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Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of &beta;-cell Mass Distribution in Diabetes Research

By adapting OPT to include the capability of imaging in the near infrared (NIR) spectrum, we here illustrate the possibility to image larger bodies of ...

umeå university

&#x7535;&#x5B50;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6269;&#x5C55;&#x7684; F&ouml;rster &#x7406;&#x8BBA; (EFT) &#x63D0;&#x4EA4;&#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x8367;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x548C;&#x6781;&#x5316;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x3002;EFT&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4ECE;&#x968F;&#x673A;&#x5218;&#x7EF4;&#x65B9;&#x7A0B;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5FAE;&#x89C2;&#x4FE1;&#x606F;&#x5173;&#x4E8E;&#x8C03;&#x6574;&#x76F8;&#x5173;&#x65F6;&#x95F4;&#xFF0C;&#x987A;&#x5E8F;&#x53C2;&#x6570;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x9664;&#x6709;&#x8272;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB;&#x3002;&#x5404;&#x5411;&#x540C;&#x6027;&#x548C;&#x5404;&#x5411;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5F31;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x6350;&#x52A9;&#x548C;&#x627F;&#x5151;&#x4EBA;&#x7FA4;&#x4F53;&#xFF0C;&#x91CD;&#x65B0;&#x8C03;&#x6574;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BF9;&#x660E;&#x667A;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x3002;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6240;&#x793A;&#x4E0D;&#x53EA;&#x505A;&#x6211;&#x4EEC;&#x9700;&#x8981;&#x8003;&#x8651;&#x8F6C;&#x578B;&#x5076;&#x6781;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4F46;&#x66F4;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x5BF9;&#x5185;&#x90E8;&#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x628A;&#x5206;&#x5B50;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x53D6;&#x5411;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;&#x540E;&#x8005;&#x786E;&#x5B9A;&#x5F62;&#x72B6;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x6350;&#x52A9;&#x8367;&#x5149;&#x548C;&#x6781;&#x5316;&#x8870;&#x53D8;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5F80;&#x5F80;&#x4E0D;&#x5355;&#x4E00;&#x6307;&#x6570;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x3002;&#x5B83;&#x8868;&#x660E;&#x5E38;&#x7528;&#x7684; F&ouml;rster &#x7406;&#x8BBA;&#x662F; EFT &#x7684;&#x7279;&#x6B8A;&#x60C5;&#x51B5;&#x3002;EFT&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4F7F;&#x5F97;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5E03;&#x6717;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x6A21;&#x62DF;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x63D0;&#x51FA;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

&#x5206;&#x6790;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5185;&#x4F53;-&#x53D7;&#x4F53;&#x5BF9;&#x7535;&#x5B50;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB;&#x3002;

An extended FÃ¶rster theory (EFT) on electronic energy transfer is presented for the quantitative analysis of time-resolved fluorescence lifetime and depolarisation experiments. The EFT, which was derived from the stochastic Liouville equation, yields microscopic information concerning the reorientation correlation times, the order parameters, as well as inter chromophoric distances. Weakly interacting donor and acceptor groups, which reorient and interact in a pair wise fashion, are considered, under isotropic and anisotropic conditions. For the analysis of experiments it is shown that not only do we need to consider the orientational distributions of the transition dipoles, but the internal reorienting molecular dynamics within the pair which is of even greater importance. The latter determines the shape as well as the rate of the observed donor fluorescence and depolarisation decays, which are most often not mono-exponential functions. It is shown that the commonly used FÃ¶rster theory is a special case of the EFT. Strategies are presented for applying the EFT, which makes use of Brownian dynamics simulation.

On the quantitative molecular analysis of electronic energy transfer within donor-acceptor pairs.

Une longue th&eacute;orie de F&ouml;rster (EFT) sur le transfert d&#39;&eacute;nergie &eacute;lectronique est pr&eacute;sent&eacute;e pour l&#39;analyse quantitative des exp&eacute;riences de vie et de d&eacute;polarisation de time-resolved fluorescence. L&#39;EFT, qui a &eacute;t&eacute; d&eacute;riv&eacute;e de l&#39;&eacute;quation de Liouville stochastique, rendements microscopiques d&#39;informations concernant les temps de corr&eacute;lation de r&eacute;orientation, les param&egrave;tres de la commande, ainsi qu&#39;inter distances chromophores. Interagissant faiblement donneur et accepteur groupes qui r&eacute;orientent et interagissent de mani&egrave;re sage paire, sont consid&eacute;r&eacute;s, dans des conditions isotropes et anisotropes. Pour l&#39;analyse des exp&eacute;riences, il est d&eacute;montr&eacute; que non seulement avons-nous besoin de consid&eacute;rer les distributions d&#39;orientationnels des dip&ocirc;les de transition, mais la dynamique mol&eacute;culaire r&eacute;orientation interne au sein de la paire qui rev&ecirc;t une importance encore plus grande. Ce dernier d&eacute;termine la forme ainsi que le taux de la d&eacute;sint&eacute;gration de la fluorescence et la d&eacute;polarisation donneur observ&eacute;es, qui sont la plupart des fonctions souvent pas mono-exponentielles. Il est d&eacute;montr&eacute; que la th&eacute;orie de F&ouml;rster couramment utilis&eacute;e est un cas particulier de l&#39;EFT. Strat&eacute;gies sont pr&eacute;sent&eacute;es pour l&#39;application de l&#39;EFT, qui rend l&#39;utilisation de la simulation dynamique brownienne.

