电子显微镜断层扫描和单粒子重建

生物样品的三维结构可以通过两种冷冻电子显微镜技术来确定——电子断层扫描和单颗粒重构。

在电子断层扫描中，样品相对于电子束逐步倾斜，从不同角度采集一系列二维图像。然后利用计算机软件将这些二维图像堆叠，生成样品的三维图像或断层图。

电子断层扫描技术可保持样品的in vivo结构完整性，主要用于在天然环境中对细胞、细胞器及大分子进行三维可视化观察。

在单颗粒重构中，分离的 体外 样品（如纯化的蛋白质样品）被均匀地分布在载网上。

捕获随机取向的单个蛋白质分子的二维图像。然后对数千张此类图像进行平均和比对，以重建样品的三维图像。