本方案节选自&#160;盖夫顿&#160;等.,&#160;体内 正向遗传筛选以鉴定新型神经保护基因&#160;黑腹果蝇&#160;视频实验杂志&#160;(2019).
1. 攀爬实验（改编自 Ali et al., J. Vis. Exp. (2011)）
<ol>
	<li>验证爬行实验。在本研究中，根据 Ali 等人先前描述的方法，使用&#160;ElavC155&#62;UAS-TauR406W&#160;（表现为爬行通过率较低）以及&#160;ElavC155&#62;UAS-GFP&#160;（对照）和&#160;ElavC155&#62;UAS-mCherry&#160;（对照）果蝇进行爬行实验测试。</li>
	<li>将果蝇逐管翻入测试装置中（不要使用 CO2&#160;麻醉），并让其在装置中恢复 5 分钟。若实验在不同日期进行，应于每天相同时段开展测试。在本研究中，所有爬行实验均在下午进行，以控制昼夜节律对运动能力的影响。 
	注意&#160;测试时应避免将果蝇暴露于直射阳光下，否则会影响其爬行能力。</li>
	<li>将装置（标记面朝下）用力在置于坚固表面的鼠标垫上敲击 3 次，使所有果蝇均从底部开始实验。观察果蝇在 10 秒内的运动情况。</li>
	<li>记录在此时间内到达或越过 5 cm 标记线的果蝇数量，以及测试的果蝇总数。每管至少重复 3 次实验，每次实验之间间隔 1 分钟。 
	注意&#160;在本研究中，初始筛选（雄性果蝇）每管包含 2 至 19 只果蝇，而杂交雌性品系的突变缺失分析每管包含 6 至 21 只果蝇。</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>VWR&amp;reg; 果蝇小瓶；窄口</td><td>VWR</td><td>75813-160</td><td></td></tr><tr><td>VWR&amp;reg; 通用实验室标签胶带</td><td>VWR</td><td>89097-912</td><td></td></tr><tr><td>标准鼠标垫</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>体视显微镜</td><td>Motic</td><td></td><td>型号 SMZ-168</td></tr><tr><td>果蝇培养箱</td><td>VWR</td><td>89510-750</td><td></td></tr><tr><td>R 软件包</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

果蝇攀爬实验：一种检测果蝇一般运动能力的方法 黑腹果蝇

Fly Climbing Assay: A Method to Test General Locomotion in Drosophila melanogaster

来源：Gevedon, O.，等 <a href="https://www.jove.com/video/59720/in-vivo-forward-genetic-screen-to-identify-novel-neuroprotective">体内正向遗传筛选鉴定新型神经保护基因 黑腹果蝇</a>. 视频实验杂志 (2019).
本视频介绍了一种量化果蝇运动能力的简单方法，并演示了攀爬实验的操作。&#160; 果蝇攀爬实验是一种检测运动功能的通用方法，其原理依赖于果蝇的负向趋地性反应。

来源：Gevedon, O. 等. 利用体内正向遗传筛选鉴定黑腹果蝇中新的神经保护基因. J. Vis. Exp. (2019)。  
该……

首先， 获取 一 组 数量 的 成年 Drosophila 用于 爬行 实验 的 测试 装置 由 两 个 用 胶带 连接 在 一起 的 小瓶 组成 其中 一个 小瓶 应 用 一 条线标记无 碳 二氧化物 麻醉， 哪个 能 损害 攀爬 行为， 转移 a 设置 数量 的 果蝇 到 的 测试 腔室 允许 的 果蝇 到 回收 用于 a 预先确定的 量 的 时间 随着 的 标记 侧面 的 的 腔室 下调 牢固地 轻敲 的 腔室 在 a 小鼠 垫 放置 开启 a 固体 表面 这 将 力 的 果蝇 到 的 底部 的 的 腔室 该 攀爬 检测 需要 优势 的 果蝇的 天然的 倾向 至 攀爬 向上 对抗 重力， a 行为 称为 阴性 向地性 在……期间 的 试验， 的 果蝇 不应 是 暴露 到 直接 阳光 因为 的 果蝇 可能 显示 趋光性 行为， 或 运动 在 反应 到 光 刺激 记录 的 数量 的 果蝇 那 达到 或 通过 这 线。 然后 获得 的 百分比 通过 速率 由 分裂 这 数量 由 的 总计 数量 的 果蝇 测试。 允许 的 果蝇 到 回收 之前 重复 的 试验 在 的 例如， 我们 将 观察 a 果蝇 攀爬 检测 是 使用 到 评估 黑腹果蝇 运动 功能 之后 化学 诱变 -至 开始， 收集 纯合的 果蝇 从 线条 属于 到 的 ENU 诱变的 收集 的 果蝇 突变体 映射 到 的 第二 染色体 翻转 的 果蝇 老年 10 到 12 天 进入 a 测试 腔室 无 麻醉 一 线 在 a 时间 和 允许 他们 到 回收 用于 五 分钟 随着 的 五厘米 线 标记的 侧面 下调 强行 轻敲 的 腔室 三 次 开启 a 小鼠 垫 放置 开启 a 固体 表面 因此 那 全部 果蝇 开始 的 检测 在 的 底部 观察 果蝇 运动 结束 a 周期 的 10 秒 记录 的 数量 的 果蝇 那 达到 或 通过 的 五厘米 线 在……之内 这 时间 作为 良好 作为 的 总计 数量 的 果蝇 测试。 等待 一 分钟 之前 开始 a 第二 试验 重复 a 最小值 的 三 试验 重复样本 每 线。

fly-climbing-assay-method-to-test-general-locomotion-drosophila

Research

科研

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biology

生物学

Drosophila melanogaster (fruit fly)

黑腹果蝇 (Drosophila melanogaster)

Adult

成体

苍蝇攀爬试验:一种测试黑腹果蝇一般运动的方法

14.0K 次观看. - 首先，获得一定数量的成年果蝇。攀爬测定的测试室由两个用胶带粘在一起的小瓶组成。其中一个样品瓶应标有一条线。如果没有二氧化碳麻醉（可能会损害攀爬行为），请将一定数量的果蝇转移到测试室。让果蝇恢复预定的时间。将腔室的标记面朝下，用力敲击放置在固体表面上的鼠标垫上的腔室。这将迫使苍蝇到达腔室的底部。攀爬测定利用了果蝇逆重...

苍蝇攀爬试验:一种测试黑腹果蝇一般运动的方法

Abstract

Protocol

<table><tbody><tr><td>VWR&reg; 果蝇小瓶；窄口</td><td>VWR</td><td>75813-160</td><td></td></tr><tr><td>VWR&reg; 通用实验室标签胶带</td><td>VWR</td><td>89097-912</td><td></td></tr><tr><td>标准鼠标垫</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>体视显微镜</td><td>Motic</td><td></td><td>型号 SMZ-168</td></tr><tr><td>果蝇培养箱</td><td>VWR</td><td>89510-750</td><td></td></tr><tr><td>R 软件包</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

果蝇攀爬实验：一种检测果蝇一般运动能力的方法黑腹果蝇

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姓名	公司	目录编号	评论
VWR® 果蝇小瓶；窄口	VWR	75813-160
VWR® 通用实验室标签胶带	VWR	89097-912
标准鼠标垫
体视显微镜	Motic		型号 SMZ-168
果蝇培养箱	VWR	89510-750
R 软件包

果蝇攀爬实验：一种检测果蝇一般运动能力的方法 黑腹果蝇

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