouml;sen empf&auml;nglicher Gram-positive Organismen untersucht. Hier untersuchen wir die Verwendung von einem Lysin, PlyC, als schmal-Spektrum Desinfektionsmittel gegen S. Equi. Dieses Enzym war aktiv gegen &gt; 20 klinische Isolate von S. Equi, einschlie&szlig;lich S. Equi subsp. Equi und S. Equi subspecies Zooepidemicus. Bezeichnenderweise wurde PlyC, 1.000 mal mehr aktiv pro Gewichtsanteil als Virkon-S, eine gemeinsame Desinfektionsmittels mit 1 &micro;g des Enzyms in der Lage um zu sterilisieren eine 10 KBE/ml Kultur der S. Equi in 30 min. PlyC wurde ein standard-Akku Tests, einschlie&szlig;lich der Verwendung-Verd&uuml;nnung-Methode f&uuml;r die Pr&uuml;fung von Desinfektionsmitteln und die keimt&ouml;tende Spray-Produkte-Test-Ergebnisse zeigen, die PlyC zerst&auml;ubt zu beseitigen oder erheblich reduzieren die S. Equi Belastung f&uuml;r eine Vielzahl von Materialien k&ouml;nnen auf gemeinsamen Stall und Pferd-Ausr&uuml;stung gefunden. Dar&uuml;ber hinaus zeigte PlyC voller Aktivit&auml;t unter Bedingungen beibehalten werden, die einen Pferdestall, d. h. in Anwesenheit von nichtionischen Detergentien, hartes Wasser oder organischen Materialien zu imitieren. Wir schlagen PlyC, wie das erste Protein-basierte, schmal-Spektrum Desinfektionsmittel gegen S. Equi, die erweitern oder erg&auml;nzen den Einsatz von Breitspektrum Desinfektionsmittel in Scheunen und St&auml;llen, wo Pferde erw&uuml;rgt, weit verbreitet ist.

Einsatz von Lysin ein Bakteriophage, PlyC, als ein Enzym-Desinfektionsmittel gegen Streptococcus Equi.

Streptococcus equi &egrave; l&#39;agente eziologico dell&#39;adenite equina infezione purulenta. Questa malattia &egrave; trasmessa attraverso lo spargimento di batteri vivi da secrezioni nasali e drenaggio di ascesso o dal contatto con superfici contaminate da batteri. Disinfettanti sono efficaci contro S. equi, ma inattivazione da fattori ambientali, danni alle apparecchiature, e tossicit&agrave; sono fonte di grande preoccupazione. Lysins del batteriofago-codificato (parete cellulare idrolasi) sono state studiate come agenti terapeutici grazie alla loro capacit&agrave; di lisare gli organismi gram-positivi sensibili. Qui, indaghiamo l&#39;uso di una lisina, PlyC, come un disinfettante di stretto-spettro contro S. equi. Questo enzima &egrave; stato attivo contro &amp;gt; 20 clinici isolati di S. equi, inclusi S. equi subsp. equi e S. equi zooepidemicus subsp. Significativamente, PlyC era 1.000 volte pi&ugrave; attivo in base al peso di Virkon-S, un comune disinfettante, con 1 microg di enzima in grado di sterilizzare un 10, paragrafo 8 cultura CFU/ml di S. equi in 30 min PlyC fu sottoposto a una batteria standard di test, tra cui il metodo di diluizione di uso per prove disinfettanti e indicare i risultati di test di prodotti Spray germicida che aerosol PlyC pu&ograve; sradicare o ridurre in modo significativo il carico di equi S. su una variet&agrave; di materiali trovato su comuni stabile e attrezzature connesse a cavallo. Inoltre, PlyC &egrave; stato indicato per mantenere la piena attivit&agrave; in condizioni che mimano un cavallo stabile, cio&egrave;, in presenza di detergenti non ionici, acqua dura o materiali organici. Proponiamo PlyC come il primo disinfettante basati su proteine, stretto-spettro contro S. equi, che pu&ograve; aumentare o integrare l&#39;uso di disinfettanti ad ampio spettro in granai e stalle dove strangola equino &egrave; prevalente.

Uso di lisina un batteriofago, PlyC, come disinfettante enzima contro Streptococcus equi.

&#x9023;&#x9396;&#x7403;&#x83CC; equi &#x5316;&#x81BF;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x99AC;&#x75AB;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x306F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C5A;&#x67D3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x9762;&#x3092;&#x751F;&#x304D;&#x305F;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x63A5;&#x89E6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9F3B;&#x6C41;&#x3068;&#x81BF;&#x760D;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30FC;&#x30B8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x9001;&#x4FE1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5264; S. &#x7B49;&#x304C;&#x74B0;&#x5883;&#x8981;&#x56E0;&#x3001;&#x6A5F;&#x5668;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x95A2;&#x5FC3;&#x4E8B;&#x3002;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7B26;&#x53F7;&#x5316;&#x30A2;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; (&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#xFF09; &#x80FD;&#x529B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x967D;&#x6027;&#x83CC;&#x3092;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x85AC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;.&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; 1 &#x3064;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;PlyC&#x3001;S. &#x7B49;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x72ED;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x6D88;&#x6BD2;&#x85AC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x76EE; 20 &#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A; S. &#x817A;&#x75AB;&#x83CC;&#x3068; S. equi &#x75C5;&#x83CC; zooepidemicus &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080; S. equi &#x306E;&#x3002;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x3001;PlyC PlyC aerosolized 1,000 &#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x91CD;&#x91CF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3088;&#x308A;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x6D88;&#x6BD2;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;1 0.5&#x3001;5&#x3001;50&#x3001;500 &#x306F;&#x3001;10 (8) &#x3092;&#x6BBA;&#x83CC;&#x3059;&#x308B; CFU/ml &#x6587;&#x5316; S. equi 30 &#x5206; PlyC &#x3067;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5264;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E0C;&#x91C8;&#x6CD5;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x30D0;&#x30C3;&#x30C6;&#x30EA;&#x306B;&#x670D;&#x5F93;&#x3057;&#x3001;&#x6BBA;&#x83CC;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x8A66;&#x9A13;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x306E; Virkon S &#x3092;&#x6839;&#x7D76;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x6750;&#x6599;&#x306E; S. equi &#x8CA0;&#x8377;&#x3092;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3068;&#x99AC;&#x95A2;&#x9023;&#x6A5F;&#x5668;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;PlyC &#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x975E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x6027;&#x6D17;&#x5264;&#x3001;&#x30CF;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x6C34;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6709;&#x6A5F;&#x7269;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x99AC;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3059;&#x308B;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F37;&#x5316;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D0D;&#x5C4B;&#x3068;&#x3069;&#x3053;&#x3067;&#x99AC;&#x3092;&#x7DE0;&#x3081;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x99AC;&#x5C0F;&#x5C4B;&#x3067;&#x5E83;&#x57DF;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5264;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x88DC;&#x3046; S. &#x7B49;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x72ED;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x6D88;&#x6BD2;&#x85AC;&#x304C;&#x666E;&#x53CA;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081; PlyC &#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;PlyC &#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3001;&#x9023;&#x9396;&#x7403;&#x83CC; equi &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6D88;&#x6BD2;&#x85AC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3002;

&#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; &#xB3D9;&#xB4F1; &#xD654; &#xB18D;&#xC131; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB9D0; strangles&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB418;&#xB294; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC740; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC624;&#xC5FC; &#xB41C; &#xD45C;&#xBA74; &#xC811;&#xCD09;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB610;&#xB294; &#xBE44; &#xAC15; &#xBD84; &#xBE44; &#xBB3C; &#xBC0F; &#xB18D; &#xC591; &#xBC30;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xBC1C;&#xC0B0;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xC1A1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xB3C5; &#xC81C;&#xB294; &#xBBF8; &#xB3D9;&#xB4F1; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD658;&#xACBD; &#xC694;&#xC778;, &#xC7A5;&#xBE44; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC0F; &#xB3C5;&#xC131;&#xC740; &#xD070; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC0AC;. &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC624;&#xD30C;&#xC9C0; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; lysins (&#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; hydrolases) &#xCE58;&#xB8CC;&#xC81C; &#xCDE8;&#xC57D; &#xADF8;&#xB78C; &#xC591;&#xC131; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC744; lyse &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825; &#xB54C;&#xBB38;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBBF8; &#xB3D9;&#xB4F1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC881;&#xC740; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC0B4; &#xADE0;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB098;&#xC758; lysin, PlyC&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &amp;gt; 20 &#xC784;&#xC0C1; &#xBBF8; &#xB3D9;&#xB4F1;, S. &#xB3D9;&#xB4F1; &#xB098;&#xBB34; &#xB3D9;&#xB4F1; S. &#xB3D9;&#xB4F1; &#xB098;&#xBB34; zooepidemicus &#xB4F1;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC;. &#xD06C;&#xAC8C;, Plyc&#xB294; PlyC aerosolized&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC18C;&#xB3C5; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;, &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; 10(8) &#xC18C;&#xB3C5; 30 &#xBD84; PlyC S. &#xB3D9;&#xB4F1;&#xC758; CFU/ml &#xBB38;&#xD654; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC18C;&#xB3C5; &#xC81C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD76C;&#xC11D; &#xBC29;&#xBC95; &#xB4F1;&#xC758; &#xD45C;&#xC900; &#xBC30;&#xD130;&#xB9AC;&#xB97C; &#xB192;&#xC600;&#xC744; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC774; &#xC81C;&#xD488; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xACB0;&#xACFC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC218;&#xC758; 1 microg Virkon S &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBB34;&#xAC8C; &#xB2F9; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; 1000 &#xBC30; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xD65C;&#xC131; &#xADFC;&#xC808; &#xB610;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC7AC;&#xB8CC;&#xC758; &#xBBF8; &#xB3D9;&#xB4F1; &#xBD80;&#xD558;&#xB97C; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xB9D0; &#xAD00;&#xB828; &#xC7A5;&#xBE44;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB610;&#xD55C;, PlyC nonionic &#xC138;&#xC81C;, &#xD558;&#xB4DC; &#xBB3C; &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xAE30; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC989;, &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB9D0;&#xC744; &#xBAA8;&#xBC29; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xCCB4; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC720;&#xC9C0;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCF4;&#xAC15; &#xB610;&#xB294; &#xBCF4;&#xCDA9; &#xC9C8;&#xB7EC;&#xC640; &#xB9C8;&#xAD6C;&#xAC04; &#xB9D0; &#xAD50; &#xC0B4; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC18C;&#xB3C5; &#xC81C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBBF8; &#xB3D9;&#xB4F1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xBC18;, &#xC881;&#xC740; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC18C;&#xB3C5; &#xC81C;&#xB294; &#xB110;&#xB9AC; Plyc&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; &#xB3D9;&#xB4F1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC0B4; &#xADE0;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC624;&#xD30C;&#xC9C0; lysin, PlyC&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;.

