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The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing

Microfluidic devices allow assays to be performed using minute amounts of sample and have recently been used to control the microenvironment of cells. ...

McGill University

Stromal &#x884D;&#x751F;&#x56E0;&#x5B50;-1 (SDF-1) &#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; (EPC) &#x62DB;&#x8058;&#x5230;&#x5730;&#x533A;&#x7F3A;&#x8840;&#xFF0C;&#x8BA9;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8865;&#x507F;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x81EA;&#x536B;&#x961F;-1 &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;CXCR4&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x662F;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x4E0A; /cd34 + &#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684; picomolar &#x548C;&#x81EA;&#x536B;&#x961F; 1 nanomolar &#x6D53;&#x5EA6;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5F71;&#x54CD;&#x65B0;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3001; &#x8BF1;&#x5BFC; /cd34 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x603B;&#x627F;&#x5305;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;/Cd34 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x3001; &#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x8BC1;&#x660E;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230; SDF-1 &#x4E2D;&#x7684;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x6B64;&#x7F3A;&#x9677;&#x6709;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x6240;&#x6709;&#x60A3;&#x8005;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6D3B;&#x6027;&#x80BD;&#x9176; CD26/&#x4E8C;&#x80BD;&#x57FA;&#x80BD;&#x9176;&#xFF0C;&#x53EF;&#x706D;&#x6D3B; SDF-1 &#x7B2C;&#x56DB;&#x3002;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5; /cd34 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x8FC1;&#x79FB;&#x4E2D;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x6784;&#x521A;&#x6027;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B75;&#x5316; /cd34 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E; &#xFF08;&#x65E0;&#xFF09; &#x6350;&#x52A9;&#x66F4;&#x6B63;&#x6B64;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7F3A;&#x9677;&#x5E76;&#x7EA0;&#x6B63;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D8;&#x5F62;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5916;&#x6E90;&#x65E0;&#x6539;&#x53D8;&#x8840;&#x7BA1;&#x6269;&#x5F20;&#x523A;&#x6FC0;&#x78F7;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x542F;&#x7528;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x4E0B;&#x6E38;&#x9AA8;&#x67B6;&#x6539;&#x53D8;&#x5728;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5; /cd34 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E14;&#x53EF;&#x7EA0;&#x6B63;&#x4E0E;&#x5916;&#x6E90;&#x53F7;&#x6B64;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x529B;&#x65E0;&#x529B;&#x5E94;&#x5BF9;&#x81EA;&#x536B;&#x961F; 1 &#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x5F02;&#x5E38;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x68C0;&#x4FEE;&#x3002;

&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x6539;&#x5EFA;&#x626D;&#x8F6C;&#x4E0E;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D04;&#x6E38;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;

Stromal-derived factor-1 (SDF-1) is a critical chemokine for endothelial progenitor cell (EPC) recruitment to areas of ischemia, allowing these cells to participate in compensatory angiogenesis. The SDF-1 receptor, CXCR4, is expressed in developing blood vessels as well as on CD34+ EPCs. We describe that picomolar and nanomolar concentrations of SDF-1 differentially influence neovascularization, inducing CD34+ cell migration and EPC tube formation. CD34+ cells isolated from diabetic patients demonstrate a marked defect in migration to SDF-1. This defect is associated, in some but not all patients, with a cell surface activity of CD26/dipeptidyl peptidase IV, an enzyme that inactivates SDF-1. Diabetic CD34+ cells also do not migrate in response to vascular endothelial growth factor and are structurally rigid. However, incubating CD34+ cells with a nitric oxide (NO) donor corrects this migration defect and corrects the cell deformability. In addition, exogenous NO alters vasodilator-stimulated phosphoprotein and mammalian-enabled distribution in EPCs. These data support a common downstream cytoskeletal alteration in diabetic CD34+ cells that is independent of growth factor receptor activation and is correctable with exogenous NO. This inability of diabetic EPCs to respond to SDF-1 may contribute to aberrant tissue vascularization and endothelial repair in diabetic patients.

Nitric oxide cytoskeletal-induced alterations reverse the endothelial progenitor cell migratory defect associated with diabetes.

D&eacute;riv&eacute;s stromal factor-1 (SDF-1) est une chimiokine critique pour le recrutement de cellules (EPC) prog&eacute;nitrices endoth&eacute;liales aux zones d&#39;isch&eacute;mie, permettant &agrave; ces cellules de participer dans l&#39;angiogen&egrave;se compensatoire. Le SDF-1 r&eacute;cepteur CXCR4, s&#39;exprime dans le d&eacute;veloppement de vaisseaux sanguins, ainsi que sur l&#39;EPCs CD34 +. Nous d&eacute;crivons ce picomoles et concentrations nanomolaires de SDF-1 influencent diff&eacute;remment la n&eacute;ovascularisation, induisant CD34 + migration cellulaire et EPC tube formation. Cellules CD34 + isol&eacute;es de patients diab&eacute;tiques montrent un d&eacute;faut marqu&eacute; en migration vers SDF-1. Ce d&eacute;faut est associ&eacute;, dans certains mais pas tous les patients, avec une activit&eacute; de surface cellulaire CD26/dipeptidyl peptidase IV, une enzyme qui inactive les SDF-1. Cellules CD34 + diab&eacute;tiques aussi ne migrent pas en r&eacute;ponse &agrave; facteur de croissance endoth&eacute;lial vasculaire et sont structurellement rigides. Cependant, en incubant les cellules CD34 + avec un oxyde nitrique (aucun) donneur corrige ce d&eacute;faut de migration et corrige la d&eacute;formabilit&eacute; de la cellule. En outre, non exog&egrave;ne modifie phosphoprot&eacute;ine stimul&eacute;e par vasodilatateur et distribution compatible mammif&egrave;res dans MSE. Ces donn&eacute;es confirment une alt&eacute;ration du cytosquelette en aval commune dans les cellules CD34 + diab&eacute;tiques qui est ind&eacute;pendante de l&#39;activation du r&eacute;cepteur de facteur de croissance et est corrigible avec no exog&egrave;ne Cette incapacit&eacute; de l&#39;EPCs diab&eacute;tiques pour r&eacute;pondre aux SDF-1 peut contribuer &agrave; la vascularisation des tissus aberrante et r&eacute;paration de l&#39;endoth&eacute;lium chez les patients diab&eacute;tiques.

