Protein Interaction Capture Methods in Cells

Co-immunoprecipitation and pull-down assays are laboratory methods used to capture stable protein-protein interactions. Protein-protein interactions help control many biological functions, but many of them have not yet been identified. These assays are related to immunoprecipitation, which isolates a target protein from a mi...

蛋白质-蛋白质相互作用在多种生物学功能中发挥着重要作用。目前大多数蛋白质-蛋白质相互作用及其生物学效应仍有待鉴定。免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation，简称 CoIP）和拉下实验（pull-down assay）是两种密切相关的方法，可用于鉴定稳定的蛋白质-蛋白质相互作用。本视频将介绍这两种实验方法的原理、通用实验操作流程以及这些技术的应用。

共免疫沉淀（CoIP）和拉下实验是免疫沉淀的变体，后者是一种从复杂溶液中选择性分离特定蛋白质的方法。在免疫沉淀实验中，使用针对目标蛋白质的特异性抗体，使其在样品中与该目标蛋白形成免疫复合物。随后，该复合物被固定在固相支持物上，通常是结合了蛋白A的葡聚糖珠（sepharose bead）。未结合的蛋白质通过离心步骤被...