ex-vivo-red-blood-cell-hemolysis-assay-for-evaluation-ph-responsive

<em>Ex Vivo</em> Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

Phospholipid bilayers that constitute endo-lysosomal vesicles can pose a barrier to delivery of biologic drugs to intracellular targets. To overcome this ...

Vanderbilt University

&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6280;&#x672F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x518D;&#x751F;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x5DF2;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x3001; &#x672A;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x672C;&#x6587;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5C01;&#x88C5;&#x548C;&#x4FDD;&#x62A4; siRNA &#x5185; pH &#x54CD;&#x5E94;&#x6027;&#xFF0C;endosomolytic &#x80F6;&#x675F;&#x7EB3;&#x7C73; (si NPs)&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7EB3;&#x5165;&#x65E0;&#x6BD2;&#x3001; &#x53EF;&#x751F;&#x7269;&#x964D;&#x89E3;&#x53CA;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7528;&#x805A;&#x6C28;&#x916F; (PUR) &#x7EC4;&#x7EC7;&#x652F;&#x67B6;&#x6750;&#x6599;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;Si NPs &#x5747;&#x5300;&#x88AB;&#x7EB3;&#x5165;&#x6574;&#x4E2A;&#x591A;&#x5B54; PUR &#x652F;&#x67B6;&#xFF0C;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x8981;&#x91CA;&#x653E;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E09;&#x4E2A;&#x591A;&#x661F;&#x671F;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6269;&#x6563;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;SiRNA &#x52A0;&#x8F7D;&#x80F6;&#x675F;&#x4E86;&#x5927;&#x7EA6; 100 nm &#x76F4;&#x5F84;&#x540E;&#x7EB3;&#x5165;&#x4ECE;&#x652F;&#x67B6;&#x91CA;&#x653E;&#x66F4;&#x5927;&#x4F46;&#x4FDD;&#x7559;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#x5F62;&#x6001;&#x3002;PUR &#x811A;&#x624B;&#x67B6; releasate &#x6536;&#x96C6;&#x4F53;&#x5916; PBS &#x5728; 37 &deg; C &#x7684; 1-4 &#x5929;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x8FBE;&#x5230;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x4ECB;&#x5BFC; siRNA &#x6C89;&#x9ED8;&#x7EA6; 50%&#x4E0E;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684; NIH3T3 &#x5C0F;&#x9F20;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6A21;&#x578B;&#x4E09;&#x53D6;&#x5F97;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x6709;&#x524D;&#x9014;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x6280;&#x672F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x80FD;&#x591F;&#x63A2;&#x6D4B;&#x672C;&#x5730;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x548C;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x9AD8;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E3A;&#x6301;&#x7EED;&#x3001; &#x672C;&#x5730;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x6709;&#x5BB3;&#x57FA;&#x56E0;&#x5185;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7F3A;&#x635F;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x6301;&#x7EED;&#x672C;&#x5730;&#x4F20;&#x9012;&#x7684; siRNA &#x4ECE;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7528;&#x7684;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x3002;

Controlled gene silencing technologies have significant, unrealized potential for use in tissue regeneration applications. The design described herein provides a means to package and protect siRNA within pH-responsive, endosomolytic micellar nanoparticles (si-NPs) that can be incorporated into nontoxic, biodegradable, and injectable polyurethane (PUR) tissue scaffolds. The si-NPs were homogeneously incorporated throughout the porous PUR scaffolds, and they were shown to be released via a diffusion-based mechanism for over three weeks. The siRNA-loaded micelles were larger but retained nanoparticulate morphology of approximately 100 nm diameter following incorporation into and release from the scaffolds. PUR scaffold releasate collected in vitro in PBS at 37 Â°C for 1-4 days was able to achieve dose-dependent siRNA-mediated silencing with approximately 50% silencing achieved of the model gene GAPDH in NIH3T3 mouse fibroblasts. This promising platform technology provides both a research tool capable of probing the effects of local gene silencing and a potentially high-impact therapeutic approach for sustained, local silencing of deleterious genes within tissue defects.

Sustained local delivery of siRNA from an injectable scaffold.

Technologies silencieux g&eacute;nique contr&ocirc;l&eacute;e ont potentiel significatif, non r&eacute;alis&eacute; pour une utilisation dans des applications de r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration tissulaire. La conception d&eacute;crite ci-apr&egrave;s permet d&#39;empaqueter et de prot&eacute;ger les siARN dans pH-r&eacute;actif, nanoparticules micellaires endosomolytic (TR-NPs) qui peut &ecirc;tre incorpor&eacute; dans les &eacute;chafaudages des tissus non toxiques, biod&eacute;gradables et injectables (PUR) polyur&eacute;thane. Les TR-NPs ont &eacute;t&eacute; incorpor&eacute;s homog&egrave;ne tout au long des &eacute;chafaudages PUR poreuses, et ils se sont av&eacute;r&eacute;s &ecirc;tre lib&eacute;r&eacute; par un m&eacute;canisme de diffusion sur pendant plus de trois semaines. Les micelles charg&eacute;es siARN &eacute;taient NANOPARTICULAIRES plus grands, mais conserv&eacute; la morphologie d&#39;environ 100 nm de diam&egrave;tre apr&egrave;s incorporation et le rejet des &eacute;chafaudages. &Eacute;chafaudage PUR releasate recueillis dans du PBS in vitro &agrave; 37 &deg; C pendant 1 &agrave; 4 jours a pu atteindre la dose-d&eacute;pendante m&eacute;di&eacute;e par les siARN silencieux avec environ 50 % silencieux atteints du g&egrave;ne GAPDH mod&egrave;le dans des fibroblastes de souris NIH3T3. Cette technologie prometteuse de la plate-forme fournit la fois un outil de recherche capable de sonder les effets de silen&ccedil;age g&eacute;nique local et une approche th&eacute;rapeutique de l&#39;impact potentiellement &eacute;lev&eacute; de soutenue, local silen&ccedil;age de g&egrave;nes d&eacute;l&eacute;t&egrave;res dans les d&eacute;fauts des tissus.

Soutenue livraison locale de siARN un &eacute;chafaudage injectable.

Kontrollierte gen-silencing-Technologien haben erhebliche, nicht realisierte Potenzial f&uuml;r den Einsatz in Gewebe-Regeneration-Anwendungen. Das Design, die hierin beschriebenen bietet eine M&ouml;glichkeit zum Verpacken und sch&uuml;tzen SiRNA innerhalb pH-Wert-responsive, Endosomolytic Mizellares Nanopartikeln (Si-NPs), die in ungiftig, biologisch abbaubar und injizierbare Polyurethan (PUR) Gewebe Ger&uuml;sten integriert werden k&ouml;nnen. Die Si-NPs einverleibt homogen in den por&ouml;sen PUR-Ger&uuml;sten, und sie wurden gezeigt, &uuml;ber eine Verbreitung basierenden Mechanismus f&uuml;r mehr als drei Wochen freigegeben werden. Die SiRNA geladenen Mizellen waren gr&ouml;&szlig;er, aber zur&uuml;ckbehaltenen nanopartikul&auml;ren Morphologie von ca. 100 nm Durchmesser nach Einbindung in und aus der Ger&uuml;ste. PUR-Ger&uuml;st releasate gesammelt, in-vitro in PBS bei 37 &deg; C f&uuml;r 1-4 Tage dosisabh&auml;ngige SiRNA-vermittelte Unterdr&uuml;ckender mit ca. 50 % erreichen konnte zum Schweigen des Gens Modell GAPDH in NIH3T3 Maus-Fibroblasten erreicht. Diese vielversprechende Plattformtechnologie bietet sowohl eine Lage sondieren, die Auswirkungen der lokalen gen zum Schweigen und eine potentiell extrem schlagfesten therapeutischer Ansatz f&uuml;r nachhaltige, lokale zum Schweigen der sch&auml;dlichen Gene im Gewebe M&auml;ngel Recherche-Tool.

Nachhaltige lokale &Uuml;bermittlung von SiRNA aus einem injizierbaren Ger&uuml;st.

Tecnologie di silenziamento del gene controllato hanno potenziale significativo, non realizzati per l&#39;uso in applicazioni di rigenerazione dei tessuti. Il progetto qui descritto fornisce un mezzo per pacchetto e proteggere siRNA all&#39;interno di pH-sensibile, endosomolytic micellare nanoparticelle (si-NPs) che possono essere incorporate in atossici, biodegradabile e iniettabili in poliuretano (PUR) tessuto impalcature. Si-PN furono incorporate omogeneamente in tutta le impalcature PUR porosi, e furono mostrati per essere rilasciato tramite un meccanismo di diffusione-basato per oltre tre settimane. Le micelle siRNA-caricato erano pi&ugrave; grandi, ma mantenuto nanoparticolato morfologia di circa 100 nm di diametro dopo incorporazione e rilascio dai ponteggi. Patibolo PUR releasata raccolti in vitro in PBS a 37 &deg; C per 1-4 giorni &egrave; stato in grado di raggiungere la dose-dipendente siRNA-mediated silencing con circa il 50% silenziamento raggiunto del gene GAPDH modello in fibroblasti NIH3T3. Questa promettente tecnologia piattaforma fornisce sia uno strumento di ricerca capace di sondare gli effetti del silenziamento genico locale e un approccio terapeutico potenzialmente ad alto impatto per sostenuta, locale silenziamento dei geni deleteri all&#39;interno di difetti dei tessuti.

Recapito locale sostenuta di siRNA da un&#39;impalcatura iniettabile.

