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Tractable Mammalian Cell Infections with Protozoan-primed Bacteria

Many intracellular bacterial pathogens use freshwater protozoans as a natural reservoir for proliferation in the environment. Legionella pneumophila, the ...

Oregon Health & Science University

&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x83CC;&#x5206;&#x6CCC;&#x901A;&#x8FC7;&#x7C7B;&#x578B;&#x7B2C;&#x4E09;&#x901A;&#x9053;&#x7684; Yops (&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x83CC;&#x5916;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;)&#x3002;Yop &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x88AB;&#x8C03;&#x63A7;&#x54CD;&#x5E94;&#x73AF;&#x5883;&#x6697;&#x793A;&#xFF0C;&#x5728;&#x7EA7;&#x8054;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x5206;&#x6CCC;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;yscM1 &#x548C; yscM2 &#x4EA7;&#x751F;&#x6D88;&#x6781;&#x8C03;&#x8282;&#x5C0F;&#x80A0;&#x7ED3;&#x80A0;&#x708E;&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x83CC; yop &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5B83;&#x88AB;&#x8868;&#x660E; yopD &#x548C;&#x5360;&#x7A7A;&#x6BD4;&#x65F6;&#x662F; yscM1 &#x548C; yscM2 &#x529F;&#x80FD;&#x9700;&#x8981;&#x548C;&#x6240;&#x6709;&#x56DB;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x534F;&#x540C;&#x884C;&#x52A8;&#x5728;&#x540C;&#x4E00;&#x76D1;&#x7BA1;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#xFF0C;SycH &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7684; yscM1 &#x548C; yscM2 &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4EA7;&#x54C1;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6FC0;&#x6D3B; yop &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x6CA1;&#x6709;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7684; YscM1 &#x548C; YscM2 &#x4E09;&#x3001; &#x8FD0;&#x8F93;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;YopQ mRNA&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; yopQ &#x548C; yopE &#x57FA;&#x56E0;&#x878D;&#x5408;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x6269;&#x6563;&#x6761;&#x7EA6; &#xFF08;&#x65B0;&#x9709;&#x7D20;&#x78F7;&#x9178;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;) &#x8BB0;&#x8005;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55; PCR &#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; yscM1 &#x548C; yscM2 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x5728;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x6C34;&#x5E73;&#x8FC8;&#x51FA;&#x7684;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;178-&#x6838;&#x82F7;&#x9178; 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x7684;&#x533A; (UTR) &#x7684; yopQ mRNA &#x662F;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x8D4B;&#x4E88; yscM1 &#x548C; yscM2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x8C03;&#x8282;&#x4E0A;&#x7684;&#x7535;&#x7194;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x662F; 28-&#x6838;&#x82F7;&#x9178; UTR &#x7684; yopE&#x3002;&#x5E8F;&#x5217; 5&#39;-AUAAA-3&#39; &#x4F4D;&#x4E8E; 5&#39; yop &#x5F02;&#x5E38;&#x548C;&#x6539;&#x53D8;&#x5E8F;&#x5217;&#x6BCD;&#x9898;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x51CF;&#x5C11;&#x6216;&#x53D6;&#x6D88;&#x4E86; yscM1 &#x548C; yscM2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x89C4;&#x4F8B;&#x3002;&#x4E00;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#x88AB;&#x63D0;&#x8BAE;&#x85C9;&#x4EE5;&#x54CD;&#x5E94;&#x7279;&#x5B9A;&#x73AF;&#x5883;&#x63D0;&#x793A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x6D89;&#x53CA;&#x4E00;&#x4E9B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x56E0;&#x7D20;&#x5BF9;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x5E8F;&#x5217;&#x5185;&#x7684; yop mRNAs UTR &#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A; yop &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5360;&#x7A7A;&#x6BD4;&#x65F6;&#x3001; SycH&#xFF0C;YopD&#x3001; YscM1&#x3001; YscM2&#x3001; &#x8C03;&#x8282;&#x3002;

&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x83CC;&#x5C0F;&#x80A0;&#x7ED3;&#x80A0;&#x708E;&#x7C7B;&#x578B; III &#x5206;&#x6CCC;&#xFF1A; yscM1 &#x548C; yscM2 yop &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x673A;&#x5236;&#x4E3A;&#x76EE;&#x6807; yop 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x7684;&#x533A;&#x7684; mRNA&#x3002;

Pathogenic Yersinia spp. secrete Yops (Yersinia outer proteins) via the type III pathway. The expression of yop genes is regulated in response to environmental cues, which results in a cascade of type III secretion reactions. yscM1 and yscM2 negatively regulate the expression of Yersinia enterocolitica yop genes. It is demonstrated that yopD and lcrH are required for yscM1 and yscM2 function and that all four genes act synergistically at the same regulatory step. Further, SycH binding to the protein products of yscM1 and yscM2 can activate yop gene expression even without promoting type III transport of YscM1 and YscM2. Reverse transcription-PCR analysis of yopQ mRNA as well as yopQ and yopE gene fusion experiments with the npt (neomycin phosphotransferase) reporter suggest that yscM1 and yscM2 regulate expression at a posttranscriptional step. The 178-nucleotide 5' untranslated region (UTR) of yopQ mRNA was sufficient to confer yscM1 and yscM2-mediated regulation on the fused reporter, as was the 28-nucleotide UTR of yopE. The sequence 5'-AUAAA-3' is located in the 5' yop UTRs, and mutations that alter the sequence motif either reduced or abolished yscM1- and yscM2-mediated regulation. A model is proposed whereby YopD, LcrH, YscM1, YscM2, and SycH regulate yop expression in response to specific environmental cues and by a mechanism that may involve binding of some of these factors to a specific target sequence within the UTR of yop mRNAs.

Yersinia enterocolitica type III secretion: yscM1 and yscM2 regulate yop gene expression by a posttranscriptional mechanism that targets the 5' untranslated region of yop mRNA.

Pathog&egrave;ne Yersinia spp s&eacute;cr&egrave;tent Yops (prot&eacute;ines ext&eacute;rieures Yersinia) via la voie de type III. L&#39;expression des g&egrave;nes d&#39;yop est r&eacute;glement&eacute;e en r&eacute;ponse &agrave; des stimuli environnementaux, qui se traduit par une cascade de r&eacute;actions s&eacute;cr&eacute;tion de type III. yscM1 et yscM2 n&eacute;gativement r&eacute;gulent l&#39;expression des g&egrave;nes de Yersinia enterocolitica yop. Il est d&eacute;montr&eacute; que les yopD et lcrH sont requis pour les fonctions yscM1 et yscM2 et que tous les quatre g&egrave;nes agissent en synergie &agrave; la m&ecirc;me &eacute;tape r&eacute;glementaire. En outre, SycH contraignante pour les produits de prot&eacute;ine d&#39;yscM1 et d&#39;yscM2 pouvez activer yop l&#39;expression des g&egrave;nes m&ecirc;me sans promotion type transport III de YscM1 et YscM2. Analyse de transcription-PCR inverse d&#39;yopQ mRNA ainsi qu&#39;yopQ et yopE g&egrave;ne exp&eacute;riences de fusion avec le reporter du TNP (n&eacute;omycine phosphotransf&eacute;rase) sugg&egrave;rent qu&#39;yscM1 et yscM2 r&eacute;gulent l&#39;expression &agrave; une &eacute;tape post-transcriptionnelle. 178-Nucl&eacute;otide 5&#39; r&eacute;gion non traduite (UTR) d&#39;yopQ mRNA &eacute;tait suffisante pour conf&eacute;rer l&#39;yscM1 et yscM2-r&eacute;gulation sur le journaliste fusionn&eacute;, tout comme l&#39;UTR 28-nucl&eacute;otide d&#39;yopE. La s&eacute;quence 5&#39;-AUAAA-3&#39; se trouve dans le 5&#39; yop RTNS et des mutations qui modifient le motif de la s&eacute;quence soit r&eacute;duit ou abolit r&egrave;glement par yscM1 et yscM2. Un mod&egrave;le est propos&eacute; par lequel YopD, LcrH, YscM1, YscM2 et SycH r&eacute;gulent l&#39;expression d&#39;yop en r&eacute;ponse &agrave; des stimuli environnementaux sp&eacute;cifiques et par un m&eacute;canisme qui peut impliquer la liaison de certains de ces facteurs &agrave; une s&eacute;quence cible sp&eacute;cifique au sein de l&#39;UTR des ARNm d&#39;yop.

Type de Yersinia enterocolitica s&eacute;cr&eacute;tion III : yscM1 et yscM2 r&eacute;gulent l&#39;expression de g&egrave;ne d&#39;yop par un m&eacute;canisme post-transcriptionnel qui cible la r&eacute;gion 5&#39; non traduite d&#39;yop ARNm.

Patogeno Yersinia spp secernono Yops (proteine esterne Yersinia) attraverso la via di tipo III. L&#39;espressione dei geni yop &egrave; regolata in risposta a stimoli ambientali, che si traduce in una cascata di reazioni di secrezione di tipo III. yscM1 e yscM2 regolano negativamente l&#39;espressione dei geni di Yersinia enterocolitica yop. &Egrave; dimostrato che comprende e lcrH sono necessari per la funzione yscM1 e yscM2 e che tutti e quattro i geni agiscono in modo sinergico al passo normativo stesso. Ulteriormente, SycH associazione ai prodotti della proteina di yscM1 e yscM2 pu&ograve; attivare yop espressione genica anche senza promozione tipo trasporto III di YscM1 e YscM2. Analisi di PCR-trascrizione inversa di yopQ mRNA come pure yopQ e yopE gene esperimenti di fusione con il reporter npt (neomicina fosfotransferasi) suggeriscono che yscM1 e yscM2 regolare espressione a una fase di posttranscriptional. Il 178-nucleotidi 5&#39; regione non tradotta (UTR) del yopQ mRNA era sufficiente a conferire yscM1 e regolamento yscM2-mediata sul reporter fuso, come il 28-nucleotide UTR di yopE. La sequenza 5&#39;-AUAAA-3&#39; si trova alla 5&#39; yop UTRs e mutazioni che alterano il motivo di sequenza sia ridotto o abolito il regolamento yscM1 - e yscM2-mediata. Un modello &egrave; proposto per cui comprende, LcrH, YscM1, YscM2 e SycH regolare espressione yop in risposta a specifici stimoli ambientali e da un meccanismo che pu&ograve; coinvolgere l&#39;associazione di alcuni di questi fattori ad una sequenza di destinazione specifica all&#39;interno dell&#39;UTR dei mRNAs yop.

Tipo di Yersinia enterocolitica secrezione III: yscM1 e yscM2 regolare espressione del gene yop da un meccanismo di posttranscriptional che gli obiettivi della regione 5&#39; non tradotta di yop mRNA.

&#x75C5;&#x539F;&#x6027; Yersinia &#x5C5E;&#x578B; III &#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; Yops (&#x30A8;&#x30EB;&#x30B7;&#x30CB;&#x30A2;&#x5916;&#x5074;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#xFF09; &#x3092;&#x5206;&#x6CCC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x5206;&#x6CCC;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x9023;&#x9396;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x30AD;&#x30E5;&#x30FC;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5426;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B; yscM1 &#x3068; yscM2 Yersinia enterocolitica &#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;YopD &#x3068; lcrH &#x304C; yscM1 &#x3068; yscM2 &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; 4 &#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x540C;&#x3058;&#x898F;&#x5236;&#x6BB5;&#x968E;&#x76F8;&#x4E57;&#x7684;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;.&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;yscM1 &#x3068; yscM2 &#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306F; YscM1 &#x3068; YscM2 &#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306A;&#x3057;&#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;-PCR &#x89E3;&#x6790; yopQ mRNA yopQ&#x3001;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x30A2;&#x30A4;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x878D;&#x5408;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E; npt (&#x30CD;&#x30AA;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;) &#x8A18;&#x8005;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B; yscM1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; yscM2 &#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;28 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; UTR &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x30A2;&#x30A4;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E; 178 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF; (UTR) yopQ mRNA yscM1 &#x3068; yscM2 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x898F;&#x5236;&#x878D;&#x5408;&#x8A18;&#x8005;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; 5&#39;-AUAAA-3&#39; &#x30EA;&#x30DC;&#x30BE;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;&#x914D;&#x5217;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x307E;&#x305F;&#x306F; yscM1 &#x3068; yscM2 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x898F;&#x5236;&#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3001;5&#39; &#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;YopD&#x3001;LcrH&#x3001;YscM1&#x3001;YscM2&#x3001;&#x5909;&#x66F4;&#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x5F0F;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x30AD;&#x30E5;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; &#x30E8;&#x30C3;&#x30D7; Mrna &#x306E; UTR &#x5185;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

