基于鸡胚尿囊绒毛膜的癌症建模：一种研究癌细胞致瘤性与转移的鸡胚内模型

摘要

来源：Sharrow, A. C. 等. 利用鸡胚尿囊绒毛膜 体内 模型研究妇科和泌尿系统癌症。J. Vis. Exp. (2020)

在本视频中，我们描述了将癌细胞植入鸡绒毛尿囊膜以生成肿瘤异种移植模型的方法 在 卵 模型成功地将卵巢癌细胞移植到模型中，用于研究妇科癌症的进展。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 准备用于移植的癌细胞悬液（选项1）

注意：此步骤应在移植前立即完成，移植最好在第7至第10天之间进行。有关移植日期的更多信息，请参见步骤3或步骤4开头的说明。该方法适用于所有细胞系以及培养的肾癌肿瘤组织消化液。

1. 将细胞外基质溶液置于冰上解冻。
2. 采用机械和/或酶消化方法，根据拟移植细胞类型的特性选择合适的方法制备单细胞悬液。
3. 将拟移植的全部细胞重悬于适合移植的培养基中。通常每枚鸡胚移植 1–2 × 10⁶ 个细胞。
   注意： 移植细胞系时通常使用该细胞培养所用的完全培养基，其中含有胎牛血清（FBS）或血清替代物。移植肿瘤组织消化物时，通常使用同类型癌症细胞系培养所用的完全培养基。但可根据实验需要对培养基成分进行调整，其对肿瘤发育和生长的影响需通过实验确定。
4. 根据所用细胞类型选择适当的离心速度和时间进行离心，使细胞沉淀。通常离心速度为 250–300 × g，时间为 5–10 分钟。
5. 用移液器吸除细胞沉淀中的上清液。通过轻弹管壁或吹打，将细胞在残留的少量培养....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
010 聚四氟乙烯（PTFE）白色 55 邵氏 D 硬度 O 型圈	The O-Ring Store	TEF010	用于细胞接种的不粘环。内径 1/4"，外径 3/8"，截面直径 1/16"，材质为聚四氟乙烯（PTFE）。
精细手术剪；弯型；尖-尖刃；30 mm 刀刃长度；总长 4-3/4 英寸	Roboz Surgical	RS6703	此处仅作为示例提供。任何类似的弯剪均可使用。
Dremel 8050-N/18 Micro 8V Max 工具套装	Dremel	8050-N/18	该套装包含所有必要工具
受精鸡卵（罗得岛红羽 - 棕色，实验级）	AA Lab Eggs Inc.	N/A	需寻找本地蛋品供应商，因该供应商仅在特定区域配送。
Hovabator Genesis 1588 Deluxe 孵化器组合套装	Incubator Warehouse	HB1588D-NONE-1102-1588-1357	可使用其他类型的卵孵化器，但其可靠性需经验证。植入后也可使用关闭 CO₂ 功能的细胞培养箱。
Incu-Bright 冷光源检卵灯	Incubator Warehouse	1102	可使用其他检卵灯，但经我们测试，此款为首选。该检卵灯已包含在上述孵化器套件中。
Matrigel 基底膜基质 HC；无 LDEV	Corning	354248	细胞外基质溶液
SKOV3	ATCC	HTB-77	人卵巢癌细胞系。
带橡胶刮头的搅拌棒；直径 5 mm，长度 6 英寸	United Scientific Supplies	GRPL06	此处仅作为示例提供。任何类似的玻璃搅拌棒均可使用。
标本镊	Electron Microscopy Sciences	72914	此处仅作为示例提供。用于在生物发光成像时掀开蛋壳的镊子长度约为 12.8 cm，尖端宽度为 3 mm。