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Examination of Thymic Positive and Negative Selection by Flow Cytometry

A healthy immune system requires that T cells respond to foreign  antigens while remaining tolerant to self-antigens. Random rearrangement of the  T cell ...

University of Alberta

&#x80F8;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x80F8;&#x817A;&#x4E2D;&#x7684;&#x79EF;&#x6781;&#x548C;&#x6D88;&#x6781;&#x9009;&#x62E9;&#x6210;&#x719F;&#x548C;&#x81EA;&#x6211;&#x5BBD;&#x5BB9; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6C47;&#x8F91;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;Bim &#x6D46;&#x6DB2; Bcl-2 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x9634;&#x6027;&#x9009;&#x62E9;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80F8;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x63A5;&#x6536;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5F3A;&#x70C8;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x81EA;&#x6211;&#x6297;&#x539F; (&#x4E4C;&#x5DF4;)&#xFF0C;Bim &#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x514B;&#x9686;&#x5220;&#x9664;&#x7B2C; 4.1 &#x9879;&#x81EA;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x80F8;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x51CB;&#x4EA1;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x5220;&#x9664;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x4E0E;&#x4E4C;&#x5DF4;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x539F; &#xFF08;TRAs&#xFF09; &#x514B;&#x9686;&#x5220;&#x9664;&#x9700;&#x8981;&#x79EF;&#x6781;&#x9009;&#x62E9;&#x548C; CCR7 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230;&#x9AD3;&#x8D28;&#x3002;&#x8FD9;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x6D4B; Bim &#x662F;&#x540E;&#x8005;&#x6240;&#x9700;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x5728;&#x514B;&#x9686;&#x5220;&#x9664;&#x5230; TRA Bim &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x9020; (BM) &#x9AA8;&#x9AD3;&#x5D4C;&#x5408;&#x4F53; OT-&#x6211; Bim &#x4E0D;&#x8DB3;&#x6216;-&#x8DB3;&#x591F;&#x6350;&#x52A9;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE;&#x819C;&#x7684;&#x6536;&#x4EF6;&#x4EBA;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x9E21;&#x5375;&#x6E05;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x5927;&#x9F20;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50; (Rip mOVA&#xFF09; &#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5230; TRA &#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x5220;&#x9664;&#x88AB;&#x5B8C;&#x5168;&#x5E9F;&#x9664;&#x7684; Bim &#x548C;&#x5927;&#x6279;&#x6210;&#x719F; OT &#x6CA1;&#x6709;-&#x6211; CD8 T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5B58;&#x6D3B;&#x5728;&#x5916;&#x56F4;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5927;&#x91CF;&#x7684; autoreactive T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#x4E0D;&#x5F00;&#x53D1;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x548C; OT-&#x6211;&#x7684; Bim &#x7F3A;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5D4C;&#x5408;&#x4F53; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x53D7;&#x635F;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x5411;&#x94C1;&#x8DEF;&#x5C40;&#x4E0E;&#x4E4C;&#x5DF4;&#x4E3A;&#x514B;&#x9686;&#x5220;&#x9664;&#x63D0;&#x4F9B;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x9274;&#x522B;&#x3001; &#x80F8;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x5728;&#x3001; &#x5206;&#x5B50;&#x8981;&#x6C42;&#x4E0B;&#x6E38; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53; (TCR) &#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x6DF1;&#x523B;&#x63A7;&#x5236; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x80F8;&#x817A;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x5220;&#x9664;&#x6CA1;&#x6709; autoreactivity &#x5176;&#x4ED6;&#x5BB9;&#x9519;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;

&#x6D46;&#x6DB2;&#x86CB;&#x767D; Bim &#x65F6;&#x5DEE;&#x5F02;&#x9700;&#x8981;&#x80F8;&#x817A;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x5220;&#x9664;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x539F;&#x4E0E;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x3002;

