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Tissue Engineering of the Intestine in a Murine Model

Tissue-engineered small intestine (TESI) has successfully been used to rescue Lewis rats after massive small bowel resection, resulting in return to ...

Keck School of Medicine of the University of Southern California

&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x4E25;&#x91CD;&#x80A2;&#x4F53;&#x7F3A;&#x8840;&#x60A3;&#x8005;&#x808C;&#x5185;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (VEGF) &#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x7597;&#x6548;&#x3002;&#x8D44;&#x6599;&#x592A;&#x5C11;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x662F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5173;&#x4E8E; (1) &#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#xFF0C;(2) &#x76F8;&#x5173;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;-2 (FGF-2) &#x548C; (3) &#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x4E0D;&#x5229;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E; VEGF &#x8868;&#x8FBE; VEGF &#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89E3;&#x51B3;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x8FC7;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; VEGF165 &#x4F7F;&#x7528;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4ED9;&#x53F0;&#x75C5;&#x6BD2; (&#x7A7A;&#x7F3A;) &#x76F4;&#x63A5;&#x76F8;&#x6BD4; FGF-2 &#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x808C;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7684;&#x7A7A;&#x7F3A;&#x5927;&#x5927;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4E86; FGF-2&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4FDD;&#x80A2;&#x663E;&#x8457;&#x7597;&#x6548;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x704C;&#x6D41;&#x4E0E;&#x589E;&#x5F3A;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; VEGF &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x80A2;&#x4F53;&#x7F3A;&#x8840;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;VEGF165 &#x9AD8;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x57FA;&#x51C6;&#x65E5; 1&#xFF0C;5 &#x500D;&#x8FD8;&#x5F3A;&#x70C8;&#x8BF1;&#x53D1;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; VEGF &#x5728;&#x808C;&#x8089;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0D;&#x6062;&#x590D;&#x8840;&#x6DB2;&#x704C;&#x6D41;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x52A0;&#x901F;&#x7684;&#x4E0B;&#x80A2;&#x622A;&#x80A2;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x53EF;&#x884C;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x7684;&#x4EFB;&#x4E00; VEGF165-&#x6216; FGF-2-&#x6CBB;&#x7597;&#x7F3A;&#x8840;&#x6027;&#x80A2;&#x4F53;&#x663E;&#x793A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x6297;&#x4F53;&#x9633;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3002;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x65B0;&#x6210;&#x7ACB;&#x7684;&#x8239;&#x53EA;&#x7531;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x6297;&#x4F53;&#x9633;&#x6027;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x886C;&#x780C;&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5927;&#x5927;&#x4E0D;&#x5B89;&#x4E0E; VEGF &#x7684;&#x808C;&#x8089;&#x4E2D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6CBB;&#x7597;&#x6548;&#x679C; FGF-2 &#x5B8C;&#x5168;&#x800C;&#x51CF;&#x5F31;&#x6297; VEGF &#x7684;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x6307;&#x793A;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; VEGF &#x786E;&#x5B9E;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E; FGF-2 &#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; VEGF &#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x4F46;&#x5E94;&#x4E3A;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6CBB;&#x7597;&#x80A2;&#x4F53;&#x7F3A;&#x8840;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x7CBE;&#x96D5;&#x7EC6;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;FGF-2&#x3001; &#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; VEGF&#xFF0C;&#x7EDF;&#x4E00;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7279;&#x6548;&#x7597;&#x6548;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6CBB;&#x7597;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x89C1;&#x89E3;&#x3002;

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Recent studies suggest the possible therapeutic effect of intramuscular vascular endothelial growth factor (VEGF) gene transfer in individuals with critical limb ischemia. Little information, however, is available regarding (1) the required expression level of VEGF for therapeutic effect, (2) the related expression of endogenous angiogenic factors, including fibroblast growth factor-2 (FGF-2), and (3) the related adverse effects due to overexpression of VEGF. To address these issues, we tested effects of overexpression of VEGF165 using recombinant Sendai virus (SeV), as directly compared with FGF-2 gene transfer. Intramuscular injection of SeV strongly boosted FGF-2, resulting in significant therapeutic effects for limb salvage with increased blood perfusion associated with enhanced endogenous VEGF expression in murine models of critical limb ischemia. In contrast, VEGF165 overexpression, 5-times higher than that of baseline on day 1, also strongly evoked endogenous VEGF in muscles, resulting in an accelerated limb amputation without recovery of blood perfusion. Interestingly, viable skeletal muscles of either VEGF165- or FGF-2-treated ischemic limbs showed similar platelet-endothelial cell adhesion molecule-1-positive vessel densities. Maturation of newly formed vessels suggested by smooth muscle cell actin-positive cell lining, however, was significantly disturbed in muscles with VEGF. Further, therapeutic effects of FGF-2 were completely diminished by anti-VEGF neutralizing antibody in vivo, thus indicating that endogenous VEGF does contribute to the effect of FGF-2. These results suggest that VEGF is necessary, but should be delicately regulated to lower expression to treat ischemic limb. The therapeutic effect of FGF-2, associated with the harmonized angiogenic effects seen with endogenous VEGF, provides important insights into therapeutic angiogenesis.

Angiogenic gene therapy for experimental critical limb ischemia: acceleration of limb loss by overexpression of vascular endothelial growth factor 165 but not of fibroblast growth factor-2.

Des &eacute;tudes r&eacute;centes sugg&egrave;rent l&#39;effet th&eacute;rapeutique possible du transfert de g&egrave;nes de facteur de croissance de l&#39;endoth&eacute;lium vasculaire (VEGF) par voie intramusculaire chez les individus pr&eacute;sentant une isch&eacute;mie critique limb. Peu d&#39;information, cependant, est disponible au sujet de (1) le niveau d&#39;expression requise du VEGF pour effet th&eacute;rapeutique, (2) l&#39;expression des facteurs angiog&eacute;niques endog&egrave;nes, y compris le facteur de croissance des fibroblastes-2 (FGF-2) et (3) les effets ind&eacute;sirables associ&eacute;s &agrave; cause de la surexpression du VEGF. Pour r&eacute;soudre ces probl&egrave;mes, nous avons test&eacute; les effets de la surexpression du VEGF165 &agrave; l&#39;aide de virus recombinant de Sendai (SeV), comme &eacute;tant directement compar&eacute; avec le transfert de g&egrave;nes de FGF-2. Injection intramusculaire de SeV a fortement stimul&eacute; FGF-2, entra&icirc;nant des effets th&eacute;rapeutiques importants pour le sauvetage d&#39;un membre avec perfusion sanguine accrue associ&eacute;e &agrave; une expression am&eacute;lior&eacute;e de VEGF endog&egrave;ne dans des mod&egrave;les murins de l&#39;isch&eacute;mie critique de membres inf&eacute;rieurs. En revanche, la surexpression du VEGF165, cinq fois plus &eacute;lev&eacute;e que celui de base le jour 1, &eacute;voqu&eacute;s &eacute;galement fortement VEGF endog&egrave;ne dans les muscles, ce qui entra&icirc;nera une amputation d&#39;un membre acc&eacute;l&eacute;r&eacute;e sans r&eacute;cup&eacute;ration de perfusion sanguine. Fait int&eacute;ressant, des muscles squelettiques viables des deux branches isch&eacute;mique VEGF165 FGF-2 trait&eacute;s ou a montr&eacute; plaquettaire semblable-endoth&eacute;lial des densit&eacute;s de navire positifs mol&eacute;cule-1 adh&eacute;rence. Maturation des navires nouvellement form&eacute;s sugg&eacute;r&eacute;e par la cellule musculaire lisse actine positif cellule doublure, cependant, a &eacute;t&eacute; significativement perturb&eacute; dans les muscles avec le VEGF. Autres effets th&eacute;rapeutiques du FGF-2 ont &eacute;t&eacute; compl&egrave;tement diminu&eacute;es par anti-VEGF, neutraliser les anticorps in vivo, ce qui indique que le VEGF endog&egrave;ne ne contribue &agrave; l&#39;effet de FGF-2. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que le VEGF est n&eacute;cessaire, mais devrait &ecirc;tre r&eacute;glement&eacute;e d&eacute;licatement &agrave; la plus faible expression pour traiter un membre isch&eacute;mique. L&#39;effet th&eacute;rapeutique du FGF-2, associ&eacute;s aux effets angiog&eacute;nique harmonis&eacute;e S&icirc;n VEGF endog&egrave;ne, fournit des renseignements importants sur l&#39;angiogen&egrave;se th&eacute;rapeutique.

Th&eacute;rapie g&eacute;nique angiog&eacute;niques pour l&#39;isch&eacute;mie exp&eacute;rimentale limb critique : acc&eacute;l&eacute;ration de la perte de membres de la surexpression du facteur de croissance endoth&eacute;lial vasculaire 165, mais pas de facteur de croissance de fibroblaste-2.

Neuere Studien legen nahe, die m&ouml;gliche therapeutische Wirkung von intramuskul&auml;ren vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF) Gentransfer bei Personen mit kritischen Extremit&auml;t Isch&auml;mie. Wenig Informationen, steht jedoch hinsichtlich (1) die erforderliche Ausdrucksebene der VEGF f&uuml;r therapeutische Wirkung, (2) der verwandte Ausdruck von endogenen angiogenen Faktoren wie Fibroblast Growth Factor-2 (FGF-2) und (3) die damit verbundenen Nebenwirkungen durch eine &Uuml;berexpression von VEGF. Um diese Probleme anzugehen, testeten wir die Auswirkungen der eine &Uuml;berexpression von VEGF165 mit rekombinanten Sendai Virus (SeV), FGF-2 Gentransfer direkt gegen&uuml;ber. Intramuskul&auml;re Injektion von SeV steigerte stark FGF-2, wodurch erhebliche therapeutische Wirkung f&uuml;r Gliedma&szlig;en Bergung mit erh&ouml;hter Durchblutung verbesserte endogene VEGF-Ausdruck in murinen Modelle der kritischen Extremit&auml;t Isch&auml;mie zugeordnet. Im Gegensatz dazu hervorgerufen VEGF165 &Uuml;berexpression, 5 - mal h&ouml;her als die der Basislinie am Tag 1, auch stark endogenen VEGF in Muskeln, was zu einer beschleunigten Gliedma&szlig;en-Amputation ohne Wiederherstellung der Durchblutung. Interessanterweise zeigte lebensf&auml;hige Skelettmuskeln der entweder VEGF165 oder FGF-2-behandelten isch&auml;mische Extremit&auml;ten &auml;hnliche Thrombozyten-endothelial Zelle Adh&auml;sion Molek&uuml;l-1-positiven Schiff dichten. Reifung der neu gebildeten Gef&auml;&szlig;e schlug von glatten Muskelzellen Aktin-positiven Zellen Futter, jedoch deutlich in den Muskeln mit VEGF gest&ouml;rt wurde. Weiteren, therapeutischen Effekte von FGF-2 wurden komplett von Anti-VEGF neutralisierenden Antik&ouml;rper in-vivo, so, dass endogene VEGF dazu beitragen, die Wirkung von FGF-2 vermindert. Diese Ergebnisse legen nahe, dass VEGF notwendig ist, aber niedriger Ausdruck zur Behandlung von isch&auml;mischen Extremit&auml;t fein reguliert werden sollte. Die therapeutische Wirkung von FGF-2, verbunden mit den Auswirkungen des harmonisierten angiogenen gesehen mit endogenen VEGF, bietet wichtige Einblicke in therapeutische Angiogenese.

Angiogenen Gentherapie f&uuml;r experimentelle kritische Extremit&auml;t Isch&auml;mie: Beschleunigung der Gliedma&szlig;en Verlust durch eine &Uuml;berexpression des vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor 165 nicht aber der Fibroblasten-Wachstumsfaktor-2.

