4.10
蛋白质-药物结合通过间接和直接方法来确定。
间接方法涉及从血液、血清或血浆等生物样本中分离结合态药物与游离态药物,以测定结合率。
这些技术包括用于测定平衡状态下游离药物浓度的平衡透析法,以及用于评估药物通过半透膜转运情况的动态透析法。
超滤、超速离心和凝胶过滤可有效分离与蛋白质结合的药物及其游离形式。
相比之下,直接方法不需要分离结合态的药物,而是通过纯蛋白质溶液来估算结合位点的特性。
这些方法包括采用紫外光谱法和荧光光谱法测定与蛋白质结合的药物浓度,以及使用离子选择性电极测量离子与蛋白质的结合。
常用于分析结合数据的多种图解方法包括:直接作图法、Scatchard 图解法、Klotz 图解法或 Lineweaver–Burk 图解法,以及 Hitchcock 图解法。
这些方法共同为蛋白质-药物相互作用提供了有价值的见解。
蛋白质-药物结合的测定可通过间接和直接方法实现,每种方法均可提供有关蛋白质与药物相互作用的宝贵信息。
间接方法包括从血液、血清或血浆等生物样品中将结合态药物与其游离态分离。这些技术旨在测定与蛋白质结合的药物百分比。平衡透析是一种常用方法,通过半透膜分离结合态与未结合态药物,从而测量平衡状态下的游离药…
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