Positive and negative selection of thymocytes in the thymus are critical for the development of a mature and self-tolerant T-cell repertoire. The proapoptotic Bcl-2 family member Bim is important for negative selection by inducing apoptosis in thymocytes receiving a strong signal through their antigen receptor. However, in the case of ubiquitous self-antigens (UbA), Bim is not required for the clonal deletion of self-reactive thymocytes, suggesting the existence of nonapoptotic clonal deletion mechanisms. Unlike UbA, clonal deletion to tissue-restricted antigens (TRAs) requires positive selection and CCR7-mediated migration to the medulla. This led us to hypothesize that Bim is required for the latter. To study the role of Bim in clonal deletion to TRA, we constructed bone marrow (BM) chimeras using OT-I Bim-deficient or -sufficient donor bone marrow and recipients that express membrane bound chicken ovalbumin under control of the rat insulin promoter (Rip-mOVA). We found that clonal deletion to TRA was completely abrogated in the absence of Bim and large numbers of mature OT-I CD8 T cells survived in the periphery. Despite the large numbers of autoreactive T cells, the chimeras did not develop diabetes and OT-I Bim-deficient T cells from these chimeras were functionally impaired. Collectively, these data provide unique evidence of a differential, thymocyte-intrinsic, molecular requirement downstream of the T-cell receptor (TCR) for clonal deletion to UbA versus TRA and highlight the profound ability of other tolerance mechanisms to control T-cell autoreactivity in the absence of thymic clonal deletion.

Proapoptotic protein Bim is differentially required during thymic clonal deletion to ubiquitous versus tissue-restricted antigens.

S&eacute;lection positive et n&eacute;gative des thymocytes dans le thymus sont essentielles pour l&#39;&eacute;laboration d&#39;un r&eacute;pertoire de lymphocytes T mature et auto-tol&eacute;rant. Membre de la famille pro-apoptotique Bcl-2 Bim est important pour la s&eacute;lection n&eacute;gative en induisant l&#39;apoptose des thymocytes recevant un signal fort &agrave; travers leur r&eacute;cepteur d&#39;antig&egrave;ne. Toutefois, dans le cas des auto-antig&egrave;nes omnipr&eacute;sents (UbA), Bim n&#39;est pas requis pour la d&eacute;l&eacute;tion clonale des thymocytes autor&eacute;actifs, sugg&eacute;rant l&#39;existence de m&eacute;canismes de d&eacute;l&eacute;tion clonale de nonapoptotic. Contrairement &agrave; UbA, d&eacute;l&eacute;tion clonale aux antig&egrave;nes restreints aux tissus (EMR) n&eacute;cessite une s&eacute;lection positive et CCR7 induite par la migration vers la moelle. Ceci nous a conduit &agrave; &eacute;mettre l&#39;hypoth&egrave;se que le Bim est requis pour ce dernier. Afin d&#39;&eacute;tudier le r&ocirc;le de Bim dans la d&eacute;l&eacute;tion clonale &agrave; TRA, nous avons construit des chim&egrave;res de moelle osseuse (BM) &agrave; l&#39;aide de OT-j&#39;ai Bim d&eacute;ficient ou - suffisante moelle de donneur et les b&eacute;n&eacute;ficiaires qui expriment la membrane li&eacute; l&#39;ovalbumine poulet sous le contr&ocirc;le du promoteur de l&#39;insuline du rat (Rip-mOVA). Nous avons trouv&eacute; que la d&eacute;l&eacute;tion clonale &agrave; TRA &eacute;tait compl&egrave;tement abrog&eacute;e en l&#39;absence de Bim et un grand nombre d&#39;OT mature-j&#39;ai T CD8 cellules ont surv&eacute;cu dans la p&eacute;riph&eacute;rie. Malgr&eacute; le grand nombre de cellules autor&eacute;actives T, les chim&egrave;res n&#39;a pas d&eacute;velopp&eacute; le diab&egrave;te et OT-j&#39;ai Bim-d&eacute;ficients en cellules de T de ces chim&egrave;res &eacute;taient fonctionnellement avec facult&eacute;s affaiblies. Collectivement, ces donn&eacute;es fournissent des t&eacute;moignage unique d&#39;une exigence diff&eacute;rentielle, thymocyte intrins&egrave;que, mol&eacute;culaire en aval du r&eacute;cepteur des cellules T (TCR) pour la suppression clonale &agrave; UbA versus TRA et mettre en &eacute;vidence la capacit&eacute; profonde d&#39;autres m&eacute;canismes de tol&eacute;rance pour contr&ocirc;ler l&#39;autor&eacute;activit&eacute; de lymphocytes en l&#39;absence d&#39;une d&eacute;l&eacute;tion clonale thymique.

Prot&eacute;ine pro-apoptotique Bim est diff&eacute;rentiellement requis lors de la suppression clonale thymique sur omnipr&eacute;sent contre les antig&egrave;nes restreints aux tissus.

