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流式细胞术可根据多种参数(如细胞大小和复杂性)分析异质性细胞群体,例如白细胞。
当悬液被加载到流式细胞仪上时,鞘液和振动喷嘴形成单细胞液滴,这些液滴穿过激光束,向多个方向散射光线。
前向散射用于测量细胞大小,侧向散射用于指示细胞复杂性,二者通过不同的检测系统进行检测。
在图中绘制前向散射与侧向散射信号有助于区分样本中不同细胞群体及其比例。例如,粒细胞比淋巴细胞更大且颗粒性更强,其前向散射和侧向散射信号更高。
荧光激活细胞分选仪(FACS)是一种专用的流式细胞术,可用于分析和分选细胞。该技术通过向样本中添加针对特定细胞组分(如T细胞上的CD4或CD8标记物)的荧光标记抗体来实现。
基于荧光标记,电荷环可对单细胞液滴施加电荷。
电磁铁随后利用此电荷将不同类型的细胞偏转至不同的试管中。
流式细胞术技术的发展始于 1934 年,细菌学家 Andrew Moldavan 首次尝试在流动的毛细管系统中计数细胞。Moldavan将细胞泵入毛细管,并在显微镜下聚焦以进行可视化。光度测定法的发明可以测量差异染色的细胞,Louis Kamentsky 于 1965 年开发出第一台多参数流式细胞仪…