Streptococcus equi es el agente causal de la estrangula equina de la infecci&oacute;n purulenta. Esta enfermedad se transmite mediante derramamiento de bacterias vivas de las secreciones nasales y el drenaje del absceso o por contacto con superficies contaminadas por la bacteria. Desinfectantes son efectivos contra S. equi, pero inactivaci&oacute;n por factores ambientales, da&ntilde;os al equipo, y la toxicidad es motivo de gran preocupaci&oacute;n. Bacteri&oacute;fago codificada lysins (hidrolasas de pared celular) han sido investigados como agentes terap&eacute;uticos debido a su capacidad para lisar organismos grampositivos susceptibles. Aqu&iacute;, investigamos el uso de un lysin, PlyC, como un espectro desinfectante contra S. equi. Esta enzima era activa contra &gt; 20 cl&iacute;nicas aislamientos de S. equi, incluyendo S. equi subsp. equi y S. equi subsp. zooepidemicus. Significativamente, PlyC era 1.000 veces m&aacute;s activa en base al peso que Virkon-S, un agente desinfectante com&uacute;n, con 1 microg de enzima capaz de esterilizar un 10 (8) cultura de UFC/ml de S. equi en 30 min PlyC fue sometida a una bater&iacute;a est&aacute;ndar de pruebas, incluyendo el m&eacute;todo de diluci&oacute;n de uso de desinfectantes de pruebas y los resultados de prueba de productos Spray germicida indican que aerosolized PlyC puede eliminar o reducir significativamente la carga de S. equi en una variedad de materiales encontrado en com&uacute;n estable y equipos relacionados con el caballo. Adem&aacute;s, PlyC ha demostrado mantener plena actividad en condiciones que imitan un caballo estable, es decir, en presencia de detergentes no i&oacute;nicos, agua dura o materiales org&aacute;nicos. Proponemos PlyC como el primer desinfectante prote&iacute;nicos, de espectro contra S. equi, que puede aumentar o complementar el uso de desinfectantes de amplio espectro en graneros y establos donde estrangula equinos es frecuente.

Uso de un lysin bacteri&oacute;fago, PlyC, como un desinfectante de enzima contra Streptococcus equi.

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&#xD6A8;&#xC18C; lysis &#xCE21;&#xC815;: &#xD654;&#xD559;, &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xACFC; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xD559;&#xC758; &#xACB0;&#xD569;&#xB41C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xCD94;&#xC815;.

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&#x91CF;&#x5316;&#x9176;&#x88C2;&#x89E3;&#xFF1A; &#x4F30;&#x8BA1;&#x5316;&#x5B66;&#x3001; &#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x548C;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7EFC;&#x5408;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

The number of microbial pathogens resistant to antibiotics continues to increase even as the rate of discovery and approval of new antibiotic therapeutics steadily decreases. Many researchers have begun to investigate the therapeutic potential of naturally occurring lytic enzymes as an alternative to traditional antibiotics. However, direct characterization of lytic enzymes using techniques based on synthetic substrates is often difficult because lytic enzymes bind to the complex superstructure of intact cell walls. Here we present a new standard for the analysis of lytic enzymes based on turbidity assays which allow us to probe the dynamics of lysis without preparing a synthetic substrate. The challenge in the analysis of these assays is to infer the microscopic details of lysis from macroscopic turbidity data. We propose a model of enzymatic lysis that integrates the chemistry responsible for bond cleavage with the physical mechanisms leading to cell wall failure. We then present a solution to an inverse problem in which we estimate reaction rate constants and the heterogeneous susceptibility to lysis among target cells. We validate our model given simulated and experimental turbidity assays. The ability to estimate reaction rate constants for lytic enzymes will facilitate their biochemical characterization and development as antimicrobial therapeutics.

Quantifying enzymatic lysis: estimating the combined effects of chemistry, physiology and physics.

Le nombre d&#39;agents microbiens pathog&egrave;nes r&eacute;sistants aux antibiotiques continue d&#39;augmenter alors que le taux de d&eacute;couverte et d&#39;approbation des nouvelles th&eacute;rapies antibiotiques diminuent progressivement. De nombreux chercheurs ont commenc&eacute; &agrave; &eacute;tudier le potentiel th&eacute;rapeutique d&#39;origine naturelle des enzymes lytiques comme alternative aux antibiotiques traditionnels. Toutefois, la caract&eacute;risation directe des enzymes lytiques, utilisant des techniques bas&eacute;es sur des substrats synth&eacute;tiques est souvent difficile car les enzymes lytiques lient &agrave; la superstructure complexe des parois des cellules intactes. Nous pr&eacute;sentons un nouveau standard pour l&#39;analyse des enzymes lytiques, bas&eacute; sur des tests de turbidit&eacute; qui nous permettent d&#39;&eacute;tudier la dynamique de la lyse sans pr&eacute;parer un substrat synth&eacute;tique. Le d&eacute;fi dans l&#39;analyse de ces essais est de d&eacute;terminer les d&eacute;tails microscopiques de la lyse de donn&eacute;es macroscopiques de turbidit&eacute;. Nous proposons un mod&egrave;le de lyse enzymatique qui int&egrave;gre la chimie responsable de clivage de la liaison avec les m&eacute;canismes physiques conduisant &agrave; la rupture de la paroi cellulaire. Puis, nous pr&eacute;sentons une solution &agrave; un probl&egrave;me inverse o&ugrave; nous estimons que les constantes de vitesse de r&eacute;action et la susceptibilit&eacute; h&eacute;t&eacute;rog&egrave;ne &agrave; la lyse des cellules cibles. Nous validons notre mod&egrave;le &eacute;tant donn&eacute; les essais simul&eacute;s et exp&eacute;rimentale de la turbidit&eacute;. La capacit&eacute; d&#39;estimer les constantes de vitesse de r&eacute;action des enzymes lytiques facilitera leur caract&eacute;risation biochimique et le d&eacute;veloppement des th&eacute;rapies antimicrobiennes.

Quantifier la lyse enzymatique : estimation des effets combin&eacute;s de la physiologie, la chimie et la physique.

Die Anzahl der mikrobiellen Krankheitserregern, die gegen Antibiotika resistent w&auml;chst st&auml;ndig, auch wenn die Entdeckung und Zulassung von neuen antibiotischen Therapeutika stetig abnimmt. Viele Forscher haben damit begonnen, das therapeutische Potenzial von nat&uuml;rlich vorkommenden untersuchen lytischer Enzyme als Alternative zu herk&ouml;mmlichen Antibiotika. Direkte Charakterisierung der lytische Enzyme mit Techniken basierend auf synthetische Substrate ist jedoch oft schwierig, da lytischer Enzyme an der komplexen &Uuml;berbau intakte Zellw&auml;nde zu binden. Hier pr&auml;sentieren wir einen neuen Standard f&uuml;r die Analyse der lytische Enzyme, die auf der Grundlage von Tr&uuml;bung-Proben, die uns erlauben, die Dynamik der Zerst&ouml;rung Sonde ohne Vorbereitung ein synthetisches Substrat. Die Herausforderung bei der Analyse der diese Proben ist die mikroskopische Details der Zerst&ouml;rung von makroskopischen Tr&uuml;bung Daten abzuleiten. Wir schlagen ein Modell des enzymatische Lyse, das die Chemie verantwortlich f&uuml;r Bond Spaltung mit den physikalischen Mechanismen zu Zellwand Fehler integriert. Dann stellen wir eine L&ouml;sung f&uuml;r ein inverses Problem wir die Geschwindigkeitskonstanten der Reaktion sch&auml;tzen und der heterogenen Anf&auml;lligkeit f&uuml;r Lyse unter den Zielzellen. Wir &uuml;berpr&uuml;fen unser Modell simuliert und experimentelle Tr&uuml;bung Proben gegeben. Die F&auml;higkeit, Reaktion Geschwindigkeitskonstanten f&uuml;r lytischer Enzyme zu sch&auml;tzen wird ihre biochemische Charakterisierung und Entwicklung als antimikrobielle Therapie erleichtern.

Quantifizierung der enzymatische Lyse: sch&auml;tzen die Auswirkungen der Chemie, Physiologie und Physik.

Il numero di microbi patogeni resistenti agli antibiotici continua ad aumentare anche se il tasso di individuazione e approvazione di nuove terapie antibiotiche diminuisce costantemente. Molti ricercatori hanno iniziato a studiare il potenziale terapeutico di naturali enzimi litici come alternativa agli antibiotici tradizionali. Tuttavia, diretta caratterizzazione degli enzimi litici usando tecniche basate su substrati sintetici &egrave; spesso difficile perch&eacute; gli enzimi litici legano alla sovrastruttura complessa delle pareti delle cellule intatte. Qui vi presentiamo un nuovo standard per l&#39;analisi degli enzimi litici basati su dosaggi di torbidit&agrave; che ci permettono di sondare le dinamiche della lisi senza preparare un substrato sintetico. La sfida nell&#39;analisi di questi dosaggi &egrave; di dedurre i dettagli microscopici di lisi da dati di torbidit&agrave; macroscopica. Vi proponiamo un modello di lisi enzimatica che integra la chimica responsabile della scissione del legame con i meccanismi fisici che portano al fallimento della parete cellulare. Vi presentiamo quindi una soluzione a un problema inverso in cui stimiamo costanti di velocit&agrave; di reazione e la suscettibilit&agrave; alla lisi eterogenea tra le cellule bersaglio. Noi convalidare il nostro modello dato saggi di torbidit&agrave; simulata e sperimentale. La capacit&agrave; di stimare le costanti di velocit&agrave; di reazione per enzimi litici faciliter&agrave; la loro caratterizzazione biochimica e sviluppo come terapia antimicrobica.