Positive und negative Auswahl von Thymozyten im Thymus sind entscheidend f&uuml;r die Entwicklung der T-Zell-Repertoire der Reifen und selbst-tolerant. Das Proapoptotischen Bcl-2-Familienmitglied Bim ist wichtig f&uuml;r negative Auswahl durch induzieren Apoptose in Thymozyten empfangen ein starkes Signal durch ihre Antigen-Rezeptor. Ist jedoch im Falle der allgegenw&auml;rtigen selbst-Antigene (UbA), Bim nicht erforderlich die klonale L&ouml;schung Selbstzersetzliche Thymozyten, die Existenz von Nonapoptotic klonische Auslassung Mechanismen vorgeschlagen. Anders als UbA erfordert klonalen L&ouml;schung auf Gewebe eingeschr&auml;nkte Antigene (TRAs) positive Selektion und CCR7-vermittelten Migration auf die Medulla. Dies f&uuml;hrte uns zu vermuten, dass Bim f&uuml;r Letzteres erforderlich ist. Um die Rolle der Bim klonalen L&ouml;schung zu TRA zu studieren, konstruierten wir Knochenmark (BM) Chim&auml;ren mit OT-ich Bim-defizienten oder - ausreichend Knochenmark Spender und Empf&auml;nger, die Membran zu schnelles Huhn Eieralbumin unter Kontrolle der Ratte Insulin Promotor (Rip-mOVA) gebunden. Wir fanden, dass klonische Auslassung zu TRA komplett ohne Bim und eine gro&szlig;e Anzahl von Reifen OT geabschafft wurde-ich CD8 T Zellen in der Peripherie &uuml;berlebt. Trotz der gro&szlig;en Zahl der autoreaktive T-Zellen, die Chim&auml;ren nicht entwickeln Diabetes und OT-ich Bim-defizienten T-Zellen aus diesen Chim&auml;ren wurden funktionell beeintr&auml;chtigt. Gemeinsam diese Daten sieht eine eindeutige Beweise f&uuml;r eine differenzielle, Thymocyte systeminterne, molekulare Voraussetzung stromabw&auml;rts von der T-Zell-Rezeptor (TCR) an UbA gegen&uuml;ber TRA klonische Auslassung und markieren die profunde F&auml;higkeit anderer Toleranz Mechanismen zur Steuerung der T-Zell-Autoreactivity in Ermangelung Thymom klonische Auslassung.

Proapoptotischen Protein ist Bim w&auml;hrend Thymom klonalen L&ouml;schvorgang allgegenw&auml;rtigen gegen Gewebe-eingeschr&auml;nkte Antigene differentiell erforderlich.

Selezione positiva e negativa di timociti nel timo sono fondamentali per lo sviluppo di un repertorio delle cellule T maturo e auto-tolleranza. Il membro della famiglia Bcl-2 Miselli Bim &egrave; importante per la selezione negativa da indurre apoptosi in timociti riceve un segnale forte attraverso i recettori dell&#39;antigene. Tuttavia, nel caso di auto-antigeni ubiquitari (UbA), Bim non &egrave; richiesto per la delezione clonale di timociti AUTOREATTIVO, suggerendo l&#39;esistenza di meccanismi di delezione clonale di nonapoptotic. A differenza di UbA, delezione clonale agli antigeni tessuto-limitato (TRAs) richiede la selezione positiva e CCR7-mediata di migrazione verso il midollo. Questo ci ha portato ad ipotizzare che il Bim &egrave; richiesto per quest&#39;ultimo. Per studiare il ruolo di Bim in delezione clonale di TRA, abbiamo costruito chimere del midollo osseo (BM) utilizzando OT-I Bim-carenti o - sufficiente del midollo osseo di donatori e destinatari che esprimono la membrana associato ovoalbumina pollo sotto il controllo del promotore di insulina del ratto (Rip-mOVA). Abbiamo trovato che la delezione clonale a TRA completamente &egrave; stata abrogata in assenza di Bim e un gran numero di OT maturo-io T CD8 cellule sopravvissero nella periferia. Nonostante il gran numero di cellule T autoreattivi, le chimere non ha fatto sviluppare diabete e OT-I Bim-deficienti cellule T da queste chimere erano funzionalmente compromesse. Collettivamente, questi dati forniscono prove uniche di un requisito di differenziale, timocita intrinseco, molecolare a valle del recettore delle cellule T (TCR) per delezione clonale di UbA versus TRA ed evidenziano la capacit&agrave; profonda di altri meccanismi di tolleranza per il controllo delle cellule T autoreactivity in assenza di delezione clonale del timo.

