Fly Climbing Assay: A Method to Test General Locomotion in <em>Drosophila melanogaster</em>

doi:10.3791/20078

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Research Article

苍蝇攀爬试验:一种测试黑腹果蝇一般运动的方法

April 30, 2023

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Abstract

来源:Gevedon， O. 等人体内正向遗传筛选以识别黑腹果蝇中的新型神经保护基因。J. Vis. Exp.（2019 年）。

该视频描述了一种量化苍蝇运动的简单方法，并展示了进行的攀爬试验。苍蝇攀爬试验是一种运动功能的一般测试，它依赖于负向性反应。

Protocol

该方案摘自 Gevedon 等人，In Vivo Forward Genetic Screen to Identify Novel Neuroprotective Genes in Drosophila melanogaster， J. Vis. Exp.（2019 年）。

1. 攀爬试验（改编自 Ali et al.， J. Vis. Exp. （2011 年））

验证攀爬测定。在这项研究中，使用 Elav^C155>UAS-Tau^R406W（表现出较低的攀爬通过率）和 Elav^C155>UAS-GFP（对照）和 Elav^C155>UAS-mCherry（对照）苍蝇。
将果蝇翻转到测试室中，一次一根线（不要使用 CO₂ 麻醉）并让它们恢复 5 分钟。如果检测在不同日期进行，请在当天的同一时间进行检测。在这项研究中，所有攀岩试验都在下午进行，以控制昼夜节律对运动的影响><。注意测试时避免将苍蝇暴露在阳光直射下;这将干扰他们的攀爬能力。
将腔室（标记面朝下）强行敲击到放置在固体表面上的鼠标垫上 3 次，以便所有果蝇从底部开始测定。观察苍蝇在 10 s 内的运动。
记录在此时间内到达或通过 5 厘米线的果蝇数量，以及测试的果蝇总数。重复该方案，每次试验之间等待 1 分钟，每条生产线至少 3 次试验重复><。注意在本研究中，每个小瓶含有 2 到 19 只用于初步筛选的果蝇（雄性果蝇）和 6 到 21 只果蝇用于杂交雌性品系的突变缺陷分析。

Materials

<表格 border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1448px;" width="1449"> VWR® 果蝇小瓶;窄 VWR 75813-160 VWR® 通用实验室标签胶带 VWR 89097-912 标准鼠标垫立体镜莫蒂奇型号 SMZ-168 果蝇培养箱 VWR 89510-750 R 软件包

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