Yersinia enterocolitica &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x5206;&#x6CCC;: yscM1 &#x3068; yscM2 &#x898F;&#x5236;&#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; 5&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;&#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; mRNA&#x3002;

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC885; &#xC720;&#xD615; III &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; Yops (&#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC678;&#xBD80; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;)&#xC744; &#xBD84; &#xBE44; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC606; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xC720;&#xD615; III &#xBD84; &#xBE44; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD658;&#xACBD; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB41C;&#xB2E4;. yscM1 &#xBC0F; yscM2 &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; enterocolitica &#xC606; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604; &#xC870;&#xC808;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; yopD &#xBC0F; lcrH yscM1 &#xBC0F; yscM2 &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xB4E0; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xB3D9; &#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xD589;&#xB3D9; &#xC2DC;&#xC5F0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, yscM1 &#xBC0F; Yscm2&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC81C;&#xD488;&#xC744; SycH &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC720;&#xD615; III &#xC804;&#xC1A1; Yscm1&#xC640; Yscm2&#xC758; &#xD64D;&#xBCF4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC606; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. YopQ yopQ yopE &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; mRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC735;&#xD569; &#xC2E4;&#xD5D8; npt (&#xB124;&#xC624; &#xB9C8;&#xC774; &#xC2E0; phosphotransferase) &#xAE30;&#xC790;&#xC640;&#xC758; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xC804;&#xC0AC;-PCR &#xBD84;&#xC11D; yscM1 &#xBC0F; yscM2 posttranscriptional &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC2DD; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xC2DC;&#xAE30; &#xBC14;&#xB78D;&#xB2C8;&#xB2E4;. 178 &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; 5&#39; Yopq&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC9C0;&#xC5ED; (UTR) Mrna&#xB294; yscM1 &#xBC0F; &#xC735;&#xD569;&#xB41C; &#xAE30;&#xC790;&#xC5D0; yscM2 &#xC911;&#xC7AC; &#xADDC;&#xCE59;&#xC744; &#xBD80;&#xC5EC; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD588;&#xB2E4; Yope&#xC758; 28-&#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; UTR. &#xACE0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; 5&#39;-AUAAA-3&#39; 5&#39; &#xC606; Utr, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC0F; yscM1 yscM2 &#xC911;&#xC7AC; &#xADDC;&#xC815; &#xD3D0;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; YopD, LcrH, YscM1, YscM2, &#xBC0F; SycH &#xC606; &#xC2DD; &#xC751;&#xB2F5; &#xD2B9;&#xC815; &#xD658;&#xACBD; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC606; mRNAs UTR &#xB0B4;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xB300;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xC911; &#xC77C;&#xBD80;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; &#xC81C;&#xC548;.

&#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; enterocolitica &#xC720;&#xD615; III &#xBD84; &#xBE44;: yscM1 &#xBC0F; yscM2 &#xC606;&#xC758; 5&#39; &#xBC88;&#xC5ED; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; posttranscriptional &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC606; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC870;&#xC808; mRNA.

Pat&oacute;genos Yersinia spp secretan Yops (prote&iacute;nas externas de Yersinia) v&iacute;a el camino de tipo III. La expresi&oacute;n de genes de yop es regulada en respuesta a se&ntilde;ales ambientales, que da lugar a una cascada de reacciones de secreci&oacute;n tipo III. yscM1 y yscM2 regulan negativamente la expresi&oacute;n de genes de Yersinia enterocolitica yop. Est&aacute; demostrado que se requiere para la funci&oacute;n yscM1 y yscM2 yopD y lcrH y que todos los cuatro genes act&uacute;an de forma sin&eacute;rgica en el mismo paso reglamentario. Adem&aacute;s, como enlace a los productos de prote&iacute;na de yscM1 y yscM2 puede activar genes yop incluso sin promover tipo transporte III de YscM1 y YscM2. An&aacute;lisis de PCR de transcripci&oacute;n reversa de yopQ mRNA, as&iacute; como yopQ y yopE gene experimentos de fusi&oacute;n con el reportero de npt (neomicina fosfotransferasa) sugieren que yscM1 y yscM2 regulan la expresi&oacute;n en un paso postranscripcional. 178-Nucle&oacute;tidos 5&#39; regi&oacute;n sin traducir (UTR) de yopQ mRNA fue suficiente para conferir yscM1 y regulaci&oacute;n mediada por yscM2 en el reportero fusionado, igual que el nucle&oacute;tido 28 UTR de yopE. La secuencia 5&#39;-AUAAA-3&#39; se encuentra en el 5&#39; yop incoe y mutaciones que alteran el motivo de secuencia reducci&oacute;n o suprimido la regulaci&oacute;n mediada por yscM1 y yscM2. Se propone un modelo por el que YopD, LcrH, YscM1, YscM2 y como regulan la expresi&oacute;n de yop en respuesta a se&ntilde;ales ambientales espec&iacute;ficos y por un mecanismo que puede implicar la Uni&oacute;n de algunos de estos factores a una secuencia espec&iacute;ficos dentro de la UTR de mRNAs yop.

Tipo de Yersinia enterocolitica secreci&oacute;n III: yscM1 y yscM2 regulan la expresi&oacute;n del gen de yop por un mecanismo postranscripcional que se dirige a la regi&oacute;n 5&#39; no traducida de yop mRNA.

&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x83CC;&#x5C0F;&#x80A0;&#x7ED3;&#x80A0;&#x708E;&#x4F20;&#x8F93; YscM1 &#x548C; YscM2 &#x901A;&#x8FC7;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x5728;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x524D;, YscM1 &#x548C; YscM2 &#x65BD;&#x52A0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x6765;&#x6291;&#x5236;&#x6548;&#x5E94; yop &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x6210;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x65C5;&#x884C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7B2C;&#x4E09;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x9884;&#x8BA1;&#x4ECE;&#x9547;&#x538B;&#x6551;&#x6D4E;&#x53D1;&#x751F;&#x901A;&#x8FC7; YscM1 &#x548C; YscM2 &#x7684;&#x7C7B;&#x578B; III &#x5206;&#x6CCC;&#x5230;&#x80DE;&#x5916;&#x4ECB;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x76D1;&#x7BA1;&#x5206;&#x5B50;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684;&#x67AF;&#x7AED;&#x3002;&#x5728;&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528; FlAsH &#x6807;&#x7B7E;&#x7684;&#x591A;&#x80BD; digitonin &#x5206;&#x998F;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5177;&#x6709;&#x672C;&#x5730;&#x5316; YscM1 &#x548C; YscM2 &#x5728;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5185;&#x3002;YscM1 &#x548C; YscM2 &#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x6CE8;&#x5C04;&#x6240;&#x9700;&#x7684; SycH &#x76D1;&#x62A4;&#x4EBA;&#x3002;C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x878D;&#x5408;&#x7684; YscM1 &#x548C; YscM2 &#x7684;&#x65B0;&#x9709;&#x7D20;&#x78F7;&#x9178;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x8BB0;&#x8005;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x663E;&#x793A;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x6D3B;&#x52A8; SycH &#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;SycH &#x548C;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD; S-&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; (GST) &#x7684;&#x5171;&#x8868;&#x8FBE;-YscM1 &#x6216;&#x5546;&#x54C1;&#x53CA;&#x670D;&#x52A1;&#x7A0E;-YscM2&#xFF0C;&#x4E0D;&#x80FD;&#x7531;&#x8BE5;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x4EEA;&#x5668;&#x3001; &#x8FD0;&#x8F93;&#x7684;&#x6DF7;&#x5408; GST &#x53D8;&#x5F62;&#x4E5F;&#x89E3;&#x9664;&#x4E86; Yop &#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;&#x5546;&#x54C1;&#x53CA;&#x670D;&#x52A1;&#x7A0E;-SycH &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; YscM1 &#x548C; YscM2 &#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6548;&#x5E94;&#x5668; yop &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6CA1;&#x6709;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x901A;&#x9053;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5F00;&#x59CB;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A; YscM1&#xFF0C;YscM2 &#x548C; SycH yop &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x5206;&#x6CCC;&#xFF0C;&#x72EC;&#x81EA;&#x884C;&#x52A8;&#x548C;&#x51DD;&#x80F6;&#x8FC7;&#x6EE4;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x663E;&#x793A;&#x7684; YscM1 &#x548C; YscM2 &#x4E0D;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; SycH &#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x54EA;&#x91CC; Yop &#x5408;&#x6210;&#x538B;&#x6291;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x53EF;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x76D1;&#x62A4;&#x4EBA; SycH &#x524D;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x6CE8;&#x5165;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514D;&#x9664; YscM1 &#x548C; YscM2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;

SycH &#x4F34;&#x4FA3;&#x5BF9; YscM1 &#x548C; YscM2 &#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6548;&#x5E94;&#x5668; yop &#x5728;&#x5C0F;&#x80A0;&#x7ED3;&#x80A0;&#x708E;&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Yersinia enterocolitica transports YscM1 and YscM2 via the type III pathway, a mechanism that is required for the establishment of bacterial infections. Prior to host cell contact, YscM1 and YscM2 exert posttranscriptional regulation to inhibit expression of effector yop genes, which encode virulence factors that travel the type III pathway into the cytoplasm of macrophages. Relief from repression has been predicted to occur via the type III secretion of YscM1 and YscM2 into the extracellular medium, resulting in the depletion of regulatory molecules from the bacterial cytoplasm. Using digitonin fractionation and fluorescence microscopy of FlAsH-labeled polypeptides in Yersinia-infected cells, we have localized YscM1 and YscM2 within the host cell cytoplasm. Type III injection of YscM1 and YscM2 required the SycH chaperone. Expression of C-terminal fusions of YscM1 and YscM2 to the neomycin phosphotransferase reporter revealed sequences required for regulatory activity and for secretion in the absence of SycH. Coexpression of SycH and glutathione S-transferase (GST)-YscM1 or GST-YscM2, hybrid GST variants that cannot be transported by the type III apparatus, also relieved repression of Yop synthesis. GST-SycH bound to YscM1 and YscM2 and activated effector yop expression without initiation of the bound regulatory molecules into the type III pathway. Further, regulation of yop expression by YscM1, YscM2, and SycH is shown to act independently of factors that regulate secretion, and gel filtration chromotography revealed populations of YscM1 and YscM2 that are not bound to SycH under conditions where Yop synthesis is repressed. Taken together, these results suggest that YscM1- and YscM2-mediated repression may be relieved through binding to the cytoplasmic chaperone SycH prior to their type III injection into host cells.

Binding of SycH chaperone to YscM1 and YscM2 activates effector yop expression in Yersinia enterocolitica.

Transports en Yersinia enterocolitica commun YscM1 et YscM2 par la voie de type III, un m&eacute;canisme qui est n&eacute;cessaire pour la mise en place d&#39;infections bact&eacute;riennes. Avant le contact de cellule h&ocirc;te, YscM1 et YscM2 exercent post-transcriptionnel r&egrave;glement pour inhiber l&#39;expression des g&egrave;nes d&#39;yop effecteur, qui codent des facteurs de virulence qui voyagent de la voie de type III dans le cytoplasme des macrophages. Soulagement de la r&eacute;pression a &eacute;t&eacute; pr&eacute;dit se pour produire par la s&eacute;cr&eacute;tion de la III type de YscM1 et YscM2 dans le milieu extracellulaire, ce qui entra&icirc;ne l&#39;appauvrissement de la couche de mol&eacute;cules r&eacute;gulatrices du cytoplasme bact&eacute;rien. Au microscope de fractionnement et de fluorescence digitonine de polypeptides marqu&eacute;s au FlAsH dans les cellules infect&eacute;es par Yersinia, nous avons localis&eacute; des YscM1 et YscM2 dans le cytoplasme de la cellule h&ocirc;te. Injection de type III de YscM1 et de YscM2 requis l&#39;escorte SycH. Expression des fusions de C-terminal de YscM1 et de YscM2 au journaliste n&eacute;omycine phosphotransf&eacute;rase a r&eacute;v&eacute;l&eacute; des s&eacute;quences requis pour l&#39;activit&eacute; de r&eacute;gulation et de s&eacute;cr&eacute;tion en l&#39;absence de SycH. Coexpression de SycH et glutathion S-transf&eacute;rase (GST)-YscM1 ou GST-YscM2, variantes hybrides GST qui ne peuvent &ecirc;tre transport&eacute;s par le type III appareils, aussi relev&eacute;e de r&eacute;pression de la synth&egrave;se de Yop. GST-SycH li&eacute; &agrave; YscM1 et YscM2 et activ&eacute; expression yop effecteur sans initiation des mol&eacute;cules r&eacute;glementaires li&eacute;s &agrave; la voie de type III. De plus, r&eacute;gulation de l&#39;expression d&#39;yop par YscM1, YscM2 et SycH est montr&eacute;e d&#39;agir ind&eacute;pendamment de facteurs qui r&eacute;gulent la s&eacute;cr&eacute;tion et gel filtration chromotography a r&eacute;v&eacute;l&eacute; des YscM1 et des YscM2 des populations qui ne sont pas li&eacute;es &agrave; SycH dans des conditions o&ugrave; la synth&egrave;se de Yop est r&eacute;prim&eacute;e. Pris ensemble, ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que la r&eacute;pression par la YscM1 et YscM2 peut-&ecirc;tre &ecirc;tre soulag&eacute;e gr&acirc;ce &agrave; la liaison &agrave; l&#39;escorte cytoplasmique SycH avant leur type injection III dans les cellules h&ocirc;tes.