Miselli proteina Bim &egrave; differenzialmente richiesto durante timica delezione clonale alla onnipresente contro antigeni tessuto-limitato.

&#x6B63;&#x3068;&#x8CA0;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x80F8;&#x817A;&#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x3068;&#x81EA;&#x5DF1;&#x5BDB;&#x5BB9;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9; Bcl 2 &#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4E00;&#x54E1; Bim &#x305D;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x53D7;&#x4FE1;&#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8CA0;&#x306E;&#x6DD8;&#x6C70;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x81EA;&#x5DF1;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x5834;&#x5408; (&#x59E5;)&#x3001;Bim nonapoptotic &#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x81EA;&#x5DF1;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x306F;&#x5FC5;&#x8981;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x59E5;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x306B;&#x306F;&#x6B63;&#x306E;&#x6DD8;&#x6C70;&#x3068;&#x9AC4;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E; CCR7 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D44;&#x7E54;&#x5236;&#x9650;&#x6297;&#x539F; (&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D8;&#x30EB;&#x30E1;&#x30C3;&#x30C8;) &#x3078;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Bim &#x304C;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x5C0E;&#x3044;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x306B; TRA &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Bim &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; OT &#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x9AA8;&#x9AC4; (BM) &#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;-&#x79C1;&#x306F; Bim &#x6B20;&#x4E4F;&#x307E;&#x305F;&#x306F; - &#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x3068;&#x819C;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B9; &#x30FB;&#x53D7;&#x4FE1;&#x8005;&#x9D8F;&#x30AA;&#x30DC;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3; &#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#xFF08;Rip mOVA&#xFF09; &#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x4E0B;&#x3067;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306B; TRA &#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x524A;&#x9664; Bim &#x3068;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F; OT &#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;-&#x79C1;&#x306F; CD8 T &#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x8FBA;&#x306B;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x81EA;&#x5DF1;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x591A;&#x6570;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x3068; OT &#x306B;&#x306F;&#x767A;&#x5C55;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;-&#x79C1;&#x306F; Bim &#x6B20;&#x4E4F; T &#x7D30;&#x80DE;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x304B;&#x3089;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x307E;&#x3068;&#x3081;&#x3066;&#x59E5; TRA &#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x7528;&#x5DEE;&#x52D5;, &#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307F;, &#x5206;&#x5B50;&#x8981;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; &#xFF08;TCR&#xFF09; &#x306E;&#x4E00;&#x610F;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x80F8;&#x817A;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x6DF1;&#x9060;&#x306A;&#x80FD;&#x529B;&#x4ED6;&#x8010;&#x6027;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3002;