Alt&eacute;rations du cytosquelette oxyde nitrique inverser le d&eacute;faut de migrateurs de cellules endoth&eacute;liales prog&eacute;nitrices associ&eacute; au diab&egrave;te.

Stromal abgeleiteten Faktor-1 (SDF-1) ist eine kritische Chemokine f&uuml;r EPCs Zelle (EPC) Einstellung auf Bereiche von Isch&auml;mie, diese Zellen zur kompensatorischen Angiogenese Teilnahme erm&ouml;glicht. Der SDF-1-Rezeptor CXCR4, wird bei der Entwicklung der Blutgef&auml;&szlig;e sowie auf CD34 + EPCs ausgedr&uuml;ckt. Wir beschreiben, dass pikolomaren und nanomolare Konzentrationen von SDF-1 beeinflussen differentiell Neovaskularisation, induzierende CD34 + tube Zellmigration und EPC Bildung. CD34 + Zellen isoliert von Diabetes-Patienten zeigen einen deutlichen Defekt in Migration zu SDF-1. Dieser Fehler ist verbunden, einige aber nicht alle Patienten, mit einer Oberfl&auml;che Zellaktivit&auml;t von CD26/Dipeptidyl Peptidase IV, ein Enzym, das SDF-1 inaktiviert. Diabetische CD34 + Zellen auch nicht als Reaktion auf den vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor migrieren und sind strukturell starr. Jedoch Inkubation CD34 + Zellen mit einem Stickstoffmonoxid (NO) Spender dieser Migration Fehler korrigiert und korrigiert die Zelle Verformbarkeit. Dar&uuml;ber hinaus &auml;ndert exogene Nr. Phosphoprotein Vasodilatator stimuliert und S&auml;uger-f&auml;higen Verteilungspunkt in EPCs. Diese Daten unterst&uuml;tzen eine gemeinsame nachgeschaltete Zytoskelett Ver&auml;nderung in diabetischen CD34 + Zellen, die unabh&auml;ngig der Wachstumsfaktor-Rezeptor-Aktivierung und korrigierbar mit exogenen Nr. Diese Unf&auml;higkeit der diabetischen EPCs reagieren zu SDF-1 kann zu abweichenden Gewebe Vaskularisierung und endothelial Reparatur bei diabetischen Patienten beitragen.

Stickstoffmonoxid Zytoskelett-induzierte Ver&auml;nderungen umkehren der endothelialen Vorl&auml;uferzellen Zelle wandernden Funktionsst&ouml;rung, die mit Diabetes assoziiert.

Stromal derived factor-1 (SDF-1) &egrave; un critico chemokine per il reclutamento di cella (EPC) progenitrici endoteliali alle aree di ischemia, permettendo che queste cellule a partecipare l&#39;angiogenesi compensativo. Il recettore SDF-1, CXCR4, &egrave; espresso nello sviluppo di vasi sanguigni, cos&igrave; come su CD34 + EPCs. Descriviamo che picomolar e concentrazioni nanomolari di SDF-1 influenzano differenzialmente neovascolarizzazione, inducendo CD34 + migrazione cellulare ed EPC tube formazione. Cellule CD34 + isolate da pazienti diabetici dimostrano un difetto marcato nella migrazione a SDF-1. Questo difetto &egrave; associato, in alcuni ma non tutti i pazienti, con un&#39;attivit&agrave; di superficie delle cellule del CD26/dipeptidil peptidasi IV, un enzima che inattiva SDF-1. Cellule CD34 + diabetiche anche non migrano in risposta al fattore di crescita vascolare endoteliale e sono strutturalmente rigide. Tuttavia, incubando le cellule CD34 + con un ossido nitrico (NO) donatore corregge questo difetto di migrazione e corregge la deformabilit&agrave; delle cellule. Inoltre, esogeno NO altera fosfoproteina stimolata vasodilatatore e distribuzione abilitati su mammiferi in EPC. Questi dati supportano una comune alterazione del citoscheletro a valle in diabetiche CD34 + cellule indipendenti dell&#39;attivazione del ricevitore di fattore di crescita ed &egrave; correggibile con n esogeno. Questa incapacit&agrave; di EPCs diabetica per rispondere a SDF-1 pu&ograve; contribuire alla vascolarizzazione del tessuto aberrante e riparazione endoteliale in pazienti diabetici.

Ossido nitrico citoscheletriche indotta da alterazioni invertire il difetto di migratori delle cellule progenitrici endoteliali associato al diabete.

&#x9593;&#x8CEA;&#x6027;&#x7531;&#x6765;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#xFF08;&#x81EA;&#x885B;&#x968A;-1) &#x865A;&#x8840;&#x306E;&#x4EE3;&#x511F;&#x6027;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x3001;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE; (EPC) &#x52DF;&#x96C6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x81EA;&#x885B;&#x968A; 1 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; CXCR4 cd34 Epc &#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x305D;&#x306E; picomolar &#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x81EA;&#x885B;&#x968A; 1 &#x30CA;&#x30CE;&#x30E2;&#x30EB;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x65B0;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3001;cd34 &#x8A98;&#x5C0E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904A;&#x8D70;&#x3068; EPC &#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x305F; cd34 &#x7D30;&#x80DE;&#x81EA;&#x885B;&#x968A; 1 &#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x3044;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; CD26/&#x30B8;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; IV&#x3001;&#x81EA;&#x885B;&#x968A; 1 &#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x4E00;&#x90E8;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5; CD34 + &#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x306F;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x786C;&#x76F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;(NO) &#x306E;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3057;&#x307E;&#x3059; cd34 &#x785D;&#x9178;&#x9178;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x5909;&#x5F62;&#x80FD;&#x3092;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306A;&#x3057;&#x8840;&#x7BA1;&#x62E1;&#x5F35;&#x523A;&#x6FC0;&#x30EA;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x304C;&#x6709;&#x52B9;&#x306A;&#x914D;&#x5E03; EPCs &#x3067;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x53F7;&#x3067;&#x8A02;&#x6B63;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x306E; cd34 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5171;&#x901A;&#x4E0B;&#x6D41;&#x9AA8;&#x683C;&#x5909;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81EA;&#x885B;&#x968A;-1 &#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5; EPCs &#x306E;&#x7121;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3068;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x9AA8;&#x683C;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x9006;&#x306B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6E21;&#x308A;&#x9CE5;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3002;

