Bioluminescent Bacterial Imaging <em>In Vivo</em>

This video describes the use of whole body bioluminesce imaging (BLI) for the study of bacterial trafficking in live mice, with an emphasis on the use of ...

University College Cork

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The infectious yeast Candida albicans is a model organism for understanding the mechanisms of fungal pathogenicity. We describe the functional expression of the firefly luciferase gene, a reporter commonly used to tag genes in many other cellular systems. Due to a non-standard codon usage by this yeast, the CUG codons were first mutated to UUG to allow functional expression. When integrated into the chromosome of C. albicans with a strong constitutive promoter, cells bioluminesce when provided with luciferin substrate in their media. When fused to the inducible promoter from the HWP1 gene, expression and bioluminescence was only detected in cultures conditioning hyphal growth. We further used the luciferase gene as a selection to isolate transformed cell lines from clinical isolates of C. albicans, using a high-density screening strategy that purifies transformed colonies by virtue of light emission. This strategy requires no drug or auxotrophic selectable marker, and we were thus able to generate stable transformants of clinical isolates that are identical to the parental strain in all aspects tested, other than their bioluminescence. The firefly luciferase gene can, therefore, be used as a sensitive reporter to analyze gene function both in laboratory and clinical isolates of this medically important yeast.

Expression of firefly luciferase in Candida albicans and its use in the selection of stable transformants.

La levure infectieuses Candida albicans est un organisme mod&egrave;le pour comprendre les m&eacute;canismes du pouvoir pathog&egrave;ne fongique. Nous d&eacute;crivons l&#39;expression fonctionnelle de la g&egrave;ne de la lucif&eacute;rase firefly, un journaliste couramment utilis&eacute; pour les g&egrave;nes de la balise dans de nombreux autres syst&egrave;mes cellulaires. En raison de l&#39;utilisation d&#39;un codon non standard par cette levure, les codons CUG &eacute;taient d&#39;abord mut&eacute;s &agrave; UUG pour permettre l&#39;expression fonctionnelle. Lorsqu&#39;elle est int&eacute;gr&eacute;e dans le chromosome de c. albicans avec un promoteur constitutif fort, cellules bioluminesce lorsqu&#39;il est fourni avec le substrat de la lucif&eacute;rine dans leurs m&eacute;dias. Lorsque fusionn&eacute; au promoteur inductible du g&egrave;ne HWP1, expression et bioluminescence a &eacute;t&eacute; seulement d&eacute;tect&eacute;e dans les cultures, la croissance des hyphes de conditionnement. Plus loin, nous avons utilis&eacute; le g&egrave;ne de la lucif&eacute;rase comme une s&eacute;lection pour isoler des lign&eacute;es de cellules transform&eacute;es &agrave; partir d&#39;isolats cliniques de c. albicans, &agrave; l&#39;aide d&#39;une strat&eacute;gie de d&eacute;pistage de haute densit&eacute; qui purifie les colonies transform&eacute;es en vertu de l&#39;&eacute;mission de lumi&egrave;re. Cette strat&eacute;gie ne n&eacute;cessite aucun m&eacute;dicament ou auxotrophe marqueur s&eacute;lectionnable, et nous avons ainsi pu g&eacute;n&eacute;rer des transformants stables des isolats cliniques qui sont identiques &agrave; la souche parentale dans tous les aspects test&eacute;s, autre que leur bioluminescence. Le g&egrave;ne de la lucif&eacute;rase firefly, par cons&eacute;quent, utilisable comme un journaliste sensible pour analyser la fonction du g&egrave;ne en laboratoire et cliniques des isolats de cette levure m&eacute;dicalement importante.

Expression de la lucif&eacute;rase luciole chez Candida albicans et son utilisation dans la s&eacute;lection des transformants stables.

Die infekti&ouml;se Hefe Candida Albicans ist ein Modellorganismus f&uuml;r das Verst&auml;ndnis der Mechanismen der pilzartigen Pathogenit&auml;t. Wir beschreiben den funktionalen Ausdruck im Gl&uuml;hw&uuml;rmchen Luciferase-gen, ein Reporter, die h&auml;ufig zum Tag Gene in viele andere zellulare Systeme. Aufgrund einer nicht standardm&auml;&szlig;igen Codon-Nutzung durch diese Hefe wurden der CUG-Codons zuerst an UUG funktionalen Ausdruck erm&ouml;glichen mutiert. Wenn das Chromosom von C. Albicans mit starken konstitutiven Promoter integriert, Zellen Bioluminesce wenn Luciferin Substrat in ihren Medien bereitgestellt. Bei dem durch Induktion Projekttr&auml;ger aus der HWP1-gen verschmolzen, wurde Ausdruck und Biolumineszenz nur erkannt in Kulturen, die Klimaanlage geflochtenen Wachstum. Wir weiter benutzt das Luciferase-gen als Selektion transformierter Zellinien aus klinischen Isolaten von C. Albicans, isolieren, mit einer High-Density-Screening-Strategie, die transformierte Kolonien aufgrund Lichtaustritt reinigt. Diese Strategie erfordert keine Droge oder auxotrophe selectable Marker, und so konnten wir stabile Transformationen der klinischen Isolate zu generieren, die die elterliche Belastung in allen Aspekten getestet, au&szlig;er ihrer Biolumineszenz identisch sind. Das Gl&uuml;hw&uuml;rmchen Luciferase gen kann daher verwendet werden, wie ein sensibler Reporter Genfunktion sowohl im Labor als auch klinische Analyse dieser medizinisch wichtige Hefe isoliert.

Ausdruck von Gl&uuml;hw&uuml;rmchen Luciferase in Candida Albicans und seine Verwendung bei der Auswahl der stabilen Transformants.

L&#39;infettive lievito Candida albicans &egrave; un organismo modello per la comprensione dei meccanismi di patogenicit&agrave; fungine. Descriviamo l&#39;espressione funzionale del gene della luciferasi firefly, un reporter comunemente usato per i geni di tag in molti altri sistemi cellulari. A causa di un utilizzo del codone non standard di questo lievito, i codoni CUG erano mutati in primo luogo a UUG per permettere l&#39;espressione funzionale. Se &egrave; integrato nel cromosoma di c. albicans con un promotore forte costitutivo, le cellule bioluminesce quando fornito con substrato luciferina nei loro mezzi. Quando fusa al promotore inducibile dal gene HWP1, espressione e bioluminescenza &egrave; stato rilevato solo in culture condizionata crescita ifale. Abbiamo usato ulteriormente il gene della luciferasi come selezione per isolare la cellula trasformata da isolati clinici di c. albicans, utilizzando una strategia di screening ad alta densit&agrave; che purifica le colonie trasformate in virt&ugrave; della emissione di luce. Questa strategia non richiede nessun farmaco o auxotrofi marcatore selezionabile, e cos&igrave; siamo stati in grado di generare transformants stabile degli isolati clinici che sono identici al ceppo parentale in tutti gli aspetti testato, diverso da loro bioluminescenza. Il gene della luciferasi firefly &egrave;, quindi, utilizzabile come un reporter sensibile per analizzare la funzione genica in laboratorio e clinici isolati di questo lievito medicamente importante.

Espressione della luciferasi firefly in Candida albicans e il suo uso nella selezione dei transformants stabile.

&#x611F;&#x67D3;&#x9175;&#x6BCD;&#x30AB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30C0;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x30BF;&#x30B0;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x4ED6;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4F7F;&#x7528;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30DB;&#x30BF;&#x30EB; &#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x975E;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30C9;&#x30F3;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x308B; CUG &#x30B3;&#x30C9;&#x30F3;&#x6700;&#x521D;&#x6A5F;&#x80FD;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x3046;&#x3061; UUG &#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F37;&#x3044;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x306E; c.albicans &#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306B;&#x7D71;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x3068;&#x304D;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x3067;&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x30F3;&#x57FA;&#x677F;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3068; bioluminesce &#x3092;&#x7D30;&#x80DE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HWP1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304B;&#x3089;&#x8A98;&#x5C0E;&#x578B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x878D;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x5F0F;&#x3068;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x306E;&#x307F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x83CC;&#x7CF8;&#x751F;&#x9577;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3067;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x9078;&#x629E;&#x767A;&#x5149;&#x306E;&#x304A;&#x304B;&#x3052;&#x3067;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x3092;&#x6D44;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x9AD8;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; C. albicans &#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x7269;&#x3084;&#x6804;&#x990A;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x4F53;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x4EE5;&#x5916;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x89AA;&#x306E;&#x7DCA;&#x5F35;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x83CC;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x30DB;&#x30BF;&#x30EB;&#x306E;&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3053;&#x306E;&#x533B;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30C0; &#x30FB; &#x30A2;&#x30EB;&#x30D3;&#x30AB;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30DB;&#x30BF;&#x30EB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A; transformants &#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x5F0F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xAC10;&#xC5FC; &#xD6A8; &#xBAA8; Candida albicans &#xADE0; pathogenicity&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0DC;&#xADF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC790; &#xAC1C; &#xB625; &#xBC8C;&#xB808; &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2DD; &#xC124;&#xBA85;. &#xC774; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBE44;&#xD45C;&#xC900; codon &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; CUG codons UUG &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2DD; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD558; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBA3C;&#xC800; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC81C;&#xC815; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; C. albicans&#xC758; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC140; bioluminesce &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xB180;&#xB790;&#xB358; &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. HWP1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC744; &#xC735;&#xD569; &#xD558;&#xBA74; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xAD11;&#xB9CC; hyphal &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; C. albicans&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD658; &#xB41C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xBC1C;&#xAD11; &#xB355;&#xD0DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD658; &#xB41C; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xC815;&#xD654; &#xACE0;&#xBC00;&#xB3C4; &#xAC80;&#xC0AC; &#xC804;&#xB7B5; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC120;&#xD0DD; &#xC601;&#xC5ED;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD94;&#xAC00; &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC774; &#xC804;&#xB7B5; &#xD544;&#xC694; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB610;&#xB294; auxotrophic &#xC120;&#xD0DD; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xB9C8;&#xCEE4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBD80;&#xBAA8;&#xC758; &#xBCC0;&#xD615; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xAD11; &#xC774;&#xC678;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC784;&#xC0C1; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC758; &#xC548;&#xC815; &#xB41C; transformants&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC1C; &#xB625; &#xBC8C;&#xB808; &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC640; &#xC784;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xAE30;&#xC790;&#xAC00; &#xC758;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB204; &#xB8E9;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC;&#xB85C; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Candida albicans&#xC5D0; &#xAC1C; &#xB625; &#xBC8C;&#xB808; &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xBC0F; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; transformants&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC5D0;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;.

