尼罗红染色 秀丽隐杆线虫一种在固定动物中可视化脂滴的方法

摘要

来源：Escorcia, W., 等. 脂质丰度的定量与脂质分布的评估 秀丽隐杆线虫 通过尼罗红和油红O染色. 视频实验杂志 (2018).

本视频介绍了一种使用尼罗红染料对完整且已固定的线虫进行脂质染色的实验方案。  为特异性观察脂滴核心中的中性脂质，应对染色后的 C. elegans 进行绿色发射光谱成像。

方案

本实验方案摘自 Escorcia et al，通过尼罗红与油红O染色对秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）中脂质丰度的定量及脂质分布的评估，《视觉化实验杂志》（J. Vis. Exp.）(2018年)。

1. 脂质的尼罗红（NR）染色

1. 5 mg/mL NR 储备液的制备
   1. 在 500 mL 瓶中，将 100 mg NR 粉末加入 200 mL 100% 丙酮中。
   2. 用铝箔包裹瓶子，避免任何光照。
   3. 使用前，在避光条件下搅拌溶液 2 小时。
   4. 长期使用时，将 NR 储备液储存于密封严密的瓶中，并避免任何光照。根据研究需要调整 NR 储备液的配制量。为获得一致的染色和成像结果，确保在所有 NR 染色实验中使用同一批次的储备液。
2. NR 工作液的制备
   1. 每 1 mL 40% 异丙醇（v/v），加入 6 µL NR 储备液。
   2. 每个样品准备 600 µL NR 工作液。
      注意：染色前现配 NR 工作液。根据所需 NR 储备液的体积，使用 15 mL 或 50 mL 带刻度的锥形管。
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材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
Imager.M2m 显微镜	Zeiss	n/a	荧光显微镜
ERC5s 相机	Axiocam	n/a	彩色成像功能
MRm 相机	Axiocam	n/a	荧光成像功能
Nile red	Thermo Fisher	N1142	脂质染料
异丙醇	BDH	BDH1133-1LP	固定液
Centrifuge 5430	Eppendorf	5428000015	离心机
Tube Rotator	VWR	10136-084	试管旋转仪