Egg Laying Assay: A Method to Quantify the Egg-Laying Behavior of <em>C. elegans</em>

doi:10.3791/20157

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Research Article

产卵测定:一种量化秀丽隐杆线虫产卵行为的方法

April 30, 2023

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Abstract

来源:Lee， S. Y. 和 Kang， K. 测量化学品对秀丽隐杆线虫生长和繁殖的影响。J. Vis. Exp. （2017 年）。

秀丽隐杆线虫的产卵行为可以在发育、生殖和解剖学研究中提供重要信息。该视频介绍了产卵测定的重要步骤，并展示了一个样品实验，其中测试了药物的生殖毒性。

Protocol

Lee 和 Kang，测量化学品对秀丽隐杆线虫生长和繁殖的影响， J. Vis. Exp. （2017 年）。

1. 秀丽隐杆线虫产卵测定

将年龄同步的鸡蛋在含有DMSO或依托泊苷的NGM平板上孵育64小时（第一次出生前），直到20°C的年轻成体阶段><。 注意:使用生长测量实验中的蠕虫是可选的。将生长测量和产卵测定一起进行很方便。
将 5 条成虫转移到不含化学物质的新 NGM 板（条件 1，在一定时间内进行化学处理，从卵到幼成体阶段）或含有相同化学预处理的新 NGM 板（条件 2，在整个实验期间连续暴露化学物质），然后孵育 24 小时
注意:建议每次处理使用 3-5 个 NGM 板进行重复;这些重复可用于统计分析。
如上所述转移到新的 NGM 板中，每天计算鸡蛋的数量。数一数爬走、死亡和内部孵化的蠕虫。
重复这些步骤，直到蠕虫不再产卵，通常在 5 天内。
计算每个盘子中每条蠕虫的产卵数，并在 5 天内每天将这些值相加，以确定产卵总数><。 注意: 从计算中排除爬出并在内部孵化的蠕虫数。

Materials

<表格 border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:656px;" width="656"> 秀丽隐杆线虫 N2 隐杆球菌遗传学中心（CGC） Wild type 二甲基亚砜 Sigma，美国 D2650 系列大肠杆菌 OP50 Caenorhabditis 遗传学中心（CGC）依托泊石 Sigma，美国编号 E1383 35 × 10 mm 培养皿 SPL Life Sciences，韩国 10035 体视显微镜 Nikon，日本 SMZ800N

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