JoVE Core
Molecular Biology
Chapter 7: DNA Repair and Recombination
7.14:
LTR 反转录转座子
LTR 反转录转座子是 I 类转座元件,在内部编码区两侧具有长末端重复序列。与其他 I 类转座因子相比,这些元素在哺乳动物中的含量较低。大约 8% 的人类基因组 DNA 由 LTR 反转录转座子组成。LTR 反转录转座子的一些常见例子是酵母中的 Ty 元件和果蝇中的 Copia 元件。
LTR 反转录转座子的内部编码区及其转座机制与逆转录病毒基因组非常相似。它们可以编码动员所需的酶,也可以合成结构蛋白以形成病毒样颗粒。但大多数 LTR 反转录转座子缺乏合成病毒包膜的基因。因此,与可以形成感染性病毒粒子并从一个细胞水平移动到另一个细胞的逆转录病毒相比,LTR 逆转录转座子只允许在单个细胞基因组内从一个基因座移动到另一个基因座。
然而,已发现一些 LTR 逆转录元件在与逆转录病毒基因组中发现的”env”基因相同的位置具有额外的 ORF,例如果蝇中的吉普赛元件。这些元件可以编码三种推定的蛋白质,其中一种类似于逆转录病毒包膜蛋白,导致该元件的感染形式。
在人类中,最常见的 LTR 反转录转座子称为内源性逆转录病毒或 ERV。这些 ERV 是种系细胞中祖先外源性病毒感染的产物,导致它们在人类中的垂直传播。然而,由于跨越数百万年的共同进化,这些 ERV 现在在人类生理学中发挥着重要作用,包括维持某些调节网络。
大多数真核生物基因组包含一组独特的转座因子,称为反转录转座子或 I 类转座子。
与仅 DNA 转座子或 II 类转座子不同,反转录转座子采用”复制和粘贴”机制 – 这意味着转座子的拷贝移动到基因组上的新位点。
有两种类型的反转录转座子 – 长末端重复序列 (LTR)、反转录转座子和非 LTR 反转录转座子 – 两者都使用不同的转座机制。
LTR 反转录转座子由一个 5-7kb 长的蛋白质编码区组成,两端两侧是长末端重复序列,长度通常为 250-600 bp。
这些 LTR 包含用于转录的增强子和启动子序列。
编码区与逆转录病毒基因组的编码区非常相似,由与逆转录病毒的 gag 和 pol 密切相关的基因组成。因此,LTR 反转录转座子也称为逆转录病毒样反转录转座子。
然而,与逆转录病毒不同的是,LTR 反转录转座子不编码 “env” 基因,因此不能形成病毒包膜。
pol 基因编码蛋白酶、逆转录酶、整合酶和 RNase H 等酶;而 gag 基因编码可以形成病毒样颗粒的结构蛋白。
LTR 元件的转座机制也类似于宿主细胞中的逆转录病毒复制。
首先,宿主细胞 RNA 聚合酶 II 与 5′ LTR 结合,并开始将反转录转座子转录成单个 RNA 链。
然后,RNA中间体由宿主细胞酶处理,以添加一个 5′ 帽和一个 3′ polyA 尾。
然后,成熟的 RNA 被转运到细胞质并翻译成蛋白质。然后 mRNA 和蛋白质产物组装形成病毒样颗粒。正是在这个病毒样颗粒内部,RNA 被逆转录成单链 DNA 拷贝。
随后 RNase H 降解 RNA 链,合成互补 DNA 链,产生双链 DNA。
这种线性双链 DNA 在两端与整合酶结合,形成一个称为 intasome 的稳定复合物,该复合物可以被转运回细胞核并插入宿主基因组上的新位置。
LTR 反转录转座子可以使用这种复制机制在同一细胞中制作多个副本。
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