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x6280;&#x8853;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x672A;&#x5B9F;&#x73FE;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x7D44;&#x7E54;&#x518D;&#x751F;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3057;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A6;&#x30EC;&#x30BF;&#x30F3;&#x306E; (PUR) &#x7D44;&#x7E54;&#x8DB3;&#x5834;&#x306B;&#x751F;&#x5206;&#x89E3;&#x6027;&#x3001;&#x6BD2;&#x6027;&#x3001;&#x6CE8;&#x5C04;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B; pH &#x5FDC;&#x7B54;&#x6027; endosomolytic &#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x30CA;&#x30CE;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50; (si NPs) &#x5185;&#x306E; siRNA &#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Si NPs &#x306F;&#x5747;&#x4E00; PUR &#x591A;&#x5B54;&#x8CEA;&#x3067;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F; 3 &#x9031;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x62E1;&#x6563;&#x8A55;&#x4FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;SiRNA &#x30ED;&#x30FC;&#x30C9; &#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x304C;&#x4FDD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x7D04; 100 nm &#x5F84;&#x306E;&#x6B21;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3068;&#x8DB3;&#x5834;&#x304B;&#x3089;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;PUR &#x306E;&#x8DB3;&#x5834;&#x304C;&#x53CE;&#x96C6;&#x3057;&#x305F; in vitro &#x3067; PBS &#x3067; 37 &deg; C 1-4 &#x65E5;&#x9593;&#x306B;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58; siRNA &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D04; 50 &#xFF05; &#x306B;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0; NIH3T3 &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; GAPDH &#x306E;&#x5B9F;&#x73FE; releasate&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x6280;&#x8853;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3068;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x7D44;&#x7E54;&#x6B20;&#x640D;&#x306B;&#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6CE8;&#x5C04;&#x7528;&#x8DB3;&#x5834;&#x304B;&#x3089; siRNA &#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x914D;&#x9054;&#x3002;

&#xC81C;&#xC5B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; silencing &#xAE30;&#xC220; &#xC870;&#xC9C1; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;, &#xC2E4;&#xD604; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xB41C; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xD328;&#xD0A4;&#xC9C0; &#xBC0F; pH &#xBC18;&#xC751; endosomolytic micellar &#xB098;&#xB178; (si-NPs) &#xAC74;&#xC124; &#xAE30;&#xACC4; &#xBB34; &#xB3C5;&#xC131;, &#xC0DD; &#xBD84;&#xD574;&#xC131;, &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0;-&#xD3F4;&#xB9AC;&#xC6B0;&#xB808;&#xD0C4; (PUR) &#xC870;&#xC9C1; &#xC784;&#xB300;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD569; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB0B4; Sirna&#xB97C; &#xBCF4;&#xD638; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB2E8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Si-NPs &#xB2E4;&#xACF5;&#xC131; PUR &#xAC74;&#xC124; &#xAE30;&#xACC4; &#xC784;&#xB300;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD1B5;&#xD569; &#xD588;&#xB2E4; homogeneously &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; 3 &#xC8FC; &#xB3D9;&#xC548; &#xBCF4;&#xAE09; &#xAE30;&#xBC18; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB420; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. SiRNA &#xB85C;&#xB4DC; micelles &#xD070; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC720;&#xC9C0; nanoparticulate &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xC57D; 100 nm &#xC9C1;&#xACBD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815; &#xAD00;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;&#xACFC; &#xAC74;&#xC124; &#xAE30;&#xACC4; &#xC784;&#xB300;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. PUR &#xBE44; &#xACC4; releasate &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xC804;&#xC790; GAPDH NIH3T3 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAC8C;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC758; &#xB2EC;&#xC131; &#xC785;&#xC744; &#xC218;&#xC9D1; &#xB41C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; PBS&#xC5D0;&#xC11C; 1-4 &#xC77C; &#xB3D9;&#xC548; 37 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57D; 50%&#xC640; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xC785;&#xC744; siRNA &#xC911;&#xC7AC; &#xB2EC;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xBAA8;&#xB450; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xC18D;, &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC870;&#xC9C1; &#xACB0;&#xD568; &#xB0B4; &#xD574;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC785;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB192;&#xC740; &#xCDA9;&#xACA9; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xD504;&#xB85C; &#xBE59; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC8FC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xBE44; &#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; Sirna&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xB85C;&#xCEEC; &#xBC30;&#xB2EC;.

Tecnolog&iacute;as silenciamiento de genes controlados tienen potencial significativo, para uso en aplicaciones de regeneraci&oacute;n de tejido. El dise&ntilde;o descrito en este documento proporciona un medio para envasar y proteger siRNA en pH-sensible, endosomolytic micelar nanopart&iacute;culas (si-NPs) que pueden ser incorporadas en inyectables, no t&oacute;xicos y biodegradables poliuretano (PUR) tejido andamios. NPs-si se incorporaron homog&eacute;neamente a lo largo de los porosos andamios PUR, y fueron demostrados para ser liberado mediante un mecanismo basado en difusi&oacute;n durante m&aacute;s de tres semanas. Las micelas de siRNA cargados fueron m&aacute;s grande pero retenidos nanoparticulados morfolog&iacute;a de aproximadamente 100 nm de di&aacute;metro, siguiendo la incorporaci&oacute;n y liberaci&oacute;n de los andamios. Andamio PUR releasate recogidos in vitro en PBS a 37 &deg; C durante 1-4 d&iacute;as fue capaz de lograr dose-dependent mediada por siRNA silenciamiento con aproximadamente 50% silenciamiento alcanzado del gen modelo GAPDH en fibroblastos de rat&oacute;n NIH3T3. Esta prometedora tecnolog&iacute;a de plataforma proporciona tanto una herramienta de investigaci&oacute;n capaz de sondear los efectos de silenciamiento g&eacute;nico local y un enfoque terap&eacute;utico potencialmente impactantes para sostenido, local silenciamiento de genes delet&eacute;reos en defectos del tejido.

Entrega local sostenida de siRNA de un andamio inyectable.

&#x7531;&#x4E19;&#x70EF;&#x786B;&#x5316; (PS) &#x548C; N&#x3001; N dimethylacrylamide &#x5D4C;&#x6BB5;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x7EC4;&#x6210;&#x65B0;&#x80F6;&#x675F;&#x836F;&#x7269;&#x8F7D;&#x4F53; (poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;)) &#x5408;&#x6210;&#x5E76;&#x5DF2;&#x4E3A;&#x758F;&#x6C34;&#x6027;&#x836F;&#x7269;&#x708E;&#x75C7;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7279;&#x5B9A;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x4E19;&#x70EF;&#x786B;&#x5316;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x805A;&#x5408;&#x7B4F;&#x94FE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5242; (CTA) 4-cyano-4-(ethylsulfanylthiocarbonylsulfanyl) &#x620A;&#x9178; (CEP)&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528; thioacyl &#x96C6;&#x56E2;&#x8F6C;&#x8BA9; (TAGT) &#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; poly(PS&#x2087;&#x2084;-CEP) &#x5B8F;-CTA &#x7528;&#x4E8E;&#x805A;&#x5408;&#x7684; DMA &#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x9006;&#x52A0;&#x6210;&#x65AD;&#x88C2;&#x94FE;&#x8F6C;&#x79FB; (&#x7B4F;) &#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5757;&#x3002;Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &#x5D4C;&#x6BB5;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x8BC1;&#x5B9E; &sup1; H &#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x5149;&#x8C31;&#x548C;&#x51DD;&#x80F6;&#x6E17;&#x900F;&#x8272;&#x8C31; (GPC)&#x3002;Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x52A8;&#x6001;&#x5149;&#x6563;&#x5C04; &#xFF08;DLS&#xFF09; &#x548C;&#x900F;&#x5C04;&#x7535;&#x955C; (TEM) &#x6240;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x7684;&#x6C34;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E2D;&#x5F62;&#x6210; 100 &#x7EB3;&#x7C73;&#x80F6;&#x675F;&#x3002;&#x52A0;&#x8F7D;&#x4E0E;&#x5C3C;&#x7F57;&#x6CB3;&#x7EA2;&#x548C;&#x8FEA;&#x5965;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8BC1;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x80F6;&#x675F;&#x4E0E;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x6C22; (H&#x2082;O&#x2082;)&#x3001; 3-morpholinosydnonimine &#xFF08;&#x5055;-1&#xFF09; &#x548C;&#x8FC7;&#x6C27;&#x4E9A;&#x785D;&#x9178;&#x76D0;&#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x4F9D;&#x8D56;&#x836F;&#x7269;&#x91CA;&#x653E;&#x673A;&#x7406;&#x6A21;&#x578B;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x80F6;&#x675F;&#x3002;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x6C27;&#x5316;&#x80F6;&#x675F;&#x805A;&#x82EF;&#x786B;&#x919A;&#x6838;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5B83;&#x66F4;&#x52A0;&#x4EB2;&#x6C34;&#x548C;&#x89E6;&#x53D1;&#x80F6;&#x675F;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16;&#x548C;&#x8D27;&#x7269;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &#x675F;&#x53CC;&#x52A0;&#x8F7D;&#x7684; F&ouml;rster &#x5171;&#x632F;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB; &#xFF08;&#x97F3;&#x54C1;&#xFF09; &#x8367;&#x5149;&#x5BF9;&#x4E0A;&#x5E74;&#x548C;&#x8FEA;&#x5965;&#x7684;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8BC1;&#x660E;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x751F;&#x6210;&#x7531;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6; (LPS)-&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x539F;&#x6599; 2.647 &#x5904;&#x7406;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x7EB3;&#x7C73;&#x5185;&#x5BB9;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x4E0D;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E; poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &#x675F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5BB9;&#x6027;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8303;&#x56F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x5408;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &#x80F6;&#x675F;&#x5408;&#x6210;&#x4F7F;&#x7528; TAGT &#x548C;&#x7B4F;&#x677F;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x6709;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x5DE8;&#x5927;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;

&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD;&#x7684; Poly(PS-b-DMA) &#x675F;&#x89E6;&#x53D1;&#x91CA;&#x836F;&#x3002;

A new micelle drug carrier that consists of a diblock polymer of propylene sulfide (PS) and N,N-dimethylacrylamide (poly(PSâ‚‡â‚„-b-DMAâ‚ƒâ‚â‚€)) has been synthesized and characterized for site-specific release of hydrophobic drugs to sites of inflammation. Propylene sulfide was first polymerized using a thioacyl group transfer (TAGT) method with the RAFT chain transfer agent (CTA) 4-cyano-4-(ethylsulfanylthiocarbonylsulfanyl) pentanoic acid (CEP), and the resultant poly(PSâ‚‡â‚„-CEP) macro-CTA was used to polymerize a second polymer block of DMA using reversible addition-fragmentation chain transfer (RAFT). The formation of the poly(PSâ‚‡â‚„-b-DMAâ‚ƒâ‚â‚€) diblock polymer was confirmed by Â¹H NMR spectra and gel permeation chromatography (GPC). Poly(PSâ‚‡â‚„-b-DMAâ‚ƒâ‚â‚€) formed 100 nm micelles in aqueous media as confirmed by dynamic light scattering (DLS) and transmission electron microscopy (TEM). Micelles loaded with the model drugs Nile red and DiO were used to demonstrate the ROS-dependent drug release mechanism of these micelles following treatment with hydrogen peroxide (Hâ‚‚Oâ‚‚), 3-morpholinosydnonimine (SIN-1), and peroxynitrite. These oxidants were found to oxidize the micelle PPS core, making it more hydrophilic and triggering micelle disassembly and cargo release. Delivery of poly(PSâ‚‡â‚„-b-DMAâ‚ƒâ‚â‚€) micelles dual-loaded with the FÃ¶rster Resonance Energy Transfer (FRET) fluorophore pair DiI and DiO was used to prove that endogenous oxidants generated by lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW 264.7 macrophages significantly increased release of nanocarrier contents relative to macrophages that were not activated. In vitro studies also demonstrated that the poly(PSâ‚‡â‚„-b-DMAâ‚ƒâ‚â‚€) micelles were cytocompatible across a broad range of concentrations. These combined data suggest that the poly(PSâ‚‡â‚„-b-DMAâ‚ƒâ‚â‚€) micelles synthesized using a combination of TAGT and RAFT have significant potential for site-specific drug delivery to tissues with high levels of oxidative stress.