Stromal &#xD30C;&#xC0DD; &#xC694;&#xC18C;-1 (&#xC790;&#xC704;&#xB300;-1) &#xD5C8; &#xD608;, &#xBCF4;&#xC0C1; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xCC38;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB0B4; &#xD53C; &#xBFCC;&#xB9AC; &#xC140; (EPC) &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; chemokine &#xC774;&#xB2E4;. &#xC790;&#xC704;&#xB300;-1 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, CXCR4, CD34 + Epc &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD608;&#xAD00; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; picomolar &#xC124;&#xBA85; &#xC790;&#xC704;&#xB300; 1&#xC758; nanomolar &#xB18D;&#xB3C4; &#xCC28;&#xB3D9; neovascularization &#xC601;&#xD5A5;, &#xC720;&#xB3C4; CD34 + &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; EPC &#xD29C;&#xBE0C; &#xD615;&#xC131;. CD34 + &#xC138;&#xD3EC; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC790;&#xC704;&#xB300;-1&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xD568;&#xC740; CD26/dipeptidyl peptidase IV, &#xC790;&#xC704;&#xB300; 1&#xC740; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xC77C;&#xBD80; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; CD34 + &#xC138;&#xD3EC; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC744; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACBD;&#xC9C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xACB0;&#xD568; &#xC218;&#xC815; CD34 + &#xC138;&#xD3EC; &#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C;&#xC640; &#xC7A0;&#xBCF5;&#xAE30; (NO) &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xBC0F; &#xC140; deformability&#xB97C; &#xC218;&#xC815;. &#xB610;&#xD55C;, exogenous NO phosphoprotein vasodilator &#xC790;&#xADF9; &#xBC0F; Epc&#xC5D0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC774; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBA54;&#xC77C; &#xBCC0;&#xACBD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; CD34 + &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xBB34;&#xAD00;&#xC740; exogenous &#xBC88;&#xD638;&#xC640; &#xD574;&#xACB0; &#xAC00;&#xB2A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; cytoskeletal &#xBCC0;&#xACBD; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xC790;&#xC704;&#xB300; 1&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5;&#xD560; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; Epc&#xC758;&#xC774; &#xBB34; &#xB2A5;&#xB825; &#xD0C8; &#xC120; &#xC870;&#xC9C1; vascularization &#xBC0F; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; cytoskeletal &#xBCC0;&#xACBD; &#xBC18;&#xB300;&#xB85C; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC870;&#xC0C1; &#xC140; &#xCCA0;&#xC0C8; &#xACB0;&#xD568;.

Derivados Estrom&aacute;tico factor-1 (SDF-1) es Quimiocina cr&iacute;tico para el reclutamiento de c&eacute;lulas (EPC) progenitoras endoteliales a zonas de isquemia, permitiendo que estas c&eacute;lulas participar en la angiog&eacute;nesis compensatoria. El SDF-1 receptor CXCR4, se expresa en el desarrollo de los vasos sangu&iacute;neos, as&iacute; como en CD34 + EPCs. Describimos que picomolar y concentraciones nanomolares de SDF-1 influyen diferencialmente neovascularizaci&oacute;n, inducir CD34 + migraci&oacute;n celular y EPC formaci&oacute;n del tubo. Las c&eacute;lulas CD34 + aisladas de pacientes diab&eacute;ticos demuestran un defecto marcado en la migraci&oacute;n a la SDF-1. Este defecto se asocia, en alguno pero no todos los pacientes, con una actividad superficial de la c&eacute;lula de CD26/dipeptidil peptidasa IV, una enzima que inactiva el SDF-1. C&eacute;lulas CD34 + diab&eacute;ticas tambi&eacute;n no migran en respuesta al factor de crecimiento endotelial vascular y son estructuralmente r&iacute;gidas. Sin embargo, incubando las c&eacute;lulas CD34 + con un &oacute;xido n&iacute;trico (NO) donante corrige este defecto de migraci&oacute;n y corrige la deformabilidad de la c&eacute;lula. Adem&aacute;s, ex&oacute;geno NO altera fosfoprote&iacute;na estimulada vasodilatador y distribuci&oacute;n basadas en mam&iacute;feros en ingenier&iacute;as. Estos datos apoyan una alteraci&oacute;n citoesqueleto descendente com&uacute;n en diab&eacute;ticas c&eacute;lulas CD34 + que es independiente de la activaci&oacute;n del receptor del factor de crecimiento y es corregible con no ex&oacute;geno. Esta incapacidad de EPCs diab&eacute;ticas para responder a la SDF-1 puede contribuir a la vascularizaci&oacute;n del tejido aberrante y reparaci&oacute;n endotelial en pacientes diab&eacute;ticos.

&Oacute;xido n&iacute;trico citoesqueleto inducida por alteraciones revertir el defecto migratorias de c&eacute;lulas progenitoras endoteliales asociado con la diabetes.