Studi recenti suggeriscono possibili effetti terapeutici di trasferimento genico intramuscolare fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) in soggetti con ischemia critica degli arti. Poche informazioni, tuttavia, sono disponibile per quanto riguarda (1) il livello richiesto espressione di VEGF per effetto terapeutico, (2) l&#39;espressione correlato fattori angiogenic endogeni, tra cui fibroblast growth factor-2 (FGF-2) e (3) gli effetti negativi connessi a causa di sovraespressione di VEGF. Per risolvere questi problemi, abbiamo testato gli effetti della sovraespressione di VEGF165 utilizzando recombinant virus Sendai (SeV), come direttamente confrontato con trasferimento del gene di FGF-2. Iniezione intramuscolare di SeV fortemente potenziato FGF-2, con conseguente effetti terapeutici significativi per il salvataggio dell&#39;arto con perfusione di sangue maggiore associata a maggiore espressione di VEGF endogeno in modelli murini di ischemia critica degli arti. Al contrario, sovraespressione VEGF165, 5 - volte superiore a quella della linea di base il giorno 1, anche fortemente evocata VEGF endogeno nei muscoli, risultante in un&#39;amputazione dell&#39;arto accelerata senza recupero di perfusione sanguigna. Interessante, vitali nei muscoli scheletrici di entrambi gli arti ischemici VEGF165 o FGF-2-trattati ha mostrato delle cellule endoteliali-piastrinica simile densit&agrave; di adesione molecola-1-positivi nave. Maturazione dei vasi neonate suggerito da cellule muscolari lisce actina-positivi cella fodera, tuttavia, &egrave; stato disturbato in modo significativo nei muscoli con VEGF. Ulteriori effetti terapeutici di FGF-2 completamente sono stati diminuiti di anti-VEGF neutralizzando anticorpo in vivo, indicando cos&igrave; che il VEGF endogeno contribuiscono all&#39;effetto di FGF-2. Questi risultati suggeriscono che il VEGF &egrave; necessaria, ma deve essere regolato delicatamente a bassa espressione per il trattamento dell&#39;arto ischemico. L&#39;effetto terapeutico di FGF-2, associato all&#39;effetto angiogenico armonizzata visto con VEGF endogeno, fornisce importanti approfondimenti angiogenesi terapeutica.

Angiogenic gene therapy per ischemia dell&#39;arto critico sperimentale: accelerazione della perdita di arto da iperespressione del fattore di crescita endoteliale vascolare 165 ma non del fattore di crescita dei fibroblasti-2.

&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x500B;&#x4EBA;&#x91CD;&#x75C7;&#x865A;&#x8840;&#x80A2;&#x306E;&#x7B4B;&#x8089;&#x5185;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50; &#xFF08;VEGF&#xFF09; &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x60C5;&#x5831;&#x3001;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;(1) &#x5FC5;&#x9808;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E; VEGF (2) &#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;-2 (FGF-2) &#x3068; (3) &#x95A2;&#x9023;&#x526F;&#x4F5C;&#x7528; VEGF &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;VEGF165 &#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30A4; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#xFF08;&#x5927;&#x5EA6;&#xFF09; &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x76F4;&#x63A5; FGF 2 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;SeV &#x306E;&#x7B4B;&#x8089;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04;&#x306F;&#x5F37;&#x304F; FGF-2 &#x4E0B;&#x80A2;&#x6551;&#x6E08;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x5927;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x91CD;&#x75C7;&#x865A;&#x8840;&#x80A2;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; VEGF &#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x8840;&#x6DB2;&#x704C;&#x6D41;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x5F8C;&#x62BC;&#x3057;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;VEGF165 &#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;5 &#x500D;&#x9AD8;&#x3044;&#x57FA;&#x6E96; 1 &#x65E5; 1 &#x56DE;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5F37;&#x304F;&#x52A0;&#x901F;&#x4E0B;&#x80A2;&#x5207;&#x65AD;&#x8840;&#x6DB2;&#x704C;&#x6D41;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; VEGF &#x306E;&#x7B4B;&#x8089;&#x3001;&#x8A98;&#x767A;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B; VEGF165 &#x307E;&#x305F;&#x306F; FGF 2 &#x6271;&#x308F;&#x865A;&#x8840;&#x80A2;&#x306E;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50; 1 &#x967D;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x65B0;&#x3057;&#x304F;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B; VEGF &#x306E;&#x7B4B;&#x8089;&#x3067;&#x90AA;&#x9B54;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x967D;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306E; FGF 2 &#x306F;&#x6297; VEGF &#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x3046;&#x3057;&#x3066;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; VEGF FGF 2 &#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6D88;&#x5931;&#x3057;&#x305F;.VEGF &#x306F;&#x4E0D;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3001;&#x7E4A;&#x7D30;&#x306A;&#x865A;&#x8840;&#x80A2;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x4F4E;&#x3044;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x3079;&#x304D;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;FGF-2 &#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; VEGF &#x3068;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x8ABF;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x7642;&#x6CD5;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x91CD;&#x75C7;&#x865A;&#x8840;&#x80A2;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7642;: &#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50; 165 &#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 2 &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x56DB;&#x80A2;&#x640D;&#x5931;&#x306E;&#x52A0;&#x901F;&#x3002;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; &#xAC1C;&#xC778;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC9C0; &#xD5C8; &#xD608;&#xACFC; &#xADFC;&#xC721; &#xB0B4; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (VEGF) &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xB3D9;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6A8;&#xACFC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xBCF4;, VEGF &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6A8;&#xACFC;, (2) &#xC0DD; angiogenic &#xC694;&#xC778;, &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 2 (FGF-2) &#xBC0F; (3) &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; overexpression VEGF&#xC758; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xBD88;&#xB9AC; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC2DD; &#xC218;&#xC900; (1)&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xC81C;&#xACF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC9C1;&#xC811; FGF 2 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC13C;&#xB2E4;&#xC774; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (SeV)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; vegf165&#xC758; overexpression&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. Sev&#xC758; &#xADFC;&#xC721; &#xC8FC;&#xC0AC;&#xC5D0; FGF-2, &#xC99D;&#xAC00; &#xD608;&#xC561; &#xAD00;&#xB958; murine &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC9C0; &#xD5C8; &#xD608; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC0DD; VEGF &#xC2DD; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C; &#xB2E4;&#xB9AC; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC00;&#xC5B4; &#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, VEGF165 overexpression, &#xD558;&#xB8E8;&#xC5D0; 1, &#xCD08;&#xAE30; &#xBCF4;&#xB2E4; 5 &#xBC30; &#xB192;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; &#xD608;&#xC561; &#xAD00;&#xB958;&#xC758; &#xD68C;&#xBCF5; &#xC5C6;&#xC774; &#xAC00;&#xC18D;&#xB41C; &#xC0AC;&#xC9C0; &#xC808;&#xB2E8;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC0DD; VEGF&#xB97C; &#xBD88;&#xB7EC; &#xC77C;&#xC73C;&#xCF30;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, VEGF165-&#xB610;&#xB294; FGF-2 &#xB300;&#xC6B0; &#xC911; &#xD5C8; &#xD608; &#xC131; &#xD314; &#xB2E4;&#xB9AC;&#xC758; &#xADFC;&#xC721; &#xACE8;&#xACA9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790; 1 &#xC591;&#xC131; &#xD608;&#xAD00; &#xBC00;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC0C8;&#xB85C; &#xD615;&#xC131;&#xB41C; &#xB41C; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xC131;&#xC219;&#xC740; VEGF&#xC640; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xBC29;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4; &#xC140; &#xC548; &#xAC10; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC591;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. FGF-2&#xC758; &#xCD94;&#xAC00;, &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC548;&#xD2F0;-VEGF &#xC911;&#xD654; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC0DD; VEGF FGF-2&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;&#xAC00; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; VEGF &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB0AE;&#xC740; &#xC2DD; &#xD5C8; &#xD608; &#xC131; &#xB2E4;&#xB9AC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC12C;&#xC138; &#xD558; &#xAC8C; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB418;&#xC5B4;&#xC57C; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. FGF-2, &#xBCF8; &#xC0DD; VEGF&#xC640; &#xC870;&#xD654; angiogenic &#xD6A8;&#xACFC;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6A8;&#xACFC; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Angiogenic &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC778; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC9C0; &#xD5C8; &#xD608;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC;: &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 165&#xC758; &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;-2&#xC758; overexpression&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0AC;&#xC9C0; &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; &#xAC00;&#xC18D;.

Estudios recientes sugieren el posible efecto terap&eacute;utico de la transferencia del gene del factor de crecimiento endotelial vascular intramuscular (VEGF) en individuos con isquemia cr&iacute;tica del miembro. Poca informaci&oacute;n, sin embargo, est&aacute; disponible con respecto a (1) el nivel requerido de la expresi&oacute;n de VEGF para efecto terap&eacute;utico, (2) la expresi&oacute;n relacionados con factores angiog&eacute;nicos end&oacute;genos, como factor de crecimiento de fibroblastos-2 (FGF-2) y (3) los efectos adversos relacionados con sobreexpresi&oacute;n de VEGF. Para tratar estos temas, probamos a efectos de la sobreexpresi&oacute;n de VEGF165 usando virus recombinante de Sendai (SeV), directamente en comparaci&oacute;n con la transferencia de genes de FGF-2. La inyecci&oacute;n intramuscular de SeV impulsado fuertemente FGF-2, resultando en efectos terap&eacute;uticos significativos para la recuperaci&oacute;n de la extremidad con perfusi&oacute;n de sangre creciente asociada con la expresi&oacute;n de VEGF end&oacute;geno realzada en modelos murinos de isquemia cr&iacute;tica del miembro. Por el contrario, sobreexpresi&oacute;n VEGF165, 5 - veces superior de referencia el d&iacute;a 1, hab&iacute;a evocado tambi&eacute;n fuertemente VEGF end&oacute;geno en los m&uacute;sculos, dando por resultado una amputaci&oacute;n acelerado sin recuperaci&oacute;n de perfusi&oacute;n de la sangre. Curiosamente, los m&uacute;sculos esquel&eacute;ticos viables de cualquiera de los dos miembros isqu&eacute;micos VEGF165 o FGF-2 tratados y mostraron a similar plaquetas-endothelial cell adhesi&oacute;n mol&eacute;cula-1-positive buque densidades. Maduraci&oacute;n de vasos sugerido por c&eacute;lulas de m&uacute;sculo liso actinia-positivo c&eacute;lulas de revestimiento, sin embargo, estaba perturbado significativamente en los m&uacute;sculos con VEGF. Efectos terap&eacute;uticos m&aacute;s de FGF-2 totalmente fueron disminuidos por anti-VEGF neutralizar anticuerpo in vivo, lo que indica que el VEGF end&oacute;geno contribuye al efecto de FGF-2. Estos resultados sugieren que el VEGF es necesario, pero deber&iacute;a regularse delicadamente a la menor expresi&oacute;n para tratar la extremidad isqu&eacute;mica. El efecto terap&eacute;utico de FGF-2, asociada a los efectos angiog&eacute;nicos armonizado con VEGF end&oacute;geno, ofrece importantes ideas sobre la angiog&eacute;nesis terap&eacute;utica.

Angiog&eacute;nica terapia del gene para la isquemia cr&iacute;tica del miembro experimental: aceleraci&oacute;n de la p&eacute;rdida de una extremidad por la sobreexpresi&oacute;n del factor de crecimiento endotelial vascular 165 pero no de factor de crecimiento de fibroblastos-2.