Poly(PS-b-DMA) micelles for reactive oxygen species triggered drug release.

Un nouveau transporteur de drogue micelle qui est constitu&eacute; d&#39;un polym&egrave;re dibloc de sulfure de propyl&egrave;ne (PS) et la N, N-dim&eacute;thylacrylamide (poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;)) a &eacute;t&eacute; synth&eacute;tis&eacute; et caract&eacute;ris&eacute; pour diffusion in site des m&eacute;dicaments hydrophobes aux sites d&#39;inflammation. Sulfure de propyl&egrave;ne a &eacute;t&eacute; tout d&#39;abord polym&eacute;ris&eacute; &agrave; l&#39;aide d&#39;une m&eacute;thode de transfert (TAGT) du groupe thioacyles avec l&#39;acide pentano&iuml;que radeau cha&icirc;ne transfert agent (CTA) 4-cyano-4-(ethylsulfanylthiocarbonylsulfanyl) (CEP), et la macro poly(PS&#x2087;&#x2084;-CEP) qui en r&eacute;sultent-LTC servait &agrave; polym&eacute;riser un deuxi&egrave;me bloc de polym&egrave;re de DMA en utilisant transfert r&eacute;versible addition-fragmentation de la cha&icirc;ne (RAFT). La formation du polym&egrave;re dibloc poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e par les spectres de RMN H &sup1; et (GPC) par chromatographie par perm&eacute;ation de gel. Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) forment des 100 micelles nm en milieu aqueux, tel que confirm&eacute; par la diffusion de la lumi&egrave;re dynamique (DLS) et microscopie &eacute;lectronique &agrave; transmission (TEM). Micelles charg&eacute;es avec les m&eacute;dicaments mod&egrave;le Nil rouge et DiO ont servi &agrave; d&eacute;montrer le d&eacute;blocage de drogue ROS d&eacute;pendant de ces micelles apr&egrave;s le traitement par le peroxyde d&#39;hydrog&egrave;ne (H&#x2082;O&#x2082;), 3-morpholinosydnonimine (SIN-1) et peroxynitrite. Ces oxydants trouv&eacute;es pour oxyder le noyau PPS micelle, rendant plus hydrophiles et d&eacute;clenchement d&eacute;montage de micelles et fret de mainlev&eacute;e. Livraison des micelles poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) dual charge avec la paire de fluorophore F&ouml;rster Resonance Energy Transfer (FRET) DiI et DiO a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour prouver que les oxydants endog&egrave;nes g&eacute;n&eacute;r&eacute;s par les lipopolysaccharides (LPS)-trait&eacute;es macrophages RAW 264.7 sensiblement augmente la lib&eacute;ration des mati&egrave;res nanocarrier par rapport aux macrophages qui n&#39;&eacute;taient pas activ&eacute;s. Des &eacute;tudes in vitro ont aussi d&eacute;montrent que les micelles de poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) ont &eacute;t&eacute; cytocompatible dans un large &eacute;ventail de concentrations. Ces donn&eacute;es combin&eacute;es donnent &agrave; penser que les micelles de poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) synth&eacute;tis&eacute;s &agrave; l&#39;aide d&#39;une combinaison de TAGT et radeau ont un potentiel significatif pour la livraison de m&eacute;dicaments sp&eacute;cifiques aux tissus avec des niveaux &eacute;lev&eacute;s de stress oxydatif.

Micelles de poly(PS-b-DMA) pour les esp&egrave;ces r&eacute;actives de l&#39;oxyg&egrave;ne a d&eacute;clench&eacute; la lib&eacute;ration du m&eacute;dicament.

Eine neue Mizellen-Droge-F&ouml;rdermaschine, die eines Diblock Polymeren des Propylens Sulfide (PS) und N, N-Dimethylacrylamide besteht (poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;)) synthetisiert und wurde f&uuml;r standortspezifische Version hydrophobe Medikamente auf Seiten der Entz&uuml;ndung gekennzeichnet. Propylen-Sulfid wurde zuerst polymerisiert mit eine Thioacyl Gruppe-&Uuml;bertragungsmethode (TAGT) mit dem FLO&szlig; Kette Transfer Agent (CTA) 4-cyano-4-(ethylsulfanylthiocarbonylsulfanyl) Valerians&auml;ure S&auml;ure (CEP) und das daraus resultierenden poly(PS&#x2087;&#x2084;-CEP) Makro-CTA wurde verwendet, um einen zweiten Polymer-Block von DMA mit reversiblen Zusatz-Fragmentierung Kette Transfer (RAFT) polymerisieren. Die Bildung des Polymers Diblock poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) best&auml;tigte &sup1; H-NMR-Spektren und gel-Permeations-Chromatographie (GPC). Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) 100 nm-Mizellen in w&auml;ssrigen Medien best&auml;tigt durch dynamische Lichtstreuung (DLS) und Transmissionselektronenmikroskopie (TEM) gebildet. Mizellen geladen mit den Modell-Medikamenten Nil rot und DiO wurden verwendet, um die ROS-abh&auml;ngigen Drogen Ausl&ouml;sevorrichtung von diesen Micellen, die nach der Behandlung mit Wasserstoffperoxid (H&#x2082;O&#x2082;), 3-Morpholinosydnonimine (SIN-1) und Peroxynitrite zu demonstrieren. Diese Oxidantien befand, dass um die Mizellen PPS Kernherstellung, es mehr hydrophile und ausl&ouml;sende Mizellen-Demontage und Fracht-Release zu oxidieren. Lieferung von poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) Mizellen Dual-geladen mit dem F&ouml;rster Resonance Energy Transfer (FRET) Fluorophor paar DiI und DiO wurde verwendet, um zu beweisen, dass endogene Oxidantien von Lipopolysaccharid (LPS) erzeugt-behandelte RAW 264.7 Makrophagen deutlich erh&ouml;ht Freisetzung von Nanocarrier Inhalt im Vergleich zu Makrophagen, die nicht aktiviert wurden. In-vitro-Studien zeigten auch, dass die poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;)-Mizellen Cytocompatible in einer breiten Palette von Konzentrationen waren. Diese kombinierten Daten schlagen vor, da&szlig; die poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) Mizellen synthetisiert, mit einer Kombination aus TAGT und FLO&szlig; erhebliches Potenzial f&uuml;r eine standortspezifische Medikamentenabgabe zu Geweben mit hoher oxidativer Stress haben.

Poly(PS-b-DMA) Mizellen f&uuml;r reaktive Sauerstoffspezies ausgel&ouml;st ARZNEIMITTELFREISETZUNG.

Un nuovo vettore di droga micella che consiste di un polimero diblock di solfuro di propilene (PS) e N, N-dimethylacrylamide (poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;)) &egrave; stato sintetizzato e caratterizzato per rilascio site-specific di farmaci idrofobici a siti di infiammazione. Solfuro di propilene in primo luogo &egrave; stato polimerizzato utilizzando un metodo di trasferimento (TAGT) gruppo thioacyl con acidi pentanoici 4-cyano-4-(ethylsulfanylthiocarbonylsulfanyl) di agente (CTA) zattera catena trasferimento (CEP), e il risultante poly(PS&#x2087;&#x2084;-CEP) macro-CTA &egrave; stato utilizzato per polimerizzare un secondo blocco di polimero di DMA tramite trasferimento di catena aggiunta-frammentazione reversibile (zattera). La formazione del polimero diblock poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &egrave; stata confermata da spettri NMR H &sup1; e gel cromatografia di permeazione (GPC). Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) formano micelle di 100 nm in mezzi acquosi, come confermato dalla diffusione dinamica della luce (DLS) e microscopia elettronica della trasmissione (TEM). Micelle caricati con la droghe modello Nilo rosso e DiO sono stati utilizzati per dimostrare il meccanismo di rilascio del farmaco ROS-dipendente di queste micelle dopo il trattamento con perossido di idrogeno (H&#x2082;O&#x2082;), 3-morpholinosydnonimine (SIN-1) e perossinitrito. Questi ossidanti sono stati trovati a ossidare il nucleo PPS micella, rendendolo pi&ugrave; idrofilo e scatenanti micella smontaggio e rilascio del carico. Consegna delle micelle poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) dual-caricato con la coppia di fluoroforo F&ouml;rster Resonance Energy Transfer (FRET) DiI e DiO &egrave; stato usato per dimostrare che ossidanti endogeni generati dal lipopolisaccaride (LPS)-trattati macrofagi RAW 264.7 notevolmente aumentato rilascio di nanocarrier contenuto relativo macrofagi che non sono stati attivati. Studi in vitro hanno dimostrato inoltre che le micelle poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) erano cytocompatible in una vasta gamma di concentrazioni. Questi dati combinati suggeriscono che le micelle poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) sintetizzati utilizzando una combinazione di TAGT e zattera hanno un potenziale significativo per la consegna della droga site-specific per tessuti con alti livelli di stress ossidativo.