Sur l&#39;analyse mol&eacute;culaire quantitative de transfert d&#39;&eacute;nergie &eacute;lectronique dans des paires de donneur-accepteur.

Eine erweiterte F&ouml;rster-Theorie auf elektronischen Energie-Transfer (EFT) wird der quantitativen Analyse der Zeit aufgel&ouml;st Fluoreszenz-Lebensdauer und Depolarisierung-Experimente vorgestellt. Die EFT, die von der stochastischen Liouville-Gleichung abgeleitet wurde, liefert mikroskopische Informationen bez&uuml;glich der Neuausrichtung Korrelation Times, die Auftrags-Parameter als auch inter Chromophore Entfernungen. Schwach wechselwirkende Spender und Akzeptor Gruppen, die Empfangsantenne und in ein paar kluge Weise interagieren, isotrope und anisotrope Bedingungen gelten. F&uuml;r die Analyse von Experimenten ist nachgewiesen, dass nicht nur wir m&uuml;ssen die Richtpreise Distributionen im &Uuml;bergang-Dipole, aber die interne Bedrohungspotenzial Molekulare Dynamik innerhalb des Paares zu pr&uuml;fen, die von noch gr&ouml;&szlig;erer Bedeutung ist. Letzterer bestimmt die Form als auch die Rate der beobachteten Spender Fluoreszenz und Depolarisierung zerf&auml;llt, die meisten oft nicht Mono-Exponentialfunktionen sind. Es wird gezeigt, dass die h&auml;ufig verwendete F&ouml;rster-Theorie ein Spezialfall der EFT ist. Strategien werden vorgestellt, f&uuml;r die Anwendung der EFT, die Brownsche Molek&uuml;ldynamik-Simulation verwendet.

&Uuml;ber die quantitative molekulare Analyse der elektronischen Energie-Transfer innerhalb von Donor-Akzeptor-Paare.

Un&#39;estesa teoria F&ouml;rster (EFT) sul trasferimento di energia elettronica &egrave; presentata per l&#39;analisi quantitativa degli esperimenti di vita e depolarizzazione time-resolved di fluorescenza. L&#39;EFT, che &egrave; stata derivata dall&#39;equazione di Liouville stocastica, produce microscopiche informazioni riguardanti i tempi di correlazione di riorientamento, i parametri di ordine, cos&igrave; come inter cromofori distanze. Debolmente interagenti donatore e accettore gruppi, quale riorientano e interagiscono in maniera saggia coppia, sono considerati, sotto condizioni isotropiche e anisotropiche. Per l&#39;analisi di esperimenti si &egrave; dimostrato che non solo abbiamo bisogno di prendere in considerazione le distribuzioni orientazionali dei dipoli di transizione, ma l&#39;interno riorientare dinamica molecolare all&#39;interno della coppia che &egrave; di importanza ancora maggiore. Quest&#39;ultimo determina la forma cos&igrave; come il tasso di decadimento di fluorescenza e depolarizzazione il donatore osservati, sono la maggior parte delle funzioni spesso non mono-esponenziale. &Egrave; dimostrato che la teoria di F&ouml;rster comunemente usata &egrave; un caso speciale dell&#39;EFT. Strategie sono presentati per l&#39;applicazione di EFT, che fa uso della simulazione dinamica browniana.

Sull&#39;analisi molecolare quantitativa di trasferimento elettronico di energia all&#39;interno di coppie donatore-accettore.

&#x62E1;&#x5F35;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC; &#x30FB;&#x7406;&#x8AD6; &#xFF08;EFT&#xFF09; &#x96FB;&#x5B50;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x4F1D;&#x9054;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x3068;&#x5206;&#x6975;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x78BA;&#x7387;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30F4;&#x30A3;&#x30E6;&#x65B9;&#x7A0B;&#x5F0F;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x9280;&#x884C;&#x53E3;&#x5EA7;&#x632F;&#x8FBC;&#x3067;&#x306F;&#x518D;&#x914D;&#x5411;&#x76F8;&#x95A2;&#x56DE;&#x3001;&#x9806;&#x5E8F;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x5FAE;&#x8996;&#x7684;&#x60C5;&#x5831;&#x5229;&#x56DE;&#x308A;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x56E3;&#x8DDD;&#x96E2; inter&#x3002;&#x5F31;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x5411;&#x304D;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30DA;&#x30A2;&#x306E;&#x8CE2;&#x660E;&#x306A;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3001;&#x7B49;&#x65B9;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7570;&#x65B9;&#x6027;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x304C;&#x8003;&#x616E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x6211;&#x3005; &#x304C;&#x9077;&#x79FB;&#x53CC;&#x6975;&#x304C;&#x4E00;&#x5C64;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30DA;&#x30A2;&#x5185;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x8FF7;&#x3063;&#x305F;&#x5206;&#x5B50;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x306E;&#x914D;&#x5411;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F8C;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x72B6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6700;&#x3082;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30E2;&#x30CE;&#x6307;&#x6570;&#x95A2;&#x6570;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x86CD;&#x5149;&#x3068;&#x5206;&#x6975;&#x5D29;&#x58CA;&#x3001;&#x7387;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC; &#x30FB;&#x7406;&#x8AD6;&#x3001;&#x9280;&#x884C;&#x53E3;&#x5EA7;&#x632F;&#x8FBC;&#x306E;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x30D6;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x9280;&#x884C;&#x53E3;&#x5EA7;&#x632F;&#x8FBC;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC; &#x30FB; &#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x5BFE;&#x5185;&#x306E;&#x96FB;&#x5B50;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x89E3;&#x6790;&#x4E0A;&#x3002;

