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互补测试是一种简单的杂交，以确定两个突变是否位于同一基因或不同基因上。 20 世纪 40 年代，爱德华·刘易斯 (Edward Lewis) 在研究果蝇时首次进行了这项技术。 他开发了该测试来识别染色体上不同突变的位置和排列。
不同突变的杂合生物在所有组合中都是成对杂交的。 如果存在于不同的基因上，突变可以通过提供产生野生型表型的缺失遗传元件来相互补充。 然而，如果两个突变属于同一基因，则它们不能互补并且不能表现出野生型表型。 不能相互互补的突变被认为属于同一互补组。 相互互补的突变属于不同的互补组。
有时，不同的突变可以产生相同的表型，例如鸟类羽毛的着色丧失。这些突变是在同一基因中还是在两个不同的基因中，可以使用互补试验来确定。
考虑两只突变鸡之间的繁殖。如果同一个基因在父母双方都发生了突变，后代将继承突变并呈现白色。
另一方面，如果后代像野生鸟一样呈棕色，那么这表明父母在两个不同的基因中发生了突变。
尽管每个亲本基因都有一个突变，但它们共同产生了野生型表型。这种现象称为互补。
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