32.2
细胞培养是一种在实验室环境中培养真核细胞的技术。
它提供了一个用于研究细胞在非自然环境中生理特性的模型系统。
当组织样本中的细胞直接在培养基中培养时,所获得的细胞培养物称为原代培养物。
这类细胞需要人工控制的培养条件以促进其生长,例如根据细胞是贴壁培养还是悬浮培养来选择合适的培养器皿;适宜的温度;能够提供必需营养物质(如氨基酸、维生素、无机盐和生长因子)的合适培养基;以及pH缓冲系统。
随着原代贴壁细胞的增殖,细胞逐渐占据培养皿的整个表面积。
在此阶段,必须使用蛋白酶和螯合剂溶液(如胰蛋白酶-EDTA)处理细胞,以削弱细胞与基质及细胞间的相互作用,从而获得单个细胞。
随后可将少量这些细胞传代至含有新鲜培养基的新培养皿中,以促进其持续生长。此类传代细胞可形成继代培养物。
大多数脊椎动物细胞在体外以单层形式附着在基质上生长,称为贴壁培养。用于培养细胞的烧瓶和平板经过化学处理以促进细胞附着。然而,一些细胞类型,例如造血细胞,可以在悬浮液中生长。与贴壁培养相反,悬浮培养可以在未经处理的培养皿中,通过使用磁力搅拌器或旋转烧瓶搅拌培养基进行生长。
培养条件
培养基是细胞最佳生…
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