肺部灌注与固定：通过气管引入液体并固定肺组织以测量固定肺容积

摘要

来源：Limjunyawong, N. 等，小鼠肺癌研究中常用的灌注与固定方法。J. Vis. Exp. (2015)。

本视频介绍了一种将液体注入气管以进行肺部灌注、固定及肺容积测量的简单且可靠的方法。

所有涉及动物的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和JoVE兽医审查委员会的审核。

1. 肺部灌注

选择一种商用的一英寸长 20 g 静脉导管用于插管。
手动弯曲导管尖端，使其尖端形成轻微弯曲，如图 1所示。
通过腹腔注射给予小鼠氯胺酮（100 mg/kg）和赛拉嗪（15 mg/kg）混合物进行麻醉，并通过缺乏反射性运动确认麻醉效果。麻醉后立即在眼睛上涂抹兽用眼膏，并皮下注射卡洛芬（5–10 mg/kg）以提供术后及灌注镇痛。
将小鼠仰卧于一个倾斜的平台之上。如图 2所示，使用带有缝合环并用胶带固定的大型办公文件夹即可达到理想效果。
剃除颈部腹侧的毛发，并用 70% 酒精清洁和消毒颈部区域。佩戴新的无乳胶、无粉手套，使用经 70% 酒精消毒的手术器械。
使用锋利的剪刀在下门齿下方约 12 mm 处的颈部做一小切口。
用镊子轻轻向尾侧牵拉颈部皮肤，直至可见气管腹壁。
轻柔地向后牵拉舌头，将导管插入，使弯曲的尖端朝向小鼠腹面。如步骤 1.4 所述，轻柔牵拉颈部皮肤，并将导管插入气管。
注意：稍加练习后，可观察到导管沿气管下行。若导管进入食管，则无法观察到其移动。切勿在气....

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弯曲的针尖，用于实验室研究中精确液体操作的微移液设备装置。
图1： 带有轻微弯曲尖端的静脉导管，用于滴注。

小鼠麻醉装置、手术实验、临床前研究、生物医学研究。
图 2： 使用倾斜的三环活页夹支撑小鼠进行插管。 该活页夹可同时固定 3 只小鼠。

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