Bim &#x3092;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5236;&#x9650;&#x5BFE;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x306B;&#x80F8;&#x817A;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x4E2D;&#x306B;&#x5DEE;&#x52D5;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC120;&#xD0DD;&#xC744; thymocytes thymus&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC131;&#xC219; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xAE30; &#xAD00;&#xC6A9; T-&#xC140; &#xB808; &#xD37C; &#xD1A0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Proapoptotic bcl-2 &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; Bim thymocytes &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC15;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC218;&#xC2E0;&#xC5D0; apoptosis&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD80;&#xC815; &#xC120;&#xD0DD;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xC140;&#xD504;-&#xD56D; (UbA)&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; Bim &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; self-reactive thymocytes &#xD074;&#xB860; &#xC0AD;&#xC81C; nonapoptotic &#xD074;&#xB860; &#xC0AD;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548;. UbA, &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC870;&#xC9C1; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xD56D; &#xC6D0; (&#xD2B8;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD14C;&#xBCA0;&#xB808;)&#xC5D0; &#xD074;&#xB860; &#xC0AD;&#xC81C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC120;&#xD0DD;&#xACFC; &#xBAA8; &#xC218;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC744; CCR7 &#xC911;&#xC7AC; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Bim&#xC740; &#xD6C4;&#xC790;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC00;&#xC124;. TRA &#xD074;&#xB860; &#xC0AD;&#xC81C;&#xC5D0; Bim&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; OT&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACE8; &#xC218; (BM) &#xD0A4;&#xBA54;&#xB77C; &#xC0DD;&#xC131;-&#xB09C; Bim &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB610;&#xB294;-&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xACE8; &#xC218; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9C9; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xBC1B;&#xB294; &#xC0AC;&#xB78C; &#xBC16;&#xC5D0; &#xCE58;&#xD0A8; ovalbumin &#xC950; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; (Rip mOVA)&#xC758; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD558;&#xC5D0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Bim&#xACFC; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; OT&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC218;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xD074;&#xB860; &#xC0AD;&#xC81C; TRA &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;-&#xB09C; CD8 T &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0; &#xC0B4;&#xC544;. Autoreactive T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD070; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xD0A4;&#xBA54;&#xB77C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;&#xACFC; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xC804;-&#xB098; &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; Bim&#xC774;&#xC774; &#xD0A4;&#xBA54;&#xB77C;&#xC758; T &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD1B5;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; TRA &#xB300; Uba&#xB97C; &#xD074;&#xB860; &#xC0AD;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCR)&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9;, thymocyte &#xB0B4;&#xC7A5;, &#xBD84;&#xC790; &#xC694;&#xAD6C; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC;&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; thymic &#xD074;&#xB860; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC5C6;&#xC774; T-&#xC140; autoreactivity &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xD0C0; &#xB0B4;&#xACB0;&#xD568;&#xC131; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC2EC;&#xC624;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC15;&#xC870;.

Proapoptotic &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Bim&#xC740; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1; &#xC81C;&#xD55C; &#xB300; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4;&#xB97C; thymic &#xD074;&#xB860; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xCC28;&#xB3D9; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Selecci&oacute;n positiva y negativa de los timocitos en el timo son cr&iacute;ticos para el desarrollo de un repertorio de c&eacute;lulas T maduro y ser tolerante. El miembro de la familia proapopt&oacute;ticas Bcl-2 Bim es importante para la selecci&oacute;n negativa mediante la inducci&oacute;n de apoptosis en timocitos recibe una se&ntilde;al fuerte a trav&eacute;s de su receptor de ant&iacute;geno. Sin embargo, en el caso de la omnipresentes uno mismo-ant&iacute;genos (UbA), Bim no se requiere para la delecci&oacute;n clonal de los timocitos reacci&oacute;n espont&aacute;nea, sugiriendo la existencia de mecanismos de delecci&oacute;n clonal de nonapoptotic. A diferencia de la UbA, delecci&oacute;n clonal a los ant&iacute;genos del tejido restringidos (TRAs) requiere la selecci&oacute;n positiva y migraci&oacute;n CCR7-mediada a la m&eacute;dula. Esto nos llev&oacute; a la hip&oacute;tesis de que el Bim es necesaria para el &uacute;ltimo. Para estudiar el papel de Bim en delecci&oacute;n clonal a TRA, construimos quimeras de m&eacute;dula &oacute;sea (Mo) usando OT-I Bim-deficiente o - suficientes m&eacute;dula de donantes y recipientes que expresen la membrana destino ovoalb&uacute;mina de pollo bajo el control del promotor de la insulina de rata (Rip-mOVA). Encontramos que delecci&oacute;n clonal a TRA totalmente fue abrogado en ausencia de Bim y gran cantidad de maduro OT-I T CD8 c&eacute;lulas sobrevivieron en la periferia. A pesar de la gran cantidad de c&eacute;lulas autorreactivas T, las quimeras no desarrollaron diabetes y OT-me Bim-deficientes las c&eacute;lulas de T de estas quimeras eran funcionalmente. Colectivamente, estos datos proporcionan evidencia &uacute;nica de un requisito del diferencial, timocitos intr&iacute;nseco, molecular aguas abajo de los receptores de c&eacute;lulas T (TCR) por delecci&oacute;n clonal a UbA frente a TRA y resaltar la profunda capacidad de otros mecanismos de tolerancia para controlar autoreactivity de c&eacute;lulas T en la ausencia de delecci&oacute;n clonal t&iacute;mico.

Prote&iacute;nas proapopt&oacute;ticas Bim diferencialmente durante es necesario t&iacute;mica delecci&oacute;n clonal a omnipresente frente a ant&iacute;genos de tejido restringidos.

Alexander Y.W. Suen

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