柱色谱的类型

凝胶过滤、离子交换和亲和层析是常用于从混合物（如蛋白质悬液）中提取纯化化合物的柱层析类型。

凝胶过滤色谱利用惰性聚合物凝胶珠基质形成特定的孔径大小。

对于蛋白质悬液而言，大于凝胶孔径的蛋白质会先被洗脱出来，而较小的蛋白质则会被截留在凝胶珠内。这些被截留的蛋白质随后可通过多次溶剂洗涤进行洗脱。

相比之下，离子交换柱中填充的基质微珠表面包被有弱酸或弱碱，使其在特定pH条件下带有净正电荷或净负电荷。

这有助于通过与带相反电荷的蛋白质形成离子键，根据蛋白质的表面电荷进行分离。

最后，亲和层析利用连接有配体（如抗体）的基质，通过特异性结合相互作用从混合物中分离出目标蛋白质。

在亲和层析和离子交换层析中，通过添加洗脱溶剂改变条件（如pH、离子强度或引入竞争性分子），减弱目标蛋白与层析柱之间的相互作用，最终实现目标蛋白的洗脱。