温度梯度测定：在 德罗索菲拉拉 瓦测试温度偏好的方法

Abstract

资料来源：刘，J.等人，一个温度梯度测定，以确定热偏好的德罗索菲拉拉瓦。J. 维斯(2018).

果 蝇可以区分温度的微小变化，因此选择具有良好热条件的环境。此视频描述了一种行为分析，该检测测试了线性热梯度上果 蝇 幼虫的温度偏好。

Protocol

此协议是刘等人的摘录。 温度梯度测定以确定 德罗索菲拉· 拉瓦的热偏好，J.Vis. Exp.（2018年）。

1. 温度梯度设置

1. 准备单向梯度
   1. 为了在检测过程中营造潮湿的环境，将连接两个水浴池的两块铝块放在湿纸巾上，隔开10厘米（图1A）。
   2. 在启动检测之前，打开两个水浴池~2小时，以便有足够的时间使铝块的温度平衡。
      注： 建议进行模拟实验，以确定实现所需线性温度梯度所需的每个水浴的温度。一些典型的温度对设置水浴列在 表1。但是，请注意，表面温度受环境温度的影响。管子的长度也会影响温度，因为管子有冷却。我们设置的管子长度为 1.5 米。
   3. 微波 100 mL 的 1% agarose 在 500 mL 圆形宽口瓶的高功率设置下产生，并将 25 mL/检测板倒在水平台面上。准备两个检测板，可以同时放置在铝块上（图1A）。
   4. agarose 凝固后（10-20 分钟），用标准厨房海绵或三聚氰胺海绵轻轻擦擦每个蔗糖表面，使 agarose 表面稍微粗....

Results

图1：单向和双向梯度测定设置。（A）单向梯度设置，两个铝块上有两个铝检测板。铝块的温度由两个水浴池的循环水控制。（B）双向梯度安排三个铝块、水浴和铝板（250 x 220 mm）。左右方块连接到同一个水浴池，中间块连接到其他水浴。铝检测板用胶带包裹，形成一个10毫米的墙，以包含1%的蔗糖。（C）位置以检查温度（以点表示）并释放板上的幼虫。在开始实验之前，检查每个区域内两个点的温度，以确认所需的线性温度梯度是否成立。幼虫在中线附近的指示区域内释放。幼虫在每个2厘米区域内计数。（D）在双向梯度上检查温度（以点表示）和幼虫释放区的位置。沿着双向梯度的每一半中线释放同样数量的幼虫。幼虫的数量在10个（2厘米）区域中计算。指示在 agarose 表面显示一组典型的温度（18 °C-26 °C）。（E.......

Materials