Liaison du Chaperon SycH &agrave; YscM1 et YscM2 active l&#39;expression d&#39;yop effecteur dans Yersinia enterocolitica.

Yersinia enterocolitica trasporti YscM1 e YscM2 attraverso la via di tipo III, un meccanismo che &egrave; necessaria per l&#39;instaurazione di infezioni batteriche. Prima del contatto cellula ospite, YscM1 e YscM2 esercitare posttranscriptional regolamento per inibire l&#39;espressione dei geni di yop di effector, che codificano i fattori di virulenza che percorrere il sentiero di tipo III nel citoplasma dei macrofagi. Sollievo dalla repressione &egrave; stato previsto per accadere attraverso la secrezione di III tipo YscM1 e YscM2 nel mezzo extracellulare, con conseguente depauperamento delle molecole regolatrici dal citoplasma batterico. Utilizzando digitonin microscopia di fluorescenza e frazionamento dei polipeptidi con etichetta FlAsH in cellule infettate da Yersinia, noi abbiamo localizzato YscM1 e YscM2 all&#39;interno del citoplasma della cellula ospite. Tipo III iniezione di YscM1 e YscM2 richiesto il chaperone SycH. Espressione delle fusioni C-terminale di YscM1 e YscM2 per il reporter di neomicina fosfotransferasi rivelato sequenze necessarie per l&#39;attivit&agrave; di regolamentazione e di secrezione in assenza di SycH. Coexpression del glutatione S-transferasi (GST) e SycH-YscM1 o GST-YscM2, varianti ibride GST che non possono essere trasportati dal tipo apparato III, anche alleviato repressione di Yop sintesi. GST-SycH associato a YscM1 e YscM2 e attivato espressione yop effettrici senza iniziazione delle molecole normative legate il pathway di tipo III. Ulteriormente, regolazione dell&#39;espressione di yop SycH, YscM2 e YscM1 &egrave; dimostrato di agire indipendentemente da fattori che regolano la secrezione e gel filtrazione chromotography ha rivelato delle popolazioni di YscM1 e YscM2 che non sono associate a SycH condizioni dove sintesi Yop sono represso. Presi insieme, questi risultati suggeriscono che la repressione mediata da YscM1 e YscM2 possa essere alleviati tramite l&#39;associazione per il chaperone citoplasmatico SycH prima del loro tipo iniezione III in cellule ospiti.

Associazione di chaperone SycH a YscM1 e YscM2 attiva l&#39;espressione yop effector di Yersinia enterocolitica.

Yersinia enterocolitica &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8; YscM1 &#x3068; YscM2 &#x578B;&#x306E; III &#x7D4C;&#x8DEF;&#x78BA;&#x7ACB;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3002;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x524D;&#x306B; YscM1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; YscM2 &#x578B; III &#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5927;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306B;&#x65C5;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; &#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x529B;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6291;&#x5727;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6551;&#x6E08;&#x306F;&#x3001;YscM1 &#x3068; YscM2 &#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x57F9;&#x5730;&#x306B;&#x306F;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3078;&#x306E;&#x7D4C;&#x7531;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4E88;&#x60F3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B8;&#x30AE;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#x5206;&#x5225;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; &#x30E9;&#x30D9;&#x30EB; &#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30A8;&#x30EB;&#x30B7;&#x30CB;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; YscM1 &#x3068; YscM2 &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5185;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;YscM1 &#x3068; YscM2 &#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x6CE8;&#x5165;&#x5909;&#x66F4;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3002;YscM1 &#x3068; YscM2 &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x878D;&#x5408;&#x30CD;&#x30AA;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x8A18;&#x8005;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x898F;&#x5236;&#x6D3B;&#x52D5;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x5206;&#x6CCC;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5909;&#x66F4;&#x3068;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3; s-&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (GST) &#x306E;&#x767A;&#x73FE;-YscM1 &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x88C5;&#x7F6E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8F38;&#x9001;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9; GST &#x4E9C;&#x7A2E; GST YscM2 &#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3082;&#x5B89;&#x5FC3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;GST &#x5909;&#x66F4; YscM1 &#x3068; YscM2 &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; &#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x5F0F;&#x578B; III &#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x306A;&#x3057;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;YscM1&#x3001;YscM2&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5909;&#x66F4;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x767A;&#x73FE;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x8981;&#x56E0;&#x3068;&#x306F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30B2;&#x30EB;&#x308D;&#x904E; chromotography &#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x5408;&#x6210;&#x304C;&#x6291;&#x5727;&#x3055;&#x308C;&#x3067;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044; YscM1 &#x3068; YscM2 &#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6CE8;&#x5165; III &#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x5909;&#x66F4;&#x524D;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; YscM1 &#x3068; YscM2 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x6291;&#x5727;&#x3092;&#x514D;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x5909;&#x66F4;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3; YscM1 &#x3068; YscM2 &#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; &#x30E8;&#x30C3;&#x30D7;&#x5F0F;&#x30B5;&#x30B1;&#x79D1;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C9;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; enterocolitica &#xC804;&#xC1A1; YscM1 &#xBC0F; YscM2 &#xC720;&#xD615; III &#xACBD;&#xB85C;, &#xC138;&#xADE0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;. &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCD09; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; Yscm1&#xC640; YscM2 &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC720;&#xD615; III &#xD1B5;&#xB85C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xD589; &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC778; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC606; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; posttranscriptional &#xADDC;&#xC815;&#xC744; &#xBC1C;&#xD718; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5B5;&#xC555;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xD638; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADDC;&#xC81C; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xACE0;&#xAC08;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC911;&#xAC04;&#xC5D0; Yscm1&#xC640; Yscm2&#xC758; &#xC720;&#xD615; III &#xBD84; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC608;&#xCE21; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD50C;&#xB798;&#xC2DC; &#xB77C;&#xB294; polypeptides&#xC758; digitonin &#xBD84;&#xB958; &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; YscM1 &#xBC0F; YscM2 &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C;. YscM1 &#xBC0F; Yscm2&#xC758; &#xC720;&#xD615; III &#xC0AC;&#xCD9C; SycH &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xD544;&#xC694;. &#xB124;&#xC624; &#xB9C8;&#xC774; &#xC2E0; phosphotransferase &#xAE30;&#xC790; Yscm1&#xC640; Yscm2&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; fusions&#xC758; &#xC2DD; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; Sych&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xACF5;&#xAC1C;. SycH &#xD2F0; S &#xC804;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C; (GST)&#xC758; coexpression-YscM1 &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xD615; III &#xAE30;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC774;&#xC1A1; &#xB420; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; GST &#xBCC0;&#xC885; GST YscM2 &#xB610;&#xD55C; &#xC606; &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC548;&#xC2EC;. GST SycH YscM1 &#xBC0F; Yscm2&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xBC0F; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC606; &#xC2DD; &#xC5C6;&#xC774; &#xC720;&#xD615; III &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xADDC;&#xC81C; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, YscM1, YscM2, &#xBC0F; SycH &#xC606; &#xC2DD;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC778;, &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBC0F; &#xC824; &#xC5EC;&#xACFC; chromotography &#xACC4;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; SycH &#xC870;&#xAC74; &#xC606; &#xC885;&#xD569; &#xC5B5;&#xC555; &#xB41C; Yscm1&#xC640; Yscm2&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; YscM1 &#xBC0F; YscM2 &#xC911;&#xC7AC; &#xC5B5;&#xC555; III &#xC0AC;&#xCD9C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; SycH &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC720;&#xD615; &#xC0AC;&#xC804;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC548;&#xC2EC;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

YscM1 &#xBC0F; YscM2 SycH &#xBCF4;&#xD638;&#xC790;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC606; &#xC2DD; &#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; enterocolitica &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Transportes de Yersinia enterocolitica tipo YscM1 y YscM2 v&iacute;a el camino de tipo III, un mecanismo que se requiere para el establecimiento de infecciones bacterianas. Antes del contacto de c&eacute;lulas hu&eacute;sped, YscM1 y YscM2 ejercen regulaci&oacute;n postranscripcional para inhibir la expresi&oacute;n de efector yop genes, que codifican factores de virulencia que recorren el camino de tipo III en el citoplasma de los macr&oacute;fagos. Alivio de la represi&oacute;n se ha previsto para ocurrir a trav&eacute;s de la secreci&oacute;n de III de tipo de YscM1 y YscM2 en el medio extracelular, dando por resultado el agotamiento de mol&eacute;culas reguladoras del citoplasma bacteriano. Mediante microscop&iacute;a de fraccionamiento y fluorescencia de digitonin de etiquetado FlAsH polip&eacute;ptidos en c&eacute;lulas infectadas por Yersinia, que hemos localizado YscM1 y YscM2 dentro del citoplasma de la c&eacute;lula hu&eacute;sped. Inyecci&oacute;n de tipo III de YscM1 y YscM2 necesaria la como acompa&ntilde;ante. Expresi&oacute;n de fusiones c-terminal de YscM1 y YscM2 para el reportero de neomicina fosfotransferasa revel&oacute; secuencias necesarias para la actividad normativa y secreci&oacute;n en la ausencia de suspiro. Coexpresi&oacute;n de SycH y glutati&oacute;n S-transferasa (GST)-YscM1 o GST-YscM2, variantes h&iacute;bridas GST que no puede ser transportado por el tipo de aparato III, tambi&eacute;n alivia la represi&oacute;n de la s&iacute;ntesis de Yop. GST-como YscM1 y YscM2 y activa la expresi&oacute;n de yop efectoras sin la iniciaci&oacute;n de las mol&eacute;culas reguladoras consolidadas en la v&iacute;a de tipo III. Adem&aacute;s, la regulaci&oacute;n de la expresi&oacute;n de yop por YscM1, YscM2 y como se muestra a actuar independientemente de los factores que regulan la secreci&oacute;n y cromatograf&iacute;a de gel filtraci&oacute;n revel&oacute; las poblaciones de YscM1 y YscM2 que no est&aacute;n limitadas a SycH en condiciones donde se represi&oacute;n la s&iacute;ntesis de Yop. Tomados juntos, estos resultados sugieren que represi&oacute;n mediada por YscM1 y YscM2 puede aliviarse a trav&eacute;s de unirse a the chaperone citoplasm&aacute;tico como antes su tipo inyecci&oacute;n III en las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped.

Uni&oacute;n de acompa&ntilde;ante como YscM1 y YscM2 activa efectoras yop expresi&oacute;n en Yersinia enterocolitica.

&#x7EC6;&#x83CC; invasins&#xFF1A; &#x5206;&#x5B50;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E13;&#x7528;&#x4E8E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#x3002;

Bacterial invasins: molecular systems dedicated to the invasion of host tissues.

Invasins bact&eacute;rienne : syst&egrave;mes mol&eacute;culaires d&eacute;di&eacute; &agrave; l&#39;invasion des tissus de l&#39;h&ocirc;te.

Invasins batterica: sistemi molecolari dedicata all&#39;invasione dei tessuti dell&#39;ospite.

&#x7D30;&#x83CC; invasins: &#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x5C02;&#x7528;&#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x4FB5;&#x7565;&#x3002;

&#xC138;&#xADE0; invasins: &#xBD84;&#xC790; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC870;&#xC9C1; &#xCE68;&#xC785;&#xC5D0; &#xC804;&#xB150;.

Invasins bacteriana: sistemas moleculares dedican a la invasi&oacute;n de los tejidos del hu&eacute;sped.