Micelle Poly(PS-b-DMA) per le specie reattive dell&#39;ossigeno attivato rilascio di farmaci.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EC;&#x30F3;&#x786B;&#x5316; (PS)&#x3001;N&#xFF0C; n&#xFF0D; &#x30B8;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30A2;&#x30AF;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9; &#x30B8;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x85AC;&#x7269;&#x904B;&#x642C; (poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;)) &#x304C;&#x5408;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x85AC;&#x7269;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x708E;&#x75C7;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EC;&#x30F3;&#x786B;&#x5316;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x3044;&#x304B;&#x3060;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x8EE2;&#x9001;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8; &#xFF08;CTA&#xFF09; 4-cyano-4-(ethylsulfanylthiocarbonylsulfanyl) &#x30DA;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x9178;&#x306E; &#xFF08;CEP&#xFF09;&#x3001;thioacyl &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001; (TAGT) &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x91CD;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x4ED8;&#x52A0;&#x65AD;&#x7247;&#x5316;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x8EE2;&#x9001; &#xFF08;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#xFF09; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; DMA &#x306E;&#x7B2C; 2 &#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC; &#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x91CD;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x7D50;&#x679C; poly(PS&#x2087;&#x2084;-CEP) &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED; CTA &#x304C;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&sup1; H NMR &#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B; poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &#x30B8;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x30B2;&#x30EB;&#x6D78;&#x900F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; &#xFF08;GPC&#xFF09;&#x3002;Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) 100 nm &#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x5149;&#x6563;&#x4E71; (DL) &#x3068;&#x900F;&#x904E;&#x578B;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; (TEM) &#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7D50;&#x6210;&#x3002;&#x30CA;&#x30A4;&#x30EB;&#x5DDD;&#x306E;&#x8D64;&#x3068; DiO &#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7; &#x30CA;&#x30A4;&#x30C8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x904E;&#x9178;&#x5316;&#x6C34;&#x7D20; (H&#x2082;O&#x2082;), 3-morpholinosydnonimine &#xFF08;&#x7F6A;-1)&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E; ROS &#x4F9D;&#x5B58;&#x85AC;&#x7269;&#x653E;&#x51FA;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x85AC;&#x3068;&#x3044;&#x3063;&#x3066;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30F3;&#x30C8; &#x30DF;&#x30BB;&#x30EB; PPS &#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x3088;&#x308A;&#x89AA;&#x6C34;&#x6027;&#x3068;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x306E;&#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x5206;&#x89E3;&#x30FB;&#x8CA8;&#x7269;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x9178;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;.Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x86CD;&#x5149;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5; (FRET) &#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2; DiI &#x3068; DiO &#x3068;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB; &#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x9178;&#x5316;&#x5264;&#x30EA;&#x30DD;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9; (LPS) &#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;-&#x30CA;&#x30CE;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x5185;&#x5BB9;&#x304C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x57FA;&#x6E96;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x672A;&#x52A0;&#x5DE5; 264.7 &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3002;In vitro &#x8A66;&#x9A13;&#x3082; poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &#x30DF;&#x30BB;&#x30EB; cytocompatible &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;TAGT &#x3068;&#x3044;&#x304B;&#x3060;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x305F; poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3078;&#x306E;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x85AC;&#x7269;&#x9001;&#x9054;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Poly(PS-b-DMA) &#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x306E;&#x85AC;&#x7269;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xD669; &#xD654;&#xBB3C; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xB80C; (PS)&#xC640; N, N-dimethylacrylamide diblock &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; micelle &#xB9C8;&#xC57D; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4; (poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;)) &#xD569;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xC73C;&#xBA70; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xBCC4; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC83;&#xC774; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xB80C; &#xD669;&#xD654; &#xBA3C;&#xC800; &#xB5CF;&#xBAA9; &#xCCB4;&#xC778; &#xC804;&#xC1A1; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; (CTA) 4-cyano-4-(ethylsulfanylthiocarbonylsulfanyl) pentanoic &#xC0B0; (CEP) thioacyl &#xADF8;&#xB8F9; &#xC804;&#xC1A1; (TAGT) &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB41C; &#xBC0F; &#xACB0;&#xACFC; poly(PS&#x2087;&#x2084;-CEP) &#xB9E4;&#xD06C;&#xB85C; CTA&#xB294; &#xAC00;&#xC5ED; &#xCD94;&#xAC00; &#xC870;&#xAC01;&#xD654; &#xCCB4;&#xC778; &#xC804;&#xC1A1; (&#xB5CF;&#xBAA9;)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; DMA&#xC758; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xBE14;&#xB85D; polymerize &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) diblock &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &sup1; H NMR &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xC824; &#xD22C;&#xACFC; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; (GPC) &#xBC0F;. Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) &#xB3D9;&#xC801; &#xAD11; &#xC0B0;&#xB780; (DL) &#xBC0F; &#xC804;&#xC1A1; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (TEM)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xC131; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; 100 nm micelles&#xC744; &#xD615;&#xC131;. Micelles &#xBAA8;&#xB378; &#xB9C8;&#xC57D; &#xB098; &#xC77C; &#xB808;&#xB4DC; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB418; &#xACE0; DiO &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xC218;&#xC18C; (H&#x2082;O&#x2082;), 3-morpholinosydnonimine (&#xC8C4;-1) &#xBC0F; peroxynitrite&#xC640; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; micelles &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xC885;&#xC18D; &#xB9C8;&#xC57D; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; oxidants &#xC0B0;&#xD654; &#xB354; &#xCE5C; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; micelle &#xBD84;&#xD574; &#xBC0F; &#xD654;&#xBB3C; &#xC790;&#xB8CC; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xAE30; micelle &#xC870;&#xB2EC; &#xCCAD; &#xD575;&#xC2EC;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) micelles F&ouml;rster &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xC1A1; (FRET) fluorophore &#xC30D; Dii&#xC640; Dio&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xB85C;&#xB4DC;&#xC758; &#xBC30;&#xB2EC; &#xC0DD; oxidants lipopolysaccharide (LPS)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xC99D;&#xBA85;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;-&#xCE58;&#xB8CC; RAW 264.7 &#xC138;&#xD3EC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xB0B4;&#xC6A9; nanocarrier&#xC758; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xC99D;&#xAC00;. &#xB610;&#xD55C; &#xCCB4; &#xC678; &#xC5F0;&#xAD6C; poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) micelles &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; cytocompatible &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;&#xACE0; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; TAGT&#xC640; &#xB5CF;&#xBAA9;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD569;&#xC131; poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) micelles &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC758; &#xC0C1;&#xBD80;&#xB97C; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAD00;&#xB828; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC804;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xAC16;&#xACE0; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Poly(PS-b-DMA) micelles &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xAC00; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Un portador de drogas micela nuevo que consiste en un pol&iacute;mero de diblock de sulfuro de propileno (PS) y N, N-dimethylacrylamide (poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;)) ha sido sintetizado y caracterizado para site-specific liberaci&oacute;n de f&aacute;rmacos hidrof&oacute;bicos a sitios de inflamaci&oacute;n. Sulfuro de propileno fue polimerizado primero usando un m&eacute;todo de transferencia (TAGT) del grupo de thioacyl con el balsa cadena transferencia agente (CTA) 4-cyano-4-(ethylsulfanylthiocarbonylsulfanyl) pentanoicos &aacute;cido (CEP), y la resultante poly(PS&#x2087;&#x2084;-CEP) macro-CTA sol&iacute;a polimerice un segundo bloque de pol&iacute;mero de DMA con la transferencia de la cadena de adici&oacute;n-fragmentaci&oacute;n reversible (balsa). La formaci&oacute;n del pol&iacute;mero diblock poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) fue confirmada por los espectros de RMN de H &sup1; y gel de cromatograf&iacute;a de permeaci&oacute;n (GPC). Poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) forman micelas de 100 nm en medios acuosos seg&uacute;n lo confirmado por la dispersi&oacute;n de la luz din&aacute;mica (DLS) y microscop&iacute;a electr&oacute;nica de transmisi&oacute;n (TEM). Micelas cargadas con la droga modelo Nilo rojo y DiO fueron utilizados para demostrar el mecanismo de liberaci&oacute;n de drogas ROS dependientes de estas micelas despu&eacute;s del tratamiento con per&oacute;xido de hidr&oacute;geno (H&#x2082;O&#x2082;), 3-morpholinosydnonimine (SIN-1) y peroxinitrito. Estos oxidantes se encontraron para oxidar el n&uacute;cleo PPS micela, haci&eacute;ndolo m&aacute;s hidrof&iacute;lico y desencadenante desmontaje de la micela y liberaci&oacute;n de carga. Entrega de micelas poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) dual-cargado con el transferencia de energ&iacute;a de resonancia F&ouml;rster (FRET) fluor&oacute;foro par DiI y DiO sirvi&oacute; para demostrar que los oxidantes end&oacute;genos generan por lipopolisac&aacute;rido (LPS)-tratados macr&oacute;fagos RAW 264.7 aumentaron significativamente la liberaci&oacute;n de nanocarrier contenidos en relaci&oacute;n con los macr&oacute;fagos que no se activaron. Estudios in vitro tambi&eacute;n demostraron que las micelas de poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) eran cytocompatible en una amplia gama de concentraciones. Estos datos sugieren que las micelas poly(PS&#x2087;&#x2084;-b-DMA&#x2083;&#x2081;&#x2080;) sintetizadas usando una combinaci&oacute;n de TAGT y balsa tienen un potencial significativo para la entrega de la droga espec&iacute;fica a los tejidos con altos niveles de estr&eacute;s oxidativo.

Poly(PS-b-DMA) micelas de especies reactivas de ox&iacute;geno provoc&oacute; la liberaci&oacute;n del f&aacute;rmaco.

Macr&oacute;fagos representan un importante objetivo terap&eacute;utico, porque su actividad se ha implicado en la progresi&oacute;n de enfermedades como el c&aacute;ncer y arteriosclerosis debilitantes. En este trabajo, hemos dise&ntilde;ado y caracteriza las micelas polim&eacute;ricas sensibles al pH que fueron mannosylated con &quot;clic&quot; qu&iacute;mica para lograr CD206 (receptor de manosa)-objetivo entrega de siRNA. CD206 se expresa principalmente en los macr&oacute;fagos y c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas y alza en los macr&oacute;fagos asociada a tumor, un objetivo potencialmente &uacute;til para la terapia del c&aacute;ncer. Las nanopart&iacute;culas de mannosylated mejoraron la entrega de siRNA en macr&oacute;fagos primarias por 4 veces relativa a la entrega de una versi&oacute;n descartando de la misma compa&ntilde;&iacute;a (p &lt; 0.01). Adem&aacute;s, el tratamiento durante 24 h con los portadores de siRNA orientada a manosa alcanzado 87 &plusmn; 10% ca&iacute;da de un gen de modelo en macr&oacute;fagos primarios, un tipo de c&eacute;lulas que normalmente cuesta transfectar. Finalmente, estas nanopart&iacute;culas fueron reconocidas tambi&eacute;n con avidez y hab&iacute;a interiorizado por los macr&oacute;fagos humanos y facilitaron la entrega de siRNA m&aacute;s multiplicada en estas c&eacute;lulas que en l&iacute;neas de c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de mama de modelo. Anticipamos que estas manosa orientada del receptor, endosomolytic siRNA entrega nanopart&iacute;culas se convertir&aacute; en una tecnolog&iacute;a habilitadora para dirigir la actividad de los macr&oacute;fagos en varias enfermedades, especialmente aquellas en las que CD206 es alza en macr&oacute;fagos presentes dentro del sitio patol&oacute;gico. Este trabajo tambi&eacute;n establece una plataforma generalizable que podr&iacute;a ser aplicada para funcionalizaci&oacute;n &quot;clic&quot; con otros ligandos dirigida a dirigir la entrega de siRNA.

