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Preparation of Cell-lines for Conditional Knockdown of Gene Expression and Measurement of the Knockdown Effects on E4orf4-Induced Cell Death

Functional inactivation of gene expression in mammalian cells is crucial for the study of the contribution of a protein of interest to various ...

Technion - Israel Institute of Technology

E4 &#x5F00;&#x653E;&#x8BFB;&#x6846; 4 (E4orf4) &#x86CB;&#x767D;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x89C4;&#x8303;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x5C55;&#x548C;&#x5355;&#x72EC;&#x8868;&#x793A;&#x65F6;&#x5B83;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x975E;&#x7ECF;&#x5178;&#x8F6C;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; E4orf4 &#x5C06;&#x4E0E; ATP &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x91CD;&#x5851;&#x56E0;&#x5B50;&#x7531;&#x975E;&#x8517;&#x7CD6;&#x53D1;&#x9175;-2 h (SNF2h) ATPase &#x548C; Acf1 &#x8C03;&#x8282;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684; ACF &#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;E4orf4 &#x4E3A;&#x76EE;&#x6807;&#x86CB;&#x767D;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; 2A (PP2A&#xFF09; &#x8FD9;&#x590D;&#x6742;&#x548C;&#x6709;&#x5173;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x3002;SNF2h &#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x6897;&#x963B;&#x6291;&#x5236; E4orf4 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x800C;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F; Acf1 &#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x589E;&#x5F3A; E4orf4 &#x81F4;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x9175;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; Acf1 &#x8868;&#x8FBE;&#x6291;&#x5236; E4orf4 &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x65E9;&#x671F;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5728;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x2477; Acf1 &#x540C;&#x6E90;&#xFF0C;WSTF&#xFF0C;&#x6291;&#x5236; E4orf4 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; E4orf4 PP2A &#x590D;&#x6742;&#x6291;&#x5236; ACF &#x548C;&#x4FBF;&#x5229;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x542B;&#x6709; SNF2h &#x7684;&#x914D;&#x5408;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982; WSTF SNF2h &#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x91CD;&#x6784;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6709;&#x6240;&#x52A0;&#x5F3A;&#x3002;&#x9020;&#x6210;&#x4EA4;&#x6362;&#x673A;&#x5728;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x91CD;&#x5851;&#x786E;&#x5B9A;&#x751F;&#x547D;&#x4E0E;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x51B3;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x95F4;&#x8D21;&#x732E; E4orf4 &#x51FD;&#x6570;&#x3002;

E4orf4 &#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x76EE;&#x6807; PP2A &#x5230;&#x6D3B;&#x6027;&#x78B3;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x91CD;&#x5851;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x901A;&#x8FC7; SNF2h &#x5305;&#x542B;&#x7269;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

The adenovirus E4 open-reading-frame 4 (E4orf4) protein regulates the progression of viral infection and when expressed individually it induces non-classical apoptosis in transformed cells. Here we show that E4orf4 associates with the ATP-dependent chromatin-remodeling factor ACF that consists of a sucrose non fermenting-2h (SNF2h) ATPase and an Acf1 regulatory subunit. Furthermore, E4orf4 targets protein phosphatase 2A (PP2A) to this complex and to chromatin. Obstruction of SNF2h activity inhibits E4orf4-induced cell death, whereas knockdown of Acf1 results in enhanced E4orf4-induced toxicity in both mammalian and yeast cells, and Acf1 overexpression inhibits E4orf4's ability to downregulate early adenovirus gene expression in the context of viral infection. Knockdown of the Acf1 homolog, WSTF, inhibits E4orf4-induced cell death. Based on these results we suggest that the E4orf4-PP2A complex inhibits ACF and facilitates enhanced chromatin-remodeling activities of other SNF2h-containing complexes, such as WSTF-SNF2h. The resulting switch in chromatin remodeling determines life versus death decisions and contributes to E4orf4 functions during adenovirus infection.

The adenovirus E4orf4 protein targets PP2A to the ACF chromatin-remodeling factor and induces cell death through regulation of SNF2h-containing complexes.

L&#39;ad&eacute;novirus prot&eacute;ine de E4 treillis-lecture 4 (E4orf4) r&eacute;glemente la progression de l&#39;infection virale et lorsqu&#39;elle est exprim&eacute;e individuellement il induit l&#39;apoptose non classiques dans les cellules transform&eacute;es. Nous montrons ici que E4orf4 associe le facteur d&eacute;pendant de l&#39;ATP de remodelage de la chromatine ACF qui se compose d&#39;un saccharose non ATPase de fermentation - 2 h (SNF2h) et une sous-unit&eacute; r&eacute;gulatrice Acf1. En outre, E4orf4 cible prot&eacute;ine phosphatase 2 a (PP2A) de ce complexe et &agrave; la chromatine. Entrave &agrave; l&#39;activit&eacute; SNF2h inhibe la mort cellulaire induite par le E4orf4, alors que knockdown de Acf1 r&eacute;sultats dans accrue induite par le E4orf4 toxicit&eacute; chez les mammif&egrave;res et les cellules de levure, et Acf1 surexpression emp&ecirc;che de E4orf4 de downregulate d&eacute;but ad&eacute;novirus expression g&eacute;nique dans le contexte de l&#39;infection virale. Pr&eacute;cipitation de l&#39;homologue de Acf1, WSTF, inhibe la mort cellulaire induite par le E4orf4. Selon ces r&eacute;sultats, nous sugg&eacute;rons que le complexe E4orf4-PP2A inhibe l&#39;ACF et facilite les activit&eacute;s de remodelage de la chromatine am&eacute;lior&eacute;es d&#39;autres complexes contenant de le SNF2h, comme WSTF-SNF2h. Le commutateur qui en r&eacute;sulte dans le remodelage de la chromatine d&eacute;termine la vie contre la mort et contribue aux fonctions E4orf4 au cours de l&#39;infection &agrave; ad&eacute;novirus.