La Legionella pneumophila sistema Dot/Icm es un tipo de aparato de secreci&oacute;n IV que transfiere prote&iacute;nas bacterianas en las c&eacute;lulas eucariotas hospederas. La prote&iacute;na de RalF es un sustrato comprometidos y trasladadas en las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped por el sistema de punto/Icm. En este estudio, se ha investigado el mecanismo de desplazamiento de punto/Icm-mediada de RalF. Se determin&oacute; que RalF desplazamiento en las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped se produce antes de internalizaci&oacute;n bacteriana. Secuencias esenciales para la translocaci&oacute;n de RalF se encontraban en la terminal C de la prote&iacute;na de RalF. Una prote&iacute;na de fusi&oacute;n que consta de un p&eacute;ptido de 20 aa c-terminal RalF anexado al dominio de la prote&iacute;na de Adenilato ciclasa de Bordetella pertussis dependiente de calmodulina Adenilato ciclasa fue desplazada en las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped por el sistema de punto/Icm. Un residuo de la leucina (L372) en la posici&oacute;n-3 en lo referente a la terminal C RalF fue fundamental para el desplazamiento. Compatible con RalF L372 desempe&ntilde;ando un papel importante en el reconocimiento del sustrato por el sistema de punto/Icm, m&aacute;s otros sustratos de Dot/Icm se encontraron residuos del amino&aacute;cido con propiedades f&iacute;sicas similares al su -3 o-4 C-posiciones terminales. Estos datos demuestran que el sistema de punto/Icm puede transferir prote&iacute;nas bacterianas que modulan las funciones celulares de host antes de absorci&oacute;n e indican que reconocimiento de sustrato implica una se&ntilde;al de desplazamiento del c-terminal. As&iacute;, Legionella tiene la capacidad de sintetizar prote&iacute;nas sustrato y transferirlos a las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped en contacto, permitiendo Legionella modificar r&aacute;pidamente el transporte de la vacuola en la que reside.

Una se&ntilde;al de desplazamiento c-terminal necesaria para la entrega de punto/Icm-dependiente de la prote&iacute;na de Legionella RalF a las c&eacute;lulas del hu&eacute;sped.

&#x55DC;&#x80BA;&#x519B;&#x56E2;&#x83CC;&#x70B9;/Icm &#x7CFB;&#x7EDF;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x5C06;&#x7EC6;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x8F6C;&#x5316;&#x4E3A;&#x771F;&#x6838;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; IV &#x5206;&#x6CCC;&#x5668;&#x5177;&#x3002;RalF &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x4ECE;&#x4E8B;&#x548C;&#x518D;&#x5165;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x70B9;/Icm &#x7CFB;&#x7EDF;&#x886C;&#x5E95;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5706;&#x70B9;/Icm &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6613;&#x4F4D;&#x7684; RalF &#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x53D7;&#x5230;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x5B83;&#x786E;&#x5B9A; RalF &#x6613;&#x4F4D;&#x5230;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5185;&#x90E8;&#x5316;&#x4E4B;&#x524D;&#x3002;&#x5E8F;&#x5217; RalF &#x6613;&#x4F4D;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x662F;&#x4F4D;&#x4E8E; RalF &#x86CB;&#x767D; C &#x603B;&#x7AD9;&#x3002;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x8FFD;&#x52A0;&#x5230;&#x6CE2;&#x6C0F;&#x6746;&#x83CC;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x9499;&#x8C03;&#x7D20;&#x7684;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x57DF; 20 aa C &#x7EC8;&#x7AEF; RalF &#x80BD;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x4F1A;&#x7531;&#x70B9;/Icm &#x7CFB;&#x7EDF;&#x8FDB;&#x5165;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x3002;&#x4EAE;&#x6C28;&#x9178; (L372) &#x6B8B;&#x7559;&#x5728; RalF C &#x603B;&#x7AD9;-3 &#x5B9A;&#x4F4D;&#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x6613;&#x4F4D;&#x3002;&#x7B26;&#x5408; RalF L372 &#x7531;&#x70B9;/Icm &#x7CFB;&#x7EDF;&#x5E95;&#x7269;&#x8BC6;&#x522B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5176;&#x4ED6;&#x70B9;/Icm &#x57FA;&#x6750;&#x4E0A;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x6709;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x5177;&#x6709;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x5C5E;&#x6027;&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;-3 &#x6216;-4 C-&#x7EC8;&#x7AEF;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5706;&#x70B9;/Icm &#x7CFB;&#x7EDF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F20;&#x8F93;&#x7EC6;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x8C03;&#x8282;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x4E4B;&#x524D;&#x5438;&#x6536;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x4F53;&#x8BC6;&#x522B;&#x6D89;&#x53CA;&#x4E00;&#x4E2A; C-&#x672B;&#x7AEF;&#x6613;&#x4F4D;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x519B;&#x56E2;&#x83CC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5408;&#x6210;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x63A5;&#x89E6;&#xFF0C;&#x628A;&#x5B83;&#x8F6C;&#x5230;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x4F7F;&#x519B;&#x56E2;&#x8FC5;&#x901F;&#x6539;&#x53D8;&#x5B83;&#x6240;&#x9A7B;&#x7559;&#x7684;&#x6CE1;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;

&#x5BF9;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x519B;&#x56E2;&#x83CC; RalF &#x86CB;&#x767D;&#x70B9;/Icm-&#x4F9D;&#x8D56;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x6240;&#x9700;&#x7684; C-&#x672B;&#x7AEF;&#x6613;&#x4F4D;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

The Legionella pneumophila Dot/Icm system is a type IV secretion apparatus that transfers bacterial proteins into eukaryotic host cells. The RalF protein is a substrate engaged and translocated into host cells by the Dot/Icm system. In this study, the mechanism of Dot/Icm-mediated translocation of RalF has been investigated. It was determined that RalF translocation into host cells occurs before bacterial internalization. Sequences essential for RalF translocation were located at the C terminus of the RalF protein. A fusion protein consisting of a 20-aa C-terminal RalF peptide appended to the calmodulin-dependent adenylate cyclase domain of the Bordetella pertussis adenylate cyclase protein was translocated into host cells by the Dot/Icm system. A leucine (L372) residue at the -3 position in relation to the RalF C terminus was critical for translocation. Consistent with RalF L372 playing an important role in substrate recognition by the Dot/Icm system, most other Dot/Icm substrates were found to have amino acid residues with similar physical properties at their -3 or -4 C-terminal positions. These data demonstrate that the Dot/Icm system can transfer bacterial proteins that modulate host cellular functions before uptake and indicate that substrate recognition involves a C-terminal translocation signal. Thus, Legionella has the ability to engage synthesized substrate proteins and transfer them into host cells on contact, enabling Legionella to rapidly alter transport of the vacuole in which it resides.

A C-terminal translocation signal required for Dot/Icm-dependent delivery of the Legionella RalF protein to host cells.

La syst&egrave;me de la Dot/Icm de Legionella pneumophila est un type appareil de s&eacute;cr&eacute;tion IV qui transf&egrave;re des prot&eacute;ines bact&eacute;riennes dans les cellules h&ocirc;tes eucaryotes. La prot&eacute;ine de RalF est un substrat engag&eacute; et transport&eacute;e dans les cellules de l&#39;h&ocirc;te par le syst&egrave;me de la Dot/Icm. Dans cette &eacute;tude, on a &eacute;tudi&eacute; le m&eacute;canisme de la translocation Dot/Icm-mediated de RalF. Il a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute; que RalF translocation dans les cellules h&ocirc;tes avant d&#39;internalisation bact&eacute;rienne. S&eacute;quences essentielles pour RalF translocation &eacute;taient situ&eacute;es &agrave; l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C terminale de la prot&eacute;ine de RalF. Une prot&eacute;ine de fusion, compos&eacute; d&#39;un peptide de C-terminal RalF 20-aa annex&eacute; au domaine calmoduline-d&eacute;pendante de l&#39;ad&eacute;nylate cyclase de la prot&eacute;ine de l&#39;ad&eacute;nylate cyclase Bordetella pertussis &eacute;tait transport&eacute;e dans les cellules h&ocirc;tes par le syst&egrave;me de la Dot/Icm. Un r&eacute;sidu de la leucine (L372) &agrave; la position-3 en ce qui concerne le terminus de RalF C &eacute;tait primordial pour la translocation. En harmonie avec RalF L372 jouant un r&ocirc;le important dans la reconnaissance du substrat par le syst&egrave;me de la Dot/Icm, la plupart des autres substrats Dot/Icm ont montr&eacute; des r&eacute;sidus d&#39;acides amin&eacute;s ayant des propri&eacute;t&eacute;s physiques semblables &agrave; leur -3 ou-4 C-postes terminaux. Ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent que le syst&egrave;me de la Dot/Icm peut transf&eacute;rer des prot&eacute;ines bact&eacute;riennes qui modulent les fonctions cellulaires h&ocirc;te avant absorption et indiquent que la reconnaissance du substrat implique un signal de translocation de C-terminal. Ainsi, Legionella a la capacit&eacute; de s&#39;engager synth&eacute;tis&eacute; les substrats prot&eacute;iques et de les transf&eacute;rer dans les cellules h&ocirc;tes sur contact, permettant aux Legionella &agrave; rapidement modifier les transports de la vacuole dans lequel il r&eacute;side.

Un signal de translocation de C-terminal requis pour la livraison de la Dot/Icm-d&eacute;pendant de la prot&eacute;ine de Legionella RalF aux cellules de l&#39;h&ocirc;te.

La Legionella pneumophila sistema Dot/Icm &egrave; un tipo di apparato di secrezione di IV che trasferisce le proteine batteriche in cellule eucariotiche ospiti. La proteina di RalF &egrave; un substrato impegnati e traslocata in cellule ospiti dal sistema Dot/Icm. In questo studio, &egrave; stato studiato il meccanismo di traslocazione Dot/Icm-mediata di RalF. &Egrave; stato determinato che RalF traslocazione in cellule ospiti si verifica prima di interiorizzazione batterica. Sequenze essenziali per RalF traslocazione si trovavano presso il C-terminale della proteina RalF. Una proteina di fusione che consiste di un peptide C-terminale RalF 20-aa aggiunto al dominio della proteina Bordetella pertussis adenilato ciclasi adenilato ciclasi calmodulina-dipendente &egrave; stata traslocata in cellule ospiti dal sistema Dot/Icm. Un residuo di leucina (L372) in corrispondenza della posizione in relazione al capolinea di RalF C-3 &egrave; stato critico per traslocazione. Coerentemente con RalF L372 giocando un ruolo importante nel riconoscimento del substrato dal sistema Dot/Icm, pi&ugrave; altri substrati Dot/Icm sono stati trovati per avere residui dell&#39;amminoacido con caratteristiche fisiche simili a loro -3 o-4 C-terminale posizioni. Questi dati dimostrano che il sistema Dot/Icm pu&ograve; trasferire proteine batteriche che modulano funzioni cellulari host prima di assorbimento e indicano che il riconoscimento del substrato coinvolge un segnale di traslocazione del C-terminale. Cos&igrave;, Legionella ha la capacit&agrave; di impegnarsi sintetizzate le proteine substrato e trasferirli in cellule ospiti a contatto, permettendo la Legionella alterare rapidamente trasporto del vacuolo in cui risiede.

Un segnale di traslocazione C-terminale necessario per la consegna di Dot/Icm-dipendente della proteina Legionella RalF a cellule ospiti.

&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9; &#x30FB; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9; &#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x7D30;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x8EE2;&#x9001; IV &#x5206;&#x6CCC;&#x88C5;&#x7F6E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30E9;&#x30EB;&#x30D5;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x7B49;&#x306E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;, &#x57FA;&#x677F;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30EB;&#x30D5;&#x306E;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x8EE2;&#x6D41;&#x6A5F;&#x69CB;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30E9;&#x30EB;&#x30D5;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x5185;&#x9762;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30EB;&#x30D5;&#x306E;&#x8EE2;&#x7F6E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x30E9;&#x30EB;&#x30D5; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30DC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30C6;&#x30E9;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0; 20 aa &#x30E9;&#x30EB;&#x30D5; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x304B;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; translocated &#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30ED;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; (L372) &#x6B8B;&#x7559;&#x30E9;&#x30EB;&#x30D5; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;-3 &#x4F4D;&#x7F6E;&#x306E;&#x8EE2;&#x7F6E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x91CD;&#x5927;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x57FA;&#x8CEA;&#x8A8D;&#x8B58;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x305F;&#x30E9;&#x30EB;&#x30D5; L372 &#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x57FA;&#x677F;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x6027;&#x8CEA;&#x3001;-3 &#x307E;&#x305F;&#x306F;-4 &#x2103; &#x304C;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;-&#x7AEF;&#x5B50;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x5438;&#x53CE;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x57FA;&#x8CEA;&#x8A8D;&#x8B58; C &#x7AEF;&#x5B50;&#x8EE2;&#x6D41;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8EE2;&#x9001;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9; &#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x6DB2;&#x80DE;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x57FA;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x5F93;&#x4E8B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x9023;&#x7D61;&#x5148;&#x3092;&#x8EE2;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x914D;&#x4FE1;&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9; &#x30E9;&#x30EB;&#x30D5; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A; C &#x672B;&#x7AEF;&#x8EE2;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

Legionella pneumophila &#xB3C4;&#xD2B8;/Icm &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xD615;&#xC2DD; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1; 4 &#xBD84; &#xBE44; &#xAE30;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB784; &#xD504; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xACE0; &#xC810;/Icm &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; translocated &#xAE30;&#xD310; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB784; &#xD504;&#xC758; &#xC804; &#xC88C; &#xC810;/Icm &#xC911;&#xC7AC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB784; &#xD504; &#xC804; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB784; &#xD504; &#xC804; &#xC88C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218; &#xB784; &#xD504; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; C &#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58; &#xD588;&#xB2E4;. Bordetella &#xBC31; adenylate &#xC788;&#xACE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; calmodulin &#xC885;&#xC18D; adenylate &#xC788;&#xACE0; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; 20-aa C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB784; &#xD504; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC810;/Icm &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; translocated &#xD588;&#xB2E4;. &#xB784; &#xD504; C &#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD558;&#xC5EC;-3 &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0; (L372)&#xC758; &#xCC0C; &#xAEBC; &#xAE30;&#xB97C; &#xC804; &#xC88C;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB784; &#xD504; l372&#xC640; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; &#xC810;/Icm &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE30;&#xD310; &#xC778;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;, &#xAC00;&#xC7A5; &#xB2E4;&#xB978; &#xC810;/Icm &#xAE30;&#xD310; &#xB4E4;-3 &#xB610;&#xB294;-4 c&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xCC3E;&#xC544;&#xB0C8;&#xB2E4;-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC704;&#xCE58;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC124;&#xBA85; &#xC810;/Icm &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC870;&#xC808; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD310; &#xC778;&#xC2DD; &#xB2E8;&#xC790; &#xC804; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, Legionella&#xB294; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xACF5;&#xD3EC; &#xC804;&#xC1A1; &#xBCC0;&#xACBD; Legionella &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xAE30;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD569;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xC811;&#xCD09;, &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;.