&#xC804;&#xC790; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xD655;&#xC7A5;&#xB41C; F&ouml;rster &#xC774;&#xB860; (&#xC804;&#xC790; &#xC1A1;&#xAE08;)&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xD574;&#xACB0; &#xD615;&#xAD11; &#xC218;&#xBA85; &#xBC0F; depolarisation &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC81C;&#xACF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Stochastic Liouville &#xBC29;&#xC815;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC1A1;&#xAE08; &#xBBF8;&#xC138;&#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xAC00; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xC7AC;&#xAD50;&#xC721; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC21C;&#xC11C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; chromophoric &#xAC70;&#xB9AC; &#xC778;&#xD130;. &#xB4F1;&#xBC29;&#xC131; &#xBC0F; &#xC774;&#xBC29;&#xC131; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57D;&#xD558;&#xAC8C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xBC0F; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xC0C8;&#xB85C; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC30D; &#xD604;&#xBA85;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB77D;&#xC790; &#xADF8;&#xB8F9; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xADF8; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD544;&#xC694;&#xAC00; &#xC804;&#xD658; &#xC30D;&#xC744; &#xADF9; &#xC790;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;, &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xD070; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC740; &#xC30D; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4;&#xBD80; reorienting &#xBD84;&#xC790; &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xADFC;&#xCC98; &#xBC30;&#xD3EC;&#xD310;&#xC744; &#xACE0;&#xB824; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6C4;&#xC790;&#xB294; &#xBAA8;&#xC591; &#xBFD0; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC790;&#xC5F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xD615;&#xAD11; &#xBC0F; depolarisation &#xBD95;&#xAD34;, &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC790;&#xC8FC;&#xB294; &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBAA8;&#xB178; &#xC9C0; &#xC218; &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xC18D;&#xB3C4; &#xACB0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; F&ouml;rster &#xC774;&#xB860;&#xC740; &#xC804;&#xC790; &#xC1A1;&#xAE08;&#xC758; &#xD2B9;&#xC218; &#xD55C; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xB7B5; &#xC801;&#xC6A9; &#xC804;&#xC790; &#xC1A1;&#xAE08;, Brownian &#xC5ED;&#xD559; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xC218;&#xB77D;&#xC790; &#xC30D; &#xB0B4;&#xC758; &#xC804;&#xC790; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xC591;&#xC801; &#xBD84;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D;.

Una teor&iacute;a extendida de F&ouml;rster (EFT) sobre la transferencia de energ&iacute;a electr&oacute;nica se presenta para el an&aacute;lisis cuantitativo de experimentos de por vida y despolarizaci&oacute;n de fluorescencia resuelta en el tiempo. La EFT, que fue derivada de la ecuaci&oacute;n estoc&aacute;stica de Liouville, aporta informaci&oacute;n microsc&oacute;pica con respecto a los tiempos de correlaci&oacute;n de reorientaci&oacute;n, los par&aacute;metros de orden, as&iacute; como entre distancias cromof&oacute;ricos. D&eacute;bil interacci&oacute;n donante y grupos aceptador que reorientaci&oacute;n e interactuan de una manera sabia de par, se consideran, en condiciones isotr&oacute;picas y anisotr&oacute;picas. Para el an&aacute;lisis de experimentos se demuestra que no s&oacute;lo tenemos que considerar la distribuci&oacute;n orientativa de los dipolos de la transici&oacute;n, pero la din&aacute;mica molecular reorientaci&oacute;n interna dentro del par que reviste una importancia a&uacute;n mayor. Este &uacute;ltimo determina la forma, as&iacute; como la tasa de las caries donantes observada fluorescencia y despolarizaci&oacute;n, que son m&aacute;s a menudo no mono-exponential functions. Se muestra que la teor&iacute;a de F&ouml;rster com&uacute;nmente usada es un caso especial de la EFT. Se presentan estrategias para la aplicaci&oacute;n de la EFT, que hace uso de la simulaci&oacute;n din&aacute;mica browniana.

En el an&aacute;lisis molecular cuantitativo de transferencia de energ&iacute;a electr&oacute;nica en pares de donantes-aceptador.