&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x5730;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x6587;&#x5316;&#x548C;&#x6E38;&#x79BB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4EEC;&#x9700;&#x8981;&#x53EA;&#x6709;&#x5F88;&#x5C11;&#x91CF;&#x7684;&#x6750;&#x6599;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x80FD;&#x591F;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E00;&#x7EA7;&#x836F;&#x7269;&#x7B5B;&#x9009;&#x53CA;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x5982;&#x8111;&#x7247;&#x57F9;&#x517B;&#x4E86;&#x66F4;&#x96BE;&#x9002;&#x5E94;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; (i) &#x704C;&#x6CE8;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#x5207;&#x7247;&#x4E0A;&#x5012;&#x7ACB;&#x7684;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x53CA;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5FAE;&#x704C;&#x6CE8;&#x7684;&#x8111;&#x7EC4;&#x7EC7; (&#x4E8C;) &#x65B0;&#x578B;&#x900F;&#x660E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668; (MFP) &#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x6210;&#x50CF;&#x4E0E;&#x517C;&#x5BB9;&#x7684;&#x5206;&#x5EAD;&#x3002;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x4E00;&#x4F53;&#x673A;&#x662F;&#x5728; poly(dimethylsiloxane)&#xFF0C;&#x529F;&#x80FD; 6 &#x5FAE;&#x7C73;&#x7EA7;&#x5149;&#x5708;&#x548C;&#x805A;&#x96C6;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x65F6;&#x5185;&#x3002;&#x4E3A;&#x5176;&#x6CE8;&#x5C04;&#x6216;&#x613F;&#x671B;&#x7684;&#x89E3;&#x51B3;&#x529E;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5F15;&#x8D77;&#x4E86;&#x5F88;&#x591A;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0D;&#x5206;&#x9752;&#x7EA2;&#x7682;&#x767D;&#x5730;&#x4F7F;&#x7528;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5B54;&#x5F84;&#x3002;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x4E00;&#x4F53;&#x673A;&#x88AB;&#x6210;&#x529F;&#x5730;&#x7528;&#x4E8E;&#x5C11;&#x91CF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x8111;&#x5207;&#x7247;&#x4E2D;&#x7684;&#x704C;&#x704C;&#x6D41;&#x7684;&#x67D3;&#x6599;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x7684;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5E76;&#x884C;&#x5171;&#x7126;&#x8367;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x3002;

&#x5206;&#x5EAD;&#x548C;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x7684;&#x5FAE;&#x704C;&#x6CE8;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#x578B;&#x8111;&#x7247;&#x3002;

Microfluidic systems are increasingly being used for the culture and study of dissociated cells because they require only minute amounts of materials while enabling drug screening and chemotaxis studies down to the single cell level. However, the culture of organized tissue, such as brain slices, has been more difficult to adapt to microfluidic devices. Here, we present a microfluidic system, comprising (i) a perfusion chamber for the culture of organotypic slices that is compatible with high resolution imaging on inverted microscopes, and (ii) a novel transparent microfluidic probe (MFP) for the localized microperfusion of the brain tissue. The MFP is made in poly(dimethylsiloxane), features six micrometre-scale apertures and can be assembled within a few hours in a standard laboratory. Each aperture can indiscriminately be used either for the injection or aspiration of solutions, giving rise to many possible combinations. The MFP was successfully used for the perfusion of a small number of cells in a brain slice with concurrent confocal fluorescence imaging of the perfused dye and sub-cellular structures within the tissue.

Chamber and microfluidic probe for microperfusion of organotypic brain slices.

Les syst&#xE8;mes microfluidiques sont de plus en plus utilis&#xE9; pour la culture et l&#x26;#39;&#xE9;tude des cellules dissoci&#xE9;es car elles n&#xE9;cessitent que des quantit&#xE9;s infimes de mati&#xE8;res tout en permettant le d&#xE9;pistage des drogues et des &#xE9;tudes de chimiotactisme vers le niveau de la cellule unique. Cependant, la culture de tissus organis&#xE9;s, comme des tranches de cerveau, a &#xE9;t&#xE9; plus difficile de s&#x26;#39;adapter &#xE0; des dispositifs microfluidiques. Ici, nous pr&#xE9;sentons un syst&#xE8;me microfluidique, comprenant (i) une chambre de perfusion pour la culture de tranches organotypiques qui est compatible avec l&#x26;#39;imagerie haute r&#xE9;solution sur des microscopes invers&#xE9;s, et (ii) un roman sonde transparente microfluidique (MFP) pour la microperfusion localis&#xE9;e de la le tissu c&#xE9;r&#xE9;bral. Le MFP est faite dans le poly (dim&#xE9;thylsiloxane), dispose de six microm&#xE8;tres &#xE9;chelle ouvertures et peuvent &#xEA;tre assembl&#xE9;s en quelques heures dans un laboratoire standard. Chaque ouverture peut indiff&#xE9;remment &#xEA;tre utilis&#xE9; soit pour l&#x26;#39;injection ou l&#x26;#39;aspiration de solutions, donnant lieu &#xE0; de nombreuses combinaisons possibles. Le MFP a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e avec succ&#xE8;s pour la perfusion d&#x26;#39;un petit nombre de cellules dans une tranche de cerveau avec l&#x26;#39;imagerie confocale de fluorescence simultan&#xE9;e du colorant perfus&#xE9; et sous-cellulaires structures au sein du tissu.

Chambre et de la sonde microfluidique pour microperfusion de tranches de cerveau organotypiques

Mikrofluidische Systeme werden zunehmend f&uuml;r die Kultur und die Studie von getrennten Zellen eingesetzt, da sie nur kleinste Mengen von Materialien, beim Screening und Chemotaxis Medikamentenstudien bis auf die einzelne Zelle-Ebene erm&ouml;glichen erfordern. Die Kultur der organisierten Gewebe, wie zum Beispiel Gehirn Scheiben, wurde jedoch schwieriger mikrofluidische Ger&auml;te anzupassen. Hier pr&auml;sentieren wir eine Microfluidic System, bestehend aus (i) eine Perfusion-Kammer f&uuml;r die Kultur organotypische Scheiben, die mit hochaufl&ouml;sende Bildgebung auf umgekehrte Mikroskope und (Ii) eine neuartige transparente Microfluidic-Sonde (MFP) f&uuml;r die lokalisierten Microperfusion das Hirngewebe kompatibel ist. Der MFP erfolgt im Poly, Funktionen sechs Mikrometer-Skala &Ouml;ffnungen und kann innerhalb weniger Stunden in ein standard Labor montiert werden. Jede Blende kann wahllos verwendet werden, entweder f&uuml;r die Injektion oder die Aspiration von L&ouml;sungen, die zu viele m&ouml;gliche Kombinationen. Der MFP wurde erfolgreich f&uuml;r die Perfusion einer kleinen Anzahl von Zellen in einem Gehirn-Segment mit gleichzeitiger konfokale Fluoreszenz-Bildgebung der durchblutete Farbstoff und subzellulare Strukturen innerhalb des Gewebes verwendet.

