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University of Cincinnati, McMicken College of Arts and Science

US Environmental Protection Agency

Office of Research and Development, US Environmental Protection Agency

&#x957F;&#x671F;&#x6297;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;CD28 &#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6700;&#x4F18;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46; CD28(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x8010;&#x5F13;&#x5F62;&#xFF0C;&#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x5206;&#x5B50;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x75C5;&#x671F;&#x95F4; CD28 &#x72EC;&#x7ACB;&#x673A;&#x5236;&#x8C03;&#x8282; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;B7 &#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D; 1/&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5171;&#x86CB;&#x767D; (ICOS) &#x901A;&#x8DEF;&#x548C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x53CA;&#x5176;&#x80FD;&#x529B;&#x9274;&#x5B9A;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6B64;&#x901A;&#x8DEF;&#x53EF;&#x80FD;&#x53C2;&#x4E0E; CD28 &#x72EC;&#x7ACB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5F13;&#x5F62;&#x7684;&#x6297;&#x6027;&#x3002;&#x652F;&#x6301;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x6216;&#x5F13;&#x5F62; CD28(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x611F;&#x67D3;&#x5BFC;&#x81F4; icos &#x9879;&#x76EE;&#x7531;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684; CD4(+) &#x548C; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x901A;&#x8DEF;&#x8D21;&#x732E;&#x4F53;&#x5916;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x7531;&#x7279;&#x5B9A;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x9014;&#x5F84;&#x88AB;&#x963B;&#x6B62;&#x65F6;&#xFF0C;&#x6709;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5242;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x6291;&#x5236;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4F53;&#x5185;&#x5C01;&#x9501; ICOS &#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x611F;&#x67D3;&#x5F13;&#x5F62;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5E76;&#x672A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6613;&#x589E;&#x52A0;&#x611F;&#x6027;&#x7684; CD28(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x5230; T.&#x8D21;&#x8FEA;&#x4E0E;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&gamma;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x8D1F;&#x62C5;&#xFF0C;&#x964D;&#x4F4E;&#x7684;&#x8840;&#x6E05;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC4;&#x76F8;&#x6BD4;&#x660E;&#x663E;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x3002;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6027;&#x7684; Th1 &#x578B;&#x53CD;&#x5E94;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6297;&#x5F13;&#x5F62; ICOS &#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8868;&#x660E;&#x4E13;&#x540D;&#x5B66;&#x548C; CD28 &#x5E76;&#x884C;&#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x8981;&#x4E48;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x8C03;&#x89E3;&#x8FD9;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x6297;&#x836F;&#x6027;&#x3002;

&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x5171;&#x86CB;&#x767D;&#x6297;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B; CD28 &#x72EC;&#x7ACB;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Long-term resistance to Toxoplasma gondii is dependent on the development of parasite-specific T cells that produce IFN-gamma. CD28 is a costimulatory molecule important for optimal activation of T cells, but CD28(-/-) mice are resistant to T. gondii, demonstrating that CD28-independent mechanisms regulate T cell responses during toxoplasmosis. The identification of the B7-related protein 1/inducible costimulator protein (ICOS) pathway and its ability to regulate the production of IFN-gamma suggested that this pathway may be involved in the CD28-independent activation of T cells required for resistance to T. gondii. In support of this hypothesis, infection of wild-type or CD28(-/-) mice with T. gondii resulted in the increased expression of ICOS by activated CD4(+) and CD8(+) T cells. In addition, both costimulatory pathways contributed to the in vitro production of IFN-gamma by parasite-specific T cells and when both pathways were blocked, there was an additive effect that resulted in almost complete inhibition of IFN-gamma production. Although in vivo blockade of the ICOS costimulatory pathway did not result in the early mortality of wild-type mice infected with T. gondii, it did lead to increased susceptibility of CD28(-/-) mice to T. gondi associated with reduced serum levels of IFN-gamma, increased parasite burden, and increased mortality compared with the control group. Together, these results identify a critical role for ICOS in the protective Th1-type response required for resistance to T. gondii and suggest that ICOS and CD28 are parallel costimulatory pathways, either of which is sufficient to mediate resistance to this intracellular pathogen.

A role for inducible costimulator protein in the CD28- independent mechanism of resistance to Toxoplasma gondii.

R&#xE9;sistance &#xE0; long terme &#xE0; Toxoplasma gondii est d&#xE9;pendante du d&#xE9;veloppement des cellules T sp&#xE9;cifiques du parasite qui produisent l&#x26;#39;IFN-gamma. CD28 est une mol&#xE9;cule co-stimulatrice importante pour l&#x26;#39;activation optimale des cellules T, mais CD28 (- / -) souris sont r&#xE9;sistantes &#xE0; T. gondii, ce qui d&#xE9;montre que les m&#xE9;canismes de CD28-ind&#xE9;pendants r&#xE9;gulent les r&#xE9;ponses des lymphocytes T au cours de la toxoplasmose. L&#x26;#39;identification de la B7 li&#xE9;e 1/inducible costimulateur prot&#xE9;ines prot&#xE9;ines (ICOS) voie et sa capacit&#xE9; &#xE0; r&#xE9;guler la production d&#x26;#39;IFN-gamma a sugg&#xE9;r&#xE9; que cette voie peut &#xEA;tre impliqu&#xE9;e dans l&#x26;#39;activation de CD28-ind&#xE9;pendante des cellules T n&#xE9;cessaire pour la r&#xE9;sistance &#xE0; T. gondii. &#xC0; l&#x26;#39;appui de cette hypoth&#xE8;se, l&#x26;#39;infection de type sauvage ou CD28 (- / -) des souris avec T. gondii abouti &#xE0; l&#x26;#39;expression accrue de l&#x26;#39;ICOS par CD4 activ&#xE9;es (+) et CD8 (+) des cellules T. En outre, &#xE0; la fois co-stimulatrice voies contribu&#xE9; &#xE0; la production in vitro d&#x26;#39;IFN-gamma par les cellules T sp&#xE9;cifiques du parasite et quand les deux voies ont &#xE9;t&#xE9; bloqu&#xE9;es, il y avait un effet additif qui a entra&#xEE;n&#xE9; une inhibition presque compl&#xE8;te de la production d&#x26;#39;IFN-gamma. Bien que, dans le blocus in vivo de la voie de costimulation ICOS n&#x26;#39;a pas entra&#xEE;n&#xE9; de la mortalit&#xE9; pr&#xE9;coce de souris de type sauvage infect&#xE9;es par T. gondii, elle a entra&#xEE;n&#xE9; &#xE0; une susceptibilit&#xE9; accrue de CD28 (- / -) des souris &#xE0; T. gondi associ&#xE9;s &#xE0; une r&#xE9;duction des taux s&#xE9;riques de l&#x26;#39;IFN-gamma, l&#x26;#39;augmentation de la charge parasitaire, et une mortalit&#xE9; accrue par rapport au groupe contr&#xF4;le. Ensemble, ces r&#xE9;sultats mettent en &#xE9;vidence un r&#xF4;le essentiel pour la protection ICOS Th1-type de r&#xE9;ponse n&#xE9;cessaire pour la r&#xE9;sistance &#xE0; T. gondii et sugg&#xE8;rent que ICOS et CD28 sont des voies de costimulation parall&#xE8;les, soit de ce qui est suffisant pour servir de m&#xE9;diateur r&#xE9;sistance &#xE0; ce pathog&#xE8;ne intracellulaire.

Un r&#xF4;le pour la prot&#xE9;ine inductible costimulateur dans le m&#xE9;canisme de CD28-ind&#xE9;pendante de la r&#xE9;sistance &#xE0; Toxoplasma gondii

Eine Rolle f&#xFC;r die induzierbare Kostimulator Protein in der CD28-unabh&#xE4;ngigen Mechanismus der Resistenz gegen Toxoplasma gondii.

Resistenza a lungo termine per Toxoplasma gondii dipende lo sviluppo di cellule T specifiche parassita che producono IFN-gamma. CD28 &egrave; una molecola costimolazione importante per l&#39;ottimale attivazione delle cellule T, ma CD28(-/-) topi sono resistenti a T. gondii, dimostrando che meccanismi indipendenti CD28 regolano le risposte delle cellule T durante la toxoplasmosi. L&#39;identificazione del sentiero B7-related protein 1/viscoelastico costimulator proteina (ICOS) e la sua capacit&agrave; di regolare la produzione di IFN-gamma ha suggerito che questo percorso pu&ograve; essere coinvolto nell&#39;attivazione delle cellule T, necessaria per la resistenza al T. gondii CD28-indipendente. A sostegno di questa ipotesi, infezione del selvaggio-tipo o CD28(-/-) topi con T. gondii ha portato l&#39;espressione aumentata di ICOS di cellule CD4(+) e cellule T attivate. Inoltre, entrambi percorsi costimolazione hanno contribuito alla produzione in vitro di IFN-gamma di cellule T specifiche parassita e quando entrambi i percorsi sono stati bloccati, c&#39;&egrave; stato un effetto additivo che ha portato in quasi completa inibizione della produzione di IFN-gamma. Sebbene in vivo blocco del percorso costimolazione ICOS non abbia provocato la mortalit&agrave; precoce del selvaggio-tipo topi infettati con T. gondii, essa ha portato all&#39;aumento della suscettibilit&agrave; dei topi CD28(-/-) a T. gondi associato siero ridotto livelli di IFN-gamma, onere maggiore parassita e aumentato mortalit&agrave; rispetto al gruppo di controllo. Insieme, questi risultati identificano un ruolo critico per la ICOS nella risposta Th1-tipo protezione necessaria per la resistenza al T. gondii e suggeriscono che ICOS e CD28 sono percorsi paralleli di costimolazione, o dei quali &egrave; sufficiente per mediare la resistenza di questo agente patogeno intracellulare.

Un ruolo per la proteina costimulator inducibile nel meccanismo di resistenza al Toxoplasma gondii CD28-indipendente.

&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x3078;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x62B5;&#x6297;&#x306F;&#x3001;IFN-&#x3B3;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; CD28&#x306F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x5206;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;CD28&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;CD28&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x75C7;&#x306E;&#x9593;&#x306B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30C7;&#x30E2;&#x3092;&#x3001;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; B7-&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;1/inducible&#x306E;costimulator&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;ICOS&#xFF09;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;IFN-&#x3B3;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;T&#x306B;&#x62B5;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;CD28&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x539F;&#x866B;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;CD28&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x3068;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;ICOS&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;IFN-&#x3B3;&#x306E;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;IFN-&#x3B3;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x307B;&#x307C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5264;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x8840;&#x6E05;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;T.&#x30B4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;ICOS&#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x5C01;&#x9396;&#x306B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x306B;&#x306F;&#x81F3;&#x3089;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;CD28&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x305F;IFN-&#x3B3;&#x306E;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x8CA0;&#x62C5;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x5BFE;&#x7167;&#x7FA4;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306B;&#x62B5;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x4FDD;&#x8B77;Th1&#x578B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;ICOS&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x304C;ICOS&#x3068;CD28&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30E9;&#x30EC;&#x30EB;&#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x539F;&#x866B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306E;CD28&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;Costimulator&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

&#xC7A5;&#xAE30; &#xC800;&#xD56D; Toxoplasma gondii&#xC5D0; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xAD00;&#xB828; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cd28&#xC740; &#xC2DC;&#xC5F0; CD28 &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; toxoplasmosis &#xB3D9;&#xC548; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; T &#xC138;&#xD3EC;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; T. gondii&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; CD28(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; costimulatory &#xBD84;&#xC790; &#xC774;&#xB2E4;. B7 &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1/&#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; costimulator &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (ICOS) &#xD1B5;&#xB85C; IFN-&#xAC10;&#xB9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC774;&#xC774; &#xD1B5;&#xB85C; T. gondii&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; CD28 &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC00;&#xC124;&#xC758; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB610;&#xB294; CD28(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; T. gondii&#xC758; &#xAC10;&#xC5FC; CD4(+) &#xBC0F; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; ICOS&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DD; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB450; costimulatory &#xACBD;&#xB85C; &#xCCB4; &#xC678; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xAD00;&#xB828; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC758; &#xAC70;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xCCA8;&#xAC00;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB450; &#xACBD;&#xB85C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. ICOS costimulatory &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; in vivo &#xBD09;&#xC1C4; T. gondii&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xC870;&#xAE30; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960;&#xC744; &#xCD08;&#xB798; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xAC83;&#xC744; &#xC774;&#xB04C;&#xC5B4; &#xC694; T. CD28(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC790;&#xD654; &#xC728;&#xC5D0; gondi &#xBC0F; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xD608; &#xCCAD; IFN-&#xAC10;&#xB9C8;, &#xC99D;&#xAC00; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xBD80;&#xB2F4; &#xC218;&#xC900;&#xC758;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960; &#xC99D;&#xAC00;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; T. gondii&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBCF4;&#xD638; Th1 &#xD0C0;&#xC785; &#xC751;&#xB2F5; ICOS&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; ICOS&#xC640; cd28&#xB294; &#xBCD1;&#xB82C; costimulatory &#xACBD;&#xB85C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xCDA9;&#xBD84;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Toxoplasma gondii&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D;&#xC758; CD28 &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; costimulator &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

Resistencia a largo plazo a Toxoplasma gondii es dependiente en el desarrollo de c&#xE9;lulas T espec&#xED;ficas del par&#xE1;sito que producen IFN-gamma. CD28 es una mol&#xE9;cula coestimuladora importante para la activaci&#xF3;n &#xF3;ptima de las c&#xE9;lulas T, pero CD28 (- / -) ratones son resistentes a T. gondii, lo que demuestra que los mecanismos independientes-CD28 regulan las respuestas de c&#xE9;lulas T en la toxoplasmosis. La identificaci&#xF3;n de la B7 relacionada 1/inducible prote&#xED;na coestimulador prote&#xED;na (ICOS) v&#xED;a y su capacidad para regular la producci&#xF3;n de IFN-gamma sugiere que esta v&#xED;a puede estar implicado en la activaci&#xF3;n CD28-independiente de las c&#xE9;lulas T requerido para la resistencia a T. gondii. En apoyo de esta hip&#xF3;tesis, la infecci&#xF3;n de tipo salvaje o CD28 (- / -) ratones con T. gondii result&#xF3; en el aumento de la expresi&#xF3;n de ICOS de CD4 activados (+) y CD8 (+) las c&#xE9;lulas T. Adem&#xE1;s, tanto coestimuladora v&#xED;as contribuido a la producci&#xF3;n in vitro de IFN-gamma por las c&#xE9;lulas T espec&#xED;ficas de par&#xE1;sito y cuando ambas v&#xED;as fueron bloqueadas, hubo un efecto aditivo que dio lugar a una inhibici&#xF3;n casi completa de la producci&#xF3;n de IFN-gamma. Aunque en vivo el bloqueo de la v&#xED;a de coestimulaci&#xF3;n de ICOS no dio lugar a la mortalidad temprana de tipo salvaje ratones infectados con T. gondii, que se ha traducido en una mayor susceptibilidad de CD28 (- / -) ratones a T. gondi asociados con la reducci&#xF3;n de los niveles s&#xE9;ricos de IFN-gamma, el aumento de carga parasitaria, y el aumento de la mortalidad en comparaci&#xF3;n con el grupo control. En conjunto, estos resultados identifican un papel fundamental para ICOS en la protecci&#xF3;n de tipo Th1 de respuesta requerida para la resistencia a T. gondii y sugieren que ICOS y CD28 son v&#xED;as paralelas coestimuladoras, cualquiera de los cuales es suficiente para mediar la resistencia a este pat&#xF3;geno intracelular.

El papel de la prote&#xED;na inducible coestimulador en el Mecanismo de CD28-independiente de la resistencia contra el Toxoplasma gondii

&#x534F;&#x540C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7; B7 CD28 &#x4E92;&#x52A8;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316;&#xFF0C;&#x548C;&#x4EE5;&#x5F80;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; CD28(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x751F;&#x6210;&#x6B21;&#x4F18; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;T &#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; 2 &#xFF08;IL-2&#xFF09; &#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89E3;&#x51B3;&#x5728;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x75C5;&#x671F;&#x95F4;&#x6269;&#x5927; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2 &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;IL-2(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x611F;&#x67D3;&#x4E86;&#x5F13;&#x5F62;&#xFF0C;&#x5176;&#x751F;&#x6210;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6027;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;&#x867D;&#x7136; IL-2(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x4EA7;&#x751F;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-12 p 40 &#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x4F3D;&#x739B;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; (&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&gamma;) &#x6C34;&#x5E73;&#x964D;&#x4F4E;&#x8840;&#x6E05;&#x4E2D;&#x3001; &#x5DF2;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x8D1F;&#x62C5;&#xFF0C;&#x5C48;&#x4ECE;&#x4E8E; 20 &#x5929;&#x5185;&#x611F;&#x67D3;&#x5F13;&#x5F62;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x6D3B;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x9009;&#x4EEA;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x672A;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684; IL-2(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x5DF2;&#x6FC0;&#x6D3B; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x589E;&#x52A0;&#x5C06;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4EBA;&#x53E3;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E0E;&#x672A;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684; IL-2(+/+) &#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x4E4B;&#x540E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x672A;&#x80FD;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x957F;&#x671F;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x6765;&#x81EA;&#x672A;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x548C;&#x611F;&#x67D3;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x813E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x80FD;&#x529B;&#x8003;&#x8BD5;&#x900F;&#x9732; IL-2(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x76F8;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6297; CD3 &#x6216;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#x5230; hyporesponsive&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x8865;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2 &#x5355;&#x72EC;&#x6216;&#x7ED3;&#x5408;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-12 &#x6216;&#x4E0E;&#x4F5B;&#x6CE2;&#x916F;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0B;&#x548C; ionomycin &#x523A;&#x6FC0;&#x4E0D;&#x80FD;&#x8FD8;&#x539F;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; IL-2(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0D;&#x80FD;&#x751F;&#x6210;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6027;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x53CD;&#x5E94;&#x540E;&#x611F;&#x67D3;&#x5F13;&#x5F62;&#x548C;&#x5EFA;&#x8BAE; IL-2(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x6709;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#xFF0C;&#x5728;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x6269;&#x5927;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5F13;&#x5F62;&#x6297;&#x6027;&#x7684;&#x4EA7;&#x751F;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;

&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; 2 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5BF9;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x662F;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x4F3D;&#x739B;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;

Costimulation through the B7-CD28 interaction is an important second signal for T-cell activation, and previous studies have shown that CD28(-/-) mice infected with Toxoplasma gondii generate suboptimal CD4(+) T-cell responses, associated with a defect in production of the T-cell growth factor interleukin-2 (IL-2). To address the role of IL-2 in the expansion of T cells during toxoplasmosis, IL-2(-/-) mice were infected with T. gondii and their ability to generate a protective T-cell response was assessed. Although IL-2(-/-) mice produced normal levels of IL-12p40, they had reduced levels of gamma interferon (IFN-gamma) in serum, had an increased parasite burden, and succumbed to infection with T. gondii within 20 days. Fluorescence-activated cell sorter analysis revealed that, although uninfected IL-2(-/-) mice had an increased number of activated T cells compared with uninfected IL-2(+/+) mice, following infection they were unable to further upregulate this population. Examination of the ability of splenocytes from uninfected and infected mice to produce IFN-gamma revealed that IL-2(-/-) mice were hyporesponsive to stimulation with anti-CD3 or parasite antigen compared with wild-type mice, and the addition of IL-2 alone or in combination with IL-12 or stimulation with phorbol myristate acetate and ionomycin did not restore the production of IFN-gamma. Together, these studies reveal that IL-2(-/-) mice are unable to generate a protective IFN-gamma response following infection with T. gondii and suggest that IL-2(-/-) mice have an intrinsic defect in their ability to activate and expand IFN-gamma-producing T cells required for resistance to T. gondii.

Susceptibility of interleukin-2-deficient mice to Toxoplasma gondii is associated with a defect in the production of gamma interferon.

Costimulation par l&#x26;#39;interaction B7-CD28 est un signal important seconde activation des lymphocytes T, et des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures ont montr&#xE9; que CD28 (- / -) des souris infect&#xE9;es par Toxoplasma gondii CD4 generate sous-optimale (+) des cellules T, les r&#xE9;ponses associ&#xE9;es &#xE0; un d&#xE9;faut dans la production du facteur de croissance des lymphocytes T de l&#x26;#39;interleukine-2 (IL-2). Pour aborder le r&#xF4;le de l&#x26;#39;IL-2 dans l&#x26;#39;expansion des cellules T au cours de la toxoplasmose, l&#x26;#39;IL-2 (- / -) des souris ont &#xE9;t&#xE9; infect&#xE9;es par T. gondii et leur capacit&#xE9; &#xE0; g&#xE9;n&#xE9;rer une protection r&#xE9;ponse des cellules T a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;e. Bien que l&#x26;#39;IL-2 (- / -) chez la souris ont produit des niveaux normaux de l&#x26;#39;IL-12p40, ils avaient r&#xE9;duit les niveaux de l&#x26;#39;interf&#xE9;ron gamma (IFN-gamma) dans le s&#xE9;rum, avait une charge parasitaire accrue, et a succomb&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;infection par T. gondii dans les 20 jours . Fluorescence-activated cell sorter analyse a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que, bien que non infect&#xE9;s IL-2 (- / -) chez la souris ont un nombre accru de cellules T activ&#xE9;es par rapport &#xE0; l&#x26;#39;IL-2 non infect&#xE9;es (+ / +) chez la souris, suite &#xE0; une infection, ils ont &#xE9;t&#xE9; incapables de r&#xE9;guler &#xE0; la hausse encore cette de la population. Examen de la capacit&#xE9; des spl&#xE9;nocytes de souris non infect&#xE9;es et infect&#xE9;es de produire de l&#x26;#39;IFN-gamma ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que l&#x26;#39;IL-2 (- / -) des souris &#xE9;taient hypor&#xE9;activit&#xE9; &#xE0; la stimulation avec l&#x26;#39;antig&#xE8;ne anti-CD3 ou un parasite par rapport &#xE0; souris de type sauvage, et l&#x26;#39;ajout d&#x26;#39;IL -2 seul ou en combinaison avec l&#x26;#39;IL-12 ou de la stimulation avec de l&#x26;#39;ac&#xE9;tate myristate de phorbol et ionomycine n&#x26;#39;a pas restaur&#xE9; la production d&#x26;#39;IFN-gamma. Ensemble, ces &#xE9;tudes r&#xE9;v&#xE8;lent que l&#x26;#39;IL-2 (- / -) souris sont incapables de g&#xE9;n&#xE9;rer une protection IFN-gamma r&#xE9;ponse suite &#xE0; l&#x26;#39;infection par T. gondii et sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;IL-2 (- / -) les souris ont un d&#xE9;faut intrins&#xE8;que dans leur capacit&#xE9; pour activer et de d&#xE9;velopper l&#x26;#39;IFN-gamma des cellules productrices de T n&#xE9;cessaires &#xE0; la r&#xE9;sistance de T. gondii.

