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Targeted Labeling of Neurons in a Specific Functional Micro-domain of the Neocortex by Combining Intrinsic Signal and Two-photon Imaging

In the primary visual cortex of non-rodent mammals, neurons are clustered according to their preference for stimulus features such as orientation1-4, ...

Medical University of South Carolina

Dimostriamo che Alexa Fluor 633 idrazide maleica (Alexa Fluor 633) etichette selettivamente neocorticale arterie e arteriole legandosi alle fibre di elastina. Abbiamo misurato dinamiche dilatazione arteriola evocati da stimoli sensoriali nella corteccia visiva, topo, ratto e gatto, utilizzando Alexa Fluor 633 insieme attivit&agrave; neuronale utilizzando gli indicatori di calcio o il flusso di sangue mediante dextrano fluoresceina. Dilatazione arteriola diminuito fluorescenza registrata da immediatamente sottostante i neuroni, che rappresentano un potenziale artefatto durante gli esperimenti di imaging funzionali neuronali.

Un colorante fluorescente arteria specifici per lo studio di accoppiamento neurovascolare.

&#x6211;&#x3005; Alexa &#x30D5;&#x30EB;&#x30A2;&#x30FC; 633 &#x30D2;&#x30C9;&#x30E9;&#x30B8;&#x30C9; (Alexa &#x30D5;&#x30EB;&#x30A2;&#x30FC; 633) &#x306F;&#x65B0;&#x76AE;&#x8CEA;&#x52D5;&#x8108;&#x3068;&#x7D30;&#x52D5;&#x8108;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Alexa &#x30D5;&#x30EB;&#x30A2;&#x30FC; 633 &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30B1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30EC;&#x30B9;&#x30BB;&#x30A4;&#x30F3; &#x30C7;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x8840;&#x6D41;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;&#x732B;&#x306E;&#x8996;&#x899A;&#x91CE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x611F;&#x899A;&#x523A;&#x6FC0;&#x8A98;&#x767A;&#x7D30;&#x52D5;&#x8108;&#x62E1;&#x5F35;&#x52D5;&#x614B;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x52D5;&#x8108;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AF;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3001;&#x57FA;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x304B;&#x3089;&#x8A18;&#x9332;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CD;&#x5149;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x795E;&#x7D4C;&#x8840;&#x7BA1;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x52C9;&#x5F37;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52D5;&#x8108;&#x7279;&#x7570;&#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x3002;

Nous d&eacute;montrons que hydrazide mal&eacute;ique Alexa Fluor 633 (Alexa Fluor 633) l&#39;marque s&eacute;lectivement n&eacute;ocorticales art&egrave;res et art&eacute;rioles en se liant aux fibres d&#39;&eacute;lastine. Nous avons mesur&eacute; la dynamique dilatation arteriole d&#39;&eacute;voqu&eacute;e par la stimulation sensorielle en souris, rat et chat cortex visuel &agrave; l&#39;aide de Alexa Fluor 633 ainsi que de l&#39;activit&eacute; neuronale &agrave; l&#39;aide d&#39;indicateurs de calcium ou du d&eacute;bit sanguin &agrave; l&#39;aide de dextran de fluoresc&eacute;ine. Dilatation de l&#39;art&eacute;riole a diminu&eacute; de fluorescence enregistr&eacute; imm&eacute;diatement sous-jacente des neurones, ce qui repr&eacute;sente un artefact potentiel lors des exp&eacute;riences d&#39;imagerie fonctionnelles neuronales.

Un colorant fluorescent de l&#39;art&egrave;re sp&eacute;cifique pour l&#39;&eacute;tude de couplage neurovasculaire.

&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4E01;&#x70EF;&#x4E8C;&#x9170;&#x80BC; Alexa &#x6C1F; 633 (Alexa &#x6C1F; 633) &#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x6807;&#x7B7E;&#x76AE;&#x5C42;&#x52A8;&#x8109;&#x3001; &#x5C0F;&#x52A8;&#x8109;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E86;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3001; &#x5927;&#x9F20;&#x3001; &#x732B;&#x89C6;&#x89C9;&#x76AE;&#x5C42;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4F7F;&#x7528;&#x9499;&#x6307;&#x6807;&#x6216;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x8461;&#x805A;&#x7CD6;&#x7684;&#x8840;&#x6D41;&#x91CF;&#x4E0E;&#x4F7F;&#x7528; Alexa &#x6C1F; 633 &#x611F;&#x5B98;&#x523A;&#x6FC0;&#x8BF1;&#x53D1;&#x52A8;&#x8109;&#x6269;&#x5F20;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;&#x5C0F;&#x52A8;&#x8109;&#x6269;&#x5F20;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x8BB0;&#x5F55;&#x4ECE;&#x7ACB;&#x5373;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x529F;&#x80FD;&#x6210;&#x50CF;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x671F;&#x95F4;&#x4EE3;&#x8868;&#x6F5C;&#x5728;&#x9879;&#x76EE;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x3002;

