32.5
组织匀浆技术通过破坏组织结构并裂解细胞,以分离亚细胞器或大分子物质,如核酸和蛋白质。
根据样本类型和预期的下游应用,匀浆化可采用机械或非机械方法进行。
基于固体的机械法,如组织研磨器或珠磨机,用于 骨和肌肉等坚硬或纤维性组织样本。
组织研磨器通过手动或自动操作的研钵和研杵来研磨样品,而珠磨机则是利用样品与珠子之间的碰撞来破碎组织。
超声处理是一种基于液体的机械均质化方法,可通过振动探头产生的高频声波对悬浮细胞进行剪切。
非机械技术包括酶法、生物法或化学均质化方法。
这些方法包括使用含有胶原酶或胰蛋白酶的酶混合液,或使用洗涤剂、变性剂等化学试剂,以及通过冻融循环或渗透作用破坏细胞壁和质膜,从而将细胞内含物释放到溶液中。
为了获得最佳效果,通常将非机械方法与机械裂解相结合。
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