&#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140;&#xC5D0; Legionella &#xB784; &#xD504; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB3C4;&#xD2B8;/Icm &#xC885;&#xC18D; &#xB0A9;&#xD488;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC804; &#xC2E0;&#xD638;.

&#x55DC;&#x80BA;&#x519B;&#x56E2;&#x83CC;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53; &#x300B; &#x53EF;&#x4EE5;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x590D;&#x5236;&#x3002;&#x8981;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x519B;&#x56E2;&#x83CC;&#x9700;&#x8981;&#x70B9;/Icm &#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x8D28;&#x76F4;&#x63A5;&#x6CE8;&#x5165;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x3002;&#x54EA;&#x4E9B;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x4ECE;&#x4E8B;&#x548C;&#x518D;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x70B9;/Icm &#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4E0D;&#x662F;&#x5F88;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x70B9;/Icm &#x5206;&#x6CCC;&#x673A;&#x68B0;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x8D28; IcmS &#x548C; IcmW&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6E38;&#x79BB;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x5728;&#x57FA;&#x677F;&#x6613;&#x4F4D;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; IcmS &#x548C; IcmW &#x5F62;&#x6210;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x3002;IcmW &#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x519B;&#x56E2;&#x83CC;&#xFF0C;&#x8FC5;&#x901F;&#x9000;&#x5316; IcmS &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x518D;&#x5165;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x70B9;/Icm &#x7CFB;&#x7EDF;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8BF1;&#x9975;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684; IcmW &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5B83;&#x786E;&#x5B9A; IcmS IcmW &#x590D;&#x6742;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x8D28;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x548C;&#x6613;&#x4F4D;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x626E;&#x6F14;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x90FD;&#x7B26;&#x5408;&#x6B63;&#x5728;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x671F;&#x95F4;&#x519B;&#x56E2;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5706;&#x70B9;/Icm-&#x4F9D;&#x8D56;&#x6613;&#x4F4D;&#x7684; IcmS IcmW &#x60C5;&#x7ED3;&#x3002;

&#x519B;&#x56E2;&#x83CC; IcmS-IcmW &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x70B9;/Icm &#x4ECB;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x6613;&#x4F4D;&#x3002;

The intracellular pathogen Legionella pneumophila can infect and replicate within macrophages of a human host. To establish infection, Legionella require the Dot/Icm secretion system to inject protein substrates directly into the host cell cytoplasm. The mechanism by which substrate proteins are engaged and translocated by the Dot/Icm system is not well understood. Here we show that two cytosolic components of the Dot/Icm secretion machinery, the proteins IcmS and IcmW, play an important role in substrate translocation. Biochemical analysis indicates that IcmS and IcmW form a stable protein complex. In Legionella, the IcmW protein is rapidly degraded in the absence of the IcmS protein. Substrate proteins translocated into mammalian host cells by the Dot/Icm system were identified using the IcmW protein as bait in a yeast two-hybrid screen. It was determined that the IcmS-IcmW complex interacts with these substrates and plays an important role in translocation of these proteins into mammalian cells. These data are consistent with the IcmS-IcmW complex being involved in the recognition and Dot/Icm-dependent translocation of substrate proteins during Legionella infection of host cells.

The Legionella IcmS-IcmW protein complex is important for Dot/Icm-mediated protein translocation.

La pathog&egrave;ne intracellulaire Legionella pneumophila peut infecter et se r&eacute;pliquer dans les macrophages d&#39;un h&ocirc;te humain. Pour &eacute;tablir l&#39;infection, Legionella n&eacute;cessitent le syst&egrave;me de s&eacute;cr&eacute;tion de Dot/Icm substrats prot&eacute;iques d&#39;injecter directement dans le cytoplasme de la cellule h&ocirc;te. Le m&eacute;canisme par lequel substrat prot&eacute;ines sont engag&eacute;s et transloqu&eacute;s par le syst&egrave;me de la Dot/Icm n&#39;est pas bien compris. Ici, nous montrons que les deux composantes cytosoliques de la machinerie de s&eacute;cr&eacute;tion Dot/Icm, les prot&eacute;ines du SGCI et IcmW, jouent un r&ocirc;le important dans la translocation du substrat. Analyse biochimique indique que le SGCI et IcmW forment un complexe de prot&eacute;ines stable. Legionella, la prot&eacute;ine IcmW est rapidement d&eacute;grad&eacute;e en l&#39;absence de la prot&eacute;ine du SGCI. Substrats prot&eacute;iques transloqu&eacute;s dans les cellules de mammif&egrave;re h&ocirc;te par le syst&egrave;me de la Dot/Icm ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s &agrave; l&#39;aide de la prot&eacute;ine IcmW comme app&acirc;t dans un &eacute;cran de deux-hybride de levure. Il a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute; que le complexe du SGCI-IcmW interagit avec ces substrats et joue un r&ocirc;le important dans la translocation de ces prot&eacute;ines dans les cellules mammif&egrave;res. Ces donn&eacute;es concordent avec le complexe du SGCI-IcmW &ecirc;tre impliqu&eacute; dans la reconnaissance et la translocation de la Dot/Icm-d&eacute;pendante des substrats prot&eacute;iques au cours de l&#39;infection &agrave; Legionella des cellules h&ocirc;tes.

Le complexe prot&eacute;ique de Legionella SGIC-IcmW est important pour la translocation de prot&eacute;ines Dot/Icm-m&eacute;di&eacute;e.

L&#39;agente patogeno intracellulare Legionella pneumophila pu&ograve; infettare e replicare all&#39;interno dei macrofagi di un ospite umano. Per stabilire l&#39;infezione, Legionella richiedono il sistema di secrezione di Dot/Icm per iniettare substrati proteina direttamente all&#39;interno del citoplasma della cellula ospite. Il meccanismo da cui substrato proteine sono impegnate e traslocate dal sistema Dot/Icm non &egrave; ben compreso. Qui vi mostriamo che due componenti citosolici del macchinario Dot/Icm secrezione, proteine IcmS e IcmW, un ruolo importante nella traslocazione del substrato. L&#39;analisi biochimica indica che IcmS e IcmW formano un complesso proteico stabile. Legionella, la proteina IcmW &egrave; rapidamente degradata in assenza della proteina IcmS. Proteine substrato traslocate in cellule di mammifero ospite dal sistema Dot/Icm sono state identificate usando la proteina IcmW come esca in una schermata di due-ibrido del lievito. &Egrave; stato determinato che il complesso IcmS-IcmW interagisce con questi substrati e svolge un ruolo importante nella traslocazione di queste proteine in cellule di mammiferi. Questi dati sono coerenti con il complesso di IcmS-IcmW essere coinvolto nel riconoscimento e traslocazione Dot/Icm-dipendente delle proteine substrato durante l&#39;infezione da Legionella di cellule ospiti.

Il complesso proteico di Legionella IcmS-IcmW &egrave; importante per la traslocazione di proteine Dot/Icm-mediata.

&#x7D30;&#x80DE;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9; &#x30FB; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x5185;&#x3067;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3069;&#x306E;&#x57FA;&#x677F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x5F93;&#x4E8B;&#x3057;&#x3001;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;, &#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8; &#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x5206;&#x6CCC;&#x6A5F;&#x68B0;&#x3001;IcmS &#x3068; IcmW&#x3001;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x8EE2;&#x6D41;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;IcmS &#x3068; IcmW &#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9;&#x306E; IcmW &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; IcmS &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x52A3;&#x5316;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x3092;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;, &#x57FA;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; IcmW &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x9175;&#x6BCD; 2 &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x990C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F; IcmS IcmW &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3068;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;IcmS IcmW &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3068;&#x57FA;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x8EE2;&#x6D41;&#x306B;&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9;&#x611F;&#x67D3;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9; IcmS IcmW &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8EE2;&#x7F6E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; Legionella pneumophila &#xAC10;&#xC5FC; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04; &#xC219;&#xC8FC; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; Legionella &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xD310; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xD558; &#xC810;/Icm &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5B4;&#xB5A4; &#xAE30;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC57D;&#xD63C; &#xBC0F; &#xC810;/Icm &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; translocated &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC810;/Icm &#xBD84; &#xBE44; &#xAE30;&#xACC4;, IcmS &#xBC0F; IcmW, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; cytosolic &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xAE30;&#xD310; &#xC804; &#xC88C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC11D; IcmS &#xBC0F; IcmW &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB808;&#xC9C0;&#xC624; &#xB12C; &#xB77C;, IcmW &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; IcmS &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD54D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC800;&#xD558; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB3C4;&#xD2B8;/Icm &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; translocated &#xAE30;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xB07C;&#xB85C; IcmW &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. IcmS IcmW &#xBCF5;&#xC7A1; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0;, &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC804; &#xC88C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xC778;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB808;&#xC9C0;&#xC624; &#xB12C; &#xB77C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; &#xAE30;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB3C4;&#xD2B8;/Icm &#xC885;&#xC18D; &#xC804; &#xC88C;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xC911;&#xC778; IcmS IcmW &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; Legionella IcmS IcmW &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC804; &#xC810;/Icm &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El pat&oacute;geno intracelular Legionella pneumophila puede infectar y replicar dentro de los macr&oacute;fagos de un anfitri&oacute;n humano. Para establecer la infecci&oacute;n, Legionella requieren el sistema de secreci&oacute;n de Dot/Icm inyectar sustratos de prote&iacute;na en el citoplasma de las c&eacute;lulas hu&eacute;sped. No se comprende bien el mecanismo por que substrato prote&iacute;nas est&aacute;n comprometidas y desplazadas por el sistema de punto/Icm. Aqu&iacute; mostramos que dos componentes citos&oacute;licas de la maquinaria de la secreci&oacute;n de Dot/Icm, las prote&iacute;nas IcmS y IcmW, juegan un papel importante en la translocaci&oacute;n de sustrato. El an&aacute;lisis bioqu&iacute;mico indica que el IcmS y IcmW forman una complejo estable de la prote&iacute;na. En Legionella, la prote&iacute;na IcmW se degrada r&aacute;pidamente en la ausencia de la prote&iacute;na del IcmS. Prote&iacute;nas sustrato trasladadas en las c&eacute;lulas hu&eacute;sped mam&iacute;fero por el sistema de punto/Icm se identificaron usando la prote&iacute;na IcmW como cebo en una pantalla de dos h&iacute;bridos de levadura. Se determin&oacute; que el IcmS-IcmW complejo interact&uacute;a con estos sustratos y desempe&ntilde;a un papel importante en el desplazamiento de estas prote&iacute;nas en c&eacute;lulas de mam&iacute;feros. Estos datos son consistentes con el complejo de IcmS-IcmW estar involucrado en el reconocimiento y el desplazamiento del punto/Icm-dependiente de prote&iacute;nas sustrato durante la infecci&oacute;n de c&eacute;lulas hospedadoras de Legionella.

El complejo de la prote&iacute;na de la Legionella IcmS-IcmW es importante para la translocaci&oacute;n de prote&iacute;nas Dot/Icm-mediada.