La sensibilit&#xE9; des souris d&#x26;#39;interleukine-2-d&#xE9;ficients &#xE0; Toxoplasma gondii est associ&#xE9;e &#xE0; un d&#xE9;faut dans la production d&#x26;#39;interf&#xE9;ron gamma

Empfindlichkeit von Interleukin-2-defizienten M&#xE4;usen gegen Toxoplasma gondii ist mit einem Defekt in der Produktion von Gamma-Interferon assoziiert.

Costimulation attraverso l&#39;interazione CD28-B7 &egrave; un secondo segnale importante per l&#39;attivazione delle cellule T, e studi precedenti hanno mostrato che CD28(-/-) topi infettati con Toxoplasma gondii generano suboptimal risposte CD4(+) T-cellula, associate a un difetto nella produzione dell&#39;interleuchina (IL-2)-fattore di crescita 2 T-cell. Per affrontare il ruolo di IL-2 nell&#39;espansione delle cellule T durante la toxoplasmosi, IL-2(-/-) topi sono stati infettati con T. gondii ed &egrave; stata valutata la loro capacit&agrave; di generare una risposta protettiva delle cellule T. Sebbene IL-2(-/-) topi prodotti normali livelli di IL-12 p 40, avevano ridotto i livelli di interferone gamma (IFN-gamma) nel siero, aveva un onere maggiore parassita e ceduto alla infezione da T. gondii entro 20 giorni. Fluorescenza-attivato cell sorter analisi hanno rivelato che, sebbene non infetti IL-2(-/-) topi ha avuto un aumento del numero di cellule T attivate rispetto ai non infetti IL-2(+/+) topi, seguito di infezione non furono in grado di ulteriore potenziamento questa popolazione. Esame della capacit&agrave; degli splenocytes da topi infetti e non infetti per produrre IFN-gamma ha rivelato che IL-2(-/-) topi erano iporeattivo alla stimolazione con l&#39;antigene anti-CD3 o parassita rispetto ai topi wild-type, e l&#39;aggiunta di IL-2 da solo o in combinazione con IL 12 o stimolazione con forbolo miristato acetato e ionomicina non ha ripristinato la produzione di IFN-gamma. Insieme, questi studi rivelano che IL-2(-/-) topi sono in grado di generare una risposta protettiva di IFN-gamma dopo l&#39;infezione da T. gondii e suggeriscono che IL-2(-/-) topi hanno un difetto intrinseco nella loro capacit&agrave; di attivare ed espandere la produzione di IFN-gamma T cellule necessarie per la resistenza al T. gondii.

Suscettibilit&agrave; di interleukin-2-deficient mice a Toxoplasma gondii &egrave; associato un difetto nella produzione di interferone gamma.

B7-CD28&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x523A;&#x6FC0;&#x306F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7B2C;2&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;CD28&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x6B20;&#x9665;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6B21;&#x5584;&#x306E;CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001; T&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3;-2&#xFF08;IL-2&#xFF09;&#x306E;&#x88FD;&#x9020;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C1;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x75C7;&#x306E;&#x9593;&#x306B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;IL-2&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;IL-2&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x3068;&#x4FDD;&#x8B77;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x611F;&#x67D3;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;IL-2&#x304C;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;IL-12p40&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;20&#x65E5;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x3001;&#x8840;&#x6E05;&#x4E2D;&#x306E;&#x3B3;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;IFN-&#x3B3;&#xFF09;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x5897;&#x52A0;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x8CA0;&#x62C5;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x5C48;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x5F8C;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;IL-2&#xFF08;+ / +&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3092;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x86CD;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BB;&#x30EB;&#x30BD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;IL-2&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6297;CD3&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6297;&#x539F;&#x3067;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x3001;IL&#x306E;&#x307B;&#x304B;&#x306B;&#x4F4E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;IFN-&#x3B3;&#x3092;&#x7523;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x813E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x691C;&#x67FB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;IL-2&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;-2&#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;IL-12&#x307E;&#x305F;&#x306F;IFN-&#x3B3;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x30DB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30FC;&#x30EB;&#x30DF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x30A4;&#x30AA;&#x30CE;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3067;&#x523A;&#x6FC0;&#x3068;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x611F;&#x67D3;&#x5F8C;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;IFN-&#x3B3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x3068;IL-2&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;IL-2&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x62B5;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;IFN-&#x3B3;&#x7523;&#x751F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x5C55;&#x958B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3;2&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;

Costimulation B7 CD28 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC2E0;&#xD638; &#xC774;&#xBA70; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; Toxoplasma gondii&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; CD28(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; interleukin-2 (&#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-2)&#xC758; &#xC81C;&#xC791; &#xACB0;&#xD568; &#xC5F0;&#xAD00; &#xCC28;&#xC120; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Toxoplasmosis &#xC911; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-2&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; IL-2(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; T. gondii &#xAC10;&#xC5FC; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; &#xBCF4;&#xD638; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. IL-2(-/-) &#xC950; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xB808;&#xBCA8; IL-12 p 40&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD608; &#xCCAD; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; (IFN-&#xAC10;&#xB9C8;) &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xC99D;&#xAC00; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xBD80;&#xB2F4; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; 20 &#xC77C; &#xC774;&#xB0B4; T. gondii&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xAD74;&#xBCF5;. &#xD615;&#xAD11; &#xD65C;&#xC131; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xBD84;&#xC11D;, &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; IL-2(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218; &#xC99D;&#xAC00;&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; &#xAC10;&#xC5FC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC774; &#xB354; upregulate &#xC218;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; IL-2(+/+) &#xC950;&#xAC00;&#xC774; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. IFN-&#xAC10;&#xB9C8;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; splenocytes&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xBC1D;&#xD600; IL-2(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD588;&#xB2E4; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC548;&#xD2F0; CD3 &#xB610;&#xB294; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xD56D; &#xC6D0; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC790;&#xADF9; hyporesponsive &#xD63C;&#xC790; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-2 &#xB610;&#xB294; IL-12&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB610;&#xB294; phorbol myristate &#xC544;&#xC138;&#xD14C;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; ionomycin &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; IFN-&#xAC10;&#xB9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACF5;&#xAC1C; IL-2(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB294; T. gondii&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBCF4;&#xD638; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; IL-2(-/-) &#xC0DD;&#xC950; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC0DD;&#xC0B0; T &#xC138;&#xD3EC; T. gondii&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xACB0;&#xD568;&#xC744;&#xAC00; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBBFC;&#xAC10;&#xC131; Toxoplasma gondii&#xC5D0; interleukin 2 &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xD568;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Coestimulaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de la interacci&#xF3;n B7-CD28 es una se&#xF1;al importante para la segunda activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T, y estudios previos han demostrado que el CD28 (- / -) ratones infectados con Toxoplasma gondii CD4 generan tales sub&#xF3;ptimos (+) las respuestas de c&#xE9;lulas T, asociados con un defecto en la producci&#xF3;n del factor de crecimiento de c&#xE9;lulas T interleucina-2 (IL-2). Para tratar el papel de la IL-2 en la expansi&#xF3;n de c&#xE9;lulas T durante la toxoplasmosis, la IL-2 (- / -) ratones fueron infectados con T. gondii y su capacidad para generar un protector de c&#xE9;lulas T se evalu&#xF3; la respuesta. Aunque la IL-2 (- / -) ratones produc&#xED;an niveles normales de IL-12p40, que hab&#xED;an reducido los niveles de interfer&#xF3;n gamma (IFN-gamma) en el suero, tuvo un aumento de la carga de par&#xE1;sitos, y sucumbi&#xF3; a la infecci&#xF3;n por T. gondii en los 20 d&#xED;as . Activada por fluorescencia clasificador de c&#xE9;lulas an&#xE1;lisis revel&#xF3; que, aunque no infectadas 2 IL-(- / -) ratones ten&#xED;an un aumento del n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas T activadas en comparaci&#xF3;n con la IL-2 no infectado (+ / +) ratones, despu&#xE9;s de la infecci&#xF3;n no fueron capaces de upregulate a&#xFA;n m&#xE1;s este poblaci&#xF3;n. El examen de la capacidad de esplenocitos de ratones no infectadas e infectadas para producir IFN-gamma revel&#xF3; que la IL-2 (- / -) ratones fueron hiporreactivo a la estimulaci&#xF3;n con ant&#xED;geno anti-CD3 o par&#xE1;sito en comparaci&#xF3;n con ratones de tipo salvaje, y la adici&#xF3;n de IL -2 solos o en combinaci&#xF3;n con IL-12 o la estimulaci&#xF3;n con acetato de forbol miristato y ionomicina no restaurar la producci&#xF3;n de IFN-gamma. En conjunto, estos estudios revelan que la IL-2 (- / -) ratones son incapaces de generar una protecci&#xF3;n de IFN-gamma de respuesta despu&#xE9;s de la infecci&#xF3;n por T. gondii y sugieren que la IL-2 (- / -) los ratones tienen un defecto intr&#xED;nseco en su capacidad para activar y expandir el IFN-gamma que producen c&#xE9;lulas T requeridas para la resistencia a T. gondii.

La susceptibilidad de los ratones de la interleucina-2-deficientes a Toxoplasma gondii est&#xE1; asociada con un defecto en la producci&#xF3;n de interfer&#xF3;n gamma

&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; 10 (IL-10&#xFF09; &#x80FD;&#x591F;&#x5236;&#x6B62;&#x6700;&#x4F18; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x914D;&#x4EF6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x4F7F;&#x5F97;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-10 &#x57FA;&#x56E0; (KO) &#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x540E;&#x4E0E;&#x539F;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x53D1;&#x5C55; CD4 (+)-T-&#x7EC6;&#x80DE;-&#x4F9D;&#x8D56;&#x4F11;&#x514B;&#x6837;&#x53CD;&#x5E94;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x5F88;&#x9AD8;&#x7684; IL-12 &#x548C; &gamma; &#x5E72;&#x6270;&#x7D20; (&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma;&#xFF09; &#x7684;&#x8840;&#x6E05;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5C0F;&#x9F20;&#x611F;&#x67D3;&#x6025;&#x6027;&#x671F;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x4ECE;&#x5148;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x5C01;&#x9501; CD28 &#x548C; CD40 &#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x6765;&#x9632;&#x6B62;&#x8FD9;&#x79CD;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5C01;&#x9501;&#x7684;&#x534F;&#x540C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x5168;&#x8EAB;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-12 &#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x7406;&#x89E3; IL-12 &#x548C; CD28 &#x548C; CD40 &#x901A;&#x8DEF;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x786E;&#x5B9A;&#x5176;&#x6548;&#x679C;&#x7684; IL-10 KO &#x5C0F;&#x9F20; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-12 &#x6216;&#x72EC;&#x81EA; CD28/B7 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5C01;&#x9501;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x751F;&#x5B58; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5408;&#x5E76;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x5C01;&#x9501;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x548C; IL-10 KO &#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x3002;CD28&#x3001; B7.1 &#x548C; B7.2 &#x8BC4;&#x4F30;&#x4E24;&#x4E2A;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4E0E; alphaIL 12 &#x52A0;&#x4E0A; alphaB7.1 &#x6216; alphaB7.2 &#x6216;&#x7EC4;&#x5408;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x79CD;&#x6297;&#x4F53;&#x6CBB;&#x7597; IL-10 KO &#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5C01;&#x9501;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; B7 &#x5206;&#x5B50;&#x662F;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x548C; IL-10 KO &#x5C0F;&#x9F20;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; B7.1 &#x548C; B7.2 &#x53EF;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB; IL-10 KO &#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x81F4;&#x547D;&#x6027;&#x4F11;&#x514B;&#x6837;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5931;&#x6548;&#x7684; IL-12 &#x548C;&#x5C01;&#x9501; CD40/CD40 &#x914D;&#x4F53; (CD40L) &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x6539;&#x53D8;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x548C;&#x4EC5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x77ED;&#x6682;&#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; CD28/B7 &#x4E92;&#x52A8;&#x6709; IL-10 KO &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x4F5C;&#x7528;&#x8FD9;&#x662F;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E; CD40/CD40L &#x548C;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-12 &#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-12 (IL-12&#xFF09; &#x548C; CD28/B7 &#x548C; CD40/CD40 &#x914D;&#x4F53;&#x901A;&#x8DEF;&#x5BF9;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-10 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x75C5;&#x7406; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;

The ability of interleukin-10 (IL-10) to suppress accessory cell functions required for optimal T-cell activation makes it an important inhibitor of cell-mediated immunity. Thus, after infection with the protozoan parasite Toxoplasma gondii, IL-10 knockout (KO) mice develop a CD4(+)-T-cell-dependent shock-like reaction with high levels of IL-12 and gamma interferon (IFN-gamma) in serum, leading to death of mice during the acute phase of infection. Previous studies from this laboratory have shown that simultaneous blockade of CD28 and CD40 can prevent this lethal reaction by inhibiting the production of IFN-gamma. However, the blockade of costimulation did not affect systemic levels of IL-12. To better understand the relationship between IL-12 and the CD28 and CD40 pathways in mediating immune hyperactivity, antagonists of these factors were used to determine their effects on the development of a pathological T-cell response in IL-10 KO mice. Blockade of IL-12 or the CD28/B7 interaction alone did not affect survival; however, the combined blockade of both pathways resulted in decreased production of IFN-gamma and the survival of IL-10 KO mice. To assess the role of the two ligands for CD28, B7.1 and B7.2, IL-10 KO mice were treated with alphaIL-12 plus alphaB7.1 or alphaB7.2 or the combination of all three antibodies. These studies revealed that blockade of both B7 molecules is required for decreased production of IFN-gamma and survival of infected IL-10 KO mice, suggesting that B7.1 and B7.2 can contribute to the lethal shock-like reaction in IL-10 KO mice. In contrast, neutralization of IL-12 and blockade of the CD40/CD40 ligand (CD40L) interaction in vivo did not alter the production of IFN-gamma and only resulted in a small delay in time to death of mice. Together, these data suggest that the CD28/B7 interaction has a central role in the development of a pathological T-cell response in IL-10 KO mice, which is distinct from the role of the CD40/CD40L and IL-12 pathways.

Contribution of interleukin-12 (IL-12) and the CD28/B7 and CD40/CD40 ligand pathways to the development of a pathological T-cell response in IL-10-deficient mice.

La capacit&#xE9; de l&#x26;#39;interleukine-10 (IL-10) pour supprimer les fonctions des cellules accessoires n&#xE9;cessaires pour optimal activation des lymphocytes T, il est un important inhibiteur de l&#x26;#39;immunit&#xE9; cellulaire. Ainsi, apr&#xE8;s l&#x26;#39;infection par le parasite Toxoplasma gondii protozoaire, l&#x26;#39;IL-10 KO (KO) chez la souris de d&#xE9;velopper un nombre de CD4 (+)-T-d&#xE9;pendante des lymphocytes de type choc de r&#xE9;action avec des niveaux &#xE9;lev&#xE9;s d&#x26;#39;IL-12 et l&#x26;#39;interf&#xE9;ron gamma (IFN-gamma) dans le s&#xE9;rum, ce qui conduit &#xE0; la mort des souris lors de la phase aigu&#xEB; de l&#x26;#39;infection. Des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures de ce laboratoire ont montr&#xE9; que le blocage simultan&#xE9; de CD28 et CD40 peut emp&#xEA;cher cette r&#xE9;action l&#xE9;tale en inhibant la production d&#x26;#39;IFN-gamma. Cependant, le blocus de costimulation n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;incidence sur les niveaux syst&#xE9;miques de l&#x26;#39;IL-12. Pour mieux comprendre la relation entre l&#x26;#39;IL-12 et le CD28 et CD40 voies dans la m&#xE9;diation hyperactivit&#xE9; immunitaire, des antagonistes de ces facteurs ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour d&#xE9;terminer leurs effets sur le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;une pathologique r&#xE9;ponse des lymphocytes T chez les souris KO IL-10. Le blocage de l&#x26;#39;IL-12 ou l&#x26;#39;interaction CD28/B7 seul n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;incidence sur la survie, mais le blocus combin&#xE9; de ces deux voies a entra&#xEE;n&#xE9; la production a diminu&#xE9; d&#x26;#39;IFN-gamma et la survie des souris KO IL-10. Pour &#xE9;valuer le r&#xF4;le des deux ligands pour CD28, B7.1 et B7.2, l&#x26;#39;IL-10 souris KO ont &#xE9;t&#xE9; trait&#xE9;s avec alphaIL-12, plus ou alphaB7.1 alphaB7.2 ou la combinaison de tous les trois anticorps. Ces &#xE9;tudes ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que le blocage de deux mol&#xE9;cules B7 est requis pour la production a diminu&#xE9; d&#x26;#39;IFN-gamma et la survie des souris infect&#xE9;es par KO IL-10, ce qui sugg&#xE8;re que B7.1 et B7.2 peut contribuer &#xE0; la meurtri&#xE8;re de choc comme la r&#xE9;action de l&#x26;#39;IL-10 les souris KO. En revanche, la neutralisation de l&#x26;#39;IL-12 et le blocus du ligand CD40/CD40 (CD40L) l&#x26;#39;interaction in vivo n&#x26;#39;a pas modifi&#xE9; la production d&#x26;#39;IFN-gamma et seulement abouti &#xE0; un petit retard dans le temps &#xE0; la mort des souris. Ensemble, ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;interaction CD28/B7 a un r&#xF4;le central dans le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;une pathologique r&#xE9;ponse des lymphocytes T chez la souris IL-10 KO, qui est distinct du r&#xF4;le de l&#x26;#39;CD40/CD40L et d&#x26;#39;IL-12 voies.

Contribution de l&#x26;#39;interleukine-12 (IL-12) et les Chemins de ligands CD28/B7 et CD40/CD40 &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;laboration d&#x26;#39;une pathologique r&#xE9;ponse des cellules T de l&#x26;#39;IL-10-souris d&#xE9;ficientes

Beitrag von Interleukin-12 (IL-12) und den CD28/B7 und CD40/CD40 Liganden-Weg zur Entwicklung eines pathologischen T-Zell-Antwort in IL-10-defizienten M&#xE4;usen.

La capacit&agrave; di interleuchina-10 (IL-10) per sopprimere le funzioni della cellula accessori necessarie per l&#39;attivazione delle cellule T ottimale lo rende un importante inibitore di immunit&agrave; cellulo-mediata. Cos&igrave;, dopo l&#39;infezione con il protozoo Toxoplasma gondii, IL-10 topi knockout (KO) sviluppano un CD4 (+)-T-cellula-dipendente shock-come reazione con alti livelli di IL-12 e gamma interferone (IFN-gamma) nel siero, che porta alla morte dei topi durante la fase acuta dell&#39;infezione. Precedenti studi da questo laboratorio hanno mostrato che simultanei blocco di CD28 e CD40 pu&ograve; prevenire questa reazione letale inibendo la produzione di IFN-gamma. Tuttavia, il blocco di costimulation non ha interessato i livelli sistemici di IL-12. Per meglio comprendere il rapporto tra IL 12 e i CD28 e CD40 percorsi nella mediazione della iperattivit&agrave; immunitaria, antagonisti di questi fattori sono stati utilizzati per determinare i loro effetti sullo sviluppo di una risposta delle cellule T patologico nei topi IL-10 KO. Blocco di IL-12 o l&#39;interazione CD28/B7 da solo non influisce sulla sopravvivenza; Tuttavia, il blocco combinato di entrambi percorsi portato a diminuita produzione di IFN-gamma e la sopravvivenza di topi IL-10 KO. Per valutare il ruolo dei due ligandi per CD28, segnale e costimolo, IL-10 KO topi sono stati trattati con alphaIL-12 plus alphaB7.1 o alphaB7.2 o la combinazione di tutti e tre gli anticorpi. Questi studi hanno rivelato che blocco di entrambi molecole B7 &egrave; richiesto per la diminuita produzione di IFN-gamma e la sopravvivenza dei topi infetti KO IL-10, suggerendo che segnale costimolo possano contribuire alla reazione simil-shock letale nei topi IL-10 KO. Al contrario, neutralizzazione di IL-12 e blocco dell&#39;interazione CD40/CD40 ligand (CD40L) in vivo non alterava la produzione di IFN-gamma e solo portato a un piccolo ritardo nel tempo di morte dei topi. Insieme, questi dati suggeriscono che l&#39;interazione CD28/B7 ha un ruolo centrale nello sviluppo di una risposta delle cellule T patologico nei topi IL-10 KO, che &egrave; distinto dal ruolo delle vie CD40/CD40L e IL-12.

Contributo di interleukin-12 (IL-12) e le vie di CD28/B7 e CD40/CD40 ligand per lo sviluppo di una risposta delle cellule T patologico nei topi IL-10-carenti.

