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固定和切片
33.3
大多数生物组织样本较厚且不透明,在显微镜下观察前必须经过处理。
组织首先用固定液处理,以杀死细胞并固定细胞组分,从而维持其结构。
固定后的样品经过浓度递增的酒精梯度处理,以使样品脱水。
为了防止脆弱的样品受损,需将其包埋在石蜡等疏水性材料中,并用切片机切成薄片。
将切好的薄片转移至载玻片上,加入几滴有机溶剂以去除附着的石蜡。
接下来,对切片进行染色,并加入封片剂,盖上盖玻片。封片剂的折射率应与盖玻片和载玻片相同,以获得最佳的图像分辨率。
样本现已准备好,可在显微镜下进行观察。
使用光学显微镜观察标本有两种基本的制备方法:湿封片和固定标本。
最简单的制备类型是湿封片,即将样本置于载玻片上的一滴液体中。可以使用滴管将液体样本直接滴在载玻片上。可以将固体标本(例如皮肤刮片)放置在载玻片上,然后添加一滴液体来制备湿封片。有时液体只是水,但通常会添加染色剂以增强对比度。将液体添加到…