32.4
杂交瘤技术用于大规模生产单克隆抗体,这些抗体只能与单一表位结合——表位是抗原中引发免疫反应的部分。
该过程 首先向小鼠注射一种靶向抗原,数周后取出其脾脏,以分离能够产生抗体的B细胞。这些细胞寿命有限,无法在实验室中进行培养。
接下来,利用电脉冲或聚乙二醇将B细胞与骨髓瘤细胞——一种永生化的癌性白细胞——进行融合,从而形成能够永生且产生抗体的杂交细胞,称为杂交瘤细胞。
根据是否存在有功能的次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)酶,杂交瘤细胞进一步在含有次黄嘌呤(hypoxanthine)、氨基蝶呤(aminopterin)和胸腺嘧啶(thymidine)的HAT培养基上进行筛选。
在这种培养基中,HGPRT阴性的骨髓瘤细胞和HGPRT阳性但寿命较短的B细胞均无法长期存活。然而,具有HGPRT酶的永生化杂交瘤细胞则能够增殖。
筛选后,鉴定出能产生对目标表位具有强亲和力的单克隆抗体的杂交瘤细胞,并将其作为起始细胞用于建立抗体生产细胞系。
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