Drosophila 攻击行为检测：一种检测果蝇行为可塑性的方法

摘要

来源：Trannoy, S. 等 一种无需直接操作即可研究攻击行为的新方法 "失败者" 效应 黑腹果蝇. 视频实验杂志 (2015).

攻击行为是一种先天性行为，先前的打斗经历会影响果蝇后续争斗中的战斗策略和结果。本视频介绍了一种用于研究黑腹果蝇（Drosophila）攻击行为的实验方法。示例实验方案采用了一种无需直接接触果蝇的操作装置，从而避免了对动物的机械处理，减少了动物应激反应，而这种应激可能会影响实验对象的行为表现。

方案

本方案节选自 Trannoy 等人， 一种无需直接操作即可研究攻击行为的新方法 "失败者" 效应在 黑腹果蝇， J. Vis. Exp. (2015).

1. 行为学实验

1. 使用6至7日龄的雄性果蝇进行行为学实验。
2. 将塑料隔板插入每个打斗室中。
3. 从隔离管中取出棉塞，并将该管置于装置侧面一个打开的孔下方。
4. 利用负向趋地性使果蝇进入打斗室，通常在数秒内完成。
5. 当果蝇离开隔离管并进入打斗室后，关闭滑动壁。
6. 重复上述步骤，将第二只果蝇引入装置另一侧的打斗室中。
7. 将装置放回光照下的录像位置。
8. 开始录像，并移除塑料隔板以允许果蝇相互接触。
   1. 对于攻击性实验：
      1. 在这些实验中，记录打斗过程至少20分钟，以确保形成稳定的支配关系。
      2. 达到预定时间后，停止录像。
      3. 通过逆向执行上述步骤，将果蝇从打斗室中移出。
      4. 每次使用后，用温和的洗涤剂和水彻底清洗行为学装置，并进行冲洗。
   2. 对于"失败者"效应实验：
      注意：在这些实验中，首次打斗被视为条件建立阶段，第二次打斗为测试阶段。两次打斗之间的休息时间可以不同，但10分钟的间隔有助于形成显著的"失败者"效应。
      1. 按照上述步骤进行第一次打斗。
      2. 关键步骤：为了诱导"失败者"心理状态的形成，需确保第一次打斗持续至少20分钟，以建立明确的支配关系。20分钟后，重新插入塑料隔板将果蝇分隔开。
      3. 经过10分钟休息期后，轻轻移除塑料隔板，使果蝇开始第二次打斗。
      4. 第二次20分钟打斗结束后，停止录像。
      5. 按上述方法将果蝇从行为学装置中移出。
      6. 再次彻底清洁行为学装置。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
行为实验箱	Mike machine		实验室自制。如需更多信息，请直接联系公司。
硼硅酸盐玻璃小瓶	VWR International	47729-576	16 x 10 mm
棉花	Fisherbrand	22-456-881	任何品牌均可使用
螺口管	VWR International	10011-394	直径15 mm，高10 mm
塑料切片	Electron Microscopy Sciences	70329-40	22 x 40 x 0.25 mm 厚度
光源（灯泡）	VWR International	500003-418	任何品牌均可使用
计时器	VWR International	62344-641	任何品牌均可使用
双目显微镜	Nikon	SMZ-745	任何品牌均可使用
摄像机（SONY Handycam HDR-CX330）	B&H	SOHDRCX330B	任何品牌均可使用