La infecciosa de la levadura Candida albicans es un organismo modelo para la comprensi&oacute;n de los mecanismos de patogenicidad de hongo. Describimos la expresi&oacute;n funcional del gen firefly luciferase, un reportero utilizado genes de etiqueta en muchos otros sistemas celulares. Debido a una utilizaci&oacute;n de codones no est&aacute;ndar por esta levadura, los codones CUG primero se mutaron a UUG para permitir la expresi&oacute;n funcional. Cuando se integra en el cromosoma de C. albicans con un fuerte promotor constitutivo, c&eacute;lulas bioluminesce cuando con sustrato Luciferina en sus medios. Cuando fusionado al promotor inducible del gen HWP1, expresi&oacute;n y bioluminiscencia s&oacute;lo fue detectado en las culturas acondicionado crecimiento hifal. Adem&aacute;s utilizamos el gen de la luciferasa como una selecci&oacute;n para aislar l&iacute;neas de c&eacute;lulas transformadas de los aislados cl&iacute;nicos de C. albicans, mediante una estrategia de proyecci&oacute;n de alta densidad que purifica las colonias transformadas en virtud de la emisi&oacute;n de luz. Esta estrategia requiere auxotr&oacute;fica marcador seleccionable ni drogas, y as&iacute; hemos podido generar transformantes estables de aislamientos cl&iacute;nicos que son id&eacute;nticas a la cepa parental en todos los aspectos evaluados, excepto su bioluminiscencia. El gen de la luciferasa de luci&eacute;rnaga, por lo tanto, utilizable como reportero sensible para analizar la funci&oacute;n del gen tanto en laboratorio como cl&iacute;nicas aislantes de esta levadura m&eacute;dicamente importante.

Expresi&oacute;n de luciferasa de la luci&eacute;rnaga en Candida albicans y su uso en la selecci&oacute;n de transformantes estables.

&#x5149;&#x5B66;&#x6210;&#x50CF;&#x6B63;&#x9010;&#x6E10;&#x6210;&#x4E3A;&#x7814;&#x7A76;&#x751F;&#x7406;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x3001; &#x80BF;&#x7624;&#x75C5;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3001; &#x5206;&#x5B50;&#x3001; &#x53D1;&#x80B2;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x548C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x6709;&#x529B;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x672C;&#x5355;&#x5143;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x8367;&#x5149;&#x8BB0;&#x8005;&#x7528;&#x4E8E;&#x751F;&#x7269;&#x6709;&#x673A;&#x4F53;&#x3001; &#x7EC4;&#x4EF6;&#x6216;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#x5BF9;&#x8003;&#x8BD5;&#x7684;&#x4F20;&#x67D3;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x76AE;&#x4E0B;&#x548C;&#x80BA;&#x90E8;&#x7EC6;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x5E94;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F46;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x90FD;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x51E0;&#x4E4E;&#x4EFB;&#x4F55;&#x4F20;&#x67D3;&#x75C5;&#x7684;&#x8DEF;&#x7EBF;&#x3002;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x7B56;&#x7565;&#x4F7F;&#x7528;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x4E3A;&#x4F8B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51E0;&#x4E4E;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x3001; &#x519B;&#x56E2;&#x83CC;&#x3001; &#x6C99;&#x95E8;&#x83CC;&#x3001; &#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x83CC;&#x3001; &#x83B1;&#x59C6;&#x75C5;&#x3001; &#x548C;&#x8461;&#x8404;&#x7403;&#x83CC;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x666E;&#x904D;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x51E0;&#x4E4E;&#x4EFB;&#x4F55;&#x4F20;&#x67D3;&#x75C5;&#x7684;&#x4EE3;&#x7406;&#x3002;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E3A;&#x8367;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x7B56;&#x7565;&#xFF1A; &#x7B2C;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x7528;&#x8BB0;&#x8005;&#x9176;&#x8367;&#x5149; (REF)&#xFF0C;&#x548C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x7EC6;&#x8282;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B0;&#x5174;&#x6280;&#x672F;&#x5230;&#x51E0;&#x4E4E;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;

&#x5168;&#x8EAB;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#x3002;

Optical imaging is emerging as a powerful tool to study physiological, neurological, oncological, cell biological, molecular, developmental, immunological, and infectious processes. This unit describes the use of fluorescent reporters for biological organisms, components, or events. We describe the application of fluorescence imaging to examination of infectious processes, in particular subcutaneous and pulmonary bacterial infections, but the same approaches are applicable to nearly any infectious route. The strategies described use mycobacterial infections as an example, but nearly identical systems can be used for Pseudomonas, Legionella, Salmonella, Escherichia, Borrelia, and Staphylococus, suggesting that the approaches are generally applicable to nearly any infectious agent. Two strategies for fluorescence imaging are described: the first method uses reporter enzyme fluorescence (REF), and the second uses fluorescent proteins for fluorescence imaging. Methods are described in detail to facilitate successful application of these emerging technologies to nearly any experimental system.

Whole-body imaging of infection using fluorescence.

L&#x26;#39;imagerie optique est en train de devenir un outil puissant pour &#xE9;tudier les processus physiologiques, neurologiques, oncologiques, de cellules biologiques, mol&#xE9;culaires, d&#xE9;veloppementales, immunologiques et infectieuses. Cette unit&#xE9; d&#xE9;crit l&#x26;#39;utilisation de reporters fluorescents pour les organismes biologiques, les composants, ou des &#xE9;v&#xE9;nements. Nous d&#xE9;crivons l&#x26;#39;application de l&#x26;#39;imagerie de fluorescence &#xE0; l&#x26;#39;examen des processus infectieux, en particulier sous-cutan&#xE9;e et pulmonaire des infections bact&#xE9;riennes, mais les m&#xEA;mes approches sont applicables &#xE0; pratiquement n&#x26;#39;importe quel itin&#xE9;raire infectieuse. Les strat&#xE9;gies d&#xE9;crites utiliser les infections &#xE0; mycobact&#xE9;ries &#xE0; titre d&#x26;#39;exemple, mais les syst&#xE8;mes &#xE0; peu pr&#xE8;s identiques peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s pour Pseudomonas, Legionella, Salmonella, Escherichia, Borrelia, et aureus, ce qui sugg&#xE8;re que les approches sont g&#xE9;n&#xE9;ralement applicables &#xE0; pratiquement n&#x26;#39;importe quel agent infectieux. Deux strat&#xE9;gies pour l&#x26;#39;imagerie de fluorescence sont d&#xE9;crites: la premi&#xE8;re m&#xE9;thode utilise enzyme rapporteur de fluorescence (REF), et la seconde utilise des prot&#xE9;ines fluorescentes pour l&#x26;#39;imagerie de fluorescence. Les m&#xE9;thodes sont d&#xE9;crites en d&#xE9;tail afin de faciliter l&#x26;#39;application r&#xE9;ussie de ces technologies &#xE9;mergentes &#xE0; presque n&#x26;#39;importe quel syst&#xE8;me exp&#xE9;rimental.

Imagerie du corps entier des maladies infectieuses utilisant la fluorescence

Optische Bildgebung entsteht als ein leistungsf&auml;higes Werkzeug, physiologischen, neurologischen, onkologischen, Zelle biologischen, molekulare Entwicklungsbiologie, immunologischen und infekti&ouml;se Prozesse zu studieren. Diese Ma&szlig;einheit beschreibt die Verwendung von fluoreszierenden Reporter f&uuml;r biologische Organismen, Komponenten oder Veranstaltungen. Wir beschreiben die Anwendung der Fluoreszenz-Bildgebung zur Pr&uuml;fung von infekti&ouml;sen Prozessen, insbesondere subkutan und pulmonale bakterielle Infektionen, aber die gleichen Ans&auml;tze gelten f&uuml;r fast alle infekti&ouml;sen Routen. Die beschriebenen Strategien verwenden mykobakterieller Infektionen als Vorbild, aber fast identische Systemen einsetzbar f&uuml;r Pseudomonas, Legionellen, Salmonellen, Escherichia, Borrelien und Staphylococus, was darauf hindeutet, dass die Ans&auml;tze auf nahezu jeder Erreger im Allgemeinen anwendbar sind. Zwei Strategien f&uuml;r Fluoreszenz-Imaging werden beschrieben: die erste Methode verwendet Reporter Enzym Fluoreszenz (REF), und die zweite fluoreszierende Proteine f&uuml;r Fluoreszenz-Imaging. Methoden sind zur Erleichterung erfolgreiche Anwendung dieser aufstrebenden Technologien an fast jedem experimentellen System detailliert beschrieben.

Ganzk&ouml;rper-Bildgebung Infektionsquelle mit Fluoreszenz.