&#x6700;&#x9069;&#x306A;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B5;&#x30EA;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3;10&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#xFF08;IL-10&#xFF09;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x539F;&#x866B;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x3001;IL-10&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#xFF08;KO&#xFF09;&#x3068;&#x611F;&#x67D3;&#x5F8C;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;CD4&#xFF08;+&#xFF09;-T-&#x7D30;&#x80DE;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;IL-12&#x3068;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;IFN-&#x3B3;&#xFF09;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x885D;&#x6483;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x8840;&#x6E05;&#x4E2D;&#x306E;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x671F;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6B7B;&#x306B;&#x81F3;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x304B;&#x3089;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CD28&#x3068;CD40&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x906E;&#x65AD;&#x304C;IFN-&#x3B3;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x906E;&#x65AD;&#x306F;&#x3001;IL-12&#x306E;&#x5168;&#x8EAB;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x512A;&#x308C;&#x305F;IL-12&#x3068;CD28&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x4EA2;&#x9032;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;CD40&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;IL-10 KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; IL-12&#x306E;&#x906E;&#x65AD;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;CD28/B7&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x4E21;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5408;&#x8A08;&#x5C01;&#x9396;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;IFN-&#x3B3;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;IL-10 KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#x3001;B7.1&#x3068;B7.2&#x3092;CD28&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;IL-10 KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;alphaIL-12&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;alphaB7.1&#x307E;&#x305F;&#x306F;alphaB7.2&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;B7.1&#x3068;B7.2&#x306F;&#x3001;IL-10&#x3067;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3057;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;B7&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5C01;&#x9396;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;IFN-&#x3B3;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3068;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;IL-10 KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;IL-12&#x306E;&#x4E2D;&#x548C;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x3067;CD40/CD40&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#xFF08;CD40L&#xFF09;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x906E;&#x65AD;&#x306F;&#x3001;IFN-&#x3B3;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x5909;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305A;&#x304B;&#x306A;&#x9045;&#x5EF6;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;CD28/B7&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;CD40/CD40L&#x3068;IL-12&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;IL-10 KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

IL-10&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3078;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3;12&#xFF08;IL-12&#xFF09;&#x3068;CD28/B7&#x3068;CD40/CD40&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5BC4;&#x4E0E;

&#xCD5C;&#xC801;&#xC758; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC561;&#xC138;&#xC11C;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8;-10 (IL-10)&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC140; &#xC911;&#xC7AC; &#xBA74;&#xC5ED;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBA74;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, protozoan &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; Toxoplasma gondii, &#xAC10;&#xC5FC; &#xD6C4; IL-10 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; (KO) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB294; CD4 &#xAC1C;&#xBC1C; (+)-T-&#xC138;&#xD3EC;-&#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xAE09;&#xC131; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC120;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xD608; &#xCCAD;&#xC5D0;&#xC11C; IL-12&#xC640; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; (IFN-&#xAC10;&#xB9C8;) &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC885;&#xC18D; &#xCDA9;&#xACA9; &#xAC19;&#xC740; &#xBC18;&#xC751;. &#xC774; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; CD28 cd40&#xC758; &#xBD09;&#xC1C4; IFN-&#xAC10;&#xB9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xBC18;&#xC751;&#xC774;&#xC774; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, costimulation&#xC758; &#xBD09;&#xC1C4; IL-12&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. IL-12&#xC640; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACFC;&#xC789; &#xD589;&#xB3D9; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; CD28 &#xBC0F; CD40 &#xACBD;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; IL-10 &#xCF54; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; T &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC4F0;&#xC600;&#xB2E4;. IL-12 &#xB610;&#xB294; &#xD63C;&#xC790; CD28/B7 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBD09;&#xC1C4; &#xC0DD;&#xC874;;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xB450; &#xD1B5;&#xB85C; &#xBD09;&#xC1C4; IFN-&#xAC10;&#xB9C8;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC0F; IL-10 &#xCF54; &#xC950;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC;. CD28, B7.1 &#xBC0F; B7.2&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; ligands&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xD3C9;&#xAC00;, IL-10 &#xCF54; &#xC950; alphaIL 12 alphaB7.1 &#xB610;&#xB294; alphaB7.2 &#xB610;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB458; &#xB2E4;&#xC758; &#xADF8; &#xBD09;&#xC1C4; &#xBC1D;&#xD600; b 7 &#xBD84;&#xC790;&#xB294; IFN-&#xAC10;&#xB9C8;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xACFC; B7.1 &#xBC0F; B7.2 IL-10 &#xCF54; &#xC950;&#xC5D0; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xCDA9;&#xACA9; &#xAC19;&#xC740; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xB41C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; IL-10 &#xCF54; &#xC950;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, IL-12&#xC758; &#xC911;&#xD654;&#xC640; in vivo CD40/CD40 &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; (CD40L) &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBD09;&#xC1C4; IFN-&#xAC10;&#xB9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;&#xB9CC; &#xC950;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC81C;&#xC548; CD28/B7 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; CD40/CD40L &#xBC0F; IL-12 &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xAD6C;&#xBD84;&#xC740; IL-10 &#xCF54; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; T &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC911;&#xCD94;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560; &#xC788;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8;-12 (IL-12) &#xBC0F; IL-10-&#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; T &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; CD28/B7 &#xBC0F; CD40/CD40 &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xAE30;&#xC5EC;.

La capacidad de la interleuquina-10 (IL-10) para suprimir las funciones celulares accesorios necesarios para una &#xF3;ptima activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T hace que sea un inhibidor importante de la inmunidad celular. Por lo tanto, despu&#xE9;s de la infecci&#xF3;n con el protozoo Toxoplasma gondii, la IL-10 por nocaut (KO) ratones desarrollan un recuento de CD4 (+) de las c&#xE9;lulas T dependiente de los golpes, como reacci&#xF3;n a los altos niveles de IL-12 e interfer&#xF3;n gamma (IFN-gamma) en el suero, que conduce a la muerte de los ratones durante la fase aguda de la infecci&#xF3;n. Estudios anteriores de este laboratorio han demostrado que el bloqueo simult&#xE1;neo de CD28 y CD40 puede prevenir esta reacci&#xF3;n letal mediante la inhibici&#xF3;n de la producci&#xF3;n de IFN-gamma. Sin embargo, el bloqueo de la coestimulaci&#xF3;n no afect&#xF3; los niveles sist&#xE9;micos de la IL-12. Para entender mejor la relaci&#xF3;n entre la IL-12 y CD28 y CD40 de la v&#xED;as en la mediaci&#xF3;n de la hiperactividad inmune, los antagonistas de estos factores se utilizan para determinar sus efectos sobre el desarrollo de una patol&#xF3;gica de las c&#xE9;lulas T de respuesta de la IL-10 ratones KO. El bloqueo de la IL-12 o la interacci&#xF3;n CD28/B7 por s&#xED; solo no afecta a la supervivencia, sin embargo, el bloqueo combinado de las dos v&#xED;as result&#xF3; en una menor producci&#xF3;n de IFN-gamma y la supervivencia de la IL-10 ratones KO. Para evaluar el papel de los dos ligandos para CD28, B7.1 y B7.2, IL-10 KO ratones fueron tratados con alphaIL-12, m&#xE1;s o alphaB7.1 alphaB7.2 o la combinaci&#xF3;n de los tres anticuerpos. Estos estudios revelaron que el bloqueo de ambas mol&#xE9;culas B7 se requiere para la disminuci&#xF3;n de la producci&#xF3;n de IFN-gamma y la supervivencia de infectados IL-10 KO ratones, lo que sugiere que B7.1 y B7.2 pueden contribuir a la letal similar al shock reacci&#xF3;n de la IL-10 ratones KO. En contraste, la neutralizaci&#xF3;n de IL-12 y el bloqueo del ligando CD40/CD40 (CD40L) interacci&#xF3;n in vivo no alter&#xF3; la producci&#xF3;n de IFN-gamma y s&#xF3;lo dio lugar a un peque&#xF1;o retardo en el tiempo a la muerte de los ratones. En conjunto, estos datos sugieren que la interacci&#xF3;n CD28/B7 tiene un papel central en el desarrollo de una patol&#xF3;gica de c&#xE9;lulas T en respuesta IL-10 ratones KO, que es distinta de la funci&#xF3;n de la CD40/CD40L y las v&#xED;as de IL-12.

Contribuci&#xF3;n de la interleucina-12 (IL-12) y las v&#xED;as de ligandos CD28/B7 CD40/CD40 y al desarrollo de una patol&#xF3;gica de las c&#xE9;lulas T de respuesta de la IL-10-ratones deficientes

&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x6297;&#x6027;&#x548C;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5185;&#x5B58;&#x4E2D;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-15 (IL-15) &#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x63D0;&#x51FA;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x63ED;&#x793A;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-15 &#x4E0D;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684; NK &#x6216; CD8 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x611F;&#x67D3;&#x6269;&#x5927;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; 15/&#x5C0F;&#x9F20;&#x5236;&#x5B9A;&#x957F;&#x671F;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75C5;&#x83CC;&#x3002;

&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-15-&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x53D1;&#x5C55;&#x5230;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x4FDD;&#x62A4;&#x3002;

Previous studies have suggested an important role for interleukin-15 (IL-15) in resistance to and memory for Toxoplasma gondii infection. The studies presented here reveal that IL-15 is not required for infection-induced expansion of NK or CD8+ T cells. Furthermore, IL-15-/- mice develop long-term protective immunity to this pathogen.

Interleukin-15-deficient mice develop protective immunity to Toxoplasma gondii.

Des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures ont sugg&#xE9;r&#xE9; un r&#xF4;le important pour l&#x26;#39;interleukine-15 (IL-15) dans la r&#xE9;sistance &#xE0; l&#x26;#39;infection et de la m&#xE9;moire pour Toxoplasma gondii. Les &#xE9;tudes pr&#xE9;sent&#xE9;es ici montrent que l&#x26;#39;IL-15 n&#x26;#39;est pas n&#xE9;cessaire &#xE0; l&#x26;#39;infection induite par l&#x26;#39;expansion des cellules NK ou T CD8 + de. En outre, IL-15-/ - souris d&#xE9;veloppent &#xE0; long terme une immunit&#xE9; protectrice contre ce pathog&#xE8;ne.

L&#x26;#39;interleukine-15-souris d&#xE9;ficientes en d&#xE9;velopper une immunit&#xE9; protectrice &#xE0; Toxoplasma gondii

Interleukin-15-defizienten M&#xE4;usen entwickeln sch&#xFC;tzende Immunit&#xE4;t gegen Toxoplasma gondii.

Precedenti studi hanno suggerito un ruolo importante per l&#39;interleuchina-15 (IL 15) nella resistenza e memoria per l&#39;infezione da Toxoplasma gondii. Gli studi qui presentati rivelano che IL 15 non &egrave; necessario per l&#39;espansione dell&#39;infezione-indotta delle cellule NK o CD8 + T. Inoltre, IL-15/topi sviluppano l&#39;immunit&agrave; protettiva a lungo termine di questo agente patogeno.

Interleuchina-15-deficient mice sviluppano immunit&agrave; protettiva per Toxoplasma gondii.

&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x3068;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x5185;&#x306B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3;-15&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#xFF08;IL-15&#xFF09;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;IL-15&#x306F;NK&#x307E;&#x305F;&#x306F;CD8 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5C55;&#x958B;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;IL-15-/  - &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x9632;&#x5FA1;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3;-15&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x539F;&#x866B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9632;&#x5FA1;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x958B;&#x767A;

&#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D;&#xACFC; Toxoplasma gondii &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8;-15 (15 &#xC77C;)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; IL-15 NK &#xB610;&#xB294; CD8 + T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC720;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774; 15/&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC774; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xAE30; &#xBCF4;&#xD638; &#xAE30;&#xB2A5;.

&#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8; 15 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950; Toxoplasma gondii&#xC5D0; &#xBCF4;&#xD638; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;.

Estudios anteriores han sugerido un papel importante para la interleucina-15 (IL-15) en la resistencia a la memoria y para la infecci&#xF3;n por Toxoplasma gondii. Los estudios presentados aqu&#xED; muestran que la IL-15 no es necesaria para la infecci&#xF3;n inducida por la expansi&#xF3;n de NK o c&#xE9;lulas T CD8 +. Adem&#xE1;s, la IL-15-/ - ratones desarrollan inmunidad a largo plazo de protecci&#xF3;n a este pat&#xF3;geno.

La interleucina-15-ratones deficientes desarrolle la inmunidad protectora contra el Toxoplasma gondii

&#x57FA;&#x8D28;&#x8F85;&#x52A9;&#x6FC0;&#x5149;&#x89E3;&#x5438;&#x7535;&#x79BB;/&#x98DE;&#x884C;&#x65F6;&#x95F4;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8D28;&#x8C31;&#x6280;&#x672F;&#x5206;&#x6790;&#x84DD;&#x6C0F;&#x8D3E;&#x7B2C;&#x97AD;&#x6BDB;&#x866B;&#x548C;&#x8D3E;&#x7B2C;&#x97AD;&#x6BDB;&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x3002;

Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry-based analysis of Giardia lamblia and Giardia muris.

Matrix-assisted laser desorption / ionisation Temps de vol spectrom&#xE9;trie de masse Analyse fond&#xE9;e sur des Giardia lamblia et Giardia Muris

Matrix assisted Laser Desorption/Ionisation Time-of-Flight mass Spektrometrie-basierte Analyse von Giardia Lamblia und Giardia Muris.

Matrix-assisted laser desorbimento/ionizzazione a tempo di volo massa spettrometria-based analysis of Giardia lamblia e Giardia muris.

&#x30E9;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x97AD;&#x6BDB;&#x866B;&#x3068;&#x30B8;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B8;&#x30A2;&#x30E0;&#x30EA;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x652F;&#x63F4;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8131;&#x96E2;/&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x98DB;&#x884C;&#x6642;&#x9593;&#x578B;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x5206;&#x6790;

&#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xC870; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xD0C8; &#xCC29;/&#xC774;&#xC628;&#xD654; &#xBE44;&#xD589; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; Giardia lamblia Giardia muris&#xC758;.

Matrix asistida por l&#xE1;ser de desorci&#xF3;n / ionizaci&#xF3;n tiempo de vuelo espectrometr&#xED;a de masas basado en an&#xE1;lisis de Giardia lamblia y Giardia Muris

&#x8981;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5728;&#x6CE2;&#x6258;&#x9A6C;&#x514B;&#x6CB3;&#x6D41;&#x57DF;&#x7684;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x578B;&#x5DE5;&#x5177;&#x7528;&#x6765;&#x5206;&#x6790; 64 &#x57FA;&#x6D41;&#x548C; 28 &#x98CE;&#x66B4;&#x6D41;&#x6837;&#x54C1;&#x4ECE;&#x5206;&#x6C34;&#x5CAD;&#x7684;&#x4E94;&#x4E2A;&#x5730;&#x70B9;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7F51;&#x7AD9;&#x5305;&#x62EC;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6C34;&#x5904;&#x7406;&#x5382;&#x8FDB;&#x6C34;&#x53E3;&#x3001; &#x4EE5;&#x53CA;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4ECE;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x571F;&#x5730;&#x5229;&#x7528;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x7528;&#x9014;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x57CE;&#x5E02;&#x6C61;&#x6C34;&#x3001; &#x519C;&#x4E1A; &#xFF08;&#x725B;&#xFF09; &#x5E9F;&#x6C34;&#x548C;&#x91CE;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x9020;&#x6210;&#x5BF9;&#x6C34;&#x6E90;&#x6C34;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x8D21;&#x732E;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x98CE;&#x9669;&#x3002;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B; 27 &#x57FA;&#x6D41;&#x6C34;&#x53CA; 23 &#x98CE;&#x66B4;&#x6D41;&#x52A8;&#x6C34;&#x6837;&#x672C;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x6700;&#x5E38;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x662F; C.&#x5B89;&#x6C0F;&#x9690;&#x866B; (41 &#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#xFF09;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6; 14 &#x5176;&#x4ED6;&#x7269;&#x79CD;&#x6216;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#xFF0C;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x5076;&#x5C14;&#x4F1A;&#x88AB;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x666E;&#x901A;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x9E1F;&#x7C7B;&#xFF0C;C.&#x4EBA;&#x548C; C.&#x5B62;&#x5B50;&#xFF0C;&#x672A;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;C.&#x5B89;&#x6C0F;&#x9690;&#x866B;&#x867D;&#x53D7;&#x519C;&#x4E1A;&#x5171;&#x540C;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x56DB;&#x4E2A;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5374;&#x57FA;&#x672C;&#x4E0A;&#x4E0D;&#x5B58;&#x5728;&#x73B0;&#x573A;&#x7684;&#x57CE;&#x5E02;&#x6C61;&#x6C34;&#x3002;&#x6709;&#x5F88;&#x5C11;&#x7684;&#x9633;&#x6027;&#x6837;&#x54C1;&#x6240;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x4FDD;&#x62A4;&#x673A;&#x6784;&#x65B9;&#x6CD5; 1623&#x5E74;&#x4EFB;&#x4F55;&#x7AD9;&#x70B9; &#xFF1B;&#x53EA;&#x6709; 8 90 &#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x5206;&#x6790; (9%) &#x7684;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x7531;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x8BA4;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x9633;&#x6027;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x578B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x6C34;&#x5904;&#x7406;&#x5382;&#x6E90;&#x6C34;&#x57DF;&#x4E2D;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x6765;&#x81EA;&#x65E7;&#x728A;&#x725B;&#x548C;&#x6210;&#x5E74;&#x725B;&#x548C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x6784;&#x6210;&#x5BF9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5065;&#x5EB7;&#x7684;&#x91CD;&#x5927;&#x98CE;&#x9669;&#x3002;

&#x8DDF;&#x8E2A;&#x5728;&#x6CE2;&#x6258;&#x9A6C;&#x514B;&#x6CB3;&#x6D41;&#x57DF;&#x7684;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x6E90;&#x3002;

To better characterize Cryptosporidium in the Potomac River watershed, a PCR-based genotyping tool was used to analyze 64 base flow and 28 storm flow samples from five sites in the watershed. These sites included two water treatment plant intakes, as well as three upstream sites, each associated with a different type of land use. The uses, including urban wastewater, agricultural (cattle) wastewater, and wildlife, posed different risks in terms of the potential contribution of Cryptosporidium oocysts to the source water. Cryptosporidium was detected in 27 base flow water samples and 23 storm flow water samples. The most frequently detected species was C. andersoni (detected in 41 samples), while 14 other species or genotypes, almost all wildlife associated, were occasionally detected. The two common human-pathogenic species, C. hominis and C. parvum, were not detected. Although C. andersoni was common at all four sites influenced by agriculture, it was largely absent at the urban wastewater site. There were very few positive samples as determined by Environmental Protection Agency method 1623 at any site; only 8 of 90 samples analyzed (9%) were positive for Cryptosporidium as determined by microscopy. The genotyping results suggest that many of the Cryptosporidium oocysts in the water treatment plant source waters were from old calves and adult cattle and might not pose a significant risk to human health.

Cryptosporidium source tracking in the Potomac River watershed.

Afin de mieux caract&#xE9;riser Cryptosporidium dans le bassin versant de la rivi&#xE8;re Potomac, un outil de g&#xE9;notypage bas&#xE9; sur la PCR a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e pour analyser les 64 et 28 du d&#xE9;bit de base des &#xE9;chantillons d&#x26;#39;&#xE9;coulement pluvial provenant de cinq sites dans le bassin versant. Ces sites comprennent des deux prises d&#x26;#39;eau des usines de traitement, ainsi que trois sites en amont, chacune associ&#xE9;e &#xE0; un type diff&#xE9;rent de l&#x26;#39;utilisation des terres. Les utilisations, y compris les eaux us&#xE9;es urbaines, agricoles (b&#xE9;tail) des eaux us&#xE9;es et la faune, faisant courir des risques diff&#xE9;rents en termes de la contribution potentielle des oocystes de Cryptosporidium &#xE0; l&#x26;#39;eau de source. Cryptosporidium a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9; dans 27 &#xE9;chantillons de base de flux d&#x26;#39;eau et 23 &#xE9;chantillons d&#x26;#39;&#xE9;coulement des eaux pluviales. Les esp&#xE8;ces les plus fr&#xE9;quemment d&#xE9;tect&#xE9;s &#xE9;tait C. andersoni (d&#xE9;tect&#xE9;s dans 41 &#xE9;chantillons), tandis que 14 autres esp&#xE8;ces ou g&#xE9;notypes, la quasi-totalit&#xE9; de la faune, associ&#xE9;es ont parfois &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;. Les deux communes humaine pathog&#xE8;nes esp&#xE8;ces, C. hominis et C. parvum, n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;. Bien que C. andersoni &#xE9;tait commune &#xE0; tous les quatre sites influenc&#xE9;s par l&#x26;#39;agriculture, il &#xE9;tait largement absente sur le site des eaux us&#xE9;es urbaines. Il y avait tr&#xE8;s peu d&#x26;#39;&#xE9;chantillons positifs tels que d&#xE9;termin&#xE9;s par la m&#xE9;thode de l&#x26;#39;Environmental Protection Agency 1623 &#xE0; n&#x26;#39;importe quel site; seulement 8 des 90 &#xE9;chantillons analys&#xE9;s (9%) &#xE9;taient positifs pour Cryptosporidium tel que d&#xE9;termin&#xE9; par microscopie. Les r&#xE9;sultats du g&#xE9;notypage sugg&#xE8;rent que bon nombre des oocystes de Cryptosporidium dans les eaux de traitement des sources d&#x26;#39;eau de plantes &#xE9;taient des veaux &#xE2;g&#xE9;s et les bovins adultes et pourraient ne pas constituer un risque important pour la sant&#xE9; humaine.

