16.16: 转基因植物

Transgenic Plants
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Molecular Biology
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Transgenic Plants
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02:50 min
April 07, 2021

称为转基因的重组 DNA 技术通常用于从生物体中添加外源基因或去除有害基因。这种转基因生物被称为转基因生物。

有史以来第一种转基因植物是 1983 年开发的烟草植物,它显示出对烟草花叶病毒的抗性。从那时起,许多转基因植物被开发并商业化,以提高农作物的农业、观赏和园艺价值。转基因植物也可用作生物反应器,用于生产具有经济重要性的代谢物或蛋白质。

将基因转移到植物的物理方法

许多方法,如电穿孔和微弹轰击,可用于将外源基因转移到植物原生质体中。在电穿孔过程中,装置向原生质体悬浮液提供高压脉冲。这增加了原生质体的通透性,允许外源 DNA 进入细胞并整合到植物基因组中。

相反,在微弹轰击或生物免疫法中,由钨或金制成的球形颗粒(微弹)涂有携带目标基因的质粒。然后,使用称为粒子枪的仪器将涂层颗粒加速到 300 至 600 m/s。该仪器使用高压氦气提供推进力,帮助质粒包被的颗粒穿透植物细胞壁。一旦进入细胞,目标基因就会整合到植物基因组中。该方法可用于将 DNA 引入愈伤组织培养物、分生组织、未成熟胚胎、植物细胞悬液等中。

转基因植物的应用

重组 DNA 技术广泛用于开发抗虫害和抗病毒植物。该技术还有助于改变种子的脂质、淀粉和蛋白质含量。

例如,黄金稻是一种营养价值更高的转基因稻草。这种转基因水稻品种产生 β-胡萝卜素 – 维生素 A 的前体,使其呈金黄色。它由农杆菌介导的 DNA 转化产生,其中携带三种编码酶(八氢番茄红素合成酶、八氢番茄红素去饱和酶和番茄红素 β-环化酶)的重组 DNA入到目标水稻胚的基因组中。然后胚胎发育成产生 β-胡萝卜素的植物。黄金大米是为了解决发展中国家的维生素 A 缺乏症而开发的。

其他一些转基因植物,如 Bt 棉花,已经通过插入从苏云金芽孢杆菌(一种在土壤中发现的革兰氏阳性菌)分离的基因进行了修饰。这种转基因植物产生晶体或 “Cry” 蛋白,可以杀死有害昆虫,使植物具有抗虫性。

Transcript

转基因植物是通过将外来基因引入植物基因组而产生的。这些植物的开发原因有很多,包括病毒或害虫抗性、更高的产量或治疗性蛋白质的产生。

为了生产转基因植物,通过在含有聚乙二醇的培养基中孵育,将目的基因及其启动子引入植物原生质体,即没有细胞壁的植物细胞。

重组

原生质体在生长调节剂和营养物质存在下在无菌培养基上培养。

原生质体的细胞无限生长,产生大量未分化的细胞,称为愈伤组织。愈伤组织的一些细胞,称为全能细胞,产生新的芽和根,它们可以发育成全新的植物。

也可以使用根癌农杆菌(一种在土壤中发现的革兰氏阴性细菌)来制造转基因植物。这种细菌是一种通常会在植物中引起疾病的病原体,并含有可以整合到植物细胞基因组中的 Ti 质粒。

Ti 质粒有两个感兴趣的区域 – T-DNA 或转移 DNA 区域,可以插入宿主细胞基因组和毒力区域,以帮助 T-DNA 转移到宿主细胞中。

通过将所需基因插入 T-DNA 区域和抗生素抗性基因来修饰该质粒,以实现含质粒生物体的选择性生长。然后通过施加电脉冲将重组质粒插入细菌中,以增加细胞通透性并使质粒能够被细菌吸收。

携带重组质粒的根癌农杆菌在含有抗生素的培养基中生长。

切开植物部分,例如番茄植株的子叶节,并在含有细菌的培养基中孵育。

茎节边缘受伤的植物细胞释放出吸引细菌的化合物。细菌感染植物并释放重组质粒,然后将外源基因转移到植物细胞基因组中。

只有具有重组 DNA 和抗生素耐药基因的转化细胞才能在含有抗生素的培养基中存活。

转化的细胞现在形成愈伤组织并发育成携带转基因的新转基因植物。