Interferencia de ARN de macr&oacute;fago espec&iacute;ficas dirigidas a trav&eacute;s de &quot;Click&quot;, Mannosylated micelas polim&eacute;ricas.

&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE3;&#x8868;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x4F7F;&#x4EBA;&#x8870;&#x5F31;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5982;&#x764C;&#x75C7;&#x3001; &#x52A8;&#x8109;&#x7CA5;&#x6837;&#x786C;&#x5316;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x548C;&#x7279;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&quot;&#x5355;&#x51FB;&quot;&#x5316;&#x5B66;&#x5B9E;&#x73B0; CD206 &#x7CD6;&#x5316; pH &#x54CD;&#x5E94;&#x6027;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x80F6;&#x675F; &#xFF08;&#x7518;&#x9732;&#x7CD6;&#x53D7;&#x4F53;)-&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684; siRNA &#x4EA4;&#x8D27;&#x3002;CD206 &#x4E3B;&#x8981;&#x5BF9;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E0A;&#x8C03;&#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80BF;&#x7624;&#x6CBB;&#x7597;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x7CD6;&#x5316;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#x6539;&#x5584; siRNA &#x4F20;&#x9001;&#x81F3;&#x4E3B;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7531;&#x5E74;&#x5229;&#x4EB2;&#x5C5E;&#x5230;&#x540C;&#x4E00;&#x627F;&#x8FD0;&#x4EBA; &#xFF08;p &lt; 0.01) nontargeted &#x7248;&#x672C;&#x7684;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6CBB;&#x7597; 24 h &#x7684;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x7518;&#x9732;&#x7CD6; siRNA &#x8F7D;&#x4F53;&#x5B9E;&#x73B0; 87 &plusmn; 10%&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x6A21;&#x578B;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x901A;&#x5E38;&#x96BE; nt-3 &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#x8D2A;&#x5A6A;&#x4E5F;&#x5F97;&#x5230;&#x4E86;&#x627F;&#x8BA4;&#x548C;&#x4EBA;&#x4F53;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x90E8;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5E2E;&#x52A9;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6BD4; 13-fold &#x66F4;&#x591A; siRNA &#x7684;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x5230;&#x6A21;&#x578B;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9884;&#x671F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7518;&#x9732;&#x7CD6;&#x53D7;&#x4F53;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;endosomolytic siRNA &#x4EA4;&#x4ED8;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#x5C06;&#x6210;&#x4E3A;&#x9488;&#x5BF9;&#x5404;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F; CD206 &#x5728;&#x4E0A;&#x8C03;&#x76EE;&#x524D;&#x75C5;&#x7406;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5185;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x4F7F;&#x80FD;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8FD8;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x5F52;&#x7EB3;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E3A;&quot;&#x5355;&#x51FB;&quot;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x76F4;&#x63A5; siRNA &#x4EA4;&#x4ED8;&#x529F;&#x80FD;&#x5316;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;

&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5B9A; RNA &#x5E72;&#x6270;&#x901A;&#x8FC7;&quot;&#x70B9;&#x51FB;&quot;&#xFF0C;&#x7CD6;&#x5316;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x80F6;&#x675F;&#x3002;

Macrophages represent an important therapeutic target, because their activity has been implicated in the progression of debilitating diseases such as cancer and atherosclerosis. In this work, we designed and characterized pH-responsive polymeric micelles that were mannosylated using "click" chemistry to achieve CD206 (mannose receptor)-targeted siRNA delivery. CD206 is primarily expressed on macrophages and dendritic cells and upregulated in tumor-associated macrophages, a potentially useful target for cancer therapy. The mannosylated nanoparticles improved the delivery of siRNA into primary macrophages by 4-fold relative to the delivery of a nontargeted version of the same carrier (p < 0.01). Further, treatment for 24 h with the mannose-targeted siRNA carriers achieved 87 Â± 10% knockdown of a model gene in primary macrophages, a cell type that is typically difficult to transfect. Finally, these nanoparticles were also avidly recognized and internalized by human macrophages and facilitated the delivery of 13-fold more siRNA into these cells than into model breast cancer cell lines. We anticipate that these mannose receptor-targeted, endosomolytic siRNA delivery nanoparticles will become an enabling technology for targeting macrophage activity in various diseases, especially those in which CD206 is upregulated in macrophages present within the pathologic site. This work also establishes a generalizable platform that could be applied for "click" functionalization with other targeting ligands to direct siRNA delivery.

Macrophage-Specific RNA Interference Targeting via "Click", Mannosylated Polymeric Micelles.

Macrophages repr&eacute;sentent une cible th&eacute;rapeutique importante, parce que leur activit&eacute; a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;e dans la progression de maladies comme le cancer et l&#39;ath&eacute;roscl&eacute;rose d&eacute;bilitantes. Dans ce travail, nous avons con&ccedil;u et caract&eacute;ris&eacute; des micelles polym&egrave;res pH-sensibles qui ont &eacute;t&eacute; mannosylated &agrave; l&#39;aide de &laquo; cliquer &raquo; chimie pour atteindre CD206 (r&eacute;cepteur du mannose)-cibl&eacute;e ARNsi. CD206 s&#39;exprime principalement sur les macrophages et les cellules dendritiques et surexprim&eacute;s dans les macrophages associ&eacute;es &agrave; la tumeur, une cible potentiellement utile pour le traitement du cancer. Les nanoparticules mannosylated am&eacute;lior&eacute; la prestation des siARN en macrophages primaires par 4 x relative &agrave; la livraison d&#39;une version non cibl&eacute;e du m&ecirc;me transporteur (p &lt; 0,01). En outre, traitement pendant 24 h avec les transporteurs de siARN ciblant mannose atteint 87 &plusmn; 10 % inactivation d&#39;un g&egrave;ne de mod&egrave;le dans les macrophages primaires, un type de cellule qui est en g&eacute;n&eacute;ral difficile &agrave; transfecter. Enfin, ces nanoparticules ont &eacute;t&eacute; reconnus aussi avidement et int&eacute;rioris&eacute;es par les macrophages humains et a facilit&eacute; la livraison des siARN plus significative dans ces cellules que dans les lign&eacute;es de cellules canc&eacute;reuses du sein mod&egrave;le. Nous pr&eacute;voyons que ces mannose r&eacute;cepteur cibl&eacute;, endosomolytic siRNA livraison nanoparticules deviendra une technologie habilitante pour cibler l&#39;activit&eacute; des macrophages dans diverses maladies, notamment ceux dans lesquels CD206 est augment&eacute;e dans les macrophages pr&eacute;sents au sein du site pathologique. Ce travail &eacute;tablit &eacute;galement une plate-forme g&eacute;n&eacute;ralisable qui pourrait &ecirc;tre appliqu&eacute;e pour la fonctionnalisation de &laquo; cliquer &raquo; avec d&#39;autres ligands ciblage pour diriger ARNsi.

Interf&eacute;rence ARN de macrophage sp&eacute;cifiques ciblant les Micelles polym&egrave;res par l&#39;interm&eacute;diaire de &laquo; Clic &raquo;, Mannosylated.

Makrophagen stellen ein wichtiges therapeutisches Ziel, da ihre T&auml;tigkeit in der Progression der schw&auml;chende Krankheiten wie Krebs und Arteriosklerose verwickelt hat. In dieser Arbeit, wir entwarfen und pH-Wert-responsive Polymere Mizellen, die waren Mannosylated, die mit &quot;click&quot; Chemie f&uuml;r die Erreichung CD206 gekennzeichnet (Mannose-Rezeptor)-gezielte SiRNA-Lieferung. CD206 dr&uuml;ckt sich in erster Linie auf Makrophagen und dendritischen Zellen und herraufreguliert im Tumor-assoziierten Makrophagen, ein potenziell n&uuml;tzliche Ziel f&uuml;r Krebstherapie. Die Mannosylated-Nanopartikeln verbessert die Anlieferung der SiRNA in prim&auml;ren Makrophagen durch 4fach gefaltete Verwandten zur Bereitstellung einer nontargeted Version des gleichen Carriers (p &lt; 0,01). Dar&uuml;ber hinaus erreicht Behandlung f&uuml;r 24 Stunden mit den Tr&auml;gern, Mannose-gerichteten SiRNA 87 &plusmn; 10 %-Niederschlag eines Modell-Gens in prim&auml;ren Makrophagen, einem Zelltyp, die in der Regel schwer bioaktiven ist. Schlie&szlig;lich diese Nanopartikel wurden auch eifrig erkannt und verinnerlicht durch menschliche Makrophagen und erleichtert die Anlieferung der Speicherumgebung weitere SiRNA in diese Zellen als in Modell-Brust-Krebs-Zelllinien. Wir erwarten, dass diese Mannose-Rezeptor-bezogene, Endosomolytic SiRNA Lieferung Nanopartikel, eine Basistechnologie werden wird f&uuml;r targeting Makrophagen-Aktivit&auml;t bei verschiedenen Krankheiten, vor allem diejenigen, die in dem CD206 herraufreguliert in Makrophagen innerhalb der pathologischer Website vorhanden ist. Diese Arbeit stellt auch eine generalisierbares Plattform, die f&uuml;r &quot;Klick&quot; Funktionalisierung mit anderen zielenden Liganden SiRNA Lieferung direkt &uuml;bernommen werden konnten.

Makrophage-spezifische RNA-Interferenz gezielt per &quot;Klick&quot;, Mannosylated Polymere Mizellen.

