果蝇攀爬实验：一种检测果蝇一般运动能力的方法 黑腹果蝇

摘要

来源：Gevedon, O.，等 体内正向遗传筛选鉴定新型神经保护基因 黑腹果蝇. 视频实验杂志 (2019).

本视频介绍了一种量化果蝇运动能力的简单方法，并演示了攀爬实验的操作。  果蝇攀爬实验是一种检测运动功能的通用方法，其原理依赖于果蝇的负向趋地性反应。

方案

本方案节选自 盖夫顿 等., 体内 正向遗传筛选以鉴定新型神经保护基因 黑腹果蝇 视频实验杂志 (2019).

1. 攀爬实验（改编自 Ali et al., J. Vis. Exp. (2011)）

1. 验证爬行实验。在本研究中，根据 Ali 等人先前描述的方法，使用 Elav^C155>UAS-Tau^R406W （表现为爬行通过率较低）以及 Elav^C155>UAS-GFP （对照）和 Elav^C155>UAS-mCherry （对照）果蝇进行爬行实验测试。
2. 将果蝇逐管翻入测试装置中（不要使用 CO₂ 麻醉），并让其在装置中恢复 5 分钟。若实验在不同日期进行，应于每天相同时段开展测试。在本研究中，所有爬行实验均在下午进行，以控制昼夜节律对运动能力的影响。
   注意 测试时应避免将果蝇暴露于直射阳光下，否则会影响其爬行能力。
3. 将装置（标记面朝下）用力在置于坚固表面的鼠标垫上敲击 3 次，使所有果蝇均从底部开始实验。观察果蝇在 10 秒内的运动情况。
4. 记录在此时间内到达或越过 5 cm 标记线的果蝇数量，以及测试的果蝇总数。每管至少重复 3 次实验，每次实验之间间隔 1 分钟。
   注意 在本研究中，初始筛选（雄性果蝇）每管包含 2 至 19 只果蝇，而杂交雌性品系的突变缺失分析每管包含 6 至 21 只果蝇。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
VWR® 果蝇小瓶；窄口	VWR	75813-160
VWR® 通用实验室标签胶带	VWR	89097-912
标准鼠标垫
体视显微镜	Motic		型号 SMZ-168
果蝇培养箱	VWR	89510-750
R 软件包