光运动反应检测：一种测量斑马鱼幼鱼对光照条件突然变化行为反应的方法

摘要

来源：Steele, W. B.，等。幼鱼行为反应谱检测的实验方案：以神经兴奋剂咖啡因为例 。J. Vis. Exp. （2018）。

本视频介绍了使用自动追踪软件对斑马鱼和黑头软口鱼幼体进行光运动反应检测的方法。该方案通过测量幼鱼在光照条件突然变化后的行为反应来评估其行为特征。

方案

1. 视频追踪参数的校准

1. 在进行行为学测量之前，在视频追踪软件中设置观察和校准参数（参见材料表）。
   1. 将一个孔板放入记录室中，每个孔内至少放置一条幼鱼。使用该孔板及其中的鱼作为设置校准参数的参考。
   2. 在视频追踪软件中，点击 "文件 | 生成协议"，将弹出“协议创建向导”对话框。在 "位置计数"字段中输入孔板的孔数，然后点击 "确定"。
   3. 在屏幕顶部，点击 "视图 | 全屏"，系统将显示孔板的俯视摄像画面。
   4. 点击 "绘制区域"图标，该图标显示为三个不同颜色的形状。在孔板视图区域右侧，选择标签为 "区域"字段中的圆形图标。
   5. 使用光标在孔板左上角的孔中划定圆形视频追踪区域。选择 "右上标记"，然后勾勒右上角孔的观察区域。接着选择 "底部标记"以勾勒右下角孔的区域。
      注意：绘制圆形轮廓后，通常需要调整其位置。  若要调整轮廓位置，请点击“选择”，然后使用光标移动所划定的区域。此外，可通过点击 "复制"，然后点击 "粘贴"来复制轮廓。 
   6. 在定义了左上、右上和右下孔的追踪区域后，点击 "生成"....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
48孔板	Fisher Scientific	08-772-52	幼年斑马鱼行为记录室
24孔板	VWR	10062-896	幼年胖头 minnow 行为记录室