&#x9762;&#x5BF9;&#x4E0D;&#x65AD;&#x6D8C;&#x73B0;&#x7684;&#x65B0;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x5982;&#x4E25;&#x91CD;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7;&#x75C5;&#x6BD2;&#x548C;&#x79BD;&#x6D41;&#x611F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x53D8;&#x5F97;&#x660E;&#x786E;&#x3002;&#x4ED9;&#x53F0;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5BFC;&#x81F4;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x547C;&#x5438;&#x9053;&#x611F;&#x67D3;&#x556E;&#x9F7F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;F1-R&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5168;&#x8EAB;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x5DF2;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E24;&#x4E2A;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x662F;&#x8D1F;&#x8D23; F1-R &#x6240;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x611F;&#x67D3; [&#x5188;&#x7530;&#x514B;&#x4E5F; et al (1998) &#x62F1; Virol 143:2343-2352&#x5E74;]&#x3002;(F) &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684; F1-R&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5F97;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x591A;&#x8F6E;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#xFF0C;&#x800C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53EA;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x591A;&#x8F6E;&#x5728;&#x80BA;&#x90E8;&#x590D;&#x5236;&#x589E;&#x5F3A;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3; cleavability pantropism &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;F1-R F &#x589E;&#x5F3A;&#x7684; cleavability &#x4EE5;&#x524D;&#x88AB;&#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E;&#x5728; F115 &#x76F8;&#x90BB;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178; 116 &#x5728;&#x9176;&#x5207;&#x4F4D;&#x70B9;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#xFF0C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x82BD;&#x53EA;&#x80FD;&#x4ECE;&#x652F;&#x6C14;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x91CA;&#x653E;&#x5230;&#x8154;&#x7684;&#x547C;&#x5438;&#x9053;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x800C; F1-R &#x82BD;&#x4ECE;&#x4E24;&#x6839;&#x5C16;&#x5C16;&#x57DF;&#x548C;&#x57FA;&#x5E95;&#x5916;&#x4FA7;&#x7684;&#x57DF;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x88AB;&#x91CA;&#x653E;&#x5230;&#x57FA;&#x5E95;&#x819C;&#xFF0C;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8F7B;&#x6613;&#x8FDB;&#x5165;&#x8840;&#x6DB2;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x4E2D;&#x65AD;&#x662F;&#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E;&#x4E24;&#x4E2A; M &#x86CB;&#x767D;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x8BA4;&#x4E0A;&#x6587;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684; F &#x548C; M &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x4E0E; F1-R &#x611F;&#x67D3;&#x6240;&#x793A;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8D1F;&#x5168;&#x8D23;&#xFF0C;&#x53CD;&#x5411;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x7528;&#x4E8E;&#x6784;&#x9020;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4ED9;&#x53F0;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC4;&#x5408;&#x7684; F1 R.M &#x548C; F &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x6591;&#x5757;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x6709;&#x65E0;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x52A0;&#x6CD5;&#x3002;&#x5305;&#x542B;&#x6240;&#x6709; F1-R M &#x548C; F &#x7A81;&#x53D8;&#x91CD;&#x7EC4;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5F62;&#x6210;&#x6591;&#x5757;&#x7684; LLC MK2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x672F;&#x7684;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x52A0;&#x6CD5;&#x4E0D;&#x590D;&#x5236;&#x591A;&#x4E2A;&#x5468;&#x671F;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x6F84;&#x6E05;&#x54EA;&#x4E9B; mutation(s) &#x662F;&#x6591;&#x5757;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x6591;&#x5757;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4F7F;&#x7528;&#x5176;&#x4ED6;&#x91CD;&#x7EC4;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3002;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4E0E;&#x4EC5; F115 &#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x66FE;&#x7ECF;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6591;&#x5757;&#x5F62;&#x6210;&#x7684; F 1-R F &#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8D4B;&#x4E88;&#x8BE5;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5F62;&#x5F0F;&#x6591;&#x5757;&#x5982;&#x679C;&#x6CA1;&#x6709;&#x53E6;&#x5916;&#x7684;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4E0E; F115 &#x548C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; M &#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x7ED9;&#x4E86;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x591A;&#x4E2A; F &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7A97;&#x4F53;&#x4E0D;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x589E;&#x52A0;&#x6591;&#x5757;&#x7684; F1 &#x7814;&#x53D1;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;

&#x7A81;&#x53D8;&#x5728;&#x4ED9;&#x53F0;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53D8;&#x79CD; F1-R &#x5173;&#x8054;&#x8D77;&#x6765;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x6591;&#x5757;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

With the emergence of new viruses, such as the SARS virus and the avian influenza virus, the importance of investigations on the genetic basis of viral infections becomes clear. Sendai virus causes a localized respiratory tract infection in rodents, while a mutant, F1-R, causes a systemic infection. It has been suggested that two determinants are responsible for the systemic infection caused by F1-R [Okada et al (1998) Arch Virol 143:2343-2352]. The primary determinant of the pantropism is the enhanced proteolytic cleavability of the fusion (F) protein of F1-R, which allows the virus to undergo multiple rounds of replication in many different organs, whereas wild-type virus can only undergo multiple rounds of replication in the lungs. The enhanced cleavability of F1-R F was previously attributed to an amino acid change at F115 that is adjacent to the cleavage site at amino acid 116. Secondly, wild-type virus buds only from the apical domain of bronchial epithelium, releasing virus into the lumen of the respiratory tract, whereas F1-R buds from both apical and basolateral domains. Thus, virus is released into the basement membrane where it can easily gain access to the bloodstream for dissemination. The microtubule disruption is attributed to two amino acid differences in M protein. To confirm that the F and M gene mutations described above are solely responsible for the phenotypic differences seen in wild-type versus F1-R infections, reverse genetics was used to construct recombinant Sendai viruses with various combinations of the mutations found in the M and F genes of F1-R. Plaque assays were performed with or without trypsin addition. A recombinant virus containing all F1-R M and F mutations formed plaques in LLC-MK2 cells and underwent multiple cycles of replication without trypsin addition. To clarify which mutation(s) are necessary for plaque formation, plaque assays were done using other recombinant viruses. A virus with only the F115 change, which was previously thought to be the only change important for plaque formation of F 1-R F, did not confer upon the virus the ability to form plaques without the addition of trypsin. Another virus with the F115 and both M changes gave the same result. Therefore, more than one mutation in the F gene contributes to the ability of F1-R to form plaques without trypsin addition.

Mutations in Sendai virus variant F1-R that correlate with plaque formation in the absence of trypsin.

Avec l&#39;&eacute;mergence de nouveaux virus, comme le virus du SRAS et le virus de la grippe aviaire, l&#39;importance des enqu&ecirc;tes sur les bases g&eacute;n&eacute;tiques des infections virales devient clair. Sendai virus provoque une infection localis&eacute;e des voies respiratoires chez les rongeurs, alors qu&#39;un mutant, F1-R, provoque une infection syst&eacute;mique. Il a &eacute;t&eacute; sugg&eacute;r&eacute; que les deux d&eacute;terminants sont responsables de l&#39;infection syst&eacute;mique caus&eacute;e par F1-R [143:2343 Okada et coll. (1998) Arch Virol-2352]. Le principal d&eacute;terminant de la pantropism est la meilleure cleavability prot&eacute;olytique de la prot&eacute;ine de fusion (F) de F1-R, ce qui permet au virus de subir plusieurs cycles de r&eacute;plication dans beaucoup de diff&eacute;rents organes, tandis que les virus de type sauvage peut seulement subissent plusieurs cycles de r&eacute;plication dans les poumons. La meilleure cleavability de F1-R F a &eacute;t&eacute; pr&eacute;c&eacute;demment attribu&eacute; &agrave; un changement d&#39;acide amin&eacute; &agrave; F115 qui jouxte le site de clivage &agrave; l&#39;acide amin&eacute; 116. Deuxi&egrave;mement, les bourgeons de virus de type sauvage uniquement du domaine apical de l&#39;&eacute;pith&eacute;lium bronchique, lib&eacute;rant le virus dans la lumi&egrave;re de l&#39;appareil respiratoire, alors que les bourgeons de F1-R &agrave; la fois apicale et domaines basolat&eacute;rale. Ainsi, les virus est lib&eacute;r&eacute; dans la membrane basale o&ugrave; il peut facilement avoir acc&egrave;s &agrave; la circulation sanguine pour diffusion. La perturbation des microtubules est attribu&eacute;e &agrave; deux diff&eacute;rences d&#39;acides amin&eacute;s dans la prot&eacute;ine M. Pour confirmer que les mutations du g&egrave;ne F et M d&eacute;crites ci-dessus sont enti&egrave;rement responsables des diff&eacute;rences ph&eacute;notypiques observ&eacute;es dans sauvage contre les infections de F1-R, g&eacute;n&eacute;tique inverse a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour construire des virus recombinants de Sendai avec diverses combinaisons de mutations dans les g&egrave;nes de M et F F1-r Plaque analyses ont &eacute;t&eacute; effectu&eacute;es avec ou sans addition de trypsine. Un virus recombinant contenant toutes les mutations F1-R M et F form&eacute; de plaques dans les cellules LLC-MK2 et a subi plusieurs cycles de r&eacute;plication sans addition de trypsine. Afin de pr&eacute;ciser quels mutation(s) est n&eacute;cessaires pour la formation de plaque, plaque essais ont &eacute;t&eacute; effectu&eacute;s &agrave; l&#39;aide d&#39;autres virus recombinants. Un virus avec la modification F115, qui &eacute;tait auparavant consid&eacute;r&eacute; comme le seul changement important pour la formation de plaques de F 1-R F, ne conf&eacute;rait pas le virus la capacit&eacute; de former des plaques sans addition de trypsine. Un autre virus avec le F115 et deux changements de M a donn&eacute; le m&ecirc;me r&eacute;sultat. Par cons&eacute;quent, plus d&#39;une mutation dans le g&egrave;ne F contribue &agrave; la capacit&eacute; de F1-R pour former des plaques sans addition de trypsine.

Mutations dans la variante du virus de Sendai F1-R qui sont corr&eacute;l&eacute;s avec la formation de la plaque en l&#39;absence de la trypsine.

Mit dem Aufkommen neuer Viren, wie z. B. das SARS-Virus und das Vogelgrippe-Virus wird die Bedeutung der Untersuchung der genetischen Basis von Virusinfektionen klar. Sendai-Virus verursacht eine lokalisierte Atemwege bei Nagern, w&auml;hrend ein Mutant, F1-R, eine systemische Infektion verursacht. Es wird angenommen, dass zwei Faktoren verantwortlich f&uuml;r die systemische Infektion, die durch F1-R [Okada Et al. (1998) Bogen Virol 143:2343-2352]. Die prim&auml;re Faktor f&uuml;r die Pantropism ist die erh&ouml;hte proteolytische Cleavability der das Fusionsprotein (F) der F1-R, wodurch das Virus mehrere Runden der Replikation in vielen verschiedenen Organen, zu unterziehen, w&auml;hrend Wildtyp Virus nur mehrere Runden der Replikation in der Lunge unterziehen kann. Die erweiterte Cleavability von F1-R F wurde zuvor eine Aminos&auml;ure-&Auml;nderung bei F115 zugeschrieben, der an der Spaltung-Website unter Aminos&auml;ure 116 grenzt. Zweitens Knospen Wildtyp Virus nur von den apikalen Dom&auml;ne des bronchialen Epithel, Freisetzung von Virus in das Lumen der Atemwege, w&auml;hrend F1-R von beiden endst&auml;ndige Knospen und Basolateraler Dom&auml;nen. Somit ist Virus in der Basalmembran ver&ouml;ffentlicht, wo es leicht den Blutkreislauf f&uuml;r Verbreitung zugreifen kann. Zwei Aminos&auml;ure Unterschiede in M-Protein wird die Microtubule-St&ouml;rung zugeschrieben. Um zu best&auml;tigen, dass die oben beschriebenen F und M-Genmutationen allein verantwortlich f&uuml;r die ph&auml;notypische Unterschiede in Wildtyp gegen&uuml;ber F1-R Infektionen gesehen wurde die Reverser zur rekombinante Sendai-Viren mit verschiedenen Kombinationen von Mutationen gefunden in die Gene M und F des F1-R. zu konstruieren Plakette-Assays wurden durchgef&uuml;hrt, mit oder ohne Zusatz von Trypsin. Rekombinante Viren, enth&auml;lt alle F1-R M und F Mutationen Plaketten in LLC-MK2-Zellen gebildet und unterzog sich mehreren Zyklen der Replikation ohne Trypsin. Um zu kl&auml;ren, welche Mutation(s) f&uuml;r die Bildung von Plaque notwendig sind, wurden Plakette Proben gemacht mit andere rekombinanten Viren. Ein Virus mit nur dem F115-Wechsel, die zuvor dachte, war die einzige &Auml;nderung, die wichtig f&uuml;r die Bildung von Plaque von F-1-R-F zu sein, das Virus nicht die F&auml;higkeit, Form Plaketten ohne Zusatz von Trypsin &uuml;bertragen. Ein anderes Virus mit dem F115 und beide M-&Auml;nderungen gab das gleiche Ergebnis. Daher tr&auml;gt mehr als eine Mutation im Gen F auf die F&auml;higkeit des F1-R, Formular Plaketten ohne Trypsin-Zusatz.