Imaging ottico sta emergendo come un potente strumento per studiare i processi biologici, molecolare, dello sviluppo, immunologiche e infettive fisiologico, neurologiche, oncologiche, cella. Questa unit&agrave; viene descritto l&#39;utilizzo dei reporter fluorescente per gli organismi biologici, componenti o eventi. Descriviamo l&#39;applicazione dell&#39;imaging di fluorescenza all&#39;esame dei processi infettivi, in particolare sottocutanee e polmonare, infezioni batteriche, ma gli stessi approcci sono applicabili a quasi qualsiasi itinerario infettiva. Le strategie descritte utilizzano infezioni micobatteriche come esempio, ma quasi identici sistemi possono essere usati per Pseudomonas, Legionella, Salmonella, Escherichia, Borrelia e Staphylococus, suggerendo che gli approcci sono generalmente applicabili a quasi qualsiasi agente infettivo. Sono descritti due strategie per l&#39;imaging di fluorescenza: il primo metodo utilizza la fluorescenza di enzima reporter (REF), e il secondo utilizza le proteine fluorescenti per l&#39;imaging di fluorescenza. Metodi sono descritti in dettaglio per facilitare la riuscita applicazione di queste tecnologie emergenti a quasi qualsiasi sistema sperimentale.

Whole-body imaging di infezione tramite fluorescenza.

&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x5B66;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x5B66;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x76AE;&#x4E0B;&#x3001;&#x80BA;&#x7D30;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3067;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x691C;&#x67FB;&#x306B;&#x86CD;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x307B;&#x307C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6226;&#x7565;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F8B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x307B;&#x307C;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E2;&#x30CA;&#x30B9;&#x5C5E;&#x3001;&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9;&#x83CC;&#x3001;&#x30B5;&#x30EB;&#x30E2;&#x30CD;&#x30E9;&#x83CC;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3001;&#x30DC;&#x30EC;&#x30EA;&#x30A2;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9EC4;&#x8272;&#x30D6;&#x30C9;&#x30A6;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x304C;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x307B;&#x307C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x304C;&#x8AAC;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9175;&#x7D20;&#x86CD;&#x5149;&#xFF08;REF&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;2&#x3064;&#x76EE;&#x306F;&#x86CD;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x307B;&#x307C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7CFB;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x65B0;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A73;&#x7D30;&#x306B;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xAD11;&#xD559; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801;, &#xC2E0;&#xACBD;&#xD559;, &#xC885;&#xC591;&#xD559;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;, &#xBD84;&#xC790;, &#xBC1C;&#xB2EC;, &#xBA74;&#xC5ED;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB85C; &#xB5A0;&#xC624;&#xB974;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB2E8;&#xC704; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;, &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;, &#xB610;&#xB294; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD615;&#xAD11; &#xAE30;&#xC790; &#xB4E4;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC10;&#xC5FC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;, &#xD2B9;&#xD788; &#xD53C;&#xD558; &#xD558; &#xACE0; &#xD3D0; &#xC138;&#xADE0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xD615;&#xAD11; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xB7B5; &#xC124;&#xBA85; &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, mycobacterial &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC70;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xB179;, Legionella, &#xC0B4; &#xBAA8; &#xB12C; &#xB77C;, &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131;, Borrelia, &#xBC0F; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC804;&#xC5FC;&#xC131;&#xC774; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC801;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; Staphylococus &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC804;&#xB7B5; &#xC124;&#xBA85;: &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xAE30;&#xC790; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD615;&#xAD11; (REF)&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD615;&#xAD11; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC774;&#xB4E4; &#xC2E0;&#xD765; &#xAE30;&#xC220;&#xC758; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xC801;&#xC6A9;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC790;&#xC138;&#xD558;&#xAC8C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD615;&#xAD11;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC804;&#xC2E0; &#xC601;&#xC0C1;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD3;ptica de im&#xE1;genes se est&#xE1; convirtiendo en una poderosa herramienta para estudiar los procesos fisiol&#xF3;gicos, neurol&#xF3;gicos, c&#xE9;lulas oncol&#xF3;gicas, biol&#xF3;gicas, moleculares, de desarrollo, inmunol&#xF3;gicas e infecciosas. Esta unidad describe el uso de los reporteros fluorescentes para los organismos biol&#xF3;gicos, componentes, o eventos. Se describe la aplicaci&#xF3;n de im&#xE1;genes de fluorescencia para el examen de los procesos infecciosos, en particular por v&#xED;a subcut&#xE1;nea y pulmonares infecciones bacterianas, pero los mismos enfoques son aplicables a casi cualquier ruta infecciosa. Las estrategias descritas utilizar infecciones micobacterianas como un ejemplo, pero los sistemas casi id&#xE9;nticos se puede utilizar para Pseudomonas, Legionella, Salmonella, Escherichia, Borrelia y estafilococos, lo que sugiere que los enfoques son generalmente aplicables a casi cualquier agente infeccioso. Dos estrategias para im&#xE1;genes de fluorescencia se describen: el primer m&#xE9;todo usa enzimas reportero de fluorescencia (REF), y la segunda utiliza prote&#xED;nas fluorescentes para im&#xE1;genes de fluorescencia. Los m&#xE9;todos se describen en detalle para facilitar la aplicaci&#xF3;n con &#xE9;xito de estas nuevas tecnolog&#xED;as a casi cualquier sistema experimental.

De todo el cuerpo de im&#xE1;genes de la infecci&#xF3;n mediante fluorescencia

&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x662F;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x76F4;&#x89C2;&#x663E;&#x793A;&#x548C;&#x76D1;&#x89C6;&#x5728;&#x4F17;&#x591A;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x672C;&#x5355;&#x5143;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x4E24;&#x79CD;&#x7B56;&#x7565;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x6765;&#x7814;&#x7A76;&#x7EC6;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x3002;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x8981;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC; &#xFF1B;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x4F7F;&#x7528;&#x8868;&#x8FBE;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176;&#x548C;&#x540C;&#x65F6;&#x5305;&#x542B;&#x7B3C;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#xFF0C;&beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x6C34;&#x89E3;&#x91CA;&#x653E;&#x5E76;&#x4E0E;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176;&#x751F;&#x6210;&#x5149;&#x53CD;&#x5E94;&#x5E95;&#x7269; &beta;-&#x5185;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7B56;&#x7565;&#xFF0C;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x4FE1;&#x53F7;&#x88AB;&#x6620;&#x50CF;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F0A;&#x7EF4;&#x65AF;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7269;&#x6210;&#x50CF;&#x7CFB;&#x7EDF; &#xFF08;&#x5361;&#x5C3A;&#x751F;&#x547D;&#x79D1;&#x5B66;&#xFF09;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x56FE;&#x50CF;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x53D1;&#x5149;&#x7EC6;&#x83CC;&#xFF0C;&#x91CF;&#x5316;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x786E;&#x5B9A;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x6CE2;&#x957F;&#x3002;&#x53EF;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x603B;&#x6570;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5F3A;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x5B9E;&#x65F6;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x83CC;&#x603B;&#x6570;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x7EC6;&#x8282;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B0;&#x5174;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x5E94;&#x7528;&#x5728;&#x51E0;&#x4E4E;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x3002;

&#x5168;&#x8EAB;&#x611F;&#x67D3;&#x7528;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x7684;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#x3002;

Bioluminescence imaging is a powerful technique to visualize and monitor biological processes in numerous systems. This unit describes two strategies for bioluminescence imaging that can be used to study bacterial infection in mice. One method is to express a luciferase gene in the bacteria; the second method is to use bacteria that express both a luciferase and Î²-lactamase along with a substrate containing caged luciferin, which is released by Î²-lactamase hydrolysis and reacts with luciferase to generate light. For both strategies, bioluminescent signals are imaged using an IVIS live animal imaging system (Caliper Life Sciences). The bioluminescence images are analyzed to localize bioluminescent bacteria, quantify signal, and determine the wavelengths of the signals produced. The correlation of bacterial numbers with signal intensity in vivo can be determined, allowing a quantitative measure of bacterial numbers in mice in real time. Methods are described in detail to facilitate successful application of these emerging technologies in nearly any experimental system.

Whole-body imaging of infection using bioluminescence.

Imagerie par bioluminescence est une technique puissante pour visualiser et contr&#xF4;ler les processus biologiques dans de nombreux syst&#xE8;mes. Cette unit&#xE9; d&#xE9;crit deux strat&#xE9;gies pour l&#x26;#39;imagerie par bioluminescence qui peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s pour &#xE9;tudier l&#x26;#39;infection bact&#xE9;rienne chez la souris. Une m&#xE9;thode consiste &#xE0; exprimer un g&#xE8;ne de la lucif&#xE9;rase dans des bact&#xE9;ries, la seconde m&#xE9;thode consiste &#xE0; utiliser des bact&#xE9;ries qui expriment &#xE0; la fois une lucif&#xE9;rase et &#x3B2;-lactamase avec un substrat contenant cage lucif&#xE9;rine, qui est lib&#xE9;r&#xE9; par &#x3B2;-lactamase hydrolyse et r&#xE9;agit avec la lucif&#xE9;rase pour produire la lumi&#xE8;re. Pour les deux strat&#xE9;gies, les signaux bioluminescents sont imag&#xE9;es par un animal vivant IVIS syst&#xE8;me d&#x26;#39;imagerie (Caliper Life Sciences). Les images de bioluminescence sont analys&#xE9;s afin de localiser les bact&#xE9;ries bioluminescentes, quantifier signal, et de d&#xE9;terminer les longueurs d&#x26;#39;onde des signaux produits. La corr&#xE9;lation entre le nombre de bact&#xE9;ries avec l&#x26;#39;intensit&#xE9; du signal in vivo peut &#xEA;tre d&#xE9;termin&#xE9;e, ce qui permet une mesure quantitative du nombre de bact&#xE9;ries chez des souris en temps r&#xE9;el. Les m&#xE9;thodes sont d&#xE9;crites en d&#xE9;tail afin de faciliter l&#x26;#39;application r&#xE9;ussie de ces technologies &#xE9;mergentes dans presque n&#x26;#39;importe quel syst&#xE8;me exp&#xE9;rimental.