Suivi des sources de Cryptosporidium dans le bassin versant de la rivi&#xE8;re Potomac

Um Cryptosporidium im Einzugsgebiet Potomac Rivers besser charakterisieren zu k&ouml;nnen, wurde ein PCR-basierten Genotypisierung-Tool verwendet, um 64 Mindestdurchfluss und 28 Sturm Str&ouml;mung Proben aus f&uuml;nf Seiten des Einzugsgebietes zu analysieren. Dieser Sites enthalten zwei Wasser-Behandlung-Pflanze-Zufuhr, sowie drei vorgelagerten Standorte, jeweils eine andere Art der Landnutzung zugeordnet. Vom verwendet wird, einschlie&szlig;lich kommunales Abwasser, landwirtschaftliche (Rind) Abwasser und Wildtiere, stellte verschiedene Risiken in Bezug auf den potenziellen Beitrag von Cryptosporidium-Oozysten zum Wasser Quelle. Cryptosporidium wurde in 27 Mindestdurchfluss Wasserproben und 23 Sturm Fluss Wasserproben festgestellt. Die meisten erkannt h&auml;ufig Arten war C. Andersoni (in 41 Proben gefunden), w&auml;hrend 14 andere Arten oder Genotypen, fast alle Wildtiere im Zusammenhang, wurden gelegentlich festgestellt. Die beiden gemeinsamen menschlichen pathogenen Arten, C. Hominis und C. Parvum, wurden nicht erkannt. C. Andersoni gemeinsame an allen vier Seiten durch die Landwirtschaft gepr&auml;gt war, war es weitgehend abwesend am Standort kommunalem Abwasser. Es gab sehr wenige positive Beispiele festgelegt durch Environmental Protection Agency Methode 1623 an jeder Stelle; nur 8 von 90 Proben analysiert (9 %) waren positiv f&uuml;r Cryptosporidium durch Mikroskopie bestimmt. Die Genotypisierung-Ergebnisse legen nahe, dass viele der Cryptosporidium-Oozysten im Wasser Behandlung Pflanze Quelle Wasser aus alten K&auml;lbern und erwachsenen Rinder wurden und k&ouml;nnen kein erhebliches Risiko f&uuml;r die menschliche Gesundheit darstellen.

Cryptosporidium Quelle tracking im Einzugsgebiet Potomac Rivers.

Per meglio caratterizzare Cryptosporidium nel bacino del fiume Potomac, uno strumento basato su PCR genotyping &egrave; stato utilizzato per analizzare il flusso base 64 e campioni flusso 28 tempesta da cinque siti nel bacino del. Questi siti inclusi due assunzioni di impianto di trattamento di acqua, come pure tre siti a monte, ognuno associato ad un diverso tipo di uso del suolo. Gli usi, comprese le acque reflue urbane, acque reflue agricole (bovini) e della fauna selvatica, ha proposto diversi rischi in termini di potenziale contributo di oocisti di Cryptosporidium all&#39;acqua di fonte. Cryptosporidium &egrave; stato rilevato in campioni di acqua di flusso base 27 e 23 campioni di acqua di flusso di tempesta. La maggior parte rilevata frequentemente specie era c. andersoni (rilevati in 41 campioni), mentre altre specie di 14 o genotipi, quasi tutti gli animali selvatici associati, sono stati occasionalmente rilevati. Le due specie di patogene per l&#39;uomo comune, hominis c. e c. parvum, non sono state rilevate. Anche se c. andersoni era comuni a tutti i quattro siti influenzati dall&#39;agricoltura, &egrave; stato in gran parte assente presso il sito delle acque reflue urbane. C&#39;erano pochissimi campioni positivi come determinato dal metodo Environmental Protection Agency 1623 presso qualsiasi sito; solo 8 di 90 campioni analizzati (9%) erano positivi per Cryptosporidium come determinato da microscopia. I risultati di genotipizzazione suggeriscono che molte delle oocisti di Cryptosporidium nelle acque di sorgente di acqua trattamento impianto provenivano dalla vecchi vitelli e bovini adulti e non pu&ograve; comportare un rischio significativo per la salute umana.

Cryptosporidium fonte di rilevamento nel bacino del fiume Potomac.

&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x30DD;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C3;&#x30AF;&#x5DDD;&#x6D41;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;PCR&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6D41;&#x57DF;&#x306E;5&#x3064;&#x306E;&#x90E8;&#x4F4D;&#x304B;&#x3089;64&#x5869;&#x57FA;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x3068;28&#x306E;&#x6D2A;&#x6C34;&#x6D41;&#x91CF;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x6C34;&#x51E6;&#x7406;&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6442;&#x53D6;&#x91CF;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E0;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x571F;&#x5730;&#x5229;&#x7528;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5404;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x90FD;&#x5E02;&#x5EC3;&#x6C34;&#x3001;&#x8FB2;&#x696D;&#xFF08;&#x725B;&#xFF09;&#x5EC3;&#x6C34;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x751F;&#x7269;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7528;&#x9014;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#xB7;&#x6C34;&#x3078;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x8CA2;&#x732E;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x3092;&#x63D0;&#x8D77;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306F;27&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x6C34;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3068;23&#x306E;&#x6D2A;&#x6C34;&#x6D41;&#x91CF;&#x306E;&#x6C34;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;14&#x7A2E;&#x3084;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x751F;&#x7269;&#x304C;&#x3001;&#x6642;&#x6298;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E2D;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7A2E;&#x306F;&#x3001;C. andersoni&#xFF08;41&#x691C;&#x4F53;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#xFF09;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3064;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30D2;&#x30C8;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x7A2E;&#x3001;C. hominis&#x3068;C.parvum&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; C. andersoni&#x306F;&#x3001;&#x8FB2;&#x696D;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;4&#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x90FD;&#x5E02;&#x6392;&#x6C34;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x4E3B;&#x306B;&#x6B20;&#x5E2D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x74B0;&#x5883;&#x4FDD;&#x8B77;&#x5E81;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;1623&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5C11;&#x6570;&#x306E;&#x967D;&#x6027;&#x691C;&#x4F53;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;8 90&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#xFF08;9&#xFF05;&#xFF09;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x967D;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x6C34;&#x51E6;&#x7406;&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x6C34;&#x4E2D;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x53E4;&#x3044;&#x5B50;&#x725B;&#x3068;&#x6210;&#x725B;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5065;&#x5EB7;&#x3078;&#x306E;&#x91CD;&#x5927;&#x306A;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3055;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

&#x30DD;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C3;&#x30AF;&#x5DDD;&#x6D41;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x8FFD;&#x8DE1;

&#xB354; &#xC6C0;&#xC744; &#xD3EC;&#xD1A0;&#xB9E5; &#xAC15; &#xC720;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;, &#xC720;&#xC804;&#xD615; PCR&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; &#xB3C4;&#xAD6C; 64 &#xAE30;&#xBCF8; &#xD750;&#xB984; &#xBC0F; &#xC720;&#xC5ED;&#xC5D0; 5 &#xAC1C;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; 28 &#xD3ED;&#xD48D; &#xD750;&#xB984; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD3EC;&#xD568; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xBCF8;&#xAC00; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xBB3C; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC12D;&#xCDE8;, &#xAC01; &#xD1A0;&#xC9C0; &#xC774;&#xC6A9;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC885;&#xB958;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;. &#xB3C4;&#xC2DC; &#xD3D0;&#xC218;, &#xB18D;&#xC5C5; (&#xAC00;&#xCD95;) &#xD3D0;&#xC218;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC57C;&#xC0DD; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC18C;&#xC2A4; &#xBB3C; &#xC6C0; oocysts&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xC5EC; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC704;&#xD5D8;&#xC744; &#xC81C;&#xAE30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6C0;&#xC740; 27 &#xAE30;&#xBCF8; &#xD750;&#xB984; &#xBB3C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBC0F; 23 &#xD3ED;&#xD48D; &#xD750;&#xB984; &#xBB3C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC00;&#xC7A5; &#xC790;&#xC8FC; &#xC885; &#xB2E4;&#xB978; 14 &#xC885;&#xB958; (41 &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC;), C. andersoni&#xB294; &#xB610;&#xB294; genotypes, &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC57C;&#xC0DD; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xAD00;&#xB828;, &#xB54C;&#xB54C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; &#xAC10;&#xC9C0;. &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xC885;, C. hominis &#xBC0F; C. parvum &#xC778;&#xC2DD; &#xB418;&#xC9C0; &#xB410;&#xB2E4;. C. andersoni&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBAA8;&#xB4E0; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB18D;&#xC5C5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD06C;&#xAC8C; &#xACB0; &#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; &#xB3C4;&#xC2DC; &#xD3D0;&#xC218; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC0D8;&#xD50C; &#xD658;&#xACBD; &#xBCF4;&#xD638;&#xAD6D; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; 1623 &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; 90 &#xC0D8;&#xD50C; &#xBD84;&#xC11D; (9%)&#xC758; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; 8 &#xC6C0;&#xC744; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xD615; &#xACB0;&#xACFC; &#xC81C;&#xC548; &#xC6C0; oocysts &#xBB3C; &#xCC98;&#xB9AC; &#xACF5;&#xC7A5; &#xC18C;&#xC2A4; &#xBC14;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; &#xC1A1;&#xC544;&#xC9C0;&#xC640; &#xC131;&#xC778; &#xAC00;&#xCD95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC74;&#xAC15;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC704;&#xD5D8;&#xC744; &#xC57C;&#xAE30; &#xD558;&#xC9C0; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC6C0; &#xD3EC;&#xD1A0;&#xB9E5; &#xAC15; &#xC720;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xC801; &#xC18C;&#xC2A4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Para caracterizar mejor el Cryptosporidium en la cuenca del r&#xED;o Potomac, una herramienta de genotipado basado en la PCR se utiliz&#xF3; para analizar el flujo de base y 64 de 28 muestras de flujo de tormenta de cinco sitios en la cuenca. Estos sitios incluyen dos tomas de agua de la planta de tratamiento, as&#xED; como los tres sitios de aguas arriba, cada uno asociado a un tipo diferente de uso de la tierra. Los usos, incluyendo las aguas residuales urbanas, agr&#xED;colas (ganado) de las aguas residuales, y la vida silvestre, que plantea riesgos diferentes en t&#xE9;rminos de la contribuci&#xF3;n potencial de los ooquistes de Cryptosporidium en el agua de la fuente. Cryptosporidium se detect&#xF3; en 27 muestras de agua de flujo base y 23 muestras de flujo de aguas pluviales. Las especies m&#xE1;s frecuentemente detectados fue C. andersoni (detectado en 41 muestras), mientras que 14 otras especies o genotipos, casi todos asociados a la fauna, se han detectado ocasionalmente. Los dos pat&#xF3;genos comunes humana de la misma especie, C. hominis y C. parvum, no fueron detectados. Aunque C. andersoni era com&#xFA;n en los cuatro sitios de la influencia de la agricultura, que era en gran medida ausente en el lugar de las aguas residuales urbanas. Hubo muy pocas muestras positivas seg&#xFA;n lo determinado por el m&#xE9;todo de la Agencia de Protecci&#xF3;n Ambiental de 1623 en cualquier sitio, s&#xF3;lo 8 de 90 muestras analizadas (9%) fueron positivas para Cryptosporidium determinada por microscop&#xED;a. Los resultados de genotipado sugieren que muchos de los ooquistes de Cryptosporidium en las aguas de la planta de tratamiento de aguas de origen eran de terneras y vacas adultas y puede que no plantean un riesgo significativo para la salud humana.

Rastreo de Cryptosporidium en la cuenca del r&#xED;o Potomac

&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6C34;&#x6027;&#x539F;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x53EF;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E25;&#x91CD;&#x8179;&#x6CFB;&#x548C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x4E2D;&#x514D;&#x75AB;&#x529B;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7528;&#x6765;&#x76D1;&#x89C6;&#x7684;&#x6C34;&#x4E2D;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x662F; 1622&#x5E74;&#x548C; 1623&#x5E74;&#x57FA;&#x4E8E;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x7F8E;&#x56FD;&#x73AF;&#x4FDD;&#x5C40;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6E90;&#x6C34;&#x57DF;&#xFF0C;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x7684;&#x603B;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x786E;&#x5B9A;&#x5375;&#x56CA;&#x6D3B;&#x529B;&#x6216;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x4E19;&#x952D; monoazide (PMA) &#x5DF2;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x4E0E;&#x5206;&#x5B50;&#x8BCA;&#x65AD;&#x5DE5;&#x5177;&#x4E00;&#x8D77;&#x786E;&#x5B9A;&#x7269;&#x79CD;&#x548C;&#x8BC4;&#x4F30;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B; PMA-&#xFF08;CryptoPMA-PCR&#xFF09; pcr&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; PMA &#x6CBB;&#x7597; PCR &#x5206;&#x6790;&#x524D;&#x7684;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62;&#x4ECE;&#x6B7B;&#x866B;&#x5375;&#x7684; DNA &#x6269;&#x589E;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; PMA &#x7A7F;&#x900F;&#x5176; DNA &#x53EA;&#x6B7B;&#x866B;&#x5375;&#x548C;&#x5757;&#x6269;&#x589E;&#x3002;CryptoPMA pcr &#x8FD8;&#x5177;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6D3B;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x5185;&#x7684;&#x6D3B;&#x7684;&#x548C;&#x6B7B;&#x7684;&#x866B;&#x5375;&#x7684;&#x6DF7;&#x5408;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002;&#x66F4;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6D3B;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x662F;&#x6B7B;&#x7684;&#x866B;&#x5375;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x539F;&#x6599;&#x5E9F;&#x7269;&#x6216;&#x8868;&#x9762;&#x6C34;&#x63BA;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x3002;&#x6B64;&#x6982;&#x5FF5;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7814;&#x7A76;&#x662F;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x8BC1;&#x660E; PMA &#x7528;&#x4E8E;&#x9884;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x6CBB;&#x7597;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x3002;CryptoPMA pcr &#x662F;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x6765;&#x5177;&#x4F53;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x53EF;&#x884C;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C34;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5F88;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4EBA;&#x4F53;&#x5065;&#x5EB7;&#x98CE;&#x9669;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;

&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x4E19;&#x952D; monoazide PCR&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x578B;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x3002;

Cryptosporidium is an important waterborne protozoan parasite that can cause severe diarrhea and death in the immunocompromised. The current methods used to monitor for Cryptosporidium oocysts in water are the microscopy-based USEPA methods 1622 and 1623. These methods assess total levels of oocysts in source waters, but do not determine oocyst viability or genotype. Recently, propidium monoazide (PMA) has been used in conjunction with molecular diagnostic tools to identify species and assess the viability of bacteria. The goal of this study was the development of a Cryptosporidium PMA-PCR (CryptoPMA-PCR) assay that includes PMA treatment prior to PCR analysis in order to prevent the amplification of DNA from dead oocysts. The results demonstrated that PMA penetrates only dead oocysts and blocks amplification of their DNA. The CryptoPMA-PCR assay can also specifically detect live oocysts within a mixed population of live and dead oocysts. More importantly, live oocysts, not dead oocysts, were detected in raw waste or surface water samples spiked with Cryptosporidium oocysts. This proof-of-concept study is the first to demonstrate the use of PMA for pre-PCR treatment of Cryptosporidium oocysts. The CryptoPMA-PCR assay is an attractive approach to specifically detect and genotype viable Cryptosporidium oocysts in the water, which is critical for human health risk assessment.

Cryptosporidium propidium monoazide-PCR, a molecular biology-based technique for genotyping of viable Cryptosporidium oocysts.

Cryptosporidium est un parasite protozoaire importante voie d&#x26;#39;eau qui peuvent causer une diarrh&#xE9;e grave et la mort chez les sujets immunod&#xE9;prim&#xE9;s. Les m&#xE9;thodes actuelles utilis&#xE9;es pour surveiller les oocystes de Cryptosporidium dans l&#x26;#39;eau sont les m&#xE9;thodes bas&#xE9;es sur la microscopie EPA 1622 et 1623. Ces m&#xE9;thodes d&#x26;#39;&#xE9;valuer les niveaux totaux d&#x26;#39;oocystes dans les eaux de source, mais ne d&#xE9;terminent pas la viabilit&#xE9; des oocystes ou g&#xE9;notype. R&#xE9;cemment, propidium monoazoture (PMA) a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; en conjonction avec des outils de diagnostic mol&#xE9;culaire pour identifier les esp&#xE8;ces et d&#x26;#39;&#xE9;valuer la viabilit&#xE9; des bact&#xE9;ries. L&#x26;#39;objectif de cette &#xE9;tude &#xE9;tait le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un Cryptosporidium PMA-PCR (CryptoPMA-PCR) qui comprend le traitement PMA avant l&#x26;#39;analyse par PCR, afin d&#x26;#39;&#xE9;viter l&#x26;#39;amplification de l&#x26;#39;ADN &#xE0; partir des oocystes morts. Les r&#xE9;sultats ont d&#xE9;montr&#xE9; que la PMA ne p&#xE9;n&#xE8;tre que les oocystes de morts et d&#x26;#39;amplification des blocs de leur ADN. Le dosage CryptoPMA-PCR peut &#xE9;galement d&#xE9;tecter sp&#xE9;cifiquement oocystes vivants au sein d&#x26;#39;une population mixte d&#x26;#39;oocystes vivants et morts. Plus important encore, les oocystes vivants, des oocystes pas morts, ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s dans des d&#xE9;chets crus ou les &#xE9;chantillons d&#x26;#39;eau de surface enrichis avec des oocystes de Cryptosporidium. Cette &#xE9;tude de preuve de concept est la premi&#xE8;re &#xE0; d&#xE9;montrer l&#x26;#39;utilisation des PMA pour la pr&#xE9;-PCR de traitement des oocystes de Cryptosporidium. Le dosage CryptoPMA-PCR est une approche int&#xE9;ressante pour d&#xE9;tecter sp&#xE9;cifiquement et les oocystes de Cryptosporidium g&#xE9;notype viables dans l&#x26;#39;eau, ce qui est essentiel pour l&#x26;#39;&#xE9;valuation des risques pour la sant&#xE9; humaine.

Cryptosporidium propidium monoazoture-PCR, une biologie mol&#xE9;culaire bas&#xE9;e sur la technique pour le g&#xE9;notypage des oocystes de Cryptosporidium viables

Cryptosporidium ist eine wichtige Wasserwege-Protozoen-Parasit, der heftigen Durchfall und Tod in der immungeschw&auml;chten verursachen kann. Die aktuellen Methoden zur &Uuml;berwachung der Cryptosporidium-Oozysten im Wasser sind die Mikroskopie-basierte USEPA-Methoden 1622 und 1623. Diese Methoden insgesamt Ebenen von Oozysten im Quellcode Gew&auml;sser zu beurteilen, aber bestimmen nicht Oozyste Lebensf&auml;higkeit oder Genotypus. Vor kurzem wurde Propidium Monoazide (PMA) verwendet in Verbindung mit Molekulare Diagnose-Tools Arten zu identifizieren und bewerten die Lebensf&auml;higkeit der Bakterien. Das Ziel dieser Studie war die Entwicklung einer Cryptosporidium PMA-PCR (CryptoPMA-PCR)-Assay, der PMA-Behandlung vor der PCR-Analyse umfasst, um die Verst&auml;rkung von DNA von Toten Oozysten verhindern. Die Ergebnisse zeigten, dass PMA nur Tote Oozysten und Bl&ouml;cke Verst&auml;rkung von DNA dringt. Der CryptoPMA-PCR-Assay kann auch speziell live Oozysten innerhalb einer gemischten Population von lebenden und Toten-Oozysten erkennen. Noch wichtiger ist, Leben Oozysten, nicht tot Oozysten, gefunden in roher Verschwendung oder Oberfl&auml;che Wasser Proben gespickt mit Cryptosporidium-Oozysten. Diese Proof-of-Concept-Studie ist die erste, die Verwendung von PMA f&uuml;r Pre-PCR Behandlung von Cryptosporidium-Oozysten demonstrieren. Der CryptoPMA-PCR-Assay ist ein attraktives Konzept, speziell zu erkennen und Genotyp lebensf&auml;higen Cryptosporidium-Oozysten im Wasser, das f&uuml;r menschliche Gesundheit-Risikobewertung von entscheidender Bedeutung ist.

Cryptosporidium Propidium Monoazide-PCR, ein Molekularbiologie-basierte Verfahren zur Genotypisierung von lebensf&auml;higen Cryptosporidium-Oozysten.

Cryptosporidium &egrave; un importante a base acquosa protozoo parassita che pu&ograve; provocare diarrea grave e morte nei pazienti immunocompromessi. Gli attuali metodi utilizzati per monitorare le oocisti di Cryptosporidium in acqua sono i metodi USEPA basati su microscopia 1622 e 1623. Questi metodi valutare livelli totali di oocisti nelle acque di fonte, ma non determinano vitalit&agrave; oocisti o genotipo. Recentemente, propidium monoazide (PMA) &egrave; stato usato in combinazione con strumenti di diagnostica molecolari per identificare la specie e valutare la vitalit&agrave; dei batteri. L&#39;obiettivo di questo studio &egrave; stato lo sviluppo di un dosaggio di Cryptosporidium PMA-PCR (CryptoPMA-PCR) che include il trattamento di PMA prima analisi PCR al fine di evitare l&#39;amplificazione del DNA da oocisti morte. I risultati hanno dimostrato che la PMA penetra solo morto oocisti e blocchi di amplificazione del loro DNA. Il dosaggio di CryptoPMA-PCR &egrave; in grado di rilevare anche specificamente oocisti live all&#39;interno di una popolazione mista di oocisti vivi e morte. Ancora pi&ugrave; importante, dal vivo oocisti, oocisti non morte, sono state rilevate in rifiuti crudo o superficie acqua campioni diluiti con le oocisti di Cryptosporidium. Questo studio di proof-of-concept &egrave; il primo a dimostrare l&#39;uso di PMA per il trattamento pre-PCR di oocisti di Cryptosporidium. Il dosaggio di CryptoPMA-PCR &egrave; un approccio interessante per rilevare in modo specifico e oocisti di Cryptosporidium vitali genotipo in acqua, che &egrave; fondamentale per la valutazione dei rischi di salute umana.

Cryptosporidium propidium monoazide-PCR, una tecnica di base di biologia molecolare per la genotipizzazione di oocisti di Cryptosporidium vitali.