Mutationen in Sendai Virus-Variante F1-R, die korrelieren mit Plaquebildung in Ermangelung von Trypsin.

Con l&#39;emergere di nuovi virus, come il virus della SARS e il virus dell&#39;influenza aviaria, evidente l&#39;importanza delle indagini su base genetica delle infezioni virali. Sendai virus provoca un&#39;infezione delle vie respiratorie localizzata nei roditori, mentre un mutante, F1-R, provoca un&#39;infezione sistemica. &Egrave; stato suggerito che due determinanti sono responsabili per l&#39;infezione sistemica causata da F1-R [143:2343 Okada et al (1998) Arch Virol-2352]. Il determinante primario del pantropism &egrave; il maggiore spaccabilit&agrave; proteolitico della proteina di fusione (F) di F1-R, che permette al virus di sottoporsi a pi&ugrave; cicli di replicazione in molti organi differenti, mentre virus wild-type pu&ograve; solo sottoporsi a pi&ugrave; cicli di replicazione nei polmoni. La spaccabilit&agrave; avanzata di F1-R F era precedentemente attribuita a un cambiamento dell&#39;amminoacido a F115 che &egrave; adiacente al sito di clivaggio all&#39;amminoacido 116. In secondo luogo, wild-type virus germoglia solo dal dominio apicale dell&#39;epitelio bronchiale, rilasciando il virus nel lume delle vie respiratorie, mentre F1-R gemme da entrambi apicale e basolaterale domini. Cos&igrave;, virus viene rilasciato nella membrana basale dove pu&ograve; facilmente accedere al flusso sanguigno per diffusione. La rottura dei microtubuli &egrave; attribuita a due differenze dell&#39;amminoacido nella proteina M. Per confermare che le mutazioni del gene F e M sopra descritte sono responsabili delle differenze fenotipiche vista nel wild-type contro infezioni da F1-R, genetica inversa &egrave; stato utilizzato per costruire recombinant virus Sendai con varie combinazioni di mutazioni trovate nei geni M e F di F1-R. Placca le analisi sono state eseguite con o senza aggiunta di tripsina. Un virus ricombinante contenente tutte le mutazioni F1-R M e F formata placche nelle cellule di LLC-MK2 e sub&igrave; ripetuti cicli di replicazione senza aggiunta di tripsina. Per chiarire quali mutazioni sono necessari per la formazione di placca, placca dosaggi sono stati fatti usando altri virus ricombinanti. Un virus con solo il cambiamento F115, che precedentemente &egrave; stato pensato per essere l&#39;unico cambiamento importante per la formazione di placca di F 1-R F, non conferire il virus la capacit&agrave; di placche di forma senza l&#39;aggiunta di tripsina. Un altro virus con il F115 ed entrambe le modifiche M ha dato lo stesso risultato. Quindi, pi&ugrave; di una mutazione nel gene F contribuisce alla capacit&agrave; di F1-R di placche di forma senza aggiunta di tripsina.

Mutazioni nei virus Sendai variante F1-R che correlano con formazione di placca in assenza di tripsina.

SARS &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x51FA;&#x73FE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x57FA;&#x790E;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3001;F1 R &#x5168;&#x8EAB;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x9593;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30A4; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E0A;&#x6C17;&#x9053;&#x611F;&#x67D3;&#x9F67;&#x6B6F;&#x985E;&#x3067;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0; F1-R &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5168;&#x8EAB;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 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Pantropism&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xACB0;&#xC815; &#xBC18;&#xBA74; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3D0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xB97C; &#xBC1B;&#xC544;&#xC57C;&#xB9CC; &#xC218; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xC7A5;&#xAE30;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xB97C; &#xBC1B; &#xB2E4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; f 1 R&#xC758; &#xD4E8;&#xC804; (F) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; cleavability&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. F1-R F&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; cleavability &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; F115 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; 116&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC778;&#xC811; &#xD55C;&#xC5D0; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xB97C; &#xD568;&#xC720;&#xD55C; &#xC0B0; &#xC131; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB458;&#xC9F8;, &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; F1 R &#xBAA8;&#xB450; &#xD600;&#xB05D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C8;&#xC2F9; &#xBC18;&#xBA74; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD638;&#xD761;&#xAE30;, &#xB8E8;&#xBA58;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC29;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xAD00;&#xC9C0; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC0F; basolateral &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC5D0;&#xC11C;&#xB9CC; &#xAF43; &#xBD09; &#xC624;&#xB9AC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xAE09;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD608; &#xB958; &#xB7C9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC9C0;&#xD558;&#xC2E4; &#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Microtubule &#xC911;&#xB2E8;&#xC740; M &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB450; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xCC28;&#xC774;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778;&#xD55C; &#xB2E4;. &#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85;&#xD55C; F&#xC640; M &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; f 1 R &#xAC10;&#xC5FC; &#xB300; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF8; phenotypic &#xCC28;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC744; &#xC9C0;&#xB294; &#xAC83;&#xC778;&#xC9C0; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xC720;&#xC804;&#xD559;&#xC740; F1-r.&#xC758; M&#xACFC; F &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC870;&#xD569; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC13C;&#xB2E4;&#xC774; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB41C; &#xD2B8;&#xB9BD; &#xC2E0; &#xCD94;&#xAC00; &#xC720;&#xBB34; &#xD328; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; f 1&#xC744; R M&#xACFC; F &#xBCC0;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD615; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; LLC MK2 &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B8;&#xB9BD; &#xC2E0; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC774; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC744; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC5B4;&#xB5A4; mutation(s)&#xB294; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;, &#xBA85;&#xD655;&#xD788; &#xD328; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB05D;&#xB0AC;&#xB2E4; &#xB2E4;&#xB978; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD615; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xB9CC; F115 &#xBCC0;&#xACBD;, F 1 R F&#xC758; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD588;&#xB358; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xBD80;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC591;&#xC2DD; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; trypsin&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC774; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;. &#xB2E4;&#xB978; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; f115&#xC640; M &#xBCC0;&#xACBD; &#xB0B4;&#xC6A9;&#xC744; &#xBAA8;&#xB450; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, F &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; trypsin &#xCD94;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xC591;&#xC2DD; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C;&#xB97C; F1-R&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC13C;&#xB2E4;&#xC774; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xC885; F1 R&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xD2B8;&#xB9BD; &#xC2E0;&#xC774; &#xC5C6;&#xC744; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xD615;&#xC131;.

Con la aparici&oacute;n de nuevos virus, como el virus SARS y el virus de la gripe aviar, la importancia de las investigaciones sobre la base gen&eacute;tica de infecciones virales llega a estar clara. Sendai virus causa una infecci&oacute;n del tracto respiratorio localizado en roedores, mientras que un mutante, F1-R, causando una infecci&oacute;n sist&eacute;mica. Se ha sugerido que los dos determinantes son responsables de la infecci&oacute;n sist&eacute;mica causada por F1-R [143:2343 Okada et al (1998) Arch Virol-2352]. El determinante principal de la pantropism es el mayor cleavability proteol&iacute;tica de la prote&iacute;na de fusi&oacute;n (F) de F1-R, que permite el virus a m&uacute;ltiples rondas de replicaci&oacute;n en muchos &oacute;rganos diferentes, mientras que el virus de tipo salvaje s&oacute;lo puede someterse a m&uacute;ltiples rondas de replicaci&oacute;n en los pulmones. La mayor cleavability de F1-R F fue atribuido previamente a un cambio de amino&aacute;cido en F115 que colinda con el sitio de la hendidura en el amino&aacute;cido 116. En segundo lugar, los virus de tipo salvaje yemas s&oacute;lo del dominio apical del epitelio bronquial, liberaci&oacute;n de virus en el lumen del tracto respiratorio, mientras que F1-R brotes de ambos apical y dominios basolateral. As&iacute;, el virus es liberado en la membrana del s&oacute;tano donde f&aacute;cilmente puede obtener acceso al torrente sangu&iacute;neo para su difusi&oacute;n. La interrupci&oacute;n de los microt&uacute;bulos se atribuye a dos diferencias de amino&aacute;cidos en la prote&iacute;na M. Para confirmar que las mutaciones de gene F y M descritas anteriormente est&aacute;n el &uacute;nico responsables de las diferencias fenot&iacute;picas en salvaje-tipo frente a infecciones de F1-R, gen&eacute;tica reversa se utiliz&oacute; para construir virus Sendai recombinantes con varias combinaciones de las mutaciones encontradas los genes M y F del F1-R. Se realizaron ensayos de placa con o sin adici&oacute;n de tripsina. Un virus recombinante que contiene todas las mutaciones de F1-R M y F forman placas en las c&eacute;lulas de la LLC-MK2 y experiment&oacute; varios ciclos de replicaci&oacute;n sin adici&oacute;n de tripsina. Para aclarar qu&eacute; mutaci&oacute;n es necesarios para la formaci&oacute;n de placa, se realizaron ensayos de placa con otros virus recombinantes. Un virus con s&oacute;lo el cambio F115, que previamente se pensaba que el &uacute;nico cambio importante para la formaci&oacute;n de placas de F 1-R F, no conferir el virus la capacidad para formar placas sin la adici&oacute;n de la tripsina. Otro virus con el F115 y ambos cambios M dio el mismo resultado. Por lo tanto, m&aacute;s de una mutaci&oacute;n en el gen F contribuye a la capacidad de F1-R para formar placas sin adici&oacute;n de tripsina.

Mutaciones en la variante de virus Sendai F1-R que correlacionan con formaci&oacute;n de placas en la ausencia de la tripsina.

&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x809D;&#x810F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187; &#xFF08;3,4,5&#xFF09;--&#x5185; (PIP3)&#x3002;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; Pten &#xFF08;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x548C;&#x5F81;&#x8C61;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x5728; 10 &#x53F7;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x5220;&#x9664;&#xFF09; &#x5220;&#x9664;&#x53EF;&#x964D;&#x4F4E; PIP3 &#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8102;&#x80AA;&#x809D;&#x809D;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x8C03;&#x67E5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4ECE;&#x4F7F;&#x7528;&#x809D; pten &#x57FA;&#x56E0;&#x5220;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; PIP3 &#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x63A2;&#x8BA8; AKT2 &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x809D; AKT &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x5728;&#x8102;&#x80AA;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; Pten&#xFF0C;&#x5220;&#x9664;&#x6211;&#x4EEC;&#x521B;&#x5EFA;&#x5C0F;&#x9F20;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7F3A;&#x4E4F; Pten &#x548C; Akt2 &#x5E76;&#x5220;&#x9664; Akt2 &#x548C;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; Pten &#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; Pten &#x5220;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4EC5;&#x53CC;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;&#x7F3A;&#x5C11; PTEN &#x548C; AKT2&#xFF0C;&#x6BD4;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; Pten &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5C0F;&#x9F20;&#x809D;&#x8102;&#x8D28;&#x79EF;&#x7D2F;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E; AKT2 &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x7EF4;&#x6301;&#x53C2;&#x4E0E; de novo &#x8C03;&#x63A7;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x53CC;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x79EF;&#x7D2F;&#x88AB;&#x5C40;&#x90E8;&#x626D;&#x8F6C;&#x7531;&#x672C;&#x6784;&#x79EF;&#x6781; FOXO1&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x975E;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C.AKT &#x7684;&#x4E0B;&#x6E38;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7531;&#x808C;&#x9187;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x901A;&#x8FC7;&#x663E;&#x793A; AKT &#x4ECB;&#x5BFC; PIP3 &#x79EF;&#x7D2F; (&#x6A21;&#x4EFF;&#x7684;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; PTEN &#x635F;&#x5931;) &#x8BF1;&#x5BFC;&#x8102;&#x8D28;&#x6C89;&#x79EF;&#x5728;&#x809D;&#x810F;&#x548C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x809D;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x5212;&#x5B9A;&#x8102;&#x8D28;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