Quantificare la lisi enzimatica: stimare gli effetti combinati di chimica, la fisiologia e la fisica.

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El n&uacute;mero de microbios pat&oacute;genos resistentes a los antibi&oacute;ticos contin&uacute;a aumentando as&iacute; como el ritmo de descubrimiento y aprobaci&oacute;n de la nueva terap&eacute;utica antibi&oacute;tica disminuye constantemente. Muchos investigadores han comenzado a investigar el potencial terap&eacute;utico de origen natural las enzimas l&iacute;ticas como alternativa a los antibi&oacute;ticos tradicionales. Sin embargo, la caracterizaci&oacute;n directa de enzimas l&iacute;ticas, mediante t&eacute;cnicas basadas en sustratos sint&eacute;ticos es a menudo dif&iacute;cil porque las enzimas l&iacute;ticas se unen a la superestructura compleja de intacta de las paredes celulares. Aqu&iacute; presentamos un nuevo est&aacute;ndar para el an&aacute;lisis de enzimas l&iacute;ticas basados en ensayos de turbidez que permiten sondear la din&aacute;mica de lisis sin preparar un substrato sint&eacute;tico. El desaf&iacute;o en el an&aacute;lisis de estos ensayos es inferir los detalles microsc&oacute;picos de lisis de datos macrosc&oacute;picos de turbidez. Proponemos un modelo de lisis enzim&aacute;tica que integra la qu&iacute;mica responsable de escote de enlace con los mecanismos f&iacute;sicos que lleva a la falta de la pared celular. Luego presentamos una soluci&oacute;n a un problema inverso en que estimamos constantes de velocidad de reacci&oacute;n y la susceptibilidad heterog&eacute;nea a lisis entre las c&eacute;lulas diana. Validamos nuestro modelo dado ensayos simulados y experimentales de la turbidez. La capacidad de estimar constantes de velocidad de reacci&oacute;n para enzimas l&iacute;ticas facilitar&aacute; su caracterizaci&oacute;n bioqu&iacute;mica y desarrollo como terap&eacute;utica antimicrobiana.

Cuantificaci&oacute;n de lisis enzim&aacute;tica: estimaci&oacute;n de los efectos combinados de la qu&iacute;mica, la fisiolog&iacute;a y la f&iacute;sica.

&#x53EA;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x4ECE;&#x54BD;&#x708E;&#x3001; &#x8113;&#x75B1;&#x75AE;&#x3001; &#x6709;&#x6BD2;&#x7684;&#x51B2;&#x51FB;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x574F;&#x6B7B;&#x6027;&#x7B4B;&#x819C;&#x708E;&#x5230;&#x62BD;&#x8C61; A &#x7EC4;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC; (&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;)&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x75BE;&#x75C5;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#xFF0C;&#x5C31;&#x5FC5;&#x987B; S.pyogenes &#x62E5;&#x6709;&#x8C03;&#x5236;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x3001; &#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;SpeB&#x3001; &#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF0C;&#x662F;&#x4ECE; S.pyogenes &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8BBE;&#x9632;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x5DF2;&#x88AB;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4F1A;&#x964D;&#x4F4E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x8865;&#x5145;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;&#x86CB;&#x767D;&#x9175;&#x7D20;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x540D;&#x79F0;&#x4F46;&#x5DF2;&#x77E5;&#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;SpeB &#x8C03;&#x8282;&#x5176;&#x4ED6;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7531;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x8FB1;&#x4EBA;&#x683C;&#x6216;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8868;&#x9762;&#x91CA;&#x653E;&#x5B83;&#x4EEC;&#x3002;&#x5047;&#x5B9A; SpeB &#x51FD;&#x6570;&#x4E0A;&#x7684;&#x6587;&#x5B66;&#x8D22;&#x5BCC;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x4ECD;&#x7136;&#x5F88;&#x591A;&#x5173;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x7684;&#x4E89;&#x8BBA;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5F88;&#x591A;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4F1A;&#x4EA7;&#x751F;&#x76F8;&#x4E92;&#x77DB;&#x76FE;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x8BA8;&#x6240;&#x6709;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x548C;&#x7EC6;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x8D28;&#x4E3A; SpeB&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5288;&#x88C2;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x5728;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5F53;&#x524D;&#x6587;&#x5B66;&#x7684;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x53D1;&#x75C5;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

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Abstract Group A streptococcus (Streptococcus pyogenes) is an exclusively human pathogen that causes a wide spectrum of diseases ranging from pharyngitis, to impetigo, to toxic shock, to necrotizing fasciitis. The diversity of these disease states necessitates that S. pyogenes possess the ability to modulate both the innate and adaptive immune responses. SpeB, a cysteine proteinase, is the predominant secreted protein from S. pyogenes. Due to its relatively indiscriminant specificity, this enzyme has been shown to degrade the extracellular matrix, cytokines, chemokines, complement components, immunoglobulins, and serum protease inhibitors, to name but a few of the known substrates. Additionally, SpeB regulates other streptococcal proteins by degrading them or releasing them from the bacterial surface. Despite the wealth of literature on putative SpeB functions, there remains much controversy about this enzyme because many of reported activities would produce contradictory physiological results. Here we review all known host and bacterial protein substrates for SpeB, their cleavage sites, and discuss the role of this enzyme in streptococcal pathogenesis based on the current literature.

The cysteine proteinase SpeB from Streptococcus pyogenes - a potent modifier of immunologically important host and bacterial proteins.

Streptococcus R&eacute;sum&eacute; groupe A (Streptococcus pyogenes) est un pathog&egrave;ne exclusivement humain qui provoque un large &eacute;ventail de maladies allant de pharyngite, imp&eacute;tigo, choc toxique, de fasciite n&eacute;crosante. La diversit&eacute; de ces &eacute;tats pathologiques n&eacute;cessite que S. pyogenes poss&egrave;dent la capacit&eacute; de moduler la r&eacute;ponse immunitaire inn&eacute;e et adaptative. SpeB, une prot&eacute;ase de cyst&eacute;ine, est la principale prot&eacute;ine s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e de S. pyogenes. En raison de son relativement sp&eacute;cificit&eacute; sans discernement, cette enzyme a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute;e que la d&eacute;gradation de la matrice extracellulaire, cytokines, chimiokines, composants du compl&eacute;ment, immunoglobulines et inhibiteurs de prot&eacute;ase s&eacute;rique, pour ne citer que quelques uns des substrats connus. En outre, SpeB r&eacute;glemente les autres prot&eacute;ines streptocoques en d&eacute;gradant eux ou eux dispensant de la surface bact&eacute;rienne. Malgr&eacute; la richesse de la litt&eacute;rature sur les fonctions SpeB putatives, il reste beaucoup de controverse au sujet de cette enzyme parce que plusieurs des activit&eacute;s mentionn&eacute;es pourraient produire des r&eacute;sultats physiologiques contradictoires. Ici nous passons en revue tous les h&ocirc;tes connus et substrats de la prot&eacute;ine bact&eacute;rienne pour SpeB, leurs sites de clivage et discuter du r&ocirc;le de cette enzyme dans la pathogen&egrave;se de streptocoque bas&eacute;e sur la litt&eacute;rature actuelle.

La prot&eacute;inase de cyst&eacute;ine SpeB de Streptococcus pyogenes - un puissant modificateur d&#39;h&ocirc;te immunologiquement important et des prot&eacute;ines bact&eacute;riennes.

Abstrakt-Gruppe A-Streptokokken (Streptococcus Pyogenes) ist ein ausschlie&szlig;lich menschliche Krankheitserreger, die ein breites Spektrum an Krankheiten, die von Pharyngitis, bis hin zu Impetigo, toxischen Schock, nekrotisierende Fasziitis verursacht. Die Vielfalt dieser Krankheit Staaten erfordert, dass S. Pyogenes die F&auml;higkeit besitzen, sowohl die angeborene und adaptive Immunantworten zu modulieren. Aus, ein Cystein-Proteinase, ist das vorherrschende sezernierte Protein von S. Pyogenes. Aufgrund seiner relativ Indiscriminant Spezifit&auml;t, dieses Enzym nachweislich der extrazellul&auml;ren Matrix, Zytokine, Chemokine, Erg&auml;nzung Komponenten, Immunglobuline und Serum-Protease-Inhibitoren, um nur einige der bekannten Substrate zu beeintr&auml;chtigen. Dar&uuml;ber hinaus reguliert aus anderen Streptokokken Proteine durch erniedrigende ihnen oder ihrer Freigabe von der bakteriellen Oberfl&auml;che. Trotz der F&uuml;lle der Literatur &uuml;ber vermeintliche aus Funktionen bleibt es viel Kontroverse &uuml;ber dieses Enzym, weil viele der gemeldeten Aktivit&auml;ten widerspr&uuml;chliche physiologische Ergebnissen f&uuml;hren w&uuml;rde. Hier &uuml;berpr&uuml;fen wir alle bekannten Host und bakterielle Protein-Substrate f&uuml;r aus, ihre Spaltung-Websites, und die Rolle dieses Enzyms in Streptokokken Pathogenese, basierend auf der aktuellen Literatur zu diskutieren.