&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x3067;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E0B;&#x75E2;&#x3084;&#x6B7B;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6C34;&#x7CFB;&#x539F;&#x866B;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6C34;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;USEPA&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;1622&#x3068;1623&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x6C34;&#x4E2D;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x5408;&#x8A08;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3084;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x308F;&#x3051;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;monoazide&#xFF08;PMA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x7A2E;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x8A3A;&#x65AD;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x200B;&#x200B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x6B7B;&#x8005;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;DNA&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;PCR&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x524D;&#x306B;PMA&#x51E6;&#x7406;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;PMA-PCR&#xFF08;CryptoPMA-PCR&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;PMA&#x3060;&#x3051;&#x6B7B;&#x3093;&#x3060;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x305D;&#x306E;DNA&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x3092;&#x8CAB;&#x901A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; CryptoPMA-PCR&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x3084;&#x6B7B;&#x3093;&#x3060;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x96C6;&#x56E3;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3001;&#x6B7B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x30B4;&#x30DF;&#x3084;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF;&#x306E;&#x5730;&#x8868;&#x6C34;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6982;&#x5FF5;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x4E8B;&#x524D;-PCR&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;PMA&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002; CryptoPMA-PCR&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x5065;&#x5EB7;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x8A55;&#x4FA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x6C34;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x306B;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;Monoazide-PCR&#x3001;&#x751F;&#x304D;&#x305F;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6280;&#x8853;

&#xC6C0;&#xC744; immunocompromised&#xC5D0; &#xC2EC;&#xD55C; &#xC124;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; waterborne protozoan &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6C0; oocysts &#xBB3C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; 1622 &#xBC0F; 1623 &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;-&#xAE30;&#xBC18; USEPA &#xBC29;&#xBC95;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; oocysts &#xC18C;&#xC2A4; &#xBC14;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; oocyst &#xC0DD;&#xC874; &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD615;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC;, propidium monoazide (PMA) &#xC218; &#xC885; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xD3C9;&#xAC00; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xBC29;&#xC9C0; &#xC8FD;&#xC740; oocysts&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xC99D;&#xD3ED; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xC804;&#xC5D0; PMA &#xCE58;&#xB8CC; &#xD3EC;&#xD568; &#xC6C0;&#xC744; PMA PCR (CryptoPMA-PCR) &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; PMA&#xC758; DNA&#xB9CC; &#xC8FD;&#xC740; oocysts &#xBC0F; &#xBE14;&#xB85D; &#xC99D;&#xD3ED; &#xCE68;&#xD22C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. CryptoPMA-PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xC640; &#xC8FD;&#xC740; oocysts&#xC758; &#xD63C;&#xD569; &#xB41C; &#xC778;&#xAD6C; &#xB0B4;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; oocysts &#xAC10;&#xC9C0; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; oocysts, &#xC544;&#xB2C8; &#xC8FD;&#xC740; oocysts &#xC6D0;&#xC2DC; &#xD3D0;&#xAE30;&#xBB3C; &#xB610;&#xB294; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC6C0; oocysts&#xB85C; &#xC544;&#xAD70;&#xC744; &#xBB3C;. &#xC774; &#xAC1C;&#xB150; &#xC99D;&#xBA85; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xBA3C;&#xC800; &#xC6C0; oocysts&#xC758; pre-PCR &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; PMA&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xAE30;. CryptoPMA-PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD615; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC6C0; oocysts &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC74;&#xAC15; &#xC704;&#xD5D8; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C;.

&#xC6C0; propidium monoazide-PCR, &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC6C0; oocysts &#xC720;&#xC804;&#xD615; &#xBD84;&#xC790; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xAE30;&#xBC18; &#xAE30;&#xC220;.

Cryptosporidium es un protozoario par&#xE1;sito importantes transmitidas por el agua que puede causar diarrea severa y la muerte en los pacientes inmunodeprimidos. Los m&#xE9;todos actuales utilizados para detectar ooquistes de Cryptosporidium en el agua son los m&#xE9;todos basados &#x200B;&#x200B;en microscop&#xED;a USEPA 1622 y 1623. Estos m&#xE9;todos de evaluar los niveles totales de ooquistes en las fuentes de agua, pero no determinar la viabilidad de los ooquistes o genotipo. Recientemente, propidio monoazide (PMA) se ha utilizado en conjunci&#xF3;n con moleculares herramientas de diagn&#xF3;stico para identificar las especies y evaluar la viabilidad de las bacterias. El objetivo de este estudio fue el desarrollo de un Cryptosporidium PMA-PCR (CryptoPMA-PCR) que incluye el tratamiento de PMA antes del an&#xE1;lisis de PCR con el fin de evitar la amplificaci&#xF3;n de ADN de ooquistes muertos. Los resultados demostraron que el PMA s&#xF3;lo penetra ooquistes muertos y amplificaci&#xF3;n de los bloques de su ADN. El ensayo CryptoPMA-PCR tambi&#xE9;n se puede detectar ooquistes en concreto en vivo dentro de una poblaci&#xF3;n mixta de oocistos vivos y muertos. M&#xE1;s importante a&#xFA;n, los ooquistes en vivo, los ooquistes no muertos, se han detectado en los residuos de crudos o las muestras de aguas superficiales enriquecidas con ooquistes de Cryptosporidium. Este estudio de prueba de concepto es el primero en demostrar el uso de los PMA para el tratamiento pre-PCR de ooquistes de Cryptosporidium. El ensayo CryptoPMA-PCR es un enfoque atractivo para la detecci&#xF3;n espec&#xED;fica y ooquistes de Cryptosporidium genotipo viables en el agua, lo cual es cr&#xED;tico para la evaluaci&#xF3;n del riesgo para la salud humana.

Cryptosporidium propidio Monoazide-PCR, uno de Biolog&#xED;a Molecular basada en la t&#xE9;cnica de tipificaci&#xF3;n gen&#xE9;tica de las viables ooquistes de Cryptosporidium

&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7ED3;&#x679C;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5B62;&#x5B50;&#x56CA;&#x751F;&#x4EA7;&#x5730;&#x585E;&#x7C73;&#x677E;&#x6291;&#x5236; CF-1 &#x548C; C57BL/6 &#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x578B;&#x53F7;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4EA7;&#x751F; 1 x 10(9) &#x603B;&#x866B;&#x5375; 20 &#x5929;&#x751F;&#x4EA7;&#x671F;&#x95F4; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709; 20 CF 1 &#x5C0F;&#x9F20;&#x5FC5;&#x987B;&#x53EF;&#x9760;&#x5730;&#x5B9E;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E00;&#x76EE;&#x6807;&#x76F8;&#x6BD4; 40 C57BL/6 &#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x9F20;&#x6807;&#x6BCF;&#x5375;&#x56CA;&#x4EA7;&#x91CF;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5C0F;&#x9F20;&#x54C1;&#x7CFB;&#x76F8;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x4F46; CF 1 &#x5C0F;&#x9F20;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7387;&#x8F83;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x9020;&#x6210;&#x51CF;&#x5C11;&#x635F;&#x5931;&#xFF0C;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7814;&#x7A76;&#x4E0E; C57BL/6 &#x5C0F;&#x9F20;&#x76F8;&#x6BD4;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x66F4;&#x9AD8;&#x6548;&#x7387;&#x548C;&#x6210;&#x672C;&#x6548;&#x76CA;&#x5730;&#x585E;&#x7C73;&#x677E;&#x6291;&#x5236;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD; C.&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5F88;&#x9AD8;&#x3002;

&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5B62;&#x5B50;&#x56CA;&#x7E41;&#x6B96;&#x4F7F;&#x7528;&#x5730;&#x585E;&#x7C73;&#x677E;&#x6291;&#x5236; CF 1 &#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;

This study evaluates Cryptosporidium parvum oocyst production in dexamethasone suppressed CF-1 and C57BL/6 mice. Both models can yield 1 x 10(9) total oocysts over a 20-day production period; however, only 20 CF-1 mice are required to reliably achieve this goal compared to 40 C57BL/6 mice. Although oocyst yields per mouse are similar for both mouse strains, the survival rate for CF-1 mice is higher, resulting in reduced lost production time per study when compared to the C57BL/6 mice. This study presents a more efficient and cost effective dexamethasone suppressed murine model of propagating high concentrations of C. parvum oocysts.

Improved Cryptosporidium parvum oocyst propagation using dexamethasone suppressed CF-1 mice.

Cette &#xE9;tude &#xE9;value la production des oocystes de Cryptosporidium parvum dans la dexam&#xE9;thasone supprim&#xE9; FC-1 et souris C57BL / 6. Les deux mod&#xE8;les peuvent donner 1 x 10 (9) oocystes totaux durant une p&#xE9;riode de production de 20 jours, mais seulement 20 souris CF-1 sont n&#xE9;cessaires pour atteindre cet objectif de fa&#xE7;on fiable par rapport &#xE0; 40 souris C57BL / 6. Bien que les rendements d&#x26;#39;oocystes par la souris sont similaires pour les deux souches de souris, le taux de survie des souris CF-1 est plus &#xE9;lev&#xE9;, r&#xE9;sultant du temps de production r&#xE9;duit perdus par l&#x26;#39;&#xE9;tude par rapport aux souris C57BL / 6. Cette &#xE9;tude pr&#xE9;sente une dexam&#xE9;thasone plus efficace et plus rentable supprim&#xE9; mod&#xE8;le murin de la propagation des concentrations &#xE9;lev&#xE9;es d&#x26;#39;oocystes de C. parvum.

Am&#xE9;lioration des oocystes de Cryptosporidium parvum propagation utilisant la dexam&#xE9;thasone Supprim&#xE9;e souris CF-1

Diese Studie wertet Cryptosporidium Parvum Oozyste Produktion Dexamethason unterdr&uuml;ckt CF-1 und C57BL/6 M&auml;usen. Beide Modelle k&ouml;nnen &uuml;ber einen Zeitraum von 20 Tagen Produktion 1 X Neubewerber Gesamt Oozysten Ertrag; nur 20 CF-1-M&auml;use sind jedoch erforderlich, um dieses Ziel im Vergleich zu 40 C57BL/6 M&auml;usen zuverl&auml;ssig zu erreichen. Obwohl Oozyste Ertr&auml;ge per Mausklick f&uuml;r beide Maus-St&auml;mme &auml;hnlich sind, die &Uuml;berlebensrate f&uuml;r CF-1 M&auml;usen h&ouml;her, was zu reduzierter Produktionszeit pro Studie im Vergleich zu den M&auml;usen C57BL/6 verloren. Diese Studie stellt ein effizienter und kosteng&uuml;nstiger Dexamethason unterdr&uuml;ckt murinen Modell zur Vermehrung hoher Konzentrationen von C. Parvum Oozysten.

Verbesserte Cryptosporidium Parvum Oozyste Vermehrung mit Dexamethason unterdr&uuml;ckt CF-1 M&auml;usen.

Questo studio valuta la produzione di oocisti Cryptosporidium parvum in topi CF-1 e C57BL/6 Desametasone soppressa. Entrambi i modelli possono produrre 1 oocisti totale arrecavano a x in un periodo di 20 giorni di produzione; Tuttavia, solo 20 topi CF-1 sono tenuti a attendibilmente raggiungere questo obiettivo rispetto ai 40 topi C57BL/6. Anche se rese oocisti per mouse sono simili per entrambi i ceppi del mouse, il tasso di sopravvivenza per topi CF-1 &egrave; superiore, con conseguente ridotta perso tempo di produzione per studio rispetto ai topi C57BL/6. Questo studio presenta un modello murino Desametasone soppresse pi&ugrave; efficiente e redditizio, di moltiplicazione delle concentrazioni elevate di oocisti di c. parvum.

Migliorata Cryptosporidium parvum propagazione oocisti utilizzando Desametasone soppressa topi CF-1.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30AD;&#x30B5;&#x30E1;&#x30BF;&#x30BE;&#x30F3;&#x3067;CF-1&#x3068;C57BL / 6&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3082;20&#x65E5;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x671F;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;1&#xD7;10&#xFF08;9&#xFF09;&#x7DCF;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x308F;&#x305A;&#x304B;20 CF-1&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x78BA;&#x5B9F;&#x306B;40 C57BL / 6&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5F53;&#x305F;&#x308A;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x5229;&#x56DE;&#x308A;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;CF-1&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306F;C57BL / 6&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3054;&#x3068;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x751F;&#x7523;&#x6642;&#x9593;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x9AD8;&#x304F;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x3067;&#x8CBB;&#x7528;&#x5BFE;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30C7;&#x30AD;&#x30B5;&#x30E1;&#x30BF;&#x30BE;&#x30F3;C.parvum&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x4F1D;&#x64AD;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C7;&#x30AD;&#x30B5;&#x30E1;&#x30BF;&#x30BE;&#x30F3;&#x6291;&#x5236;CF-1&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x6539;&#x5584;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x4F1D;&#x64AD;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC6C0;&#xC744; parvum oocyst &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC5B5;&#xC81C; dexamethasone CF 1&#xACFC; C57BL/6 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD3C9;&#xAC00;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xBAA8;&#xB378; &#xBAA8;&#xB450; 20 &#xC77C; &#xC81C;&#xC791; &#xAE30;&#xAC04;; 1 x 10(9) &#xCD1D; oocysts&#xB97C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBD88;&#xACFC; 20 CF 1 &#xC950; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; 40 C57BL/6 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;&#xC774; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB2F9; oocyst &#xC218;&#xC775;&#xB960; &#xB450; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xC885;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xBE44;&#xB85D; CF 1 &#xC950;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874; &#xC728;&#xC740; &#xB192;&#xC740;, &#xC5F0;&#xAD6C; C57BL/6 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB2F9; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC190;&#xC2E4; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xBE44;&#xC6A9; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; dexamethasone &#xC5B5;&#xC81C; murine &#xBAA8;&#xB378; &#xC81C;&#xC2DC; C. parvum oocysts&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC804;&#xD30C;.

Dexamethasone&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC6C0;&#xC744; parvum oocyst &#xC804;&#xD30C; CF 1 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Este estudio eval&#xFA;a el Cryptosporidium parvum en la producci&#xF3;n de ooquistes dexametasona suprime CF-1 y ratones C57BL / 6. Ambos modelos pueden producir 1 x 10 (9) ooquistes totales a lo largo de un per&#xED;odo de producci&#xF3;n de 20 d&#xED;as, sin embargo, s&#xF3;lo 20 ratones CF-1 son necesarios para lograr este objetivo de forma fiable en comparaci&#xF3;n con 40 ratones C57BL / 6. Aunque los rendimientos de oocistos por rat&#xF3;n son similares para ambas cepas de rat&#xF3;n, la tasa de supervivencia de ratones CF-1 es mayor, resultando en un menor tiempo de producci&#xF3;n perdido por estudio, en comparaci&#xF3;n con los ratones C57BL / 6. Este estudio presenta un dexametasona m&#xE1;s eficiente y costo suprimido modelo murino de la propagaci&#xF3;n de altas concentraciones de ooquistes de C. parvum.

Mejora de la Propagaci&#xF3;n de Cryptosporidium parvum ooquistes uso de dexametasona suprimido ratones CF-1

&#x5BBD;&#x543B;&#x6D77;&#x8C5A;&#x3001; &#x6D77;&#x8C61;&#x3001; &#x6D77;&#x736D;&#x3001; &#x5230;&#x4ECE;&#x5BC4;&#x751F;&#x539F;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x4E16;&#x754C;&#x5404;&#x5730;&#x7684;&#x6D77;&#x6D0B;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;&#x800C;&#x5F13;&#x5F62;&#x7684;&#x5730;&#x9762;&#x4F20;&#x8F93;&#x9014;&#x5F84;&#x90FD;&#x6709;&#x62A5;&#x9053;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6D77;&#x6D0B;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x6B63;&#x88AB;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x4F20;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x6D4B;&#x6D04;&#x6E38;&#x7684;&#x6EE4;&#x98DF;&#x6027;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5317;&#x90E8;&#x51E4;&#x5C3E;&#x9C7C; &#xFF08;&#x9CC0; mordax) &#x548C;&#x592A;&#x5E73;&#x6D0B;&#x6C99;&#x4E01;&#x9C7C; (Sardinops sagax)&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5F13;&#x5F62;&#x5185;&#x6D77;&#x6D0B;&#x73AF;&#x5883;&#x751F;&#x7269;&#x8F7D;&#x4F53;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x7B5B;&#x9009;&#x4ECE;&#x6D77;&#x6C34;&#x866B;&#x5375;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9C7C;&#x7C7B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FD0;&#x9001;&#x5230;&#x4E2D;&#x4E0A;&#x5C42;&#x73AF;&#x5883;&#x4ECE;&#x8FD1;&#x5CB8;&#x866B;&#x5375;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x66B4;&#x9732;&#x5317;&#x90E8;&#x51E4;&#x5C3E;&#x9C7C;&#x548C;&#x592A;&#x5E73;&#x6D0B;&#x5230; T.&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x5728;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x8D77;&#x6765;&#x7684;&#x6C99;&#x4E01;&#x9C7C;&#x3002;&#x66DD;&#x5149;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x9C7C;&#x7C7B;&#x7684;&#x6D88;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x662F;&#x6536;&#x83B7;&#x548C;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5F13;&#x5F62;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x53D7;&#x5230;&#x5C3D;&#x53EF;&#x80FD;&#x5C11;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5F13;&#x5F62; 1197&#x5E74;&#x866B;&#x5375;/L &#x6D77;&#x6C34;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x9633;&#x6027; pcr &#x7684;&#x9C7C;&#x3002;&#x603B;&#x5171;&#x6709; pcr &#x68C0;&#x6D4B;&#x5230; T.&#x866B; DNA &#x4E2D;&#x66B4;&#x9732;&#x7684;&#x9C7C;&#x7C7B;&#x7684; 66%&#xFF08;40/61&#xFF09;&#x3002;&#x5375;&#x56CA;&#x611F;&#x67D3;&#x529B;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E86;&#x9F20;&#x6807;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#xFF1A; 30%(7/23) &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x53D1;&#x8FBE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x75C5;&#x65F6;&#x5582;&#x7684;&#x9C7C;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; 100,000 &#x866B;&#x5375;/l&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x5317;&#x90E8;&#x51E4;&#x5C3E;&#x9C7C;&#x548C;&#x592A;&#x5E73;&#x6D0B;&#x6C99;&#x4E01;&#x9C7C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7B5B;&#x9009;&#x51FA;&#x5728;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x6D77;&#x6C34; T.&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x3002;&#x51E4;&#x5C3E;&#x9C7C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x866B;&#x5375;&#x575A;&#x6301;&#x81F3;&#x5C11; 8 h &#x540E;&#x7684;&#x9C7C;&#x548C;&#x6C99;&#x4E01;&#x9C7C;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x866B;&#x5375;&#x4ECD;&#x91CC;&#x9762;&#x7684;&#x9C7C;&#x6D88;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x3002;

&#x5438;&#x6536;&#x548C;&#x4F20;&#x8F93;&#x7684;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x7684;&#x6D04;&#x6E38;&#x3001; &#x6EE4;&#x98DF;&#x6027;&#x9C7C;&#x7C7B;&#x3002;

From bottlenose dolphins, to walruses, to sea otters, the parasitic protozoan Toxoplasma gondii is infecting marine mammals around the world. Whereas the terrestrial transmission pathways of T. gondii are well-described, the transmission pathway by which marine mammals are being infected is unknown. We hypothesize that migratory filter feeders, specifically northern anchovies (Engraulis mordax) and Pacific sardines (Sardinops sagax), are serving as biotic vectors for T. gondii within the marine environment. By filtering oocysts from seawater, these fishes could be transporting the oocysts from nearshore to pelagic environments. In this study, we experimentally exposed northern anchovies and Pacific sardines to T. gondii oocysts under laboratory conditions. Following exposure, the fishes' alimentary canals were harvested and assayed for the presence of T. gondii by PCR. Fish exposed to as few as 1197 oocysts/L seawater tested positive for T. gondii by PCR. In total, the PCR assay detected T. gondii DNA in 66% (40/61) of the exposed fishes. Oocyst infectivity was confirmed by mouse bioassay: 30% (7/23) of mice developed toxoplasmosis when fed fish exposed to 100,000 oocysts/L. This study demonstrates that both northern anchovies and Pacific sardines can filter T. gondii oocysts out of seawater under experimental conditions. Our experiments with anchovies demonstrated that the oocysts persisted in the fish for at least 8h post-exposure and our experiments with sardines demonstrated that the oocysts remained infectious inside the fish's alimentary canals.

Uptake and transmission of Toxoplasma gondii oocysts by migratory, filter-feeding fish.

De grands dauphins, morses &#xE0;, &#xE0; la loutre de mer, le parasite protozoaire Toxoplasma gondii est d&#x26;#39;infecter les mammif&#xE8;res marins dans le monde entier. Alors que les voies de transmission terrestres de T. gondii sont bien d&#xE9;crites, la voie de transmission par lesquels les mammif&#xE8;res marins sont infect&#xE9;es est inconnue. Nous &#xE9;mettons l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que les d&#xE9;parts migratoires filtre, anchois sp&#xE9;cifiquement nord (Engraulis mordax) et les sardines du Pacifique (Sardinops sagax), servent de vecteurs biotiques pour T. gondii dans le milieu marin. En filtrant l&#x26;#39;eau de mer oocystes, ces poissons pourraient &#xEA;tre le transport des oocystes de nearshore &#xE0; des environnements p&#xE9;lagiques. Dans cette &#xE9;tude, nous avons exp&#xE9;rimentalement expos&#xE9;s anchois et les sardines du Pacifique nord &#xE0; T. gondii oocystes dans des conditions de laboratoire. Apr&#xE8;s l&#x26;#39;exposition, les canaux alimentaires des poissons ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;colt&#xE9;es et analys&#xE9;es pour la pr&#xE9;sence de T. gondii par PCR. Les poissons expos&#xE9;s &#xE0; aussi peu que 1197 oocystes / L d&#x26;#39;eau de mer ont &#xE9;t&#xE9; test&#xE9;s positifs pour T. gondii par PCR. Au total, le test PCR d&#xE9;tect&#xE9; l&#x26;#39;ADN de T. gondii dans 66% (40/61) des poissons expos&#xE9;s. Infectiosit&#xE9; des oocystes a &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9;e par test biologique sur souris: 30% (7/23) des souris ont d&#xE9;velopp&#xE9; la toxoplasmose lorsque les poissons nourris expos&#xE9;s &#xE0; 100.000 oocystes / L. Cette &#xE9;tude d&#xE9;montre que les deux anchois et les sardines du Pacifique Nord peut filtrer T. gondii oocystes de l&#x26;#39;eau de mer dans des conditions exp&#xE9;rimentales. Nos exp&#xE9;riences avec des anchois a d&#xE9;montr&#xE9; que les oocystes ont persist&#xE9; dans le poisson pendant au moins 8h post-exposition et de nos exp&#xE9;riences avec les sardines ont d&#xE9;montr&#xE9; que les oocystes est rest&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur de tubes digestifs infectieuse du poisson.