AKT2 pten &#x57FA;&#x56E0;&#x4E22;&#x5931;&#x6240;&#x81F4;&#x7684;&#x809D;&#x8102;&#x80AA;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Insulin signaling in the liver leads to accumulation of phosphatidylinositol (3,4,5)-trisphosphate (PIP3). Deletion of the phosphatase Pten (phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10) reduces PIP3 levels and leads to fatty liver development. The purpose of this study was to investigate the mechanisms underlying lipogenesis that result from PIP3 accumulation using liver Pten-deletion mice. To explore the role of AKT2, the major liver AKT isoform in steatosis induced by deletion of Pten, we created mice lacking both Pten and Akt2 in hepatocytes and compared the effect of deleting Akt2 and Pten in the double mutants to the Pten deletion mice alone. Hepatic lipid accumulation was significantly reduced in mice lacking both PTEN and AKT2, as compared with Pten mutant mice alone. This effect was due to the role of AKT2 in maintaining expression of genes involved in de novo lipogenesis. We showed that lipid accumulation in the double mutant hepatocytes was partially reversed by expression of constitutive active FOXO1, a transcription factor downstream of AKT not dependent on inhibition of atypical protein kinase C. In summary, this study delineated regulation of lipid metabolism by PI3K signaling pathway by showing that AKT mediates PIP3 accumulation (mimicked by PTEN loss) induced lipid deposition in the liver and provided an important molecular mechanism for insulin-regulated hepatic lipogenesis.

The critical role of AKT2 in hepatic steatosis induced by PTEN loss.

L&#39;insuline dans le foie de signalisation entra&icirc;ne l&#39;accumulation de phosphatidylinositol (3,4,5)-trisphosphate (PIP3). Suppression de la phosphatase Pten (phosphatase et tensine homologue supprim&eacute; sur le chromosome 10) r&eacute;duit les niveaux PIP3 et conduit au d&eacute;veloppement du foie gras. Le but de cette &eacute;tude &eacute;tait d&#39;&eacute;tudier les m&eacute;canismes qui sous-tendent la lipogen&egrave;se qui r&eacute;sultent de l&#39;accumulation PIP3 en utilisant des souris de Pten-suppression du foie. Pour explorer le r&ocirc;le de AKT2, l&#39;isoforme AKT h&eacute;patique majeure dans la st&eacute;atose induite par d&eacute;l&eacute;tion du g&egrave;ne Pten, nous avons cr&eacute;&eacute; des souris d&eacute;pourvues de g&egrave;ne Pten tant Akt2 dans les h&eacute;patocytes et a compar&eacute; l&#39;effet de suppression Akt2 et Pten dans les doubles mutants &agrave; la souris de suppression de Pten seule. Accumulation de lipides h&eacute;patiques a &eacute;t&eacute; significativement r&eacute;duite chez les souris manquant de PTEN tant AKT2, comparativement &agrave; des souris mutantes Pten seuls. Cet effet est d&ucirc; au r&ocirc;le d&#39;AKT2 dans le maintien de l&#39;expression de g&egrave;nes impliqu&eacute;s dans la lipogen&egrave;se de novo. Nous avons montr&eacute; qu&#39;accumulation de lipides dans les h&eacute;patocytes de mutants doubles a &eacute;t&eacute; partiellement renvers&eacute;e par l&#39;expression de FOXO1 active constitutive, un facteur de transcription en aval d&#39;AKT ne d&eacute;pendant pas d&#39;inhibition de l&#39;atypique de prot&eacute;ine kinase C. En r&eacute;sum&eacute;, cette &eacute;tude d&eacute;limit&eacute;es r&eacute;gulation du m&eacute;tabolisme des lipides de PI3K signalisation voie en montrant que l&#39;AKT m&eacute;die PIP3 accumulation (imit&eacute;e par perte PTEN) induites par les d&eacute;p&ocirc;ts de lipides dans le foie et a fourni un important m&eacute;canisme mol&eacute;culaire pour la lipogen&egrave;se h&eacute;patique r&eacute;glement&eacute;es par l&#39;insuline.

Le r&ocirc;le essentiel des AKT2 dans une st&eacute;atose h&eacute;patique induite par la perte du g&egrave;ne PTEN.

Insulin signalisieren in der Leber f&uuml;hrt zur Ansammlung von Phosphatidylinositol (3,4,5)-Trisphosphate (PIP3). L&ouml;schung der Phosphatase Pten (Phosphatase und tensin Homolog gel&ouml;scht auf Chromosom 10) reduziert PIP3 Ebenen und fetthaltige Leber Entwicklung f&uuml;hrt. Der Zweck dieser Studie war zu untersuchen die Mechanismen Lipogenese das Ergebnis PIP3 Akkumulation mit Leber Pten-L&ouml;schung-M&auml;use. Um die Rolle der AKT2 zu untersuchen, die gro&szlig;en Leber AKT-Isoform in Steatose induziert durch Streichung von Pten, wir erstellt M&auml;usen Pten und Akt2 in Hepatozyten fehlt und verglichen die Wirkung von Akt2 und Pten in die doppelten Mutanten, die Pten L&ouml;schung M&auml;use allein zu l&ouml;schen. Leber Lipid Ansammlung wurde in M&auml;usen PTEN und AKT2, gegen&uuml;ber Pten Mutante M&auml;use allein fehlt deutlich reduziert. Dieser Effekt war durch die Rolle der AKT2 bei der Aufrechterhaltung der Expression von Genen de Novo Lipogenese beteiligt. Wir haben gezeigt, dass Lipid-Akkumulation in der doppelten-Mutanten-Hepatozyten durch Expression konstitutiv aktive FOXO1, einen Transkriptionsfaktor stromabw&auml;rts der AKT nicht abh&auml;ngig von der Hemmung der atypischen Proteinkinase C. teilweise r&uuml;ckg&auml;ngig gemacht wurde Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen getrennte dieser Studie Regulierung des Fettstoffwechsels durch das PI3K signalisieren Weg zeigen, dass AKT PIP3 Akkumulation (nachgeahmt durch PTEN Verlust) vermittelt induzierten Lipid-Ablagerungen in der Leber und einen wichtigen molekularen Mechanismus f&uuml;r Insulin reguliert Leber Lipogenese bereitgestellt.

Die entscheidende Rolle der AKT2 in hepatische Steatose induziert durch PTEN Verlust.

Insulina segnalazione nel fegato porta ad accumulo di fosfatidilinositolo (3, 4,5)-trifosfato (PIP3). Eliminazione della fosfatasi Pten (fosfatasi e Tensina omologo eliminato sul cromosoma 10) riduce i livelli di PIP3 e conduce allo sviluppo di fegato grasso. Lo scopo di questo studio era di indagare i meccanismi sottostanti la lipogenesi che derivano dall&#39;accumulo di PIP3 utilizzando topi Pten-eliminazione epatici. Per esplorare il ruolo di AKT2, l&#39;isoforma principale di AKT fegato nella steatosi indotta dall&#39;eliminazione di Pten, abbiamo creato topi privi sia Pten e Akt2 in epatociti e confrontato l&#39;effetto dell&#39;eliminazione di Akt2 e Pten i mutanti doppia per i topi di eliminazione Pten da solo. Accumulo di lipidi epatici &egrave; stato ridotto significativamente in topi privi sia PTEN e AKT2, rispetto ai topi mutanti Pten da solo. Questo effetto &egrave; stato a causa del ruolo di AKT2 nel mantenimento della espressione di geni coinvolti in de novo lipogenesi. Abbiamo mostrato che accumulo di lipidi nel doppi mutanti epatociti parzialmente &egrave; stata invertita di espressione costitutiva FOXO1 attivo, un fattore di trascrizione a valle di AKT non dipende dalla inibizione della atipica chinasi di proteina C. In sintesi, questo studio delineato la regolazione del metabolismo lipidico da PI3K signaling pathway mostrando che AKT da intermediario PIP3 accumulo (imitato da perdita PTEN) indotta da deposizione di lipidi nel fegato e fornito un importante meccanismo molecolare per insulina-regolato lipogenesi epatica.

Il ruolo critico di AKT2 nella steatosi epatica indotta dalla perdita PTEN.

&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3067;&#x809D;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB; (3,4,5) &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;-&#x30C8;&#x30EA;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; (PIP3)&#x3002;&#x8131;&#x71D0;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20; Pten &#x306E; &#xFF08;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A; 10 &#x3092;&#x524A;&#x9664;&#xFF09; &#x3092;&#x524A;&#x9664; PIP3 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3057;&#x3001;&#x8102;&#x80AA;&#x809D;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B; &#x3002;&#x809D; Pten &#x524A;&#x9664;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F; PIP3 &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x304B;&#x3089;&#x7D50;&#x679C;&#x8102;&#x80AA;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x57FA;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;AKT2 &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x63A2;&#x308B; pten&#x3001;&#x524A;&#x9664;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x8102;&#x80AA;&#x809D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x809D;&#x81D3; AKT &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; Pten &#x3068; Akt2 &#x306E;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x3001;Pten &#x524A;&#x9664;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x4E8C;&#x91CD;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Akt2 &#x3068; Pten &#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x809D;&#x8102;&#x8CEA;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306F; PTEN &#x3068; AKT2&#x3001;Pten &#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5358;&#x72EC;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x304C; AKT2 &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3088;&#x308B; de novo &#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4E8C;&#x91CD;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8102;&#x8CEA;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306F;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x69CB;&#x6210;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; FOXO1&#x3001;&#x975E;&#x5B9A;&#x578B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; c. &#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044; AKT &#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9006;&#x8EE2;&#x3057;&#x305F;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x8102;&#x8CEA;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0; AKT (PTEN &#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3092;&#x771F;&#x4F3C;&#x305F;) PIP3 &#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x3067;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x6C88;&#x7740;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x898F;&#x5236;&#x809D;&#x8102;&#x80AA;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B; PI3K &#x3092;&#x5408;&#x56F3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7DDA;&#x5F15;&#x304D;&#x3002;

AKT2 &#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272; PTEN &#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x8102;&#x80AA;&#x809D;&#x3067;&#x306F;&#x3002;

&#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xC2E0;&#xD638; &#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; phosphatidylinositol (3,4,5)&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C;-trisphosphate (PIP3). Pten (&#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; 10&#xC5D0; &#xC0AD;&#xC81C; homologue tensin) &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C; PIP3 &#xC218;&#xC900; &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC9C0;&#xBC29; &#xAC04; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744;&#xC774; &#xB048;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; lipogenesis PIP3 &#xCD95;&#xC801; &#xAC04; Pten &#xC0AD;&#xC81C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. Akt2&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD0D0;&#xAD6C;, Pten, &#xC0AD;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC9C0; &#xBC29;&#xC99D;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xAC04; AKT isoform &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC950; hepatocytes&#xC5D0; Pten&#xC640; Akt2 &#xBD80;&#xC871; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC0AD;&#xC81C; Akt2 &#xBC0F; Pten Pten &#xC0AD;&#xC81C; &#xC950; &#xD63C;&#xC790; &#xC774;&#xC911; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50;. &#xAC04; &#xC7A5;&#xC758; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xCD95;&#xC801; PTEN &#xBC0F; AKT2, Pten &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC950; &#xD63C;&#xC790;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB4DC; &#xB178; &#xBCF4; lipogenesis&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xC815;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0;&#xC5D0; akt2&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xC608;&#xC815; &#xC774;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC911; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; hepatocytes&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xCD95;&#xC801; &#xC81C;&#xC815; &#xD65C;&#xC131; FOXO1 &#xBE44;&#xC815;&#xD615; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; c.&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; AKT&#xC758; &#xD558;&#xB958; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC18;&#xC804; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;,&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; PI3K &#xC2E0;&#xD638; &#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC99D; &#xCC29;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; AKT &#xC911;&#xC7AC; PIP3 &#xCD95;&#xC801; (PTEN &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xC0AC;)&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xC5EC; &#xD1B5;&#xB85C; &#xAC04;&#xC7A5; lipogenesis &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC;&#xC758; &#xADDC;&#xC815; delineated.