Die Cystein-Proteinase aus von Streptococcus Pyogenes - ein potenter Modifizierer immunologisch wichtige Host und bakterielle Proteine.

Streptococco astratto gruppo A (Streptococcus pyogenes) &egrave; un patogeno esclusivamente umano che provoca un ampio spettro di malattie che vanno da faringite, a impetigine, a shock tossico, a necrotizzante fascite. La diversit&agrave; di questi stati di malattia necessita che S. pyogenes possiede la capacit&agrave; di modulare le risposte innate e adattive dell&#39;immune. SpeB, una proteinasi cisteina, &egrave; la proteina secreta predominante da S. pyogenes. Grazie alla sua relativamente indiscriminant specificit&agrave;, questo enzima &egrave; stato indicato per degradare la matrice extracellulare, citochine, chemochine, componenti del complemento, immunoglobuline e inibitori di proteasi del siero, per citarne solo alcuni dei substrati noti. Inoltre, SpeB regola altre proteine da streptococco da loro degradanti o rilasciarli dalla superficie batterica. Nonostante la ricchezza della letteratura sulle presunte funzioni SpeB, rimane molto polemica circa questo enzima perch&eacute; molte delle attivit&agrave; dichiarate produrrebbe risultati contraddittori fisiologici. Qui passiamo in rassegna tutti gli host conosciuti e substrati proteina batterica per SpeB, i siti di clivaggio e discutere il ruolo di questo enzima nella patogenesi dello streptococco sulla base della letteratura corrente.

La proteinasi cisteina SpeB da Streptococcus pyogenes - un potente modificatore di host immunologicamente importante e proteine batteriche.

&#x8981;&#x7D04;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; A &#x7403;&#x83CC; &#xFF08;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC;) &#x304B;&#x3089;&#x54BD;&#x982D;&#x708E;&#x3001;&#x81BF;&#x75C2;&#x75B9;&#x306B;&#x58CA;&#x6B7B;&#x6027;&#x7B4B;&#x819C;&#x708E;&#x3001;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6027;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x81F3;&#x308B;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3001;&#x5C02;&#x3089;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027; s. &#x611F;&#x67D3;&#x4E21;&#x65B9;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x3068;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SpeB &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A3;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;S. &#x611F;&#x67D3;&#x304B;&#x3089;&#x512A;&#x52E2;&#x306A;&#x5206;&#x6CCC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x7121;&#x5DEE;&#x5225;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x88DC;&#x4F53;&#x6210;&#x5206;, &#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;, &#x3068;&#x8840;&#x6E05;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x540D;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;SpeB &#x4ED6;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x5206;&#x89E3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x63A8;&#x5B9A; SpeB &#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x6587;&#x732E;&#x306E;&#x5BCC;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x77DB;&#x76FE;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x8AD6;&#x4E89;&#x304C;&#x6B8B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x7D30;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x57FA;&#x677F; SpeB&#x3001;&#x81EA;&#x5206;&#x306E;&#x80F8;&#x306E;&#x8C37;&#x9593;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x6587;&#x732E;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8A71;&#x3057;&#x5408;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SpeB &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A3;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC;-&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x4FEE;&#x98FE;&#x5B50;&#x3002;

&#xAC1C;&#xC694; &#xADF8;&#xB8F9; A &#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; (&#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; pyogenes) &#xC778; &#xB450; &#xC5FC;, &#xB18D;&#xAC00;&#xC9C4;, &#xB3C5;&#xC131; &#xC1FC;&#xD06C; necrotizing &#xADFC; &#xB9C9; &#xD558;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAE30;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xB113;&#xC740; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB294; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; S. pyogenes &#xBAA8;&#xB450; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBC0F; &#xC801;&#xC751;&#xD615; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SpeB, &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; S. pyogenes&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xC138; &#xBE44; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;&#xC801; indiscriminant &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC774;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC654;&#xB2E4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;, cytokines, chemokines, &#xBCF4;&#xC644; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0;, &#xBC0F; &#xD608; &#xCCAD; protease &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC774;&#xB984; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xC800;&#xD558;. &#xB610;&#xD55C;, SpeB &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xC800;&#xD558; &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC29;&#xCD9C; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xAD6C; &#xADE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC870;&#xC808;. &#xC0C1; SpeB &#xD568;&#xC218;&#xC5D0;&#xB294; &#xBB38;&#xD559; &#xBD80;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xC21C; &#xB41C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xD560; &#xAC83; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xB9CE;&#xC774; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9CE;&#xC740; &#xB17C;&#xB780;&#xC774; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. SpeB, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC720; &#xBC29; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xACE8;&#xC9DC;&#xAE30; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xD310; &#xAC80;&#xD1A0; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xAD6C; &#xADE0; pathogenesis &#xD604;&#xC7AC; &#xBB38;&#xD559; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC5D0;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB17C;&#xC758; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; pyogenes-immunologically &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC640; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; SpeB.

Estreptococo Resumen del grupo A (Streptococcus pyogenes) es un pat&oacute;geno exclusivamente humano que provoca un amplio espectro de enfermedades desde faringitis, imp&eacute;tigo, a choque t&oacute;xico, a la fascitis necrotizante. La diversidad de estos Estados de enfermedad requiere que S. pyogenes poseen la capacidad para modular la respuesta inmune innata y adaptativa. SpeB, una proteinasa de ciste&iacute;na, es la prote&iacute;na secretada predominante de S. pyogenes. Debido a su relativamente indiscriminada especificidad, esta enzima se ha demostrado que degradan la matriz extracelular, citocinas, quimiocinas, componentes del complemento, inmunoglobulinas e inhibidores de la proteasa de suero, por citar s&oacute;lo algunos de los sustratos conocidos. Adem&aacute;s, SpeB regula otras prote&iacute;nas estreptoc&oacute;cicas por les degradantes o liberarlos de la superficie bacteriana. A pesar de la riqueza de la literatura sobre supuesta SpeB funciones, existe mucha controversia sobre esta enzima porque muchas de las actividades divulgadas producir&iacute;a resultados fisiol&oacute;gicos contradictorios. Aqu&iacute; repasamos todos los host conocido y sustratos de prote&iacute;na bacteriana para SpeB, sus sitios de escote y discutir el papel de esta enzima en patogenesia estreptoc&oacute;cica basado en la literatura actual.

La proteinasa de ciste&iacute;na SpeB de Streptococcus pyogenes - un potente modificador de host inmunol&oacute;gicamente importante y prote&iacute;nas bacterianas.

A &#x65CF;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC; (&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;) &#x662F;&#x53EA;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x4ECE;&#x54BD;&#x708E;&#xFF0C;&#x5230;&#x8113;&#x75B1;&#x75AE;&#xFF0C;&#x6709;&#x6BD2;&#x7684;&#x51B2;&#x51FB;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x574F;&#x6B7B;&#x6027;&#x7B4B;&#x819C;&#x708E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x75BE;&#x75C5;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#xFF0C;&#x5C31;&#x5FC5;&#x987B; S.pyogenes &#x62E5;&#x6709;&#x8C03;&#x5236;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x3001; &#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;SpeB&#x3001; &#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF0C;&#x662F;&#x4ECE; S.pyogenes &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8BBE;&#x9632;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x5DF2;&#x88AB;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4F1A;&#x964D;&#x4F4E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x8865;&#x5145;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;&#x86CB;&#x767D;&#x9175;&#x7D20;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x540D;&#x79F0;&#x4F46;&#x5DF2;&#x77E5;&#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;SpeB &#x8C03;&#x8282;&#x5176;&#x4ED6;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7531;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x8FB1;&#x4EBA;&#x683C;&#x6216;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8868;&#x9762;&#x91CA;&#x653E;&#x5B83;&#x4EEC;&#x3002;&#x5047;&#x5B9A; SpeB &#x51FD;&#x6570;&#x4E0A;&#x7684;&#x6587;&#x5B66;&#x8D22;&#x5BCC;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x4ECD;&#x7136;&#x5F88;&#x591A;&#x5173;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x7684;&#x4E89;&#x8BBA;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5F88;&#x591A;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4F1A;&#x4EA7;&#x751F;&#x76F8;&#x4E92;&#x77DB;&#x76FE;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x8BA8;&#x6240;&#x6709;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x548C;&#x7EC6;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x8D28;&#x4E3A; SpeB&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5288;&#x88C2;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x5728;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5F53;&#x524D;&#x6587;&#x5B66;&#x7684;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x53D1;&#x75C5;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Group A streptococcus (Streptococcus pyogenes) is an exclusively human pathogen that causes a wide spectrum of diseases ranging from pharyngitis, to impetigo, to toxic shock, to necrotizing fasciitis. The diversity of these disease states necessitates that S. pyogenes possess the ability to modulate both the innate and adaptive immune responses. SpeB, a cysteine proteinase, is the predominant secreted protein from S. pyogenes. Because of its relatively indiscriminant specificity, this enzyme has been shown to degrade the extracellular matrix, cytokines, chemokines, complement components, immunoglobulins, and serum protease inhibitors, to name but a few of the known substrates. Additionally, SpeB regulates other streptococcal proteins by degrading them or releasing them from the bacterial surface. Despite the wealth of literature on putative SpeB functions, there remains much controversy about this enzyme because many of reported activities would produce contradictory physiological results. Here we review all known host and bacterial protein substrates for SpeB, their cleavage sites, and discuss the role of this enzyme in streptococcal pathogenesis based on the current literature.

Cysteine proteinase SpeB from Streptococcus pyogenes - a potent modifier of immunologically important host and bacterial proteins.