Imagerie du corps entier de l&#x26;#39;infection par bioluminescence

Biolumineszenz ist eine leistungsf&auml;hige Technik zu visualisieren und biologische Prozesse in zahlreiche Systeme zu &uuml;berwachen. Diese Ma&szlig;einheit beschreibt zwei Strategien f&uuml;r die Biolumineszenz-Bildgebung, die verwendet werden k&ouml;nnen, um bakterielle Infektion bei M&auml;usen zu studieren. Eine Methode ist es, eine Luciferase-Gens in den Bakterien abzugeben; die zweite Methode ist, Bakterien zu verwenden, die sowohl eine Luciferase &beta;-Lactamase zusammen mit einem Substrat mit K&auml;fig Luciferin, die durch Hydrolyse &beta;-Lactamase losgelassen wird und reagiert mit Luciferase und, Licht zu generieren. F&uuml;r beide Strategien sind phosphoreszierende Signale &uuml;berhaupt mit einem IVIS Tier bildgebenden Livesystem (Caliper Life Sciences). Die Biolumineszenz-Bilder werden analysiert, um phosphoreszierende Bakterien zu lokalisieren, Signal zu quantifizieren und die Wellenl&auml;ngen der erzeugten Signale zu bestimmen. Die Korrelation der bakteriellen Zahlen mit der Signalintensit&auml;t in-vivo kann ermittelt werden, so dass ein quantitatives Ma&szlig; der bakteriellen Zahlen bei M&auml;usen in Echtzeit. Methoden sind zur Erleichterung erfolgreiche Anwendung dieser aufstrebenden Technologien in fast jedem experimentellen System detailliert beschrieben.

Ganzk&ouml;rper-Bildgebung Infektionsquelle mit Biolumineszenz.

Bioluminescenza imaging &egrave; una tecnica potente per visualizzare e monitorare i processi biologici in numerosi sistemi. Questa unit&agrave; descrive due strategie per l&#39;imaging di bioluminescenza che pu&ograve; essere utilizzato per studiare l&#39;infezione batterica in topi. Un metodo consiste nell&#39;esprimere un gene luciferasi in batteri; il secondo metodo consiste nell&#39;utilizzare batteri che esprimono una luciferasi e il &beta;-lattamasi insieme ad un substrato contenente luciferina in gabbia, che viene rilasciata dall&#39;idrolisi di &beta;-lattamasi e reagisce con luciferase per generare luce. Per entrambe le strategie, segnali bioluminescenti sono stampati usando un IVIS live animali sistema di imaging (pinza Life Sciences). Le immagini di bioluminescenza sono analizzate per localizzare batteri bioluminescenti, segnale di quantificare e determinare le lunghezze d&#39;onda dei segnali di prodotto. Pu&ograve; essere determinata la correlazione dei numeri batterici con intensit&agrave; di segnale in vivo, permettendo una misura quantitativa dei numeri batterici in topi in tempo reale. Metodi sono descritti in dettaglio per facilitare l&#39;applicazione di queste tecnologie emergenti successo in quasi ogni sistema sperimentale.

Whole-body imaging di infezione tramite bioluminescenza.

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Im&#xE1;genes de bioluminiscencia es una poderosa t&#xE9;cnica para visualizar y controlar los procesos biol&#xF3;gicos en numerosos sistemas. Esta unidad se describen dos estrategias para im&#xE1;genes de bioluminiscencia que se pueden utilizar para estudiar la infecci&#xF3;n bacteriana en ratones. Un m&#xE9;todo consiste en expresar un gen de luciferasa en las bacterias, el segundo m&#xE9;todo consiste en utilizar bacterias que expresan tanto una luciferasa y &#x3B2;-lactamasa, junto con un sustrato que contiene enjaulado luciferina, que se libera por &#x3B2;-lactamasa hidr&#xF3;lisis y reacciona con luciferasa para generar la luz. Para ambas estrategias, las se&#xF1;ales bioluminiscentes est&#xE1;n reflejados con un animal vivo IVIS sistema de imagen (Caliper Life Sciences). Las im&#xE1;genes de bioluminiscencia se analizan para localizar bacterias bioluminiscentes, cuantificar la se&#xF1;al, y determinar las longitudes de onda de las se&#xF1;ales producidas. La correlaci&#xF3;n del n&#xFA;mero de bacterias con una intensidad de se&#xF1;al en vivo puede ser determinada, lo que permite una medida cuantitativa del n&#xFA;mero de bacterias en ratones en tiempo real. Los m&#xE9;todos se describen en detalle para facilitar la aplicaci&#xF3;n con &#xE9;xito de estas tecnolog&#xED;as emergentes en casi cualquier sistema experimental.

De todo el cuerpo de im&#xE1;genes de la infecci&#xF3;n por usar la bioluminiscencia

&#x8DDF;&#x8E2A;&#x5B9E;&#x65F6;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x662F;&#x6781;&#x5927;&#x7684;&#x4EF7;&#x503C;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x4E34;&#x5E8A;&#x524D;&#x671F;&#x8C03;&#x67E5;&#x5728;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x6216;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x7EC6;&#x83CC;&#x76EE;&#x524D;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x7C7B;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x62E5;&#x6709;&#x5929;&#x7136;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x5185;&#x80BF;&#x7624;&#x540E;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x7BA1;&#x7406;&#x4F18;&#x5148;&#x589E;&#x957F;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x6210;&#x50CF; &#xFF08;BLI&#xFF09; &#x5230;&#x5FEB;&#x9012;&#x8BB0;&#x8005;&#x5982; lux &#x57FA;&#x56E0;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x83CC;&#x5177;&#x6709;&#x4EE3;&#x8868;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x6709;&#x529B;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;BLI &#x4F20;&#x7EDF;&#x4E0A;&#x7528;&#x4F5C;&#x5728;&#x89E3;&#x5256;&#x5B66;&#x4E0A;&#x627E;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x4E2D;&#x4EA7;&#x751F; 2D &#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; 3D &#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x5149;&#x5B66;&#x5C42;&#x6790;&#x6210;&#x50CF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4ECD;&#x9700;&#x8981;&#x4E0E;&#x5FAE;&#x578B;&#x578B;&#x8BA1;&#x7B97;&#x673A;&#x65AD;&#x5C42;&#x626B;&#x63CF;&#x4EEA; (&mu;CT) &#x89E3;&#x91CA;&#x50CF;&#x89E3;&#x5256;&#x6210;&#x50CF;&#x65B9;&#x5F0F;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x975E;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x5171;&#x751F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; K 12 MG1655 &#x548C; UCC2003&#xFF0C;&#x77ED;&#x53CC;&#x6B67;&#x6746;&#x83CC;&#x6216;&#x6C99;&#x95E8;&#x6C0F;&#x83CC;&#x4F24;&#x5BD2; SL7207 &#x6BCF;&#x4E2A;&#x8868;&#x793A; luxABCDE &#x64CD;&#x7EB5;&#x5B50;&#x662F;&#x9759;&#x8109;&#x6CE8;&#x5C04; (IV) &#x7BA1;&#x7406;&#x5BF9;&#x5C0F;&#x9F20;&#x76AE;&#x4E0B; &#xFF08;s.c&#xFF09; FLuc &#x8868;&#x793A;&#x5F02;&#x79CD;&#x79FB;&#x690D;&#x80BF;&#x7624;&#x3002;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5458;&#x989D;&#x56DB;&#x3001; &#x884C;&#x653F;&#x548C;&#x53D1;&#x5149;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4ECE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6062;&#x590D;&#x7684;&#x6570;&#x5B57;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7EC6;&#x83CC; lux &#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5168;&#x8EAB; lux &#x548C; FLuc&#x3001; &#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x662F; co-localised&#x3002;3D BLI &#x548C; &mu;CT &#x56FE;&#x50CF;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x7FA4;&#x96C6;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x5185;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3002;Ex &#x4F53;&#x5185;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x5F97;&#x5230;&#x652F;&#x6301; 3D &#x5149;&#x5B66;&#x6210;&#x50CF;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x53E3;&#x670D;&#x5171;&#x751F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5728;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053; (GIT) &#x4E2D;&#x7684;&#x6D3B;&#x4F53;&#x6210;&#x50CF;&#x4E5F;&#x5B9E;&#x73B0;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528; 3D BLI&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x9996;&#x6B21;&#x8868;&#x660E;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x56FE;&#x50CF;&#x591A; BLI &#x8BB0;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7EF4;&#x5EA6;&#x4F53;&#x5185;&#x4F7F;&#x7528;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5373;&#x5728;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x4E0A;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;

&#x4F53;&#x5185;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x80BF;&#x7624;&#x9776;&#x5411;&#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x3002;

The ability to track microbes in real time in vivo is of enormous value for preclinical investigations in infectious disease or gene therapy research. Bacteria present an attractive class of vector for cancer therapy, possessing a natural ability to grow preferentially within tumours following systemic administration. Bioluminescent Imaging (BLI) represents a powerful tool for use with bacteria engineered to express reporter genes such as lux. BLI is traditionally used as a 2D modality resulting in images that are limited in their ability to anatomically locate cell populations. Use of 3D diffuse optical tomography can localize the signals but still need to be combined with an anatomical imaging modality like micro-Computed Tomography (Î¼CT) for interpretation.In this study, the non-pathogenic commensal bacteria E.coli K-12 MG1655 and Bifidobacterium breve UCC2003, or Salmonella Typhimurium SL7207 each expressing the luxABCDE operon were intravenously (IV) administered to mice bearing subcutaneous (s.c) FLuc-expressing xenograft tumours. Bacterial lux signal was detected specifically in tumours of mice post IV-administration and bioluminescence correlated with the numbers of bacteria recovered from tissue. Through whole body imaging for both lux and FLuc, bacteria and tumour cells were co-localised. 3D BLI and Î¼CT image analysis revealed a pattern of multiple clusters of bacteria within tumours. Investigation of spatial resolution of 3D optical imaging was supported by ex vivo histological analyses. In vivo imaging of orally-administered commensal bacteria in the gastrointestinal tract (GIT) was also achieved using 3D BLI. This study demonstrates for the first time the potential to simultaneously image multiple BLI reporter genes three dimensionally in vivo using approaches that provide unique information on spatial locations.