&#x805A;&#x5408;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x3001; &#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x548C;&#x805A;&#x5408;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x6C0F;&#x75C7;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837; &beta;-&#x80BD;&#xFF0C;A&beta;((1-40))(E22G)&#xFF0C;&#x5728;&#x751F;&#x7406;&#x4E0A;&#x6709;&#x5173;&#x62DB;&#x8058;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A; (pH 7.4) &#x4E2D;&#x7684;&quot;&#x5317;&#x6781;&quot;&#x7A81;&#x53D8;&#x57FA;&#x56E0;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x90FD;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x6C0F;&#x75C7;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x80BD;&#xFF0C;wt-A&beta;((1-40))&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x539F;&#x4F4D;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x548C;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x3001; &#x5706;&#x4E8C;&#x8272;&#x6027;&#x548C; thioflavin T &#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5145;&#x5206;&#x63A2;&#x8BA8;&#x3002;&#x672B;&#x5C3E;&#x7684; &#39;&#x843D;&#x540E;&#39; arc-A&beta;((1-40))-fibrillization &asymp; 3 &#x7A81;&#x7136;&#x51FA;&#x73B0;&#x7684;&#x65F6;&#x671F; nm &#x5927;&#x5C0F;&#x5747;&#x5300;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x7403;&#x5F62;&#x805A;&#x5408;&#39; &#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x7136;&#x540E;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x7403;&#x5F62;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x6700;&#x7EC8;&#x6D88;&#x5931;&#x5728;&#x539F;&#x4F4D;&#x6D4B;&#x91CF;&#x671F;&#x95F4;&#x805A;&#x5408;&#x6536;&#x76CA;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x5F62;&#x8C8C;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x589E;&#x957F;&#x3002;Arc-A&beta;((1-40))&#xFF0C;&#x4E5F;&#x540C;&#x6837;&#x663E;&#x793A;&#x7A97;&#x4F53;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x6BD4; wt-A&beta;((1-40)) &#x66F4;&#x4F4E;&#x6D53;&#x5EA6;&#xFF1A; &le; 2.5 &mu; M &#x548C; 12.5 &mu; M&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5728;&#x540C;&#x6837;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#xFF0C;50 &mu; M&#xFF0C;&#x805A;&#x5408;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x66F4;&#x8FC5;&#x901F;&#x5730;&#x4E3A;&#x6240;&#x5F97; arc-A&beta;((1-40))&#xFF1A; &#x5B89;&#x5FB7;&#x68EE;&#x4ECE;&#x5927;&#x7EA6; 7 &#x5929;&#x7684; wt-A&beta;((1-40)) &#x4E0E;&#x5B75;&#x5316;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5; 72 h &#x540E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7B2C;&#x4E00;&#x7684;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x3002;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7684; arc-A&beta;((1-40)) &#x5C55;&#x793A;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x591A;&#x6676;&#x578B;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E94;&#x3001; &#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDE;&#x7EED;&#x548C;&#x975E;&#x5377;&#x6750;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7ED3;&#x6784;&#x7531;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x3001; &#x8BA4;&#x53EF;&#xFF0C;&#x800C;&#x81F3;&#x5C11;&#x56DB;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684; arc-A&beta;((1-40)) &#x7EA4;&#x7EF4;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x900F;&#x5C04;&#x7535;&#x955C;&#x548C;&#x5E72;&#x548C;&#x5176;&#x5927;&#x4F17;&#x6BCF;&#x957F;&#x5EA6;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x6536;&#x96C6;&#x4E86;&#x6697;&#x793A;&#x5206;&#x5B50;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x3001; &#x56DB;&#x4E2A;&#x548C;&#x516D;&#x4E2A; &beta; &#x8868;&#x7EB9;&#x5C42;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x901A;&#x8DEF;&#x4E0A;&#x76F4;&#x63A5;&#x524D;&#x4F53;&#x7684;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x5168;&#x957F;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x6C0F;&#x75C7;&#x80BD;&#x4E0E;&#x5C0F;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x6709;&#x5E8F;&#x7684;&#x77AC;&#x6001;&#x7403;&#x5F62;&#x603B;&#x91CF;&#x4E3A; fibrillogenesis&#x3002;

&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x6C0F;&#x75C7; A&beta; &#x80BD;&#x7684; CD&#x3001; &#x900F;&#x5C04;&#x7535;&#x955C;&#x3001; &#x5E72;&#x548C;&#x539F;&#x4F4D; AFM &#x7684;&#x5317;&#x6781;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x805A;&#x96C6;&#x548C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5F62;&#x6001;&#x3002;

Morphology of aggregation intermediates, polymorphism of amyloid fibrils and aggregation kinetics of the "Arctic" mutant of the Alzheimer's amyloid Î²-peptide, AÎ²((1-40))(E22G), in a physiologically relevant Tris buffer (pH 7.4) were thoroughly explored in comparison with the human wild type Alzheimer's amyloid peptide, wt-AÎ²((1-40)), using both in situ atomic force and electron microscopy, circular dichroism and thioflavin T fluorescence assays. For arc-AÎ²((1-40)) at the end of the 'lag'-period of fibrillization an abrupt appearance of â‰ˆ 3 nm size 'spherical aggregates' with a homogeneous morphology, was identified. Then, the aggregation proceeds with a rapid growth of amyloid fibrils with a variety of morphologies, while the spherical aggregates eventually disappeared during in situ measurements. Arc-AÎ²((1-40)) was also shown to form fibrils at much lower concentrations than wt-AÎ²((1-40)): â‰¤ 2.5 Î¼M and 12.5 Î¼M, respectively. Moreover, at the same concentration, 50 Î¼M, the aggregation process proceeds more rapidly for arc-AÎ²((1-40)): the first amyloid fibrils were observed after c.a. 72 h from the onset of incubation as compared to approximately 7 days for wt-AÎ²((1-40)). Amyloid fibrils of arc-AÎ²((1-40)) exhibit a large variety of polymorphs, at least five, both coiled and non-coiled distinct fibril structures were recognized by AFM, while at least four types of arc-AÎ²((1-40)) fibrils were identified by TEM and STEM and their mass-per-length statistics were collected suggesting supramolecular structures with two, four and six Î²-sheet laminae. Our results suggest a pathway of fibrillogenesis for full-length Alzheimer's peptides with small and structurally ordered transient spherical aggregates as on-pathway immediate precursors of amyloid fibrils.