L&#x26;#39;absorption et la transmission des oocystes de Toxoplasma gondii par migrateurs, Filtre-Alimentation des poissons

Von T&uuml;mmler, Walrosse, um Seeotter ist die Parasit&auml;re Protozoen Toxoplasma Gondii Meeress&auml;uger auf der ganzen Welt infizieren. Die terrestrische &Uuml;bertragung-Bahnen von T. Gondii beschriebenem sind, ist die &Uuml;bertragung-Pathway, die durch die Meeress&auml;uger infiziert wird, sind unbekannt. Wir vermuten, dass wandernde Filter Feeder, speziell n&ouml;rdlichen Sardellen (Engraulis Mordax) und Pacific Sardinen (Sardinops Sagax), als biotische Vektoren f&uuml;r T. Gondii in der Meeresumwelt dienen. Durch Oozysten aus Meerwasser filtern, k&ouml;nnte diese Fische die Oozysten von Nearshore pelagische Umgebungen transportieren. In dieser Studie wir versuchsweise gemachten n&ouml;rdliche Sardellen und Pacific Sardinen, T. Gondii Oozysten unter Laborbedingungen. Nach Exposition waren die Fische Alimentary Grachten geerntet und hemmende gegen das Vorhandensein von T. Gondii durch PCR. Fisch f&uuml;r so wenig wie 1197 Oozysten/L Meerwasser getestet-positiv f&uuml;r T. Gondii der PCR ausgesetzt. Insgesamt hat der PCR-Assay T. Gondii DNA bei 66 % (40/61) der exponierten Fische festgestellt. Oozyste Infektiosit&auml;t von Maus-Bioassay best&auml;tigt: 30 % (7/23) von M&auml;usen entwickelt Toxoplasmose bei 100.000 Oozysten/L. gef&uuml;ttert Fische ausgesetzt Diese Studie zeigt, dass die n&ouml;rdlichen Sardellen und Sardinen Pacific T. Gondii Oozysten aus Meerwasser unter Versuchsbedingungen filtern k&ouml;nnen. Unsere Experimente mit Sardellen gezeigt, dass die Oozysten in den Fischen f&uuml;r mindestens 8 h Expositions-beibehalten und unseren Experimenten mit Sardinen gezeigt, dass die Oozysten infekti&ouml;se innerhalb des Fisches Alimentary Kan&auml;le blieb.

Aufnahme und &Uuml;bertragung von Toxoplasma Gondii Oozysten von wandernden, Filter-F&uuml;tterung der Fische.

Da tursiopi, di trichechi, di lontre di mare, il protozoo parassita Toxoplasma gondii &egrave; infettare mammiferi marini nel mondo. Considerando che le vie di trasmissione terrestre di T. gondii sono ben definite, il percorso di trasmissione di cui sono infetti mammiferi marini &egrave; sconosciuto. Ipotizziamo che migratori filtratori, in particolare del Nord acciughe (Engraulis mordax) e Pacific sardine (Sardinops sagax), servono come vettori biotici per T. gondii all&#39;interno dell&#39;ambiente marino. Filtrando le oocisti da acqua di mare, questi pesci potevano trasportare le oocisti da nearshore agli ambienti pelagici. In questo studio, abbiamo esposto sperimentalmente acciughe settentrionale e Pacifico le sardine di oocisti di T. gondii in condizioni di laboratorio. A seguito dell&#39;esposizione, canali di alimentare i pesci sono stati raccolti e analizzati per la presenza di T. gondii mediante PCR. Pesce esposto a come pochi come oocisti 1197/L acqua di mare testato positivo per T. gondii mediante PCR. In totale, il dosaggio PCR rilevato T. gondii DNA nel 66% (40/61) dei pesci esposti. Infettivit&agrave; oocisti &egrave; stata confermata da biotest: 30% (7/23) dei topi sviluppato toxoplasmosi quando pesci nutriti esposti a 100.000 oocisti/L. Questo studio dimostra che sia nord acciughe e sardine pacifica possono filtrare oocisti di T. gondii fuori dell&#39;acqua di mare in condizioni sperimentali. Nostri esperimenti con le acciughe hanno dimostrato che le oocisti persistenti nel pesce per almeno 8 h post-esposizione e nostri esperimenti con le sarde hanno dimostrato che le oocisti &egrave; rimasto infettive all&#39;interno di canali alimentare del pesce.

Assorbimento e trasmissione di oocisti di Toxoplasma gondii dai pesci migratori, filtratori.

&#x30E9;&#x30C3;&#x30B3;&#x306B;&#x30A4;&#x30EB;&#x30AB;&#x3001;&#x30BB;&#x30A4;&#x30A6;&#x30C1;&#x306B;&#x3001;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x539F;&#x866B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x539F;&#x866B;&#x306F;&#x4E16;&#x754C;&#x4E2D;&#x306E;&#x6D77;&#x6D0B;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x5730;&#x4E0A;&#x4F1D;&#x9001;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x3088;&#x304F;&#x8AAC;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x6D77;&#x6D0B;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x304C;&#x611F;&#x67D3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x4F1D;&#x9001;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x6E21;&#x308A;&#x9CE5;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x5317;&#x90E8;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E7;&#x30D3;&#xFF08;&#x30AB;&#x30BF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30A4;&#x30EF;&#x30B7;&#x5C5E;mordax&#xFF09;&#x3001;&#x592A;&#x5E73;&#x6D0B;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#xFF08;&#x30DE;&#x30A4;&#x30EF;&#x30B7;sagax&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x6D77;&#x6D0B;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6D77;&#x6C34;&#x304B;&#x3089;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9B5A;&#x306F;&#x3001;&#x6CBF;&#x5CB8;&#x304B;&#x3089;&#x5916;&#x6D0B;&#x74B0;&#x5883;&#x3078;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x8F38;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x200B;&#x200B;&#x3067;&#x306E;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x5317;&#x90E8;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E7;&#x30D3;&#x3068;&#x592A;&#x5E73;&#x6D0B;&#x30A4;&#x30EF;&#x30B7;&#x3092;&#x9732;&#x5448;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x66B4;&#x9732;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x9B5A;&#x306E;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x306F;&#x3001;&#x63A1;&#x53D6;&#x3057;PCR&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;1197&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;/ L&#x306E;&#x6D77;&#x6C34;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9B5A;&#x306F;&#x3001;PCR&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x967D;&#x6027;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5408;&#x8A08;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PCR&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x9732;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x9B5A;&#x985E;&#x306E;66&#xFF05;&#xFF08;40/61&#xFF09;&#x306B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;DNA&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#xFF1A;&#x98FC;&#x80B2;&#x9B5A;&#x304C;100,000&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;/ L&#x306B;&#x66B4;&#x9732;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;30&#xFF05;&#xFF08;7/23&#xFF09;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x75C7;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5317;&#x90E8;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E7;&#x30D3;&#x3068;&#x592A;&#x5E73;&#x6D0B;&#x30A4;&#x30EF;&#x30B7;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x5B9F;&#x9A13;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x6D77;&#x6C34;&#x306E;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x9664;&#x5916;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E7;&#x30D3;&#x3068;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;8&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x5F8C;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x9B5A;&#x306E;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x6C34;&#x8DEF;&#x5185;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x30A4;&#x30EF;&#x30B7;&#x3068;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9B5A;&#x306B;&#x56FA;&#x57F7;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x6E21;&#x308A;&#x9CE5;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30BF;&#x6442;&#x98DF;&#x9B5A;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x6442;&#x53D6;&#x3068;&#x4F1D;&#x9001;

Bottlenose &#xB3CC;&#xACE0;&#xB798;, &#xBC14;&#xB2E4; &#xCF54;&#xB07C;&#xB9AC;, &#xBC14;&#xB2E4; &#xC218; &#xB2EC;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xAE30;&#xC0DD; protozoan Toxoplasma gondii &#xC804;&#xC138;&#xACC4; &#xD574;&#xC591; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. T. gondii&#xC758; &#xC9C0;&#xC0C1;&#xD30C; &#xC804;&#xC1A1; &#xACBD;&#xB85C; &#xC798; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xD574;&#xC591; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xB294; &#xC804;&#xC1A1; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; biotic &#xBCA1;&#xD130;&#xB85C; T. gondii &#xD574;&#xC591; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xD130;&#xC758; &#xCCA0;&#xC0C8; &#xBAA8;&#xC774; &#xD1B5;, &#xD2B9;&#xD788; &#xBD81;&#xBD80; &#xBA78; &#xCE58; (&#xBA78;&#xCE58;&#xC18D; mordax)&#xC640; &#xD0DC;&#xD3C9;&#xC591; &#xC815;&#xC5B4;&#xB9AC; (Sardinops sagax)&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;. Oocysts &#xBC14;&#xB2F7;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xC6D0;&#xC591; &#xD658;&#xACBD; &#xC778;&#xC811;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C; oocysts &#xC218;&#xC1A1; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD81;&#xBD80; &#xBA78; &#xCE58; &#xB178;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xD0DC;&#xD3C9;&#xC591; &#xC815;&#xC5B4;&#xB9AC; T. gondii oocysts &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;. &#xB178;&#xCD9C;, &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; alimentary &#xC6B4;&#xD558; &#xC218;&#xD655;&#xB97C; PCR&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; T. gondii&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; T. gondii 1197 oocysts/L &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD574; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; PCR&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB178;&#xCD9C;. &#xCD1D;, PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB178;&#xCD9C;&#xB41C; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xC758; 66% (40/61) T. gondii DNA&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Oocyst infectivity &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; bioassay&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;: 30% (7/23) &#xAC1C;&#xBC1C; toxoplasmosis &#xC950;&#xC758; &#xBA39;&#xC774; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; 100000 oocysts/L.&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB418; &#xBA74; &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xBD81;&#xBD80; &#xBA78; &#xCE58;&#xC640; &#xC815;&#xC5B4;&#xB9AC; &#xD0DC;&#xD3C9;&#xC591; T. gondii oocysts &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574; &#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xD130;&#xB9C1; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA78; &#xCE58;&#xC640; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB5A4; oocysts&#xB294; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C; 8 h post-exposure&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC815;&#xC5B4;&#xB9AC;&#xC640; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC5F0;&#xC740; oocysts &#xB0A8;&#xC544; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xC758; alimentary &#xC6B4;&#xD558; &#xC548;&#xC5D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00; &#xBC0F; &#xCCA0;&#xC0C8;, &#xD544;&#xD130; &#xBA39;&#xC774; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; Toxoplasma gondii oocysts &#xC804;&#xC1A1;.

Desde delfines nariz de botella, para las morsas, a las nutrias marinas, el par&#xE1;sito protozoo Toxoplasma gondii infecta a mam&#xED;feros marinos en todo el mundo. Considerando que las v&#xED;as terrestres de transmisi&#xF3;n de T. gondii son bien descritos, la v&#xED;a de transmisi&#xF3;n por el cual los mam&#xED;feros marinos est&#xE1;n siendo infectadas es desconocido. Nuestra hip&#xF3;tesis es que los alimentadores de filtro migratorias, las anchoas en concreto del norte (Engraulis mordax) y la sardina del Pac&#xED;fico (Sardinops sagax), sirven como vectores bi&#xF3;ticos para T. gondii en el medio marino. Al filtrar los ooquistes del agua de mar, estos peces podr&#xED;a ser el transporte de los ooquistes de cerca de la costa a los ambientes pel&#xE1;gicos. En este estudio, ratas expuestas experimentalmente las anchoas y las sardinas del Pac&#xED;fico del norte de T. gondii ooquistes en condiciones de laboratorio. Tras la exposici&#xF3;n, los canales de los peces alimenticios se cosecharon y se ensayaron para la presencia de T. gondii por PCR. Los peces expuestos a tan s&#xF3;lo 1197 ooquistes / L de agua de mar dieron positivo a T. gondii por PCR. En total, el ensayo de PCR detect&#xF3; ADN de T. gondii en el 66% (40/61) de los peces expuestos. Infectividad de ooquistes fue confirmada por bioensayo en ratones: 30% (7/23) de los ratones desarrollaron la toxoplasmosis, cuando los peces alimentados expuesto a 100.000 ooquistes / L. Este estudio demuestra que tanto las anchoas y las sardinas del Pac&#xED;fico norte se puede filtrar de T. gondii ooquistes del agua de mar en condiciones experimentales. Nuestros experimentos con anchoas demostrado que los ooquistes persisti&#xF3; en el pescado por lo menos 8 horas despu&#xE9;s de la exposici&#xF3;n y los experimentos con sardinas demostrado que los ooquistes se mantuvo dentro de los canales alimentarios infecciosa de los peces.

La captaci&#xF3;n y transmisi&#xF3;n de ooquistes de Toxoplasma gondii por Migratorias, filtro-alimentaci&#xF3;n de los peces

&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x6709;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x6297;&#x836F;&#x6027;&#x5F88;&#x591A;&#x5316;&#x5B66;&#x6740;&#x83CC;&#x5242;&#x5395;&#x3002;&#x7528;&#x4E8E;&#x786E;&#x5B9A;&#x5375;&#x56CA;&#x611F;&#x67D3;&#x529B;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x9F20;&#x6807;&#x3001; &#x9E21;&#x548C;&#x732B;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x9EC4;&#x91D1;&#x6807;&#x51C6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B83;&#x4EEC;&#x53EA;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5375;&#x56CA;&#x6D3B;&#x529B;&#x7684;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E24;&#x79CD;&#x5907;&#x9009;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x91CF;&#x5316;&#x540E;&#x6CBB;&#x7597;&#x51E0;&#x79CD;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x6740;&#x83CC;&#x5242;&#x5395;&#x7684;&#x53EF;&#x884C; T.&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x3002;&#x9996;&#x5148;&#x662F;&#x9488;&#x5BF9; ACT1 &#x548C; SporoSAG &#x57FA;&#x56E0;&#x6765;&#x679A;&#x4E3E;&#x53EF;&#x884C; T.&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x5B9A;&#x91CF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176;&#x5B9E;&#x65F6;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94; (RT-qPCR) &#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;RT qPCR C(T) &#x503C; Wescodyne(R)&#x3001; &#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x4E59;&#x9187;&#x6216;&#x70ED;&#x5904;&#x7406;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5DEE;&#x522B;&#x4E0D;&#x5927;&#x800C;&#x672A;&#x7ECF;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x63A7;&#x4EF6;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x7528;&#x798F;&#x5C14;&#x9A6C;&#x6797;&#x6216; Clorox(R) &#x6CBB;&#x7597;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684; C(T) &#x503C; 2-log(10) &#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4F53;&#x5916;&#x7684; T.&#x866B;&#x56CA;&#x7A7A;&#x6591;&#x8BD5;&#x9A8C; &#xFF08;&#x9876;&#x90E8;&#x6D4B;&#x5B9A;)&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8861;&#x91CF;&#x5375;&#x56CA;&#x6D3B;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x7528;&#x73E0;&#x94E3;&#x524A;&#x548C;&#x80C6;&#x6C41;&#x6D88;&#x5316;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F; excysted &#x866B;&#x5B50;&#x5728;&#x5408;&#x6D41;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5355;&#x5C42;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x9178;&#x5316;&#x4E59;&#x9187;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x5B50;&#x5B62;&#x5B50;&#x6D3B;&#x529B;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x6216; Wescodyne(R) &#x6CBB;&#x7597;&#x866B;&#x5375;&#x867D;&#x7136;&#x81F3;&#x5C11; 2-log(10) &#x51CF;&#x5C11;&#x6591;&#x5757;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x7684;&#x6709;&#x4EBA;&#x6307;&#x51FA;&#x4E0E; Clorox(R) &#x6CBB;&#x7597;&#x866B;&#x5375;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x798F;&#x5C14;&#x9A6C;&#x6797;&#x6216;&#x70ED;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x5BFC;&#x81F4;&#x81F3;&#x5C11; 5-log(10) &#x51CF;&#x5C11;&#x6591;&#x5757;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x4E8E; mRNA &#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027; pcr &#x9488;&#x5BF9; ACT1 &#x6216; SporoSAG &#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5FEB;&#x901F;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x9876;&#x90E8;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8BC1;&#x660E;&#x975E;&#x5E38;&#x6709;&#x6548;&#x548C;&#x654F;&#x611F;&#x91CF;&#x5316;&#x5375;&#x56CA;&#x6D3B;&#x529B;&#x4E0E;&#x52A8;&#x7269;&#x751F;&#x7269;&#x9274;&#x5B9A;&#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x5B9A;&#x91CF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x83CC;&#x6591;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x5BF9;&#x5316;&#x5B66;&#x6740;&#x83CC;&#x5242;&#x5395;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x7684;&#x6297;&#x6027;&#x3002;

Toxoplasma gondii oocysts are highly resistant to many chemical sanitizers. Methods used to determine oocyst infectivity have relied primarily on mouse, chicken, and feline bioassays. Although considered gold standards, they only provide a qualitative assessment of oocyst viability. In this study, two alternative approaches were developed to quantitate viable T. gondii oocysts following treatment with several common sanitizers. The first is a quantitative reverse transcriptase real-time PCR (RT-qPCR) assay targeting the ACT1 and SporoSAG genes to enumerate viable T. gondii oocysts. RT-qPCR C(T) values between Wescodyne(R), acidified ethanol, or heat treated oocysts were not significantly different as compared with untreated controls. By contrast, treatment with formalin or Clorox(R) resulted in a 2-log(10) reduction in C(T) values. An in vitro T. gondii oocyst plaque assay (TOP-assay) was also developed to measure oocyst viability. This assay used a combination of bead milling and bile digestion, followed by culturing the excysted sporozoites in a confluent fibroblast cell monolayer. Results showed that no significant reduction in sporozoite viability was detected in acidified ethanol or Wescodyne(R) treated oocysts while at least a 2-log(10) reduction in plaques formed was observed with Clorox(R) treated oocysts. Moreover, formalin or heat treatment of oocysts resulted in at least a 5-log(10) reduction in plaques formed. This study demonstrates that an mRNA-based PCR viability assay targeting the ACT1 or SporoSAG genes is a relatively rapid technique compared to in vitro and in vivo assays. In addition, the TOP-assay proved very effective and sensitive at quantifying oocyst viability when compared with animal bioassays.

Using quantitative reverse transcriptase PCR and cell culture plaque assays to determine resistance of Toxoplasma gondii oocysts to chemical sanitizers.

Toxoplasma gondii oocystes sont tr&#xE8;s r&#xE9;sistants &#xE0; de nombreux produits chimiques d&#xE9;sinfectants. Les m&#xE9;thodes utilis&#xE9;es pour d&#xE9;terminer l&#x26;#39;infectiosit&#xE9; des oocystes sont appuy&#xE9;s principalement sur la souris, le poulet, et des essais biologiques f&#xE9;lins. Bien que consid&#xE9;r&#xE9; comme l&#x26;#39;&#xE9;talon-or, ils ne fournissent une &#xE9;valuation qualitative de la viabilit&#xE9; des oocystes. Dans cette &#xE9;tude, deux approches alternatives ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9;es pour quantifier viables T. gondii oocystes apr&#xE8;s le traitement avec plusieurs d&#xE9;sinfectants communs. La premi&#xE8;re est une transcriptase inverse quantitative PCR en temps r&#xE9;el (RT-qPCR) test ciblant les g&#xE8;nes RET1 et SporoSAG d&#x26;#39;&#xE9;num&#xE9;rer viables T. gondii oocystes. RT-qPCR C (T) des valeurs comprises entre Wescodyne (R), l&#x26;#39;&#xE9;thanol acidifi&#xE9;, ou de chaleur oocystes trait&#xE9;s n&#x26;#39;&#xE9;taient pas significativement diff&#xE9;rents par rapport aux t&#xE9;moins non trait&#xE9;s. En revanche, le traitement avec du formol ou Clorox (R) a entra&#xEE;n&#xE9; une 2-log (10) de r&#xE9;duction de C (T) des valeurs. Une in vitro de T. gondii dosage de plaque d&#x26;#39;oocystes (TOP-test) a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9; pour mesurer la viabilit&#xE9; des oocystes. Ce test a utilis&#xE9; une combinaison de fraisage talon et la digestion bile, suivie par la culture des sporozo&#xEF;tes excysted dans une monocouche de cellules fibroblastes confluents. Les r&#xE9;sultats ont montr&#xE9; qu&#x26;#39;aucune r&#xE9;duction significative de la viabilit&#xE9; des sporozo&#xEF;tes a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9; dans de l&#x26;#39;&#xE9;thanol acidifi&#xE9; ou Wescodyne (R) des oocystes trait&#xE9;s tout au moins une r&#xE9;duction de 2 log (10) dans les plaques form&#xE9;es a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e avec Clorox (R) des oocystes trait&#xE9;s. En outre, le traitement au formol ou la chaleur d&#x26;#39;oocystes a fait au moins une r&#xE9;duction de 5 log (10) dans les plaques form&#xE9;es. Cette &#xE9;tude d&#xE9;montre que l&#x26;#39;ARNm d&#x26;#39;un dosage bas&#xE9; sur la viabilit&#xE9; PCR ciblant les g&#xE8;nes Act1 ou SporoSAG est une technique relativement rapide par rapport &#xE0; l&#x26;#39;in vitro et in vivo. En outre, le TOP-test s&#x26;#39;est av&#xE9;r&#xE9; tr&#xE8;s efficace et sensible &#xE0; quantifier la viabilit&#xE9; des oocystes par rapport &#xE0; des essais biologiques d&#x26;#39;origine animale.

