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酶联免疫吸附测定(ELISA)是一种标记免疫测定法,广泛应用于检测和定量抗体、多肽、糖蛋白、激素和病毒等分析物。
与抗原或靶分子结合的检测抗体上连接有特定的酶,当加入底物时,这些酶会产生可测量的信号。
根据捕获和检测方法的不同,ELISA 主要分为四种类型。
直接ELISA使用酶标记的一抗来检测包被在板上的样本抗原。
而对于间接ELISA,固定的抗原用于捕获 样本一抗,与之结合的是偶联的二抗。
双抗体夹心ELISA使用两种抗体,一种包被在板上用于捕获样本中的抗原,另一种酶标记抗体则结合到抗原的特异性表位,从而形成夹心结构。
在竞争性ELISA中,将抗原与一抗预先孵育后,加入包被有相同抗原的酶标板中。
样本中抗原浓度越高,形成的抗原-抗体复合物越多,导致剩余可与酶标板上竞争性抗原结合的游离抗体越少,因而产生较弱的信号。
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