Aggregation and fibril morphology of the Arctic mutation of Alzheimer's AÎ² peptide by CD, TEM, STEM and in situ AFM.

La morphologie des interm&eacute;diaires de l&#39;agr&eacute;gation, polymorphisme des fibrilles amylo&iuml;des et cin&eacute;tique d&#39;agr&eacute;gation du mutant &laquo; Arctique &raquo; de la maladie d&#39;Alzheimer &beta;-peptide b&ecirc;ta-amylo&iuml;de, A&beta;((1-40))(E22G), dans un tampon Tris un physiologiquement pertinent (pH 7,4) ont &eacute;t&eacute; compl&egrave;tement explor&eacute; en comparaison du peptide b&ecirc;ta-amylo&iuml;de Alzheimer humain de type sauvage, wt-A&beta;((1-40)), tant in situe force atomique et microscopie &eacute;lectronique, dichro&iuml;sme circulaire et dosages de fluorescence thioflavine T. Pour arc-A&beta;((1-40)) &agrave; la fin du &laquo; GAL &raquo;-p&eacute;riode de fibrillization une apparition brusque de &asymp; 3 taille nm &laquo; agr&eacute;gats sph&eacute;riques &raquo; avec une morphologie homog&egrave;ne, a &eacute;t&eacute; identifi&eacute;. L&#39;agr&eacute;gation proc&egrave;de alors, avec une croissance rapide des fibrilles amylo&iuml;des d&#39;une vari&eacute;t&eacute; de types de morphologies, tandis que les agr&eacute;gats sph&eacute;riques a finalement disparu au cours de mesures in situ. Arc-A&beta;((1-40)) s&#39;est aussi av&eacute;r&eacute; de fibrilles forme &agrave; des concentrations beaucoup plus faibles que wt-A&beta;((1-40)): &le; 2,5 &mu;M et 12,5 &mu;M, respectivement. En outre, &agrave; la m&ecirc;me concentration, 50 &mu;M, le processus d&#39;agr&eacute;gation produit plus rapidement pour arc-A&beta;((1-40)) : les premiers fibrilles amylo&iuml;des sont observ&eacute;es apr&egrave;s c.a. 72 h d&egrave;s le d&eacute;but de l&#39;incubation, comparativement &agrave; environ 7 jours pour wt-A&beta;((1-40)). Les fibrilles amylo&iuml;des de arc-A&beta;((1-40)) pr&eacute;sentent une grande vari&eacute;t&eacute; de polymorphes, au moins cinq, tous deux enroul&eacute; et structures fibrillaires distincts non enroul&eacute;s ont &eacute;t&eacute; reconnus par l&#39;AFM, alors qu&#39;au moins quatre types de fibrilles arc-A&beta;((1-40)) ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute; par TEM et tige et leurs statistiques de masse-par-longueur ont &eacute;t&eacute; recueillies en sugg&eacute;rant des structures supramol&eacute;culaires avec deux, quatre et six strates de feuillet &beta;. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent une voie de FIBRILLOGENESE pour les peptides Alzheimer pleine longueur avec petites et structurellement ordonn&eacute;es des agr&eacute;gats sph&eacute;riques transitoires comme le sentier les pr&eacute;curseurs imm&eacute;diats de fibrilles amylo&iuml;des.

Agr&eacute;gation et fibrille la morphologie de la mutation Arctique du peptide A&beta; Alzheimer par CD, TEM, la tige et AFM in situ.