&#x6BD2;&#x529B;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5230;&#x4E3B;&#x673A;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x4E00;&#x9879;&#x5171;&#x540C;&#x6218;&#x7565;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x611F;&#x67D3;&#x9769;&#x5170;&#x9634;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x6240;&#x91C7;&#x7528;&#x3002;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#39;&#x6548;&#x5E94;&#39; &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x76EE;&#x524D;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x76F8;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x673A;&#x68B0;&#x5316;&#x5206;&#x660E;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x7C7B;&#x578B; III &#x548C;&#x7C7B;&#x578B;&#x56DB;&#x3001; &#x5206;&#x6CCC;&#x3002;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x5148;&#x7956;&#x6709;&#x5173; multiprotein &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x7EC4;&#x88C5;&#x97AD;&#x6BDB;&#xFF0C;&#x800C;&#x56DB;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x53EF;&#x80FD;&#x51FA;&#x73B0;&#x4ECE;&#x652F;&#x6301;&#x592B;&#x59BB;&#x8F6C;&#x8BA9; DNA &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9014;&#x5F84;&#x670D;&#x52A1;&#x8FD0;&#x8F93;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5230;&#x4E3B;&#x673A;&#xFF0C;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x8D28;&#x548C;&#x5305;&#x542B;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FE1;&#x606F;&#x8BC6;&#x522B;&#x51FA;&#x73B0;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x886C;&#x5E95;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x548C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5E95;&#x7269;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;

&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5165;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x3002;

The direct transport of virulence proteins from bacterium to host has emerged as a common strategy employed by Gram-negative pathogens to establish infections. Specialized secretion systems function to facilitate this process. The delivery of 'effector' proteins by these secretion systems is currently confined to two functionally similar but mechanistically distinct pathways, termed type III and type IV secretion. The type III secretion pathway is ancestrally related to the multiprotein complexes that assemble flagella, whereas the type IV mechanism probably emerged from the protein complexes that support conjugal transfer of DNA. Although both pathways serve to transport proteins from the bacterium to host, the recognition of the effector protein substrates and the secretion information contained in these proteins appear highly distinct. Here, we review the mechanisms involved in the selection of substrates by each of these transport systems and secretion signal information required for substrate transport.

Recognition and delivery of effector proteins into eukaryotic cells by bacterial secretion systems.

Le transport direct de prot&eacute;ines de virulence de la bact&eacute;rie h&ocirc;te est devenue une strat&eacute;gie commune employ&eacute;e par des pathog&egrave;nes Gram n&eacute;gatifs pour &eacute;tablir les infections. Fonction syst&egrave;mes de s&eacute;cr&eacute;tion sp&eacute;cialis&eacute;s pour faciliter ce processus. La livraison des prot&eacute;ines &laquo; effecteur &raquo; par ces syst&egrave;mes de s&eacute;cr&eacute;tion est actuellement limit&eacute;e &agrave; deux voies fonctionnellement similaires mais distinctes de fa&ccedil;on m&eacute;caniste, qualifi&eacute;s de s&eacute;cr&eacute;tion de type III et IV. La voie s&eacute;cr&eacute;tion de type III est ancestralement li&eacute;e aux complexes multiprot&eacute;iques qui assemblent des flagelles, tandis que le type de m&eacute;canisme IV d&eacute;coule probablement les complexes de prot&eacute;ine qui prennent en charge le transfert de l&#39;ADN. Bien que les deux voies servent &agrave; transporter les prot&eacute;ines de la bact&eacute;rie &agrave; l&#39;h&ocirc;te, la reconnaissance des substrats prot&eacute;ines effectrices et les informations de s&eacute;cr&eacute;tion contenues dans ces prot&eacute;ines apparaissent tr&egrave;s distincts. Ici, nous passons en revue les m&eacute;canismes impliqu&eacute;s dans la s&eacute;lection des substrats par chacun de ces syst&egrave;mes de transport et les informations de signal de s&eacute;cr&eacute;tion n&eacute;cessaires au transport du substrat.

Reconnaissance et ex&eacute;cution de prot&eacute;ines effectrices dans les cellules eucaryotes par syst&egrave;mes de s&eacute;cr&eacute;tion bact&eacute;rienne.

Il trasporto diretto delle proteine di virulenza da batterio a host &egrave; emersa come una strategia comune impiegata da agenti patogeni gram-negativi per stabilire le infezioni. Funzione di sistemi di secrezione specializzato per facilitare questo processo. La consegna delle proteine &#39;effettrici&#39; di questi sistemi di secrezione &egrave; attualmente limitata a due vie funzionalmente simili ma distinti meccanicistico, definiti di secrezione di tipo III e tipo IV. Il pathway secrezione di tipo III &egrave; ancestralmente correlato i complessi multiproteici che assemblare flagelli, considerando il tipo di meccanismo IV probabilmente emerse dai complessi della proteina che supportano conjugal trasferimento di DNA. Anche se entrambi percorsi servono per il trasporto di proteine dal batterio all&#39;host, il riconoscimento di substrati di proteine effettrici e le informazioni di secrezione contenuta in queste proteine appaiono molto distinte. Qui, passiamo in rassegna i meccanismi coinvolti nella selezione dei substrati da ciascuno di questi sistemi di trasporto e secrezione segnale informazioni necessarie per il trasporto del substrato.

Riconoscimento e consegna delle proteine effettrici in cellule eucariotiche da sistemi di secrezione batterici.

&#x76F4;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x304B;&#x3089;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63A1;&#x7528;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;&#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x95A2;&#x6570;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#39;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#39; &#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x3068;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; IV &#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B; 2 &#x3064;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x6A5F;&#x68B0;&#x8AD6;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; IV &#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F; DNA &#x306E;&#x592B;&#x5A66;&#x9593;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x306A;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x97AD;&#x6BDB;&#x3001;&#x591A;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x83CC;&#x304B;&#x3089;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3078;&#x8F38;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3001;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x308B;&#x5206;&#x6CCC;&#x60C5;&#x5831;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5404;&#x8F38;&#x9001;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x57FA;&#x8CEA;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x60C5;&#x5831;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A8D;&#x8B58;&#x3068;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xB3C5;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC804;&#xC1A1; &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0;&#xC6A9; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC804;&#xB7B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xB5A0;&#xC624;&#xB974;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xC804;&#xBB38;&#xB41C; &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#39;&#xC774;&#xD399;&#xD130;&#39; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC30;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAD6D;&#xD55C; &#xD604;&#xC7AC; &#xB450; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC0AC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; mechanistically &#xACE0;&#xC720; &#xACBD;&#xB85C;, &#xC720;&#xD615; III &#xBC0F; &#xC720;&#xD615; IV &#xBD84; &#xBE44; &#xB418; &#xB098;. &#xC720;&#xD615; III &#xBD84; &#xBE44; &#xD1B5;&#xB85C; ancestrally IV &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC720;&#xD615;&#xC740; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; DNA&#xC758; &#xBD80;&#xBD80; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB4F1;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; flagella, &#xC870;&#xB9BD; multiprotein &#xB2E8;&#xC9C0;&#xB97C; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xACBD;&#xB85C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC1A1;&#xC744; &#xBD09;&#xC0AC;, &#xBE44;&#xB85D; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xC9C8; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xBD84; &#xBE44; &#xC815;&#xBCF4; &#xC778;&#xC2DD; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC804;&#xC1A1; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD310; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBD84; &#xBE44; &#xC2E0;&#xD638; &#xC815;&#xBCF4; &#xAC01; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xC2DD;&#xACFC; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xC804;&#xB2EC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El transporte directo de prote&iacute;nas de virulencia de la bacteria a host se ha convertido en una estrategia com&uacute;n empleada por pat&oacute;genos gram-negativos para establecer infecciones. Funci&oacute;n de sistemas de secreci&oacute;n especializados para facilitar este proceso. La entrega de prote&iacute;nas &quot;efectoras&quot; por estos sistemas de secreci&oacute;n se limita actualmente a dos v&iacute;as funcionalmente similares pero distintas mec&aacute;nico, denominadas secreci&oacute;n de tipo III y tipo IV. La v&iacute;a de secreci&oacute;n tipo III ancestralmente se relaciona los complejos Multiproteinas que montan flagelos, mientras que el tipo de mecanismo IV probablemente surgi&oacute; de los complejos de prote&iacute;na que ayuda conyugal de la transferencia de ADN. Aunque ambas v&iacute;as sirven para el transporte de las prote&iacute;nas de la bacteria al host, el reconocimiento de los sustratos de prote&iacute;nas efectoras y la informaci&oacute;n de secreci&oacute;n contenida en estas prote&iacute;nas aparecen muy distintas. Aqu&iacute;, se revisan los mecanismos implicados en la selecci&oacute;n de sustratos por cada uno de estos sistemas de transporte y la informaci&oacute;n de se&ntilde;al de secreci&oacute;n necesaria para el transporte de sustrato.

Reconocimiento y entrega de prote&iacute;nas efectoras en las c&eacute;lulas eucariotas por sistemas de secreci&oacute;n bacteriana.

&#x8BB8;&#x591A;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9634;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x4F7F;&#x7528;&#x7C7B;&#x578B;&#x56DB;&#x3001; &#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF; &#xFF08;T4SS&#xFF09; &#x4E3A;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F20;&#x9012;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6613;&#x4F4D;&#x7684;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x771F;&#x6027;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6709;&#x6548;&#x627F;&#x8BA4;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x7684; T4SS&#x3002;&#x55DC;&#x80BA;&#x519B;&#x56E2;&#x83CC;&#x5165;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F7F;&#x7528;&#x5706;&#x70B9;/Icm T4SS &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x5982;&#x4F55;&#x70B9;/Icm &#x7CFB;&#x7EDF;&#x80FD;&#x591F;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x662F;&#x4E86;&#x89E3;&#x5F97;&#x5F88;&#x5C11;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; IcmS &#x548C; IcmW &#x86CB;&#x767D;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E00;&#x79CD;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x7531;&#x70B9;/Icm &#x7CFB;&#x7EDF;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6613;&#x4F4D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x590D;&#x6742;&#x7684; IcmSW &#x662F;&#x591A;&#x4E2A;&#x70B9;/Icm &#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x8FD0;&#x8F6C;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x80FD;&#x591F;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A; IcmSW &#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x6613;&#x4F4D;&#x5230;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728; L.&#x55DC;&#x80BA;&#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x95F4; icmS &#x548C; icmW&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x5730;&#x533A;&#x7684; SidG icmSW &#x4F9D;&#x8D56;&#x6613;&#x4F4D;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5168;&#x957F; SidG &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7531; icmSW &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4F1A;&#x8F6C;&#x79FB;&#xFF0C;&#x5220;&#x9664;&#x7684; SidG &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x5730;&#x533A;&#x5BFC;&#x81F4; icmSW &#x72EC;&#x7ACB;&#x6613;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x590D;&#x6742; IcmSW &#x4E0D;&#x6D3E;&#x9063;&#x76F4;&#x63A5;&#x5411;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x7531;&#x70B9;/Icm &#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x548C;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x590D;&#x6742;&#x7684; IcmSW &#x4E0E; SidG &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4E2D;&#x90E8;&#x5730;&#x533A;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;IcmSW &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5BFC;&#x81F4; SidG &#x86CB;&#x767D;&#x7531;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x51B3;&#x5B9A;&#x4E86;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; IcmSW &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x89E3;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7FA7;&#x57FA;&#x533A;&#x57DF;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x6613;&#x4F4D;&#x57DF; T4SS &#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x53D8;&#x5316;&#x52A0;&#x5F3A;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x4EA4;&#x8D27;&#x3002;

&#x55DC;&#x80BA;&#x519B;&#x56E2;&#x83CC; IcmSW &#x590D;&#x6742;&#x4E0E;&#x591A;&#x4E2A;&#x70B9;/Icm &#x4EA7;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF;&#x7C7B;&#x578B;&#x56DB;&#x3001; &#x6613;&#x4F4D;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

Many gram-negative pathogens use a type IV secretion system (T4SS) to deliver effector proteins into eukaryotic host cells. The fidelity of protein translocation depends on the efficient recognition of effector proteins by the T4SS. Legionella pneumophila delivers a large number of effector proteins into eukaryotic cells using the Dot/Icm T4SS. How the Dot/Icm system is able to recognize and control the delivery of effectors is poorly understood. Recent studies suggest that the IcmS and IcmW proteins interact to form a stable complex that facilitates translocation of effector proteins by the Dot/Icm system by an unknown mechanism. Here we demonstrate that the IcmSW complex is necessary for the productive translocation of multiple Dot/Icm effector proteins. Effector proteins that were able to bind IcmSW in vitro required icmS and icmW for efficient translocation into eukaryotic cells during L. pneumophila infection. We identified regions in the effector protein SidG involved in icmSW-dependent translocation. Although the full-length SidG protein was translocated by an icmSW-dependent mechanism, deletion of amino terminal regions in the SidG protein resulted in icmSW-independent translocation, indicating that the IcmSW complex is not contributing directly to recognition of effector proteins by the Dot/Icm system. Biochemical and genetic studies showed that the IcmSW complex interacts with a central region of the SidG protein. The IcmSW interaction resulted in a conformational change in the SidG protein as determined by differences in protease sensitivity in vitro. These data suggest that IcmSW binding to effectors could enhance effector protein delivery by mediating a conformational change that facilitates T4SS recognition of a translocation domain located in the carboxyl region of the effector protein.