High resolution in vivo bioluminescent imaging for the study of bacterial tumour targeting.

La capacit&#xE9; de suivre des microbes en temps r&#xE9;el in vivo est d&#x26;#39;une immense valeur pour les enqu&#xEA;tes pr&#xE9;cliniques dans les maladies infectieuses ou la recherche en th&#xE9;rapie g&#xE9;nique. Les bact&#xE9;ries pr&#xE9;sentes une classe int&#xE9;ressante de vecteur pour la th&#xE9;rapie du cancer, poss&#xE9;dant une capacit&#xE9; naturelle &#xE0; se d&#xE9;velopper pr&#xE9;f&#xE9;rentiellement dans les tumeurs apr&#xE8;s l&#x26;#39;administration syst&#xE9;mique. Bioluminescent Imaging (BLI) repr&#xE9;sente un outil puissant pour une utilisation avec des bact&#xE9;ries modifi&#xE9;es pour exprimer des g&#xE8;nes rapporteurs comme lux. BLI est traditionnellement utilis&#xE9; comme une modalit&#xE9; 2D aboutissant &#xE0; des images qui sont limit&#xE9;s dans leur capacit&#xE9; &#xE0; localiser anatomiquement les populations de cellules. Utilisation de la tomographie optique diffuse 3D permet de localiser les signaux, mais doivent encore &#xEA;tre combin&#xE9;e avec une modalit&#xE9; d&#x26;#39;imagerie anatomique comme la micro-tomographie par ordinateur (&#x3BC;CT) pour interpretation.In cette &#xE9;tude, les bact&#xE9;ries non pathog&#xE8;nes de E. coli commensales K-12 MG1655 et Bifidobacterium breve UCC2003, ou Salmonella Typhimurium SL7207 exprimant chacun l&#x26;#39;op&#xE9;ron luxABCDE ont &#xE9;t&#xE9; par voie intraveineuse (IV) administr&#xE9;e &#xE0; des souris porteuses sous-cutan&#xE9;e (sc) Fluc-tumeurs exprimant de x&#xE9;nogreffe. Bact&#xE9;rienne lux signal n&#x26;#39;a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9; sp&#xE9;cifiquement dans les tumeurs de souris apr&#xE8;s l&#x26;#39;administration IV-et bioluminescence en corr&#xE9;lation avec le nombre de bact&#xE9;ries r&#xE9;cup&#xE9;r&#xE9;es &#xE0; partir de tissu. Gr&#xE2;ce &#xE0; l&#x26;#39;imagerie du corps entier &#xE0; la fois pour lux et Fluc, les bact&#xE9;ries et les cellules tumorales ont &#xE9;t&#xE9; co-localis&#xE9;. 3D BLI et analyse d&#x26;#39;image &#x3BC;CT r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; un motif de plusieurs clusters de bact&#xE9;ries au sein des tumeurs. Enqu&#xEA;te de la r&#xE9;solution spatiale de l&#x26;#39;imagerie optique 3D a &#xE9;t&#xE9; appuy&#xE9;e par des analyses histologiques ex vivo. Dans l&#x26;#39;imagerie in vivo de administr&#xE9;s par voie orale bact&#xE9;ries commensales dans le tractus gastro-intestinal (TGI) a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9; en utilisant 3D BLI. Cette &#xE9;tude d&#xE9;montre pour la premi&#xE8;re fois le potentiel pour imager simultan&#xE9;ment plusieurs g&#xE8;nes rapporteurs BLI en trois dimensions in vivo en utilisant des approches qui fournissent des informations uniques sur l&#x26;#39;emplacement spatial.

Haute in vivo Bioluminescent imagerie pour l&#x26;#39;&#xE9;tude de la tumeur bact&#xE9;rienne de ciblage

Nachverfolgen von Mikroben in Echtzeit in-vivo ist von enormen Wert f&uuml;r pr&auml;klinische Untersuchungen Infektionskrankheit oder gen-Therapie-Forschung. Bakterien stellen eine attraktive Klasse Vector Krebstherapie, besitzen eine nat&uuml;rliche F&auml;higkeit zu wachsen bevorzugt in Tumoren nach systemischen Verabreichung. Phosphoreszierende Imaging (BLI) stellt ein leistungsf&auml;higes Werkzeug f&uuml;r Gebrauch mit Bakterien entwickelt, um schnelles Reporter Gene wie Lux. BLI dient traditionell als eine 2D Modalit&auml;t, dass Bilder, die in ihrer F&auml;higkeit, anatomisch Zelle Bev&ouml;lkerungen lokalisieren begrenzt sind. Verwendung von 3D diffuse optische Tomographie kann die Signale zu lokalisieren aber m&uuml;ssen noch kombinierbar mit einer anatomischen bildgebenden Modalit&auml;t wie Mikro-Computed Tomography (&Mu;ct) Interpretation.In dieser Studie verabreicht die nicht-pathogenen Kommensale Bakterien e. coli K-12 MG1655 und Bifidobacterium Breve UCC2003 oder Salmonella Typhimurium SL7207 jeder Ausdruck der LuxABCDE-Operon waren intraven&ouml;s (IV) auf M&auml;use mit subkutane (s.c) FLuc-Ausdruck Xenograft-Tumoren. Bakterielle Lux-Signal wurde speziell in Tumoren der M&auml;use Post IV-Verwaltung und Biolumineszenz korreliert mit der Anzahl der Bakterien erholte sich von Gewebe erkannt. Ganzk&ouml;rper Imaging f&uuml;r Lux und FLuc, Bakterien und Tumor-Zellen wurden durch co-localised. 3D BLI und &Mu;ct-Bildanalyse ergeben ein Muster von mehreren Clustern von Bakterien in Tumoren. Untersuchung der r&auml;umlichen Aufl&ouml;sung von 3D Bildgebung wurde von ex-Vivo histologische Analysen unterst&uuml;tzt. In-vivo Bildgebung von oral verabreichten Kommensale Bakterien im Magen-Darm-Trakt (GIT) wurde auch mit 3D BLI erreicht. Diese Studie zeigt zum ersten Mal das Potenzial zum Bild gleichzeitig mehrere BLI Reporter Gene drei dimensional in-vivo mit Ans&auml;tzen, die einzigartige r&auml;umliche Standorte informieren.

Hohe Aufl&ouml;sung in Vivo imaging f&uuml;r die Untersuchung der bakteriellen Tumor gezielt biolumineszierende.

La capacit&agrave; di rintracciare i microbi in tempo reale in vivo &egrave; di enorme valore per studi preclinici di malattie infettive o ricerca sulla terapia genica. Batteri presentano un&#39;interessante classe di vettore per la terapia del cancro, che possiedono una naturale capacit&agrave; di crescere preferenzialmente nei tumori dopo somministrazione sistemica. Imaging bioluminescenti (BLI) rappresenta un potente strumento per l&#39;uso con batteri ingegnerizzati per geni reporter espressa come lux. BLI &egrave; tradizionalmente utilizzato come una modalit&agrave; 2D con conseguente immagini che sono limitati nella loro capacit&agrave; di individuare anatomicamente popolazioni cellulari. Uso di 3D Tomografia ottica diffusa pu&ograve; localizzare i segnali ma ancora bisogno di essere combinato con una modalit&agrave; di imaging anatomica come micro-Computed Tomography (&mu;CT) per l&#39;interpretazione.In questo studio, i batteri commensali non patogeni Escherichia coli K-12 MG1655 e Bifidobacterium breve UCC2003 o Salmonella Typhimurium SL7207 ognuno esprimendo l&#39;operone luxABCDE era per via endovenosa (IV) somministrato a topi cuscinetto sottocutanea (SC) tumori xenoinnesto FLuc-esprimere. Signal lux batterica &egrave; stato rilevato in particolare nei tumori di topi post IV-amministrazione e bioluminescenza correlato con il numero di batteri recuperati dal tessuto. Attraverso tutto il corpo erano co-localised imaging per lux e FLuc, batteri e tumore cellule. 3D BLI e analisi delle immagini &mu;CT ha rivelato un modello di cluster multipli di batteri all&#39;interno dei tumori. Indagine di risoluzione spaziale di imaging ottico 3D &egrave; stato supportato da ex vivo analisi istologica. Imaging in vivo di batteri commensali somministrato per via orale, nel tratto gastrointestinale (GIT) &egrave; stato raggiunto anche utilizzando BLI 3D. Questo studio dimostra per la prima volta il potenziale di immagine simultaneamente pi&ugrave; geni di reporter BLI tre dimensionalmente in vivo utilizzando approcci che forniscono informazioni uniche su posizioni spaziali.