I macrofagi rappresentano un importante obiettivo terapeutico, perch&eacute; la loro attivit&agrave; &egrave; stato implicato nella progressione di malattie come il cancro e l&#39;arteriosclerosi invalidanti. In questo lavoro, abbiamo progettato e caratterizzato pH-sensibile micelle polimeriche che erano mannosylated utilizzando &quot;Clicca&quot; chimica per raggiungere CD206 (recettore del mannosio)-mirati siRNA consegna. CD206 &egrave; principalmente espressi sui macrofagi e cellule dendritiche e sovraregolati nei macrofagi associati al tumore, un target potenzialmente utile per la terapia del cancro. Le nanoparticelle mannosylated migliorato la consegna di siRNA in macrofagi primari da 4 volte relativa alla consegna di una versione immaturi del vettore stesso (p &lt; 0,01). Ulteriormente, il trattamento per 24 h con i vettori di siRNA mirate mannosio raggiunto 87 &plusmn; 10% atterramento di un gene di modello in macrofagi primari, un tipo di cellula che &egrave; in genere difficile da transfect. Infine, queste nanoparticelle sono state riconosciute anche avidamente e interiorizzata dai macrofagi umani e facilitato la consegna delle 13-fold pi&ugrave; siRNA in queste cellule che nel modello breast cancer cell lines. Anticipiamo che queste mannosio recettore-mirati, endosomolytic siRNA consegna nanoparticelle diventer&agrave; una tecnologia abilitante per l&#39;attivit&agrave; dei macrofagi in varie malattie, specialmente quelle in cui CD206 &egrave; sovraregolati nei macrofagi presenti all&#39;interno del sito patologico di targeting. Questo lavoro stabilisce anche una piattaforma generalizzabile che potrebbe essere applicata per &quot;fare clic&quot; funzionalizzazione con altri leganti targeting per dirigere siRNA consegna.

Interferenza del RNA specifico del macrofago Targeting tramite &quot;Clic&quot;, Mannosylated micelle polimeriche.

&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x764C;&#x3001;&#x52D5;&#x8108;&#x786C;&#x5316;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x3092;&#x8870;&#x5F31;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E0A;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x8A2D;&#x8A08;&#x306F;&#x3001;&#x300C;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x3066;&#x300D;CD206 &#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5316;&#x5B66;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; mannosylated &#x3055;&#x308C;&#x305F; pH &#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4; &#xFF08;&#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF09;-siRNA &#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30EA;&#x30FC;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3002;CD206 &#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x95A2;&#x9023;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3067;&#x4EA2;&#x9032;&#x304C;&#x3093;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Mannosylated &#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x306F;&#x540C;&#x3058;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2; (p &lt; 0.01) &#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3078;&#x306E; 4 &#x500D;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B; siRNA &#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;24 &#x6642;&#x9593;&#x6CBB;&#x7642;&#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x305F; siRNA &#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x3092; 87 &plusmn; 10% &#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x901A;&#x5E38; transfect &#x306B;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x643A;&#x5E2F;&#x578B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3067;&#x306E;&#x9054;&#x6210;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x3082;&#x71B1;&#x5FC3;&#x306B;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5185;&#x9762;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082; 13-fold &#x3088;&#x308A; siRNA &#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x4E73;&#x623F;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x3001;endosomolytic siRNA &#x914D;&#x4FE1;&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001;&#x7279;&#x306B; CD206 &#x5927;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x5185;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3067;&#x306F;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CE;&#x30ED;&#x30B8;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x4E88;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306F;&#x300C;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x3066;&#x300D;&#x9AD8;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5316; siRNA &#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x6307;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x6C4E;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x30DF;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x300C;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x300D;&#x3001;Mannosylated &#x7D4C;&#x7531;&#x3067;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E; RNA &#x5E72;&#x6E09;&#x3002;

&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC554;&#xACFC; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xACBD;&#xD654;&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC124;&#xACC4; &#xBC0F; pH &#xC751;&#xB2F5;&#xC131; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; micelles mannosylated &quot;&#xD074;&#xB9AD;&quot; &#xD654;&#xD559; cd206&#xB97C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB41C; &#xAC83;&#xC774; &#xD2B9;&#xC9D5; (&#xC2A4; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;)-siRNA &#xC804;&#xB2EC; &#xB300;&#xC0C1;. Cd206&#xB294; &#xC8FC;&#xB85C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; upregulated &#xC885;&#xC591; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC554; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Mannosylated &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790; 4-fold &#xC0C1;&#xB300; &#xD558; &#xC5EC; 1 &#xCC28; &#xB300; &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC19;&#xC740; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4; (p &lt; 0.01)&#xC758; nontargeted &#xBC84;&#xC804;&#xC758; &#xBC30;&#xB2EC; siRNA &#xC804;&#xB2EC; &#xD5A5;&#xC0C1;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC2A4; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; siRNA &#xC0AC;&#xC5C5;&#xC790;&#xC640; 24 &#xC2DC;&#xAC04; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; transfect &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; 87 &plusmn; 10% &#xCD5C;&#xC800; &#xB2EC;&#xC131;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790; &#xC778;&#xAC04; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB0B4; &#xBA74; &#xACE0; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140;&#xC73C;&#xB85C; 13-fold &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; siRNA &#xC804;&#xB2EC; &#xCD09;&#xC9C4; &#xB610;&#xD55C; avidly&#xC744; &#xC778;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305;&#xC774; &#xC2A4; endosomolytic siRNA &#xC804;&#xB2EC; &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790; &#xD2B9;&#xD788; CD206 upregulated pathologic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAE30;&#xC220;&#xC774; &#xB420; &#xAC83; &#xC608;&#xC0C1;. &#xC774; &#xC791;&#xD488; &#xB610;&#xD55C; siRNA &#xC804;&#xB2EC; &#xC9C1;&#xC811; &#xB2E4;&#xB978; &#xB300;&#xC0C1; ligands&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5;&#xD654; &quot;&#xD074;&#xB9AD;&quot;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xD654;&#xD560; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&quot;&#xD074;&#xB9AD;&quot;, Mannosylated &#xD1B5;&#xD574; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; Micelles&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; macrophage &#xD2B9;&#xC815; RNA &#xAC04;&#xC12D;.

&#x5BF9;&#x6E29;&#x5EA6;&#x548C; ph &#x503C;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x6CE8;&#x5C04;&quot;&#x667A;&#x80FD;&quot;&#x5FAE;&#x7403;&#x5DF2;&#x634F;&#x9020;&#x548C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5BF9;&#x7F3A;&#x8840;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x3002;&#x56FE;&#x4E66;&#x9986;&#x7684;&#x5171;&#x805A;&#x7269;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684; N-&#x5F02;&#x4E19;&#x57FA;&#x4E19;&#x70EF;&#x9170;&#x80FA; (NIPAAm) &#x4E19;&#x916F;&#x4E19;&#x70EF;&#x9178; (PAA) &#x548C;&#x4E19;&#x70EF;&#x9178;&#x4E01;&#x916F; (BA) &#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x5236;&#x9020;&#x5FAE;&#x7403;&#x4F7F;&#x7528;&#x53CC;&#x4E73;&#x6DB2;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7531;&#x5171;&#x805A;&#x7269;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684; 57mol.%NIPAAm&#xFF0C;18mol.%&#x4E34;&#x65F6;&#x673A;&#x573A;&#x7BA1;&#x7406;&#x5C40;&#x548C; 25mol.%BA &#x5171;&#x805A;&#x7269;&#x5236;&#x6210;&#x6700;&#x4F73;&#x914D;&#x65B9;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x5728; 37 &deg; C&#x3001; ph &#x503C;&#x4EE3;&#x8868;&#x7684;&#x7F3A;&#x8840;&#x6027;&#x808C; (&#x5373; ph &#x503C; 5.2-7.2&#xFF09;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5FAE;&#x7403;&#x4EA7;&#x751F;&#x6301;&#x7EED;&#x3001; &#x6269;&#x6563;&#x63A7;&#x5236;&#x91CA;&#x653E;&#x548C;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x751F;&#x7406; ph &#x503C; (&#x5373; pH 7.4)&#xFF0C;&#x5728;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7ECF;&#x5386;&#x4E86;&#x6EB6;&#x51FA;&#x5EA6;&#x548C;&#x5FEB;&#x901F;&#x901A;&#x5173;&#x3002;&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; 2 &#x7684;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x786E;&#x8BA4;&#x5FAE;&#x7403;&#x5C01;&#x88C5;&#x53D1;&#x5E03;&#x57FA;&#x4E8E; NIH3T3 &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x589E;&#x52A0;&#x540E;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x7559;&#x8BE5;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x5FAE;&#x7403;&#x52A0;&#x8F7D;&#x6216;&#x514D;&#x8D39; Cy5.5 &#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#x6CE8;&#x5165;&#x7F3A;&#x8840;&#x6027;&#x548C;&#x63A7;&#x5236; gastrocnemii &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x540E;&#x5355;&#x65B9;&#x9762;&#x611F;&#x5E94;&#x7684;&#x540E;&#x80A2;&#x7F3A;&#x8840;&#x6A21;&#x578B;&#x5916;&#x5468;&#x52A8;&#x8109;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;3.5 &#x548C; 7 &#x5929;&#x5728;&#x80A2;&#x4F53;&#x7F3A;&#x8840;&#xFF0C;&#x5728;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0E;&#x6CE8;&#x5165;&#x514D;&#x8D39;&#x86CB;&#x767D;&#x5FAE;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x9AD8;&#x672C;&#x5730;&#x4FDD;&#x7559; (p &lt; 0.05&#xFF09;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x5FAE;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6E05;&#x62C6;&#x884C;&#x52A8;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E;&#x514D;&#x8D39;&#x86CB;&#x767D;&#x4EE5;&#x540E;&#x5BF9;&#x5E94;&#x7F3A;&#x8840;&#x6027;&#x7684;&#x6062;&#x590D;&#xFF0C;&#x5728;&#x6B64;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x8153;&#x80A0;&#x808C;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5FAE;&#x7403;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EA7;&#x751F;&#x4EFB;&#x4F55;&#x663E;&#x5FAE;&#x6CE8;&#x5C04;&#x90E8;&#x4F4D;&#x9644;&#x8FD1;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x8FF9;&#x8C61;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x5408;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x672C;&#x6587;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684; ph &#x503C;&#x548C;&#x6E29;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x5FAE;&#x7403;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x524D;&#x9014;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x5E73;&#x53F0;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#x7F3A;&#x8840;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#x7F3A;&#x8840;&#x8111;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x53CC;&#x91CD; ph &#x503C;&#x548C;&#x6E29;&#x5EA6;-&#x5E73;&#x7B49;&#x7684;&#x5FAE;&#x7C92;&#x3002;

Injectable "smart" microspheres that are sensitive to both temperature and pH have been fabricated and tested for controlled delivery of therapeutic proteins to ischemic skeletal muscle. A library of copolymers composed of N-isopropyl acrylamide (NIPAAm), propyl acrylic acid (PAA) and butyl acrylate (BA) was used to fabricate microspheres using a double emulsion method, and an optimal formulation made from copolymers composed of 57mol.% NIPAAm, 18mol.% PAA and 25mol.% BA copolymers was identified. At 37Â°C and pH representative of ischemic muscle (i.e. pH 5.2-7.2), these microspheres produced sustained, diffusion-controlled release, and at normal, physiological pH (i.e. pH 7.4), they underwent dissolution and rapid clearance. Delivery of fibroblast growth factor 2 was used to confirm that protein bioactivity was retained following microsphere encapsulation/release based on a dose-dependent increase in NIH3T3 fibroblast proliferation in vitro. Microsphere-loaded or free Cy5.5-labeled albumin was injected into ischemic and control gastrocnemii of mice following unilateral induction of hind limb ischemia to model peripheral arterial disease. In the ischemic limb at days 3.5 and 7, there was higher local retention of the protein delivered via microspheres relative to injected free protein (p<0.05). However, clearance of protein delivered via microspheres was equivalent to free protein at later time points that correspond to ischemic recovery in this model. Finally, histological analysis of the gastrocnemius revealed that the polymeric microspheres did not produce any microscopic signs of toxicity near the injection site. These combined results suggest that the pH- and temperature-responsive microspheres presented herein are a promising technological platform for controlled protein delivery to ischemic tissue.