The Legionella pneumophila IcmSW complex interacts with multiple Dot/Icm effectors to facilitate type IV translocation.

De nombreux pathog&egrave;nes Gram-utilisent un syst&egrave;me de s&eacute;cr&eacute;tion type IV (T4SS) pour fournir des prot&eacute;ines effectrices dans les cellules h&ocirc;tes eucaryotes. La fid&eacute;lit&eacute; de la translocation des prot&eacute;ines d&eacute;pend de la reconnaissance efficace des prot&eacute;ines effectrices de la T4SS. Legionella pneumophila fournit un grand nombre de prot&eacute;ines effectrices dans les cellules eucaryotes &agrave; l&#39;aide de la T4SS Dot/Icm. Comment le syst&egrave;me de la Dot/Icm est capable d&#39;identifier et de contr&ocirc;ler la livraison des effecteurs est mal comprise. Des &eacute;tudes r&eacute;centes sugg&egrave;rent que les prot&eacute;ines du SGCI et IcmW interagissent pour former un complexe stable qui facilite la translocation des prot&eacute;ines effectrices par le syst&egrave;me de la Dot/Icm par un m&eacute;canisme inconnu. Nous d&eacute;montrons que la IcmSW complexe est n&eacute;cessaire pour la translocation productive de multiples prot&eacute;ines effectrices de Dot/Icm. Prot&eacute;ines effectrices qui pouvaient se lier IcmSW in vitro requis du SGCI et icmW pour la translocation efficace dans les cellules eucaryotes pendant l&#39;infection de L. pneumophila. Nous avons identifi&eacute; des r&eacute;gions dans la prot&eacute;ine effectrice que SIDG impliqu&eacute; dans la translocation icmSW-d&eacute;pendante. Bien que la prot&eacute;ine pleine longueur de SidG &eacute;tait transport&eacute;e par un m&eacute;canisme d&eacute;pendant d&#39;icmSW, suppression des r&eacute;gions de terminales amin&eacute;es dans la prot&eacute;ine SidG entra&icirc;n&eacute; translocation icmSW ind&eacute;pendants, indiquant que le complexe de IcmSW ne contribue pas directement &agrave; la reconnaissance des prot&eacute;ines effectrices par le syst&egrave;me de la Dot/Icm. Des &eacute;tudes biochimiques et g&eacute;n&eacute;tiques ont montr&eacute; que la IcmSW complexe interagit avec une r&eacute;gion centrale de la prot&eacute;ine SidG. L&#39;interaction de IcmSW a entra&icirc;n&eacute; un changement de conformation de la prot&eacute;ine SidG, tel que d&eacute;termin&eacute; par les diff&eacute;rences de sensibilit&eacute; de prot&eacute;ase in vitro. Ces donn&eacute;es sugg&egrave;rent que IcmSW liaison aux effecteurs pourrait am&eacute;liorer la livraison de prot&eacute;ines effectrices par la m&eacute;diation d&#39;un changement de conformation qui facilite la reconnaissance de la T4SS d&#39;un domaine de translocation, situ&eacute; dans la r&eacute;gion de carboxyle de la prot&eacute;ine effectrice.

La Legionella pneumophila IcmSW complexe interagit avec plusieurs effecteurs Dot/Icm pour faciliter la translocation de type IV.

Molti agenti patogeni gram-negativi utilizzano un sistema di secrezione di tipo IV (T4SS) per fornire proteine effettrici in cellule eucariote. La fedelt&agrave; della traslocazione di proteine dipende il riconoscimento efficiente delle proteine effettrici dal T4SS. Legionella pneumophila offre un gran numero di proteine effettrici in cellule eucariotiche usando il T4SS Dot/Icm. Come il sistema Dot/Icm &egrave; in grado di riconoscere e controllare la consegna di effettori &egrave; scarsamente compreso. Studi recenti suggeriscono che le proteine IcmS e IcmW interagiscono per formare un complesso stabile che facilita la traslocazione delle proteine effettrici dal sistema Dot/Icm da un meccanismo sconosciuto. Qui dimostriamo che il complesso IcmSW &egrave; necessaria per la traslocazione produttiva di pi&ugrave; le proteine effettrici Dot/Icm. Proteine effettrici che erano in grado di associare IcmSW in vitro richiesti icmS e icmW per traslocazione efficiente nelle cellule eucariotiche durante l&#39;infezione da L. pneumophila. Abbiamo identificato le regioni della proteina effector che sidg coinvolti nella traslocazione icmSW-dipendente. Anche se la proteina SidG full-length &egrave; stata traslocata da un meccanismo icmSW-dipendente, eliminazione delle regioni amminici terminale della proteina SidG portato a traslocazione icmSW indipendente, che indica che il complesso IcmSW &egrave; non contribuiscono direttamente al riconoscimento delle proteine effettrici dal sistema Dot/Icm. Studi biochimici e genetici hanno mostrato che il complesso IcmSW interagisce con una regione centrale della proteina SidG. L&#39;interazione di IcmSW ha provocato un cambiamento conformazionale nella proteina SidG come determinato dalle differenze nella sensibilit&agrave; di proteasi in vitro. Questi dati suggeriscono che IcmSW associazione di effettori potrebbe migliorare la consegna di proteine effettrici di mediando un cambiamento conformazionale che facilita il riconoscimento T4SS di un dominio di traslocazione che si trova nella regione del carbossilico delle proteine effettrici.

La Legionella pneumophila IcmSW complesso interagisce con molteplici effettori Dot/Icm per facilitare una traslocazione di tipo IV.

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; IV &#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0; (T4SS) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x914D;&#x4FE1;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x3001;T4SS &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x8A8D;&#x8B58;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9; &#x30FB; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9; &#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm T4SS &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3057;&#x3001;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x304C;&#x3088;&#x304F;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;IcmS &#x3068; IcmW &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8EE2;&#x6D41;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; IcmSW&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x8EE2;&#x7F6E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;IcmSW in vitro &#x3067;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; icmS &#x3068; icmW l. &#x30FB; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x8EE2;&#x6D41;&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5730;&#x57DF; SidG icmSW &#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x8EE2;&#x6D41;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3002;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E; SidG &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F; icmSW &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067; translocated &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;SidG &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE; &#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x524A;&#x9664; icmSW &#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x8EE2;&#x6D41;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; IcmSW &#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x306F;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x907A;&#x4F1D;&#x6027;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; IcmSW SidG &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E2D;&#x592E;&#x90E8;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;IcmSW &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x69CB;&#x9020;&#x5909;&#x5316;&#x3068;&#x4F53;&#x5916;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B9A;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;SidG &#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F; IcmSW &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; &#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB;&#x57FA;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x79FB;&#x884C;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; T4SS &#x8A8D;&#x8B58;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x914D;&#x4FE1;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EC;&#x30B8;&#x30AA;&#x30CD;&#x30E9; &#x30FB; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9; IcmSW &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; IV &#x8EE2;&#x6D41;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/Icm &#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB9CE;&#xC740; &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0; &#xC885;&#xB958; 4 &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (T4SS)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAE30; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC804; &#xC88C;&#xC758; &#xC815; &#xC808;&#xC740; t4ss&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. Legionella pneumophila &#xB3C4;&#xD2B8;/Icm t4ss&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD070; &#xC22B;&#xC790;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC810;/Icm &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC740; &#xC778;&#xC2DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xBC30;&#xB2EC; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC218; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; Icms&#xC640; IcmW &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC810;/Icm &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC804; &#xC88C;&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xC548;&#xC815; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; Icmsw&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC810;/Icm effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC804; &#xC88C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. IcmSW &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; icmS &#xBC0F; icmW L. pneumophila &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC804; &#xC88C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xC5ED; SidG icmSW &#xC885;&#xC18D; translocation&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; SidG &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; icmSW &#xC885;&#xC18D; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; translocated &#xD588;&#xB2E4;, &#xBE44;&#xB85D; SidG &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC601;&#xC5ED; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC810;/Icm &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; IcmSW effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC778;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; icmSW &#xB3C5;&#xB9BD; &#xC804; &#xACB0;&#xACFC;. &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; IcmSW SidG &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC911;&#xC559; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. IcmSW &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; SidG &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCCB4; &#xC678; &#xD6A8;&#xC18C; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xB97C; IcmSW &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC911;&#xC7AC; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; carboxyl &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xD55C; &#xC804; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; T4SS &#xC778;&#xC2DD;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC804;&#xB2EC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC218; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Legionella pneumophila IcmSW &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC810;/Icm &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xD615;&#xC2DD; 4 &#xC804;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Muchos pat&oacute;genos gramnegativos utilizan un sistema de secreci&oacute;n tipo IV (T4SS) para entregar prote&iacute;nas efectoras en las c&eacute;lulas eucariotas hospederas. La fidelidad de la translocaci&oacute;n de la prote&iacute;na depende el reconocimiento eficaz de prote&iacute;nas efectoras de la T4SS. Legionella pneumophila ofrece a un gran n&uacute;mero de prote&iacute;nas efectoras en c&eacute;lulas eucariotas usando el T4SS Dot/Icm. &iquest;C&oacute;mo el sistema Dot/Icm es capaz de reconocer y controlar la entrega de efectores es mal entendida. Estudios recientes sugieren que las prote&iacute;nas IcmS y IcmW interact&uacute;an para formar un complejo estable que facilita la translocaci&oacute;n de prote&iacute;nas efectoras del sistema Dot/Icm por un mecanismo desconocido. Aqu&iacute; demostramos que el complejo de IcmSW es necesaria para el desplazamiento productivo de m&uacute;ltiples prote&iacute;nas efectoras de Dot/Icm. Prote&iacute;nas efectoras que fueron capaces de enlazar IcmSW in vitro necesaria icmS y icmW para desplazamiento eficiente en c&eacute;lulas eucari&oacute;ticas durante la infecci&oacute;n de L. pneumophila. Se identificaron las regiones de la prote&iacute;na efectora que sidg implicado en la translocaci&oacute;n de icmSW-dependiente. Aunque la prote&iacute;na integral de SidG fue desplazada por un mecanismo dependiente de icmSW, eliminaci&oacute;n de regiones amino&aacute;cidas terminales de la prote&iacute;na SidG dio lugar a desplazamiento de icmSW independiente, indicando que el complejo de IcmSW no contribuye directamente al reconocimiento de prote&iacute;nas efectoras por el sistema de punto/Icm. Estudios bioqu&iacute;micos y gen&eacute;ticos demostraron que el IcmSW complejo interact&uacute;a con una regi&oacute;n central de la prote&iacute;na SidG. La interacci&oacute;n de IcmSW dio lugar a un cambio conformacional en la prote&iacute;na de SidG seg&uacute;n lo determinado por diferencias en la sensibilidad de la proteasa in vitro. Estos datos sugieren que IcmSW Uni&oacute;n a efectores podr&iacute;a mejorar suministro de prote&iacute;nas efectoras mediando un cambio conformacional que facilita el reconocimiento T4SS de un dominio de desplazamiento situado en la regi&oacute;n carboxilo de la prote&iacute;na efectora.

La Legionella pneumophila IcmSW complejo interact&uacute;a con m&uacute;ltiples efectores Dot/Icm para facilitar el desplazamiento de tipo IV.