Ad alta risoluzione in vivo imaging per lo studio di targeting tumorale batterici bioluminescente.

in vivo&#x3067;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x3067;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3084;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7642;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x83AB;&#x5927;&#x306A;&#x4FA1;&#x5024;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;&#x5168;&#x8EAB;&#x6295;&#x4E0E;&#x5F8C;&#x306B;&#x816B;&#x760D;&#x5185;&#x306B;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x7136;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x764C;&#x6CBB;&#x7642;&#x7528;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3092;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;BLI&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30EB;&#x30AF;&#x30B9;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x7D30;&#x83CC;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; BLI&#x306F;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306B;&#x89E3;&#x5256;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x753B;&#x50CF;&#x304C;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;2D&#x30E2;&#x30C0;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3068;&#x306F;&#x3001;3D&#x62E1;&#x6563;&#x5149;&#x30C8;&#x30E2;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x975E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x5171;&#x751F;&#x7D30;&#x83CC;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;K-12 MG1655&#x3001;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x307E;&#x3060;interpretation.In&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D4;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x65AD;&#x5C64;&#x64AE;&#x5F71;&#x200B;&#x200B;&#xFF08;&#x3BC;CT&#xFF09;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x89E3;&#x5256;&#x5B66;&#x7684;&#x753B;&#x50CF;&#x8A3A;&#x65AD;&#x6CD5;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x30D3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30D9;UCC2003&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30CD;&#x30BA;&#x30DF;&#x30C1;&#x30D5;&#x30B9;&#x83CC;SL7207 luxABCDE&#x30AA;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x304C;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#xFF08;IV&#xFF09;&#x76AE;&#x4E0B;&#xFF08;sc&#xFF09;FLuc&#x767A;&#x73FE;&#x7570;&#x7A2E;&#x79FB;&#x690D;&#x7247;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6295;&#x4E0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x83CC;&#x30EB;&#x30AF;&#x30B9;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x304B;&#x3089;&#x56DE;&#x53CE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x83CC;&#x6570;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;IV&#x6295;&#x4E0E;&#x3068;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x30EB;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;FLuc&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5168;&#x8EAB;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x3084;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 3D BLI&#x3068;&#x3BC;CT&#x753B;&#x50CF;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x5185;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 3D&#x5149;&#x5B66;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306F;&#x3001;ex vivo&#x3067;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x80C3;&#x8178;&#x7BA1;&#xFF08;GIT&#xFF09;&#x306E;&#x7D4C;&#x53E3;&#x6295;&#x4E0E;&#x5171;&#x751F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;in vivo&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x3082;3D BLI&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x753B;&#x50CF;&#x306E;BLI&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;3&#x6B21;&#x5143;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306E;&#x4E00;&#x610F;&#x306E;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;

&#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xCD94;&#xC801; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC774;&#xB098; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804; &#xC784;&#xC0C1; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5C4;&#xCCAD;&#xB09C; &#xAC00;&#xCE58;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC885;&#xC591; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xC790;&#xC5F0;&#xC801;&#xC778; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC720; &#xD558;&#xB294; &#xC554; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD80; &#xC601;&#xC0C1; (BLI) &#xB7ED; &#xC2A4; &#xB4F1; &#xD2B9;&#xAE09; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. BLI&#xB294; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD574;&#xBD80;&#xD559; &#xC801;&#xC778; &#xBAB8;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xB294; 2D &#xD615;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. 3D &#xD655;&#xC0B0; &#xAD11; &#xB2E8;&#xCE35; &#xCD2C;&#xC601;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xACC4;&#xC0B0; &#xB41C; &#xB2E8;&#xCE35; (&mu;CT) &#xD574;&#xC11D; &#xCC98;&#xB7FC; &#xD574; &#xBD80; &#xC601;&#xC0C1; &#xC801;&#xC784;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xD560; &#xD544;&#xC694;&#xAC00;.&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xBE44; &#xACF5;&#xC0DD; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; E.coli K-12 MG1655 &#xBC0F; Bifidobacterium breve UCC2003, &#xB610;&#xB294; &#xAC01; luxABCDE &#xC624; &#xD398;&#xB860; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xC0B4; &#xBAA8; &#xB12C; &#xB77C; &#xD2F0; SL7207 &#xC815; &#xB9E5; (IV) &#xAD00;&#xB9AC; &#xC950; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xD53C;&#xD558; (s.c) &#xB1CC;&#xC885;&#xC591; &#xC885;&#xC591; FLuc &#xD45C;&#xD604;. &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xB7ED; &#xC2A4; &#xC2E0;&#xD638; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C; 4 &#xAD00;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD55C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xC22B;&#xC790;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xAD11;&#xC758; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAB8; &#xC804;&#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB7ED; &#xC2A4;&#xC640; FLuc, &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xBC0F; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; co-localised &#xD588;&#xB2E4;. 3D BLI &#xBC0F; &mu;CT &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D; &#xC885;&#xC591; &#xB0B4; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC758; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. 3D &#xAD11;&#xD559; &#xC601;&#xC0C1;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC758; &#xC870;&#xC0AC; ex vivo &#xC870;&#xC9C1;&#xD559; &#xBD84;&#xC11D; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC704; &#xC7A5;&#xAD00; (GIT)&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xB450;&#xB85C; &#xAD00;&#xB9AC; &#xACF5;&#xC0DD; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; in vivo &#xC601;&#xC0C1; &#xB610;&#xD55C; 3D BLI&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; BLI &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; 3 &#xCC28;&#xC6D0;&#xC801; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xAC04; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

Vivo &#xBC1C;&#xAD11; &#xC138;&#xADE0; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;.

La posibilidad de realizar un seguimiento de los microbios en tiempo real en vivo es de enorme valor para las investigaciones precl&#xED;nicas en enfermedades infecciosas o la investigaci&#xF3;n en terapia g&#xE9;nica. Las bacterias presentes una clase atractiva de vector para la terapia del c&#xE1;ncer, que posee una capacidad natural para crecer preferentemente dentro de los tumores despu&#xE9;s de la administraci&#xF3;n sist&#xE9;mica. Bioluminiscente de im&#xE1;genes (BLI) representa una poderosa herramienta para su uso con bacterias modificadas para expresar genes reporteros como lux. BLI se utiliza tradicionalmente como una modalidad 2D que resulta en im&#xE1;genes que est&#xE1;n limitados en su capacidad para localizar anat&#xF3;micamente las poblaciones de c&#xE9;lulas. El uso de 3D tomograf&#xED;a &#xF3;ptica difusa puede localizar las se&#xF1;ales, pero todav&#xED;a tienen que ser combinado con una t&#xE9;cnica de imagen anat&#xF3;mica, como micro-tomograf&#xED;a axial computerizada (&#x3BC;CT) para interpretation.In este estudio, las bacterias no pat&#xF3;genas de E. coli comensales K-12 y MG1655 Bifidobacterium breve UCC2003, o Salmonella typhimurium SL7207 cada uno expresa el oper&#xF3;n luxABCDE fueron por v&#xED;a intravenosa (IV), administrado a ratones con subcut&#xE1;nea (sc) fluctua-expresando xenoinjertos de tumores. Se&#xF1;al bacteriana lux se detect&#xF3; espec&#xED;ficamente en los tumores de los ratones despu&#xE9;s de la administraci&#xF3;n IV-y bioluminiscencia correlacionada con el n&#xFA;mero de bacterias recuperadas a partir de tejido. A trav&#xE9;s de im&#xE1;genes de todo el cuerpo, tanto para lux y Fluc, las bacterias y las c&#xE9;lulas tumorales fueron co-localizadas. BLI 3D y el an&#xE1;lisis de la imagen &#x3BC;CT revel&#xF3; un patr&#xF3;n de m&#xFA;ltiples racimos de bacterias dentro de los tumores. Investigaci&#xF3;n de la resoluci&#xF3;n espacial de las im&#xE1;genes &#xF3;pticas 3D fue apoyado por ex an&#xE1;lisis histol&#xF3;gicos in vivo. En im&#xE1;genes in vivo de la administrada por v&#xED;a oral bacterias comensales en el tracto gastrointestinal (TGI) se logr&#xF3; tambi&#xE9;n el uso de 3D BLI. Este estudio demuestra por primera vez el potencial de imagen de forma simult&#xE1;nea m&#xFA;ltiples genes reporteros BLI tridimensional in vivo utilizando m&#xE9;todos que proporcionan una informaci&#xF3;n &#xFA;nica sobre la ubicaci&#xF3;n espacial.

De alta resoluci&#xF3;n en vivo bioluminiscente de im&#xE1;genes para el Estudio de Tumores bacteriana Orientaci&#xF3;n