Dual pH- and temperature-responsive microparticles for protein delivery to ischemic tissues.

Injectables microsph&egrave;res &laquo; intelligentes &raquo; qui sont sensibles &agrave; la temp&eacute;rature et le pH ont &eacute;t&eacute; fabriqu&eacute;s et test&eacute;s pour des livraisons surveill&eacute;es de prot&eacute;ines th&eacute;rapeutiques dans le muscle squelettique isch&eacute;mique. Une biblioth&egrave;que de copolym&egrave;res compos&eacute; de N-isopropyl acrylamide (NIPAAm), acide acrylique de propyle (AAP) acrylate de butyle (BA) a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; pour fabriquer des microsph&egrave;res en utilisant une m&eacute;thode de double &eacute;mulsion et une formulation optimale de copolym&egrave;res compos&eacute;es de 57mol.% NIPAAm, 18mol.% AAP et copolym&egrave;res BA 25mol.% a &eacute;t&eacute; identifi&eacute;e. &Agrave; 37 &deg; C et &agrave; pH repr&eacute;sentatif du muscle isch&eacute;mique (c.-&agrave;-d. pH 5.2-7.2), ces microsph&egrave;res produit lib&eacute;ration soutenue et contr&ocirc;l&eacute;e par la diffusion, et &agrave; un pH normal, physiologique (pH 7,4), ils subissent la dissolution et le d&eacute;douanement rapide. Livraison du facteur de croissance fibroblastique 2 a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; pour confirmer que la bioactivit&eacute; de la prot&eacute;ine a &eacute;t&eacute; retenue apr&egrave;s des microsph&egrave;res encapsulation/version bas&eacute;e sur une augmentation dose-d&eacute;pendante dans la prolif&eacute;ration des fibroblastes NIH3T3 in vitro. Microsph&egrave;res charg&eacute;es ou gratuit albumine marqu&eacute;e Cy5. 5 a &eacute;t&eacute; inject&eacute; dans isch&eacute;mique et gastrocn&eacute;miens de souris apr&egrave;s induction unilat&eacute;rale de l&#39;isch&eacute;mie du membre post&eacute;rieur de la maladie art&eacute;rielle p&eacute;riph&eacute;rique de mod&egrave;le de contr&ocirc;le. Dans la branche isch&eacute;mique 3.5 et 7 jours, il y avait une r&eacute;tention locale plus &eacute;lev&eacute;e de la prot&eacute;ine envoy&eacute;e par l&#39;interm&eacute;diaire de microsph&egrave;res par rapport aux prot&eacute;ines libres inject&eacute;e (p &lt; 0,05). Cependant, clairance de prot&eacute;ine envoy&eacute;e par l&#39;interm&eacute;diaire de microsph&egrave;res a &eacute;t&eacute; &eacute;quivalente &agrave; la prot&eacute;ine libre aux p&eacute;riodes ult&eacute;rieures qui correspondent &agrave; une r&eacute;cup&eacute;ration isch&eacute;mique dans ce mod&egrave;le. Enfin, l&#39;analyse histologique de la gastrocn&eacute;mien a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les microsph&egrave;res polym&eacute;riques ne produisent pas des signes microscopiques de toxicit&eacute; pr&egrave;s du site d&#39;injection. Ces r&eacute;sultats combin&eacute;s donnent &agrave; penser que les microsph&egrave;res de pH et temp&eacute;rature-sensibles pr&eacute;sent&eacute;es ici sont prometteur d&#39;une plateforme technologique pour la livraison de la prot&eacute;ine contr&ocirc;l&eacute;e aux tissus isch&eacute;miques.

Microparticules double pH et temp&eacute;rature-sensibles pour la livraison de prot&eacute;ines dans les tissus isch&eacute;miques.

Injizierbare &quot;intelligente&quot; Mikrosph&auml;ren, die empfindlich auf Temperatur und pH-Wert sind wurden hergestellt und f&uuml;r kontrollierte Lieferung therapeutischer Proteine zu isch&auml;mischen Skelettmuskulatur getestet. Eine Bibliothek von Copolymere von N-Isopropyl Acrylamid (NIPAAm), Propyl Acryls&auml;ure (PAA) komponiert und Butylacrylat (BA) wurde verwendet, um die Mikrosph&auml;ren, die mit einer doppelten Emulsion-Methode zu fabrizieren und eine optimale Formulierung aus Copolymeren bestehend aus 57mol.% NIPAAm, 18mol.% PAA und 25mol.% BA Copolymere hergestellt wurde identifiziert. Bei 37 &deg; C und pH repr&auml;sentativ f&uuml;r isch&auml;mische Muskel (d.h. pH-Wert 5.2-7.2) diese Mikrosph&auml;ren produziert nachhaltig, Verbreitung-kontrollierte Freigabe und bei normalen, physiologischen pH-Wert (d.h. pH 7,4), unterzog sie Aufl&ouml;sung und schnelle Abfertigung. Lieferung von Fibroblasten-Wachstumsfaktor 2 wurde verwendet, um best&auml;tigen, dass dieses Protein Bioaktivit&auml;t nach Microsphere Kapselung/Ver&ouml;ffentlichung basiert auf eine dosisabh&auml;ngige Zunahme NIH3T3 Fibroblasten Verbreitung in-vitro wurde beibehalten. Mikrosph&auml;ren geladen oder kostenlose Cy5.5-beschrifteten Albumin war isch&auml;mischen eingespritzt und Gastrocnemii von M&auml;usen nach einseitige Induktion von Hind Limb Ischemia auf periphere arterielle Verschlusskrankheit Modell zu steuern. In der isch&auml;mischen Extremit&auml;t 3,5 und 7 Tage, gab es h&ouml;here lokale Speicherung des Proteins &uuml;ber Mikrosph&auml;ren relativ injizierten freie Protein geliefert (p &lt; 0,05). Abstand des Proteins &uuml;ber Mikrosph&auml;ren geliefert entsprach jedoch freie Protein zu sp&auml;teren Zeitpunkten, die isch&auml;mische Erholung in diesem Modell entsprechen. Schlie&szlig;lich ergab histologische Analyse der Wadenmuskel, dass Polymeren Mikrosph&auml;ren mikroskopisch kleine Anzeichen von Toxizit&auml;t in der N&auml;he der Einstichstelle nicht ausgewirkt habe. Diese kombinierten Ergebnisse schlagen vor, da&szlig; die pH-Wert und Temperatur-responsive Mikrosph&auml;ren, die hier aufgef&uuml;hrten eine vielversprechende technologische Plattform f&uuml;r kontrollierte Protein Lieferung zu isch&auml;mischen Gewebe sind.

Dual pH-Wert - und Temperatur-responsive Mikropartikel f&uuml;r Protein-&Uuml;bermittlung an isch&auml;mischen Gewebe.

Iniettabile microsfere &quot;intelligenti&quot; che sono sensibili alla temperatura e il pH sono state realizzate e testate per la consegna controllata di proteine terapeutiche di muscolo scheletrico ischemico. Una libreria di copolimeri composto N-isopropil acrilamide (NIPAAm), acrilato di propile (PAA) acrilato di butile (BA) &egrave; stato usato per fabbricare microsfere utilizzando un metodo di doppia emulsione e una formulazione ottimale da copolimeri composti 57mol.% NIPAAm, 18mol.% PAA e copolimeri BA 25mol.% &egrave; stato identificato. A 37 &deg; C e a pH rappresentativi del muscolo ischemico (cio&egrave; pH 5.2-7.2), queste microsfere prodotto rilascio sostenuto e controllato di diffusione, e sottopose a pH fisiologico, normale (cio&egrave; pH 7,4), scioglimento e liquidazione rapida. Consegna del fattore di crescita del fibroblasto 2 &egrave; stato utilizzato per confermare che bioattivit&agrave; della proteina &egrave; stato mantenuto dopo microsfere incapsulamento e rilasciare basato su un aumento dose-dipendente della proliferazione dei fibroblasti NIH3T3 in vitro. Albumina marcato incubiamo caricato di microsfere o libero &egrave; stato iniettato in ischemico e gastrocnemii dei topi dopo induzione unilaterale di ischemia degli arti posteriori per malattia arteriosa periferica modello di controllo. Dell&#39;arto ischemico a giorni 3.5 e 7, c&#39;era maggiore ritenzione locale della proteina consegnata tramite microsfere rispetto alla proteina libera iniettata (p &lt; 0,05). Tuttavia, liquidazione della proteina consegnata tramite microsfere era equivalente a proteina gratuita presso punti di tempo pi&ugrave; tardi che corrispondono al recupero ischemico in questo modello. Infine, l&#39;analisi istologica del gastrocnemio ha rivelato che le microsfere polimeriche non hanno prodotto alcun microscopici segni di tossicit&agrave; nei pressi del sito di iniezione. Questi risultati combinati suggeriscono che le microsfere di pH e temperatura-sensibile presentate qui sono una promettente piattaforma tecnologica per la consegna di proteine controllato al tessuto ischemico.

