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方法文章

味觉偏好实验:一种测量摄食行为的方法 黑腹果蝇

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2023年4月30日

本文内容

摘要

来源:Bantel, A. P. 和 Tessier, C. R. 成年个体味觉偏好检测 果蝇. 视频实验杂志 (2016).

本视频介绍了味觉偏好检测法,这是一种行为学方法,通过检测果蝇摄取偏好物质后腹部的颜色变化,来衡量其对不同味道的有色溶液的趋向性或回避性。本方案展示了用于测定果蝇对不同蔗糖浓度溶液偏好的实验操作流程。

方案

本方案节选自 Bantel 和 Tessier 的《成年个体味觉偏好检测方法》 果蝇, J. Vis. Exp. (2016).

1. 饥饿处理

  1. 通过在标准果蝇小瓶底部放置一个用18.2 MΩ水充分浸湿的棉球来制备饥饿用果蝇小瓶。或者,也可将一小条滤纸用18.2 MΩ水充分浸湿后斜置于小瓶内。
  2. 在CO2麻醉垫上收集约100只果蝇为一组,然后将果蝇转移至已准备好的小瓶中。
    注意:使用年龄小于5天的果蝇效果最佳。然而,果蝇的确切年龄可作为实验变量加以控制,以确定味觉偏好随时间的变化。
  3. 使用棉塞或泡沫塞密封小瓶。将小瓶平放在环境可控的培养箱中,保持温度为25 °C,湿度高于70%。静置培养24小时,期间不要扰动小瓶。

2. 味觉偏好实验

  1. 在测试当天准备所有用于实验的味觉刺激物。
    注意: 具体使用的味觉刺激物将根据所研究的实验问题而有所不同。以下为本方案中使用的示例味觉刺激物。有关优化方法,请参见第4节。
    1. 通过混合10 µl的100 mM蔗糖溶液、13 µl红色食用色素和977 µl的18.2 MΩ水,....

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结果

黑腹果蝇表型变异比较;遗传学研究结果;显微镜图像。
图1:味觉偏好实验结果。 图中展示了腹部着色变异的一些示例。摄入深红色染料(A)。摄入浅红色染料(B)。摄入深蓝色染料(C)。摄入浅蓝色染料(D)。当整个腹部呈现紫色着色时,记为紫色腹部(E);或当腹部不同区域分别显示红色部分(箭头)和蓝色部分(箭)时,也记为紫色腹部(F)。请点击此处查看该图的放大版本。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
蓝色食用色素(水、丙二醇、FD&C 蓝色 1 号和红色 40 号、丙基对羟基苯甲酸酯)McCormickN/A
无分隔冷冻盒(Cryo/Freezer Boxes)Fisher03-395-455
Dumont #5 镊子精细科学工具公司(Fine Science Tools)11251-20
Leica S6 E 体视变倍显微镜 0.63X-4.0XW. Nuhsbaum 公司(W. Nuhsbaum, Inc.)10446294
培养皿(100 mm × 15 mm)BD Falcon351029若彻底清洗并干燥后可重复使用
Quick-Snap 微量管Alkali Scientific 公司(Alkali Scientific Inc.)C3017
红色食用色素(水、丙二醇、FD&C 红色 40 号和 3 号、丙基对羟基苯甲酸酯)McCormickN/A
蔗糖IBI ScientificIB37160

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