Utilisation de la transcriptase inverse quantitative des dosages PCR et culture cellulaire Plaque pour d&#xE9;terminer la r&#xE9;sistance des oocystes de Toxoplasma gondii &#xE0; d&#xE9;sinfectants chimiques

Toxoplasma Gondii Oozysten sind sehr widerstandsf&auml;hig gegen viele chemische Sanitizers. Methoden zur Bestimmung der Oozyste Infektiosit&auml;t haben in erster Linie auf Maus, Huhn und katzenartige Bioassays verlassen. Obwohl Gold Standards, bieten sie nur eine qualitative Bewertung der Oozyste Lebensf&auml;higkeit. In dieser Studie wurden zwei alternative Ans&auml;tze entwickelt, um tragf&auml;hige T. Gondii Oozysten nach Behandlung mit mehreren gemeinsamen Sanitizers Quantifizierung. Die erste ist eine quantitative Reverse Transkriptase Echtzeit-PCR (RT-qPCR) Assay gezielt die Gene ACT1 und SporoSAG um tragf&auml;hige T. Gondii Oozysten aufzulisten. RT-qPCR C(T) Werte zwischen Wescodyne(R), ges&auml;uerte Ethanol oder w&auml;rmebehandelt Oozysten waren nicht signifikant im Vergleich zu unbehandelten Kontrollen. Behandlung mit Formalin oder Clorox(R) f&uuml;hrte hingegen eine Verringerung 2-log(10) C(T) Werte. Ein in-vitro-T. Gondii Oozyste Plakette Assay (TOP-Assay) wurde auch entwickelt, um Oozyste Lebensf&auml;higkeit zu messen. Diese Probe verwendet eine Kombination aus Perlen-Fr&auml;sen und Galle Verdauung, gefolgt von der Kultivierung der Excysted Sporozoites in einem konfluierende Fibroblast Zellen Monolage. Ergebnisse zeigten, dass keine signifikante Verringerung der Sporozoite Lebensf&auml;higkeit in anges&auml;uertem &Auml;thanol festgestellt oder Wescodyne(R) behandelt Oozysten w&auml;hrend mindestens einem 2-log(10) R&uuml;ckgang der Plaketten gebildet mit Clorox(R) beobachtet wurde behandelt Oozysten. Dar&uuml;ber hinaus f&uuml;hrte Formalin oder W&auml;rmebehandlung von Oozysten in mindestens einem 5-log(10) R&uuml;ckgang der Plaketten gebildet. Diese Studie zeigt, dass eine mRNA basierende PCR Entwicklungsf&auml;higkeit-Probe ACT1 oder SporoSAG Gene targeting eine relativ rasche Technik im Vergleich zur in-vitro- und in-vivo-Tests. Dar&uuml;ber hinaus erwies sich der TOP-Assay, sehr effektiv und sensibler auf die Quantifizierung der Oozyste Rentabilit&auml;t im Vergleich zu tierischen Bioassays.

Mit quantitative Reverse-Transkriptase-PCR und Zelle-Kultur-Plaque-Proben Widerstand von Toxoplasma Gondii Oozysten zu chemischen Sanitizers zu bestimmen.

Le oocisti di Toxoplasma gondii sono altamente resistenti a molti disinfettanti chimici. Metodi utilizzati per determinare l&#39;infettivit&agrave; di oocisti hanno contato principalmente sul mouse, pollo e biotest felino. Anche se considerato il gold standard, che forniscono solo una valutazione qualitativa della redditivit&agrave; di oocisti. In questo studio, sono stati sviluppati due approcci alternativi per quantificare vitali oocisti di T. gondii dopo il trattamento con disinfettanti comuni diversi. Il primo &egrave; un transcriptase d&#39;inversione quantitativa Real-Time PCR (RT-qPCR) dosaggio targeting dei geni ACT1 e SporoSAG per enumerare vitali oocisti di T. gondii. RT-qPCR c (t) i valori tra Wescodyne(R), acidificato etanolo o trattate termicamente oocisti non erano significativamente differenti rispetto ai controlli non trattati. Al contrario, trattamento con formalina o Clorox(R) ha provocato una riduzione dei valori di c (t) 2-log(10). Un&#39;analisi in vitro T. gondii oocisti placca (TOP-saggio) &egrave; stata sviluppata anche per misurare la redditivit&agrave; di oocisti. Questo dosaggio utilizzato una combinazione di digestione fresatura e bile perlina, seguita da coltura gli sporozoiti excysted in un monostrato di cellule confluenti del fibroblasto. I risultati hanno mostrato che nessuna riduzione significativa redditivit&agrave; sporozoite &egrave; stato rilevato in etanolo acidificato o Wescodyne(R) trattati oocisti mentre &egrave; stata osservata almeno una riduzione 2-log(10) in placche formate con Clorox(R) trattati oocisti. Inoltre, formalina o trattamento termico di oocisti ha provocato almeno una riduzione 5-log(10) in placche formate. Questo studio dimostra che un mRNA-based PCR targeting dei geni ACT1 o SporoSAG &egrave; una tecnica relativamente rapida rispetto ai saggi in vitro e in vivo. Inoltre, il TOP-saggio si dimostr&ograve; molto efficace e sensibile a quantificare la redditivit&agrave; oocisti quando confrontato con analisi biologiche animali.

Utilizzando quantitativi reverse transcriptase PCR e cellula placca cultura dosaggi per determinare la resistenza delle oocisti di Toxoplasma gondii a disinfettanti chimici.

&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5264;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;&#x30CB;&#x30EF;&#x30C8;&#x30EA;&#x3001;&#x30CD;&#x30B3;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x983C;&#x3063;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x91D1;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x3060;&#x3051;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306E;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x306A;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x5217;&#x6319;&#x3059;&#x308B;ACT1&#x3068;SporoSAG&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;PCR&#xFF08;RT-QPCR&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; RT-qPCR&#x306B;C&#xFF08;T&#xFF09;Wescodyne&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x5024;&#xFF08;R&#xFF09;&#x3001;&#x9178;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x30A8;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x71B1;&#x51E6;&#x7406;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x672A;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x5BFE;&#x7167;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30DB;&#x30EB;&#x30DE;&#x30EA;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;R&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x3001;C&#xFF08;T&#xFF09;&#x5024;&#x306E;2  - &#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;10&#xFF09;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#xFF08;TOP-&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#xFF09;&#x306B;&#x3082;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5358;&#x5C64;&#x3067;&#x8131;&#x56A2;&#x3057;&#x305F;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x304C;&#x7D9A;&#x3044;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x30DF;&#x30EB;&#x3084;&#x80C6;&#x6C41;&#x3001;&#x6D88;&#x5316;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;2&#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;10&#xFF09;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;R&#xFF09;&#x51E6;&#x7406;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#x9178;&#x6027;&#x30A8;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;Wescodyne&#xFF08;R&#xFF09;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30DB;&#x30EB;&#x30DE;&#x30EA;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x71B1;&#x51E6;&#x7406;&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;5&#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;10&#xFF09;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;ACT1&#x307E;&#x305F;&#x306F;SporoSAG&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;mRNA&#x306E;PCR&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;TOP-&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x304B;&#x3064;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5316;&#x5B66;&#x6D88;&#x6BD2;&#x306B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;PCR&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;

Toxoplasma gondii oocysts&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xD654;&#xD559; &#xC18C;&#xB3C5; &#xC81C;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xD558;&#xB2E4;. Oocyst infectivity &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, &#xB2ED;, &#xACE0;&#xC591;&#xC774; bioassays&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACE8;&#xB4DC; &#xD45C;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB2E8;&#xC9C0; oocyst &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xC9C8;&#xC801; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB300;&#xCCB4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC81C;&#xC640; &#xCE58;&#xB8CC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; T. gondii oocysts quantitate&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC5F4;&#xAC70; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; T. gondii oocysts ACT1 &#xBC0F; SporoSAG &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xB7C9; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR (RT qPCR) &#xC2DC;&#xD5D8; &#xC774;&#xB2E4;. RT qPCR C(T) &#xAC12;&#xC774; Wescodyne(R), acidified &#xC5D0;&#xD0C4;&#xC62C; &#xB610;&#xB294; &#xC5F4; &#xCC98;&#xB9AC; oocysts &#xC0AC;&#xC774; &#xCE58;&#xB8CC; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xD3EC; &#xB974; &#xB9D0;&#xB9B0; &#xB610;&#xB294; Clorox(R) &#xCE58;&#xB8CC; C(T) &#xAC12;&#xC5D0; 2-log(10) &#xAC10;&#xC18C; &#xACB0;&#xACFC;. &#xCCB4; &#xC678; T. gondii oocyst &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xC2DC;&#xD5D8; (&#xC704;&#xCABD;-&#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;) &#xB610;&#xD55C; oocyst &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; confluent fibroblast &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xCE35;&#xC5D0; excysted sporozoites &#xBC30;&#xC591; &#xC774;&#xC5B4;&#xC11C; &#xBE44;&#xB4DC; &#xBC00;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xB2F4; &#xC999; &#xC18C;&#xD654;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4; acidified &#xC5D0;&#xD0C4;&#xC62C; sporozoite &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB294; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB610;&#xB294; Wescodyne(R) &#xCE58;&#xB8CC; oocysts &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 2-log(10) &#xAC10;&#xC18C; clorox(r)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; oocysts &#xCDE8;&#xAE09;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD3EC; &#xB974; &#xB9D0;&#xB9B0; &#xB610;&#xB294; &#xC5F4; &#xCC98;&#xB9AC; oocysts &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 5-log(10) &#xAC10;&#xC18C; &#xACB0;&#xACFC;. &#xC774; &#xD559;&#xBB38;&#xC740; &#xC124;&#xBA85; &#xD55C;&#xB2E4; mRNA &#xAE30;&#xBC18; PCR &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xBD84;&#xC11D; ACT1 &#xB610;&#xB294; SporoSAG &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE60;&#xB978; &#xAE30;&#xC220; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC704; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xB3D9;&#xBB3C; bioassays&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; oocyst &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC785;&#xC99D; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xD654;&#xD559; &#xC18C;&#xB3C5; &#xC81C;&#xC5D0; Toxoplasma gondii oocysts&#xC758; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC815;&#xB7C9; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; PCR &#xBC0F; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xD328;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;.

Ooquistes de Toxoplasma gondii son altamente resistentes a muchos desinfectantes qu&#xED;micos. Los m&#xE9;todos utilizados para determinar la infectividad de ooquistes se han basado principalmente en el rat&#xF3;n, el pollo, y bioensayos de felinos. Aunque se consideran las normas de oro, que s&#xF3;lo proporcionan una evaluaci&#xF3;n cualitativa de la viabilidad de los ooquistes. En este estudio, dos enfoques alternativos se han desarrollado para cuantificar viables de T. gondii ooquistes despu&#xE9;s del tratamiento con varios desinfectantes comunes. La primera es una transcriptasa inversa cuantitativa en tiempo real PCR (RT-PCR cuantitativa) de ensayo dirigido a los genes ACT1 y SporoSAG para enumerar viables de T. gondii ooquistes. RT-qPCR C (T) valores entre Wescodyne (R), etanol acidificado, o calor oocistos tratados no fueron significativamente diferentes en comparaci&#xF3;n con los controles no tratados. Por el contrario, el tratamiento con formalina o Clorox (R) result&#xF3; en un 2-log (10) reducci&#xF3;n en C (T) valores. Una in vitro de T. gondii ensayo de placa de ooquistes (TOP-ensayo) tambi&#xE9;n fue desarrollado para medir la viabilidad de los ooquistes. Este ensayo utiliza una combinaci&#xF3;n de molienda con perlas y la digesti&#xF3;n biliar, seguido por cultivo de los esporozoitos excysted en una monocapa de c&#xE9;lulas de fibroblastos confluente. Los resultados mostraron que ninguna reducci&#xF3;n significativa en la viabilidad esporozoito se detect&#xF3; en etanol acidificado o Wescodyne (R) oocistos tratados mientras que al menos una reducci&#xF3;n de 2-log (10) en las placas formadas se observ&#xF3; con Clorox (R) oocistos tratados. Adem&#xE1;s, el tratamiento con formalina o calor de ooquistes result&#xF3; en al menos una reducci&#xF3;n de 5-log (10) en placas formadas. Este estudio demuestra que un ensayo basado en la PCR ARNm viabilidad orientaci&#xF3;n de los genes ACT1 o SporoSAG es una t&#xE9;cnica relativamente r&#xE1;pida en comparaci&#xF3;n con in vitro y en ensayos in vivo. Adem&#xE1;s, el TOP-ensayo demostrado ser muy eficaz y sensible a la cuantificaci&#xF3;n de la viabilidad de ooquistes cuando se compara con los bioensayos animales.

Uso de la transcriptasa reversa cuantitativa de PCR y ensayos en cultivos celulares de placa para determinar la resistencia de los ooquistes de Toxoplasma gondii a los desinfectantes qu&#xED;micos

&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x5BF9;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x7167;&#x5C04;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x5C1A;&#x672A;&#x5B8C;&#x5168;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7528;&#x4E8E;&#x6C34;&#x6D88;&#x6BD2;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x4E09;&#x79CD;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x7167;&#x5C04;&#x866B;&#x5375;&#xFF1A; SCID &#x5C0F;&#x9F20;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3001; &#x4F53;&#x5916; T.&#x866B;&#x56CA;&#x6591; &#xFF08;&#x9876;&#x90E8;&#xFF09; &#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94; (RT-qPCR&#xFF09; &#x5B9E;&#x65F6;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x4ECE;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; 1 &#x548C; 3-log(10) &#x7684;&#x706D;&#x6D3B;&#x5206;&#x522B;&#x53D6;&#x5F97; 4 mJ/cm(2) UV&#x3001; 10 mJ/cm(2) &#x4F4E;&#x538B; UV&#x3001;&#x3002;&#x9876;&#x90E8;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; RT qPCR &#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4E0E;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7ED3;&#x679C;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;T.&#x866B;&#x866B;&#x5375; 3-log(10) &#x706D;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7; 10-mJ/cm(2) &#x4F4E;&#x538B;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x9876;&#x90E8;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x662F;&#x6709;&#x5E0C;&#x671B;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x9F20;&#x6807;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;

&#x786E;&#x5B9A;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x706D;&#x6D3B;&#x7684;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x3002;

The effect of UV exposure on Toxoplasma gondii oocysts has not been completely defined for use in water disinfection. This study evaluated UV-irradiated oocysts by three assays: a SCID mouse bioassay, an in vitro T. gondii oocyst plaque (TOP) assay, and a quantitative reverse transcriptase real-time PCR (RT-qPCR) assay. The results from the animal bioassay show that 1- and 3-log(10) inactivation is achieved with 4 mJ/cm(2) UV and 10 mJ/cm(2) low-pressure UV, respectively. TOP assay results, but not RT-qPCR results, correlate well with bioassay results. In conclusion, a 3-log(10) inactivation of T. gondii oocysts is achieved by 10-mJ/cm(2) low-pressure UV, and the in vitro TOP assay is a promising alternative to the mouse bioassay.

Determining UV inactivation of Toxoplasma gondii oocysts by using cell culture and a mouse bioassay.

L&#x26;#39;effet de l&#x26;#39;exposition aux UV sur les oocystes de Toxoplasma gondii n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; compl&#xE8;tement d&#xE9;fini pour une utilisation dans la d&#xE9;sinfection de l&#x26;#39;eau. Cette &#xE9;tude a &#xE9;valu&#xE9; UV-irradi&#xE9;s oocystes par trois essais: un essai biologique sur souris SCID, un essai in vitro T. gondii oocystes plaque (TOP) test, et une transcriptase inverse quantitative PCR en temps r&#xE9;el (RT-qPCR) dosage. Les r&#xE9;sultats de l&#x26;#39;exp&#xE9;rimentation animale montrent que 1 - et 3-log (10) l&#x26;#39;inactivation est r&#xE9;alis&#xE9;e avec 4 mJ / cm (2) UV et 10 mJ / cm (2) &#xE0; basse pression UV, respectivement. Les r&#xE9;sultats d&#x26;#39;analyse TOP, mais pas de RT-qPCR r&#xE9;sultats, une bonne corr&#xE9;lation avec les r&#xE9;sultats des essais biologiques. En conclusion, un 3-log (10) l&#x26;#39;inactivation des oocystes de T. gondii est r&#xE9;alis&#xE9; par 10-mJ/cm (2) &#xE0; basse pression UV, et le dosage in vitro TOP est une alternative prometteuse &#xE0; l&#x26;#39;essai biologique sur souris.

D&#xE9;terminer l&#x26;#39;inactivation des oocystes UV Toxoplasma gondii par culture cellulaire et d&#x26;#39;un essai biologique sur souris

Die Wirkung der UV-Exposition auf Toxoplasma Gondii Oozysten wurde f&uuml;r den Einsatz im Wasserdesinfektion nicht vollst&auml;ndig definiert. Diese Studie UV-bestrahltes Oozysten von drei Proben ausgewertet: ein SCID-Maus-Bioassay, eines in vitro T. Gondii Oozyste Plakette (oben) Tests und eine quantitative Reverse Transkriptase Echtzeit-PCR (RT-qPCR) Assay. Die Ergebnisse aus tierischen Bioassays zeigen, dass die Inaktivierung von 1- und 3-log(10) mit 4 mJ/cm(2), UV- und 10 mJ/cm(2) Niederdruck UV, bzw. erreicht wird. TOP Untersuchungsergebnisse, aber nicht RT-qPCR Ergebnisse korrelieren gut mit Bioassay Ergebnisse. Abschlie&szlig;end eine Inaktivierung der 3-log(10) von T. Gondii Oozysten erfolgt durch 10-mJ/cm(2) Niederdruck UV und der in-vitro-TOP-Assay ist eine vielversprechende Alternative zu den Maus-Bioassay.

Bestimmen mithilfe von Zellkultur und ein Maus-Bioassay UV Inaktivierung von Toxoplasma Gondii Oozysten.

L&#39;effetto dell&#39;esposizione ai raggi UV su oocisti di Toxoplasma gondii non &egrave; stato completamente definito per l&#39;uso nella disinfezione dell&#39;acqua. Questo studio ha valutato le oocisti UV-irradiati da tre saggi: un biotest SCID, un&#39;analisi in vitro T. gondii oocisti placca (in alto) e un dosaggio di transcriptase d&#39;inversione quantitativa Real-Time PCR (RT-qPCR). I risultati di analisi biologica animale mostrano che tale inattivazione 1 e 3-log(10) &egrave; raggiunto con 4 mJ/cm(2) UV e UV a bassa pressione di 10 mJ/cm(2), rispettivamente. Risultati alto dosaggio, ma non risultati RT-qPCR, correlano bene con risultati di analisi biologica. In conclusione, un&#39;inattivazione 3-log(10) di T. gondii oocisti &egrave; raggiunto da 10-mJ/cm(2) UV a bassa pressione, e l&#39;analisi in vitro TOP &egrave; una promettente alternativa per il biotest.

Determinare inattivazione UV di oocisti di Toxoplasma gondii mediante coltura cellulare e un biotest.

&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x7D2B;&#x5916;&#x7DDA;&#x200B;&#x200B;&#x66DD;&#x9732;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6C34;&#x306E;&#x6D88;&#x6BD2;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; SCID&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#xFF08;TOP&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;PCR&#xFF08;RT-QPCR&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#xFF1A;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;UV&#x7167;&#x5C04;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x305D;&#x306E;1&#x306E;&#x7D50;&#x679C; - &#x304A;&#x3088;&#x3073;3  - &#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;10&#xFF09;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;4 MJ / CM&#xFF08;2&#xFF09;UV&#x3001;10 MJ / CM&#xFF08;2&#xFF09;&#x4F4E;&#x5727;UV&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; TOP&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;RT-&#x5B9A;&#x91CF;PCR&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3088;&#x304F;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;3&#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;10&#xFF09;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;10-mJ/cm&#xFF08;2&#xFF09;&#x4F4E;&#x5727;UV&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro TOP&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x4EE3;&#x66FF;&#x624B;&#x6BB5;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;UV&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;

Toxoplasma gondii oocysts&#xC5D0; &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xB178;&#xCD9C;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5; &#xBB3C; &#xC18C;&#xB3C5;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC815;&#xC758; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; UV &#xBC18;&#xAD6C; oocysts &#xD3C9;&#xAC00;: SCID &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; bioassay, &#xCCB4; &#xC678; T. gondii oocyst &#xD328; (&#xB9E8; &#xC704;) &#xBD84;&#xC11D;, &#xBC0F; &#xC815;&#xB7C9; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR (RT qPCR) &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;. &#xB3D9;&#xBB3C; bioassay&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC; 1-&#xBC0F; 3-log(10) &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; 4 mJ/cm(2) UV&#xC640; 10 mJ/cm(2) &#xC800;&#xC555; UV&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xACE0; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xACB0;&#xACFC;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; RT qPCR &#xACB0;&#xACFC; bioassay &#xACB0;&#xACFC; &#xC798; &#xC0C1;&#xAD00;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, T. gondii oocysts&#xC758; 3-log(10) &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; 10-mJ/cm(2) &#xC800;&#xC555; UV&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCCB4; &#xC678; &#xCD5C;&#xACE0; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; bioassay&#xC5D0; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xB300;&#xC548; &#xC774;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; bioassay &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; Toxoplasma gondii oocysts&#xC758; UV &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El efecto de la exposici&#xF3;n UV en ooquistes de Toxoplasma gondii no ha sido completamente definidos para su uso en la desinfecci&#xF3;n del agua. Este estudio evalu&#xF3; la radiaci&#xF3;n UV-irradiados ooquistes por tres ensayos: un bioensayo en ratones SCID, una placa in vitro de ooquistes de T. gondii (TOP) de ensayo, y una transcriptasa inversa cuantitativa en tiempo real PCR (RT-qPCR). Los resultados de la serie de bioensayo animal que 1 - y 3-log (10) inactivaci&#xF3;n se consigue con 4 mJ / cm (2) UV y 10 mJ cm / (2) de baja presi&#xF3;n UV, respectivamente. TOP resultados del ensayo, pero no de RT-qPCR resultados, se correlacionan bien con los resultados del bioensayo. En conclusi&#xF3;n, un 3-log (10) la inactivaci&#xF3;n de T. gondii ooquistes se logra 10-mJ/cm (2) bajo la presi&#xF3;n de los rayos UV, y el ensayo TOP in vitro es una alternativa prometedora para el bioensayo en ratones.