Morphologie der Aggregation Zwischenprodukte, Polymorphismus von Amyloid-Fibrillen und Aggregation Kinetik der &quot;Arctic&quot; Mutant Alzheimer Amyloid &beta;-Peptide, A&beta;((1-40))(E22G), in einem physiologisch relevanten Tris-Puffer (pH 7,4) waren im Vergleich mit der menschlichen Wildtyp-Alzheimer Amyloid-Peptid, wt-A&beta;((1-40)), mit in-situ Rasterkraft und Elektronenmikroskopie, Circulardichroismus und Thioflavin T Fluoreszenzassays gr&uuml;ndlich erforscht. F&uuml;r arc-A&beta;((1-40)) am Ende der &#39;Lag&#39;-Zeitraum &uuml;ber wichtige abrupt Auftritt der &asymp; 3 nm Gr&ouml;&szlig;e &#39;kugelf&ouml;rmige Aggregate&#39; mit einer homogenen Morphologie, wurde identifiziert. Dann geht die Aggregation mit einem rasanten Wachstum von Amyloid-Fibrillen mit verschiedenen Morphologien, w&auml;hrend die kugelf&ouml;rmige Aggregate schlie&szlig;lich w&auml;hrend der in-situ Messungen verschwunden. Arc-A&beta;((1-40)) wurde auch gezeigt, dass Formular Fibrillen bei viel niedrigeren Konzentrationen als wt-A&beta;((1-40)): &le; 2,5 &mu;M und 12,5 &mu;M, beziehungsweise. Dar&uuml;ber hinaus in der gleichen Konzentration, 50 &mu;M, der Aggregation-Prozess verl&auml;uft schneller f&uuml;r arc-A&beta;((1-40)): die ersten Amyloid-Fibrillen wurden nach c.a. 72 h von Beginn der Inkubation im Vergleich zu ca. 7 Tage f&uuml;r wt-A&beta;((1-40)) beobachtet. Amyloid-Fibrillen der arc-A&beta;((1-40)) weisen eine Vielzahl von polymorphe Objekte, mindestens f&uuml;nf, beide gewickelt und nicht gewickelt unterschiedliche Fibrille Strukturen wurden von AFM, anerkannt, w&auml;hrend mindestens vier Arten von arc-A&beta;((1-40)) Fibrillen durch TEM und VORBAU identifiziert wurden und ihre Masse-pro-Length-Statistik vorschlagen Supramolekulare Strukturen mit zwei, vier und sechs &beta;-Blatt Spreiten gesammelt wurden. Unsere Ergebnisse deuten einen Weg der Fibrillogenesis f&uuml;r die Alzheimer Krankheit in Peptide mit kleinen und strukturell geordneten transient kugelf&ouml;rmige Aggregate als auf Weg unmittelbaren Vorl&auml;ufer der Amyloid-Fibrillen.

Aggregation und Fibrille Morphologie der arktischen Mutation von Alzheimer A&beta;-Peptid von CD, TEM, VORBAU und in-situ AFM.

Morfologia di aggregazione intermedi, polimorfismo delle fibrille amiloidi e cinetica di aggregazione del mutante &quot;Artico&quot; del morbo di Alzheimer amiloide &beta;-peptide, A&beta;((1-40))(E22G), in tampone Tris fisiologicamente rilevante (pH 7,4) sono stati accuratamente esplorati rispetto al peptide amiloide umano selvaggio tipo morbo di Alzheimer, wt-A&beta;((1-40)), utilizzando la forza atomica in situ e microscopia elettronica, Dicroismo circolare e analisi di fluorescenza thioflavin T. Per arc-A&beta;((1-40)) alla fine del &#39;lag&#39;-periodo di fibrillization un&#39;improvvisa comparsa di &asymp; 3 dimensione nm &#39;aggregati sferici&#39; con una morfologia omogenea, &egrave; stato identificato. Quindi, l&#39;aggregazione procede con una rapida crescita delle fibrille amiloidi con una variet&agrave; di morfologie, mentre gli aggregati sferici alla fine scomparvero durante le misurazioni in situ. Arc-A&beta;((1-40)) &egrave; stato anche dimostrato di fibrille forma a concentrazioni molto inferiori rispetto a wt-A&beta;((1-40)): &le; 2,5 &mu;M e 12.5 &mu;M, rispettivamente. Inoltre, presso la stessa concentrazione, 50 &mu;M, il processo di aggregazione procede pi&ugrave; rapidamente per arc-A&beta;((1-40)): il prime fibrille amiloidi sono state osservate dopo c.a. 72 h dall&#39;insorgenza di incubazione rispetto ai circa 7 giorni per wt-A&beta;((1-40)). Fibrille amiloidi di arc-A&beta;((1-40)) esibiscono una grande variet&agrave; di polimorfi, almeno cinque, sia avvolto e strutture non arrotolato fibrillare distinti sono stati riconosciuti da AFM, mentre almeno quattro tipi di fibrille di arc-A&beta;((1-40)) sono stati identificati da TEM e staminali e loro statistiche di massa per lunghezza sono stati raccolti suggerendo strutture supramolecolari con due, quattro e sei lamine &beta;-foglio. I nostri risultati suggeriscono un percorso di fibrillogenesis per i peptidi full-length Alzheimer con piccoli e strutturalmente ordinati aggregati sferici transitori come precursori immediati sul percorso di fibrille amiloidi.

Aggregazione e fibrillare morfologia della mutazione artica del peptide A&beta; Alzheimer da CD, TEM, stelo e AFM in situ.