&#x67B8;&#x6A7C;&#x9178; rodentium&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4ED6;&#x56FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x9644;&#x52A0;&#x7684;&#x62B9;&#x53BB; (A/E) &#x75C5;&#x53D8;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x80A0;&#x9ECF;&#x819C;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x7ED3;&#x80A0;&#x589E;&#x751F;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5982;&#x679C;&#x968F;&#x4EE5;&#x77ED;&#x97F3;&#x7B26;&#x53CC;&#x6B67;&#x6746;&#x83CC; UCC2003 &#x7684;&#x9884;&#x9632;&#x6027;&#x6CBB;&#x7597;&#x53EF;&#x6539;&#x5584; C.rodentium &#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x516D;&#x5468;&#x8001;&#x767D;&#x5316; C57BL/6 &#x5C0F;&#x9F20;&#x88AB;&#x9884;&#x5904;&#x7406; 3 &#x5929;&#x5E26; B.&#x77ED;&#x97F3;&#x7B26;&#xFF0C;&#x8D28;&#x7591;&#x4E0E;&#x53D1;&#x5149; C.rodentium &#x548C;&#x7BA1;&#x7406; B.&#x77ED;&#x97F3;&#x7B26;&#x6216; PBS C 8 &#x5929;&#x540E;&#x611F;&#x67D3; &#xFF1B;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC4;&#x5C0F;&#x9F20;&#x662F;&#x8981;&#x4E48;&#x7BA1;&#x7406; B.&#x4EE5;&#x77ED;&#x97F3;&#x7B26;&#x548C;&#x6A21;&#x62DF; PBS&#xFF0C;&#x611F;&#x67D3;&#x6216;&#x88AB;&#x6A21;&#x62DF;&#x6CBB;&#x7597; PBS C &#x548C;&#x6A21;&#x62DF;&#x611F;&#x67D3; PBS&#x3002;C.rodentium &#x6B96;&#x6C11;&#x76D1;&#x6D4B;&#x4ECE;&#x7CAA;&#x4FBF;&#x7EC6;&#x83CC;&#x679A;&#x4E3E;&#x548C; 2D &#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x6CD5; &#xFF08;BLI&#xFF09; &#x548C;&#x590D;&#x5408; 3D &#x6F2B;&#x5C04;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x65AD;&#x5C42;&#x626B;&#x63CF;&#x6210;&#x50CF; (DLIT &#x5C0F;&#xFF09; &#x5C0F;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;&#x7B2C; 8 &#x5929;&#x540E;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x5728;&#x88AB;&#x5220;&#x9664;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;&#x53CA; A/E &#x75C5;&#x53D8;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x7535;&#x955C;&#x5730;&#x7A74;&#x589E;&#x751F;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x7684;&#x5149;&#x955C;&#x3001; &#x7EC6;&#x83CC;&#x6B96;&#x6C11;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5192;&#x53F7;&#x3002;C.rodentium &#x6B96;&#x6C11;&#x6216; A/E &#x75C5;&#x53D8;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x59A8;&#x788D; B.&#x77ED;&#x97F3;&#x7B26;&#x7684;&#x9884;&#x9632;&#x6027;&#x7BA1;&#x7406;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5F85;&#x9047;&#x5E76;&#x6539;&#x53D8; C.rodentium &#x5206;&#x5E03;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x5185;&#x7684;&#xFF0C;&#x5927;&#x5927;&#x964D;&#x4F4E;&#x7ED3;&#x80A0;&#x5730;&#x7A74;&#x589E;&#x751F;&#x5728;&#x7EC6;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x9AD8;&#x5CF0;&#x671F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;B.&#x77ED;&#x97F3;&#x7B26;&#x7ADE;&#x4E89;&#x529B;&#x4E0D;&#x80FD;&#x6392;&#x9664; C.rodentium&#xFF0C;&#x4F46;&#x51CF;&#x5C11;&#x75C5;&#x539F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7ED3;&#x80A0;&#x708E;&#x75C7;&#x3002;

&#x968F;&#x4EE5;&#x77ED;&#x97F3;&#x7B26;&#x53CC;&#x6B67;&#x6746;&#x83CC; UCC2003 &#x9884;&#x5904;&#x7406;&#x8C03;&#x8282;&#x67B8;&#x6A7C;&#x9178; rodentium &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7ED3;&#x80A0;&#x708E;&#x75C7;&#x548C;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x3002;

Citrobacter rodentium, which colonizes the gut mucosa via formation of attaching and effacing (A/E) lesions, causes transmissible colonic hyperplasia. The aim of this study was to evaluate if prophylactic treatment with Bifidobacterium breve UCC2003 can improve the outcome of C. rodentium infection. Six week old Albino C57BL/6 mice were pre-treated for 3 days with B. breve, challenged with bioluminescent C. rodentium and administered B. breve or PBS-C for 8 days post infection; control mice were either administered B. breve and mock infected with PBS, or were mock treated with PBS-C and mock infected with PBS. C. rodentium colonisation was monitored by bacterial enumeration from faeces and by a combination of both 2D bioluminescence imaging (BLI) and composite 3D diffuse light imaging tomography with microCT imaging (DLIT-microCT). At day 8 post infection, colons were removed and assessed for crypt hyperplasia, histology by light microscopy, bacterial colonisation by immunofluorescence, and A/E lesion formation by electron microscopy. Prophylactic administration of B. breve did not prevent C. rodentium colonisation or A/E lesion formation. However, this treatment did alter C. rodentium distribution within the large intestine and significantly reduced colonic crypt hyperplasia at the peak of bacterial infection. These results show that B. breve could not competitively exclude C. rodentium, but reduced pathogen-induced colonic inflammation.

Pre-treatment with Bifidobacterium breve UCC2003 modulates Citrobacter rodentium-induced colonic inflammation and organ specificity of infection.

Citrobacter rodentium, qui colonisent la muqueuse de l&#39;intestin via la formation de fixation et effa&ccedil;ant des l&eacute;sions (A/E), provoque une hyperplasie colique transmissible. Le but de cette &eacute;tude &eacute;tait d&#39;&eacute;valuer si le traitement prophylactique par Bifidobacterium breve UCC2003 peut am&eacute;liorer l&#39;issue de l&#39;infection par c. rodentium. Six semaines vieille souris albinos C57BL/6 ont &eacute;t&eacute; pr&eacute;-trait&eacute;es les 3 jours avec b. breve, a contest&eacute; avec bioluminescente c. rodentium appliqu&eacute;e b. breve ou PBS-C pour 8 jours apr&egrave;s l&#39;infection ; souris t&eacute;moins &eacute;taient soit administr&eacute; b. breve et mock infect&eacute; par PBS, ou ont &eacute;t&eacute; simul&eacute;s trait&eacute;s avec PBS-C et simul&eacute;s infect&eacute;s avec du PBS. C. rodentium colonisation a &eacute;t&eacute; suivie par l&#39;&eacute;num&eacute;ration bact&eacute;rienne de f&egrave;ces et par une combinaison de la bioluminescence 2D imagerie (BLI) et composite lumi&egrave;re diffuse 3D imagerie tomographie avec gamme d&#39;imagerie (DLIT-microCT). &Agrave; apr&egrave;s l&#39;infection jour 8, deux-points ont &eacute;t&eacute; enlev&eacute;s et &eacute;valu&eacute;s pour hyperplasie des cryptes, histologie en microscopie optique, la colonisation bact&eacute;rienne par immunofluorescence et la formation de l&eacute;sions A/E en microscopie &eacute;lectronique. L&#39;administration prophylactique de b. breve n&#39;a pas emp&ecirc;ch&eacute; la colonisation c. rodentium ou la formation de l&eacute;sions A/E. Cependant, ce traitement alt&egrave;re la distribution c. rodentium dans le gros intestin et r&eacute;duit significativement l&#39;hyperplasie de la crypte du c&ocirc;lon &agrave; l&#39;apog&eacute;e de l&#39;infection bact&eacute;rienne. Ces r&eacute;sultats montrent que b. breve pourrait exclure pas comp&eacute;titif c. rodentium, mais r&eacute;duit l&#39;inflammation colique induite par le pathog&egrave;ne.

Pr&eacute;traitement avec Bifidobacterium breve UCC2003 module Citrobacter rodentium induite par l&#39;inflammation du c&ocirc;lon et la sp&eacute;cificit&eacute; d&#39;organe de l&#39;infection.

Citrobacter Rodentium, die die Darm-Schleimhaut durch Bildung von anf&uuml;gen und auszul&ouml;schen (A/E) L&auml;sionen kolonisiert, bewirkt, dass transmissible Kolon Hyperplasie. Das Ziel dieser Studie war es zu ermitteln, ob eine prophylaktische Behandlung mit Bifidobacterium Breve UCC2003 das Ergebnis der C. Rodentium Infektion verbessern kann. Sechs Wochen alte Albino C57BL/6 M&auml;usen vorbehandelt f&uuml;r die waren 3 Tage mit B. brevis, herausgefordert mit phosphoreszierende C. Rodentium B. brevis oder PBS-C f&uuml;r 8 Tage Post Infektion verabreicht; Kontrolle M&auml;use waren entweder verabreicht B. brevis und Mock mit PBS, infiziert oder mock mit PBS-C behandelt und mock mit PBS infiziert. C. Rodentium Kolonisation wurde durch bakterielle Enumeration von Kot und durch eine Kombination von 2D Biolumineszenz imaging (BLI) und zusammengesetzte 3D diffuses Licht imaging-Tomographie mit MicroCT imaging (DLIT-MicroCT) &uuml;berwacht. Am 8. Tag Post-Infektion wurden Doppelpunkte entfernt und Krypta Hyperplasie, Histologie lichtmikroskopisch, bakterielle Besiedelung von Immunfluoreszenz und A/E-L&auml;sion Bildung durch Elektronenmikroskopie bewertet. Prophylaktische Verwaltung von B. brevis verhinderte nicht C. Rodentium Besiedelung oder A/E-L&auml;sion Bildung. Jedoch diese Behandlung C. Rodentium Verteilung im Dickdarm zu &auml;ndern und deutlich reduziert Kolon Krypta Hyperplasie auf dem H&ouml;hepunkt der bakteriellen Infektion. Diese Ergebnisse zeigen, dass B. brevis konnte nicht konkurrierend C. Rodentium ausschlie&szlig;en, aber Pathogen-induzierte Kolon Entz&uuml;ndung verringert.

Vorbehandlung mit Bifidobacterium Breve UCC2003 moduliert Citrobacter Rodentium induziert Kolon Entz&uuml;ndung und Organspezifit&auml;t der Infektion.

Citrobacter rodentium, che colonizza la mucosa intestinale mediante la formazione di associare e cancellare le lesioni (A/E), cause trasmissibile iperplasia del colon. Lo scopo di questo studio era di valutare se il trattamento profilattico con Bifidobacterium breve UCC2003 pu&ograve; migliorare l&#39;esito dell&#39;infezione da c. rodentium. Settimana sei vecchio Albino C57BL/6 topi sono stati pretrattati per 3 giorni con b. breve, sfid&ograve; con bioluminescenti rodentium c. e somministrato b. breve o PBS-C per 8 giorni post infezione; topi di controllo erano sia amministrato b. breve e derisione infettati con PBS, o erano finta trattati con PBS-C e finta infettati con PBS. C. rodentium colonizzazione &egrave; stata monitorata dall&#39;enumerazione batterica dalle feci e da una combinazione di bioluminescenza 2D imaging (BLI) e composita luce diffusa 3D imaging tomografia con magnetica imaging (DLIT-magnetica). All&#39;infezione post giorno 8, i due punti furono rimossi e valutati per iperplasia cripta, istologia da microscopia chiara, colonizzazione batterica di immunofluorescenza e formazione di lesione A E da microscopia elettronica. Somministrazione profilattica di b. breve non ha impedito rodentium c. colonizzazione o lesione A E formazione. Tuttavia, questo trattamento ha fatto alterare rodentium c. distribuzione all&#39;interno dell&#39;intestino crasso e significativamente ridotto iperplasia cripta del colon al picco di infezione batterica. Questi risultati mostrano che b. breve competitivo potrebbe non escludere rodentium c., ma riduce l&#39;infiammazione del colon indotta da agenti patogeni.