Kammer und mikrofluidische Sonde f&uuml;r Microperfusion organotypische Gehirn Scheiben.

Sistemi microfluidici sono sempre pi&ugrave; utilizzati per la cultura e lo studio delle cellule dissociate perch&eacute; richiedono solo minute quantit&agrave; di materiali consentendo studi di screening e di chemiotassi farmaco fino al livello di singola cellula. Tuttavia, la coltura del tessuto organizzato, come le fette di cervello, &egrave; stato pi&ugrave; difficile da adattare ai dispositivi microfluidici. Qui, vi presentiamo un sistema di microfluidica, composto da (i) una camera di perfusione per la coltura delle fette organotypic compatibile con imaging ad alta risoluzione su microscopi rovesciati e (ii) una sonda romanzo microfluidica trasparente (MFP) per la microperfusion localizzata del tessuto cerebrale. MFP &egrave; realizzato in poly(dimethylsiloxane), sei aperture su scala micrometrica caratteristiche e pu&ograve; essere montato all&#39;interno di un paio d&#39;ore in un laboratorio standard. Ogni apertura indiscriminatamente pu&ograve; essere utilizzato per l&#39;iniezione o aspirazione delle soluzioni, dando origine a molte combinazioni possibili. MFP &egrave; stato usato con successo per la perfusione di un piccolo numero di cellule in una fetta di cervello con imaging simultanee fluorescenza confocale del colorante perfusi e subcellulare strutture all&#39;interno del tessuto.

Camera e microfluidica sonda per microperfusion di fette di cervello organotypic.

&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x85AC;&#x7269;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x6750;&#x6599;&#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x5FAE;&#x91CF;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x3059;&#x89E3;&#x96E2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x3068;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x8133;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x7DE8;&#x6210;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x304C;&#x3088;&#x308A;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;microperfusion&#x7528;&#x5012;&#x7ACB;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#xFF08;ii&#xFF09;&#x65B0;&#x898F;&#x900F;&#x660E;&#x306A;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#xFF08;MFP&#xFF09;&#x3068;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x704C;&#x6D41;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x7D39;&#x4ECB;&#x8133;&#x7D44;&#x7E54;&#x3002; MFP&#x306F;&#x3001;6&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x53E3;&#x90E8;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x3067;&#x6570;&#x6642;&#x9593;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#xFF08;&#x30B8;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B7;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#xFF09;&#x3067;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5404;&#x958B;&#x53E3;&#x90E8;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x5DEE;&#x5225;&#x306B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x751F;&#x307F;&#x51FA;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5438;&#x5F15;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3067;&#x3082;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; MFP&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x7D44;&#x7E54;&#x5185;&#x704C;&#x6D41;&#x67D3;&#x6599;&#x3068;&#x30B5;&#x30D6;&#x7D30;&#x80DE;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x86CD;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x8133;&#x5207;&#x7247;&#x4E2D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x304C;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x704C;&#x6D41;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5668;&#x5B98;&#x8133;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;Microperfusion&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;

&#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xC218;&#xC900;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC2A4;&#xD06C;&#xB9AC;&#xB2DD; &#xBC0F; chemotaxis &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C;&#xB9CC; &#xBD84; &#xC591;&#xC758; &#xC7AC;&#xB8CC;&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xC138; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC810;&#xC810; &#xBB38;&#xD654;&#xC640; &#xCC9C;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418; &#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB1CC; &#xC870;&#xAC01; &#xAC19;&#xC740; &#xC870;&#xC9C1;&#xB41C; &#xC870;&#xC9C1; &#xBB38;&#xD654; &#xACB0;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xD558;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB835;&#xAC8C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; (i) &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xAC70;&#xAFB8;&#xB85C; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBC0F; &#xB1CC; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; microperfusion&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC18C;&#xC124; &#xD22C;&#xBA85; &#xBBF8;&#xC138; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; (MFP) (2)&#xC640; &#xD638;&#xD658; &#xB418;&#xB294; organotypic &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xC2A4; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xB958; &#xCC54;&#xBC84;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC81C;&#xC2DC;. MFP&#xB294; poly(dimethylsiloxane), &#xAE30;&#xB2A5; 6 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C;&#xBBF8;&#xD130; &#xC2A4;&#xCF00;&#xC77C; apertures&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4;&#xC838; &#xD45C;&#xC900; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA87; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC548;&#xC5D0; &#xC870;&#xB9BD; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xAC01; &#xC870;&#xB9AC;&#xAC1C; &#xC0AC;&#xCD9C; &#xB610;&#xB294; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC744; &#xC57C; &#xAE30;&#xD55C; &#xB9CE;&#xC740; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0;&#xC758; &#xC5F4;&#xB9DD;&#xC5D0; &#xBB34;&#xCC28;&#xBCC4;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. MFP &#xB3D9;&#xC2DC; confocal &#xD615;&#xAD11; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; perfused &#xC5FC;&#xB8CC; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; sub-cellular &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xB450;&#xB1CC; &#xBD84;&#xD560; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xC801;&#xC740; &#xC218;&#xC758; &#xAD00;&#xB958;&#xC5D0; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xCC54;&#xBC84;&#xC640; &#xACB0;&#xD569; organotypic &#xB1CC; &#xC870;&#xAC01; microperfusion&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC;.