PTEN &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xAC04; &#xC9C0; &#xBC29;&#xC99D;&#xC5D0; akt2&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

Insulina en el h&iacute;gado lleva a la acumulaci&oacute;n del fosfatidilinositol (3,4,5)-trifosfato (PIP3). Eliminaci&oacute;n de la fosfatasa Pten (fosfatasa y Tensina hom&oacute;logo eliminado en el cromosoma 10) reduce los niveles de PIP3 y conduce al desarrollo de h&iacute;gado graso. El prop&oacute;sito de este estudio era investigar los mecanismos subyacentes de la lipog&eacute;nesis que resultan de la acumulaci&oacute;n de PIP3 utilizando ratones de Pten eliminaci&oacute;n hep&aacute;ticas. Para explorar el papel de AKT2, la isoforma hep&aacute;tica importante de AKT en esteatosis inducida por la supresi&oacute;n de Pten, hemos creado ratones que carecen de Pten tanto Akt2 en hepatocitos y compararon el efecto de eliminar Akt2 y Pten en los dobles mutantes a los ratones de la supresi&oacute;n de Pten solos. Acumulaci&oacute;n lip&iacute;dica hep&aacute;tica se redujo significativamente en ratones que carecen tanto de PTEN y AKT2, en comparaci&oacute;n con los ratones mutantes de Pten solos. Este efecto fue debido al papel de AKT2 en mantener la expresi&oacute;n de genes implicados en la lipog&eacute;nesis de novo de. Demostramos que acumulaci&oacute;n de l&iacute;pidos en los hepatocitos mutantes dobles se revirti&oacute; parcialmente por la expresi&oacute;n de FOXO1 activa constitutiva, un factor de transcripci&oacute;n aguas abajo de AKT no depende de la inhibici&oacute;n de la anormal de la prote&iacute;na quinasa C. En Resumen, este estudio delineado regulaci&oacute;n del metabolismo lip&iacute;dico mediante se&ntilde;alizaci&oacute;n PI3K en camino demostrando que AKT media PIP3 acumulaci&oacute;n (m&iacute;mica por p&eacute;rdida PTEN) inducida por la deposici&oacute;n de l&iacute;pidos en el h&iacute;gado y proporciona un mecanismo molecular importante para lipog&eacute;nesis hep&aacute;tica de insulina-regulado.

El papel fundamental de AKT2 en esteatosis hep&aacute;tica inducida por la p&eacute;rdida PTEN.

&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x9178;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0D;&#x540C;&#x8111;&#x533A;&#x548C;&#x521D;&#x7EA7;&#x7684;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6587;&#x5316;&#x6E90;&#x81EA;&#x8001;&#x5316;&#x556E;&#x9F7F;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x8001;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5982;&#x4E0B;&#x6240;&#x793A;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x610F;&#x5916;&#x53D1;&#x73B0;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x9178;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x6709;&#x5173;&#x589E;&#x52A0;&#x88AB;&#x538B;&#x5236;&#x5728;&#x6DF7;&#x5408;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE; + &#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x9178;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x589E;&#x52A0;&#x6709;&#x4EBA;&#x6307;&#x51FA;&#x5F53; E18 &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E0E;&#x6DF7;&#x5408;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6291;&#x5236;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x9178;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5728;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x539F;&#x4EE3;&#x57F9;&#x517B;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x6709;&#x5173;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x5730;&#x5B9A;&#x6027;&#x8001;&#x5316;&#x548C;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x4E0E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4F1A;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x597D;&#x5F97;&#x591A;&#x82AF;&#x7247; (Rat230 2.0) &#x5F02;&#x5F62;&#x4ECE;&#x5E74;&#x8F7B; (3 mo) &#x548C;&#x65E7; (24 mo) &#x96C4;&#x6027;&#x5927;&#x9F20;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x8D28;&#x6DF7;&#x5408;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5E74;&#x9F84;&#x53D8;&#x5316;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x53CC;&#x91CD;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x968F;&#x7740;&#x5E74;&#x9F84;&#x589E;&#x957F;&#x4E0D;&#x662F;&#x968F;&#x7740;&#x5E74;&#x9F84;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x800C;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;&#x5C11;&#x6570;&#x4EBA;&#x7684;&#x5E74;&#x9F84;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x88AB;&#x538B;&#x5236;&#x6216;&#x63ED;&#x793A;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x7528;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5F71;&#x54CD;&#x8001;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4F53;&#x5916;&#x66F4;&#x6539;&#x5171;&#x4EAB;&#x4E0E;&#x8001;&#x5316;&#x5927;&#x9F20;&#x6D77;&#x9A6C;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4ECE;&#x5170;&#x83F2;&#x5C14;&#x5FB7;&#x96C6;&#x56E2; &#xFF08;Rowe et al 2007 &#x5E74; &#xFF1B;&#x5361;&#x8FEA;&#x4EC0; et al&#xFF0C;2009&#x5E74;)&#x3002;

&#x5728;&#x4E3B;&#x6DF7;&#x5408;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x6587;&#x5316;&#x4ECE;&#x5E74;&#x8F7B;&#x4E0E;&#x8001;&#x5927;&#x9F20;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5E74;&#x9F84;&#x53D8;&#x5316;&#x4E0E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4FEE;&#x6539;&#x3002;

Astrocytic GFAP expression increases during normal aging in many brain regions and in primary astrocyte cultures derived from aging rodent brains. As shown below, we unexpectedly found that the age-related increase of GFAP expression was suppressed in mixed glia (astrocytes+microglia). However, the age-related increase of GFAP was observed when E18 neurons were co-cultured with mixed glia. Thus, the presence of microglia can suppress the age-related increase of GFAP, in primary cultures of astrocytes. To more broadly characterize how aging and co-culture with neurons alters glial gene expression, we profiled gene expression in mixed glia from young (3 mo) and old (24 mo) male rat cerebral cortex by Affymetrix microarray (Rat230 2.0). The majority of age changes were independent of the presence of neurons. Overall, the expression of twofold more genes increased with age than decreased with age. The minority of age changes that were either suppressed or revealed by the presence of neurons may be useful to analyze glial-neuron interaction during aging. Some in vitro changes are shared with those of aging rat hippocampus in studies from the Landfield group (Rowe et al., 2007; Kadish et al., 2009).

Age-changes in gene expression in primary mixed glia cultures from young vs. old rat cerebral cortex are modified by interactions with neurons.

Expression de GFAP astrocytaires augmente au cours du vieillissement normal dans de nombreuses r&eacute;gions du cerveau et dans des cultures primaires astrocyte d&eacute;riv&eacute;s de vieillissement des cerveaux de rongeurs. Comme indiqu&eacute; ci-dessous, nous avons trouv&eacute; subitement que l&#39;augmentation li&eacute;e &agrave; l&#39;&acirc;ge d&#39;expression GFAP a &eacute;t&eacute; supprim&eacute;e en mixte cellules gliales (astrocytes + cellules microgliales). Toutefois, l&#39;augmentation li&eacute;e &agrave; l&#39;&acirc;ge de l&#39;accord-cadre a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e lorsque les neurones E18 &eacute;taient cultiv&eacute;es avec les cellules gliales mixtes. Ainsi, la pr&eacute;sence des microglies peut supprimer l&#39;augmentation li&eacute;e &agrave; l&#39;&acirc;ge de l&#39;accord-cadre, dans des cultures primaires d&#39;astrocytes. Afin de caract&eacute;riser plus largement comment vieillissement et co-culture avec des neurones modifie l&#39;expression des g&egrave;nes gliale, nous profil&eacute;s gene expression in glia mixte de jeunes (3 mo) et vieux cortex c&eacute;r&eacute;bral de rat m&acirc;le (24 mo) par Affymetrix microarray (Rat230 2.0). La majorit&eacute; des changements d&#39;&acirc;ge &eacute;tait ind&eacute;pendante de la pr&eacute;sence de neurones. Dans l&#39;ensemble, l&#39;expression de deux fois plus de g&egrave;nes augmente avec l&#39;&acirc;ge que diminuait avec l&#39;&acirc;ge. La minorit&eacute; des changements d&#39;&acirc;ge qui ont &eacute;t&eacute; supprim&eacute;es ou r&eacute;v&eacute;l&eacute;es par la pr&eacute;sence de neurones peut &ecirc;tre utile d&#39;analyser l&#39;interaction gliale neurone au cours du vieillissement. Certains changements in vitro sont partag&eacute;s avec ceux du vieillissement d&#39;hippocampe de rat dans les &eacute;tudes du groupe Landfield (Rowe et coll., 2007 ; Kadish et coll., 2009).

&Acirc;ge-changements dans l&#39;expression des g&egrave;nes dans des cultures primaires de cellules gliales mixtes de jeunes vs vieux cortex c&eacute;r&eacute;bral sont modifi&eacute;es par des interactions avec les neurones.

Astrozytische GLIAL Ausdruck erh&ouml;ht w&auml;hrend normale Altern in vielen Hirnregionen und in prim&auml;ren Gliazelle Kulturen Alterung Nagetiere Gehirn abgeleitet. Wie unten dargestellt, fanden wir unerwartet, dass die altersbedingte Zunahme von GFAP Ausdruck in gemischten Glia (Astrozyten + Mikroglia) unterdr&uuml;ckt wurde. Jedoch wurde die altersbedingte Zunahme von GFAP beobachtet als E18 Neuronen mit gemischten Glia co-cultured waren. So kann das Vorhandensein von Mikroglia die altersbedingte Zunahme von GFAP, Prim&auml;rkulturen von Astrozyten unterdr&uuml;cken. Um breiter zu charakterisieren, wie Alterung und Kokulturen mit Neuronen &auml;ndert Gliazellen Genexpression, profilierte wir Genexpression in gemischten Glia von jung (3 Mo) und alt (24 Mo) m&auml;nnliche Ratte Gro&szlig;hirnrinde von Affymetrix Microarray (Rat230 2.0). Die meisten Alter &Auml;nderungen waren unabh&auml;ngig vom Vorhandensein von Neuronen. Insgesamt stieg der Ausdruck der zweifache mehr Gene mit dem Alter als mit Alter verringert. Die Minderheit der Alter &Auml;nderungen, die entweder unterdr&uuml;ckt oder durch das Vorhandensein von Neuronen offenbart n&uuml;tzlich, Gliazellen-Neuron Interaktionen w&auml;hrend der Alterung zu analysieren. Einige in-vitro-&Auml;nderungen sind gemeinsam mit jenen der alternden Ratte Hippocampus in Studien aus der Landfield-Gruppe (Rowe Et Al., 2007; Kadish Et Al., 2009).

Alter-&Auml;nderungen in der Genexpression in prim&auml;ren gemischte Glia Kulturen von jung vs. alt Ratte Hirnrinde werden durch Wechselwirkungen mit Neuronen ge&auml;ndert.

