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高效液相色谱法:简介
11.17
在高效液相色谱(HPLC)中,分离过程发生在装有基于二氧化硅的键合固定相的分析柱中。
分析物的分离基于固定相中的固体与流动相中的液体之间的相互作用。
二氧化硅表面还含有未反应的硅醇基团,这会导致极性相互作用,从而引起拖尾现象。
因此,硅醇基团与三甲基氯硅烷反应,形成封端的固定相。
在分析柱之前安装一个装有相同固定相的保护柱,以防止其受到污染,并定期更换保护柱以延长分析柱的使用寿命。
流动相的极性在分析物的洗脱过程中起着至关重要的作用。
正相色谱法使用极性固定相和非极性流动相。
相比之下,反相色谱使用非极性固定相和极性流动相。
高效液相色谱法 (HPLC),以前称为高压液相色谱法,是一种用于分离、识别和量化复杂混合物中成分的强大技术。术语“高压”是指使用高压将液体流动相推过紧密填充的色谱柱。
在 HPLC 中,两个相在分离过程中起着关键作用: