卵窗法：一种打开受精鸡卵壳以暴露绒毛尿囊膜血管的方法

摘要

来源：Sharrow, A. C. 等。利用鸡胚尿囊绒毛膜体内模型研究妇科和泌尿系统癌症。J. Vis. Exp. (2020)

在本视频中，我们介绍一种打开受精鸡胚蛋壳的技术，以暴露其携带分支血管网络的绒毛尿囊膜（CAM）。暴露的CAM可用于 在卵内 肿瘤建模

方案

所有涉及鸡胚的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 准备卵子

1. 在收到鸡蛋之前，按照制造商的说明将孵化箱组装并预热至37.8 °C（100 °F），湿度保持在60-70%。
   注意：为尽量减少污染风险，可使用经高压灭菌的水来控制湿度。
2. 从经认证的实验级蛋品供应商处收到受精的罗得岛红鸡鸡蛋后，用纸巾干擦蛋壳表面。如有必要，可用略微湿润的纸巾去除附着物，随后立即擦干。
   注意：使用低于43.3 °C的液体润湿蛋壳可能将细菌带入蛋内。若需清洗或对鸡蛋进行消毒，液体温度必须控制在43.3-48.9 °C之间。温度过高可能导致蛋内内容物沸腾。消毒剂的选择应基于所关注的微生物种类。
3. 使用铅笔或标记笔在蛋壳上标注日期，此日记为发育第0天。
4. 将鸡蛋放入孵化箱中，持续孵化至少7天，并保持翻转以促进绒毛尿囊膜（CAM）发育。可使用自动翻蛋器，或每日人工翻转180° 2-3次。

2. 开启卵壳

注意：应在绒毛尿囊膜（CAM）完全发育后进行卵壳 opening，通常在发....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
Roboz 外科	RS6703		此为示例。任何类似的弯剪均可使用。
Dremel	8050-N/18		该套件包含所有必需工具。
AA Lab Eggs 公司	N/A		需确定本地蛋品供应商，因为该供应商仅在区域内配送。
孵化箱仓库	HB1588D-NONE-1102-1588-1357		可使用其他蛋类孵化箱，但需验证其可靠性。植入后也可使用关闭 CO2 的细胞培养箱。
孵化箱仓库	1102		可使用其他照蛋灯；然而，在我们测试过的设备中，此款为首选。该照蛋灯包含在上述孵化箱套件中。
世界精密仪器公司	15915		此为示例。任何类似的弯头镊子均可使用。本方法已使用多个品牌。
BD	305196		此为示例。任何 18G 针头均可达到类似效果。
精细科学工具公司	11008-13		此为示例。任何类似的镊子或符合研究人员偏好的其他类型均可适用。
电子显微镜科学公司	72914		此为示例。用于拉开蛋壳进行生物发光成像的镊子长度约为 12.8 cm，尖端宽度为 3 mm。
费舍品牌	22-456-885		此为示例。任何无菌棉球均可满足要求。
摩尔医药	21272
康宁	353803		此为示例。可使用任何类似的无菌 10 cm 培养皿。无需组织培养处理。
Tygon	AACUN017		此为示例。任何尺寸相似的管路均可使用。