Microparticelle Dual pH e temperatura-reattivo per la consegna di proteine ai tessuti ischemici.

PH &#x3068;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x6CE8;&#x5C04;&#x306E;&#x300C;&#x30B9;&#x30DE;&#x30FC;&#x30C8;&#x300D;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x6CBB;&#x7642;&#x86CB;&#x767D;&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x865A;&#x8840;&#x6027;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x3078;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;N &#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EB; &#x30A2;&#x30AF;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E; &#xFF08;NIPAAm) &#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EB; &#x30A2;&#x30AF;&#x30EA;&#x30EB;&#x9178; &#xFF08;PAA&#xFF09; &#x5171;&#x91CD;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30EA;&#x30EB;&#x9178;&#x30D6;&#x30C1;&#x30EB; &#xFF08;BA&#xFF09;&#x3001;&#x30C0;&#x30D6;&#x30EB; &#x30A8;&#x30DE;&#x30EB;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7403;&#x306B;&#x4F7F;&#x308F;&#x308C;&#x305F; 57mol.% NIPAAm&#x3001;18mol.% PAA &#x3068; 25mol.% BA &#x5171;&#x91CD;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x5171;&#x91CD;&#x5408;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x5B9A;&#x5F0F;&#x5316;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;37 &deg; C &#x3068; pH (&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061; pH 5.2-7.2)&#x3001;&#x865A;&#x8840;&#x6027;&#x7B4B;&#x306E;&#x4EE3;&#x8868;&#x7684;&#x306A;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x751F;&#x6210;&#x6301;&#x7D9A;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x306E; pH (&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061; pH 7.4) &#x3067;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x89E3;&#x6563;&#x3068;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 2 &#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x305D;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7403;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;/&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306B;&#x5897;&#x52A0; NIH3T3 &#x7D30;&#x80DE;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x4F53;&#x5916;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x4FDD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7403;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7121;&#x6599;&#x306E; Cy5.5 &#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x306F;&#x865A;&#x8840;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x5236;&#x5FA1;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x672B;&#x68A2;&#x52D5;&#x8108;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x4E0B;&#x80A2;&#x865A;&#x8840;&#x306E;&#x4E00;&#x65B9;&#x7684;&#x306A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E; gastrocnemii&#x3002;&#x865A;&#x8840;&#x6027;&#x80A2;&#x65E5; 3.5 &#x304A;&#x3088;&#x3073; 7 &#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x7121;&#x6599;&#x76F8;&#x5BFE;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x914D;&#x4FE1;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F; (p &lt; 0.05)&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7403;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x914D;&#x4FE1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x865A;&#x8840;&#x6027;&#x56DE;&#x5FA9;&#x5F8C;&#x306E;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x306B;&#x76F8;&#x5F53;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;&#x8153;&#x8179;&#x7B4B;&#x306E;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x6BD2;&#x6027;&#x6CE8;&#x5C04;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x306E;&#x5FAE;&#x7D30;&#x306A;&#x5146;&#x5019;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F; pH &#x3068;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7403;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x865A;&#x8840;&#x7D44;&#x7E54;&#x3078;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x305F;&#x3093;&#x3071;&#x304F;&#x8CEA;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB; pH &#x3068;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5FDC;&#x7B54;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30EA;&#x30FC;&#x865A;&#x8840;&#x7D44;&#x7E54;&#x3078;&#x3002;

&#xC628;&#xB3C4; Ph&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC8FC;&#xC0AC; &quot;&#xC2A4;&#xB9C8;&#xD2B8;&quot; microspheres &#xC870;&#xC791; &#xB418; &#xACE0; &#xD5C8; &#xD608; &#xC131; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721;&#xC744; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB41C; &#xBC30;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. N-&#xC774;&#xC18C;&#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xC544;&#xD06C;&#xB9B4; &#xC544; &#xBBF8;&#xB4DC; (NIPAAm), propyl &#xC544;&#xD06C;&#xB9B4;&#xC0B0; (PAA)&#xC758; &#xACF5;&#xC911; &#xD569;&#xCCB4;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xBD80; &#xD2F8; &#xC544;&#xD06C;&#xB9B4; (BA) microspheres &#xB354;&#xBE14; &#xC720;&#xC81C; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C; &#xACF5;&#xC911; &#xD569;&#xCCB4; 57mol.% NIPAAm, 18mol.% PAA &#xBC0F; 25mol.% BA &#xACF5;&#xC911; &#xD569;&#xCCB4;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9CC;&#xB4E0; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xBC30;&#xD569; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. 37 &#x2103;&#xC640; Ph&#xC758; &#xD5C8; &#xD608; &#xC131; &#xADFC;&#xC721; (&#xC989;, pH 5.2-7.2), &#xB300;&#xD45C;&#xC774; microspheres &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xD655;&#xC0B0; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xACFC; &#xC815;&#xC0C1;, &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; pH (&#xC989;, pH 7.4)&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD574;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; &#xD5C8;&#xAC00; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 2 &#xBC30;&#xB2EC; &#xADF8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; bioactivity microsphere &#xCEA1;&#xC290;&#xD654;/&#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; NIH3T3 fibroblast &#xD655;&#xC0B0; &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; &#xD655;&#xC778;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Microsphere &#xB85C;&#xB4DC; &#xB610;&#xB294; &#xBB34;&#xB8CC; Cy5.5 &#xB77C;&#xB294; &#xBBFC;&#xC5D0; &#xD5C8; &#xD608; &#xC131; &#xC8FC;&#xC785; &#xD588;&#xB2E4; &#xC950; &#xB4B7; &#xB2E4;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC9C0; &#xD5C8; &#xD608;&#xC758; &#xC77C;&#xBC29;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xB3C4; &#xBAA8;&#xB378; &#xB9D0; &#xCD08; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; gastrocnemii&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC640;. 3.5-7 &#xC77C;&#xC5D0; &#xD5C8; &#xD608; &#xC131; &#xB2E4;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xB294; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; &#xBB34;&#xB8CC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; microspheres &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xBCF4;&#xC874; (p &lt; 0.05). &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; microspheres &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBB34;&#xB8CC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774;&#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD5C8; &#xD608; &#xC131; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB098;&#xC911;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;,&#xB294; gastrocnemius&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xD559; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; microspheres &#xB3C5;&#xC131; &#xC0AC;&#xCD9C; &#xD604;&#xC7A5; &#xADFC;&#xCC98;&#xC758; &#xBBF8;&#xC138;&#xD55C; &#xD754;&#xC801;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; pH &#xBC0F; &#xC628;&#xB3C4; &#xBC18;&#xC751; microspheres &#xD5C8; &#xD608; &#xC131; &#xC870;&#xC9C1; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB0A9;&#xD488;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xB9DD; &#xAE30;&#xC220; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xACFC; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD5C8; &#xD608; &#xC131; &#xC870;&#xC9C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC30;&#xB2EC; &#xB4C0;&#xC5BC; pH &#xBC0F; &#xC628;&#xB3C4;-&#xC751;&#xB2F5; &#xBBF8;.

Microesferas inyectables de &quot;inteligentes&quot; que son sensibles a la temperatura y el pH han sido fabricadas y probados para liberaci&oacute;n controlada de prote&iacute;nas terap&eacute;uticas al m&uacute;sculo esquel&eacute;tico isqu&eacute;mico. Compuesto de una biblioteca de copol&iacute;meros de acrilamida N-isopropyl (NIPAAm), &aacute;cido acr&iacute;lico de propilo (PAA) y acrilato de butilo (BA) fue utilizado para la fabricaci&oacute;n de microesferas utilizando un m&eacute;todo de doble emulsi&oacute;n, y una formulaci&oacute;n &oacute;ptima de copol&iacute;meros compuestas por 57mol.% NIPAAm, 18mol.% PAA y copol&iacute;meros de BA 25mol.% fue identificada. A 37 &deg; C y pH representativo del m&uacute;sculo isqu&eacute;mico (es decir, pH 5.2-7.2), estas microesferas producci&oacute;n liberaci&oacute;n sostenida y controlada por difusi&oacute;n, y a pH fisiol&oacute;gico, normal (es decir, pH 7.4), experimentaron la disoluci&oacute;n y separaci&oacute;n r&aacute;pida. Entrega de factor de crecimiento fibrobl&aacute;stico 2 fue utilizado para confirmar que eso bioactividad de la prote&iacute;na se mantuvo tras microesfera encapsulaci&oacute;n/liberaci&oacute;n basado en un aumento dosis-dependiente en la proliferaci&oacute;n de fibroblastos NIH3T3 in vitro. Alb&uacute;mina marcado Cy5.5 microesferas cargadas o libre se inyect&oacute; en isqu&eacute;mica y control gastrocnemii de ratones tras inducci&oacute;n unilateral de hind revascularizables a enfermedad arterial perif&eacute;rica del modelo. En la extremidad isqu&eacute;mica 3,5 y 7 d&iacute;as, hubo mayor retenci&oacute;n de local de la prote&iacute;na suministrada a trav&eacute;s de microesferas en relaci&oacute;n con la prote&iacute;na libre inyectada (p &lt; 0.05). Sin embargo, la separaci&oacute;n de prote&iacute;na suministrada a trav&eacute;s de microesferas equival&iacute;a a prote&iacute;na libre en momentos posteriores que corresponden a la recuperaci&oacute;n isqu&eacute;mica en este modelo. Finalmente, el an&aacute;lisis histol&oacute;gico del gastrocnemius revel&oacute; que las microesferas polim&eacute;ricas no produjo trazas microsc&oacute;picas de toxicidad cerca del sitio de la inyecci&oacute;n. Estos resultados combinados sugieren que las microesferas de pH y temperatura-sensibles presentadas son una prometedora plataforma tecnol&oacute;gica para la entrega controlada de la prote&iacute;na al tejido isqu&eacute;mico.

Article	Year
Sustained local delivery of siRNA from an injectable scaffold. Biomaterials\| PubMed ID: 22061489	2012
Poly(PS-b-DMA) micelles for reactive oxygen species triggered drug release. Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society\| PubMed ID: 22889714	2012
Macrophage-Specific RNA Interference Targeting via "Click", Mannosylated Polymeric Micelles. Molecular pharmaceutics\| PubMed ID: 23331322	2013
Dual pH- and temperature-responsive microparticles for protein delivery to ischemic tissues. Acta biomaterialia\| PubMed ID: 23402764	2013

Christopher E. Nelson

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