蛋白质印迹法

Western印迹是一种用于从蛋白质混合物中检测目标蛋白质的分析技术。

它可帮助鉴定蛋白质异构体和翻译后蛋白质修饰。此外，它还能在药物处理后确定靶蛋白。

该方法基于SDS-PAGE，后者根据电荷与质量比来分离蛋白质。

这些蛋白质通常在电场作用下转移至硝酸纤维素膜上。

带负电荷的蛋白质向阳极移动，并转移至膜上，同时保持其原始位置不变。

然后将膜与针对目标蛋白的特异性一抗孵育。预先在封闭缓冲液中孵育可防止抗体与膜非特异性结合。

接下来，二抗会标记上报告酶，例如辣根过氧化物酶或荧光染料，这些标记物可与一抗结合。

当与适当的底物共同孵育时，这些报告酶会产生颜色或光，或发出荧光信号，从而可在混合物中检测到特定蛋白质。