Espressione di GFAP astrocitari aumenta durante il normale invecchiamento in molte regioni del cervello e nelle culture primarie Astrocita derivate da invecchiamento cervello roditore. Come mostrato di seguito, inaspettatamente abbiamo trovato che l&#39;aumento dell&#39;espressione di GFAP legati all&#39;et&agrave; fu soppressa nel misto glia (astrociti + microglia). Tuttavia, l&#39;aumento et&agrave;-correlate di GFAP &egrave; stata osservata quando E18 neuroni erano coltivati con glia mista. Cos&igrave;, la presenza di microglia pu&ograve; sopprimere l&#39;aumento et&agrave;-correlate di GFAP, in colture primarie di astrociti. Per caratterizzare in senso pi&ugrave; ampio come invecchiamento e co-culture con i neuroni altera l&#39;espressione di gene gliali, abbiamo profilato espressione genica in glia mista da giovane (3 mo) e vecchio (24 mo) ratto maschio corteccia cerebrale da Affymetrix microarray (Rat230 2.0). La maggior parte dei cambiamenti di et&agrave; era indipendente dalla presenza di neuroni. Nel complesso, l&#39;espressione della duplice geni pi&ugrave; aumentato con l&#39;et&agrave; che &egrave; diminuito con l&#39;et&agrave;. La minoranza dei cambiamenti di et&agrave; che sono stati soppressi o rivelato dalla presenza di neuroni pu&ograve; essere utile per analizzare l&#39;interazione neurone-gliali durante l&#39;invecchiamento. Alcuni cambiamenti in vitro sono condivisi con quelli di invecchiamento ippocampo di ratto in studi dal gruppo Landfield (Rowe et al., 2007; Kadish et al., 2009).

Et&agrave;-cambiamenti nell&#39;espressione genica in colture primarie glia mista da giovane vs vecchia corteccia cerebrale di ratto sono modificati da interazioni con i neuroni.

&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; GFAP &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x8001;&#x5316;&#x8133;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9F67;&#x6B6F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306B;&#x793A;&#x3059;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x7A81;&#x7136; GFAP &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x5897;&#x52A0;&#x6DF7;&#x5408;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2; (&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; + &#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;) &#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x5E74;&#x9F62;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x5897;&#x52A0; GFAP &#x306E;&#x3068;&#x304D;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3; E18 &#x3068;&#x6DF7;&#x5408;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x5171;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F; GFAP&#x3001;&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x5E74;&#x9F62;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5E83;&#x304F;&#x8001;&#x5316;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5909;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AF;&#x30B9; &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4; (Rat230 2.0) &#x30E4;&#x30F3;&#x30B0; &#xFF08;3 mo&#xFF09; &#x3068;&#x53E4;&#x3044; (24 mo) &#x96C4;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3002;&#x5E74;&#x9F62;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x306F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x52A0;&#x9F62;&#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5E74;&#x9F62;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5F0F;&#x3092;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x3002;&#x6291;&#x5236;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5E74;&#x9F62;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x5C11;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x6642;&#x52B9;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2; &#x30FB; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x5F79;&#x306B;&#x7ACB;&#x3064;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3068;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067; Landfield &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; &#xFF08;Rowe et al., 2007; &#x304B;&#x3089;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x6D77;&#x99AC;&#x306E;&#x5171;&#x6709;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Kadish &#x3089;&#x3001;2009&#x5E74;&#xFF09;&#x3002;

&#x5E74;&#x9F62; - &#x82E5;&#x3044;&#x5BFE;&#x53E4;&#x3044;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x6DF7;&#x5408;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Astrocytic GFAP &#xC2DD; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xB178;&#xD654; &#xB9CE;&#xC740; &#xB1CC; &#xC601;&#xC5ED; &#xBC0F; &#xC124;&#xCE58;&#xB958; &#xB450;&#xB1CC; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC0AC;&#xC774;&#xD1A0; &#xBB38;&#xD654; &#xC911; &#xC99D;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB798;&#xC640; &#xAC19;&#xC774; GFAP &#xC2DD;&#xC758; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xC99D;&#xAC00; (&#xC774;&#xB2E4; + microglia) &#xD63C;&#xD569;&#xB41C; &#xBA85;&#xACFC;&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC555;&#xC744; &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xAC8C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, GFAP &#xC5F0;&#xB839; &#xAD00;&#xB828; &#xC99D;&#xAC00; E18 &#xB274;&#xB7F0; &#xD63C;&#xD569;&#xB41C; &#xBA85;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; co-cultured &#xB418;&#xC5C8;&#xC744; &#xB54C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, microglia &#xC874;&#xC7AC; &#xC774;&#xB2E4;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; GFAP&#xC758; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC5B5;&#xC81C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xB178;&#xD654; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; co-culture &#xAD50; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Affymetrix microarray (Rat230 2.0)&#xC73C;&#xB85C; &#xD63C;&#xD569;&#xB41C; &#xBA85;&#xACFC; &#xC601; (3 &#xAC1C;&#xC6D4;) &#xBC0F; &#xC774;&#xC804; (24 &#xAC1C;&#xC6D4;) &#xB0A8;&#xC131; &#xC950;&#xC758; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1;. &#xC2DC;&#xB300; &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0;&#xC758; &#xC2DD;&#xC740; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC99D;&#xAC00; &#xB098;&#xC774; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xB098; &#xC774;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB098;&#xC774; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD588;&#xB2E4; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; &#xC18C;&#xC218; &#xB178;&#xD654; &#xC911; &#xAD50; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBD84;&#xC11D; &#xC720;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBD80; &#xCCB4; &#xC678; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB178;&#xD654; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; Landfield &#xADF8;&#xB8F9; (&#xB85C;&#xC6B0; et al., 2007; &#xC950; &#xD574; &#xB9C8;&#xC758; &#xADF8;&#xC640; &#xACF5;&#xC720; Kadish &#xC678;., 2009)&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB098;&#xC774;-&#xC80A;&#xC740; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; &#xC950;&#xC758; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8; &#xB300;&#xC5D0;&#xC11C; 1 &#xCC28; &#xD63C;&#xD569;&#xB41C; &#xBA85;&#xACFC; &#xBB38;&#xD654; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Expresi&oacute;n de GFAP astroc&iacute;tico aumenta durante el envejecimiento normal en muchas regiones del cerebro y en primaria Astrocito cultivos derivados de envejecimiento cerebros de roedores. Como se muestra abajo, inesperadamente se encontr&oacute; que el aumento relacionado con la edad de la expresi&oacute;n de GFAP fue suprimido en glia mixto (astrocitos + microglia). Sin embargo, el aumento relacionado con la edad de GFAP observ&oacute; cuando las neuronas E18 fueron co-cultivadas con glia mixto. As&iacute;, la presencia de la microgl&iacute;a puede suprimir el aumento relacionado con la edad de GFAP, en cultivos primarios de astrocitos. Para caracterizar m&aacute;s ampliamente c&oacute;mo envejecimiento y cocultivo con neuronas altera la expresi&oacute;n del gen glial, nos perfila la expresi&oacute;n g&eacute;nica en glia mixto de j&oacute;venes (3 meses) y el vieja hombre rata de (24 mes) de la corteza cerebral por Affymetrix microarray (Rat230 2.0). La mayor&iacute;a de los cambios de edad fueron independiente de la presencia de neuronas. En general, la expresi&oacute;n de doble m&aacute;s genes aumentaron con la edad que disminuy&oacute; con la edad. La minor&iacute;a de los cambios de edad que fueron suprimidos o revelado por la presencia de neuronas puede ser &uacute;til para analizar la interacci&oacute;n de glial neuronal durante el envejecimiento. Algunos cambios in vitro son compartidos con los de envejecimiento hipocampo de la rata en los estudios del grupo Landfield (Rowe et al., 2007; Kadish et al., 2009).

Edad-cambios en la expresi&oacute;n g&eacute;nica en las culturas de la glia mixto primaria desde joven vs vieja corteza cerebral de rata se modifican por las interacciones con las neuronas.

&#x76EE;&#x7684;&#xFF1A; &#x7ED3;&#x80A0;&#x5207;&#x9664;&#x672F;&#x540E;&#x7ED3;&#x80A0;&#x6C34;&#x5E93;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E27;&#x5931;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x75C5;&#x4EBA;&#x9884;&#x540E;&#x3002;&#x5728;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x80CE;&#x513F;&#x80A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x8D28;&#x5C0F;&#x9F20;&#x690D;&#x5165;&#x540E;&#x65E0;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6765;&#x8BF4;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x540E;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5C06;&#x9996;&#x9009;&#x7684;&#x6350;&#x52A9;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x4EA7;&#x540E;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5355;&#x4F4D;&#x751F;&#x6210;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x5192;&#x53F7; (TEC)&#x3002;&#x6750;&#x6599; &amp; &#x65B9;&#x6CD5;&#xFF1A; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5355;&#x4F4D;&#x662F;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7ED3;&#x80A0;&#x5E9F;&#x7269;&#x6837;&#x54C1;&#x51C6;&#x5907;&#x3001; &#x88C5;&#x4E0A;&#x751F;&#x7269;&#x53EF;&#x964D;&#x89E3;&#x6750;&#x6599;&#x548C;&#x690D;&#x5165;&#x514D;&#x75AB;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;4 &#x5468;&#x540E;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x7C7B; TEC &#x88AB;&#x6536;&#x83B7;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8D77;&#x6E90;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x67E5;&#x660E;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x548C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x652F;&#x6301;&#x95F4;&#x8D28;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF1A; &#x4EBA;&#x7C7B; TEC &#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x7EB5;&#x680F;&#x5F0F;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x8868;&#x660E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8D77;&#x6E90;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x7ED3;&#x80A0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4E09;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x770B;&#x5230;&#x5173;&#x952E;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x7EC4;&#x4EF6; &#xFF08;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x3001; &#x80A0;&#x9053;&#x4E0A;&#x76AE;&#x4E0B;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09;&#x3002;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; &#x5192;&#x53F7;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x9F20;&#x6807;&#x4E3B;&#x673A;&#x652F;&#x67B6;&#x4E0A;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x6982;&#x5FF5;&#x8BC1;&#x660E;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x662F; TEC &#x8FC7;&#x6E21;&#x5230;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;

&#x4EA7;&#x540E;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x5192;&#x53F7;&#x5F62;&#x5F0F;&#xFF1A; &#x4E00;&#x79CD;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

Aim: Loss of colon reservoir function after colectomy can adversely affect patient outcomes. In previous work, human fetal intestinal cells developed epithelium without mesenchyme following implantation in mice. However, for humans, postnatal tissue would be the preferred donor source. We generated tissue-engineered colon (TEC) from postnatal human organoid units. Materials & methods: Organoid units were prepared from human colon waste specimens, loaded onto biodegradable scaffolds and implanted into immunocompromised mice. After 4 weeks, human TEC was harvested. Immunofluorescence staining confirmed human origin, identified differentiated epithelial cell types and verified the presence of supporting mesenchyme. Results: Human TEC demonstrated a simple columnar epithelium. Immunofluorescence staining demonstrated human origin and the three differentiated cell types of mature colon epithelium. Key mesenchymal components (smooth muscle, intestinal subepithelial myofibroblasts and ganglion cells) were seen. Conclusion: Colon can form from human progenitor cells on a scaffold in a mouse host. This proof-of-concept experiment is an important step in transitioning TEC to human therapy.

Human tissue-engineered colon forms from postnatal progenitor cells: an in vivo murine model.

Objectif : Perte de fonction de r&eacute;servoir du c&ocirc;lon apr&egrave;s que colectomie peut affecter d&eacute;favorablement les r&eacute;sultats pour les patients. Dans des travaux ant&eacute;rieurs, des cellules intestinales humaines foetales d&eacute;velopp&eacute; &eacute;pith&eacute;lium sans m&eacute;senchyme apr&egrave;s implantation chez la souris. Toutefois, pour l&#39;homme, tissu postnatal serait la source pr&eacute;f&eacute;r&eacute;e de donateurs. Nous tissulaire du c&ocirc;lon (TEC) issues d&#39;unit&eacute;s postnatal organo&iuml;de humaine. Mat&eacute;riaux &amp; m&eacute;thodes : organo&iuml;de unit&eacute;s ont &eacute;t&eacute; pr&eacute;par&eacute;es &agrave; partir d&#39;&eacute;chantillons de d&eacute;chets du c&ocirc;lon humain, charg&eacute;es sur des &eacute;chafaudages biod&eacute;gradables et implant&eacute;es dans des souris immunod&eacute;prim&eacute;es. Apr&egrave;s 4 semaines, TEC humaine a &eacute;t&eacute; r&eacute;colt&eacute;. Immunofluorescence souillant a confirm&eacute; d&#39;origine humaine, identifi&eacute; les cellules &eacute;pith&eacute;liales diff&eacute;renci&eacute;e types et v&eacute;rifi&eacute; la pr&eacute;sence de soutien du m&eacute;senchyme. R&eacute;sultats : TEC humain ont d&eacute;montr&eacute; un &eacute;pith&eacute;lium cylindrique simple. Immunofluorescence souillant a d&eacute;montr&eacute; d&#39;origine humaine et les trois types de cellules diff&eacute;renci&eacute;es de l&#39;&eacute;pith&eacute;lium du c&ocirc;lon matures. Principaux &eacute;l&eacute;ments m&eacute;senchymateuses (muscle lisse, des myofibroblastes sous-&eacute;pith&eacute;liaux intestinales et cellules ganglionnaires) ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s. Conclusion : C&ocirc;lon peut former des cellules prog&eacute;nitrices humaine sur un &eacute;chafaudage dans un h&ocirc;te de souris. Cette exp&eacute;rience de validation est une &eacute;tape importante dans la transition TEC &agrave; la th&eacute;rapie humaine.

