以下方案节选自 Mersha et al. 的研究《胚胎期暴露于低剂量毒物的长期行为与生殖后果》，发表于《视觉化实验杂志》（J. Vis. Exp.，2018年）
<ol>
	<li>前部触碰习惯化实验
	<ol>
		<li>使用经火焰灭菌的30 G铂金丝挑取约10条同步化的年轻成虫线虫，转移至新的未接种NGM平板上。将线虫静置5分钟，使其有时间适应新培养皿环境。</li>
		<li>进行习惯化反应测试时，使用一根固定在木签或牙签末端的眉毛毛发，并将其浸入70%乙醇中进行灭菌。用干净无绒纸巾擦拭后，静置1分钟，待乙醇完全挥发。用该毛发轻轻触碰线虫头部（咽部球前部），每次触碰间隔10秒，以便线虫有时间恢复。</li>
		<li>持续进行触碰（保持10秒的刺激间间隔），直至线虫不再向后移动。此时线虫已对该刺激产生习惯化。记录线虫达到习惯化所需的触碰次数。</li>
		<li>采用单因素方差分析（one-way ANOVA）结合Tukey事后检验，分析处理组与未处理对照组之间平均习惯化速率的差异。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>乙醇（EtOH）</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>64-17-5</td><td></td></tr><tr><td>N2（野生型秀丽隐杆线虫 C. elegans）</td><td>CGC</td><td></td><td>明尼苏达大学菌种保藏中心</td></tr><tr><td>铂金丝接种环</td><td>Genesee Scientific</td><td>59-AWP</td><td></td></tr><tr><td>培养皿</td><td>Fisher</td><td>07-202-011</td><td></td></tr><tr><td>解剖显微镜</td><td>AmScope</td><td>SM-2TYY</td><td></td></tr></tbody></table>

触觉习惯化实验：一种研究c. elegans中非联合型学习的方法

Touch Habituation Assay: A Method to Study Non-Associative Learning in C. elegans

来源：Mersha, M. D.，等。<a href="https://www.jove.com/video/56771/long-term-behavioral-reproductive-consequences-embryonic-exposure-to">低剂量毒物胚胎期暴露的长期行为与生殖后果</a>。J. Vis. Exp. (2018)。
本视频介绍了触觉习惯化实验，这是一种用于评估秀丽隐杆线虫（C. elegans）机械感知能力并量化习惯化所需时间的行为学方法。

触觉习惯化实验：一种研究C. elegans中非联合型学习的方法

来源：Mersha, M. D. 等。胚胎期暴露于低剂量毒物的长期行为与生殖后果。J. Vis. Exp. (2018)。  
该……

- C. elegans 移动 开启 它的 侧面 由 生成 正弦波的 波浪 沿着 它的 身体 的 动物 移动 在 a 正向 方向 当 的 波 是 扩增 来自 的 头部 到 的 尾部 相反地， 当 的 正弦波 波浪 是 扩增 来自 的 尾部 到 的 头部 的 蠕虫 移动 向后 向后 运动能力， 已知 作为 反转， 是 简要 和 或者 发生 自发地 或 是 触发的 由 a 感觉 刺激， 用于 例如， a 温和的 触碰 到 的 前部 的 的 蠕虫 为了 执行 的 前侧 触碰 习惯化 检测 分离 此前 同步的 线虫 的 的 期望的 发育的 载物台 在 未接种的 NGM 平板 使用 无菌的 细毛 针，轻轻触碰 线虫 身体 的 前部 区域。此操作 将 引发 一种 逃逸 反应，其 表现 为 线虫发生倒退运动。允许 10秒 的 刺激 间隔 时间，使 线虫 恢复，并重复触碰操作。为 评估 习得 性 习惯 化（一种 非关联性学习形式），记录 引发 倒退 反应 所 需 的 触碰次数，直至不再观察到倒退反应为止。在 本 示例 实验方案中，将 展示 一种 前部 触觉 习惯化 检测 方法 的 操作 示例。- 首先， 使用 的 火 无菌的 30号针头 铂 导线 挑选 到 转移 大约 10 同步的 年轻 成年 线虫 到 新 未接种的 NGM 培养皿 离开 的 线虫 未受干扰的 用于 五 分钟 到 允许 它们 时间 到 适应环境 到 的 新 板 然后， 灭菌 一个 眉毛 毛发 已附上 到 的 结束 的 a 木质的 串签 或 牙签 由 浸渍 在 70% 乙醇 用 干净、 无 绒毛 的 纸巾 擦拭 ， 并 等待 1 分钟 ， 使 乙醇 完全挥发。 使用 眉 毛 轻轻 触碰 线 虫 的 头 部 。 重复 触碰 操作 ， 每次 间隔 10 秒 ， 以 允许 线 虫 充分 恢复。 继续 至 触碰 允许 10秒 刺激间 间隔 直到 的 蠕虫 无 更长 移动 向后 记录 的 数量 的 接触 必需的 用于 这 习惯化 至 发生。 - 允许 a 10秒 间隔 之间 接触 是 重要， 作为 这 允许 的 动物 恢复 时间 和 有助于 是 获得 一致的 习惯化 行为 检测方法

touch-habituation-assay-method-to-study-non-associative-learning-c

Research

科研

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biology

生物学

Caenorhabditis elegans (worm)

秀丽隐杆线虫

Behavior

行为

触摸习惯化试验:一种研究秀丽隐杆线虫非联想学习的方法

2.8K 次观看. - 秀丽隐杆线虫通过沿其身体产生正弦波来向一侧移动。当波从头部传播到尾巴时，动物向前移动。相反，当正弦波从尾部传播到头部时，蠕虫会向后移动。向后运动，称为反转，是短暂的，要么是自发发生的，要么是由感觉刺激触发的，例如，轻轻触摸蠕虫的前部。为了进行前触摸习惯化测定，在未接种的 NGM 平板上分离所需发育阶段的先前同步的蠕虫。

触觉习惯化实验：一种研究C. elegans中非联合型学习的方法

本文内容

摘要

方案

材料

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姓名	公司	目录编号	评论
乙醇（EtOH）	Sigma-Aldrich	64-17-5
N2（野生型秀丽隐杆线虫 C. elegans）	CGC		明尼苏达大学菌种保藏中心
铂金丝接种环	Genesee Scientific	59-AWP
培养皿	Fisher	07-202-011
解剖显微镜	AmScope	SM-2TYY