FISH - 荧光原位杂交

荧光 原位 杂交或荧光原位杂交（FISH）是一种用于检测特定基因或基因片段在固定细胞染色体上位置的技术。

在此技术中，使用荧光标记的单链DNA作为探针，以结合染色体中含有互补DNA序列的区域，该区域被称为靶标。

首先，将细胞阻滞在间期或中期。将阻滞的细胞悬浮于缓冲液中，并涂布在洁净的玻璃载片上。

接下来，通过加热或化学方法使目标 DNA 和标记的探针变性。此步骤可使双链 DNA 解链，从而使探针和目标 DNA 均成为能够进行碱基配对的单链序列。

然后，将探针与目标DNA混合，并在夜间孵育。这使得探针能够与染色体上的互补序列杂交。

杂交完成后，洗去多余的探针。

如果探针用荧光染料标记，则可以通过荧光显微镜直接观察杂交DNA的位置。

如果未标记，则在成像前需对杂交的DNA进行荧光标记。  为此，探针序列必须包含与半抗原相连的修饰核苷酸——半抗原是一种小分子，荧光素（如荧光抗体）可与其结合。

这种对基因的直接可视化在基于细胞的诊断检测中非常有用，可在细胞分裂过程中通过染色体的任何缺失、增加或重排来检测遗传异常。