Streptocoque du groupe A (Streptococcus pyogenes) est un pathog&egrave;ne exclusivement humain qui provoque un large &eacute;ventail de maladies allant de pharyngite, imp&eacute;tigo, choc toxique, de fasciite n&eacute;crosante. La diversit&eacute; de ces &eacute;tats pathologiques n&eacute;cessite que S. pyogenes poss&egrave;dent la capacit&eacute; de moduler la r&eacute;ponse immunitaire inn&eacute;e et adaptative. SpeB, une prot&eacute;ase de cyst&eacute;ine, est la principale prot&eacute;ine s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e de S. pyogenes. En raison de son relativement sp&eacute;cificit&eacute; sans discernement, cette enzyme a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute;e que la d&eacute;gradation de la matrice extracellulaire, cytokines, chimiokines, composants du compl&eacute;ment, immunoglobulines et inhibiteurs de prot&eacute;ase s&eacute;rique, pour ne citer que quelques uns des substrats connus. En outre, SpeB r&eacute;glemente les autres prot&eacute;ines streptocoques en d&eacute;gradant eux ou eux dispensant de la surface bact&eacute;rienne. Malgr&eacute; la richesse de la litt&eacute;rature sur les fonctions SpeB putatives, il reste beaucoup de controverse au sujet de cette enzyme parce que plusieurs des activit&eacute;s mentionn&eacute;es pourraient produire des r&eacute;sultats physiologiques contradictoires. Ici nous passons en revue tous les h&ocirc;tes connus et substrats de la prot&eacute;ine bact&eacute;rienne pour SpeB, leurs sites de clivage et discuter du r&ocirc;le de cette enzyme dans la pathogen&egrave;se de streptocoque bas&eacute;e sur la litt&eacute;rature actuelle.

Prot&eacute;ase de cyst&eacute;ine SpeB de Streptococcus pyogenes - un puissant modificateur d&#39;h&ocirc;te immunologiquement important et des prot&eacute;ines bact&eacute;riennes.

Gruppe A-Streptokokken (Streptococcus Pyogenes) ist ein ausschlie&szlig;lich menschliche Krankheitserreger, die ein breites Spektrum an Krankheiten, die von Pharyngitis, bis hin zu Impetigo, toxischen Schock, nekrotisierende Fasziitis verursacht. Die Vielfalt dieser Krankheit Staaten erfordert, dass S. Pyogenes die F&auml;higkeit besitzen, sowohl die angeborene und adaptive Immunantworten zu modulieren. Aus, ein Cystein-Proteinase, ist das vorherrschende sezernierte Protein von S. Pyogenes. Wegen seiner relativ Indiscriminant Spezifit&auml;t, dieses Enzym nachweislich der extrazellul&auml;ren Matrix, Zytokine, Chemokine, Erg&auml;nzung Komponenten, Immunglobuline und Serum-Protease-Inhibitoren, um nur einige der bekannten Substrate zu beeintr&auml;chtigen. Dar&uuml;ber hinaus reguliert aus anderen Streptokokken Proteine durch erniedrigende ihnen oder ihrer Freigabe von der bakteriellen Oberfl&auml;che. Trotz der F&uuml;lle der Literatur &uuml;ber vermeintliche aus Funktionen bleibt es viel Kontroverse &uuml;ber dieses Enzym, weil viele der gemeldeten Aktivit&auml;ten widerspr&uuml;chliche physiologische Ergebnissen f&uuml;hren w&uuml;rde. Hier &uuml;berpr&uuml;fen wir alle bekannten Host und bakterielle Protein-Substrate f&uuml;r aus, ihre Spaltung-Websites, und die Rolle dieses Enzyms in Streptokokken Pathogenese, basierend auf der aktuellen Literatur zu diskutieren.

Cystein Proteinase aus von Streptococcus Pyogenes - ein potenter Modifizierer immunologisch wichtige Host und bakterielle Proteine.

Lo streptococco di gruppo A (Streptococcus pyogenes) &egrave; un patogeno esclusivamente umano che provoca un ampio spettro di malattie che vanno da faringite, a impetigine, a shock tossico, a necrotizzante fascite. La diversit&agrave; di questi stati di malattia necessita che S. pyogenes possiede la capacit&agrave; di modulare le risposte innate e adattive dell&#39;immune. SpeB, una proteinasi cisteina, &egrave; la proteina secreta predominante da S. pyogenes. A causa della sua relativamente indiscriminant specificit&agrave;, questo enzima &egrave; stato indicato per degradare la matrice extracellulare, citochine, chemochine, componenti del complemento, immunoglobuline e inibitori di proteasi del siero, per citarne solo alcuni dei substrati noti. Inoltre, SpeB regola altre proteine da streptococco da loro degradanti o rilasciarli dalla superficie batterica. Nonostante la ricchezza della letteratura sulle presunte funzioni SpeB, rimane molto polemica circa questo enzima perch&eacute; molte delle attivit&agrave; dichiarate produrrebbe risultati contraddittori fisiologici. Qui passiamo in rassegna tutti gli host conosciuti e substrati proteina batterica per SpeB, i siti di clivaggio e discutere il ruolo di questo enzima nella patogenesi dello streptococco sulla base della letteratura corrente.

Proteinasi cisteina SpeB da Streptococcus pyogenes - un potente modificatore di host immunologicamente importante e proteine batteriche.

&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; A &#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC; (&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC;) &#x304B;&#x3089;&#x54BD;&#x982D;&#x708E;&#x3001;&#x81BF;&#x75C2;&#x75B9;&#x306B;&#x58CA;&#x6B7B;&#x6027;&#x7B4B;&#x819C;&#x708E;&#x3001;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6027;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x81F3;&#x308B;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3001;&#x5C02;&#x3089;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027; s. &#x611F;&#x67D3;&#x4E21;&#x65B9;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x3068;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SpeB &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A3;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;S. &#x611F;&#x67D3;&#x304B;&#x3089;&#x512A;&#x52E2;&#x306A;&#x5206;&#x6CCC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x7121;&#x5DEE;&#x5225;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x88DC;&#x4F53;&#x6210;&#x5206;, &#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;, &#x3068;&#x8840;&#x6E05;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x540D;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;SpeB &#x4ED6;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x5206;&#x89E3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x63A8;&#x5B9A; SpeB &#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x6587;&#x732E;&#x306E;&#x5BCC;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x77DB;&#x76FE;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x8AD6;&#x4E89;&#x304C;&#x6B8B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x7D30;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x57FA;&#x677F; SpeB&#x3001;&#x81EA;&#x5206;&#x306E;&#x80F8;&#x306E;&#x8C37;&#x9593;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x6587;&#x732E;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8A71;&#x3057;&#x5408;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A3;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; SpeB &#x7FA4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x30FB;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x4FEE;&#x98FE;&#x5B50;&#x304B;&#x3089;&#x3002;

&#xADF8;&#xB8F9; A &#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; (&#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; pyogenes) &#xC778; &#xB450; &#xC5FC;, &#xB18D;&#xAC00;&#xC9C4;, &#xB3C5;&#xC131; &#xC1FC;&#xD06C; necrotizing &#xADFC; &#xB9C9; &#xD558;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAE30;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xB113;&#xC740; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB294; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; S. pyogenes &#xBAA8;&#xB450; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBC0F; &#xC801;&#xC751;&#xD615; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SpeB, &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; S. pyogenes&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xC138; &#xBE44; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;&#xC801; indiscriminant &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC774;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC654;&#xB2E4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;, cytokines, chemokines, &#xBCF4;&#xC644; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0;, &#xBC0F; &#xD608; &#xCCAD; protease &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC774;&#xB984; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xC800;&#xD558;. &#xB610;&#xD55C;, SpeB &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xC800;&#xD558; &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC29;&#xCD9C; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xAD6C; &#xADE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC870;&#xC808;. &#xC0C1; SpeB &#xD568;&#xC218;&#xC5D0;&#xB294; &#xBB38;&#xD559; &#xBD80;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xC21C; &#xB41C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xD560; &#xAC83; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xB9CE;&#xC774; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9CE;&#xC740; &#xB17C;&#xB780;&#xC774; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. SpeB, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC720; &#xBC29; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xACE8;&#xC9DC;&#xAE30; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xD310; &#xAC80;&#xD1A0; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xAD6C; &#xADE0; pathogenesis &#xD604;&#xC7AC; &#xBB38;&#xD559; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC5D0;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB17C;&#xC758; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; SpeB &#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; pyogenes-immunologically &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC640; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0;&#xC11C;.

Estreptococos del grupo A (Streptococcus pyogenes) son un pat&oacute;geno exclusivamente humano que provoca un amplio espectro de enfermedades desde faringitis, imp&eacute;tigo, a choque t&oacute;xico, a la fascitis necrotizante. La diversidad de estos Estados de enfermedad requiere que S. pyogenes poseen la capacidad para modular la respuesta inmune innata y adaptativa. SpeB, una proteinasa de ciste&iacute;na, es la prote&iacute;na secretada predominante de S. pyogenes. Debido su relativamente indiscriminada especificidad, esta enzima se ha demostrado que degradan la matriz extracelular, citocinas, quimiocinas, componentes del complemento, inmunoglobulinas e inhibidores de la proteasa de suero, por citar s&oacute;lo algunos de los sustratos conocidos. Adem&aacute;s, SpeB regula otras prote&iacute;nas estreptoc&oacute;cicas por les degradantes o liberarlos de la superficie bacteriana. A pesar de la riqueza de la literatura sobre supuesta SpeB funciones, existe mucha controversia sobre esta enzima porque muchas de las actividades divulgadas producir&iacute;a resultados fisiol&oacute;gicos contradictorios. Aqu&iacute; repasamos todos los host conocido y sustratos de prote&iacute;na bacteriana para SpeB, sus sitios de escote y discutir el papel de esta enzima en patogenesia estreptoc&oacute;cica basado en la literatura actual.

Proteinasa de ciste&iacute;na SpeB de Streptococcus pyogenes - un potente modificador de host inmunol&oacute;gicamente importante y prote&iacute;nas bacterianas.

&#x8BA1;&#x91CF;&#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x75C5;&#x539F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5BF9;&#x5E7F;&#x8C31; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x7C7B;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x8010;&#x836F;&#x3002;

Ratiometric fluorescence detection of pathogenic bacteria resistant to broad-spectrum Î²-lactam antibiotics.

