平台重新定位的水迷宫:一种评估工作记忆的方法

摘要

来源:Hausser， N. 等人 检测创伤性脑损伤后大鼠的行为缺陷。J. Vis. Exp （2018 年）。

在本视频中，我们描述了带有平台重新定位的莫里斯水迷宫测试，这是一种用于研究啮齿动物工作记忆的导航任务。

方案

所有涉及动物模型的程序均已由当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审查。

1. 工作记忆水迷宫

1. 设备
   1. 使用装满水的水箱至 28 厘米高并保持在 26 ± 1 °C。
   2. 在高度为 26 厘米的支架上使用直径为 10 厘米的透明亚克力玻璃平台。
      注意:平台的顶面应涂有圆形的硅，上面有一个 X。这允许老鼠爬上平台并给它们提供牵引力，这样它们就不会滑落。
   3. 收集秒表、加热灯、一次性毛巾、吸水垫、额外的笼子和一个小的长柄观赏鱼网。使用连接到摄像机的计算机化视频跟踪系统记录老鼠游泳并将数据发送到计算机。将视频和数据保存在计算机上以供以后分析。
2. 工作记忆水迷宫测试
   1. 连续五天每天给大鼠四对试验，将平台放置在四个象限中的每一个，并从四个起点（N、S、E、W）中的每一个开始大鼠，如下所述。
   2. 首先，定义在整个实验过程中使用的起始位置-平台对。
      注意:在游泳的五天中，平台所在的象限的顺序和使用的起点的顺序需要不同，但每只老鼠的顺序都相同。
      1. 使用四个起点（N、S、E 或 W）和四个平台位置（象限 1、2、3 或 4;图 1）。例如，（N， 2;E，4 岁;S，1 人;W，3 岁;参见图 1）。规划一个平衡的顺序（非随机）以避免起点太靠近平台（没有起点与平台位置相同）。使用平台象限和四个起点设置数据表。
      2. 为视频跟踪软件编写一个协议，用于对大鼠游泳进行视频并收集指定的数据（例如，游泳的持续时间、速度、找到平台之前的行进距离）。
         注意: 跟踪软件将在指定的持续时间后自动停止录制。该协议应允许指定平台的放置位置、每只动物要运行多少次试验、每次会话将测试多少只动物，以及允许的最长持续时间（例如，120 秒）。
      3. 每次测试 4-6 只大鼠。
         注意: 超过 6 只 rat 会在 rat 之间的时间上产生问题，并可能导致处理程序出错。保温箱也变得拥挤。
   3. 试验 1
      1. 打开视频跟踪软件并加载正确的协议，包括水迷宫地图。
      2. 将平台放置在指定的位置（例如，2;图 1） 并检查它是否与软件中的地图匹配。准备跟踪软件，当大鼠进入摄像机的视野时启动。
      3. 将大鼠放在指定位置（例如，N;图 1） 并立即启动计时器。
      4. 让大鼠 120 秒找到平台。当老鼠找到平台时，停止计时器并将时间记录在工作表上。如果老鼠找不到平台，则用手将其引到平台上，并记录 120 s。让大鼠在平台上停留 15 秒。
   4. 试验 2
      1. 检查软件是否已为试用版 2 做好准备。将大鼠放回水箱中的相同起始位置 （N）。重复步骤 1.2.3.4。
   5. 试验 2 后，将大鼠放入加热的围栏中 4 分钟。将平台移至第二个位置 （4;图 1），并检查它是否与软件中的地图匹配。
   6. 重复试验 1 和 2 程序（步骤 1.2.3–1.2.4），直到完成所有四个起始位置/平台配对。

结果

图 1.水迷宫示意图。此图演示了工作记忆莫里斯水迷宫的可能平台位置（1、2、3、4）和起点（N、S、E、W）。允许大鼠从每个起始位置/平台配对进行两次试验。在对试验之间有 15 秒的试验间隔和 4 分钟的在加热室中休息，每天总共进行四对试验。

材料