Los sistemas de microfluidos son cada vez m&#xE1;s utilizado para el cultivo y el estudio de c&#xE9;lulas disociadas, ya que requieren s&#xF3;lo cantidades m&#xED;nimas de materiales al tiempo que permite la detecci&#xF3;n de drogas y estudios de quimiotaxis hasta el nivel de c&#xE9;lulas individuales. Sin embargo, el cultivo de tejido organizado, tales como cortes de cerebro, ha sido m&#xE1;s dif&#xED;cil para adaptarse a los dispositivos de microfluidos. A continuaci&#xF3;n, presentamos un sistema de microfluidos, que comprende (i) una c&#xE1;mara de perfusi&#xF3;n para el cultivo de rodajas organot&#xED;picos que es compatible con im&#xE1;genes de alta resoluci&#xF3;n en los microscopios invertidos, y (ii) de la sonda una novela transparente de microfluidos (MFP) para el microperfusi&#xF3;n localizada de la del tejido cerebral. El MFP se realiza en poli (dimetilsiloxano), cuenta con seis escala micr&#xF3;metros de aberturas y se puede montar en unas pocas horas en un laboratorio est&#xE1;ndar. Cada abertura indiscriminadamente puede utilizarse ya sea para la inyecci&#xF3;n o aspiraci&#xF3;n de soluciones, dando lugar a muchas combinaciones posibles. El MFP se utiliz&#xF3; con &#xE9;xito para la perfusi&#xF3;n de un peque&#xF1;o n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas en un corte de cerebro con concurrente imagen confocal de fluorescencia del colorante perfundido y estructuras subcelulares dentro del tejido.

C&#xE1;mara y de la sonda de microfluidos para microperfusi&#xF3;n de rodajas de cerebro organot&#xED;picos

&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5982;&#x80BF;&#x7624; de-differentiates &#x57FA;&#x7840;&#x7ED3;&#x80A0;&#x80BF;&#x7624;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x5FAE;&#x89C2;&#x5F62;&#x8C8C; (mT)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x533A;&#x5206;&#x9AD8;&#x5206;&#x5316;&#x5C71;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&quot;&#x5751;&quot;&#x548C;&#x4F4E;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5C71;&#x4EE5;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&quot;&#x804C;&#x4F4D;&quot;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6765;&#x81EA;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5728; ECM &#x7684;&#x7ED3;&#x80A0;&#x764C;&#x60A3;&#x8005;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684; mT &#x529F;&#x80FD;&#x7684; mechanosensing &#x86CB;&#x767D;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8C03;&#x67E5; Rho A&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684; Rho A &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x8F83;&#x5C11;-tumorogenic (&#x4E2D;&#x4E9A;&#x5408;&#x4F5C;&#x7EC4;&#x7EC7; 2 E) &#x548C;&#x66F4;&#x591A;&#x81F4;&#x7624;&#x6027; (SW620)-&#x7ED3;&#x80A0;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D85;&#x5FAE;&#x578B;&#x5751;&#x548C; 2.5 &#x5988;&#x5988;&#x76F4;&#x5F84;&#x53CA; 200 &#x725B;&#x7C73;&#x6DF1;&#x5EA6;/&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7684;&#x804C;&#x4F4D;&#x3002;&#x4E2D;&#x4E9A;&#x5408;&#x4F5C;&#x7EC4;&#x7EC7; 2 E &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230; Rho A &#x6D3B;&#x52A8;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8868;&#x9762;&#x4E0E;&#x5751;&#x6216;&#x804C;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x8FD9;&#x4F4E;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x51FB;&#x5012;&#x7684; Rho A &#x5BFC;&#x81F4;&#x5BC6;&#x95ED;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x6697;&#x793A;&#x540C;&#x65F6;&#x6D3B;&#x52A8;&#x51CF;&#x5C11;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8868;&#x9762;&#x7684; Rho &#x5B83;&#x4ECD;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x969C;&#x788D;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x8DCC;&#x5E45;&#xFF0C;G/F &#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x5728; SW620 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6307;&#x51FA; Rho A &#x6D3B;&#x52A8;&#x6700;&#x5927;&#x9540;&#x4E0A;&#x5F00;&#x673A;&#x81EA;&#x68C0;&#x5F62;&#x8C8C;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x52A8;&#x529B;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x3002;

&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x5FAE;&#x5730;&#x5F62;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x52A8;&#x529B;&#x53CA;&#x7ED3;&#x80A0;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE; Rho A &#x6D3B;&#x52A8;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

We have shown that the microtopography (mT) underlying colon cancer changes as a tumor de-differentiates. We distinguish the well-differentiated mT based on the increasing number of "pits" and poorly differentiated mT on the basis of increasing number of "posts." We investigated Rho A as a mechanosensing protein using mT features derived from those observed in the ECM of colon cancer. We evaluated Rho A activity in less-tumorogenic (Caco-2 E) and more tumorigenic (SW620) colon cancer cell-lines on microfabricated pits and posts at 2.5 mum diameter and 200 nm depth/height. In Caco-2 E cells, we observed a decrease in Rho A activity as well as in the ratio of G/F actin on surfaces with either pits or posts but despite this low activity, knockdown of Rho A led to a significant decrease in confined motility suggesting that while Rho A activity is reduced on these surfaces it still plays an important role in controlling cellular response to barriers. In SW620 cells, we observed that Rho A activity was greatest in cells plated on a post microtopography which led to increased cell motility, and an increase in actin cytoskeletal turnover.

The extracellular matrix microtopography drives critical changes in cellular motility and Rho A activity in colon cancer cells.