&#x96C6;&#x8A08;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x3068;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &beta; &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;, A&beta;((1-40))(E22G) &#x751F;&#x7406;&#x95A2;&#x9023; Tris &#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC; (pH 7.4) &#x3067;&#x306E;&#x300C;&#x5317;&#x6975;&#x300D;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E;&#x591A;&#x578B;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x3057;&#x305F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;, in situ &#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x3001;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3001;&#x5186;&#x4E8C;&#x8272;&#x6027;&#x3068; thioflavin T &#x86CD;&#x5149;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;wt-A&beta;((1-40)) &#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x5FB9;&#x5E95;&#x7684;&#x306B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3002;Arc-A&beta;((1-40)) &#x306F; &#39;&#x30E9;&#x30B0;&#x306E;&#x7D42;&#x308F;&#x308A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;-&#x7A81;&#x7136;&#x59FF; &asymp; 3 &#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5316;&#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x3060;&#x3063;&#x305F; nm &#x30B5;&#x30A4;&#x30BA; &#39;&#x7403;&#x72B6;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#39; &#x306F;&#x3001;&#x5747;&#x8CEA;&#x306A;&#x5F62;&#x614B;&#x3068;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x59FF;&#x3092;&#x6D88;&#x3057;&#x305F; in situ &#x6E2C;&#x5B9A;&#x6642;&#x306B;&#x7403;&#x5F62;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x4E2D;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x96C6;&#x8A08;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Arc-A&beta;((1-40)) &#x304C;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD; wt-A&beta;((1-40)) &#x3088;&#x308A;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x307E;&#x305F;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;: &le; 2.5 &mu; M &#x3068; 12.5 &mu; M&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067; 50 &mu; M&#x3001;&#x96C6;&#x8A08;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3088;&#x308A;&#x6025;&#x901F;&#x306B; arc-A&beta;((1-40)) &#x306E;&#x53CE;&#x5165;: &#x30AB;&#x30CA;&#x30C0;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066; wt-A&beta;((1-40)) &#x306B;&#x7D04; 7 &#x65E5;&#x9593;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x304B;&#x3089; 72 &#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Arc-A&beta;((1-40)) &#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306E;&#x591A;&#x5F62;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 5 &#x3064;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x5C55;&#x793A;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x975E;&#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x30C9;&#x72EC;&#x7279;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30EB;&#x69CB;&#x9020; AFM &#x306B;&#x3088;&#x308B; TEM &#x304A;&#x3088;&#x3073; STEM &#x306B;&#x3088;&#x308B; arc-A&beta;((1-40)) &#x7DDA;&#x7DAD;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 4 &#x3064;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x304C;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x5F53;&#x305F;&#x308A;&#x306E;&#x8CEA;&#x91CF;&#x306E;&#x7D71;&#x8A08;&#x306F;&#x3001;2 &#x3064;&#x3001;4 &#x3064;&#x3001;&#x516D;&#x3064;&#x306E; &beta; &#x30B7;&#x30FC;&#x30C8; &#x30E9;&#x30DF;&#x30CA;&#x3068;&#x8D85;&#x5206;&#x5B50;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x53CE;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E2D;&#x306B;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5C0F;&#x578B;&#x3067;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306B;&#x9806;&#x5E8F;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x904E;&#x6E21;&#x7403;&#x5F62;&#x9AA8;&#x6750;&#x3092;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x5373;&#x6642;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;.

CD&#x3001;TEM&#x3001;&#x5E79;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x5834; AFM &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306E; a &beta; &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5317;&#x6975;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x96C6;&#x7D04;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3002;

&#xC9D1;&#xACC4; &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4;, &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC18C;&#xC758; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xC21C;&#xC218; &#xAD00;&#xB828; Tris &#xBC84;&#xD37C; (pH 7.4)&#xC5D0;&#xC11C; A&beta;((1-40))(E22G) &beta; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4;&#xC758; &quot;&#xBD81;&#xADF9;&quot; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC9D1;&#xACC4; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xB2E4;&#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC740; &#xCCA0;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785; &#xCE20; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;, wt-A&beta;((1-40)), &#xC6D0;&#xB798;&#xC758; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xBC0F; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;, &#xC6D0;&#xD615; &#x9EC4;&#xC640; thioflavin T &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBE44;&#xAD50; &#xD0D0;&#xD5D8;. &#39;&#xC9C0;&#xC5F0;&#39;&#xC758; &#xB05D;&#xC5D0; Arc-a&beta;((1-40))&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;-fibrillization &asymp; 3&#xC758; &#xAC11;&#xC791;&#xC2A4;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xB4F1;&#xC7A5;&#xC758; &#xAE30;&#xAC04; nm &#xD06C;&#xAE30; &#39;&#xAD6C;&#xD615; &#xC9D1;&#xACC4;&#39; &#xB3D9;&#xC885; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7F0; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC9D1;&#xACC4; &#xAD6C;&#xD615; &#xC9D1;&#xACC4;&#xB294; &#xACB0;&#xAD6D; &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0AC;&#xB77C;&#xC838; &#xBC84;&#xB9B0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBB38;&#xBC95;&#xACFC;, &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC18C;&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xC131;&#xC7A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C4;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Arc-a&beta;((1-40))&#xB294; wt-A&beta;((1-40)) &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC591;&#xC2DD; &#xC18C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC;: &le; 2.5 &mu; M &#xBC0F; 12.5 &mu; M &#xAC01;&#xAC01;. &#xB610;&#xD55C;, &#xAC19;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; 50 &mu; M&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9D1;&#xACC4; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC9C4;&#xD589; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; Arc-a&beta;((1-40))&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;: &#xCC98;&#xC74C; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC18C; c.a. &#xC778;&#xD050;&#xBCA0;&#xC774;&#xC158; Wt-a&beta;((1-40))&#xC5D0; &#xC57D; 7 &#xC77C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xBC1C;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; 72 &#xC2DC;&#xAC04; &#xD6C4; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. Arc-a&beta;((1-40))&#xC758; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC18C; &#xC804;&#xC2DC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; polymorphs, &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 5, &#xB450; &#xCF54;&#xC77C; &#xBC0F; arc-A&beta;((1-40)) &#xC18C;&#xC758; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 4 &#xC885;&#xB958; &#xD3B8; &#xBC0F; &#xC904;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE38;&#xC774; &#xB2F9; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xD1B5;&#xACC4; &#xC218;&#xC9D1; 2, 4 &#xBC0F; 6 &#xAC1C;&#xC758; &beta; &#xC2DC;&#xD2B8;&#xC758; laminae&#xC640; supramolecular &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; fibril &#xBE44; &#xCF54;&#xC77C; &#xAD6C;&#xC870; AFM&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC18C;&#xC758; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC989;&#xAC01;&#xC801;&#xC778; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790;&#xB85C; &#xC791;&#xACE0; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xB82C; &#xB41C; &#xACFC;&#xB3C4; &#xAD6C;&#xD615; &#xC9D1;&#xACC4; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; Alzheimer&#xC758; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; fibrillogenesis&#xC758; &#xD1B5;&#xB85C; &#xAD8C;&#xD574; &#xB4DC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;.