La determinaci&#xF3;n de la inactivaci&#xF3;n UV de los ooquistes de Toxoplasma gondii mediante cultivo celular y un bioensayo en ratones

&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7CAA;&#x4FBF;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x6E90;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x6807;&#x8BB0;&#x5728;&#x6837;&#x672C;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x548C;&#x8D3E;&#x7B2C;&#x97AD;&#x6BDB;&#x866B;&#x4F7F;&#x7528;&#x7F8E;&#x56FD;&#x73AF;&#x4FDD;&#x5C40;&#x65B9;&#x6CD5; 1623&#x5E74;&#x6D53;&#x5EA6;&#x88AB;&#x4E22;&#x5F03;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x56DE;&#x6536;&#x7387;&#x4E3A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7CAA;&#x4FBF;&#x7EC6;&#x83CC;&#x662F;&#x5C16;&#x523A;&#x7684;&#x6C61;&#x6C34;&#x6837;&#x672C;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7EC4;&#x548C;&#x4E3B;&#x673A;&#x7279;&#x5B9A; pcr &#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x6C34;&#x57DF;&#x4E2D;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;Bacteroidales DNA &#x6062;&#x590D; 59 &#x81F3;&#x6E05;&#x6DB2;&#x540E;&#x6D17;&#x8131;&#x6B65;&#x9AA4;&#x6536;&#x96C6; ms 71%&#x4E0D;&#x7B49;&#x3002;&#x4EBA;&#x6743;&#x5177;&#x4F53; Bacteroidales DNA &#x4ECE;&#x5C16;&#x523A;&#x7684;&#x6C61;&#x6C34;&#x6837;&#x672C;&#x4E2D;&#x56DE;&#x6536;&#x662F;&#x5728;&#x6D17;&#x8131;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4E2D;&#x7684; 54%&#x3002;&#x989D;&#x5916;&#x7684; 1 7%Bacteroidales DNA &#x88AB;&#x5BFB;&#x56DE;&#x540E;&#x514D;&#x75AB;&#x78C1;&#x73E0;&#x5206;&#x79BB;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4ECE;&#x9897;&#x7C92;&#x6062;&#x590D;&#x79BB;&#x5F00;&#x540E;&#x7684;&#x539F;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x514D;&#x75AB;&#x78C1;&#x73E0;&#x5206;&#x79BB;&#x88AB;&#x5927;&#x5927;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F83; Bacteroidales 16S rRNA &#x57FA;&#x56E0;&#x5E8F;&#x5217;&#x4ECE;&#x6D17;&#x8131;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x78C1;&#x73E0;&#x5206;&#x79BB;&#x4E22;&#x5F03;&#x6837;&#x54C1;&#x8868;&#x793A;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x7684;&#x5206;&#x5E03;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x4E0A;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;&#x6709;&#x6697;&#x793A;&#x4E86;&#x7531;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x6CA1;&#x6709;&#x6062;&#x590D;&#x504F;&#x89C1;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x548C;&#x725B; Bacteroidales &#x548C;&#x7CAA;&#x4FBF;&#x6307;&#x6807;&#x7EC6;&#x83CC; &#xFF08;&#x5373;&#xFF0C;&#x80A0;&#x7403;&#x83CC;&#xFF0C;&#xFF09; &#x4E5F;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5728;&#x5E9F;&#x5F03;&#x998F;&#x5206;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x6837;&#x672C;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5730;&#x7406;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5269;&#x4F59;&#x6837;&#x672C;&#x5206;&#x6570;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#x88AB;&#x4E22;&#x5F03;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7CAA;&#x4FBF;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6307;&#x6807;&#x53CA;&#x5206;&#x5B50;&#x6E90;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;

&#x6C34;&#x6027;&#x539F;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x6807;&#x8BB0;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x76D1;&#x6D4B; Bacteroidales &#x548C;&#x7CAA;&#x6E90;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5269;&#x4F59;&#x6837;&#x54C1;&#x6750;&#x6599;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

In this study, we examined the potential for detecting fecal bacteria and microbial source tracking markers in samples discarded during the concentration of Cryptosporidium and Giardia using USEPA Method 1623. Recovery rates for different fecal bacteria were determined in sewage spiked samples and environmental waters using different group-specific and host-specific PCR assays. Bacteroidales DNA recovery ranged from 59 to 71% for aliquots of supernatant collected after the elution step. The recovery of human-specific Bacteroidales DNA from sewage spiked samples was 54% in the elution step. An additional 1-7% Bacteroidales DNA was recovered after the immunomagnetic separation step, while recovery from the pellet left after the immunomagnetic separation of protozoa parasites was substantially lower. Comparison of Bacteroidales 16S rRNA gene sequences from elution and immunomagnetic separation discarded samples indicated that the distribution of clones was not statistically different, suggesting that there were no recovery biases introduced by these steps. Human- and cow-specific Bacteroidales and fecal indicator bacteria (i.e., enterococci,) were also detected in the discarded fractions of environmental samples collected from different geographic locations. Overall, the results of this study demonstrated the potential application of leftover sample fractions that are currently discarded for the PCR detection of fecal bacterial indicators and molecular source tracking.

Application of leftover sample material from waterborne protozoa monitoring for the molecular detection of Bacteroidales and fecal source tracking markers.

Dans cette &#xE9;tude, nous avons examin&#xE9; le potentiel pour d&#xE9;tecter les bact&#xE9;ries f&#xE9;cales et des marqueurs suivi des sources microbiennes dans les &#xE9;chantillons rejet&#xE9;s au cours de la concentration de Cryptosporidium et Giardia en utilisant la m&#xE9;thode EPA 1623. Les taux de r&#xE9;cup&#xE9;ration pour diff&#xE9;rentes bact&#xE9;ries f&#xE9;cales ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;es dans des &#xE9;chantillons d&#x26;#39;eaux us&#xE9;es et les eaux de l&#x26;#39;environnement &#xE0; pointes en utilisant diff&#xE9;rents groupes sp&#xE9;cifiques et sp&#xE9;cifiques de l&#x26;#39;h&#xF4;te PCR. Bacteroidales l&#x26;#39;ADN de r&#xE9;cup&#xE9;ration variait de 59 &#xE0; 71% pour les aliquotes de surnageant recueilli apr&#xE8;s l&#x26;#39;&#xE9;tape d&#x26;#39;&#xE9;lution. La r&#xE9;cup&#xE9;ration de l&#x26;#39;ADN sp&#xE9;cifique de l&#x26;#39;homme Bacteroidales &#xE0; partir d&#x26;#39;&#xE9;chantillons d&#x26;#39;eaux us&#xE9;es &#xE0; pointes est de 54% dans l&#x26;#39;&#xE9;tape d&#x26;#39;&#xE9;lution. Un montant suppl&#xE9;mentaire de 1-7% d&#x26;#39;ADN a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;cup&#xE9;r&#xE9; Bacteroidales apr&#xE8;s l&#x26;#39;&#xE9;tape de s&#xE9;paration immunomagn&#xE9;tique, alors que la reprise du culot &#xE0; gauche apr&#xE8;s la s&#xE9;paration des parasites protozoaires immunomagn&#xE9;tique &#xE9;tait sensiblement plus faible. Comparaison des 16S ARNr Bacteroidales s&#xE9;quences de g&#xE8;nes &#xE0; partir d&#x26;#39;&#xE9;chantillons d&#x26;#39;&#xE9;lution et la s&#xE9;paration immunomagn&#xE9;tique jet&#xE9;s indiqu&#xE9; que la distribution des clones n&#x26;#39;&#xE9;tait pas statistiquement diff&#xE9;rente, ce qui sugg&#xE8;re qu&#x26;#39;il n&#x26;#39;y avait pas de r&#xE9;cup&#xE9;ration biais introduits par ces mesures. Human-et-vache sp&#xE9;cifiques Bacteroidales et des bact&#xE9;ries indicatrices de pollution f&#xE9;cale (c.-&#xE0;-ent&#xE9;rocoques,) ont &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;e dans les fractions rejet&#xE9;es d&#x26;#39;&#xE9;chantillons environnementaux pr&#xE9;lev&#xE9;s dans diff&#xE9;rents endroits g&#xE9;ographiques. Dans l&#x26;#39;ensemble, les r&#xE9;sultats de cette &#xE9;tude a d&#xE9;montr&#xE9; l&#x26;#39;application potentielle de fractions d&#x26;#39;&#xE9;chantillons restants qui sont actuellement mis au rebut pour la d&#xE9;tection par PCR de f&#xE9;caux indicateurs bact&#xE9;riens et suivi des sources mol&#xE9;culaire.

L&#x26;#39;&#xE9;pandage de mati&#xE8;res &#xE9;chantillon restes de surveillance protozoaires hydrique pour la d&#xE9;tection mol&#xE9;culaire de Bacteroidales et f&#xE9;caux marqueurs de d&#xE9;pistage des sources

In dieser Studie wurden das Potential zum Erkennen von f&auml;kalen Bakterien und mikrobielle Quelle Nachverfolgen von Markern in Proben verworfen, w&auml;hrend die Konzentration von Cryptosporidium und Giardia mit USEPA Methode 1623. Verwertungsquoten f&uuml;r verschiedene f&auml;kalen Bakterien wurden in Abwasser Spike-Proben und Gew&auml;ssern mit verschiedenen zielgruppenspezifische und Host-spezifische PCR-Assays bestimmt. Bacteroidales DNA-Erholung zwischen 59 und 71 % f&uuml;r Aliquote des &Uuml;berstands sammelte nach der Elution Schritt. Die Wiederherstellung der Mensch-spezifische Bacteroidales DNA von Abwasser Pfennigabsatz Proben war 54 % in der Elution Schritt. Eine zus&auml;tzliche 1-7 % Bacteroidales DNA wurde nach dem Immunomagnetic Trennung Schritt wiederhergestellt, w&auml;hrend der Erholung von der Pellet verlie&szlig;, nachdem die Immunomagnetic Trennung von Protozoen-Parasiten wesentlich niedriger war. Vergleich der Bacteroidales 16S rRNA-Gen-Sequenzen von Elution und Immunomagnetic Trennung verworfen Proben gaben an, dass die Verteilung der Klone war nicht statistisch anders, was darauf hindeutet, dass es keine Wiederherstellung-Vorurteile, die von diesen Schritten eingef&uuml;hrt wurden. In der verworfenen Br&uuml;che von Umweltproben aus verschiedenen geografischen Standorten gesammelt wurden auch Mensch und Kuh-spezifische Bacteroidales und f&auml;kalen Indikator Bakterien (z. B. Enterokokken,) erkannt. Insgesamt zeigten die Ergebnisse dieser Studie die m&ouml;gliche Anwendung der &uuml;brig gebliebene Beispiel Br&uuml;che, die derzeit f&uuml;r den PCR-Nachweis von f&auml;kalen Bakterien Indikatoren und Molekulare Source tracking verworfen werden.

Anwendung der &uuml;brig gebliebenen Probenmaterial aus Wasserwegen Protozoen, die &Uuml;berwachung f&uuml;r die molekulare Erkennung von Bacteroidales und f&auml;kalen Source Tracking-Marker.

In questo studio, abbiamo esaminato il potenziale per la rilevazione di batteri fecali e origine microbica tracking marcatori in campioni scartati durante la concentrazione di Cryptosporidium e Giardia utilizzando 1623 Metodo USEPA. Tassi di recupero per i diversi batteri fecali sono stati determinati in campioni di acque reflue a spillo e acque ambientali utilizzando diversi dosaggi di gruppo-specifici e host PCR. Recupero del DNA Bacteroidales variava da 59 a 71% per aliquote del surnatante raccolto dopo la fase di eluizione. Il recupero di umani specifici Bacteroidales DNA dai campioni di acque reflue a spillo era 54% nella fase di eluizione. Un ulteriore 1-7% Bacteroidales DNA &egrave; stato recuperato dopo la fase di separazione immunomagnetic, mentre il recupero dalla pallina a sinistra dopo la separazione di immunomagnetic dei parassiti protozoi era notevolmente inferiore. Confronto del gene del rRNA 16S Bacteroidales sequenze di eluizione e immunomagnetic separazione scartati campioni indicarono che la distribuzione dei cloni non era statisticamente differente, suggerendo che non c&#39;erano pregiudizi di recupero introdotti da questi passaggi. Specifiche umane e mucca Bacteroidales e batteri dell&#39;indicatore fecale (cio&egrave;, enterococchi,) sono stati rilevati anche nelle frazioni scartate di campioni ambientali raccolti da diverse aree geografiche. Nel complesso, i risultati di questo studio hanno dimostrato il potenziale applicazione delle frazioni rimasto campione che attualmente vengono scartati per il rilevamento di PCR di indicatori batterici fecali e molecolare fonte di rilevamento.

Applicazione del materiale rimasto campione da protozoi a base acquosa di monitoraggio per la rilevazione molecolare di Bacteroidales e di origine fecale marcatori di rilevamento.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7CDE;&#x4FBF;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x3084;USEPA&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;1623&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;Cryptosporidium&#x304A;&#x3088;&#x3073;Giardia&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5EC3;&#x68C4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x4E2D;&#x306E;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x6E90;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5225;&#x306E;&#x7CDE;&#x4FBF;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x56DE;&#x53CE;&#x7387;&#x306F;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x60C5;&#x5831;&#x3068;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;PCR&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x4E0B;&#x6C34;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3068;&#x74B0;&#x5883;&#x6C34;&#x4E2D;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Bacteroidales DNA&#x306E;&#x56DE;&#x53CE;&#x306F;&#x3001;&#x6EB6;&#x51FA;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x306E;&#x5F8C;&#x306B;&#x56DE;&#x53CE;&#x3057;&#x305F;&#x4E0A;&#x6E05;&#x306E;&#x30A2;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C8;&#x306F;59&#x304B;&#x3089;71&#xFF05;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E0B;&#x6C34;&#x6DFB;&#x52A0;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x30D2;&#x30C8;&#x7279;&#x7570;Bacteroidales DNA&#x306E;&#x56DE;&#x53CE;&#x306F;&#x3001;&#x6EB6;&#x51FA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;54&#xFF05;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30DA;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306F;&#x539F;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5206;&#x96E2;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x306B;&#x6B8B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9593;&#x3001;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;1&#x304B;&#x3089;7&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;Bacteroidales DNA&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5206;&#x96E2;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x306E;&#x5F8C;&#x306B;&#x56DE;&#x53CE;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Bacteroidales&#x6EB6;&#x51FA;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x5206;&#x96E2;&#x5EC3;&#x68C4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x306E;16S rRNA&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x306F;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x3067;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305A;&#x3001;&#x56DE;&#x5FA9;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x304C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x7D71;&#x8A08;&#x7684;&#x306B;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x3068;&#x725B;&#x7279;&#x6709;&#x306E;Bacteroidales&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CDE;&#x4FBF;&#x6307;&#x6A19;&#x83CC;&#xFF08;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x8178;&#x7403;&#x83CC;&#xFF09;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x5730;&#x7406;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5834;&#x6240;&#x304B;&#x3089;&#x63A1;&#x53D6;&#x3057;&#x305F;&#x74B0;&#x5883;&#x8A66;&#x6599;&#x306E;&#x5EC3;&#x68C4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x753B;&#x5206;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x7CDE;&#x4FBF;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x6307;&#x6A19;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#xB7;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;PCR&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7834;&#x68C4;&#x3055;&#x308C;&#x6B8B;&#x308A;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x753B;&#x5206;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Bacteroidales&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CDE;&#x4FBF;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6C34;&#x7CFB;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304B;&#x3089;&#x58F2;&#x308C;&#x6B8B;&#x308A;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x6750;&#x6599;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC30;&#xC124;&#xBB3C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xC18C;&#xC2A4; &#xCD94;&#xC801; &#xC6C0;&#xC744; &#xB18D;&#xB3C4; Giardia USEPA &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; 1623 &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xAC80;&#xCD9C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;. &#xB2E4;&#xB978; &#xBC30;&#xC124;&#xBB3C;&#xB85C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC544;&#xAD70; &#xD558; &#xC218; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xADF8;&#xB8F9; &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAD00;&#xB828; PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD658;&#xACBD; &#xBC14;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. Bacteroidales DNA &#xBCF5;&#xAD6C; 59&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xCF8C;&#xD55C; &#xCC28;&#xC785; &#xB2E8;&#xACC4; &#xD6C4; &#xC218;&#xC9D1; &#xB41C; aliquots&#xC758; 71%&#xC5D0; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC544;&#xAD70; &#xD558; &#xC218; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; Bacteroidales DNA&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xB294; &#xCC28;&#xC785; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; 54%. 1-7%&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; Bacteroidales DNA&#xB294; &#xD3A0; &#xB9BF;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB5A0;&#xB09C; &#xD6C4; &#xC6D0;&#xC0DD; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; immunomagnetic &#xBD84;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB354; &#xB0AE;&#xC740; immunomagnetic &#xBD84;&#xB9AC; &#xB2E8;&#xACC4; &#xD6C4; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bacteroidales 16S rRNA &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xC785; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC0F; immunomagnetic &#xBD84;&#xB9AC; &#xD3D0;&#xAE30; &#xC0D8;&#xD50C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD074;&#xB860;&#xC758; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB294; &#xD1B5;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978;, &#xB2E4;&#xC74C;&#xC774; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB3C4;&#xC785; &#xB41C; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD3B8;&#xACAC; &#xC5C6;&#xB294; &#xD588;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xAC70;&#xAE30;. &#xC778;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC554;&#xC18C; &#xD2B9;&#xC815; Bacteroidales&#xC640; &#xC9C0;&#xC800;&#xBD84;&#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC;&#xAE30; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; (&#xC989;, enterococci) &#xB2E4;&#xB978; &#xC9C0;&#xB9AC;&#xC801; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1; &#xB41C; &#xD658;&#xACBD; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xD3D0;&#xAE30; &#xBD84;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;,&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC9C0;&#xC800;&#xBD84;&#xD55C; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC9C0;&#xD45C; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xC18C;&#xC2A4; &#xCD94;&#xC801;&#xC758; PCR &#xD0D0;&#xC9C0; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD604;&#xC7AC; &#xB0A8;&#xC740; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBD84;&#xC218;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;.

Bacteroidales&#xC758; &#xC9C0;&#xC800;&#xBD84;&#xD55C; &#xC18C;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC790; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD94;&#xC801; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; waterborne &#xC6D0;&#xC0DD; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0A8;&#xC740; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC790;&#xB8CC;&#xC758; &#xC801;&#xC6A9;.

En este estudio, se analiz&#xF3; el potencial para la detecci&#xF3;n de bacterias fecales y marcadores microbianos de origen en el seguimiento de las muestras descartadas durante la concentraci&#xF3;n de Cryptosporidium y Giardia usando el m&#xE9;todo USEPA 1623. Las tasas de recuperaci&#xF3;n de diferentes bacterias fecales fueron determinados en muestras de aguas residuales y aguas enriquecidas ambientales a trav&#xE9;s de diferentes grupos espec&#xED;ficos y no espec&#xED;ficos de acogida-PCR. Bacteroidales recuperaci&#xF3;n ADN variaron de 59 a 71% en al&#xED;cuotas de sobrenadante recogido despu&#xE9;s de la etapa de eluci&#xF3;n. La recuperaci&#xF3;n de los derechos humanos espec&#xED;ficos de ADN a partir de muestras de aguas residuales Bacteroidales pinchos fue de 54% en la etapa de eluci&#xF3;n. Un adicional de ADN 1.7% Bacteroidales se recuper&#xF3; despu&#xE9;s de la etapa de separaci&#xF3;n inmunomagn&#xE9;tica, mientras que la recuperaci&#xF3;n del sedimento que queda despu&#xE9;s de la separaci&#xF3;n inmunomagn&#xE9;tica de los par&#xE1;sitos protozoarios fue sustancialmente menor. Comparativa de 16S rRNA Bacteroidales secuencias de genes a partir de muestras de eluci&#xF3;n y separaci&#xF3;n inmunomagn&#xE9;tica desechados se indica que la distribuci&#xF3;n de los clones no fue estad&#xED;sticamente significativa, lo que sugiere que no hubo sesgo de recuperaci&#xF3;n de la introducci&#xF3;n de estas medidas. Humanos y espec&#xED;ficos de vaca y bacterias fecales Bacteroidales indicador (es decir, los enterococos), tambi&#xE9;n se detect&#xF3; en las fracciones de desecho de las muestras ambientales recogidas en diferentes ubicaciones geogr&#xE1;ficas. En general, los resultados de este estudio demuestran la potencial aplicaci&#xF3;n de las fracciones sobrantes de muestras que se est&#xE1;n descartados para la detecci&#xF3;n por PCR de los indicadores bacterianos fecales y el seguimiento de la fuente molecular.

Aplicaci&#xF3;n del material de muestra de sobra de Monitoreo Acu&#xE1;tico protozoos para la detecci&#xF3;n molecular de Bacteroidales fecales y marcadores de seguimiento Fuente

ArticleTotal : 2	Year
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Publication title Cited by 11	2012

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Eric N. Villegas

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