Pretrattamento con Bifidobacterium breve UCC2003 modula Citrobacter rodentium indotta infiammazione del colon e la specificit&agrave; di organo di infezione.

&#x8178;&#x7C98;&#x819C;&#x75C5;&#x5909; &#xFF08;A/E&#xFF09; &#x8178;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5B9A;&#x7740;&#x3001;&#x30B7;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5C5E; rodentium &#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x5927;&#x8178;&#x904E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E88;&#x9632;&#x7684;&#x6CBB;&#x7642;&#x30D3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BA;&#x30B9;&#x83CC;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30F4;&#x30A7; UCC2003 &#x4ED8;&#x304D; C. rodentium &#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x4E88;&#x5F8C;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;.6 &#x9031;&#x53E4;&#x3044;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D3;&#x30CE; c57bl/6 &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149; c. rodentium B. &#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30F4;&#x30A7;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E; 3 &#x65E5;&#x9593;&#x306B;&#x6311;&#x6226;&#x3001;B. &#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30F4;&#x30A7;&#x307E;&#x305F;&#x306F; PBS C 8 &#x65E5;&#x9593;&#x306E;&#x30DD;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x6295;&#x4E0E;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x3060;&#x3063;&#x305F;;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B; B. &#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30F4;&#x30A7;&#x3068; PBS &#x3067;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x30E2;&#x30C3;&#x30AF;&#x6295;&#x4E0E;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3044;&#x305F;&#x6A21;&#x64EC; PBS-C &#x3068;&#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x6A21;&#x64EC; PBS &#x3067;&#x611F;&#x67D3;.C. rodentium &#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x306F;&#x3001;2 D &#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0; BL1) &#x3068;&#x8907;&#x5408;&#x306E; 3 D &#x62E1;&#x6563;&#x5149;&#x30C8;&#x30E2;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3; &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#xFF08;DLIT-&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;) &#x3092;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x7CDE;&#x4FBF;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x5217;&#x6319;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x65E5; 8 &#x30DD;&#x30B9;&#x30C8;&#x611F;&#x67D3;&#x3067;&#x30B3;&#x30ED;&#x30F3;&#x3044;&#x305F;&#x524A;&#x9664;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x904E;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x6297;&#x4F53;&#x6CD5;, &#x304A;&#x3088;&#x3073; A/E &#x306E;&#x75C5;&#x6591;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3002;B. &#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30F4;&#x30A7;&#x306E;&#x4E88;&#x9632;&#x7684;&#x6295;&#x4E0E;&#x306F;&#x3001;C. rodentium &#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F; A/E &#x306E;&#x75C5;&#x6591;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4E88;&#x9632;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x5927;&#x8178;&#x5185; C. rodentium &#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x904E;&#x5F62;&#x6210;&#x7D30;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x6642;&#x306B;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x305D;&#x306E; B. &#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30F4;&#x30A7;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x3042;&#x308B; C. rodentium &#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x8A98;&#x767A;&#x5927;&#x8178;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5C5E; rodentium &#x8A98;&#x767A;&#x5927;&#x8178;&#x708E;&#x75C7;&#x3084;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306E;&#x30D3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BA;&#x30B9;&#x83CC;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30F4;&#x30A7; UCC2003 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x3092;&#x5909;&#x8ABF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5F0;&#xACB0; &#xBC0F; effacing (A/E) &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xCC3D; &#xC790; &#xC810; &#xB9C9; colonizes Citrobacter rodentium &#xC804;&#xC1A1; &#xAC00;&#xB2A5; &#xC800; &#xC2B9; &#xC99D;&#xC2DD; &#xD558;&#xBA74;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; Bifidobacterium breve ucc2003&#xC640; &#xC608;&#xBC29; &#xCE58;&#xB8CC; C. rodentium &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;&#xBA74; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. 6 &#xC8FC; B. breve&#xC640; 3 &#xC77C; &#xBD80; C. rodentium&#xC640; &#xB3C4;&#xC804; &#xBC0F; B. breve &#xB610;&#xB294; PBS C 8 &#xC77C; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C; &#xAC10;&#xC5FC;;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; &#xC54C; &#xBE44; &#xB178; C57BL/6 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD588;&#xB2E4; pre-treated &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD558;&#xB098; B. breve &#xBC0F; &#xBAA8;&#xC758; PBS, &#xAC10;&#xC5FC; &#xAD00;&#xB9AC; &#xB610;&#xB294; &#xBAA8;&#xC758; PBS-C&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xBAA8;&#xC758; PBS&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xD588;&#xB2E4;. C. rodentium &#xC2DD;&#xBBFC; &#xB300;&#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC5F4;&#xAC70;&#xD615; &#xBC0F; 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xAD11; (BLI) &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xBC0F; &#xBCF5;&#xD569; 3D &#xD655;&#xC0B0; &#xBE5B; microCT &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; (DLIT-microCT)&#xC640; &#xB2E8;&#xCE35; &#xCD2C;&#xC601; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD558;&#xB8E8; 8 &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xCF5C;&#xB860; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; A/E &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; &#xD1A0; &#xAD74; &#xC99D;&#xC2DD;, &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC9C1;&#xD559;, &#xC138;&#xADE0; &#xC2DD;&#xBBFC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. B. breve&#xC758; &#xC608;&#xBC29; &#xAD00;&#xB9AC;&#xB294; C. rodentium &#xC2DD;&#xBBFC; &#xB610;&#xB294; A/E &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300; &#xC7A5; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; C. rodentium &#xBC30;&#xD3EC; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD588; &#xACE0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC808;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC800; &#xC2B9; &#xD1A0; &#xAD74; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; B. breve &#xACBD;&#xC7C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; C. rodentium &#xC81C;&#xC678; &#xD558;&#xB294; &#xAC83; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC800; &#xC2B9; &#xC5FC;&#xC99D; &#xAC10;&#xC18C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC804;&#xCC98;&#xB9AC; Bifidobacterium breve ucc2003&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBCC0;&#xC870; Citrobacter rodentium &#xC720;&#xB3C4; &#xC800; &#xC2B9; &#xC5FC;&#xC99D; &#xBC0F; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;.

Citrobacter rodentium, que coloniza la mucosa del intestino mediante formaci&oacute;n y deformando las lesiones (A/E), causas transmisible hiperplasia col&oacute;nica. El objetivo de este estudio fue evaluar si el tratamiento profil&aacute;ctico con Bifidobacterium breve UCC2003 puede mejorar el resultado de la infecci&oacute;n por C. rodentium. Semana seis ratones C57BL/6 de Albino del viejo eran pretratadas para 3 d&iacute;as con B. breve, desafi&oacute; con bioluminiscente C. rodentium y administr&oacute; B. breve o PBS-C durante 8 d&iacute;as post infecci&oacute;n; control de ratones fueron ya sea administrado B. breve y mock infectados con PBS, o fueron tratados simulado con PBS-C y simulado infectados con PBS. C. rodentium colonizaci&oacute;n fue supervisada por enumeraci&oacute;n bacteriana de las heces y por una combinaci&oacute;n de bioluminiscencia 2D (BLI) la proyecci&oacute;n de imagen y compuesta 3D luz difusa imagen tomograf&iacute;a con microCT imaging (DLIT-microCT). En infecci&oacute;n de post del d&iacute;a 8, dos puntos fueron quitados y evalu&oacute; por hiperplasia de la cripta, histolog&iacute;a por microscopia ligera, colonizaci&oacute;n bacteriana por inmunofluorescencia y formaci&oacute;n de la lesi&oacute;n A/E por microscopia electr&oacute;nica. La administraci&oacute;n profil&aacute;ctica de B. breve no impidi&oacute; C. rodentium colonizaci&oacute;n y formaci&oacute;n de la lesi&oacute;n A/E. Sin embargo, este tratamiento alter&oacute; la distribuci&oacute;n de C. rodentium dentro del intestino y redujo significativamente la hiperplasia col&oacute;nica de la cripta en el pico de infecci&oacute;n bacteriana. Estos resultados demuestran breve B. no pod&iacute;a excluir competitivamente C. rodentium, pero redujo la inflamaci&oacute;n col&oacute;nica inducida por el pat&oacute;geno.

Tratamiento previo con Bifidobacterium breve UCC2003 modula Citrobacter rodentium inducida por la inflamaci&oacute;n col&oacute;nica y especificidad de &oacute;rgano de la infecci&oacute;n.

Article	Year
Expression of firefly luciferase in Candida albicans and its use in the selection of stable transformants. Microbial pathogenesis\| PubMed ID: 16427765	2006
Whole-body imaging of infection using fluorescence. Current protocols in microbiology\| PubMed ID: 21538304	2011
Whole-body imaging of infection using bioluminescence. Current protocols in microbiology\| PubMed ID: 21538305	2011
High resolution in vivo bioluminescent imaging for the study of bacterial tumour targeting. PloS one\| PubMed ID: 22295120	2012
Pre-treatment with Bifidobacterium breve UCC2003 modulates Citrobacter rodentium-induced colonic inflammation and organ specificity of infection. Microbiology (Reading, England)\| PubMed ID: 22902730	2012

Ali R. Akin

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