Nous avons montr&eacute; que la microtopographie (mT) qui sous-tendent les modifications du cancer du c&ocirc;lon comme une tumeur de-differentiates. Nous distinguons le mT bien diff&eacute;renci&eacute;, bas&eacute; sur le nombre croissant de &laquo; carri&egrave;res &raquo; et peu diff&eacute;renci&eacute; mT sur la base du nombre de &laquo; postes &raquo;. Nous avons &eacute;tudi&eacute; Rho A comme une prot&eacute;ine de mechanosensing &agrave; l&#39;aide de caract&eacute;ristiques de mT d&eacute;riv&eacute;es de celles observ&eacute;es dans l&#39;ECM du cancer du c&ocirc;lon. Nous avons &eacute;valu&eacute; l&#39;activit&eacute; de Rho A en moins-ont (Caco-2 E) et plus tumorig&egrave;nes (SW620) c&ocirc;lon lign&eacute;es cellulaires canc&eacute;reuses-microfabriques fosses et messages &agrave; maman 2,5 de diam&egrave;tre et de profondeur/hauteur de 200 nm. Dans les cellules Caco-2 E, nous avons observ&eacute; une diminution de l&#39;activit&eacute; A Rho, ainsi que dans le rapport de l&#39;actine G/F sur des surfaces avec fosses ou de messages, mais malgr&eacute; cette faible activit&eacute;, d&eacute;fiant de Rho A conduit &agrave; une diminution significative de la motilit&eacute; clos sugg&eacute;rant que, tandis que Rho, une activit&eacute; est r&eacute;duite sur ces surfaces, elle joue encore un r&ocirc;le important dans le contr&ocirc;le de la r&eacute;ponse cellulaire aux barri&egrave;res. Dans les cellules de SW620, nous avons observ&eacute; que Rho A l&#39;activit&eacute; est maximale dans les cellules cultiv&eacute;es sur une microtopographie de post qui a conduit &agrave; la motilit&eacute; cellulaire accrue et une augmentation du chiffre d&#39;affaires du cytosquelette d&#39;actine.

La microtopographie de la matrice extracellulaire des lecteurs des modifications critiques dans la motilit&eacute; cellulaire et l&#39;activit&eacute; A Rho dans les cellules canc&eacute;reuses du c&ocirc;lon.

Wir haben gezeigt, dass die Microtopography (mT) Doppelpunkt Krebs &Auml;nderungen zugrunde liegen, wie ein Tumor de-differentiates. Wir unterscheiden die Liposarkom mT basierend auf die zunehmende Zahl von &quot;Gruben&quot; und schlecht differenzierten mT auf der Grundlage der Anzahl der &quot;Beitr&auml;ge.&quot; Wir untersuchten Rho A als Mechanosensing Protein mit mT-Features bei ECM von Dickdarmkrebs abgeleitet. Wir evaluieren Rho A Activity in weniger-Tumorogenic (Caco-2 E) und weitere tumorigenic (SW620) Doppelpunkt-Krebszelllinien auf Microfabricated Gruben und Beitr&auml;ge bei 2,5 malzkaffee Durchmesser und 200 nm Tiefe/H&ouml;he. In Caco-2 E Zellen beobachteten wir einen R&uuml;ckgang der Rho A Activity sowie das Verh&auml;ltnis der G/F-Aktin auf Oberfl&auml;chen mit Gruben oder Beitr&auml;ge, aber trotz dieser niedrige Aktivit&auml;t, Niederschlag von Rho A f&uuml;hrte zu einem deutlichen R&uuml;ckgang der beengten Motilit&auml;t darauf hindeutet, dass w&auml;hrend des Rho, die eine T&auml;tigkeit auf diesen Oberfl&auml;chen reduziert wird es eine wichtige Rolle bei der Kontrolle der zellul&auml;re Reaktion auf Barrieren spielt. In den SW620 Zellen beobachteten wir, dass Rho A Activity in Zellen plattiert auf ein Post-Microtopography f&uuml;hrte zu erh&ouml;hte Zelle Motilit&auml;t und eine Zunahme der Aktin-Zytoskelett-Umsatz am gr&ouml;&szlig;ten war.

Die extrazellul&auml;re Matrix-Microtopography f&auml;hrt kritische Ver&auml;nderungen in zellul&auml;rer Motilit&auml;t und Rho A Activity in Doppelpunkt Krebszellen.

Abbiamo dimostrato che il microtopography (mT) sottostante le modifiche di cancro del colon, come un tumore de-differentiates. Distinguiamo il mT ben differenziati sulla base del numero crescente di &quot;pozzi&quot; e scarsamente differenziati mT sulla base di aumentare il numero dei &quot;messaggi&quot;. Abbiamo studiato A Rho come una proteina di mechanosensing utilizzando mT caratteristiche derivate da quelle osservate in ECM del cancro del colon. Abbiamo valutato l&#39;attivit&agrave; A Rho in meno-tumorogenic (E Caco-2) e pi&ugrave; genetica (SW620) del colon cancro-linee cellulari su microfabricated box e i posti di 2,5 diametro mamma e 200 profondit&agrave; di nm/altezza. Nelle cellule Caco-2 E, abbiamo osservato una diminuzione nell&#39;attivit&agrave; A Rho cos&igrave; come il rapporto G/F actina su superfici con pozzi o messaggi ma nonostante questa bassa attivit&agrave;, atterramento di Rho un condotto ad una diminuzione significativa della motilit&agrave; limitata suggerisce che mentre Rho un&#39;attivit&agrave; viene ridotta su queste superfici gioca ancora un ruolo importante nel controllo della risposta cellulare alle barriere. Nelle cellule SW620, abbiamo osservato che A Rho attivit&agrave; era maggiore nelle cellule placcate su un post microtopography che ha portato alla cellula aumentata motilit&agrave; e un aumento del fatturato del citoscheletro di actina.