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We demonstrate that Alexa Fluor 633 hydrazide (Alexa Fluor 633) selectively labels neocortical arteries and arterioles by binding to elastin fibers. We measured sensory stimulus-evoked arteriole dilation dynamics in mouse, rat and cat visual cortex using Alexa Fluor 633 together with neuronal activity using calcium indicators or blood flow using fluorescein dextran. Arteriole dilation decreased fluorescence recorded from immediately underlying neurons, representing a potential artifact during neuronal functional imaging experiments.

An artery-specific fluorescent dye for studying neurovascular coupling.

Wir zeigen, dass Alexa Fluor 633 Maleins&auml;urehydrazid (Alexa Fluor 633) selektiv neokortikalen Arterien und Arteriolen durch Bindung an Elastin Fasern beschriftet. Wir messen die sensorischen Reiz hervorgerufen Arteriole Dilatation Dynamik in Maus, Ratte und Katze Sehrinde &uuml;ber Alexa Fluor 633 sowie die neuronale Aktivit&auml;t mit Kalzium-Indikatoren oder Blutfluss mit Fluoreszein Dextran. Arteriole Dilatation sank Fluoreszenz registrate sofort zugrunde liegenden Neuronen, eine potenzielle Artefakt w&auml;hrend neuronale funktionelle Bildgebung Experimente darstellt.

Eine Arterie-spezifische Leuchtstofff&auml;rbung f&uuml;r Neurovaskul&auml;re Kopplung zu studieren.

&#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; 633 hydrazide (&#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; 633)&#xB97C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; neocortical &#xB3D9;&#xB9E5;&#xACFC; &#xC5D8;&#xB77C; &#xC2A4; &#xD2F4; &#xC12C;&#xC720;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; arterioles &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xAC01; &#xC790;&#xADF9;&#xC744; &#xBD88;&#xB7EC; &#xC77C;&#xC73C;&#xCF30;&#xB2E4; arteriole &#xD33D;&#xCC3D; &#xC5ED;&#xD559; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, &#xC950;, &#xACE0;&#xC591;&#xC774; &#xC2DC;&#xAC01; &#xD53C; &#xC9C8; &#xC54C; &#xB809; &#xC0AC; &#xD615; &#xC11D; 633 &#xC2E0;&#xACBD; &#xD65C;&#xB3D9; &#xCE7C;&#xC298; &#xC9C0;&#xD45C; &#xB610;&#xB294; fluorescein dextran&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD608;&#xC561; &#xD750;&#xB984;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD568;&#xAED8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Arteriole &#xD33D;&#xCC3D; &#xC989;&#xC2DC; &#xB274;&#xB7F0;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC544;&#xD2F0;&#xD329;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB85D; &#xB41C; &#xD615;&#xAD11; &#xAC10;&#xC18C;.

&#xACF5;&#xBD80; neurovascular &#xCEE4;&#xD50C;&#xB9C1; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xAD00;&#xB828; &#xD615;&#xAD11; &#xC5FC;&#xB8CC;.

Demostramos que Alexa Fluor 633 hidrazida (Alexa Fluor 633) etiquetas selectivamente neocorticales arterias y arteriolas atando a las fibras de elastina. Medimos din&aacute;mica de dilataci&oacute;n arteriola evocado por el est&iacute;mulo sensorial en rat&oacute;n, rata y gato corteza visual usando Alexa Fluor 633 junto con la actividad neuronal utilizando indicadores de calcio o flujo sangu&iacute;neo utilizando dextr&aacute;n de fluoresce&iacute;na. Dilataci&oacute;n arteriola disminuido fluorescencia grabada inmediatamente subyacente a las neuronas, que representan un potencial artefacto durante experimentos de proyecci&oacute;n de imagen funcionales neuronales.

Zhiming Shen

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