CD, &#xD3B8;, &#xC904;&#xAE30; &#xBC0F; &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; AFM Alzheimer A&beta; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xBD81;&#xADF9; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC9D1;&#xACC4; &#xBC0F; fibril &#xD615;&#xD0DC;.

Morfolog&iacute;a de agregaci&oacute;n intermedios, polimorfismo de fibrillas amiloideas y cin&eacute;tica de la agregaci&oacute;n del mutante &quot;&Aacute;rtico&quot; de &beta;-p&eacute;ptido amiloide la enfermedad de Alzheimer, A&beta;((1-40))(E22G), en un tamp&oacute;n Tris fisiol&oacute;gicamente relevante (pH 7.4) fueron completamente exploradas en comparaci&oacute;n con el p&eacute;ptido amiloide de Alzheimer humana tipo salvaje, wt-A&beta;((1-40)), usando tanto la fuerza at&oacute;mica in situ y microscopia electr&oacute;nica, dicro&iacute;smo circular y tioflavina T fluorescencia ensayos. Para arc-A&beta;((1-40)) al final de la &#39;lag&#39;-per&iacute;odo de fibrillization una aparici&oacute;n brusca de &asymp; 3 tama&ntilde;o de NM &#39;agregados esf&eacute;ricos&#39; con una morfolog&iacute;a homog&eacute;nea, fue identificado. Entonces, la agregaci&oacute;n se procede con un r&aacute;pido crecimiento de fibrillas amiloideas con una variedad de morfolog&iacute;as, mientras que los agregados esf&eacute;ricos eventualmente desaparecieron durante las mediciones in situ. Arc-A&beta;((1-40)) tambi&eacute;n ha demostrado que las fibrillas de forma mucho concentraciones inferiores que wt-A&beta;((1-40)): &le; 2,5 &mu;M y 12.5 &mu;m, respectivamente. Por otra parte, en la misma concentraci&oacute;n, 50 &mu;M, procede m&aacute;s r&aacute;pidamente el proceso de agregaci&oacute;n para arc-A&beta;((1-40)): las primeras fibrillas amiloideas observaron despu&eacute;s c.a. 72 h del inicio de la incubaci&oacute;n en comparaci&oacute;n con aproximadamente 7 d&iacute;as para wt-A&beta;((1-40)). Fibrillas amiloideas de arc-A&beta;((1-40)) exhiben una gran variedad de organismos polimorfos, por lo menos cinco, ambos en espiral y las estructuras de la fibrilla distintas en espiral no fueron reconocidas por AFM, mientras que al menos cuatro tipos de las fibrillas del arc-A&beta;((1-40)) fueron identificados por TEM y madre y sus estad&iacute;sticas de masa por longitud se recolectaron sugiriendo estructuras supramoleculares con dos, cuatro y seis l&aacute;minas &beta;-hoja. Nuestros resultados sugieren una v&iacute;a de fibrilog&eacute;nesis de p&eacute;ptidos de cuerpo entero de Alzheimer con peque&ntilde;os y estructuralmente ordenados agregados esf&eacute;ricos transitorios como precursores inmediatos en el camino de fibrillas amiloideas.

Agregaci&oacute;n y fibrilla morfolog&iacute;a de la mutaci&oacute;n &aacute;rtica de p&eacute;ptido A&beta; de Alzheimer por CD, TEM, v&aacute;stago y AFM in situ.

Article	Year
On the quantitative molecular analysis of electronic energy transfer within donor-acceptor pairs. Physical chemistry chemical physics : PCCP\| PubMed ID: 17431522	2007
Aggregation and fibril morphology of the Arctic mutation of Alzheimer's AÎ² peptide by CD, TEM, STEM and in situ AFM. Journal of structural biology\| PubMed ID: 22750418	2012

Nils Norlin

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