&#x5728;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x9896;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8BA1;&#x7B97;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x4ECE; III &#x578B;&#x548C; IV &#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9634;&#x6027;&#x83CC;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x91C7;&#x7528;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x6982;&#x8FF0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x51C6;&#x786E;&#x9884;&#x6D4B;&#x5206;&#x6CCC;&#x4EA7;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x548C;&#x53D1;&#x73B0;&#x53EF;&#x80FD;&#x53CD;&#x6620;&#x751F;&#x7269;&#x76F8;&#x5173;&#x529F;&#x80FD;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x4E4B;&#x5904;&#x8868;&#x73B0;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E; Web &#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x9884;&#x6D4B;&#x5E76;&#x5BA3;&#x5E03;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x7B5B;&#x670D;&#x52A1;&#x5668; &#xFF08;http://www.sysbep.org/sieve&#xFF09; &#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E00;&#x5C0F;&#x5957;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x4E4B;&#x524D;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#x4F7F;&#x7528;&#x548C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x548C;&#x8BA1;&#x7B97;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7C7B;&#x578B; III &#x6548;&#x5E94;&#x9884;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x51C6;&#x786E;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8868;&#x660E;&#x6240;&#x6709;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x7528;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x548C;&#x4E00;&#x822C;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5F97;&#x51FA;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x5728;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5728;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x7684;&#x5206;&#x6B67;&#x70B9;&#x987A;&#x5E8F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6BCD;&#x9898;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EA7;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5177;&#x6709;&#x677E;&#x6563;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x56FE;&#x6848;&#x4ED6;&#x4EBA;&#x5728;&#x54EA;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x7C7B;&#x662F;&#x4EC5;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x4F5C;&#x66F2;&#x7684;&#x504F;&#x89C1;&#x3002;&#x8BA1;&#x7B97;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5E8F;&#x5217;&#x4ECE;&#x5206;&#x6CCC;&#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x4EE3;&#x8868;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x548C;&#x4E3B;&#x673A;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;

&#x8BA1;&#x7B97;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684; III &#x578B;&#x548C; IV &#x5206;&#x6CCC;&#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9634;&#x6027;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4E2D;&#x3002;

In this review, we provide an overview of the methods employed in four recent studies that described novel methods for computational prediction of secreted effectors from type III and IV secretion systems in Gram-negative bacteria. We present the results of these studies in terms of performance at accurately predicting secreted effectors and similarities found between secretion signals that may reflect biologically relevant features for recognition. We discuss the Web-based tools for secreted effector prediction described in these studies and announce the availability of our tool, the SIEVE server (http://www.sysbep.org/sieve). Finally, we assess the accuracies of the three type III effector prediction methods on a small set of proteins not known prior to the development of these tools that we recently discovered and validated using both experimental and computational approaches. Our comparison shows that all methods use similar approaches and, in general, arrive at similar conclusions. We discuss the possibility of an order-dependent motif in the secretion signal, which was a point of disagreement in the studies. Our results show that there may be classes of effectors in which the signal has a loosely defined motif and others in which secretion is dependent only on compositional biases. Computational prediction of secreted effectors from protein sequences represents an important step toward better understanding the interaction between pathogens and hosts.

Computational prediction of type III and IV secreted effectors in gram-negative bacteria.

Dans cette revue, nous donnent un aper&ccedil;u des m&eacute;thodes employ&eacute;es dans les quatre &eacute;tudes r&eacute;centes qui d&eacute;crit des m&eacute;thodes novatrices pour la pr&eacute;diction de calcul des effecteurs s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es de type III et des syst&egrave;mes de s&eacute;cr&eacute;tion de IV chez les bact&eacute;ries Gram-n&eacute;gatives. Nous pr&eacute;sentons les r&eacute;sultats de ces &eacute;tudes en termes de performances &agrave; pr&eacute;dire avec exactitude les effecteurs s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es et similitudes entre les signaux de s&eacute;cr&eacute;tion qui peuvent refl&eacute;ter les caract&eacute;ristiques biologiquement pertinentes pour la reconnaissance. Nous avons discuter les outils Web pour la pr&eacute;diction de l&#39;effecteur s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es d&eacute;crites dans ces &eacute;tudes et annoncer la disponibilit&eacute; de notre outil, le serveur de tamis (http://www.sysbep.org/sieve). Enfin, nous &eacute;valuons la pr&eacute;cision des m&eacute;thodes pr&eacute;diction trois type III effecteur sur un petit ensemble de prot&eacute;ines ne pas connues avant le d&eacute;veloppement de ces outils que nous avons r&eacute;cemment d&eacute;couvert et valid&eacute;e en utilisant des approches exp&eacute;rimentales et de calculs. Notre comparaison montre que toutes les m&eacute;thodes utilisent des approches similaires et, en g&eacute;n&eacute;ral, arrivent aux m&ecirc;mes conclusions. Nous discutons de la possibilit&eacute; d&#39;un motif d&#39;ordre d&eacute;pendant du signal de s&eacute;cr&eacute;tion, qui &eacute;tait un point de d&eacute;saccord dans les &eacute;tudes. Nos r&eacute;sultats montrent qu&#39;il peut y avoir des classes des effecteurs dans laquelle le signal a un motif mal d&eacute;fini et autres dans laquelle la s&eacute;cr&eacute;tion d&eacute;pend uniquement des biais compositions. Pr&eacute;diction computationnelle des effecteurs s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es de s&eacute;quences prot&eacute;iques repr&eacute;sente une &eacute;tape importante pour mieux comprendre l&#39;interaction entre les agents pathog&egrave;nes et des h&ocirc;tes.

Pr&eacute;diction num&eacute;rique de type III et IV s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e effecteurs chez les bact&eacute;ries Gram-n&eacute;gatives.

In questa recensione, forniamo una panoramica dei metodi impiegati in quattro studi recenti che descritto nuovi metodi di predizione computazionale di effettori secrete dal tipo III e IV sistemi di secrezione in batteri Gram-negativi. Vi presentiamo i risultati di questi studi in termini di prestazioni a predire con precisione secrete effettori e somiglianze tra segnali di secrezione che possono riflettere biologicamente rilevanti caratteristiche per il riconoscimento. Noi discutere gli strumenti Web-based per la previsione di effector secrete descritto in questi studi e annunciare la disponibilit&agrave; del nostro strumento, il setaccio server (http://www.sysbep.org/sieve). Infine, valutiamo la precisione dei metodi tre tipo III effettrici pronostico su un piccolo insieme di proteine non conosciuto prima dello sviluppo di questi strumenti che abbiamo recentemente scoperto e convalidato utilizzando approcci sia sperimentali e computazionali. Il nostro confronto dimostra che tutti i metodi utilizzano approcci simili e, in generale, arrivano a conclusioni simili. Discutere la possibilit&agrave; di un motivo di ordine-dipendente del segnale di secrezione, che era un punto di disaccordo negli studi. Nostri risultati indicano che ci possono essere classi di effettori in cui il segnale ha un motivo vagamente definito e altri in cui la secrezione &egrave; dipendente solo su pregiudizi compositivi. Predizione computazionale di effettori secrete da sequenze proteiche rappresenta un passo importante verso una migliore comprensione dell&#39;interazione tra gli agenti patogeni e i padroni di casa.

Predizione computazionale di tipo III ed effettori IV secernuti in batteri Gram-negativi.

III &#x578B;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x4E88;&#x6E2C;&#x624B;&#x6CD5;&#x3068; IV &#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0; &#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x3067;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x305F; 4 &#x3064;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x7528;&#x3044;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x6982;&#x8981;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x8A8D;&#x8B58;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x9593;&#x767A;&#x898B;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x70B9;&#x3092;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3067;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3059;&#x308B;.&#x5206;&#x6CCC;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; Web &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x3075;&#x308B;&#x3044;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC; (http://www.sysbep.org/sieve) &#x306E;&#x7A7A;&#x5BA4;&#x72B6;&#x6CC1;&#x3092;&#x767A;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x6700;&#x8FD1;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3068;&#x8A08;&#x7B97;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x524D;&#x306B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B; 3 &#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306E;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7D50;&#x8AD6;&#x306B;&#x5230;&#x9054;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x610F;&#x898B;&#x306E;&#x76F8;&#x9055;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x306F;&#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x9806;&#x5E8F;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4FE1;&#x53F7;&#x304C;&#x5927;&#x307E;&#x304B;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x4EBA;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x7D50;&#x679C;&#x8A73;&#x7D30;&#x7D44;&#x6210;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x306E;&#x307F;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8A08;&#x7B97;&#x4E88;&#x6E2C;&#x5206;&#x6CCC;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3068;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x6DF1;&#x3081;&#x308B;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x305F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

III &#x578B;&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x4E88;&#x6E2C;&#x5024;&#x3001;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x83CC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5206;&#x6CCC; IV &#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3002;

&#xC774; &#xB9AC;&#xBDF0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720;&#xD615; III&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; secreted &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xC804;&#xC0B0; &#xC608;&#xCE21;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95;&#xACFC; 4 &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xC138;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC1C;&#xC694;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Secreted &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xBC0F; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131; &#xBD84; &#xBE44; &#xC2E0;&#xD638; &#xC778;&#xC2DD; &#xC704;&#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBC18;&#xC601; &#xD558;&#xB294; &#xC0AC;&#xC774; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC744; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC608;&#xCE21;&#xC5D0; &#xC131;&#xB2A5; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; secreted &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC608;&#xCE21;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6F9; &#xAE30;&#xBC18; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD1A0;&#xB860; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB3C4;&#xAD6C;, &#xCCB4; &#xC11C;&#xBC84; (http://www.sysbep.org/sieve)&#xC758; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;&#xC744; &#xBC1C;&#xD45C;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC0F; &#xACC4;&#xC0B0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xC9D1;&#xD569;&#xC758; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC720;&#xD615; III &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC608;&#xCE21; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xB3C4; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACB0;&#xB860;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xCC29;. &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58;&#xB294; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; &#xBD84; &#xBE44; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC21C;&#xC11C; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xB2E4;&#xB8E8;&#xACA0;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; &#xB290;&#xC2A8;&#xD558;&#xAC8C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC8FC;&#xC81C;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xC5B4;&#xB290; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; &#xC791;&#xACE1; &#xD3B8;&#xACAC;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xC0B0; &#xC608;&#xCE21; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; secreted &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC640; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xD615; III&#xC758; &#xC804;&#xC0B0; &#xC608;&#xCE21; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xC138;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84; &#xBE44; &#xD558;&#xB294; IV &#xC774;&#xD399;&#xD130;.

En esta revisi&oacute;n, ofrecemos un Resumen de los m&eacute;todos empleados en cuatro estudios recientes que describen m&eacute;todos novedosos para predicci&oacute;n computacional de efectores secretados de tipo III y IV secreci&oacute;n sistemas en bacterias Gram-negativas. Presentamos los resultados de estos estudios en t&eacute;rminos de desempe&ntilde;o en predecir con precisi&oacute;n efectores secretados y similitudes entre las se&ntilde;ales de la secreci&oacute;n que pueden reflejar caracter&iacute;sticas biol&oacute;gicamente relevantes para el reconocimiento. Discutimos las herramientas basadas en Web para la predicci&oacute;n de efectoras secretadas descrito en estos estudios y anunciar la disponibilidad de nuestra herramienta, el servidor de tamiz (http://www.sysbep.org/sieve). Por &uacute;ltimo, evaluamos las exactitudes de los m&eacute;todos de predicci&oacute;n de efectoras de tres tipo III en un peque&ntilde;o conjunto de prote&iacute;nas no conocidas antes del desarrollo de estas herramientas que recientemente descubierto y validado usando el enfoque experimental y computacional. Nuestra comparaci&oacute;n muestra que todos los m&eacute;todos utilizan enfoques similares y, en general, llegan a conclusiones similares. Discutimos la posibilidad de un motivo de orden-dependiente en la se&ntilde;al de secreci&oacute;n, que era un punto de desacuerdo en los estudios. Nuestro resultados demuestran que pueden existir clases de efectores, en el que la se&ntilde;al tiene un motivo vagamente definido y otros en que la secreci&oacute;n es dependiente s&oacute;lo de sesgos compositivas. Computational prediction of secretadas efectores de las secuencias de prote&iacute;nas representa un paso importante para entender mejor la interacci&oacute;n entre pat&oacute;genos y los hosts.

Article	Year
Yersinia enterocolitica type III secretion: yscM1 and yscM2 regulate yop gene expression by a posttranscriptional mechanism that targets the 5' untranslated region of yop mRNA. Journal of bacteriology\| PubMed ID: 12374821	2002
Binding of SycH chaperone to YscM1 and YscM2 activates effector yop expression in Yersinia enterocolitica. Journal of bacteriology\| PubMed ID: 14729710	2004
Bacterial invasins: molecular systems dedicated to the invasion of host tissues. Contributions to microbiology\| PubMed ID: 15496781	2005
A C-terminal translocation signal required for Dot/Icm-dependent delivery of the Legionella RalF protein to host cells. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 15613486	2005
The Legionella IcmS-IcmW protein complex is important for Dot/Icm-mediated protein translocation. Molecular microbiology\| PubMed ID: 15661013	2005
Recognition and delivery of effector proteins into eukaryotic cells by bacterial secretion systems. Traffic (Copenhagen, Denmark)\| PubMed ID: 16734660	2006
The Legionella pneumophila IcmSW complex interacts with multiple Dot/Icm effectors to facilitate type IV translocation. PLoS pathogens\| PubMed ID: 18069892	2007
Computational prediction of type III and IV secreted effectors in gram-negative bacteria. Infection and immunity\| PubMed ID: 20974833	2011

Eric D. Cambronne

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