D&eacute;tection de fluorescence ratiom&eacute;trique de bact&eacute;ries pathog&egrave;nes r&eacute;sistantes aux &beta;-lactamines &agrave; large spectre.

Ratiometrisch Fluoreszenzdetektion von pathogenen Bakterien gegen Breitspektrum-Beta-Lactam-Antibiotika resistent.

Raziometrici rilevazione a fluorescenza di batteri patogeni resistenti agli antibiotici ad ampio spettro &beta;-lattamico.

&#x75C5;&#x539F;&#x7D30;&#x83CC;&#x5E83;&#x57DF;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &beta;-&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30E0;&#x7CFB;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x30EC;&#x30B7;&#x30AA; &#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x86CD;&#x5149;&#x691C;&#x51FA;&#x3002;

&#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &beta;-&#xB77D;&#xD0D0; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xBE44;&#xC728; &#xAE30;&#xC900; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xCD9C;.

Detecci&oacute;n de fluorescencia radiom&eacute;trica de bacterias pat&oacute;genas resistentes a antibi&oacute;ticos &beta;-lact&aacute;micos de amplio espectro.

&#x80BD;&#x805A;&#x7CD6; (PG) &#x662F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7ED3;&#x6784;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6709;&#x81EA; PG &#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x5206;&#x88C2;&#x3002;&#x730E;&#x6237;&#x5EA7;&#x7684;&#x4E00;&#x7EC4; PG &#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x9176;&#x662F;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53; endolysins&#x3002;Endolysins &#x662F; PG &#x964D;&#x89E3;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x88C2;&#x89E3;&#x5468;&#x671F;&#x4E2D;&#x9003;&#x51FA;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;Endolysins&#x3001; &#x7EAF;&#x51C0;&#x548C;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x5916;&#x90E8;&#xFF0C;PG &#x65F6;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&quot;&#x4ECE;&#x88C2;&#x89E3;&#x65E0;&quot;&#x3002;&#x8BB8;&#x591A;&#x51FA;&#x7248;&#x7269;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x5982;&#x4F55;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6297;&#x83CC;&#x836F;&#x7269;&#x5BF9;&#x67D0;&#x4E9B;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x4EA7;&#x751F;&#x8010;&#x836F;&#x6027;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x73B0;&#x8C61;&#x3002;Endolysins &#x5177;&#x6709;&#x7279;&#x8272;&#x7684;&#x6A21;&#x5757;&#x5316;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5F80;&#x5F80;&#x5177;&#x6709;&#x591A;&#x4E2A;&#x6EB6;&#x548C;/&#x6216;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x7ED3;&#x5408;&#x57DF; &#xFF08;Cbd&#xFF09;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4F1A;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E0E;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176;&#x3001; &#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x3001; &#x80BD;&#x94FE;&#x5185;&#x5207;&#x9176;&#x6216;&#x6EB6; transglycosylase &#x6D3B;&#x52A8; PG &#x5E76;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E;&#x8981;&#x534F;&#x540C;&#x4E0E;&#x540C;&#x80DE; PG &#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x6216;&#x5176;&#x4ED6;&#x6297;&#x83CC;&#x836F;&#x7269;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x4E0E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x534F;&#x540C;&#x8FDB;&#x5316;&#xFF0C;&#x662F;&#x4EE5;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x662F;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x90A3;&#x4E48;&#x5BB9;&#x6613;&#x8C03;&#x7528;&#x62B5;&#x6297;&#x3002;&#x4F53;&#x5185;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x5DF2;&#x5F00;&#x653E;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x65B0;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4ECE;&#x98DF;&#x54C1;&#x5B89;&#x5168;&#x5230;&#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6297;&#x83CC;&#x836F;&#x7269;&#x5C31;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x96BE;&#x6CBB;&#x6027;&#x8010;&#x53D1;&#x5C55;&#x73AF;&#x5883;&#x51C0;&#x5316;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x3002;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x4F53;&#x5185;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x653E;&#x5230;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7AE0;&#x5305;&#x62EC;&#x5176;&#x4ED6;&#x4EBA;&#x4EEC;&#x719F;&#x77E5;&#x7684; PG &#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x6297;&#x83CC;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6297;&#x83CC;&#x5242;&#x7684; Endolysins&#x3002;

Peptidoglycan (PG) is the major structural component of the bacterial cell wall. Bacteria have autolytic PG hydrolases that allow the cell to grow and divide. A well-studied group of PG hydrolase enzymes are the bacteriophage endolysins. Endolysins are PG-degrading proteins that allow the phage to escape from the bacterial cell during the phage lytic cycle. The endolysins, when purified and exposed to PG externally, can cause "lysis from without." Numerous publications have described how this phenomenon can be used therapeutically as an effective antimicrobial against certain pathogens. Endolysins have a characteristic modular structure, often with multiple lytic and/or cell wall-binding domains (CBDs). They degrade the PG with glycosidase, amidase, endopeptidase, or lytic transglycosylase activities and have been shown to be synergistic with fellow PG hydrolases or a range of other antimicrobials. Due to the coevolution of phage and host, it is thought they are much less likely to invoke resistance. Endolysin engineering has opened a range of new applications for these proteins from food safety to environmental decontamination to more effective antimicrobials that are believed refractory to resistance development. To put phage endolysin work in a broader context, this chapter includes relevant studies of other well-characterized PG hydrolase antimicrobials.

Endolysins as antimicrobials.

Peptidoglycane (PG) est le principal composant structurel de la paroi cellulaire bact&eacute;rienne. Les bact&eacute;ries ont autolytique PG hydrolases qui permettent &agrave; la cellule &agrave; cro&icirc;tre et &agrave; diviser. Un groupe bien &eacute;tudi&eacute; des enzymes hydrolase PG sont l&#39;endolysins de bact&eacute;riophage. Endolysins sont PG capables de d&eacute;grader les prot&eacute;ines qui permettent de s&#39;&eacute;chapper de la cellule bact&eacute;rienne pendant le cycle lytique du phage phage. L&#39;endolysins, lorsque purifi&eacute;e et expos&eacute; aux PG ext&eacute;rieurement, peut provoquer &laquo; la lyse de sans. &raquo; Nombreuses publications ont d&eacute;crit comment ce ph&eacute;nom&egrave;ne peut &ecirc;tre utilis&eacute; en th&eacute;rapeutique comme un antimicrobien efficace contre certains agents pathog&egrave;nes. Endolysins ont une structure modulaire caract&eacute;ristique, souvent avec plusieurs domaines lytiques et/ou de liaison de la paroi cellulaire (DBC). Ils d&eacute;gradent le PG avec glycosidase, amidase, endopeptidase ou activit&eacute;s lytiques transglycosylase et montrent &agrave; agir en synergie avec les coll&egrave;gues PG hydrolases ou une gamme d&#39;autres antimicrobiens. En raison de la co-&eacute;volution des phages et h&ocirc;te, on pense qu&#39;ils sont beaucoup moins susceptibles d&#39;invoquer la r&eacute;sistance. Endolysin g&eacute;nie a ouvert une gamme de nouvelles applications pour ces prot&eacute;ines de salubrit&eacute; des aliments &agrave; la d&eacute;contamination environnementale aux antimicrobiens plus efficaces que l&#39;on croit r&eacute;fractaires au d&eacute;veloppement de la r&eacute;sistance. Mettre phage endolysin travail dans un contexte plus large, ce chapitre comporte des &eacute;tudes pertinentes d&#39;autres antimicrobiens d&#39;hydrolase PG bien caract&eacute;ris&eacute;s.

Endolysins antimicrobiens.

Peptidoglycane (PG) ist die wichtigste strukturelle Komponente der bakteriellen Zellwand. Bakterien haben Autolytische PG-HYDROLASEN, mit denen die Zelle zu wachsen und sich teilen. Eine gut erforscht Gruppe PG-Hydrolase-Enzyme sind die Endolysins Bakteriophage. Endolysins sind PG-erniedrigende Proteine, die das Bakterium w&auml;hrend der Phage lytischer Zyklus von der bakteriellen Zelle entkommen zu erm&ouml;glichen. Die Endolysins, wenn gereinigtes und PG extern, ausgesetzt k&ouml;nnen dazu f&uuml;hren, dass &quot;Lyse von ohne.&quot; Zahlreiche Publikationen haben beschrieben, wie dieses Ph&auml;nomen als eine effektive antimikrobielle gegen bestimmte Erreger therapeutisch eingesetzt werden kann. Endolysins haben eine charakteristische modulare Struktur, oft mit mehreren Dom&auml;nen lytischer bzw. Zellwand-Bindung (CBD). Sie beeintr&auml;chtigen die PG mit Glycosidaseinhibitoren, Amidase, Endopeptidase oder lytische Transglycosylase T&auml;tigkeiten und haben gezeigt worden, um Synergieeffekte mit anderen PG-HYDROLASEN oder eine Reihe von anderen Antibiotika werden. Aufgrund der Koevolution von Phagen und Host wird angenommen, dass sie sind viel weniger wahrscheinlich, zum Widerstand aufrufen. Endolysin Ingenieur hat eine Reihe neuer Anwendungen f&uuml;r diese Proteine von Lebensmittelsicherheit bis Umwelt Dekontamination zu wirksamer Antibiotika ge&ouml;ffnet, die geglaubt werden, feuerfeste Widerstand Entwicklung. Dieses Kapitel enth&auml;lt um Phage Endolysin Arbeit in einem gr&ouml;&szlig;eren Zusammenhang zu stellen, relevante Studien anderer antimikrobieller Mittel gut charakterisierten PG-Hydrolase.

Endolysins als antimikrobielle Substanzen.

