报告基因

报告基因是一种蛋白编码基因，通常被标记到感兴趣的基因上。 一旦进入靶细胞，报告基因与感兴趣的基因一起表达时，通常会产生视觉上可识别的特征，例如荧光和冷光。 因此，报告基因“报告”生物体中是否存在感兴趣的基因，确定基因表达模式，或追踪细胞中DNA片段或蛋白的物理位置。

常用的报告基因有-GFP（绿色荧光蛋白基因）、lacZ（β-半乳糖苷酶基因）、RFP（红色荧光蛋白基因）和Luc（荧光素酶基因）。 表达 GFP 的细胞在被蓝色至紫外线范围的波长激发时发出绿光，而表达 RFP 的细胞在被 488 nm 或 532 nm 的波长激发时发出红光。 表达 Luc 基因的细胞产生荧光素酶，催化与荧光素的反应以产生光。 lacZ 基因是大肠杆菌中最常用的报告基因。 它产生一种 β-半乳糖苷酶，使细菌在含有 X-gal 底物的培养基中生长时呈现蓝色。

研究启动子活性的报告基因

除了使用报告基因来研究基因表达和定位之外，它们还可以帮助研究启动子的强度。 这是通过将报告基因放置在质粒中启动子的下游，然后将其引入哺乳动物细胞来完成的。 报告基因的表达监测启动子的活性。 如果报告基因表达高，则该启动子被认为是强启动子； 如果报告基因表达低，则其强度较弱。

当报告基因放置在质粒中启动子的下游时，也有助于测量转染效率。 将重组质粒转染哺乳动物细胞，其表达表明细胞转染成功。 重组质粒产生的蛋白量显示了其转染效率。