La matrice extracellulare microtopography unit&agrave; cambiamenti critici nella motilit&agrave; cellulare e attivit&agrave; A Rho in cellule di cancro del colon.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x3092; de-differentiates &#x3068;&#x5927;&#x8178;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x57FA;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x5FAE;&#x5730;&#x5F62; (mT) &#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x300C;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C8;&#x300D;&#x3068;&#x300C;&#x6295;&#x7A3F;&#x300D;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x4E2D;&#x5206; mT &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x6570;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x9AD8;&#x5206;&#x5316;&#x578B;&#x306E; mT &#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x8178;&#x764C;&#x306E; ECM &#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F; mT &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x529B;&#x899A;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066; Rho A &#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;-tumorogenic &#xFF08;&#x70AD;&#x9178;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; 2 E&#xFF09; &#x3067; Rho &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x3088;&#x308A;&#x767A;&#x764C;&#x6027; (SW620) &#x5927;&#x8178;&#x304C;&#x3093; - &#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x5FAE;&#x7D30;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068; 2.5 mum &#x76F4;&#x5F84; 200 nm &#x306E;&#x6DF1;&#x3055;/&#x9AD8;&#x3055;&#x3067;&#x306E;&#x6295;&#x7A3F;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x70AD;&#x9178;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; 2 E &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Rho &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x3082;&#x8868;&#x9762;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C8;&#x3084;&#x6295;&#x7A3F;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4F4E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3001;Rho&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x518D;&#x751F;&#x304C;&#x9589;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F; Rho A &#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A; &#x11C;/F &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6BD4;&#x7387;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;SW620 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Rho &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5897;&#x52A0;&#x7D30;&#x80DE;&#x904B;&#x52D5;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x58F2;&#x308A;&#x4E0A;&#x3052;&#x9AD8;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x306E;&#x8A18;&#x4E8B;&#x306E;&#x5FAE;&#x5730;&#x5F62;&#x306B;&#x3081;&#x3063;&#x304D;&#x30BB;&#x30EB;&#x3067;&#x6700;&#x5927;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x5FAE;&#x5730;&#x5F62;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3068;&#x5927;&#x8178;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Rho &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xACB0; &#xC7A5; &#xC554; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC885;&#xC591; de-differentiates&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xBCF5;&#xC774; (&#xC0B0;)&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &quot;&#xAD6C; &#xB369;&#xC774;&quot;&#xC640; &quot;&#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C;&quot;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xADFC;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC00;&#xB09C; &#xD558; &#xAC8C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC0B0;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC798; &#xC0B0; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB300; &#xC7A5; &#xC554;&#xC758; ECM&#xC5D0; &#xADF8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB9C8;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; mechanosensing &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C;&#xB85C; A&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB35C;-tumorogenic (Caco-2 E)&#xC5D0; Rho A &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; tumorigenic (SW620) &#xB300; &#xC7A5; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;-&#xB77C;&#xC778; &#xFE59; &#xAD6C; &#xB369;&#xC774; 2.5 &#xC5C4;&#xB9C8; &#xC9C1;&#xACBD; 200 nm &#xAE4A;&#xC774;/&#xB192;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xD3C9;&#xAC00;. Caco-2 E &#xC140; G/F &#xB9D0;&#xB77C; &#xAD6C; &#xB369;&#xC774; &#xB610;&#xB294; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBC00;&#xD3D0; &#xB41C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744;&#xC774; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC8FC;&#xB3C4; Rho&#xC758; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758;&#xC774; &#xB0AE;&#xC740; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB85C;&#xB3C4; A &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SW620 &#xC140;&#xC5D0; Rho A &#xD65C;&#xB3D9; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeletal &#xB9E4;&#xCD9C; &#xC99D;&#xAC00;&#xB97C; &#xC8FC;&#xB3C4; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C; &#xAE30;&#xBCF5;&#xC774;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xAE08;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD070; &#xD588;&#xB2E4; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; &#xAE30;&#xBCF5;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBC0F; &#xACB0; &#xC7A5; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; Rho A &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;.

Hemos demostrado la microtopograf&iacute;a (mT) subyacente cambios de c&aacute;ncer de colon como un tumor de-differentiates. Distinguimos la TA bien diferenciada basada en el creciente n&uacute;mero de &quot;hoyos&quot; y mT pobremente diferenciado sobre la base de aumentar el n&uacute;mero de &quot;puestos&quot;. Investigamos A Rho como una prote&iacute;na mechanosensing mT caracter&iacute;sticas derivadas de los observados en el ECM del c&aacute;ncer de colon. Se evaluaron la actividad Rho en menos-tumorig&eacute;nica (Caco-2 E) y m&aacute;s tumor&iacute;gena (SW620) colon l&iacute;neas celulares de c&aacute;ncer-en microfabricated hoyos y puestos en 2,5 di&aacute;metro mam&aacute; y 200 nm profundidad/altura. En las c&eacute;lulas Caco-2 E, se observ&oacute; una disminuci&oacute;n en la actividad de A Rho, as&iacute; como en la relaci&oacute;n de la actina G/F en superficies con hoyos o mensajes pero a pesar de esta baja actividad, precipitaci&oacute;n de la Rho A conducido a una disminuci&oacute;n significativa en la motilidad confinada sugiriendo que mientras que una actividad se reduce en estas superficies de Rho todav&iacute;a desempe&ntilde;a un papel importante en el control de la respuesta celular a las barreras. En las c&eacute;lulas SW620, observamos que Rho actividad era mayor en las c&eacute;lulas plateadas en una microtopograf&iacute;a puesto que condujo a la movilidad creciente de la c&eacute;lula y un aumento en la facturaci&oacute;n de citoesqueleto de actina.

La microtopograf&iacute;a de la matriz extracelular impulsa cambios cr&iacute;ticos en la motilidad celular y actividad Rho en c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de colon.

Article	Year
Nitric oxide cytoskeletal-induced alterations reverse the endothelial progenitor cell migratory defect associated with diabetes. Diabetes\| PubMed ID: 16380482	2006
Chamber and microfluidic probe for microperfusion of organotypic brain slices. Lab on a chip\| PubMed ID: 20091004	2010
The extracellular matrix microtopography drives critical changes in cellular motility and Rho A activity in colon cancer cells. Cancer cell international\| PubMed ID: 20667086	2010

Cecile M. Perrault

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