Peptidoglicano (PG) &egrave; il principale componente strutturale della parete cellulare batterica. I batteri hanno autolitica PG idrolasi che permettono alla cellula di crescere e dividersi. Un gruppo ben studiato di enzimi idrolasi PG sono il endolysins del batteriofago. Endolysins sono proteine PG-degradanti che permettono il fago a fuggire dalla cellula batterica durante il ciclo litico del fago. Endolysins, quando purificata ed esposto a PG esternamente, pu&ograve; causare &quot;lisi da senza.&quot; Numerose pubblicazioni hanno descritto come questo fenomeno pu&ograve; essere usato terapeuticamente come un antimicrobico efficacia contro determinati agenti patogeni. Endolysins hanno una struttura modulare caratteristica, spesso con pi&ugrave; domini litici e/o parete cellulare-associazione (CBDs). Essi degradano il PG con glicosidasico, amidase, endopeptidasi o lytic transglycosylase attivit&agrave; e hanno dimostrati di essere sinergici con compagni PG idrolasi o una gamma di altri antimicrobici. A causa della coevoluzione di fago e host, si pensa che sono molto meno probabili richiamare la resistenza. Endolysin engineering ha aperto una vasta gamma di nuove applicazioni per queste proteine dalla sicurezza alimentare alla decontaminazione ambientale agli antimicrobici pi&ugrave; efficaci che si ritiene refrattario allo sviluppo di resistenza. Per mettere dei fagi endolysin opera in un contesto pi&ugrave; ampio, questo capitolo comprende studi pertinenti di altri antimicrobici di idrolasi PG ben caratterizzati.

Endolysins come antimicrobici.

&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3; (PG) &#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x69CB;&#x6210;&#x8981;&#x7D20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x83CC;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x88C2;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x81EA;&#x5DF1;&#x6D88;&#x5316;&#x306E; PG &#x52A0;&#x6C34;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; endolysins &#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x304F;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; PG &#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Endolysins &#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x6EB6;&#x83CC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x4E2D;&#x306B;&#x30A8;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D7;&#x3059;&#x308B;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF; PG &#x5206;&#x89E3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Endolysins &#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5916;&#x90E8;&#x304B;&#x3089;&#x306F;&#x3001;PG &#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x300C;&#x306A;&#x3057;&#x304B;&#x3089;&#x6EB6;&#x89E3;&#x300D;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x51FA;&#x7248;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x83CC;&#x85AC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6CBB;&#x7642;&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x8C61;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Endolysins &#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6EB6;&#x89E3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; (CBDs) &#x306E;&#x7279;&#x6709;&#x306A;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6EB6;&#x89E3; transglycosylase &#x6D3B;&#x52D5;&#x3084;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x65E5;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x7CD6;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3; PG &#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x3001;&#x76F8;&#x4E57;&#x4EF2;&#x9593; PG &#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x6297;&#x83CC;&#x5264;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x5171;&#x9032;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x3092;&#x547C;&#x3073;&#x51FA;&#x3059;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x5DE5;&#x5B66;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x304B;&#x3089;&#x98DF;&#x54C1;&#x5B89;&#x5168;&#x74B0;&#x5883;&#x6C5A;&#x67D3;&#x9664;&#x53BB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x767A;&#x96E3;&#x6CBB;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x83CC;&#x85AC;&#x306B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3088;&#x308A;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x914D;&#x7F6E;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x3088;&#x304F;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051; PG &#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6297;&#x83CC;&#x85AC;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x7AE0;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Endolysins &#x6297;&#x83CC;&#x85AC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3002;

Peptidoglycan (PG)&#xC740; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xAD6C;&#xC870; &#xC694;&#xC18C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xB294; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xC140; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; autolytic PG hydrolases. PG &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC774;&#xC57C;&#xAE30;&#xB3C4; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC740; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC624;&#xD30C;&#xC9C0; endolysins. Endolysins&#xB294; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; &#xC6A9;&#xADE0;&#xC131; &#xC8FC;&#xAE30; &#xB3D9;&#xC548; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0C8;&#xCD9C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; &#xC218; &#xC138; &#xC800;&#xD558; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. Endolysins, &#xC21C;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC678;&#xBD80;, PG&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &quot;lysis&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0;.&quot; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4; &#xC218;&#xC758; &#xCD9C;&#xD310;&#xBB3C;&#xC740; &#xD2B9;&#xC815; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xD56D;&#xADE0;&#xC73C;&#xB85C;&#xC774; &#xD604;&#xC0C1;&#xC744; therapeutically &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. Endolysins&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC6A9;&#xADE0;&#xC131; &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (CBDs)&#xC640; &#xC885;&#xC885; &#xD2B9;&#xC131; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xD615; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; glycosidase, amidase, endopeptidase, &#xB610;&#xB294; &#xC6A9;&#xADE0;&#xC131; transglycosylase &#xD65C;&#xB3D9; PG &#xC800;&#xD558; &#xACE0; &#xB3D9;&#xB8CC; PG hydrolases &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; antimicrobials&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC2DC;&#xB108;&#xC9C0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; coevolution &#xC778;&#xD574; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD6E8;&#xC52C; &#xC801;&#xC740; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xD638;&#xCD9C;&#xD560; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB41C;&#xB2E4;. Endolysin &#xACF5;&#xD559;&#xC774;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xD488; &#xC548;&#xC804; &#xC800;&#xD56D; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB0B4; &#xD654;&#xC73C;&#xB85C; &#xB354; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; antimicrobials &#xD658;&#xACBD; &#xC624;&#xC5FC; &#xC81C;&#xAC70;&#xB97C; &#xC5F4;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; endolysin &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xB123;&#xC5B4;,&#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; well-characterized PG &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; antimicrobials&#xC758; &#xAD00;&#xB828; &#xC5F0;&#xAD6C;.

Antimicrobials&#xB85C; Endolysins&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Peptidoglicano (PG) es el principal componente estructural de la pared celular bacteriana. Las bacterias tienen autol&iacute;tico hidrolasas PG que permiten a la c&eacute;lula crecer y dividirse. Un grupo bien estudiado de PG hidrolasa enzimas son el bacteri&oacute;fago endolysins. Endolysins son prote&iacute;nas degradadoras de PG que permiten el fago escapar de la c&eacute;lula bacteriana durante el ciclo l&iacute;tico de fago. El endolysins, cuando purificada y expuestos a PG externamente, puede causar &quot;lisis de sin.&quot; Numerosas publicaciones han descrito c&oacute;mo este fen&oacute;meno se puede utilizar terap&eacute;uticamente como un antimicrobiano eficaz contra ciertos pat&oacute;genos. Endolysins tienen una estructura modular caracter&iacute;stica, a menudo con m&uacute;ltiples dominios l&iacute;ticas o enlace de pared celular (CBDs). Que degradan el PG con glucosidasa, Amidasa, endopeptidasa o l&iacute;tica transglycosylase actividades y han demostrado ser sin&eacute;rgica con compa&ntilde;eros hidrolasas PG o una gama de otros antimicrobianos. Debido a la coevoluci&oacute;n de Fago y anfitri&oacute;n, se cree es mucho menos probables que invocar la resistencia. Endolysin Ingenier&iacute;a ha abierto una gama de nuevas aplicaciones de estas prote&iacute;nas de inocuidad de los alimentos a la descontaminaci&oacute;n ambiental a los antimicrobianos m&aacute;s eficaces que se cree refractaria al desarrollo de la resistencia. Para poner el fago endolysin trabajo en un contexto m&aacute;s amplio, este cap&iacute;tulo incluye estudios pertinentes de otros agentes antimicrobianos bien caracterizadas de hidrolasa de PG.

Endolysins como antimicrobianos.

&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x90E8;&#x7F72;&#xFF0C;&#x964D;&#x4F4E;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4ECE;&#x4E3B;&#x673A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x51FA;&#x53E3;&#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5F53;&#x5916;&#x90E8;&#x5E94;&#x7528;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9176;&#x7834;&#x574F;&#x5BB9;&#x6613;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6CBB;&#x7597;&#x5242;&#x5177;&#x6709;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x6700;&#x5F3A;&#x6548;&#x6EB6;&#x662F; PlyC&#xFF0C;&#x662F;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x9176;&#x7EC4;&#x88C5;&#x4ECE;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6; &#xFF08;PlyCA &#x548C; PlyCB&#xFF09;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x7684; PlyC &#x5168;&#x9176;&#x8FD8;&#x80FD;&#x7ED3;&#x6784;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x5355;&#x4E00;&#x7684; PlyCA &#x7ED3;&#x6784;&#x62F4;&#x73AF;&#x578B;&#x516B; PlyCB &#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5927;&#x4F1A;&#x3002;&#x7ED3;&#x6784;&#x5BFC;&#x5411;&#x7684;&#x8BF1;&#x53D8;&#x63ED;&#x793A;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x901A;&#x8FC7;&#x5728; PlyCB &#x4E0A;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x88C2;&#x53E3;&#x3002;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x6570;&#x636E;&#x63ED;&#x793A; PlyCA &#x5305;&#x542B;&#x9664;&#x4E86;&#x4EE5;&#x524D;&#x516C;&#x8BA4;&#x7684;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x3001; &#x7EC4;&#x6C28;&#x9178;&#x4F9D;&#x8D56; amidohydrolases/peptidases &#x50AC;&#x5316;&#x57DF;&#x82F7;&#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x57DF;&#x3002;&#x516B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x57DF;&#x4E0E;&#x50AC;&#x5316;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57DF;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x53EF;&#x80FD;&#x89E3;&#x91CA;&#x975E;&#x51E1;&#x6548;&#x4EF7; PlyC holoenyzme &#x5BF9;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x6EB6; PlyC x &#x5C04;&#x7EBF;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

Bacteriophages deploy lysins that degrade the bacterial cell wall and facilitate virus egress from the host. When applied exogenously, these enzymes destroy susceptible microbes and, accordingly, have potential as therapeutic agents. The most potent lysin identified to date is PlyC, an enzyme assembled from two components (PlyCA and PlyCB) that is specific for streptococcal species. Here the structure of the PlyC holoenzyme reveals that a single PlyCA moiety is tethered to a ring-shaped assembly of eight PlyCB molecules. Structure-guided mutagenesis reveals that the bacterial cell wall binding is achieved through a cleft on PlyCB. Unexpectedly, our structural data reveal that PlyCA contains a glycoside hydrolase domain in addition to the previously recognized cysteine, histidine-dependent amidohydrolases/peptidases catalytic domain. The presence of eight cell wall-binding domains together with two catalytic domains may explain the extraordinary potency of the PlyC holoenyzme toward target bacteria.