La prot&eacute;ine ad&eacute;novirus E4orf4 cible PP2A au facteur de remodelage de la chromatine ACF et provoque la mort cellulaire par le biais de r&eacute;glementation des complexes contenant SNF2h.

Die Adenoviren E4 offene Leseraster 4 (E4orf4) Protein reguliert das Fortschreiten der Virusinfektion und individuell ausgedr&uuml;ckt es nicht-klassischen Apoptose in transformierten Zellen induziert. Hier zeigen wir, dass der ATP-abh&auml;ngigen Chromatin-Umbau Faktor ACF E4orf4 zuordnet, der eine Saccharose nicht g&auml;renden - 2H (SNF2h)-ATPase und ein Acf1 regulatorische Untereinheit besteht. Dar&uuml;ber hinaus zielt E4orf4 Protein Phosphatase 2A (PP2A) an diesem komplexen und Chromatin. Behinderung der SNF2h Aktivit&auml;t hemmt E4orf4-induced Zellentod, w&auml;hrend Niederschlag von Acf1 f&uuml;hrt E4orf4-induzierter Toxizit&auml;t im S&auml;ugetier- und Hefezellen verst&auml;rkt und Acf1 &Uuml;berexpression E4orf4s F&auml;higkeit, gulieren fr&uuml;hen Adenovirus Genexpression im Rahmen einer Virusinfektion hemmt. Niederschlag von Acf1 Homolog, WSTF, hemmt E4orf4-induced Zellentod. Basierend auf diesen Ergebnissen empfehlen wir der E4orf4-PP2A-Komplex hemmt ACF und erleichtert die erh&ouml;hte Aktivit&auml;ten im Chromatin-Umbau von anderen SNF2h-haltigen komplexen, wie WSTF-SNF2h. Der resultierende Schalter in Chromatin Umbau bestimmt Leben versus Tod Entscheidungen und tr&auml;gt zur E4orf4 Funktionen w&auml;hrend der Adenovirus-Infektion.

Das E4orf4 Adenovirus-Protein zielt auf PP2A zum ACF-Chromatin-Umbau-Faktor und induziert Zelltod durch Regulierung der SNF2h-haltigen komplexe.

Adenovirus proteina di E4 open-lettura-frame 4 (E4orf4) regola la progressione dell&#39;infezione virale e quando espressa individualmente induce classico apoptosis in cellule trasformate. Qui vi mostriamo che E4orf4 associates con il trifosfato di Adenosina-dipendente-rimodellamento della cromatina fattore ACF che consiste di un saccarosio non fermentazione-2 h (SNF2h) ATPasi e una subunit&agrave; di regolamentazione Acf1. Inoltre, E4orf4 gli obiettivi della proteina fosfatasi 2A (PP2A) a questo complesso e a cromatina. Ostruzione dell&#39;attivit&agrave; SNF2h inibisce la morte cellulare indotta da E4orf4, mentre atterramento di Acf1 risultati in enhanced E4orf4-indotto tossicit&agrave; nei mammiferi sia le cellule di lievito, e Acf1 sovraespressione inibisce la capacit&agrave; di E4orf4 di sottoregola precoce dell&#39;adenovirus espressione genica nel contesto dell&#39;infezione virale. Atterramento dell&#39;omologo Acf1, FSMT, inibisce la morte cellulare indotta da E4orf4. Sulla base di questi risultati consigliamo il complesso E4orf4-PP2A inibisce ACF e facilita l&#39;attivit&agrave; di rimodellamento della cromatina avanzata di altri complessi contenenti SNF2h, come SNF2h FSMT. L&#39;interruttore risultante nel rimodellamento della cromatina determina la vita contro le decisioni di morte e contribuisce alla E4orf4 funzioni durante l&#39;infezione da adenovirus.

La proteina dell&#39;adenovirus E4orf4 PP2A si rivolge al fattore di rimodellamento della cromatina ACF e induce la morte cellulare attraverso il regolamento di complessi contenenti SNF2h.