Formes de c&ocirc;lon humaines tissulaire de cellules prog&eacute;nitrices postnatales : un mod&egrave;le murin in vivo.

Ziel: Verlust der Doppelpunkt-Reservoir-Funktion nach Kolektomie geduldige Resultate nachteilig beeinflussen kann. In fr&uuml;heren Arbeiten entwickelten menschliche fetale Darmzellen Epithel ohne Mesenchym nach Implantation bei M&auml;usen. Allerdings w&auml;re postnatale Gewebe f&uuml;r den Menschen, die bevorzugte Spender-Quelle. Wir Gewebe-Engineering Doppelpunkt (TEC) von postnatale menschlichen organoide Einheiten generiert. Materialien &amp; Methoden: organoide Einheiten wurden aus menschlichen Doppelpunkt Abfall Proben vorbereitet, biologisch abbaubare Ger&uuml;sten verladen und in immungeschw&auml;chten M&auml;use implantiert. Nach 4 Wochen war die menschliche TEC geerntet. Immunfluoreszenz-F&auml;rbung best&auml;tigt menschlichen Ursprungs, identifizierten differenzierten Epithelzellen eingibt und &uuml;berpr&uuml;ft das Vorhandensein von Mesenchym zu unterst&uuml;tzen. Ergebnisse: Menschliche TEC demonstriert eine einfache Einspaltig Epithel. Immunfluoreszenz-F&auml;rbung nachgewiesen menschlichen Ursprungs und die drei differenzierte Zelltypen der Reifen Doppelpunkt-Epithel. Mesenchymale Schl&uuml;sselkomponenten (glatte Muskulatur, intestinale muzin&ouml;se Myofibroblasts und Ganglienzellen) galten. Fazit: Doppelpunkt kann vom menschlichen Vorl&auml;uferzellen auf leske in einem Maus-Host bilden. Dieses Proof-of-Concept-Experiment ist ein wichtiger Schritt in der Humantherapie TEC &uuml;berf&uuml;hren.

Menschlichen Gewebe-Engineering Doppelpunkt Formen von postnatale Vorl&auml;uferzellen: eine in-vivo murinen Modell.

Obiettivo: La perdita della funzione di serbatoio del colon dopo colectomia pu&ograve; influenzare negativamente i risultati per il paziente. Nel precedente lavoro, le cellule intestinali fetali umane sviluppato epitelio senza mesenchima seguendo l&#39;impianto nei topi. Tuttavia, per gli esseri umani, tessuto postnatale sarebbe all&#39;origine del donatore preferito. Abbiamo generato tessutale del colon (TEC) da unit&agrave; organoid umano postnatale. Materiali &amp; metodi: Organoid unit&agrave; sono stati preparati da campioni dei rifiuti del colon umano, caricati su ponteggi biodegradabile e impiantati in topi immunocompromessi. Dopo 4 settimane, &egrave; stato raccolto TEC umana. Colorazione di immunofluorescenza ha confermato di origine umana, tipi di identificate cellule epiteliali differenziate e verificata la presenza del supporto mesenchima. Risultati: TEC umano ha dimostrato un epitelio colonnare semplice. Colorazione di immunofluorescenza ha dimostrato di origine umana e i tre tipi di cellule differenziate di matura dell&#39;epitelio del colon. Principali componenti mesenchimali (muscolo liscio, miofibroblasti sottoepiteliale intestinale e cellule gangliari) sono stati visti. Conclusione: Colon pu&ograve; formare da cellule progenitrici umana su un ponteggio in un host di mouse. Questo esperimento di proof-of-concept &egrave; un passo importante nella transizione TEC a terapia umana.

Tessutale del colon forme umane da cellule progenitrici postnatale: un modello murino in vivo.

&#x76EE;&#x7684;: &#x7D50;&#x8178;&#x30EA;&#x30B6;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7D50;&#x8178;&#x5207;&#x9664;&#x5F8C;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x8EE2;&#x5E30;&#x306B;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x3001;&#x3072;&#x3068;&#x80CE;&#x5150;&#x5C0F;&#x8178;&#x7D30;&#x80DE;&#x4E0A;&#x76AE;&#x9593;&#x5145;&#x7E54;&#x79FB;&#x690D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F8C;&#x306A;&#x3057;&#x958B;&#x767A;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x751F;&#x5F8C;&#x7D44;&#x7E54;&#x6700;&#x5BC4;&#x308A;&#x306E;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x30B3;&#x30ED;&#x30F3; (TEC) &#x751F;&#x5F8C;&#x4EBA;&#x9593;&#x5668;&#x5B98;&#x6BDB;&#x7D30;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x6750;&#x6599; &amp; &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;: &#x5668;&#x5B98;&#x6BDB;&#x7D30;&#x5358;&#x4F4D;&#x3044;&#x305F;&#x3072;&#x3068;&#x5927;&#x8178;&#x304B;&#x3089;&#x5EC3;&#x68C4;&#x7269;&#x6A19;&#x672C;&#x6E96;&#x5099;&#x3001;&#x751F;&#x5206;&#x89E3;&#x6027;&#x8DB3;&#x5834;&#x4E0A;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;4 &#x9031;&#x9593;&#x5F8C;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; TEC &#x3092;&#x53CE;&#x7A6B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8D77;&#x6E90;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3001;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3057;&#x9593;&#x5145;&#x7E54;&#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;: &#x4EBA;&#x9593;&#x30C6;&#x30C3;&#x30AF; &#x30B7;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306A;&#x5186;&#x67F1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8D77;&#x6E90;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; 3 &#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x5927;&#x8178;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3002;&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8; &#xFF08;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x3001;&#x8178;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x4E0B;&#x306E;&#x82BD;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09; &#x304C;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;: &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x8DB3;&#x5834;&#x4E0A;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x30B3;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6982;&#x5FF5;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B; TEC &#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x751F;&#x5F8C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x30B3;&#x30ED;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;: in vivo &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3002;

&#xBAA9;&#xD45C;: colectomy &#xD6C4; &#xCF5C;&#xB860; &#xC800;&#xC218;&#xC9C0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xD658;&#xC790; &#xACB0;&#xACFC; &#xC800;&#xD558; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD0DC;&#xC544; &#xCC3D; &#xC790; &#xC138;&#xD3EC; mesenchyme &#xB2E4;&#xC74C; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xC0C1;&#xD53C;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC778;&#xAC04;, &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; &#xC870;&#xC9C1; &#xC120;&#xD638; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xC18C;&#xC2A4; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0B0; &#xD6C4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; organoid &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1; &#xC5D4;&#xC9C0;&#xB2C8;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xCF5C;&#xB860; (TEC)&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xB8CC; &amp; &#xBC29;&#xBC95;: Organoid &#xB2E8;&#xC704; &#xD588;&#xB2E4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCF5C;&#xB860; &#xD3D0;&#xAE30;&#xBB3C; &#xD45C;&#xBCF8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC900;&#xBE44;, &#xC0DD; &#xBD84;&#xD574;&#xC131; &#xAC74;&#xC124; &#xAE30;&#xACC4; &#xC784;&#xB300;&#xC5D0; &#xB85C;&#xB4DC; &#xBC0F; immunocompromised &#xC950;&#xC5D0; &#xC774;&#xC2DD;. 4 &#xC8FC; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; TEC &#xC218;&#xD655; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xC6D0; &#xD655;&#xC778; &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC774; &#xC9C0;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC;, &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615; &#xBC0F; mesenchyme&#xB97C; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC;: &#xC778;&#xAC04;&#xC758; TEC &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xCEEC;&#xB7FC; &#xD615;&#xC2DD;&#xC774; &#xC0C1;&#xD53C;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xC5BC;&#xB8E9; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xC6D0;&#xACFC; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; &#xACB0; &#xC7A5; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xC694; &#xC5FD; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; (&#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC;, &#xCC3D; &#xC790; subepithelial myofibroblasts&#xC640; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC;) &#xBCFC; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xB860;: &#xCF5C;&#xB860; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBE44; &#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC1C;&#xB150; &#xC99D;&#xBA85; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; TEC&#xC758; &#xC804;&#xD658;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC774;&#xB2E4;.

&#xC0B0; &#xD6C4; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xC124;&#xACC4; &#xCF5C;&#xB860; &#xD615;&#xD0DC;: &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; murine &#xBAA8;&#xB378;.

Objetivo: La p&eacute;rdida de la funci&oacute;n de dep&oacute;sito de colon despu&eacute;s de la extirpaci&oacute;n del intestino grueso puede afectar negativamente los resultados del paciente. En trabajos anteriores, las c&eacute;lulas intestinales fetales humanas desarrollaron epitelio sin mes&eacute;nquima despu&eacute;s de la implantaci&oacute;n en ratones. Sin embargo, para los seres humanos, tejido postnatal ser&iacute;a la fuente preferida de donantes. Generamos tejido-dirigida Col&oacute;n (TEC) de unidades de organoide humana postnatal. Materiales &amp; m&eacute;todos: organoide unidades fueron preparadas a partir de muestras de residuos de colon humano, cargan en andamios biodegradables e implantadas en ratones inmunodeprimidos. Despu&eacute;s de 4 semanas, se cosech&oacute; TEC humana. La coloraci&oacute;n de la inmunofluorescencia confirm&oacute; el origen humano, c&eacute;lulas epiteliales diferenciadas identificado tipos y verificado la presencia de apoyo mes&eacute;nquima. Resultados: TEC humano demostr&oacute; un epitelio cil&iacute;ndrico simple. La coloraci&oacute;n de la inmunofluorescencia demostr&oacute; el origen humano y los tres tipos de c&eacute;lulas diferenciadas de epitelio maduro de Col&oacute;n. Se observaron los principales componentes mesenquimales (m&uacute;sculo liso, miofibroblastos subepitelial intestinal y las c&eacute;lulas del ganglio). CONCLUSI&Oacute;N: Colon puede formarse de las c&eacute;lulas progenitoras humana en un andamio en un host de rat&oacute;n. Este experimento proof-of-concept es un paso importante en la transici&oacute;n de TEC para la terapia humana.

Article	Year
Angiogenic gene therapy for experimental critical limb ischemia: acceleration of limb loss by overexpression of vascular endothelial growth factor 165 but not of fibroblast growth factor-2. Circulation research\| PubMed ID: 12016262	2002
Mutations in Sendai virus variant F1-R that correlate with plaque formation in the absence of trypsin. Medical microbiology and immunology\| PubMed ID: 15834752	2005
The critical role of AKT2 in hepatic steatosis induced by PTEN loss. The American journal of pathology\| PubMed ID: 20348245	2010
Age-changes in gene expression in primary mixed glia cultures from young vs. old rat cerebral cortex are modified by interactions with neurons. Brain, behavior, and immunity\| PubMed ID: 22226781	2012
Human tissue-engineered colon forms from postnatal progenitor cells: an in vivo murine model. Regenerative medicine\| PubMed ID: 23164081	2012

Xiaogang Hou

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