X-ray crystal structure of the streptococcal specific phage lysin PlyC.

Bact&eacute;riophages d&eacute;ploient les bact&eacute;riophages qui d&eacute;gradent la paroi cellulaire bact&eacute;rienne et de facilitent l&#39;&eacute;vacuation du virus de l&#39;h&ocirc;te. Lorsqu&#39;elle est appliqu&eacute;e de fa&ccedil;on exog&egrave;ne, ces enzymes d&eacute;truisent les microbes sensibles et donc potentiel comme agents th&eacute;rapeutiques. La lysine plus puissante identifi&eacute;e &agrave; ce jour est PlyC, une enzyme Assembl&eacute;e &agrave; partir de deux &eacute;l&eacute;ments (PlyCA et PlyCB) qui est sp&eacute;cifique pour les esp&egrave;ces de streptocoques. Ici, la structure de l&#39;holoenzyme PlyC r&eacute;v&egrave;le qu&#39;une seule portion de PlyCA est attach&eacute;e &agrave; une Assembl&eacute;e en forme d&#39;anneau de huit mol&eacute;cules PlyCB. Mutagen&egrave;se guid&eacute;e par structure r&eacute;v&egrave;le que la fixation de la paroi cellulaire bact&eacute;rienne est assur&eacute;e par une fente sur PlyCB. Contre toute attente, nos donn&eacute;es structurales r&eacute;v&egrave;lent que PlyCA contient un domaine de glycoside hydrolase outre la cyst&eacute;ine pr&eacute;alablement reconnu, domaine catalytique histidine-d&eacute;pendante amidohydrolases/peptidases. La pr&eacute;sence de huit domaines de liaison pari&eacute;taux ainsi que deux domaines catalytiques peut-&ecirc;tre expliquer l&#39;extraordinaire puissance de la holoenyzme de PlyC vers les bact&eacute;ries cibl&eacute;es.

Structure cristalline de la lysine de streptocoque bact&eacute;riophage sp&eacute;cifique PlyC.

Bakteriophagen bereitstellen lysine, die die bakterielle Zellwand abgebaut und erleichtern Virus Ausstieg vom Host. Wenn exogen angewendet, diese Enzyme zerst&ouml;ren empf&auml;nglicher Mikroben und dementsprechend haben Potential als Therapeutika. Die potentesten Lysin bisher identifiziert ist PlyC, ein Enzym aus zwei Komponenten (PlyCA und PlyCB) zusammengesetzt, die spezifisch f&uuml;r Streptokokken-Arten. Hier zeigt die Struktur der PlyC Erfahrung, dass eine einzelne PlyCA-Gruppe zu einer ringf&ouml;rmigen Assembly acht PlyCB Molek&uuml;le angebunden ist. Struktur-gef&uuml;hrte Mutagenese zeigt, dass die bakterielle Zellwand-Bindung durch einen Spalt am PlyCB erreicht wird. Unerwartet, zeigen unsere Strukturdaten, dass PlyCA ein Glykosid Hydrolase-Bereich neben der zuvor erkannten Cystein, Histidin-abh&auml;ngige Amidohydrolases/Peptidasen katalytische Dom&auml;ne enth&auml;lt. Das Vorhandensein von acht Zellwand-Bindung-Dom&auml;nen mit zwei katalytische Dom&auml;nen mag erkl&auml;ren, die au&szlig;ergew&ouml;hnliche Wirksamkeit von der PlyC-Holoenyzme in Richtung Ziel Bakterien.

R&ouml;ntgen-Kristallstruktur von den Streptokokken spezifische Phage Lysin PlyC.

Batteriofagi distribuire lysins che degradano la parete cellulare batterica e facilitare l&#39;uscita del virus dall&#39;host. Quando viene applicato in maniera esogena, questi enzimi distruggono i microbi sensibili e, di conseguenza, hanno un potenziale come agenti terapeutici. Il pi&ugrave; potente lisina identificata fino ad oggi &egrave; PlyC, un enzima assemblato da due componenti (PlyCA e PlyCB) che &egrave; specifico per la specie da streptococco. Qui la struttura dell&#39;esonucleasica PlyC rivela che un singolo gruppo di PlyCA &egrave; legato a un assembly a forma di anello di otto molecole di PlyCB. Mutagenesi guidata struttura rivela che l&#39;associazione della parete cellulare batterica &egrave; raggiunto attraverso una fenditura su PlyCB. Inaspettatamente, i nostri dati strutturali rivelano che PlyCA contiene un dominio di idrolasi del glicoside oltre la cisteina in precedenza riconosciuto, dominio catalitico istidina-dipendente amidohydrolases/peptidasi. La presenza di otto domini parete cellulare-associazione insieme a due domini catalitici pu&ograve; spiegare la straordinaria potenza dell&#39;holoenyzme PlyC verso batteri bersaglio.

Struttura di cristallo dei raggi x della lisina da streptococco fago specifico PlyC.

&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30A2;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x51FA;&#x53E3;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x5C55;&#x958B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5EA6;&#x5916;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E0A;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x65E5;&#x4ED8;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; PlyC&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC;&#x6027;&#x306E;&#x7A2E;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x3082;&#x306E; (PlyCA &#x304A;&#x3088;&#x3073; PlyCB) &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3059;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053; PlyC &#x306E;&#x30DB;&#x30ED;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x5358;&#x4E00; PlyCA &#x90E8;&#x4F4D; 8 PlyCB &#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x74B0;&#x72B6;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304B;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x305F;&#x5909;&#x7570;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x7D50;&#x5408; PlyCB &#x4E0A;&#x88C2;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E88;&#x671F;&#x305B;&#x305A;&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; PlyCA &#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;, &#x30D2;&#x30B9;&#x30C1;&#x30B8;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x578B; amidohydrolases/&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x89E6;&#x5A92;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x7CD6;&#x8CEA;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;8 &#x500B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x5171;&#x306B; 2 &#x3064;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x7D30;&#x83CC; PlyC holoenyzme &#x306E;&#x81E8;&#x6642;&#x306E;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x7403;&#x83CC;&#x7279;&#x5B9A;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; PlyC &#x306E; x &#x7DDA;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3002;

Bacteriophages lysins&#xB294; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD;&#xC744; &#xC800;&#xD558; &#xD558; &#xACE0; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD0C8;&#xCD9C;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC30;&#xD3EC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Exogenously &#xC801;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xC18C; &#xCDE8;&#xC57D; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xD30C;&#xAD34; &#xACE0;, &#xADF8;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;, &#xCE58;&#xB8CC;&#xC81C;&#xB85C; &#xC11C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;. &#xB0A0;&#xC9DC;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; lysin PlyC, &#xC5F0;&#xC1C4; &#xAD6C; &#xADE0; &#xC885;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xD6A8;&#xC18C; (PlyCA &#xBC0F; PlyCB)&#xC758; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xB9BD; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; PlyC holoenzyme &#xAD6C;&#xC870; &#xB2E8;&#xC77C; PlyCA moiety 8 PlyCB &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xACE0;&#xB9AC; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB2FF;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xAD6C;&#xC870; &#xAE30;&#xBC18; mutagenesis &#xBC1D;&#xD600; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; Plycb&#xC5D0; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xAC8C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xACF5;&#xAC1C; PlyCA glycoside &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC778;&#xC2DD; &#xB41C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;, &#xD788;&#xC2A4;&#xD2F0;&#xB518; &#xC885;&#xC18D; amidohydrolases/&#xC120;&#xD0DD;&#xC131; &#xCD09;&#xB9E4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 8 &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB450; &#xCD09;&#xB9E4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD568;&#xAED8; &#xC874;&#xC7AC; &#xB300;&#xC0C1; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; PlyC holoenyzme&#xC758; &#xD2B9;&#xBCC4; &#xD55C; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5F0;&#xC1C4; &#xAD6C; &#xADE0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; lysin Plyc&#xC758; x-&#xC120; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;.

Bacteri&oacute;fagos implementaci&oacute;n lysins que degradan la pared celular bacteriana y facilitan la salida del virus desde el host. Cuando se aplica de forma ex&oacute;gena, estas enzimas destruyen microbios susceptibles y, por consiguiente, tienen potencial como agentes terap&eacute;uticos. El m&aacute;s potente lysin identificado hasta la fecha es PlyC, una enzima montada a partir de dos componentes (PlyCA y PlyCB) que es espec&iacute;fica para especies de estreptococos. Aqu&iacute; la estructura de la PlyC holoenzyme revela que una sola mol&eacute;cula de PlyCA es atada a una Asamblea en forma de anillo de ocho mol&eacute;culas de PlyCB. Mutag&eacute;nesis guiada por estructura revela que la Uni&oacute;n de la pared celular bacteriana se logra a trav&eacute;s de una hendidura en PlyCB. Inesperadamente, nuestros datos estructurales revelan que PlyCA contiene un dominio de la hidrolasa de gluc&oacute;sido adem&aacute;s la ciste&iacute;na previamente reconocido, dominio catal&iacute;tico de histidina-dependiente amidohydrolases/peptidasas. La presencia de ocho dominios de uni&oacute;n a pared celular junto con dos dominios catal&iacute;ticos puede explicar la extraordinaria potencia de la holoenyzme de PlyC hacia las bacterias de destino.

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Extracellular proteolytic activities expressed by Bacillus pumilus isolated from endodontic and periodontal lesions. Journal of medical microbiology\| PubMed ID: 18436599	2008
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Daniel C. Nelson

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