E4 &#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x8AAD;&#x66F8;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0; 4 (E4orf4) &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3066;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9; &#x30DB;&#x30FC;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x975E;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F; E4orf4 &#x306E;&#x4EF2;&#x9593;&#x3068; ATP &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x518D;&#x69CB;&#x7BC9;&#x306F;&#x30B7;&#x30E7;&#x7CD6;&#x306E;&#x975E;&#x767A;&#x9175; 2 h (SNF2h) &#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059; ACF &#x8981;&#x56E0;&#x304C;&#x793A;&#x3059; ATPase &#x3068; Acf1 &#x8ABF;&#x7BC0;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC; 2 a &#x306E; E4orf4 &#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; (PP2A) &#x3053;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3002;SNF2h &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x9589;&#x585E;&#x306F;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3067; Acf1 &#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x3068;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; E4orf4 &#x8A98;&#x8D77;&#x6BD2;&#x6027;&#x5897;&#x5F37;&#x3057;&#x3001;Acf1 &#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5; &#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x521D;&#x671F;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; E4orf4 &#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; E4orf4 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DB;&#x30EF;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B5;&#x30F3;&#x30BA;, Acf1 &#x540C;&#x65CF;&#x4F53;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3; E4orf4 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066; E4orf4 PP2A &#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; ACF &#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x30DB;&#x30EF;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B5;&#x30F3;&#x30BA; SNF2h &#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E; SNF2h &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x932F;&#x4F53;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x306F;&#x751F;&#x547D;&#x5BFE;&#x6B7B;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x4E2D;&#x306B; E4orf4 &#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; E4orf4 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; PP2A ACF &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3057;&#x3001;SNF2h &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x932F;&#x4F53;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; E4 &#xC624;&#xD508; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784; 4 (E4orf4) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xACE0; &#xBCC0;&#xD658; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0; &#xC544;&#xB2CC; &#xD074;&#xB798;&#xC2DD; apoptosis &#xC720;&#xB3C4; &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; E4orf4 ATP &#xC885;&#xC18D; &#xAC1C;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; chromatin &#xC694;&#xC18C; ATPase &#xBC1C;&#xD6A8;-2 h (SNF2h)&#xC640; Acf1 &#xADDC;&#xC815; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xBE44; &#xC790;&#xB2F9;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xD53C; &#xC624;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; 2A &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; E4orf4 (PP2A)&#xC774; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;&#xC744; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xACE0; chromatin. SNF2h &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xBC29;&#xD574; &#xCD5C;&#xC800; acf1&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC640; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; e4orf4&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3C5;&#xC131; &#xBC0F; Acf1 overexpression e4orf4&#xC758; &#xB2A5;&#xB825; downregulate &#xCD08;&#xAE30; &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; E4orf4 &#xC720;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xC5B5;&#xC81C;. Acf1 &#xCCB4;, WSTF, &#xCD5C;&#xC800; E4orf4 &#xC720;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xC5B5;&#xC81C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; E4orf4 PP2A &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD53C; &#xC624;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; SNF2h &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB2E8;&#xC9C0;, WSTF SNF2h &#xB4F1;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xAC1C;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; chromatin &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; chromatin&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xC8FD;&#xC74C; &#xACB0;&#xC815; &#xB300; &#xC0DD;&#xD65C;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; E4orf4 &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;.

&#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; E4orf4 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xD53C; &#xC624; &#xAC1C;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; chromatin &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; pp2a&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; snf2h&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;.

El adenovirus prote&iacute;na E4 marco de lectura abierto de 4 (E4orf4) regula la progresi&oacute;n de la infecci&oacute;n viral y cuando expresan individualmente induce apoptosis no cl&aacute;sicas en las c&eacute;lulas transformadas. Aqu&iacute; mostramos que E4orf4 se asocia con el factor de remodelaci&oacute;n de la cromatina dependiente de ATP ACF que consiste en una sacarosa no ATPasa de fermentaci&oacute;n - 2 h (SNF2h) y una subunidad reguladora de Acf1. Adem&aacute;s, E4orf4 dirige la prote&iacute;na fosfatasa 2A (PP2A) a este complejo y a la cromatina. Obstrucci&oacute;n de la actividad de SNF2h inhibe la muerte celular inducida por el E4orf4, mientras que la ca&iacute;da de Acf1 da lugar a mayor toxicidad inducida por E4orf4 tanto en mam&iacute;feros como en las c&eacute;lulas de levadura y sobreexpresi&oacute;n de Acf1 inhibe la capacidad de E4orf4 de regular a la baja temprana adenovirus expresi&oacute;n g&eacute;nica en el contexto de la infecci&oacute;n viral. Ca&iacute;da de la Acf1 hom&oacute;logo, WSTF, inhibe la muerte celular inducida por E4orf4. Basado en estos resultados nos sugieren que el complejo E4orf4-PP2A inhibe la ACF y facilita las actividades de remodelaci&oacute;n de la cromatina mejoradas de otros complejos que contienen SNF2h, como WSTF-SNF2h. El interruptor resultante en la remodelaci&oacute;n de la cromatina determina la vida frente a las decisiones de la muerte y contribuye a E4orf4 funciones durante la infecci&oacute;n por adenovirus.

La prote&iacute;na de adenovirus E4orf4 PP2A dirige al factor de remodelaci&oacute;n de la cromatina ACF e induce muerte celular mediante la regulaci&oacute;n de los complejos que contienen SNF2h.

Anna Brestovitsky

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